Pewarnaan Kuman

Nurul Wiqoyah

Living state: Wet Mount Method Hanging drop Preparat

Fixed state: pewarnaan

Fiksasi:Melekatkan spesimen pada obyek glassMembunuh kuman tanpa merubah morfologinyaMencegah enzym yang dapat merusak morfologi selSebagai intensifier sehingga kuman mudah di cat

Macam fiksasi:Secara phisic: pemanasan Secara chemis: methyl/ethyl alkohol, formalin, asam asetat

Sifat cat:Mempunyai : struktur cincin benzena gugus chromofor menentukan warna cat gugus auxochrome menentukan sifat elektrolit dissosiasi/ kemampuan membentuk salt linkages dengan protein jaringan dll.

Macam cat:

Basic dyes: garam-garam cat yang chromofor (ion-ion cat)nya kation dengan anion: Cl, SO4, asetat, oksalatex. Methylen blue, safranin, crystal violet

Acid dyes: khromofornya anion dengan kation: Na+, K+, Ca+, NH4+Ex. Fuchsin, acid fuchsin, congo red dll

Preparasi smear:

Smear: lesi, exudate, darah, jaringan atau koloni kuman yang terisolir

Smear fiksasi pewarnaan

Types of stainSimple stains

Differential stains

Special stains

General stains

Pewarnaan sederhanaMenggunakan satu macam zat warnaKuman terwarnai zat warna

Ex. Methylen blue kuman berwarna biru

Safranin kuman berwarna merah

Pewarnaan negatifZat warna Iodin Ink

Kuman tidak terwarnai dengan bakcground gelap

Kapsul jernih

Pewarnaan differensial1. Pewarnaan Gram:

Paling umum digunakan Tehnik pengecatan diagnostik

Cat: crystal violet (primary stain) Lugol (mordan) Alkohol Safranin (counter stain)

Bakteri Gram positif purple

Bakteri Gram negatif merah

positivenegativeprimary stainmordantdecolorizationcounterstain

Kuman Gram positif Kuman Gram negatif

2. Pewarnaan tahan asam ZEIHL-NEELSON METHODPewarnaan differensial untuk bakteri tahan asam kelompok kuman ycobacterium

Prinsip: tergantung pada ketahanan bakteri terhadap dekolorisasi alkohol asam dinding sel mengandung asam mikolat yang berikatan dengan polisakarida yang mencegah karbol fuchsin dari sel

Acid fast cells merah

Non Acid fast counter stain

Pewarnaan kapsul

Congo Red METHOD

MUIRS METHOD

Carbol FuchsinEthanolMUIRS MordantCounterstain: Loefflers methylen blue

ANTHONY METHOD:Crystal violet20% CUSO4Pewarnaan khusus

Pewaranaan sporaTypes:Moeller Modified Method Carbol Fuchsin, Ethanol, Loeffers Methylen Blue Vegetative cell biru, spora merah

Pewarnaan Schaeffer fultonBahan malachite green, safraninSpora kuman hijauVegetative cell merahPewarnaan Bartolomev dan Mittwer

Pewarnaan NEISSERZat warna Neisser AB Neisser C

Melihat granula metakhromatikGranula metakhromatik biru gelapVegetatif sel kuning coklat

Pewarnaan flagella

Pewarnaan LeiffsonPewarnaan Baileymordan Asam tannin

*****************