1

Thrombocyta és VVT analízis

RBC

WBC

PLT

Sejt típus

Minta típus:

- perifériás vér - csontvelő - nyirokcsomó - CSF (likvor) - ascites - mellkasi folyadék - BAL

5%

VVT analízis

VVT kapu

PNH VVT

- PNH diagnózis

- EMA (eosin-5’-maleimide) szűrőteszt herediter membrán defektusokban (HS, HPP, SAO)

Granulocyta és monocyta analízis

11% 13%

- Reticulated platelet %

-  Platelet activation (P selectin, CD62%)

- Platelet surface

glycoproteins

Atherothrombotic risk assessment

To differentiate between thrombocytopenia with low or high thrombopoietic activity

To evaluate the efficacy of clopidogrel therapy

Thrombocyta vizsgálatok

- VASP phosphorylation

-  HIT FC test (Annexin V labeling)

Heparin Induced Thrombocytopenia functional assay

Bleeding history, suspected Glanzmann’s disease or Bernard-Soulier syndrome

GPIIb (CD41) GPIIIa (CD61) GPIb (CD42b) GPIX (CD42a)

Glanzmann betegség

2

EMA, PNH panel

Immunophenotyping of hematological malignancies: AL screen (ALL, AML)

MRD – 300.000 – 1 million cells

Cell cycle analysis, DNA index,

MDR functional test CD34+ cell count

PLT activation Reticulated PLT %

VASP phosphorylation HIT FC test PLT surface glycoproteins

CD34+ sejtszám meghatározás

Őssejt = CD34+ progenitor Módszerek

•  Dual platform - a mintában lévő CD34+ sejtek számának kiszámításához szükséges a minta FVS számának ismerete (haematológiai analizátoron mérjük). „Lyse and wash”.

Első mérés: 2003.07.14 •  Single platform - ismert koncentrációjú és

térfogatú, fluorescens festéket tartalmazó bead segítségével történik a számítás (bead és vér 1:1 arány). „Lyse no wash”.

Első mérés: 2008.01.03

ISHAGE protokoll: szekvenciális kapuzás Minimum 75.000 CD45+ event Minimum 100 CD34+ event Single platform: fluoreszcens bead alkalmazása

CD34+ progenitor őssejt abszolút szám meghatározás standardizálása

CD34+ progenitor őssejt abszolút szám meghatározás standardizálása EWGCCA – 13 európai országból, task forces

3

ISHAGE protokoll

Dual platform

CD34 events x fvs (G/L) x 1000 --------------------------- CD45 events

Single platform (DAKO)

CD34 events

---------- x C bead x hígítás

bead events

Minta típusa •  Mobilizált perifériás vérben CD34+sejt/µL

meghatározás: döntő jelentőségű a feretizálás elkezdését illetően. Citosztatikum és Neupogen (G-CSF) kezelés! (II. Bel)

•  Leukaferezissel nyert minta CD34+ sejtszámának meghatározása. I. vagy II. feretizátum zsákból. (II.Bel + STL Sejtterápia Laboratórium)

•  Őssejtkoncentrátum CD34+ sejtszámának meghatározása. Induló cs.v. (II.Bel), mágneses szeparálás után CD34-, CD34+ frakció és Ampulla (Omninvest).

AMI, perifériás érbeteg, stroke •  Konzervált teljes vér (külső QC)

•  Résztvevők: kb. 200 laboratórium •  Évente 6 alkalommal, 2 minta •  Minta: fixált vér (HIV, HBV, HCV-re szűrt) •  Szállítása: postával, erről értesítés e-mailben

•  Eredmény megadása: online - fehérvérsejt szám CD34+ abszolút szám CD34 %

•  Értékelés: CD 34 abszolút szám alapján

UK-NEQAS CD34+ abszolút sejtszám meghatározás jellemzői

Eredmények visszaküldése

4

Értékelés