REVISI Proposal Skripsi Aa Noval .doc

8/18/2019 REVISI Proposal Skripsi Aa Noval .doc

1/35

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sistem imun secara normal akan memberikan respon terhadap semua

zat asing yang masuk ke dalam tubuh. Pada beberapa orang yang memiliki

faktor predisposisi, respon imun yang terjadi justru berlebihan, sehingga

membahayakan tubuh sendiri. Suatu respon imun yang berlebihan ini adalah

reaksi hipersensitivitas atau dikenal dengan istilah alergi (Paul, 200!.

Penyakit alergi dapat memberikan dampak buruk berupa penurunan

kualitas hidup, besarnya biaya pengobatan, dan terjadinya ko"morbiditas.

#lergi juga dapat mempengaruhi kemampuan belajar pada anak"anak, hal ini

diketahui setelah terungkap bah$a alergi bisa mengganggu fungsi otak.

%angguan fungsi otak ini menimbulkan ganguan perkembangan dan perilaku

pada anak seperti gangguan konsentrasi, gangguan emosi, keterlambatan

bicara, bahkan autisme (&ao et al , 20'0!.

Prevalensi alergi di seluruh dunia mengalami peningkatan secara

dramatis baik di negara maju maupun di negara berkembang. Peningkatan

kasus alergi selama dua dekade terakhir ini terutama terjadi di kalangan anak"

anak. erdasarkan data statistik World Health Organization ()*+!,

diperkirakan sekitar 0"-0 populasi di seluruh dunia menderita penyakit

yang termasuk reaksi hipersensitivitas, seperti asma, alergi makanan, alergi

obat, rinokonjungtivitis, dermatitis atopik dan reaksi anafilaksis (Pa$ankar et

al , 20'2!.

'


2/35

American Academy of Allergy Asthma and Immunology (####/!

memperkirakan sekitar 0 juta penduduk #merika Serikat mengalami

beberapa bentuk gejala penyakit alergi. Prevalensi alergi makanan pada anak"

anak diba$ah usia ' tahun di #merika Serikat meningkat sebanyak ' dari

tahun '11 hingga 200 (3o$ak")4grzyn 5 Sampson, 20''!. erdasarkan

hasil penelitian Global Initiative for Asthma (%/3#! , penyakit asma

mengenai sekitar 00 juta orang di seluruh dunia dan prevalensinya terus

meningkat terutama di negara berkembang (Sveum et.al, 20'2!.

6i /ndonesia, beberapa peneliti memperkirakan bah$a peningkatan

kasus penyakit alergi mencapai 0 persen tiap tahunnya (P7&S/, 20'2!.

Peningkatan prevalensi alergi beberapa dekade terakhir terutama pada

masyarakat dengan sosial ekonomi tinggi dan di daerah industri. Penelitian di

$ilayah 68/ 9akarta menemukan prevalensi alergi pada anak usia kurang dari

'- tahun sebesar 2. 8husus untuk rinitis alergi di /ndonesia prevalensinya

mencapai ',"'2,- dan cenderung terus meningkat setiap tahunnya

(:adhlia, 20'2!. *asil penelitian pada anak sekolah dasar di Semarang

didapatkan jumlah kasus alergi berturut"turut meliputi asma sebanyak ,',

rinitis alergik sebanyak '', dan eksim sebanyak ,2 (Paramita, 20''!.

&eaksi #lergi terjadi saat adanya paparan ulang terhadap suatu alergen

tertentu, misalnya beberapa jenis makanan. #lergen yang masuk ke dalam

tubuh akan diproses oleh Antigen Presenting Cell (#P;!, kemudian #P;

akan menginduksi aktivasi


3/35

berinteraksi dengan


4/35

dari sistem innate immunity kemudian mengarah pada pengembalian

keseimbangan =h' dan =h2 (9ain et al , 20'0!.

6efinisi )*+ menyebutkan bah$a probiotik adalah mikroorganisme

hidup yang dapat memberi keuntungan bagi kesehatan tubuh ketika diberikan

dalam jumlah yang adekuat. erbagai jenis produk probiotik telah berhasil

dikembangkan, salah satu produk probiotik lokal yang memiliki potensi untuk

dikembangkan adalah dadih. Aakanan khas Sumatera arat ini dibuat dari

fermentasi susu kerbau menggunakan bambu dan daun pisang secara

tradisional (Bsmiati dan &isfaheri, 20'!.

6adih mengandung berbagai bakteri probiotik yang memiliki manfaat

baik untuk kesehatan tubuh apabila dikonsumsi. eberapa strain probiotik

yang telah diidentifikasi dari dadih adalah #actobacillus s!., #actococcus s!.,

dan #euconostoc s!. (Surono, 2001!. Penelitian yang dilakukan oleh alai

Penelitian =ernak di Sumatera arat menunjukkan bah$a bakteri probiotik

yang dominan ditemukan dalam dadih adalah #actobacillus s!. (Bsmiati ,

20''!.

eberapa penelitian yang menunjukkan berbagai manfaat dari probiotik

dadih diantaranya adalah dapat menekan kadar kolesterol dalam darah, dapat

menekan proses karsinogenesis, dadih juga terbukti dapat meningkatkan

kemampuan sistem imunitas tubuh, memiliki sifat antioksidan dan antibakteri

(;halid dan *artiningsih , 20'!.

erdasarkan pemaparan latar belakang permasalahan diatas, penulis

menyadari pentingnya dilakukan penelitian mengenai potensi probiotik dadih

dalam mencegah terjadinya reaksi alergi. Pada penelitian ini penulis

-


5/35

melakukan pengamatan kadar eosinofil darah tepi pada mencit yang dijadikan

model alergi.

1.2 Rumusan Masalah

agaimanakah pengaruh probiotik dadih dalam menekan reaksi alergi

melalui pengamatan jumlah eosinofil apus darah tepi pada mencit model

alergiC

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

=ujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh probiotik

dadih dalam menekan reaksi alergi melalui pengamatan jumlah eosinofil apus

darah tepi pada mencit model alergi.

1.3.2 Tujuan husus

'. Aengetahui jumlah eosinofil apus darah tepi pada mencit yang

diinduksi alergen ovalbumin.2. Aengetahui potensi imunoregulasi probiotik dadih terhadap reaksi

alergi melalui pengamatan jumlah eosinofil apus darah tepi.. Aembandingkan jumlah eosinofil apus darah mencit model alergi

yang diberi probiotik dadih dengan kelompok kontrol.

1.! Man"aat Penelitian

1.!.1 Bagi klinisi


6/35

Aenambah pengetahuan tentang manfaat probiotik dadih dalam

menekan reaksi alergi melalui pengamatan jumlah eosinofil apus darah tepi,

sehingga dapat dijadikan acuan untuk mempertimbangkan pemberian

probiotik dadih bagi pasien alergi.

1.!.2 Bagi ilmu #engetahuan

'. Aemberikan kontribusi bagi ilmu pengetahuan mengenai pengaruh

probiotik dalam menekan reaksi alergi melalui pengamatan jumlah

eosinofil apus darah tepi.2. 6apat dijadikan sebagai data dasar bagi peneliti lain untuk melakukan

penelitian lebih lanjut mengenai efek probiotik dadih.

1.!.3 Bagi mas$arakat

Aemberikan informasi kepada masyarakat mengenai salah satu

manfaat dari konsumsi probiotik dadih untuk menekan reaksi alergi, dengan

harapan meningkatkan kesadaran dan minat masyarakat untuk mengkonsumsi

makanan tradisional dadih yang memiliki banyak manfaat untuk kesehatan

tubuh.

D


7/35

BAB 2

T%N&AUAN PU'TAA

2.1 Alergi

Pada tahun '10D seorang ilmu$an bernama ;lemens von PirEuet untuk

pertama kalinya memperkenalkan istilah alergi. Penggunaan istilah tersebut

dimaksudkan untuk menjelaskan suatu Fperubahan reaksi hostG apabila

terpapar dengan suatu bahan yang sama untuk yang kedua kalinya atau lebih

(&ing, 20'-!. &eaksi alergi dapat terjadi hampir di semua jaringan atau organ

dalam tubuh, adapun manifestasi klinis yang muncul tergantung pada organ

target terjadinya reaksi. Aanifestasi klinis alergi diantaranya adalah asma,

reaksi anafilaksis, dermatitis atopik, rinitis alergi, dan urtikaria. #sma dan

reaksi anafilaksis termasuk gejala klinis yang paling parah dan dapat

mengancam hidup. #lergi makanan dan dermatitis atopik lebih sering terjadi

pada anak"anak dan berisiko menjadi rhinitis alergi bahkan asma dikemudian

hari apabila reaksi alergi terus berlanjut (;hristanto 5 +edono, 20''!.

2.1.1. %mun(#at(l(gi Alergi

Proses terjadinya reaksi alergi melalui beberapa tahapan aktivasi sel"sel

imunokompeten, aktivasi sel"sel struktural, aktivasi dan rekruitmen sel"sel

mast, eosinofil dan basofil, reaksi mediator dengan organ target dan tahap

timbulnya gejala klinis. #lergen yang masuk ke dalam tubuh akan diproses

oleh #P;. Peptida dari alergen yang dipresentasikan oleh #P; akan

menginduksi aktivasi


8/35

memproses alergen akan mengaktivasi


9/35

*"histamin meningkatan pelepasan neurotransmitter seperti histamin,

norepinfrin, asetilkolin, peptida dan "hidroksitriptamin.

Secara ringkas mekanisme terjadinya alergi ditampilkan dalam %ambar

2.', yaitu pada individu yang memiliki predisposisi alergi, paparan pertama

alergen menimbulkan aktivasi sel"sel allergen%s!ecific hel!er " dan sintesis

/g7, yang dikenal sebagai sensitisasi alergi. Paparan alergen selanjutnya akan

menimbulkan penarikan sel"sel inflamasi dan aktivasi serta pelepasan

mediator"mediator, yang dapat menimbul&an early 'acute( allergic res!onses

(7#&s! dan late allergic res!onses (


10/35

Aediator"mediator sel mast tersebut meliputi histamin, leukotrien dan

sitokin yang meningkatkan permeabilitas vaskuler, kontraksi otot polos dan

produksi mukus. 8emokin yang dilepas sel mast dan sel"sel lain merekrut

sel"sel inflamasi yang menyebabkan


11/35

bronkokonstriksi dan pengendapan kompleks imun yang akan menimbulkan

keluhan urtikaria. 9ika target organnya saluran cerna, akan terjadi kolik

abdominal atau diare. #pabila kompleks ini mengendap di hidung, akan

timbul gejala kongesti atau rinorea (;hristanto 5 +edono, 20''J &obbins,

200!.

6iagnosis penyakit alergi dapat ditegakkan melalui anamnesis gejala

yang dialami dan kemungkinan alergen penyebab, pemeriksaan fisik untuk

melihat gejala alergi yang muncul dan apabila masih terdapat keraguan harus

dilakukan pemeriksaan penunjang. Pemeriksaan penunjang yang dilakukan

tersebut dapat secara in vivo ataupun in vitro (Sude$i, 2001!.

Pemeriksaan in vitro yang dapat dilakukan misalnya adalah hitung

eosinofil total. Pemeriksaan hitung eosinofil total perlu dilakukan untuk

menunjang diagnosis dan mengevaluasi pengobatan penyakit alergi. Penderita

alergi dapat mengalami eosinofilia apabila dijumpai jumlah eosinofil darah

lebih dari -0 eosinofil?@


12/35

agar dapat memperoleh diagnosis yang tepat sehingga dapat menghindari

tatalaksana yang undertreatment maupun overtreatment.

2.1.3. Tatalaksana Pen$akit Alergi

erbagai substansi atau zat yang mampu menimbulkan reaksi alergi

dikenal sebagai alergen. #lergi dapat muncul terhadap alergen udara (airborne

allergens! seperti debu rumah, tungau, jamur dan serbuk sari. )alaupun

penyakit alergi bersifat meluas dan sering terjadi, penyakit alergi masih dapat

disembuhkan dan gejalanya dapat dikontrol (


13/35


14/35


15/35

2.3 Pr(+i(tik

Probiotik merupakan mikroorganisme hidup yang mampu memberikan

efek menguntungkan bagi kesehatan hostnya apabila dikonsumsi dalam

jumlah adekuat. 7fek yang menguntungkan dari probiotik adalah

memperbaiki keseimbangan mikroflora intestinal pada saat masuk ke dalam

saluran pencernaan. /stilah QprobiotikQ diperkenalkan oleh


16/35

permukaan enterosit, mampu membentuk kolonisasi pada saluran

pencernaan, mampu menghasilkan zat anti mikroba (bakteriosin!, dapat

berkembang biak dengan baik, dan memberikan pengaruh yang

menguntungkan kesehatan manusia. *al yang penting lainnya adalah tidak

bersifat patogen dan aman jika dikonsumsi. Strain probiotik juga harus tahan

dan tetap hidup selama proses pengolahan makanan dan penyimpanan,

mudah diaplikasikan pada produk makanan, dan tahan terhadap proses

psikokimia pada makanan (Puryana, 20''!.

2.3.1 Man"aat #r(+i(tik

Probiotik telah dimanfaatkan untuk penanggulangan penyakit

gastroenteritis seperti diare (;ollado et al., 2001!, menstimulasi sistem

kekebalan tubuh (/solauri and Salminen, 200!, menurunkan kadar

kolesterol (


17/35

bakteri (asam organik, hidrogen peroksida, dan bakteriosin yang mampu

menekan pertumbuhan patogen!J (2! fungsi sistem imun tubuh, yaitu dengan

peningkatan sistem imun tubuh melalui induksi pembentukan /g#, aktivasi

makrofag, modulasi profil sitokin, serta menginduksi hy!ores!onsiveness

terhadap antigen yang berasal dari pangan.J (! fungsi metabolit probiotik,

yaitu metabolit yang dihasilkan oleh probiotik, termasuk kemampuan

probiotik mendegradasi laktosa di dalam produk susu terfermentasi, dapat

dimanfaatkan oleh penderita intoleransi laktosa (Puryana, 20''!.

2.3.2 Pengaruh #r(+i(tik terha)a# reaksi alergi

Penelitian yang dilakukan )iduri 5 Suryani (20''! membuktikan

bah$a suplementasi #actobacillus casei # shirota strain menurunkan kadar

/g7 pada penderita rhinitis alergi. #lergi merupakan bentuk penyakit =h2

yang upaya perbaikannya memerlukan pengembalian host pada kondisi =h'"

=h2 yang seimbang. Pemberian probiotik ditujukan pada imunomodulasi

respons imun untuk menyeimbangkan respons imun =h' dan =h2.

Aekanisme imunoregulasi dari probiotik diduga melalui kemampuan

probiotik untuk menginduksi perkembangan sel = &egulator (= &eg!,

kemudian sel = &eg menghasilkan beberapa sitokin yang menekan proliferasi

sel =h2 yang berlebihan. Perbaikan homoestasis sistem biologis penderita ini

pada akhirnya dapat mencegah reaksi alergi (#ldi, 2001!.

Probiotik memiliki kemampuan sebagai aktivator yang kuat untuk

sistem innate immunity karena mempunyai molekul yang spesifik pada

dinding selnya. 6alam mikrobiologi, molekul"molekul spesifik tersebut

dikenal sebagai !athogen%associated molecular !atterns (P#APs!. Aolekul"

'


18/35

molekul spesifik (P#APs! dikenali oleh reseptor"reseptor spesifik ( s!ecific

!attern recognition rece!tors, P&&s!. Salah satu P#APs yang ada pada

probiotik adalah li!oteichoic acid (


19/35

mikroba. 9adi konsep probiotik pada pencegahan alergi didasari pada induksi

aktif dari respon imunologik yang dimulai dari sistim imun innate dan

mengarah pada pengembalian host pada kondisi F=h'"=h2G yang seimbang

(7ndaryanto, 200D!.

2.! Da)ih

6adih atau F6adiahG dalam bahasa minang merupakan makanan khas

dari Sumatera arat, produk fermentasi susu kerbau ini diproses secara

tradisional sehingga proses fermentasi terjadi secara alami. 6ari hasil

penelitian telah diketahui bah$a bakteri probiotik yang ada dalam dadih

berasal dari bambu, daun pisang dan susu kerbau itu sendiri (#kuza$a 5

Surono, 2002!.

'1

A B

%ambar 2.- Probiotik dadih murni (#! dan produk ampiang dadiah (!dokumentasi pribadi


20/35

=erdapat tiga hal pokok dalam proses pembuatan dadih yaitu persiapan

bambu, pemerahan dan proses terjadinya dadih. ambu yang digunakan

adalah jenis bamboo gombong (Gigantochloa verticilate! dan bambu ampel

( ambusa vulgaris!. 9enis bambu tersebut dipilih karena rasanya pahit

sehingga tidak disukai semut. Selanjutnya dadih ditutup daun talas, daun

pisang, plastik maupun tanpa penutup. 6adih terbentuk karena proses

penggumpalan susu kerbau yang disebabkan oleh adanya asam"asam yang

dihasilkan dari perubahan karbohidrat dalam susu kerbau oleh mikroba

tertentu (Sunarlim, 2001!.

6ari hasil penelitian ditemukan bah$a strain bakteri probiotik dalam

dadih didominasi oleh


21/35

6adih asal 8abupaten #gam dan Solok, Sumbar mengandung protein

dan lemak relatif lebih tinggi dibanding yogurt susu sapi, sehingga kadar

proteinnya -,0, lemak 2,D'. 6adih mengandung 'D jenis asam amino

dari 22 asam amino yang ada di alam. 6engan demikian dadih mengandung

berbagai jenis asam amino esensial dan non esensial dalam jumlah yang

cukup banyak (Sunarlim, 2001!.

2.!.2 Man"aat Da)ih Bagi esehatan

6adih tebukti mengandung akteri #sam berpotensi sebagai probiotik dan berkhasiat terapeutik pada tubuh karena

dapat memperbaiki keseimbangan mikroflora dalam saluran pencernaan.

7fek menguntungkan yang dihasilkan #< disebabkan metabolit yang

dihasilkannya dapat menekan pertumbuhan bakteri patogen enterik,

menurunkan kolesterol, bersifat antimutagenik, antikarsinogenik,

antivaginitis, memperbaiki imunitas tubuh, mencegah sembelit, serta

memproduksi vitamin dan bakteriosin (Bsmiati 5 &isfaheri, 20'J ;halid

5 *artiningsih, 20'!.

Protein yang terdapat dalam dadih dapat membantu pertumbuhan dan

perbaikan sel"sel yang rusak termasuk untuk penambahan tinggi vili usus

yang berpengaruh terhadap proses absorpsi makanan. =eori tersebut

dibuktikan oleh penelitian yang menyimpulkan bah$a pemberian probiotik

pada mencit yang menderita diare mampu mengurangi diare yang dideritanya

dan juga dapat memicu pertumbuhan vili usus yang rusak akibat bakteri

patogen penyebab diare (Sunaryanto 5 Aar$oto, 20'!.

2'


22/35

Pemanfaatan dadih sudah tidak asing di beberapa daerah sentra

produksi dadih di Sumatera arat yang terdapat di kabupaten yaituL 8ab.

#gam (8odya ukittinggi!, 8ab. 0 kota, 8ab. Solok, 8ab. =anah 6atar, dan

8ab. Sa$ah


23/35

+valbumin

Sel 6endritik Sensitisasi alergenSel =0

Sel =*2

/


24/35


25/35

6imanaL n T jumlah he$an coba tiap kelompok

t T jumlah kelompok

banyak sampel yang dibutuhkan dalam kelompokL

U(-"'! (n"'!V W'

n W ' X

n W D D ekor

Sampel ditambah satu ekor (20! tiap kelompok untuk menghindari dro!

out sehingga total sampel yang dibutuhkan untuk empat kelompok adalah 2

mencit.

!.3.1 riteria %nklusi

Aencit putih jantan ( 3us musculus!, dalam keadaan sehat, aktifitas dan

tingkah laku normal, berumur D" minggu, dengan berat badan 20 " 0 gram.

!.3.2 riteria Eksklusi

%erakan mencit tidak aktif, dan mencit mati dalam masa penelitian.

!.! aria+el Penelitian

!.!.1 aria+el Penelitian

'. Rariabel ebas L Pemberian probiotik dadih dengan dosis D mg?20g

dan ''2mg?20gJ /nduksi alergi menggunakan ovalbumin.2. Rariabel =erikat L Proses reaksi alergi, dilihat melalui pengamatan

kadar eosinofil darah.. Rariabel 8ontrol L Bmur, berat badan, dan makanan mencit.

!.!.2 De"inisi #erasi(nal

'. +valbumin

2


26/35

#ntigen yang berasal dari putih telur ayam dan berpotensi menimbulkan

reaksi alergi. Pada penelitian ini digunakan antigen dengan dosis terkecil

yang dapat menimbulkan reaksi alergi yang dapat diamati dengan mudah

yaitu '0 b?v (#ldi, 2001!.2. 8adar eosinofil darah

6arah mencit diambil dari ekor mencit, kemudian dilakukan hitung jumlah

sel eosinofil secara manual menggunakan hapusan darah dengan metode

pan"optic stainning F)right %iemsaG. *apusan darah dicat dengan )right

dan sebagai pengganti buffer dipakai cat %iemsa yang telah diencerkan

dengan larutan penyangga, lalu diperiksa tiap zona hapusan darah diba$ah

mikroskop dengan perbesaran -00Y (%andasoebrata, 200'!. 9umlah

eosinofil dihitung rata"rata dari lapang pandang.. Probiotik dadih

Aakanan khas Sumatra arat yang terbuat dari susu kerbau yang

difermentasikan selama 2-"- jam dalam suhu ruangan yang mengandung

bakteri #actobacillus sebagai bakteri probiotik. Pada penelitian ini

diberikan dadih dengan dosis D dan ''2 mg?20g pada he$an

percobaan (6osis dadih ditentukan dengan perkiraan porsi orang de$asa

(0 kg! dalam satu hari yaitu sekitar '00"-00 gram!.

!. Bahan Penelitian

!..1. He4an 5(+a )an Bahan untuk Pemeliharaan He4an 5(+a

• 6ua puluh delapan (2! ekor mencit yang memenuhi kriteria inklusi

• Pakan standar

• Sekam

• #lkohol 0

• #ir

!..2. Bahan Pem+uatan 'e)iaan Uji

2D


27/35

• Putih telur ayam ras " #Euadest

• 3a;l fisiologis " 6adih

• 6ifenhidramin!..3. Bahan Pemeriksaan Hitung E(sin("il

• ;at )right dan %iemsa• 6arah tepi mencit yang diambil dari ekor

• #Euades

!.6 %nstrumen Penelitian

!.6.1. %nstrumen untuk Pemeliharaan He4an 5(+a

• 8andang he$an coba

• =empat makan dan minum he$an coba

• =imbangan digital

!.6.2. %nstrumen untuk %n)uksi Alergi

• Spuit ' m<

• 9arum suntik 2 %

• )adah 8ecil

!.6.3. %nstrumen untuk Pengam+ilan Darah Uji

•

Papan bedah• Ainor Set

• 9arum suntik 2 %

• Spuit ' m<

!.6.!. %nstrumen untuk Pem+uatan Pre#arat 'li)e Hitung E(sin("il

• &ak pe$arnaan Pipet tetes

• Ob+ect glass ak pe$arnaan

• Cover glass

!.6.. %nstrumen untuk Pemeriksaan Hitung E(sim("il

• Aikroskop

• 8amera digital

!.6.6. %nstrumen 'anitasi )an Higiene

• Sarung tangan (hand gloves! Aasker

• Sabun cuci tangan antiseptik #lkohol

• 9as


28/35

!.6.7. %nstrumen Pengum#ulan )ata

• uku (catatan perlakuan he$an coba! dan Pena

• Penggaris

!.7 Pr(se)ur Penelitian

!.7.1 Pemeliharaan )an Perlakuan He4an Per0(+aan

Semua mencit yang akan diberikan perlakuan sebelumnya diadaptasikan

selama hari dengan lingkungannya. Selama adaptasi mencit ditimbang

dia$al dan akhir dari adaptasi.

Aencit dibagi kedalam empat kelompok, dengan masing"masing

kelompok terdiri dari ekor. Setiap kelompok diberi perlakuan yang berbeda,

dengan rincian L

8elompok ' L 8ontrol positif yang hanya diinduksi alergen +R#

8elompok 2 L 6iinduksi alergen +R# dan diberi dadih dengan dosis D

mg?20g

8elompok L 6iinduksi alergen +R# dan diberi dadih dengan dosis ''2

mg?20g

8elompok - L 6iinduksi alergen +R# dan diberi obat anti alergi

(difenhidramin! dengan dosis ',D2 mg?kg

Bntuk semua kelompok perlakuan akan diberikan pakan standar dan minum

secara ad libitum setiap harinya.

!.7.2 Peren0anaan D(sis

'. 6osis #ntigen

Putih telur ayam (ovalbumin! dengan konsentrasi '0 b?v yang dilarutkan

dalam 3a;l fisiologis 0,1.

2


29/35

2. 6osis


30/35

pembanding digunakan difenhidramin (#ldi, 2001!. Pada hari ke"2'

mencit diambil darahnya. 8emudian dilakukan pembuatan slide apus

darah tepi untuk dilakukan penghitungan kadar eosinofil darah tepi

diba$ah mikroskop.

!.8 Peng(lahan )an Analisis Data

*asil pengamatan kadar eosinophil total pada he$an coba dicatat,

ditabulasi, dan dianalisis secara statistik menggunakan program SPSS 20

dengan interval kepercayaan 1 dan taraf signifikansi 0,0 (p T 0,0!.

#nalisis normalitas data '/ha!iro%Wil&s(, dan uji One%Way #3+R# diikuti

uji !ost%hoc u&ey H/2 dengan alternatif uji non parametric 8ruskal")allis

diikuti uji !ost%hoc 3ann%Whitney. &erata 'mean! dan simpangan baku

'standard deviation( untuk tiap kelompok dihitung dari data yang

didapatkan. 3ilai yang didapat dari data hasil penelitian disajikan dalam

bentuk rerata Z standar deviasi (S6!.

!.9 Etika Penelitian

+leh karena pada penelitian ini digunakan mencit sebagai he$an coba,

maka sampel perlu dilakukan dengan layak, dengan cara penempatan pada

kandang yang dibersihkan tiap hari, cahaya yang cukup serta makanan dan

minuman sesuai kebutuhan.

!.1: Alur erja Penelitian

0

2 ekor mencit

#daptasi selama hari


31/35

agan -.' &encana 8erja Penelitian

'

Pemberian 3a;l

fisiologis secara oral pada hari ke"'sd 20

8"'(8ontrolPositif!

&andomisasi mencit kedalam - kelompok pemberian perlakuan selama 2' hari

Sensitisasi secara intra peritoneal dengan +R# 0,2 ml?20g pada hari ke"' kemudian diulangilagi secara subkutan pada hari ke" dan ke"'-

8"-(8ontrol

Pembanding!

Pengambilan darah he$an coba dan pembuatan slide apus darah tepi pada hari ke 2'.

8"2(6adih

D mg?kg!

8"(6adih

''2 mg?kg!

Pemberian dadih

secara oral pada harike"' sd 20

Pemberian difenhidramin

',D2 mg?kg secara oral pada hari ke"' sd 20

*itung jumlah eosinofil menggunakan mikroskop


32/35


33/35

%andasoebrata &, 200'. Penuntun laboratorium klinik. 9akartaL 6ian &akyat.

*uriyati 7, udiman 9, +ctiza &, 20'-. Peran kemokin dalam patogenesis rinitisalergi. 9urnal 8esehatan #ndalas (2!.

/solauri, 7 and S Salminen, 200. ProbioticsL use in allergic disordersL a nutrition,allergy, mucosal immunology, and intestinal microbiota (3#A/!&esearch %roup &eport. 9. ;lin. %astroenterol -2 (2! L 1' 1D.

9ain S, Madav *, 20'0. #nti"allergic effects of probiotic 6ahi through Aodulationof the %ut /mmune Sistem . =urk 9 %astroenterol 2' (!L 2--"20.

zdemir >, 20'. Aechanisms of preventative and therapeutic role of probioticsin different allergic and autoimmune disorders. +pen 9ournal of /mmunology (!L '0"''.

Paul )7, Khu 9, 20'0. *o$ are =* 2" type immune responses initiated andamplifiedC. 3at &ev /mmunol '0(-!L 22"2.


34/35

Paul, )illiam 7, 200. undamental immunology 4th edition. Bnited States of #mericaL


35/35

Sunaryanto & dan Aar$oto , 20'2. /solasi, identifikasi, dan karakterisasi bakteriasam laktat dari dadih susus kerbau. 9urnal Sains dan =eknologi /ndonesiaRol. '-, 3o. L 22"2.

Surono / dan Bsman P, 2001. /n vivo antimutagenicity of dadih probiotic bacteria

to$ards =rp"P'. #sian"#ust. 9. #nim. Sci 22('!L ''1"'2.

Sveum &, ergstrom 9, rottman %, *anson A, *eiman A, 9ohns 8, et al, 20'2./nstitute for ;linical Systems /mprovement. 6iagnosis and Aanagementof #sthma. Bpdated 9uly 20'2.

=orii S, # =orii, 8 /toh, # Brisu, # =erada, = :ujisa$a, et.al, 20'0. 7ffects of +ral#dministration of

Documents

REVISI Proposal Skripsi Aa Noval .doc