AUTORES:Jhon Camacho MD*, Luz Dary Gutiérrez†, Diana Arias MD‡, Alfonso Suarez MD§* Residente de Pediatría, Facultad de Medicina, Fundación Universitaria de Ciencias de la Salud† Magister en Genética, Docente Investigadora del Grupo CBS-FUCS‡ Medica Pediatra, Neonatóloga, Jefe del postgrado Pediatría, Fundación Universitaria de Ciencias de la Salud§ Médico Genetista, Docente Investigador del Grupo CBS-FUCS Hospital San José - Hospital Infantil Universitario de San JoséCorrespondencia: asuarezc@fucsalud.edu.co

Exostosis hereditaria múltiple: reporte de una mutación en el gen EXT2 en una familia colombiana

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Introducción

Análisis y Conclusiones

La Exostosis Hereditaria Múltiple (EHM) es una enfermedad caracterizada por el crecimiento anormal de osteocondromas (OC) especialmente en las metáfisis de huesos largos. Se presenta el caso de 3 miembros de una familia afectada con EHM, en quien se estableció diagnóstico por secuenciación directa del exón 3 del gen EXT2.

Descripción del Caso

La familia asiste a consulta médica de genética humana, 2 hermanos y su padre presentan características clínicas de la enfermedad (Figura 1).

El paciente (c) masculino de 11 años de edad, presenta crecimiento progresivo de masas en regiones óseas evidentes desde los 8 años, localizados en fémur, tibia, peroné proximal, húmero proximal y escápula. A los 7 años presentó compresión tendinosa del segundo dedo mano izquierda, corregida quirúrgicamente. El paciente (d) de 8 años, presenta aparición de masas desde los 2 años, en fémur proximal y distal, tibia proximal y distal, peroné proximal, húmero proximal, pies y clavículas (Figura 2). Actualmente presenta 14 OC, sin deformación esquelética o complicaciones. El padre (a) de 46 años de edad inició con crecimiento de OC a los 13 años, actualmente presenta 4 OC en miembros inferiores y superiores, con una deformación esquelética (acortamiento del antebrazo derecho), no ha presentado complicaciones como compresiones nerviosas, tendinosas o vasculares. La madre no presentaba características de la enfermedad y ninguno ha desarrollado condrosarcomas.

Clínicamente se sospecha que son afectados de manera autosómica dominante por EHM, se contactó al Dr. Wim Wuyts (Departamento de genética médica de la universidad y el hospital universitario de Antwerp en Bélgica) quien realizó el estudio de ADN de la familia.

La EHM es una enfermedad autosómica dominante, poco frecuente con una prevalencia de 1 / 50.000 - 100.000 habitantes caucásicos; en Colombia se desconoce su prevalencia. Los genes implicados son el EXT1, EXT2 y el EXT3 que codifican enzimas glucosiltransferasas responsables de la síntesis de glucosaminoglicanos (heparan sulfato) y además actúan como genes supresores de tumor. Se conocen cerca de 184 variantes en EXT2, de las cuales 36 son mutaciones “Nonsense” que producen pérdida de la función.

El estudio del gen EXT2 encontró la mutación c.544C>T heterocigótica en el exón 3. Esta mutación genera un codón stop (p.Arg182*), resultando probablemente en la formación de ARNm inestable o una proteína truncada que conlleva a la formación de proteínas EXT2 no funcionales, causando los OC y el cuadro clínico de los pacientes. Debido a la característica del gen, de funcionar como supresor de tumor los pacientes tienen un mayor riesgo de malignización de los OC, pero hasta la fecha ninguno de los pacientes ha presentado condrosarcomas. Existen escasos reportes de EHM en Colombia por lo cual es trascendental continuar investigaciones genéticas para conocer nuestra epidemiologia y las mutaciones más frecuentes.

Se realizó el estudio molecular mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), secuenciación directa de todos los exones codificantes y amplificación de sondas dependientes de ligamiento múltiple (MLPA) del gen EXT1 y EXT2. El análisis no mostró mutaciones en el EXT1, sin embargo, al realizar el estudio del EXT2 por re-secuenciación directa se encontró que el padre y los hijos tienen la mutación c.544C>T de forma heterocigótica en el exón 3. El Electroferograma muestra una diferencia de altura en el patrón de los picos, reflejando cambios en el número de copias del exón 3. (Figura 3)

Agradecimientos al Dr. Wim Wuyts (Department of Medical Genetics - University and University Hospital of Antwerp, Bélgica) por la donación de las sondas de ADN y el procesamiento de las muestras de los pacientes.

Bibliografía1. Jennes I, Pedrini E, Zuntini M, Mordenti M, Balkassmi S, Asteggiano CG, et al. “Multiple

osteochondromas: mutation update and description of the multiple osteochondromas mutation database (MOdb)” Hum Mutat. 2009 Dec;30(12):1620–7.

2. Jones K. “Glycobiology and the Growth Plate: Current Concepts in Multiple Hereditary Exostoses” J Pediatr Orthop, 2011;31:577–586

3. Wuyts W, Van Hul W, De Boulle K, Hendrickx J, Bakker E, Vanhoenacker F, et al. “Mutations in the EXT1 and EXT2 genes in hereditary multiple exostoses” Am J Hum Genet, 1998 Feb;62(2):346–54.

4. Ropero S, Setien F, Espada J, Fraga MF, Herranz M, Asp J, et al. “Epigenetic loss of the familial tumor-suppressor gene exostosin-1 (EXT1) disrupts heparan sulfate synthesis in cancer cells” Hum Mol Genet. 2004 Nov 15;13(22):2753–65.

Figura 1: Árbol familiar con EHM

Figura 2: OC en pierna derecha - Rx fémur osteocondroma en cuello femoral y peroné

Figura 3: Electroferograma del Gen EXT 2

Agradecimientos