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lA iDentiFicAción no eXteRioRiStA De loS cARActeReS nAtURAleS

Esta identificación se basa en el polimorfismo de base genética, partiendo de los caracteres de naturaleza genética que poseen los animales desde su nacimiento y que se mantienen inalterables a lo largo de su vida sin que se vean afectados por factores externos. Se denominan marcadores genéticos y tienen gran valor específico, dado que son constantes, permanentes e inmutables, pero no suelen utilizarse en la práctica ganadera ya que son laboriosos y costosos de recoger y sobre todo, cuestionables desde el punto de vista económico. Se presentan en distintos líquidos y estructuras orgánicas, así como en el ADN. Son detectables a partir de pruebas inmunológicas o bioquímicas, y presentan variabilidad de base genética (alelos entre individuos), de ahí el nombre de polimorfismo genético.

La identificación no exteriorista de los caracteres naturales se basa en el estudio de los grupos sanguíneos, los alotipos, el polimorfismo bioquímico, el Sistema Mayor de histocompatibilidad y el ADN.

Continuando con los métodos que se siguen para definir la identidad de un ejemplar, después de haber visto en capítulos anteriores los caracteres naturales y artificiales exterioristas, nos centraremos a continuación, independientemente de la finalidad para la que sean obtenidos, en la identificación de caracteres naturales no exterioristas, los caracteres genotípicos, inherentes al material genético.

Identificación equina III

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los grupos sanguíneosHay pocos laboratorios que determinen los

grupos sanguíneos, lo que supone ser un asunto costoso y de esfuerzo añadido. Los grupos sanguíneos, en el caso del caballo hasta treinta, se deben a una serie de proteínas con marcado carácter antigénico (se evidencian en laboratorio mediante pruebas de aglutinación o hemólisis) que se encuentran en la membrana externa de los eritrocitos, también llamados glóbulos rojos o hematíes, células encargadas del transporte del oxígeno a los tejidos y que son los elementos más numerosos de la sangre. El equino nace con un tipo sanguíneo que no puede ser alterado en ninguna forma por lo que, una vez que este tipo sanguíneo ha sido determinado, el animal puede ser identificado positivamente a través

del análisis de una muestra de sangre durante toda su vida y todas las veces que se estime conveniente.

Se calcula que el número de tipos sanguíneos distintos en el equino sobrepasa el billón. Es por esto que la posibilidad que dos caballos seleccionados al azar tengan el mismo tipo de sangre es tan remota que puede considerarse imposible, a no ser que se trate de gemelos idénticos.

Por lo anterior, se considera que el tipo sanguíneo de un equino puede compararse a la huella digital del hombre, y cuando se utiliza junto con los datos del animal como sexo, color, edad y marcas naturales o adquiridas, se logra una identificación completa. Esta connotación nos dirige hacia la posibilidad de obtener resultados extremadamente veraces en la verificación de la paternidad de los caballos

basándose en el principio de exclusión genética, es decir, establecer que

cierto animal no puede ser padre o madre del potrillo en cuestión. A partir del análisis de los datos, se buscan aquellos factores presentes en el potrillo y que están ausentes en la madre y,

por lo tanto, obligatoriamente deben de provenir del padre.

Aquel potro que no los posea queda automáticamente excluido.

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En el equino, se descri-ben siete sistemas gené-ticos y de los cuales con-tienen factores antigéni-cos en número variable. Los Grupos Sanguíneos del equino (Bell 1985) son: A, C, D, K, P, Q y U. Además de poseer antí-genos de grupos sanguí-neos en sus células, los animales también po-seen anticuerpos séricos

contra otros grupos sanguíneos y se llaman isoanti-cuerpos, siendo éstos los que se utilizan para deter-minar diferencias sanguíneas.

Los antígenos eritrocitarios en el caballo se desarrollan durante la vida fetal, llegándose a constatar en fetos de 4 a 5 meses de edad concentraciones de estos antígenos tan altas como en el adulto. De los grupos sanguíneos, hay que tener especial consideración con el sistema A y Q porque están involucrados en el 98 % de los casos de isoeritrolisis.

La isoeritrolisis es una enfermedad también conocida como ictericia del potrillo, enfermedad hemolítica, ictericia hemolítica, etc… y afecta al feto a través de una inmunización de la madre contra los eritrocitos del potrillo, desencadenando un desenlace fatal en las primeras tomas del calostro.

Grupos sanguíneos

Locus Alelos

A 11

C 2

D 11

K 2

P 3

Q 5

U 2

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los alotiposSon variantes de diversas proteínas sanguíneas,

séricas, eritrocitarias, leucocitarias, lácteas o seminales que puede ser detectadas como antigénicas por otro miembro de la misma especie. Los alotipos reflejan pequeñas diferencias identificativas, que son constantes entre individuos en la secuencia de los aminoácidos de las inmunoglobulinas. En el caso del caballo encontramos las siguientes:

Inmunoglobulina IgM, actúa en las respuestas primarias y, de forma más reducida, en las respuestas secundarias asociada a otras inmunoglobulinas, aunque en algunas infecciones sólo se produce IgM, y es un mecanismo importante frente a gastroenteritis y enfermedades causadas por E.coli y Salmonella.

Inmunoglobulina IgA, puede neutralizar algunas partículas víricas y bacterianas aunque su función principal es prevenir su adherencia a las superficies epiteliales, tal que puedan ser eliminadas con la lágrima. La inmunoglobulina IgA reside en las secreciones respiratoria, genital, intestinal y ocular.

Inmunoglobulina IgG, cuya función principal es el fomento de la eliminación de los microorganismos y la neutralización de las toxinas en la fase secundaria de la respuesta inmune. La IgGT es una inmunoglobulina específica del caballo y está considerada como subclase poseyendo una alta capacidad para neutralizar la toxina tetánica y muy presente en caballos jóvenes.Como vemos, las inmunoglobulinas actúan especí-

ficamente contra un determinado antígeno o invasor

en el organismo y se van a ubicar en una región dife-rente formando parte del sistema inmunitario humoral.

El polimorfismo bioquímicoEs el término que se aplica a las variantes

moleculares de las proteínas (polimorfismos) presentes en líquidos orgánicos o células, y se detectan por medio de procedimientos bioquímicos de laboratorio. La electroforesis es el principal de ellos, aunque a veces se utiliza la cromatografía. Ambas técnicas no requieren de los reactivos que precisan los grupos sanguíneos para ser identificados por lo que supone que muchos laboratorios practiquen este tipo de estudio de identificación.

Dentro de los animales domésticos existen gran-des cantidades de variantes proteicas en las globuli-nas, albúminas, enzimas de la sangre y hemoglobi-nas. En el caballo se han descrito 14 de ellas, y algu-nos de estos polimorfismos más acentuados ocurren entre las yeguas que carecen de ciertos genes para los grupos sanguíneos, pudiendo ocurrir que los porten los potros que llevan en el vientre, provenientes en este caso del padre, de modo que generarán determi-nados anticuerpos que serán excretados en el primer calostro. Al mamar, los anticuerpos que deben ob-tener de la madre desencadenarán una grave enfer-medad hemolítica muy severa que les destruye los glóbulos rojos. Si hubiesen transcurrido entre 48 a 60 horas, el riesgo desaparece porque a partir de ese momento el estómago del potrillo no absorberá los anticuerpos que se dirigirán al torrente sanguíneo. Si un animal tiene un gen para una sustancia específica (lo que implica su relación directa con el genotipo), ésta puede ser detectada por los métodos adecuados.

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Hasta la fecha, la identificación de los polimor-fismos bioquímicos ha tenido más trascendencia en lo relacionado con la paternidad (al igual que el ADN) al depender de que un individuo no posea un antígeno sanguíneo específico o una variante proteica de la leche a menos que uno de los padres la tuviera. Lo mejor es hacer las pruebas a los hijos del padre conocido y a los posibles padres.

Las pruebas de paternidad, junto con el estudio de las diferencias filogenéticas de las razas y sus tipos, constituyen una medida imparcial de la similitud o disimilitud al estar sujetas a medidas selectivas naturales, y con ello suponen factores identificativos. Lamentablemente, su utilidad desde el punto de vista económico, resulta muy limitada.

Sistema mayor de histocompatibilidadEstá formado por sustancias con carácter

antigénico que se encuentran en la membrana de células no eritrocitarias. Los más interesantes son los presentes en los linfocitos. Al igual que los grupos sanguíneos, se detectan mediante una reacción antígeno-anticuerpo.

el ADnLa Genética estudia la herencia y la transmisión

de las propiedades biológicas de una generación a otra, constituyendo la identificación genética de un individuo un valor indiscutible a tener en cuenta. Los factores hereditarios se encuentran contenidos en los cromosomas, estructuras alargadas, delgadas y filamentosas cuyo componente principal es el ácido desoxirribonucléico (ADN). Las unidades

Genética cualitativa en la cría de animales Sistemas de las proteínas de la sangre en el caballo

Proteína / enzima Locus Fuente Número de alelosTransferrina Tf suero 10Albúmina Al suero 3Esterasa Es suero 7Prealbúmina Pr suero 8Prealbúmina Xk suero 3Postalbúmina Pa suero 2Hemoglobina Hb glóbulos rojos 2Anhidrasa carbónica CA glóbulos rojos 56-fosfogluconato deshidrogenasa PGD glóbulos rojos 3Fosfoglucomutasa PMG glóbulos rojos 3Fosfohexosa isomerasa PHI glóbulos rojos 3Ácido fosfatasa AP glóbulos rojos 2Catalasa Cat glóbulos rojos 2NADH diaforasa Dia glóbulos rojos 2

Adaptado de sandberg (1974), “Proc. 1st World Congress on Genetics Applied to Livestock Production”, vol. 1, págs. 253-365.

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funcionales de los cromosomas son los genes, que controlan la expresión de los caracteres y se localizan a lo largo de los cromosomas, formando estructuras químicas que determinan caracteres individuales. Ambos se presentan por pares en las células del individuo. Cada pareja de genes ocupa un determinado lugar en el cromosoma, un locus específico. El caballo posee 32 pares de cromosomas, que son el soporte de los genes que llevan implícito el material hereditario, y a su vez, las diferentes formas posibles de existir cada gen se denominan alelos, constituyendo éstos el abanico de posibilidades en que puede mostrarse ese caracter concreto. Cada individuo llevará únicamente dos alelos, correspondientes uno a cada progenitor.

Sin embargo, hay circunstancias que producen un cambio en la secuencia génica de una población, y son la selección, la mutación, la migración y el azar. La primera de las fuerzas influyentes, la selección, es quizás a la que mayor modificación puede imprimirse a la hora de un criador ajustarse a sus necesidades o mejoras en los apareamientos.

Con relación al parentesco, la endocría o consan-guinidad compromete la proporción de homocigosis en los loci de un individuo, de modo que se alcanza un grado de coincidencia mayor al resto de la pobla-ción heterocigótica original.

En la actualidad, los estudios en el tema deter-minan la consanguinidad como mejora en una selección inicial de las ganaderías, aunque una elevada consanguinidad producirá, muy proba-blemente, individuos con baja fertilidad debido a la aparición de deletéreos y escasa heterocigosis, en función de que sea una consanguinidad ligera

o fuerte (dependiendo el grado de parentesco). Determinar el grado de consanguinidad (coeficiente F, según Wright) es detectar el incremento probable de la homocigosidad resultante del apareamiento de miembros emparentados y se encuentra en un rango de 0 y 1,0, o como generalmente se dice entre un porcentaje del 0 y el 100, a partir de un cálculo de probabilidades. De este modo, identificando el coeficiente F que representa la proporción de los loci que inicialmente eran heterocigotos (diferentes) y se han vuelto homocigotos (iguales) nos detecta la probabilidad de que los alelos de un mismo locus sean “idénticos por descendencia”, aspecto muy a tener en cuenta en la cría y mejora de una raza.

Otra cuestión interesante en la identificación del ADN se relaciona con los estudios del color de la capa. El caballo está determinado genéticamente por 50.000 genes de los cuales solo 16 series son las responsables de determinar su pelaje. Al ser la capa un carácter cualitativo y no ligado al sexo, se constituyen en uno o pocos genes aunque sus series de alelos pueden ser más o menos complicadas, y dicho sea de paso, objeto de innumerables estudios sobre la herencia de la capa en reproducción. Consolidar la identificación de las series génicas del individuo es un factor cada vez más controlado para poder atender las modas establecidas en el pelaje.

Haciendo una breve exposición del tema, comen-cemos por relacionar la nomenclatura de los genes que determinan el color del caballo y la designación de sus símbolos:

“A” (Agoutí): Determina la modificación para el pelaje básico, generalmente el negro.

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“B” (Black): Controla la calidad de la repartición de los gránulos de eumelanina.

“C” (Condition): Es el res-ponsable de la formación de melanina.

“D” (Dilution): Determina el reparto de melanina por el pelo.

“E” (Extensión): Influye en la restric-ción y extensión.

“P” que determina la dilución de los ojos rosas.Veámoslos con detalle:

Gen “A”Presenta cuatro variantes o alelos, A+, A, at y a,

prevaleciendo la dominancia según el orden descrito. El alelo A+, dominante, provoca que la eumelanina se concentre en el dorso, espalda, cruz extremidades por lo que el animal que lo porta tendrá apariencia de rojiza a amarillenta con cola y crin negra y raya de mula, banda dorsal y cebraduras. El alelo A, permite la apariencia rojiza a amarillenta y oscurece las extremidades (animales de capa castaña). El alelo at, su efecto es semejante al anterior pero menos intenso (animales de capa castaño oscuro). Por último, el

alelo a presenta la exclusión total de la feomelanina por lo que el individuo homocigótico será homogéneo en la capa (color negro).

Gen “B”Presenta dos variantes o alelos,

B y b, que controlan la calidad de la repartición de los gránulos

de eumelanina, no su cantidad total. El alelo B propicia gránulos de pigmentos alargados

que retienen toda la longitud de onda de la luz (color negro). El alelo b propicia que los gránulos sean más esféricos y no absorben toda la longitud de onda de la luz (color marrón). Dependiendo de si el individuo es homocigótico (BB) o heterocigótico (Bb) presentará crines negras tanto en negros como en castaños. En el caso del carácter recesivo (bb) tendrá el mismo color en todo el cuerpo (alazán).

Gen “c”La producción de melanina depende de la exis-

tencia de la tiroxinasa. Si no existe esta enzima no hay producción, por lo que estamos ante un albino. En el caso del caballo, el homocigoto cc es letal, por lo tanto, solamente existe la despigmentación en el heterocigoto Cc.

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Gen “D”Presenta dos variantes o alelos, D y d, que a su

vez actúan sobre las series A y el B. Al actuar en el reparto de la melanina, actúa diluyendo el color, siendo DD la dilución completa, Dd la dilución media y dd aclara mucho una capa produciendo el blanco.

La media dilución en los que tenían el genotipo castaño provoca la capa “isabela”, en los que

presentan el genotipo negro provocan la capa “ratonero” y en los que tenía el genotipo alazán provoca la capa “palomino”. La doble dilución dd dará un “cremello” que puede provenir de padres cremellos o negro.

Gen “e”Presenta tres alelos, ED, E y e, que influyen

en la restricción y extensión del negro. Los genotipos ED (EDED ; EDE y EDe) actúan enmascarando la serie A, en la que provocan

la aparición del “bocifuego”, en la serie B la aparición del negro “azabache” y en la serie b, la

aparición del “alazán tostado”.Los genotipos EE y Ee permiten la expresión

normal de la capa. El genotipo ee aclara la totalidad del pelo, por lo que en las serie B heterocigóticas dará un “castaño claro”, “negro peceño” y “alazán claro”.Gen “P”

Este gen no contiene alelos.

En conjunto, todos los caracteres genotípicos brevemente vistos en este artículo formulan mé-todos más o menos complejos orientados a la de-tección de aspectos que puedan determinar la au-tenticidad e identificación de los individuos frente

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al resto de los de su especie, especialmente cuando la prác-tica zootécnica demanda una mayor precisión, fiabiidad y permanencia, como en el caso de ejemplares de razas puras que adquieren en el mercado una alta cotización. No dejan de ser posibles herramientas en los estudios etnológicos, en la producción, el avance científico o el orden jurídico, que completan más sustan-cialmente a los métodos de identificación exterioristas, que por ende, son los más utiliza-dos en el ámbito común.

Los análisis genéticos en principio pueden llevarse cabo a partir de cualquier tejido del animal. Esto ofrece la ventaja de poder realizarse a partir de pelos. Aproximadamente en-tre 20 y 30 pelos son suficien-tes para realizar la determi-nación. Este tipo de muestra puede incluso ser enviada al laboratorio por correo postal para su análisis. Cariotipos del caballo: semental (superior) y yegua (inferior), según Hsu y Bernirschke, 1967.

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En el próximo capítulo, trataremos el modo en que los profesionales veterinarios plasman documentalmente los datos producto de la identifica-ción de los équidos, así como las variantes existentes.

GloSARioAntígeno: todas las sustancias que pueden ser reconocidas por el sistema inmunitario del organismo y desencadenar una respuesta defensiva,

generando la creación de anticuerpos. Generalmente son proteínas o polisacáridos. Anticuerpos séricos: proteínas defensivas del organismo (Inmunoglobulinas) que se encuentran de forma soluble en la sangre.estudios etnológicos: estudio de las diferentes razas, origen, evolución y relaciones.Alelos: cada una de las formas alternativas de un gen, que se diferencian en su secuencia y que se pueden manifestar en modificaciones concretas de

las funciones de ese gen. Es una variante de la secuencia del ADN en un determinado lugar del cromosoma.cromosomas: cada una de las estructuras, formadas por ADN y proteínas, que contienen la mayor parte de la información genética de un individuo.Gen: es la unidad de almacenamiento de información genética y unidad de la herencia genética, pues transmite esa información a la descendencia.

Los genes se disponen a lo largo de los cromosomas y ocupan en ellos una posición determinada llamada locus. Los genes están localizados en los cromosomas, en el núcleo celular.

Genoma: es el conjunto de genes de una especie.Filogenética: es la parte de la biología evolutiva que se ocupa de determinar la relación de parentesco entre las especies, utilizando matrices de

información de moléculas de ADN y de morfología. locus: es una posición fija que ocupa un gen en un cromosoma. loci: plural de locus, pronunciado loki.Homocigosis: cuando la pareja de genes son idénticos.Heterocigosis: cuando la pareja de genes no son idénticos.cariotipos: preparaciones de los cromosomas para poder visualizarlos.

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA. Tema 4: Identificación animal: concepto, importancia y tipos. Identificación por caracteres morfológicos. Identificación por caracteres fanerópticos. Identificación basada en el polimorfismo de base genética. Identificación por marcas o signos artificiales. La reseña: normativa. Tipos de reseña. Ficha zootécnica. Valoración exteriorista. Concepto de belleza, defecto, tara y vicio. [en línea]. [Consulta el 8 mayo 2017] Disponible en: http://www.uco.es/organiza/departamentos/prodanimal/economia/aula/img/pictorex/30_07_08_Tema4.pdf.

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Por maría isabel martín Sobrino Ramón García matías

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