Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf

8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf

1/94

i

LAPORAN TETAPPRAKTIKUM BIOKIMIA UMUM

Oleh :KELOMPOK XVII

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGANFAKULTAS TEKNOLOGI PANGAN DAN AGROINDUSTRI

UNIVERSITAS MATARAM2015


2/94

ii


3/94

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kita panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah

memberikan kesempatan kepada penulis untuk menyusun Laporan Tetap

Praktikum Biokimia, sehingga dapat terselesaikan tepat waktu. Laporan tetap

praktikum Biokimia ini disusun sebagai syarat untuk menyelesaikan mata kuliah

Biokimia Umum di Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas

Mataram. Semoga laporan tetap ini menjadi bukti penanggung jawaban kami

terhadap tugas-tugas yang di berikan

Tidak lupa kami ucapkan terimakasih kami kepada Co. Assisten Praktikum

yang telah membimbing kami selama melakukan praktikum Biokimia dengan

penuh tanggung jawab. Ucapan terimakasih pula kami sampaikan kepada semua

pihak yang telah terlibat secara langsung maupun tidak langsung dalam

pengerjaan laporan tetap praktikum Biokimia umum.

Laporan ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu diharapkan kritik

dan saran yang menunjang dalam penyempurnaan laporan ini selanjutnya.

Akhirnya kami berharap agar laporan ini dapat menjadi sumbangan ilmu

pengetahuan bagi rekan-rekan yang lain dan juga dapat menambah ilmu

pengetahuan kita.

Mataram, 23 Desember 2015

Penyusun.

iii


4/94

iv

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .................................................................................. i

HALAMAN PENGESAHAN ..................................................................... ii

KATA PENGANTAR .............................................................................. iii

DAFTAR ISI ........................................................................................ iv

DAFTAR TABEL ................................................................................... vi

ACARA I PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRKATKUMPendahuluan ...........................................................................1Tinjauan Pustaka .....................................................................3Pelaksanaan Praktikum ............................................................6Hasil Pengamatan.....................................................................7Pembahasan .........................................................................12Kesimpulan ............................................................................17

ACARA II LARUTAN BUFFER Pendahuluan .........................................................................18Tinjauan Pustaka ...................................................................20Pelaksanaan Praktikum ..........................................................22Hasil Pengamatan...................................................................24Pembahasan .........................................................................25Kesimpulan ............................................................................28

ACARA III UJI KARBOHIDRAT

Pendahuluan .........................................................................29Tinjauan Pustaka ...................................................................31Pelaksanaan Praktikum ..........................................................33Hasil Pengamatan...................................................................35Pembahasan .........................................................................37Kesimpulan ............................................................................40

ACARA IV PENGUJIAN PROTEINPendahuluan .........................................................................41Tinjauan Pustaka ...................................................................43Pelaksanaan Praktikum ..........................................................46Hasil Pengamatan...................................................................48Pembahasan .........................................................................49Kesimpulan ............................................................................54

ACARA V PENGUJIAN LEMAK

Pendahuluan .........................................................................55

Tinjauan Pustaka ...................................................................57

iv


5/94

v

Pelaksanaan Praktikum ..........................................................59Hasil Pengamatan ..................................................................61

Pembahasan .........................................................................62Kesimpulan ............................................................................64

ACARA VI PENGUJIAN ENZIMPendahuluan .........................................................................65Tinjauan Pustaka ...................................................................67Pelaksanaan Praktikum ..........................................................69Hasil Pengamatan...................................................................71Pembahasan .........................................................................72Kesimpulan ............................................................................75

ACARA VII SPEKTROFOTOMETER Pendahuluan .........................................................................76Tinjauan Pustaka ...................................................................78Pembahasan .........................................................................82Kesimpulan ............................................................................86

DAFTAR PUSTAKA

v


6/94

vi

DAFTAR TABEL

Tabel 1.1 Hasil Pengamatan Alat-alat Praktikum............................................. 7Tabel 1.2 Hasil Pengamatan Analisa MSDS ....................................................10Tabel 2.1 Perubahan pH Larutan HCL 0,1 M dengan Penambahan 0,01 N ........24Tabel 2.2 Perubahan pH Larutan H3PO4 0,05 M dengan Penambahan NaOH

0,05N. .........................................................................................24Tabel 3.1 Hasil Uji Molisch............................................................................35Tabel 3.2 Hasil Pengamatan Uji Seliwanoff ....................................................35Tabel 3.3 Hasil Pengamatan Uji Benedict.......................................................36Tabel 3.4 Hasil Pengamatan Uji Iodin............................................................36Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Asam Amino dengan Uji Ninhidrin .....48

Tabel 4.2 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Peptida dengan Uji Biuret.................48Tabel 4.3 Hasil Pengamatan Uji Sulfur Beberapa Jenis Larutan ........................48Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Uji Sifat Isoelektrik Protein..................................48Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Jenis Pelarut Terhadap Kehidupan Lemak ............61Tabel 5.2 Hasil Pengamatan Uji Ketidakjenuhan Dua Jenis Minyak...................61Table 5.3 Hasil Pengamatan Sifat Penyabunan dari Dua Jenis Garam Asam

Lemak..........................................................................................61Tabel 6.1 Hasil Pengamatan Penentuan Aktivitas Amilase Air Liur ....................71Tabel 6.2 Hasil Pengamatan Pengaruh pH terhadap Aktivitas Enzim.................71

vi


7/94

1

ACARA IPENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Pengenalan alat merupakan langkah pertama sebelum melakukan

percobaan atau penelitian. Mengenal alat, praktikan dapat mengetahui fungsi

masing-masing bagian dari alat tersebut serta cara penggunaan alat yang akan

digunakan dalam percobaan. Mengetahui fungsi dan cara penggunaan alat-alat

yang akan digunakan akan memperlancar jalannya suatu percobaan. Sehingga,

dengan berbekal pengetahuan pemahaman akan fungsi alat tersebut akan

memperoleh hasil penelitian yang maksimal. Penggunaan alat tidak terjadi

kesalahan yang begitu fatal (Coudhary, 2008).

Penggunaan alat-alat laboratorium haruslah dalam keadaan steril.

Sterilisasi dapat mencegah adanya kontaminasi sehingga alat-alat dapat

digunakan dengan aman. Selain itu, pengetahuan bahan-bahan praktikum juga

penting karena bahan-bahan tersebut memiliki sifat yang berbeda. Bahan-bahan

kimia dapat menimbulkan bahaya apabila tidak dikenali sifat dan jenis bahan

tersebut. Jika praktikan tidak mengetahui bahan-bahan praktikum dan tidak

berhati-hati maka dapat menimbulkan kecelakaan kerja.

Dalam percobaan biasanya menggunakan alat-alat yang ada di

Laboratorium. Setiap alat-alat praktikum memiliki fungsi yang berbeda, sehingga

perlu pengenalan alat-alat praktikum. Selain itu, pengenalan alat-alat praktikum

juga sangat penting karena dalam laboratorium terdapat beragam bahan-bahan

yang sangat berbahaya. Apabila alat-alat praktikum salah digunakan dan bahan-

Nama : Risa Intan SartikaNIM : J1A014105


8/94

2

bahan praktikum tidak berhati-hati saat penggunaannya dapat menyebabkan

bahaya bagi diri sendiri maupun orang lain disekitarnya. Oleh karena itu,

pengenalan alat dan bahan praktikum sangat diperlukan guna memperlancar

kegiatan praktikum dan mencegah terjadinya hal-hal yang tidak diinginkan

(Manruw, 2010).

Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui nama serta

fungsi dari alat-alat dan mengetahui nama, sifat, serta penanganan pertama

pada bahan-bahan yang ada di Laboratorium.


9/94

3

TINJAUAN PUSTAKA

Pekerjaan dalam laboratorium biasanya sering menggunakan beberapa

alat gelas. Penggunaan alat ini dengan tepat penting untuk diketahui agar

pekerja tersebut dapat berjalan dengan baik. Keadaan yang aman dalam suatu

laboratorium dapat tercipta apabila ada kemauan dari pekerja, pengguna,

maupun kelompok kerja laboratorium untuk menjaga dan melindungi diri.

Diperlukan kesadaran bahwa kecelakaan yang terjadi dapat berakibat pada

dirinya sendiri maupun orang lain disekitarnya. Tujuan dari praktiikum

pengenalan alat ini adalah untuk mengenal beberapa macam alat gelas yang

sering digunakan dalam laboratorium dan penggunaannya (Setiawati, 2002).

Pengenalan alat-alat ini meliputi macam-macam alat, mengetahui nama-

namanya, memahami bentuk, fungsi serta cara kerja alat tersebu. Setiap alat

dirancang atau dibuat dengan bahan-bahan yang berbeda-beda satu sama lain

dan mempunyai fungsi yang sangat spesifik. Kebanyakan peralatan untuk

percobaan di dalam laboratorium terbuat dari gelas. Meskipun peralatan tersebut

telah siap dipakai, tetapi dalam pemasangan suatu alat untuk suatu percobaan

kadang kala diperlukan sambungan-sambungan dengan gelas atau membuat

peralatan khusus sesuai kebutuhan. Hal ini dilakukan karena dalam percobaan

diperlukan berbagai macam alat-alat tertentu (Imamkhasani, 2000).

Peranan laboratorium dalam mempelajari ilmu kimia yaitu untuk

memberikan kelengkapan bagi pelajaran teori yang telah diterima sehingga

antara teori dan praktek bukan merupakan kedua hal yang terpisah melinkan

satu kesatuan. Keduanya saling mengkaji dan saling mencari dasar, memberikan

keterampilan kerja ilmiah bagi praktikan dan juga memupuk keberanian untuk


10/94

4

mencari kebenaran ilmiah suatu objek dalam lingkungan alam dan sosial.

Sebagai alat untuk menambah keterampilan dalam mempergunakan alat media

yang tersedia untuk menentukan kebenaran. Membina rasa ingin tahu dan rasa

percaya diri sebagai keterampilan yang diperoleh penemuan yang didapat dalam

proses kegiatan kerja laboratorium (Rohman, 2010).

Sifat-sifat bahan kimia dalam laboratorium, dapat dibagi menjadi

beberapa macam anatara lain yaitu bahan kimia beracun adalah bahan kimia

yang dapat menyebabkan bahaya terhadap kesehatan manusia atau

menyebabkan kematian apabila terserap kedalam tubuh karena tertelan, lewat

pernafasan atau kontak lewat kulit. Bahan kimia korosit adalah bahana kimia

yang karena ada reaksi kimia dapat menyebabkan kerusakan apabila kontak

dengan jaringan tubuh atau bahan lain. Bahan kimia mudah terbakar adalah

bahan kimia yang mudah bereaksi dengan oksigen dan dapat menimbulkan

kebakaran. Reaksi kebakaran yang amat cepat juga menimbulkan ledakan.

Bahan kimia peledak adalah suatu zat padat atau cair atau campuran keduanya

yang karena suatu reaksi kimia dapat menghasilkan gas dalam jumlah dan

tekanan yang besar serta suhu yang tinggi sehingga menimbulkan kerusakan

disekelilingnya. Bahan kimia reaktif terhadap asam adalah bahan kimia yang

mudah bereaksi dengan asam menghasilkan panas dan gas yang mudah

terbakar atau gas yang beracun dan korosif (Baker, 2010).

Praktikum merupakan salah satu metode pembelajaran yang mampu

menumbuhkembangkan rasa ingin tahu, aktif, kreatif, inovatif dan memiliki

kejujuran dalam menghadapi suatu masalah dalam realita kehidupan. Melalui

praktikum, mahasiswa memperoleh kemampuan konkrit untuk melengkapi teori


11/94

5

yang diperoleh di kelas yang bersifat verbalistik, melatih keterampilan ilmiah,

menanamkan dan menumbuhkan sikap ilmiah serta meningkatkan motivasi

belajar. Laborataorium dan berbagai sarana prasarananya berperan penting

dalam proses praktikum (Udaibah, 2014).


12/94

6

PELAKSANAAN PRAKTIKUM

Waktu dan Tempat Praktikum

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 05 November 2015 di

Laboratorium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan

Agroindustri Universitas Mataram.

Alat dan Bahan Praktikum

a. Alat-alat praktikum

Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah alat-alat

seperti tabung reaksi, pipet tetes, gelas kimia, gelas ukur, erlenmeyer,

timbangan analitik, rak tabung reaksi, spektrofotometer, lemari pendingin,

dan hot plate

b. Bahan-bahan praktikum

Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah

Natrium Klorida (NaCl), Natrium Hidroksida (NaOH), Asam Klorida (HCl),

Asam Sulfat (H₂SO₄) dan Asam Sitrat (HNO₃).


13/94

7

HASIL PENGAMATAN

Tabel 1.1 Hasil Pengamatan Alat-alat Praktikum

No. Nama Alat Gambar Fungsi

1. Tabung Reaksi Sebagai alat untuk mereaksikan

dua zat atau lebih, menyimpan

zat serta untuk pemanasan

suatu larutan.

2. Gelas Kimia Sebagai tempat mereaksikan

bahan kimia, membuat larutan,

menampung bahan kimia

berupa larutan, padatan atau

pasta, melarutkan dan

memanaskan bahan.

3. Erlenmeyer Sebagi tempat mereaksikan

bahan, untuk menempatkan

larutan yang akan dititrasi.


14/94

4. Pipet Tetes

5. Gelas Ukur

6. Timbangan

Analitik

7. Bulb pipet

Untuk m

suatu w

lain dala

Untuk m

dengan

tidak m

tingkat ti

Berfungsi

bahan y

pada

ketelitian

Berfungsi

dalam

dalam pi

8

mindahkan cairan dari

dah ke wadah yang

jumlah sedikit

ngukur sutau larutan

olume tertentu yang

emerlukan ketelitian

ggi.

untuk menimbang

nag akan digunakan

praktikum dengan

yang tinggi.

untuk membantu di

engisian laruan ke

et


15/94

9

8. Rak Tabung

Reaksi

Digunakan sebagai wadah

untuk meletakkan atau

menyimpan tabung reaksi.

9. Lemari

Pendingin

Sebagai tempat penyimpanan

enzim agar tidak terjadi

denaturasi, segabai tempat

penyimpanan bahan makanan

sehingga mencegah terjadinya

pembusukan.

10. Hot Plate Untuk menghomogenkan suatu

campuran dari dua atau lebih

zat sehingga tercampur dan

bersifat homogeny.


16/94

10

Tabel 1.2 Hasil Pengamatan Bahan-Bahan Praktikum

No. Nama BahanNamaKimia

Sifat Bahaya Penanganan Pertama

1. Garam Dapur NaCl Bersifat korosif dan

mudah larut dalam air

Dapat menyebabkan

gangguan pernafasan, iritasi

mata dan kulit jika terjadi

kontak langsung.

- Jika terkena mata, segera siram dengan

dengan air ± 15 menit

- Jika terkena kulit segera basuh dengan air

dan tutupi dengan sesuatu yang lunak

- Jika terhirup, maka segera pindah ke

tempat yang udaranya terbuka

2. Asam Klorida HCl Bau menyengat, tidak

mudah terbakar dan

sangat korosif

Dapat menyebabkan iritasi

dan luka bakar

- Bila terkena mata, bilas dengan air mengalir

±15 menit

- Bila terkena kulit, cuci dengan air sebanyak-

banyaknya

- Jika tertelan, beri minum 1-2 gelas untuk

pengenceran

- Bila terhirup, segera pindah ke tempat yang

udaranya lebih segar


17/94

11

3. Natrium

Hidroksida

NaOH Solid, berbau, mudah

larut dalam air dingin,

dan dapat merusak

logam

Dapat menyebabkan luka

bakar dapat menyebabkan

kerusakan pada jaringan jika

terkena kulit

- Gunakan sarung tangan saat praktikum

- Jika terkena mata, segera bilas dengan air

beberapa menit

- Basuh dengan air jika terkena kulit

4. Asam Sulfat H₂SO₄ Bersifat korosif dan

tidak mudah terbakar

Menyebabkan iritasi dan luka

bakar, berbahaya jika

tertelan dan terhirup

- Jika terkena kulit, cuci daerah yang terkena

dengan sabun dan air

- Jika terkena mata, segera bilas dengan air

±15 menit

- Jika terhirup, maka segera ke tempat yang

udaranya lebih segar

5. Asam Sitrat HNO₃ Bersifat korosif dan

merupakan asam yang

beracun

Dapat menyebabkan

iritasi dan luka bakar,

- Jika terkena kulit, lepas pakaian yang

terkontaminasi

- Jika terkena mata, basuh dengan air

secara hati-hati

- Jika terhirup, segera mencari udara

yang segar


18/94

12

PEMBAHASAN

Larutan didefinisikan sebagai campuran homogen antara dua atau lebih

zat yang terdispersi baik sebagai molekul, atom maupun ion yang komposisinya

dapat bervariasi. Larutan dapat berupa gas, cairan atau padatan. Larutan encer

adalah larutan yang mengandung sejumlah kecil solute , relative terhadap jumlah

pelarut. Sedangkan larutan pekat adalah larutan yang mengandung sebagian

besar solute . Solute adalah zat terlarut, sedangkan solvent adalah pelarutnya.

Pembuatan larutan adalah suatu cara mempelajari cara pembuatan larutan dari

bahan cair atau padat dengan konsentrasi tertentu. Untuk menyatakan

kepekatan atau konsentrasi suatu larutan dapat dilakukan berbagai cara

tergantung pada tujuan penggunaannya. Langkah-langkah dalam membuat

larutan adalah yang pertama membaca detail resep larutan yang ingin dibuat.

Kalau ada yang perlu dihitung, siapkan perhitungan dulu. Kedua, kumpulkan

bahan kimia yang akan dipakai dan letakkan dekat dengan timbangan digital.

Ketiga, siapkan alat lain yang dibutuhkan, seperti kertas, sendok, tisu, beaker ,

sarung tangan dan sebaginya. Keempat, baru kemudian mengukur jumlah bahan

kimia yang dibutuhkan dengan hati-hati. Ketika semua bahan kimia diukur,

rapikan dan bersihkan alat timbang dan peralatan disekitarnya. Kelima, tuangkan

aquades secukupnya kedalam beaker dan letakkan stir bar dengan ukuran yang

sesuai kedalamannya. Pakailah alat otomatik stirrer dengan kecepatan sedang

untuk mengencerkan bahan kimia.

Jenis-jenis larutan berdasarkan kejenuhannya yaitu pertama larutan tak

jenuh adalah larutan yang mengandung solute kurang dari yang diperlukan

untuk membuat larutan jenuh. Larutan tak jenuh terjadi apabila hasil kali


19/94

13

konsentrasi ion lebih kecil dari Ksp berarti larutan belum jenuh. Kedua, larutan

jenuh adalah suatu larutan yang mengandung sejumlah solute yang larut dan

mengadakan kesetimbangan dengan solute padatnya. Larutan jenuh terjadi

apabila hasil konsentrasi ion sama dengan Ksp berarti larutan tepat jenuh.

Ketiga, larutan sangat jenuh adalah suatu larutan yang mengandung lebih

banyak solute daripada yang diperlukan untuk larutan jenuh. Larutan sangat

jenuh terjadi apabila hasil kali konsentrasi ion lebih besar dari Ksp berarti larutan

lewat jenuh (mengendap). Berdasarkan banyak sedikitnya zat terlarut, larutan

dibedakan menjadi larutan pekat yaitu larutan yang mengandung relative lebih

banyak solute dibanding solvent. Larutan tidak pekat (encer) yaitu larutan yang

relative lebih sedikit solute dibandingkan solvent. Berdasarkan kemampuan

mengahntarkan listrik, larutan dibagi menjadi larutan elektrolit yaitu larutan yang

dapat menghantarkan listrik dengan baik dan larutan non elektrolit yaitu larutan

yang tidak dapat menghantarkan listrik.

Hasil pengamatan alat-alat praktikum yaitu diketahui terdapat alat-alat

yang termasuk glassware yang meliputi tabung reaksi yaitu sebuah tabung yang

terbuat dari kaca yang dapat menahan temperatur dan tahan terhadap reaksi

kimia. Tabung reaksi berfungsi untuk mereaksikan bahan kimia. Gelas kimia yaitu

tempat untuk melarutkan zat yang tidak butuh ketelitian tinggi, misalnya

pereaksi atau reagen untuk analisis kimia kuantitatif atau pembuatan larutan

standar sekunder analisis titrimetri atau volumetri. Pipet tetes yaitu jenis pipet

yang berupa pipa kecil terbuat dari kaca dengan ujung bawahnya meruncing

serta ujung atasnya ditutupi karet. Alat ini berfungsi untuk mengambil larutan

dalam jumlah sedikit. Erlenmeyer yaitu alat berupa gelas diameternya semakin


20/94

14

atas semakin kecil dengan skala disepanjang dindingnya. Alat ini berfungsi untuk

mereaksikan bahan atau menampung hasil titrasi. Gelas ukur yaitu alat yang

digunakan untuk mengukur volume larutan dari 10 hingga 2000 ml. alat ini

memiliki bentuk seperti pipa dengan bawah agak sedikit lebar sebagai kaki atau

penyangganya. Terdapat juga alat-alat nonglassware seperti timbangan analitik

yaitu timbangan yang digunakan untuk menimbang suatu yang bersifat halus

dan tidak bias menggunakan timbangan biasa. Timbangan analitik dimulai dari

dua angka dibelakang koma sampai lima angka dibelakang koma. Rak tabung

reaksi yaitu dinakan sebagai tempat meletakkan atau menyimpan tabung reaksi

yang kosong maupun yang berisi. Biasanya rak tabung reaksi terbuat dari kayu

atau plastik dan terdapat 12 lubang. Lemari pendingin yaitu sebagai tempat

untuk menyimpan bahan makanan agar terhindar dari pembusukan serta

menyimpan enzim agar enzim tidak mengalami denaturasi. Hot plate yaitu

berfungsi menghomogenkan larutan dengan pengadukan. Plate yang terdapat

pada alat ini dapat dipanaskan sehingga mempercepat homogenisasi.

Bahan yang digunakan dalam membuat larutan pada prkatikum ini adalah

HCl. Pertama-tama, HCl yang dikonsentrasikan memiliki berat massa 36,5 gr/mol,

HCl memiliki kerapatan 1,19 gr/ml dengan persen berat sebanyak 37% dari berat

HCl. Berapa ml asam konsentrat tersebut yang harius dilarutkan dalam satu liter

air untuk membuat larutan 0,1 M ini?

Untuk membuat larutan HCl, terlebih dahulu dihitung jumlah HCl yang

dibutuhkan.

Diketahui : • Volume Larutan = 1 liter

• % berat = 47%


21/94

15

• Berat Massa = 36,5 gr/mol

• Konsentrasi = 0,1 m

• Kerapatan = 1,19 gr/m

Ditanya : volume asam konsentrasi ?

gram HCl yang dibutuhkan = 1 liter air x 0,1 m/liter x 36,5 gr/mol = 36,5 gram.

Setelah didapatkan jumlah HCl yang dibutuhkan kemudian dicari sejumlah HCl

dalam ini :

gr HCl/ml = rapat massa x % berat

= 1,19 x 0,37

= 0,44 gr/ml

Dari hasil perhitungan yang telah dilakukan, maka dapat diketahui jumlah ml

asam konsentrat dalam 1 liter air yakni :

Volume asam konsentrat =gr HCl yang dibutuhkan

gr HCl per ml air

=36,5 gr

0,44 gr/ml

= 8,3 ml

Jadi, dapat disimpulkan bahwa jumlah volume asam konsentrat adalah

8,3 ml. sehingga, cara pembuatan larutan HCL 0,1 M sebanyak 1 liter air adalah

mengisi labu takar ukuran 1 liter dengan aquades sebanyak 250 ml, lalu

ditambahkan dengan 8,3 ml asam konsentrat secara perlahan kemudian di kocok

dan ditambahkan aquades sampai 1 liter atau 1000 ml sehingga, pada proses

akhir didapatkan jumlah konsentrasi asam asetat yang dibutuhkan adalah 0,1 M.


22/94

16

Cara-cara yang digunakan untuk membuat larutan NaOH 0,1 M dengan

volume sebanyak 50 ml aquades, sehingga akan didapatkan jumlah mol NaOH

sebanyak 2 mol. Adapun yang diketahui pertama kali adalah :

M = 0,1 m

V = 50 ml = 0,05 liter

Kemudian dimasukkan ke rumus molaritas :

Molaritas =n

V

0,1 M =n

0,05 liter

n = 5 x 10-3 M/liter

n =gr

Mr

5 x 10-3 =gr

40

gr = 0,2 gram

Sehingga untuk membuat larutan NaOH 0,1 M dibutuhkan 0,2 gr NaOH

yang dilarutkan dalam 50 ml aquades pada gelas ukur, kemudian dikocok

sehingga didapatkan proses akhir jumlah konsentrasinya 0,1 m.


23/94

17

KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat ditarik

beberapa kesimpulan sebagai berikut :

1. Alat-alat praktikum terbagi menjadi dua yaitu glassware yang meliputi tabung

reaksi, gelas kimia, gelas ukur, pipet tetes, Erlenmeyer dan nonglassware

meliputi rak tabung reaksi, hot plate, lemari pendingin, spektrofotometer, dan

timbangan analitik.

2. Larutan merupakan campuran homogen antara dua atau lebih zat yang

terdispersi baik sebagai atom, molekul atau ion.

3. Berdasarkan kejenuhannya larutan dibagi menjadi larutan jenuh dan tidak

jenuh, berdasarkan banyak sedikitnya zat terlarut dibagi menjadi larutan

pekat dan tidak pekat, sedangkan berdasarkan kemampuan menghantarkan

listrik larutan dibagi menjadi larutan elektrolit dan non elektrolit.

4. Pembuatan larutan 0,1 M asam konsentrat yang harus dilarutkan dalam 1

liter air yaitu sebanyak 8,3 ml.

5. Pembuatan larutan NaOH 0,1 M dengan volume 50 ml dibutuhkan NaOH

sebanyak 0,2 gram.


24/94

18

ACARA IILARUTAN BUFFER

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Larutan penyangga atau larutan buffer adalah larutan yang dapat

mempertahankan pH tertentu terhadap usaha mengubah pH, seperti

penambahan asam, basa, ataupun pengenceran. Dengan kata lain pH larutan

penyangga tidak akan berubah walaupun pada larutan tersebut diencerkan.

Sebenarnya penambahan sedikit asam, basa atau pengenceran pada larutan

penyangga menimbulkan sedikit perubahan pH, sehingga pH larutan diangga

tidak bertambah atau pH tetap pada kisarannya. Namun jika asam atau basa

ditambahkan kelarutan bukan penyangga maka perubahan larutan pH akan

sangat mencolok (Milady, 2010).

Larutan penyangga mempunyai beberapa fungsi, salah satunya dalam

bidang kesehatan. Dalam bidang farmasi (obat-obatan), banyak zat aktif yang

harus berada dalam keadaan pH yang stabil. Perubahan pH akan menyebabkan

zat aktif tersebut berkurang atau hilang sama sekali. Untuk obat suntik atau obat

tetes mata, pH obat-obatan tersebut harus disesuaikan dengan pH cairan tubuh.

Obat tetes mata harus sesuai dengan pH air mata agar tidak menimbulkan ritasi

yang menyebabkan iritasi pada mata. Begitu juga dengan obat suntik harus

disesuaikan dengan pH darah agar tidak menimbulkan alkolosis atau asidosis

pada darah (Padmono, 2007).

Sifat dari larutan buffer yaitu pH larutan tidak berubah dan jika

diencerkan tidak berubah pula jika ditambahkan kedalamnya sedikit asam atau

Nama : Rangga MahendraNIM : J1A014101


25/94

19

basa. Pada dasarnya suatu larutan penyangga yang tersusun dari asam lemah

dan basa konjugasi merupakan suatu sistem kesetimbangan ion dalam air, yang

melibatkan adanya kesetimbangan airdan kestimbangan asam lemah. Disamping

itu, terdapat ion basa konjugasi yang berasal dari garam atau hasil reaksi antara

asam lemah tersebut dengan basa kuat. Buffer dapat didefinisikan sebagai asam

basa lemah dengan garamnya. Fungsi buffer adalah untuk mempertahankan pH

larutan saat ditambah asam-basa lemah dalam jumlah yang relatif sedikit.

Kapasitas buffer adalah parameter kuantitatif yang menunjukkan kekuatan

(resistensi) untuk mempertahankan pH (Mulyasa, 2009). Oleh karena itu,

dilakukannya percobaan pH dan larutan buffer agar kita mengetahui fungsi dan

kegunaan dari larutan buffer serta manfaatnya dibidang kesehatan.

Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk membandingkan tampilan

perubahan pH asam kuat dengan asam lemah yang dititrasi dengan NaOH.


26/94

20

TINJAUAN PUSTAKA

Larutan penyangga atau larutan buffer merupakan suatu larutan yang

dapat mempertahankan nilai pH tertentu. Adapun sifat yang paling menonjol dari

larutan penyangga ini seperti pH larutan penyangga hanya berubah sedikit pada

penambahan sedikit asam kuat. Disamping itu larutan penyangga merupakan

larutan yang dibentuk oleh reaksi suatu asam lemah dengan basa konjugasinya

ataupun dengan basa lemah dengan basa konjugasinya. Reaksi ini disebut

dengan reaksi asam-basa konjugasi. Disamping itu mempunyai sifat yang

berbeda dengan komponen-komponen pembentuknya (Chang. R, 2006).

Sifat dari larutan buffer yaitu pH larutan tidak berubah jika diencerkan

dan tidak berubah pula jika ditambahkan kedalamnya, sedikit asam atau basa.

Pada dasarnya suatu larutan penyangga yang tersusun dari asam lemah dan

basa konjugasi merupakan suatu sistem kesetimbangan ion dalam air, yang

melibatkan adanya kesetimbangan dalam air dan kesetimbangan asam lemah.

Disamping itu, terdapat ion basa konjugasi yang berasal dari garam atau hasil

reaksi antara asam lemah tersebut dengan basa kuat (Sudarmo, 2005).

Senyawa-senyawa organik yang dapat digunakan sebagai indikator dalam

titrasi mempunyai karakteristik yaitu senyawa memberikan perubahan warna

terhadap suasana pH larutan. Perubahan warna dapat terjadi melalui proses

kesetimbangan bentuk molekul dan ion dari senyawa indikator tersebut. Sebagai

contoh senyawa fenolftalein merupakan indikator asam lemah-basa kuat

(Nuryanti, 2010).

Faktor-faktor yang mempengaruhi pH larutan buffer adalah penambahan

garam-garam netral kedalam larutan dapat mengubah pH larutan dengan


27/94

21

berubahnya kekuatan ion. Perubahan kekuatan ion dan pH larutan buffer dapat

pula disebabkan oleh pengenceran. Penambahan air dalam jumlah cukup, jika

tidak mengubah pH dapat mengakibatkan penyimpangan positif atau negatif

sekalipun kecil sekali. Karena air selain dapat mengubah niali koefisien

kereaktifan dapat juga bertindak sebagai asam lemah atau basa lemah (Martin,

1990).

Kelarutan buffer terkadang menyulitkan karena hampir setiap analisa

membutuhkan kondisi pH tertentu yang relatif stabil, karena banyaknya macam

dan jenis buffer. Pemilihan buffer yang akan digunakan menjadi masalah

tersendir. Dalam memilih buffer, yang harus diperhatikan adalah pH optimum

serta sifat-sifat biologisnya. Banyak jenis buffer yang mempunyai dampak

terhadap sistem biologis, aktivitas enzim, substrat, ataupun kofaktor

(Krisbiantoro, 2008).


28/94

22



Praktikum ini dilaksanakan pada hari kamis, 12 November 2015 di





Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum ini adalah

erlenmeyer, labu ukur, gelas piala, pipet volum, pH stik, statif, gelas ukur

dan ruber bulb .

b. Bahan –bahan praktikum

Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah

larutan NaOH 0,01 N dan 0,05 N, larutan HCl 0,1 M, larutan H3PO4 0,05 M

dan aquades.

Prosedur Kerja

a. Titrasi Larutan HCl

Disiapkan HCl 0,1 M, aquades, NaOH 0,01 M

Diambil 2 ml HCl 0,1 M, dimasukkan dalam gelas piala 18 ml aquades

Diaduk rata

Diukur pH dengan pH stik

Dititrasi dengan NaOH 0,01 M (50 ml)

Diukur pH dengan pH stik dengan selang pengukuran 5 ml sambil diaduk

Digambar kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dan volume larutan


29/94

23

b. Titrasi Larutan H3PO4

Disiapkan H3PO4 , NaOH 0,05 N

Diambil 20 ml H3PO4 0,05 M, dimasukkan dalam gelas piala

Diaduk rata

Diukur pH dengan pH stik

Dititrasi dengan NaOH 0,01 N (30 ml)

Diukur pH dengan pH stik dengan selang pengukuran 5 ml sambil diaduk

Digambar kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dan volume larutan


30/94

24

HASIL PENGAMATAN

Tabel 2.1 Perubahan pH Larutan HCL 0,1 M dengan Penambahan 0,01 N

Volume NaOH 0,01 N (ml) yang ditambahkan

0 5 10 15 20 25 30

pH larutan HCL 2 2 3 3 3 4 4

Tabel 2.2 Perubahan pH Larutan H3PO4 0,05 M dengan Penambahan NaOH0,05N.

Volume NaOH 0,05 N (ml) yang ditambahkan

0 5 10 15 20 25 30

pH larutan HCL 2 2 2 2 3 3 3

Kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dengan volume NaOH

a. Perubahan pH HCl

b. Perubahan pH H3PO4

0

1

2

3

4

5

5 10 15 20 25 30

p H

volume NaOH

perubahan pH

HCl

0

0.5

1

1.5

22.5

3

3.5

5 10 15 20 25 30

p H

volume NaOH

perubahan pH

HCl


31/94

25

PEMBAHASAN

Larutan buffer adalah larutan yang berfungsi menahan perubahan pH

yang ekstrim pada saat terjadi penambahan jumlah ion H dan OH dalam

larutan. Buffer tersusun atas asam lemah dengan basa konjugasinya atau

dengan basa lemah dengan asam konjugasinya. Reaksi antara kedua komponen

penyusun ini disebut dengan reaksi asam-basa konjugasi. Larutan penyangga

yang bersifat asam akan mempertahankan pH pada daerah asam (pH < 7),

sedangkan larutan penyangga yang bersifat basa akan mempertahankan pH

pada daerah basa (pH > 7) (Anonim, 2013).

Praktikum ini ada dua uji yang dilakukan yaitu uji titrasi HCl dan uji titrasi

H3PO4. Dimana praktikum ini dilakukan untuk membandingkan perubahan pH

pada asam kuat dan basa lemah dengan dilakukan titrasi dengan menggunakan

NaOH yang konsentrasinya 0,01 N (ml) dan 0,05 N (ml). Pada uji titrasi HCL

yang dilakukan dengan menitrasi NaOH yang memiliki konsentrasi 0,01 N (ml) pH

larutan ini adalah 2, setelah ditambahkan 5 ml pertama NaOH diperoleh pH 2,

pada 10 ml didapatkan pH 3. Kemudian pada 15 ml larutan didapatkan pH 3,

pada 20 ml larutan didapatkan pH 3 dan pada larutan 25 dan 30 ml didapatkan

pH 4. Berdasarkan hasil pengamatan tersebut didapatkan kurva yang meningkat,

sehingga dapat disimpulkan bahwa larutan penyangga ini bersifat asam lemah

karena dapat mempertahankan pH > 7. Walaupun pada larutan dari 0 sampai 30

ml pH larutan tersebut meningkat, tetapi tidak melebihi pH yang ditetapkan.

Praktikum pada uji kedua yaitu pengujian larutan H3PO4 menggunakan

NaOH dengan konsentrasi 0,05 N (ml). Sebelum ditambahkan NaOH pada 5 ml

pertama pH larutan adalah 2, setelah ditambahkan 5 ml kedua yaitu 10 ml


32/94

26

larutan didapatkan pH 2, pada larutan ke 15 pH 2. Dan pada larutan ke 20, 25

dan 30 didapatkan pH masing-masing pada setiap larutan. Berdasarkan data

tersebut larutan penyangga ini bersifat asam lemah karena pH nya > 7.

Penambahan asam (H ) akan menggeser kesetimbangan kekiri. Dimana

ion H yang ditambahkan bereaksi dengan ion CH3COŌ untuk membentuk

molekul CH3COO. Jika ditambahkan larutan basa maka ion OH dari basa itu

akan bereaksi dengan ion H maka dapat membentuk air (H2O). Hal ini akan

menyebabkan kesetimbangan bergeser kekanan sehingga konsentrasi ion

H dapat dipertahankan. Jadi, penambahan basa menyebabkan berkurangnya

kompinen asam. Penambahan NaOH akan menghancurkan ion OH sehingga pH

menjadi naik.

Reaksi-reaksi kimia pada tubuh makhluk hidup hanya berlangsung pada

pH tertentu. Oleh karena itu, cairan tubuh harus merupakan larutan penyangga

agar pH selalu konstan ketika metabolisme berlangsung, karena sistem buffer

akan mempertahankan pH tubuh agar tetap selalu normal.

Asam klorida (HCl) adalah asam kuat, dan terbuat dari aton hodrogendan

klorin. Atom hidrogen dan kolin berpartisipasi dalam ikatan kovalen, yang berarti

bahwa hidrogen akan berbagi sepasang elektron dengan klorin. Ikatan kovalen

hadir sampai air ditambahkan ke HCl. Setelah ditambahkan kedalam air, HCl

akan terpisah menjadi ion yang positif dan akan melekat pada air (ion hidrogen)

dan ion negatif (ion klorida). HCl bening dan tidak berwarna ketika ditambahkan

kedalam air. Namun, asam klorida memiliki bau yang kuat, dan mengandung

rasa asam yang khas dari kebanyakan asam. Asam klorida mudah larut dalam air


33/94

27

pada semua konsentrasi, dan memiliki titik didih sekitar 100ºC. HCL juga bersifat

korosif yang akan merusak dan mengikis jaringan biologis jika tersentuh.

NaOH berwarna putih, membentuk pellet, serpihan atau batang dan

bentuk lain. Sangat basa, keras, rapuh dan menunjukkan pecahan hablur. Bila

dibiarkan keudara akan cepat menyerap CO2 dan lembab. Mudah larut dalam air,

dan etanol tetapi tidak larut dalam eter. NaOH membentuk basa kuat bila

dilarutakan dalam air. Sedangkan H3PO4 bersifat asam lemah.

Faktor-faktor yang mempengaruhi larutan buffer adalah penambahan

garam-garam netral kedalam larutan dapar mengubah pH larutan dengan

berubahnya kekuatna ion. Perubahan kekuatan ion dan pH dapar, dapat pula

disebabkan oleh pengenceran. Penambahan air dalam jumlah cukup, jika tidak

mengubah pH dapat mengakibatkan penyimpangan positif atau negatif sekalipun

skala kecil.


34/94

28

KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat disimpulkan

sebagai berikut :

1. Lartan buffer adalah larutan yang berfungsi menahan perubahan pH yang

ekstrim pada saat terjadi penambahan jumlah ion H dan OH dalam larutan

2. Penambahan basa (OH ), jika bereaksi dengan ion H akan membentuk

molekul air (H2O).

3. HCL bersifat bening dan tidak berwarna ketika ditambahkan H2O. Namun,

HCL memiliki bau yang kuat dan bersifat asam kuat.

4. NaOH berwarna putih, berbentuk serpihan tau batang, sangat basa, keras,

serta rapuh dan bersifat basa kuat.

5. Faktor-faktor yang mempengaruhi larutan buffer adalah penambahan

garam-garam netral dan larutan dapar mengubah larutan pH dengan

berubahnya kekuatan ion.


35/94

29

ACARA IIIUJI KARBOHIDRAT

PENDAHULUAN

Latar belakang

Energi merupakan salah asatu hal utama yang dibutuhkan oleh manusia

dalam melakukan aktivitas sehari-hari. Energi dapat diperoleh dari makanan yang

mengandung senyawa organik seperti karbohidrat. Makanan yang mengandung

karbohidrat bersal dari biji-bijian dan sayuran. Karbohidrat adalah senyawa

organik yang terdiri dari unsur karbon, hidrogen dan oksigen. Unsur tersebut

sangat dibutuhkan oleh manusia dalam melangsungkan hidupnya (Haris, 2014).

Selain sebagai sumber enegri, karbohidrat juga berfungsi sebagi

cadangan makanan. Pati, sukrosa dan glukosa merupakan senyawa karbohidrat

yang penting dalam kehidupan. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan

karbohidrat dalam tiap bahan pangan berbeda. Penting bagi kita untuk

mengetahui berbagai jenis karbohidrat yang terdapat pada bahan pangan. Ada

beberapa cara yang dapat digunakan untuk menganalisis karbohidrat antara lain

uji Molisch , uji Seliwanoff , uji Benedict , dan uji iodin.

Karbohidrat pada umumnya merupakan zat padat berwarna putih yang

sukar larut dalam pelarutorganik tetapi larut dalam air. Berdasarkan monomernya

karbohidrat dibagi menjadi tiga yaitu monosakarida, oligisakarida, dan

polisakarida. Monosakarida merupakan senyawa karbohidrat paling sederhana.

Oligosakarida merupakan kelompok karbohidrat yang terdiri dari 2 sampai 10

monosakarida sedangkan polisakarida adalah karbohidrat dengan rantai yang

Nama : Nurul Yeni SafitriNIM : J1A014095


36/94

30

panjang. Oleh karena itu, praktikum ini perlu dilakukan untuk mengetahui

macam-macam uji karbohidrat.

Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengidentifikasi berbagai

jenis karbohidrat berdasarkan terbentuknya furfural, sifat preduksinya, dan

perubahan warna iodin yang terikat pada molekul polisakarida sebelum dan

sesudah terhidrolisis.


37/94

31

TINJAUNA PUSTAKA

Uji iodin bertujuan untuk mengidentifikasi polisakarida. Reagen yang

digunakan dalah iodin yang merupakan terlarut dalam potasium iodin. Reaksi

antara polisakarida umumnya membentuk rantai heliks, sehingga dapat berikatan

dengan iodin, sedangkan karbohidrat berantai pendek seperti disakarida dan

monosakarida tidak membentuk struktur heliks sehingga tidak dapat berikatan

dengan iodin. Amilum dengan iodin dapat membentuk komplek biru, amilopektin

dengan iodine akan memberi warna merah ungu sedangkan dengan glikogen

dan dekstrin akan membentuk merah coklat (Haris, 2014).

Karbohidrat adalah komponen bahan pangan yang tersusun oleh tiga

unsur utama, yaitu karbon (C), hidrogen (H), dan oksigen (O). Susunan atom-

atom tersebut dan ikatannya membedakan karbohidrat yang satu dengan yang

lainnya sehingga ada karbohidrat yang masuk kedalam kelompok struktur

sederhana seperti monosakrida dan disakarida dengan struktur komplek atau

polisakarida seperti pati, glikogen, dan hemiselulosa. Analisis kualitatif

karbohidrat umumnya didasarkan atas reaksi-reaksi warna yang dipengaruhi oleh

produk-produk hasil penguraian senyawa organik, sifat mereduksi dan gugus

karboksil dan sifat oksidasi dari gugusan hidroksil yang berdekatan. Reaksi

dengan asam kuat seperti asam sulfat, hidroklorat dan fosfat pada karbohidrat

menghasilkan pembentukan produk terurai yang berwarna. Beberapa analisis

kualitatif karbohidrat yang sering dilakukan adalah uji molisch, uji seliwanoff, uji

antone, dan uji fenol (Kusbandari, 2015).

Disakarida adalah produk kondensasi dua unit monosakarida, ada empat

jenis disakarida yaitu, sukrosa, maltosa, laktosa dan triholosa. Kedua


38/94

32

monosakarida yang saling mengikat berupa ikatan glikosidik melalui satu atom

oksigen, ikatan glikosidik ini biasanya terjadi antara atom C nomor 1 dengan

atom C nomor 4 dan membentuk ikatan dengan melepas satu molekul. Hanya

karbohidrat yang unit monosakaridanya terikat dalam bentuk alfa dapat dicerna.

Disakarida dapat di pecah kembali menjadi dua molekulmonosakarida melalui

hidrolisi. Glukosa terdapat pada empat jenis disakarida, monosakarida lainnya

adalah fruktosa dan galaktosa (Almaitser, 2010).

Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen

dan oksigen. Tepung atau amilum merupakan salah satu bentuk dari karbohidrat

yang merupakan bagian utama dari bahan makanan seperti gandum, jagung,

kentang, ubi da lain-lain. Keberadaan amilum didalam bahan makanan diuji

dengan pemberian larutan yodium. Larutan yodium menyebabkan amilum

berubah warnanya menjadi biru tua. Bahan makanan yang mengandung amilum

jika ditetesi larutan yodium akan berubah warnanya menjadi biru keunguan atau

biru kehitaman (Yunaida, 2014).

Karbohidrat merupakan senyawa metabolit primer selain protein dan lipid.

Karbohidrat mempunyai peranan yang penting dalam kehidupan manusia, antara

lain adalah sebagai sumber tenaga dan penghasil panas tubuh. Adanya

karbohidrat dapat diidentifikasi dengan mengguanakan berbagai metode. Salah

satu metode yang paling umum digunakan adalah uji molisch. Uji molisch sangat

efektif untuk senyawa-senyawa yang dapat didehidrasi oleh asam pekat menjadi

senyawa furfural yang tersubstitusi warna yang disebabkan oleh kondensasi

furfural dengan alfa-naftol menghasilkan senyawa kompleks berwarna merah

ungu (Muddinjafar, 2013).


39/94

33








Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung

reaksi, hot plate , stopwatch , penjepit, gelas kimia, botol, rak tabung, rubber

bulb , dan pipet volume.

b. Bahan-bahan Praktikum


glukosa 1%, pati 1%, fruktosa 1%, maltosa 1%, larutan H2SO4, larutan

Molisch , larutan seliwanoff , larutan Benedict , larutan iodin dan HCl.

Prosedur Kerja

a. Uji Molisch

Disiapkan 5 tabung reaksi

Diisi masing-masing 1 ml larutan berturut-turut yaitu glukosa 1%, amilum 1%,sukrosa 1%, fruktosa 1%, maltose 1%

Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Molisch

Ditambahkan 1 ml larutan H2SO4 padat secara perlahan melalui dindingtabung etanol

Diamati apakah terbentuk cincin berwarna ungu


40/94

34

b. Uji Seliwanoff



Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Seliwanoff dan digojog

Dipanaskan pada perangas air selama 5 menit

Diamati perubahan warna yang terjadi setiap 1 menit

c. Uji Benedict



Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Benedict

Dipanaskan pada perangas air selama 5 menit

Diamati perubahan warna yang terjadi

d. Uji Iodin



Ditambahkan 2 ml larutan iodium

Diamati dan dicatat warna dari masing-masing tabung

Ditambahkan 3 – 5 tetes larutan HCl encer pada masing-masing tabungdan digojok

Dipanaskan pada perangas air selama 5 – 10 menit

Diamati dan dicatat perubahan warna yang terjadi


41/94

35

HASIL PENGAMATAN

Tabel 3.1 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis Karbohidrat Berdasarkan Terbentuknya Furfural (Uji Molisch)

Jenis Karbohidrat Terjadinya Pembentukan Cincin

Glukosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu

Pati 1% Tidak terbentuk cincin ungu

Sukrosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu

Fruktosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu

Maltosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu

Tabel 3.2 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis Karbohidrat Berdasarkan Terbentuknya Furfural (Uji Seliwanoff)

Jenis Karbohidrat

Perubahan Warna

SebelumDipanaskan

Sesudah Dipanaskan

1 2 3 4 5

Glukosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening

Pati 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening

Sukrosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Orange Bening Orange Kemerahan Merah Bata Merah Bara

Fruktosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Orange Bening Orange Orange Kemerahan Orange Kemerahan

Maltosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening


42/94

36

Tabel 3.3 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis KarbohidratBerdasarkan Sifat Pereduksinya (Uji Benedict)

Jenis KarbohidratPerubahan Warna

Sebelum DipanaskanSesudah Dipanaskan

5 Menit

Glukosa 1% Biru Muda Merah Bata

Pati 1% Biru Muda Biru Keruh

Sukrosa 1% Biru Muda Biru Muda

Fruktosa 1% Biru Muda Merah Bata

Maltosa 1% Biru Muda Merah

Tabel 3.4 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis KarbohidratBerdasarkan Perubahan Warna Iodin (Uji Iodin)

Jenis KarbohidratWarna Setelah Ditetesi

Iodin

Warna SetelahDitambahkan

HCl+Dipanaskan

Glukosa 1% Biru Pekat Kuning Bening

Pati 1% Kuning KecoklatanKuning Bening

dengan Butiran Ungu

Sukrosa 1% Kuning Kecoklatan Bening

Fruktosa 1% Kuning Kecoklatan Bening

Maltosa 1% Kuning Kecoklatan Kuning Bening Pekat


43/94

37

PEMBAHASAN

Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen

dan oksigen. Fungsi utama karbohidrat adalah sebagi sumber energi yang

dibutuhkan oleh manusia dalam melakukan segala aktivitasnya. Karbohidrat

banyak terdapat pada bahan panagan seperti biji-bijian dan sayuran. Untuk

mengetahui jenis-jenis karbohidrat dalam berbagai jenis bahan panagan

dilakukan berbagai uji. Pada praktikum ini pengujian karbohidrat dilakukan

dengan menggunakan empat uji, yaitu uji Molisch, uji Seliwanoff, uji Benedict,

dan uji Iodin. Uji Molisch digunakan untuk mengidentifikasi berbagai jenis

karbohidrat berdasarkan terbentuknya furfural begitu juga pengujian Seliwanoff.

Uji Benedict bertujuan untuk mengidentifikasi berbagai jenis karbohidrat

berdasarkan sifat preduksinya dan uji iodin digunakan untuk mengidentifikasi

karbohidrat berdasarkan perubahan warna iodinnya. Bahan-bahan yang

digunakan dalam pengujian karbohidrat adalah glukosa 1%, pati 1%, fruktosa

1% dan maltosa1%.

Berdasarkan hasil pengamatan pada uji Molisch semua jenis karbohidrat

yang diujikan tidak membentuk cincin ungu. Hal ini kemungkinan disebabkan

karena adanya kesalahan oleh praktikan selama pengujian. Uji Seliwanoff ada 2

jenis karbohidrat yang berubah warna pada tiap menitnya selain itu tidak ada

yang berubah yaitu sukrosa dan fruktosa. Sebelum dipanaskan keduanya

berwana kuning bening setelah mulai berubahan menjadi orange, kemerahan

dan merah bata. Hal tersebut menunjukkan bahwa adanya kandungan ketosa

dalam karbohidrat jenis monosakarida itu. Sedangkan jenis karbohidrat sebelum

dan sesudah dipanaskan tidak mengalami perubahan warna. Uji ketiga yaitu uji


44/94

38

benedict yang dilakukan untuk membuktikan adanya gula preduksi. Hasilnya

adalah glukosa, fruktosa dan maltosa mengalami perubahn warna sebelum

dipanaskan dan setelah dipanaskan selama 5 menit. Sebelum dipanaskan ketiga

jenis karbohidrat tersebut berwarna biru muda namun setelah 5 menit

dipanaskan warnanya berubah menjadi merah dan merah bata. Hal ini

menunjukkan adanya kandungan gula preduksi pada ketiga jenis karbohidrat

tersebut. Sedangkan pati dan sukrosa tidak mengalamu perubhan warna baik

sebelum dan sesudah dipanaskan warnanya tetap biru muda.

Sedangkan pada uji Iodin, warna setelah ditetesi iodin adalah pada

glukosa warnanya biru pekat, sedangkan pada pati, sukrosa, fruktosa dan

maltosa warnanya kuning kecoklatan. Sedangkan setelah ditambahkan larutan

HCl dan dipanaskan semua jenis karbohidrat tersebut mengalami perubahan

warna. Glukosa berwarna kuning bening, pati berwarna kuning bening dengan

butiran ungu, sukrosa dan fruktosa berwarna bening dan maltosa berwarna

kuning bening yang pekat. Hasil tersebut hanya glukosa yang menandakan

adanya kandungan polisakarida karena setelah ditetesi larutan iodin warnanya

biru pekat.

Terbentuknya cincin ungu pada uji molisch disebabkan karna terjadi

reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat. Reaksi positif terjadi ditandai

dengan adanya cincin ungu yang terbentuk antara lapisan asam dan lapisan

sampel. Namun, pada praktikum ini molisch menghasilkan data yang negatif

pada semua jenis karbohidrat. Hal ini berbeda dengan hasil pengamatan yang

dilakukan oleh Nurani (2014), dimana pada hasil pengamatannya glukosa,

sukrosa, maltosa dan pati membentuk cincin ungu. Warna kuning pada uji


45/94

39

Seliwanoff menunjukkan adanya kandungan ketosa adalah fruktosa dan sukrosa.

Hasil ini sama dengan hasil percobaan yang dilakukan Nurani.

Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui kandungan gula preduksi pada

berbagai jenis karbohidrat. Ada tidaknya kandungan gula preduksi pada suatu

karbohidrat ditandai dengan adanya perubahan warna zat sebelum dan sesudah

dipanaskan menjadi warna merah bata. Terbentuknya warna merah bata ini

merupakan hasil dari reduksi ion Cu2+ menjadi Cu+ oleh suatu gugus aldehida

yang terkandung dalam gula reduksi yang berlangsung dalam suasana basa.

Penambahan iodin pada suatu karbohidrat akan membentuk warna ungu sampai

merah. Hanya pati yang menunjukkan adanya polisakarida karena setelah

ditetesi iodin warnanya biru pekat, hasil ini sama dengan literatur (Nurani, 2014).


46/94

40

KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat disimpulkan

sebagai berikut :

1. Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen

dan oksigen.

2. karbohidrat berdasarkan monomernya dibagi menjadi tiga, yaitu

monosakarida, oligosakarida dan polisakarida.

3. Terbentuknya cincin ungu pada uji Molisch disebabkan karena terjadinya

reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat.

4. Uji Seliwanoff jiaka sampel berwarna merah bata maka menunjukkan adanya

kandungan ketosa pada sampel tersebut.

5. Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui adanya kandungan gula pereduksi

pada karbohidrat.


47/94

41

ACARA IV UJI PROTEIN

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Protein merupakan makromolekul yang menyusun lebih dari sepuluh

bagian dari sel. Protein menentukan ukuran dan struktur sel, komponen utama

dari sistem komunikasi antara sel serta sebagai katalis berbagai reaksi biokimia

dalam sel. Karena itulah sebagian besar aktivitas penelitian biokimia bertujuan

pada protein khususnya hormon, antibodi dan enzim. Setiap jenis protein

mempunyai jumlah dan urutan asam amino yang khas. Didalam sel, protein

terdapat baik pada membran plasma maupun membran internal yang menyusun

organel sel seperti mitokondria, retikulum endoplasma, nukleus dan badan golgi

dengan fungsi yang berbeda-beda tergantung tempatnya (Yunarso,2007).

Protein-protein yang terlibat dalam reaksi biokimia sebagian besar berupa

enzim banyak terdapat dalam sitoplasma dan sebagian terdapat pada

kompartemen dari organel sel. Protein merupakan kelompok biomakromolekul

yang sangat heterogen. Ketika berada diluar bagi semua makhluk hidup

termasuk mikroorganisme, hewan dan tumbuhan. Protein merupakan rangkaian

gabungan 22 jenis asam amino. Protein ini memainkan berbagai peranan dalam

benda hidup dan bertanggung jawab untuk fungsi dan ciri-ciri benda hidup

(Vandef, 2009).

Protein yang terdapat dalam makanan berfungsi sebagai sumber zat utama

dalam pembentukan sel-sel tubuh dan sebagai sumber energi. Protein terlibat

dalam sistem kekebalan sebagai antibody . Proses kimia yang berlangsung dalam

Nama : Padu Nawazul ImamNIM : J1A014097


48/94

42

tubuh adanya enzim yang merupakan suatu protein yang berfungsi sebagai

biokatalis. Mengingat banyaknya fungsi dan manfaat protein bagi kehidupan kita,

serta pentingnya kita untuk mengetahui berbagai jenis protein. Oleh karena itu,

perlu dilakukannya percobaan mengenai pengujian protein secara kimia dengan

mengenal sifat pengendapan dan perubahan warrna yang terjadi bila protein

tersebut ditambahkan senyawa tertentu.

Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengidentifikasi adanya

gugus asam amino bebas pada suatu bahan, mengidentifikasi gugus R asam

amino yang mengandung sulfur, mengidentifikasi adanya ikatan peptida suatu

larutan dan megidentifikasi titik isoelektrik kasein.


49/94

43

TINJAUAN PUSTAKA

Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam

amino. Asam amino yang menyusun protein ada 20 macam. Protein terdapat

dalam sistem hidup semua organisme baik yang berada pada tingkat rendah

maupun organisme tingkat tinggi. Protein memiliki fungsi utama yang kompleks

di dalam semua proses biologi. Protein berfungsi sebagai katalisator, sebagai

pengangkut dan penyimpan molekul lain seperti oksigen, mendukung secara

mekanis sistem kekebalan (imunitas) tubuh, menghasilkan pergerakan tubuh,

sebagai transmitor gerakan syaraf dan mengendalikan pertumbuhan dan

perkembangan (Katili,2009).

Protein merupakan polimer heterogen dari molekul asam amino. Protein

sangat penting bagi tubuh kita terutama utuk pertumbuhan dan pergantian sel-

sel tubuh yang rusak karena itu metabolisme protein sangat penting untuk

dialami dan karena hal ini banyak melibatkan enzim proteolitik yaitu enzim yang

dapat menguraikan atau memcah protein. Protein dalam bahan pangan yang

konsumsi manusia akan diseap oleh usus dalam bentuk asam amino. Kadang-

kadan beberapa asam amino yang merupakan peptide dan molekul-molekul

protein dapat juga diserap melalui dinding usus masuk kedalam pembuuh darah

(Winarno, 2007).

Protein dapat memerankan fungsi sebagai bahan strutural karena seperti

halnya polimer lain, protein memiliki rantai yang panjang da juga dapat

mengalami crosswking dan lain-lain. Selain itu juga dapat berperan sebagai

biokatalis untuk reaksi-reaksi kimia dalam sistem makhluk hidup, makromolekul

ini memindahkan jalur dan waktu metabolisme yang kompleks untuk menjaga


50/94

44

kelangsungan hidup suatu organisme . Suatu sistem metabolisme terganggu bila

biokatalis yang berperan di dalamnya mengalami kerusakan (Vandef, 2009).

Pada umumnya, protein sangat terhadap pengaruh-pengaruh fisik dan zat

kimia sehingga mudah mengalami perubahan bentuk. Perubahan atau modifksi

pada struktur molekul protein disebut debaturasi. Sifat fisik kimia protein berbeda

satu sama lainnya, tergantung pada komposisi dan jenis asam amino

penyusunnya. Sebagian besar protein bila dilarutkan dalam air akan berbentuk

dipersi koloid dan tidak dapat berdifasi bila dilewatkan melalui membran

semifermiable. Beberapa protein mudah larut dalam air, tetapi adapula yang

sukar larut. Namun, semua protein tidak dapat laru dalam pelarut organik seperti

eter, kloroform atau butena (Najamudin, 2011).

Uji protein dengan menggunakan pereaksi biuret ditandai dengan

perubahan warna larutan ungu violet dalam larutan basa. Reaksi uji protein

dengan menggunakan pereaksi biuret memberikan hasil yang positif jika warna

yang dihasilkan ungu. Hal ini akibat pembentukan senyawa kompleks Cu2+ gugus

–CO- dan –NH dari rantai peptida dalam suasana basa. Pereaksi Ninhidrin

digunakan untuk mengetahui adanya asam amino prolin. Hasil positif ditunjukkan

dengan hasil akhir berupa warna kuning. Hal ini disebabkan adanya satu gugus

karboksil dan asam amino prolin dan hidroksi prolin bereaksi dengan Ninhidrin

(triketohidrindenahidrat) menghasilkan warna kuning (Marzuki, 2011).

Hidrolisis protein ikatan peptida yang membangun rantai polipeptida dalam

protein dapat dihidrolisis menggunakan asam, basa atau enzim pemecah. Ikatan

peptida dalam kondisi asam kuat merupakan proses hidrolisiskimia dan pemecah

ikaan peptida menggunkan enzim merupakan proses hidrolisis biokimia. Reaksi


51/94

45

hidrolisis peptida akan mnghasilkan produk reaksi yang berupa satu molekul

dengan gugus karboksil dan molekul lainnya memiliki gugus amino (Yunarso,

2013).


52/94

46




Laboraturium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan

Agroindustri Univesitas Mataram.


a. Alat-alat Praktikum

Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum kali ini adalah tabung

reaksi, hot plate, pipet volume, ruber bulb, gelas kimia, botol, rak tabung

reaksi erlenmeyer, stopwatch, penjepit dan karet gelang.


Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah

aquades,albumin, glisin, larutan Na asetat, larutan Ninhidrin, Pb-asetat,

larutan CuSO4 0,5%, larutan NaOH 10%, susu segar dan asam asetat.

Prosedur Kerja

a. Uji Ninhidrin

Disiapkan aquades, albumin, glisin (1 mL)

3 tabung reaksi

Ditambahkan 2 mL larutan Na-asetat

Ditambahkan 1 mL larutan Ninhidrin

Dipanaskan dengan penangas air selama 5 menit (1000C)



53/94

47

b. Uji Biuret

Disiapkan aquades, albumin, glisin (1 mL)

3 tabung reaksi

Ditambahkan 2 mL larutan Na-asetat

Ditambahkan 1 ml larutan CuSO4 0,5% dan 1 ml larutan NaOH 1%

Dipanaskan selama 5 menit dengan suhu 100ºC


c. Uji Sulfur

Disiapkan glisin, albumin (0,5 mL)

2 tabung reaksi

Ditambahkan 2,5 mL aquades

Ditambahkan 1 tetes larutan NaOH 10%

Diaduk rata

Ditambahkan 2 tetes Pb-asetat (perubahan warna)

Dipanaskan selama 5 menit dengan suhu 100ºC


d. Uji Sifat Isoelektrik Protein

6 tabung reaksi

Ditambahkan 1 ml susu segar

Tabung 1,2,3 Tabung 4,5,6

Ditambah masing-masing larutan2ml, 4ml, 5ml aquades

Ditambah masing-masing larutan1ml, 3,5ml, 3,7ml aquades

Ditambahkan masing-masing 4ml,2ml, 1ml larutan asetat 0,1 ml

Ditambahkan masing-masing 5ml,2,5ml, 1,5ml larutan asetat 0,1 ml

Diaduk Diaduk

Diamati endapat yang terbentuk Diamati endapat yang terbentuk


54/94

48

HASIL PENGAMATAN

Tabel 4.1 Hasil Uji Kualitatif Asam Amino dengan Uji Ninhidrin

Jenis LarutanPerubahan Warna

Sebelum dipanaskan Setelah dipanaskan

Aquades Bening kekuningan Kuning Bening

Albumin Kuning Bening Merah Keunguan

Glisin Bening Kekuningan Kuning bening

Tabel 4.2 Hasil Uji Kualitatif Peptida dengan Uji Biuret

Jenis Larutan

Perubahan Warna

Sebelumdipanaskan

Setelah dipanaskan

+ CuSO4 0,5% + NaOH 10%

Aquades Bening Bening Kebiruan Biru

Albumin Kuning Bening Hijau Toska Ungu

Glisin 1 % Bening Biru Bening Biru Bening

Tabel 4.3 Hasil Uji Sulfur Beberapa Jenis Larutan

Jenis LarutanPerubahan Warna

Sebelum dipanaskan Setelah dipanaskan

Glisin Bening Bening

Albumin Bening Kuning Bening

Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Uji Sifat Isoelektrik Protein

JenisLarutan

Nomor tabung reaksi

1 2 3 4 5 6

pH

4,1 4,4 4,8 5,1 5,4 5,7

Jumlahendapan

3 3 3 2 2 2

Keterangan : 1 = Tidak ada endapan

2 = Sedikit endapan

3 = Banyak endapan


55/94

49

PEMBAHASAN

Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam

amino. Asam amino yang menyusun protein ada 20 macam. Analisis kuantitatif

asam amino dan protein dapat dilakukan bedasarkan reaksi perubahan warna.

Reaksi perubahan warna untuk mengidentifikasi asam amino dan protein

mencakup : reaksi Biuret, Ninhidrin, Xantho protein, Milon, Diazo, Fohldan

Sakaguchi (Katili, 2009). Pada praktikum ini dilakukan empat jenis pengujian,

yaitu uji Ninhidrin, Uji Biuret, Uji Sulfur dan sifat Isoelektrik Protein.

Uji Ninhidrin bertujuan untuk mengidentifikasi adanya gugus asam amino

bebas pada suatu bahan. Dalam percobaan kali ini menggunakan bahan

aquades, albumin (putih telur) dan glisin 1%. Dengan percobaan ini dapat

diketahui sampel mana yang positif mengandung protein dilihat dari ada atau

tidaknya kandungan asam aminonya. Berdasarkan hasil pengamatan,

menunjukkan larutan aquades sebelum ditambahkan larutan Ninhidrin berwarna

bening, kemudian setelah ditambahkan larutan Ninhidrin berubah warna menjadi

kuning bening. Sedangkan pada larutan albumin setelah ditambahkan larutan

Ninhidrin dan dipanaskan warnanya berubah dari kuning bening menjadi merah

keunguan. Adapun pada larutan glisin tidak mengalami perubahan warna, tetap

berwarna kuning bening. Hal ini menunjukkan bahwa larutan Albumin positif

mengandung asam amino, sedangkan larutan aquades dan glisin hasilnya negatif

karena setelah dipanaskan warnanya tidak berubah menjadi ungu atau merah

violet. Sehingga dari hasil pengamatan tersebut diperoleh hasil yang sama

dengan literatur yang mengatakan pada prinsip kerja ninhidrin, mengujji ada

atau tidaknya protein dalam suatu senyawa dengan penambahan reagen


56/94

50

Ninhidrin untuk mengetahui jumlah kadar asam amino bebas yang terkandung

didalamnya, dimana asam amino bebas akan bereaksi dengan Ninhidrin dan

membentuk senyawa kompleks berwarna ungu (Hamid, 2007).

Uji Biuret merupakan uji umum bentuk protein yang spesifik untuk ikatan

peptida. Dalam percobaan ini, setiap bahan (aquades, albumin, dan glisin)

ditambahkan masing-masing 1 ml CuSO4 0,5% dan 1ml dan NaOH 10%

kemudian dipanaskan pada suhu 1000C selama 5 menit. Pada data hasil

pengamatan, warna larutan pada aquades setelah ditambahkan CuSO4 0,5% dan

NaOH 10% berwarna biru bening dari yang sebelumnya berwarna bening. Pada

larutan Albumin warna berubah menjadi ungu dari berwarna kuning bening.

Adapun larutan Glisin mengalami perubahan warna menjadi biru dari warna

bening. Pada prinsip kerja Biuret, yaitu menguji ada atau tidaknya protein dalam

suatu senyawa dengan penambahan reagen NaOH dan CuSO4 berdasarkan

adanya ikatan peptida (ikatan peptida harus 2 atau lebih). Dimana ion Cu 2+ (dari

pereaksi biuret) dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida yang

menyusun protein dan membentuk senyawa kompleks berwara biru hingga ungu

(Azhar, 2010). Data percobaan tersebut, ketiga larutan positif memiliki ikatan

peptida karena setelah direaksikan dengan reagen pada permukaannya warna

berubah menjadi biru hingga ungu. Membuktikan adanya peptida dalam protein

dilakukan dengan penambahan larutan NaOH yang bersifat basa, larutan

tersebut akan bereaksi dengan polipeptida. Prinsipnya sama dengan

penambahan larutan CuSO4. Warna ungu yang dihasilkan menunjukkan bahwa

ikatan peptidanya sangat kuat, jika ikatan peptidanya lemah maka warna

ungunya akan berubah saat digojok.


57/94

51

Uji Sulfur atau reaksi Fohl bertujuan untuk mengidentifiasi gugu R asam

amino yang mengandung sulfur. Pada percobaan uji sulfur kali ini digunakan

sampel glisin dan albumin. Berdasarkan hasil pengamatan, ada glisin tidak

mengalami perubahan warna sebelum dan sesudah dipanaskan, sedangkan pada

Albumin setelah dipanaskan berubah menjadi kuning bening. Sesuai dengan

literatur yang menyatakan bahwa pemanasan larutan protein bersifat basa akan

berbentuk Na2S jika larutan protein itu mengandung asam amino bersulfur,

seperti sistein, sistin atau metionin. Jika Na2S yang terbentuk direaksikan lebh

lanjut dengan Pb-asetat akan terbentuk endapan berwarna coklat dari PbS

(Ophart, 2003).

Sifat isoelektrik protein bertujuan untuk mnegndentifikasi titik isoelektrik

kasein. Pada percobaan kali ini menggunakan susu segar. Adanya gugus amino

bebas pada gugus karboksil bebas pada ujung-ujung rantai molekul protein

menyebabkan protein bersifat amfoter yaitu dapat bereaksi dengan asam

maupun basa. pH tertentu muatan gugus amino dan karboksilat saling

mentralkan sehingga molekul protein tidak bermuatan. Nilai pH dimana molekul

protein tidak bermuatan disebut titik isoelektrik. Jika pH berada pada kondisi

dibawah titik isoelektrik, maka muatan partiket koloid akan bermuatan positif.

Sebaliknya jika pH berada diatas titik isoelektik maka muatan koloid akan

berubah menjadi netral atau bahkan menjadi negatif. Terjadinya endapan

menandakan bahwa gugus amino dan karboksilatnya tidak saling menetralkan

(Murray, 2006). Berdasarkan hasil pengamatan, pada tabung 1,2,3 memiliki nilai

pH berkisar antara 4,1-4,8 dan membentuk banyak endapan, sedangkan pada

tabung reaksi 4,5,6 dengan nilai pH kisaran 5,1 – 5,7 membentuk sedikit


58/94

52

endapan. Titik isoelektrik dapat ditentukan berdasarkan kekeruhan dan endapan

yang terbentuk karena pada titik dekat isoelektrik akan terjadi gaya tolak

menolak elektrostatik. Gaya tolak menolak tersebut akan menyebabkan kelauan

menjadi minimum lalu terbentuk keruh. Setiap jenis protein memiliki titik

Isoelektrik yang berbeda-beda. Jadi pada tabung 1,2,3 telah mencapai titik

isoelektrik. Jenis buffer yang digunakan pada uji ini adalah buffer asam yaitu

larutan Na-asetat karena dapat mempengaruhi terjadinya denaturasi. Denaturasi

adalah proses terputusnya ikatan peptida protein dan perubahan sifat kimia

gugus samping (-R) rantai asam amino. Pengaruh asam terhadap denaturasi

ialah adanya ion H+ menyebabkan sebagian ikatan peptida terputus. Ion H+ akan

bereaksi dengan gugus COO- membentuk COOH. Sedangkan sisanya (asam)

berikatan dengan gugus amina membentuk ikatan, sehingga apabila larutan

peptida dalam keadaan isoelektrik diberi asam akan menyebabkan bertambahnya

gugus bermuatan yang membentuk afinitas terhadap air dan kelarutan air

meningkat.

Kelarutan protein dalam suatu cairan, sesungguhnya sangat dipengaruhi

oleh beberapa faktor antara lain pH, suhu, kekuatan ionik dan konstanta

dielektrik pelarutnya. Adapun pada uji pengendapan, struktur protein menjadi

tidak stabil karena mudah mengalami denaturasi. Faktor-faktor yang

menyebabkan denaturasi adalah pH, panas, pelarut, kekuatan ion terlarut dan

radiasi. Pemanasan merupakan salah satu faktor yang menyebabkan perubahan

pada struktur protein. Pemanasan akan membuat protein bahan terdenaturasi

sehingga kemampuan mengikat airnya menurun. Hal ini terjadi karena energi

panas akan mangakibatkan terputusnya interaksi non-kovalen yang ada pada


59/94

53

struktur alami protein tetapi tidak memutuskan ikatan kovalennya yang berupa

ikatan peptida. Proses ini biasanya berlangsung pada kisaran suhu yang sempit.


60/94

54

KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan, dapat disimpulkan

sebagai berikut :

1. Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam amino.

2. Pada uji Ninhidrin, albumin positif mengandung asam amino, sedangkan

larutan glisin dan aquades negatif, karena setelah dipanaskan warnanya tidak

berubah moenjadi ungu atau merah violet.

3. Pada Uji Biuret, aquades hasil ujinya negatif, sedangkan glisin dan albumin

positif memiliki ikatan peptida karena setelah direaksikan dengan reagen ada

permukaan warnanya berubah menjadi biru tua dan ungu.

4. Penambahan larutan NaOH dan CuSO4 pada uji Biuret berfungsi untuk

membuktikan adanya peptida dalam protein; Pb-asetat pada uji sulfur

berfungsi untuk membantu terbentuknya endapan pada larutan; dan

penggunaan larutan Na-asetat pada uji sifat Isoelektrik berfungsi untuk

mempengaruhi terjadinya denaturasi.

5. Faktor utama yang mempengaruhi struktur protein yaitu pemanasan, adapun

faktor lain seperti pH, suhu, pelarut, kekuatan ion, konstanta dielektrik dan

radiasi.


61/94

55

ACARA V PENGUJIAN LEMAK

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Lemak adalah ester dari asam lemak dengan gliserol. Satu molekul

gliserol akan mengikat tiga molekul asam lemak. Lemak umumnya tidak larut

dalam air, tetapi dapat larut dalam pelarut non polar seperti kloroform, eter dan

benzena. Lemak dari tumbuhan dinamakan lemak nabati sedangkan lemak dari

hewan dinamakan lemak hewani (Handito, 2015).

Lemak sangat penting bagi tubuh dan mempunyai banyak peranan.

Lemak atau lipid berfungsi sebagai sumber energi, komponen strukturan

membran, pelindung dan sebagai zat bahan penting yang dibutuhkan tubuh.

Lipid yang banyak di alam adalah lemak dan trigliserida. Berdasarkan sifat

kimianya lipid dikelompokkan menjadi dua yaitu, lipid yang dapat disabunkan dan

lipid yang tidak dapat disabunkan. Contoh dari lipid tersebut adalah asam lemak

dan steroid.

Dalam bidang pangan lipid sangat banyak digunakan, yaitu minyak

goreng. Minyak dapat diperoleh dari hwan maupun tumbuhan. Minyak digunakan

untuk menggoreng berbagai macam produk pangan. Seperti kerupuk, gorengan

dan sebagainya. Oleh karena itu, praktikum ini dilakukan untuk mengetahui jenis

pelarut terhadap sifat kelarutan lemak dan untuk mengetahui tingkat

ketidakjenuhan berbagai jenis lemak serta, mengetahui sifat penyabunan dua

jenis garam asam lemak.

Nama : Putri Jannatin SalehaNIM : J1A014099


62/94

56

Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dai praktikum ini adalah untuk mengetahui jenis pelarut

terhadap sifat kelarutan lemak dan untuk mengetahui tingkat ketidakjenuhan

berbagai jenis lemak serta, mengetahui sifat penyabunan dua jenis garam asam

lemak.


63/94

57

TINJAUAN PUSTAKA

Lemak dibagi menjadi tiga yaitu lemak sederhana, lemak majemuk, dan

lemak turunan. Lemak sederhana yaitu apabila dihidrolisis akan menghasilkan

alcohol biasanya berupa gliserol dan asam lemak. Lemak majemuk yaitu apabila

dihidrolisis akan menghasilkan alkohol, asam lemak dan senyawa lainnya seperti

fosfat, asam amino, dan lain-lain. Lemak turunan adalah berbagai jenis senyawa

yang diperoleh dari hidrolisis kedua jenis lemak. Kelompok jenis turunan lemak

adalah gliserol dan berbagai alkohol lain yang ikut menyusun lemak (Sistiawan,

2011).

Lemak dan minyak termasuk dalam satu golongan lipid, yaitu lipid netral.

Lemak dan minyak dapat diperoleh dari hewan dan tumbuhan dapat dikonsumsi.

Lemak dalam tubuh berfungsi sebagai sumber energi dan cadangan makanan.

Wujud lemak berkaitan dengan asam lemak pembentuknya. Lemak yang

berbentuk cair banyak mengandung asam lemak tidak jenuh sedangkan lemak

yang berbentuk padat lebih banyak mengandung asam lemak jenuh (Riawan,

2010).

Berdasarkan kerangka dasarnya, lipida atau lemak dibedakan menjadi

lipida kompleks dan lipida sederhana. Golongan pertama dapat dihidrolisis

sedangkan golongan kedua tidak dapat dihidrolisis. Asam lemak dapat dibedakan

berdasaran tingkat esensialitasnya, yakni linoleat dan linolenat. Asam lemak tidak

jenuh yang (rangkap) kalau hanya sebuah terdapat pada atom nomor 9, bila

terdapat lebih dari satu, maka ikatan atom C rangkap berikutnya terjadi antara 3

buah atom C (Martoharsono, 2012).


64/94

58

Lemak adalah garam yang terbentuk dari penyatuan asam lemak dengan

alcohol organik yang disebut gliserol atau gliserin. Lemak yang dapat mencair

dalam temperatur biasa disebut minyak, sedangkan dalam berbentuk padatan

disebut lemak. Lemak tersusun dari molekul karbon, hidrogen dan oksigen. Sifat-

sifat lemak antara lain mengapung pada permukaan air, tidak larut dalam air dan

dapat melarutkan vitamin A, D, E dan K. Manfaat lemak dalam tubuh adalah

sebagai sumber energi, pelarut vitamin dan sebagai cadangan makanan (Putri,

2015).

Lemak adalah salah satu komponen makanan multifungsi yang sangat

penting untuk kehidupan. Selain memiliki sisi positif, lemak juga mempuyai sisi

negatif terhadap kesehatan. Fungsi lemak dalam tubuh adalah antara lain

sebagai sumber energi , bagian dari membrane sel, pelindung organ-organ tubuh

serta pelarut vitamin A, D, E, dan K. Penambahan lemak dalam makanan

memberikan efek rasa lezat dan tekstur makanan menjadi lembut serta gurih. Di

dalam tubuh, lemak menghasilkan energi dua kali lebih banyak dibandingkan

dengan rotein dan karbohidrat (Sartika, 2008).


65/94

59



Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 03 Desember 2015 di

Laboraturium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan

Agroindustri Univesitas Mataram.



Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung

reaksi, pipet ukur, gelas beaker , bubble bulb, rak tabung reaksi, pipet tetes,

kertas label, tisu, dan erlenmeyer.



kloroform, etanol, aquades, minyak curah, minyak komersial, sabun,

deterjen, CaCl2 0,5%, MgCl2 0,5%, FeCl3 0,5%, minyak hewani, NaOH 0,05

M, HCl 0,05M, benzene, dan iodine.

Prosedur Kerja

a. Uji Sifat Kelarutan Lemak


Ditambahkan 2 ml pelarutTabung 1 : kloroformTabung 2 : benzenaTabung 3 : etanolTabung 4 : NaOH 0,05MTabung 5 : HCl 0,05M

Ditambahkan 2 ml minyak nabati


66/94

60

Digojog

Diulangi untuk minyak hewani

b. Uji Tingkat Kejenuhan Lemak


Ditambahkan 1 ml campuran kloroform dan etanol

Tabung 1: 0,5 ml aquadesTabung 2: 0,5 ml minyak hewani

Tabung 3: 0,5 ml minyak nabati (komersial)

Tabung 4: 0,5 ml minyak nabati (curah)

Digojog

Ditambahkan tetes demi tetes larutan wijs sampai berbentuk warna coklat

c. Uji Sifat Penyabunan Lemak Disapkan 8 gelas piala

Tabung 1-4 ditambahkan sabun 1% 25mlTabung 5-8 ditambahkan deterjen 1% 25ml

Ditambahkan 5ml larutan CaCl2 0,5% (tabung 1 dan 5)

Ditambahkan 5ml larutan MgCl2 0,5% (tabung 2 dan 6)

Ditambahkan 5ml larutan FeCl3 0,5% (tabung 3 dan 7)

Ditambahkan minyak nabati (tabung 4 dan 8) (komersial)

Diaduk rata


67/94

61

HASIL PENGAMATAN

Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Jenis Pelarut Terhadap Kehidupan Lemak

Jenis Pelarut

Jenis Lemak

Minyak NabatiMinyak Hewani

Curah Komersial

Kloroform Larut (non polar) Larut (non polar) Tidak larut (polar)

Benzena Larut (non polar) Larut (non polar) Sedikit larut (semi polar)

Etanol Tidak larut (polar) Tidak larut (polar) Larut (non polar)

NaOH 0,05 M Tidak larut (polar) Larut (non polar) Larut (non polar)

HCl 0,05 M Tidak larut (polar) Larut (non polar) Larut (non polar)

Tabel 5.2 Hasil Pengamatan Uji Ketidakjenuhan Dua Jenis Minyak

Sampel Jumlah Tetesan Larutan Iodin

Minyak Hewani 25 tetes

Minyak Nabati (curah) 25 tetes

Minyak Nabati (komersial) 30 tetes

Aquades (control) 45 tetes

Table 5.3 Hasil Pengamatan Sifat Penyabunan Dari Dua Jenis Garam AsamLemak

Larutan uji Sabun Deterjen

CaCl2 0,5% ++ +++MgCl2 0,5% +++ +++

FeCl3 0,5% ++ ++

Minyak Nabati ++ +

Keterangan : + : sedikit gelembung

++ : agak banyak gelembung

+++ : banyak gelembung


68/94

62

PEMBAHASAN

Lemak adalah ester dari asam lemak dengan gliserol. Satu molekul

gliserol akan mengikat tiga molekul asam lemak. Lemak umumnya tidak larut

dalam air, tetapi dapat larut dalam pelarut non polar seperti kloroform, eter dan

benzena. Lemak dari tumbuhan dinamakan lemak nabati sedangkan lemak dari

hewan dinamakan lemak hewani. Lemak sangat penting bagi tubuh dan

mempunyai banyak peranan. Lemak atau lipid berfungsi sebagai sumber energi,

komponen strukturan membran, pelindung dan sebagai pra zat bahan penting

yang dibutuhkan tubuh. Lipid yang banyak di alam adalah lemak dan trigliserida.

Berdasarkan sifat kimianya lipid dikelompokkan menjadi dua yaitu, lipid yang

dapat disabunkan dan lipid yang tidak dapat disabunkan (Handito, 2015).

Praktikum kali ini membahas tentang pengujian lemak yang terdiri dari 3

jenis uji. Antara lain uji sifat kelarutan lemak, uji tingkat ketidakjenuhan lemak

dan uji sifat penyabunan lemak. Pada praktikum ini menggunakan beberapa

bahan utama yaitu minyak nabati komersial dan curah serta minyak hewani pada

uji sifat kelarutan lemak dan uji tingkat kejenuhan , sedangkan pada uji sifat

penyabunan menggunakan sabun dan deterjen 1%. Pada uji pertama yaitu uji

sifat kelarutan lemak yang berfungsi untuk mengetahui pengaruh jenis pelarut

terhadap sifat kelarutan lemak menggunakan lima jenis pelarut yang berbeda.

Pada minyak nabati komersial maupun curah larut pada larutan kloroform dan

benzena, karena kedua larutan tersebut bersifat non polar. Sedangkan pada

etanol NaOH 0,05 M dan HCl 0,05 M minyak nabati curah tidak larut diebabkan

larutan tersebut bersifat polar. Beda halnya dengan minyak nabati komesial,

larutan etanol, NaOH 0,05M dan HCl 0,05M larut bersama minyak karena


69/94

63

keduanya bersifat non polar. Sedangkan pada minyak hewani pada larutan

kloroform minyak tidak larut, pada larutan benzena hanya sedikit yang larut. Hal

ini disebabkan karena minyak hewani bersifat semi polar. Sedangkan pada

larutan etanol, NaOH 0,05M dan HC

Documents

Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf