TIAMIN, VITAMIN B1

Osobine:beo kristalan praak ili bezbojni kristali, gorkog ukusa, rastvoran u vodi i etanolu kiseli vodeni rastvori (pH 3-4) su stabilni u prisustvu kiseonika, termo- i fotostabilnitermolabilan vodeni rastvor iznad pH 5 neutralan vodeni rastvor stajanjem uti

U H+ rast. dominira tiazol a u OH- i neutralnim tiol.U vodi obe forme su u ravnotei: prisutna 2 apsorpciona maksimuma na 232 nm i na 266 nm.

UV spektar tiamin hidrohloridaMaksimumi apsorpcije:

Metanol: 262 nm, 238 nm

0.1M HCl: 246 nm 0.1M NaOH: 232 nm

IR spektar tiamin nitrata

Identifikacija: Ph.Eur.1. IR spektri2. Tiohromna reakcija: svetlo plava fluorescencija u butanolu UV max. 365nm. Dodatkom mineralnih kiselina gasi se fluorescencija. Reakcija je specifina za vitamin B1 tek ako se izvodi u priustvu NaHSO3 ne sme doi do fluoroscencije!

Odreivanje:

TNS kao slaba baza sa HClO4. u HCOOH / (CH3COO)2O. z.t.t. potenciometrijski

kao hidrohlorid titracija sa 0.1M NaOH; z.t.t. potenciometrijski.

RIBOFLAVIN VITAMIN B2

Osobine:

ut do oran - ut kristalan praak, R. u vodi samo pri dodatku elektrolita ili uree kao polarnih komponenti, sa bazama gradi soli.U H+ sredini termostabilan (moe da se sterilie) i prema O2 Rastvori fotosenzitivni, posebno u prisustvu alkalija. Nestabilan u OH- sredini. Optiki je aktivan (C*u ribitil ostatku)

Rastvaranje

Neutralan rastvor ima ukasto-zelenu fluorescenciju koja je pH zavisna!- Gasi se dodatkom H+, OH- ili redukcionih sredstava (Identifikacija!)

UV apsorpcija sa max= 223, 267, 373 i 444 uta boja slui u identifikaciji i odreivanju.

U H+ sredini u prisustvu redukcionih sredstava Zn (HCl) ili Na2S2O4 gubi se uta boja dihidroriboflavin.

UV spektar riboflavina

Fotosenzitivan na povienoj temperaturi - tip fd.p. zavisi od pH i prisustva kiseonika

Identifikacija i odreivanje: Ph.Eur.

1. []D20 = -115 -135 (u baznim rastvorima). ili u prisustvu boraksa kada o.a. jako raste ali je (+)!2. IR spektri 3. Gaenje uto-zelene fluorescencije vodenog rastvora dodatkom min. kiseline ili baze.

Odreivanje: spektrofotometrija, bazni rastvor max = 444 nm (Ph. Eur.) Izvodi se zatieno od svetlosti.

Test istoe

Ispitivanje na lumiflavin TLC metodom ili testom rastvaranja u hloroformu osloboenim od etanola

fotod. proizvod rastvorljiv, riboflavin ne.

PIRIDOKSIN VITAMIN B6

Osobine:u formi baze - bezbojni kristali rastvorni u organskim rastvaraima. T. T. = 160C.Hidrohlorid bezbojan, kiselog ukusa, T. T. = 205C ili 212C, hidrosolubilan. Vitamin B6 amfoteran (pirid. N bazan)(fenol kiseo)

UV apsorpcija je pH zavisna

OsobineStabilan je na vazduhu. Fotosenzibilan u alkalnim i neutralnim rastvorima. Rastvori u mineralnim kiselinama su termostabilni i mogu biti autoklavirani na 120C, 30 minuta, dok neutralni rastvori podleu polimerizaciji i oksidaciji

Za analitiku vane:1. OH grupa (fenolna azafenol) 2. N bazan piridinski 3. pikolin (CH3 grupa kisela) 4. bifunkcionalna parcijalna struktura fenola i susednih hidroksimetil grupa. 5. pozicija 6 koja je sub. elektrofilnog napada (ES)

Identifikacija po Ph.Eur.

1.UV spektar : 0.1M HCl. max 288-296 nm, - u fosfatnom puferu dva max 248-256nm i 320-327nm IR spektri (fenolna grupa) TLC metode-detekcija mrlja sa Gibbs-ovim regensom

UV spektar piridoksina0.1M HCl. max 288-296 nm,

- u fosfatnom puferu dva max 248-256nm i 320-327nm

U 0.1M NaOH takoe dva aps. Max. 309 i 244nm

IR spektar piridoksina

Ostale metode identifikacije Fenolna funkcionalna grupa: -Gibbs-ov reagens za VIS i TLC detekciju-FeCl3 - ljubiasta boja kompleksa i -kuplovanje sa diazonijum solimaR-ja alkilovanja sa CH3JFluorescentni metod

gde je fenol blokiran i reakcija sa Gibbs-ovim reagensom izostaje.Dodatkom H3BO3 raste specifinost reakcije.

kuplovanje

Reakcija sa CH3J

Fluorescentni metod

Odreivanje: titracija u nevodenoj sredini sa HClO4 / HgAc2O z.t.t. potenciometrijski

Osobine: ut praak, nerastvoran u vodi i organskim rastvaraima, soli rastvorljive u vodi, rastv. u alkalnim hidroksidima, karbonatnim rastvorima i mineralnim kiselinama.

Spektralne osobine:

U baz. rast. tri aps. max. max = 256 nm, 283 nm (pteridin) i 365 nm (PAB).(Ph. Eur.)U kiselim rastvorima max = 298 nm

Identifikacija: Ph.Eur.

1.) specifina optika rotacija u 0.1M NaOH je +18 do +22 2.) HPLC metod iz odreivanja (tR)

3.) TLC metod. Detekcija mrlja na 365nm UV denzitometrijski.

Ostale identifikacije:

3.

4.

Odreivanje:HPLC po Ph.Eur.spektrofotometrijski Za sve vitamine hromatografske metode (TLC, HPLC, GH)