Hovenia Dulcis Thunberg La­s

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  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Hovenia dulcis Thunberg

    As fores so hermaroditas, pequenas,

    branco-esverdeadas a creme e numerosas.

    Polinizao: Melitolia.

    !isperso: "ooc#rica.

    $abitat: !esenvolve-se tanto no interiorcomo em bordas de forestas na MataAtl%ntica.

    !istribuio &eo&r'ca: (hina, (or)ia e*apo.

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Para debatermos:

    +iblio&raa descreve eeitos inibit#rios no

    crescimento de c)lulas de hepatoma humano

    linha&em $ep/ e de adenocarcinoma de c#lon

    humano linha&em $01/ atrav)s do e2trato

    metan#lico de olhas3

    Material de campo 2 material in vitro: alelopatia e

    outros atores3

    0empo de incubao com o rea&ente 450-63

    7tilizao de leveduras.

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    Sugesto de outras metodologias

    M)todo M003

    M)todo 8973

    M)todo P03

    (itoto2icidade pelo m)todo de diuso em '&ar.

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    Mtodo MTT

    Avalia atividade mitocondrial pelo metabolismo de

    sais de tetrazolium.

    ()lulassemeadas em

    placas

    Adio docorante vital

    M00

    ;ncubaopor cerca de

    ?eitura emespectroot@metro

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    Mtodo MTT

    >s par%metros de avaliao so a porcenta&em de

    morte celular e a ;(= concentrao que inibe =B

    de crescimento celular/3

    !esvanta&em: tem o mesmo princCpio do 450-6,

    por)m com uma ase a mais, na adio de !M5>.

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Mtodo NRU

    D um corante vermelho solEvel em '&ua que mede a atividade de

    reteno do corante pelos lisossomos das c)lulas vi'veis pela

    intensidade de cor da cultura3

    (oncentra-se nos lisossomos, 2ando-se por li&aFes

    eletrost'ticas hidro#bicas na matriz lisossomal. 5ubst%ncias que

    danicam as membranas resultam no decr)scimo de captura e

    li&ao do corante3

    uanticao eita por espectrootometria atrav)s de leitor

    autom'tico de microplacas3

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    Mtodo NRU

    Atrav)s da curva do &r'co com os resultados pode-seencontrar o Cndice de citoto2icidade ;(=/ que si&nica aconcentrao do e2trato que induz =B de lise ou mortecelular e como consequGncia a inibio de incorporaodo vermelho neutro.

    ()lulassemeadasem placas

    Adio doe2trato deinteresse eincubao

    Adio docorante897 e

    incubao

    ?ava&emcom P+5

    ?ava&em comsoluo de 'cido

    ac)tico?eitura

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Mtodo MTT e NRU

    !esvanta&ens: par%metros dependentes de

    condiFes siol#&icas das c)lulas, podendo ser

    modicados por aspectos como densidade e

    secreo celular.

    Hanta&ens: estes m)todos so precisos, suIeitos a

    automao e com as c)lulas crescendo em

    condiFes similares, podem ser comparadas por

    esses m)todos.

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    M)todo P0

    Jste m)todo baseia-se na adsoro, eluio e mediode densidade #tica !.>./ do corante Azul +rilhante de(oomassie que cora as proteCnas3

    Mede a ta2a de crescimento celular atrav)s dadeterminao colorim)trica da quanticao deproteCnas totais contidas em cultura celular3

    Avaliao do eeito de uma determinada subst%nciasobre o crescimentoKprolierao celular, ou seIa, o &raude inibio do crescimento celular provocado pelasubst%ncia em questo ornece um indicativo de suato2icidade3

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    M)todo P0

    !esvanta&ens: quantica as c)lulas indiretamente, ou seIa,de orma relativa L quantidade de proteCnas totais e osresultados obtidos so dependentes do tipo celular utilizado.

    Hanta&ens: teste ) considerado r'pido, sensCvel,reprodutCvel, possui simplicidade de e2ecuo, custorelativamente bai2o, requer rea&entes com bai2ato2icidade, ) suIeito a automao, h' possibilidade de se

    estocar as placas para um processamento posterior,repetiFes do ensaio utilizando as mesmas microplacas, eno ) to dependente das modicaFes siol#&icascelulares como os ensaios de viabilidade atrav)s daavaliao do metabolismo celular.

    )

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    (itoto2icidade pelo m)todo de diusoem '&ar:

    Toxicidade: medio (quando houer! do halo com rguamilimtrica" # $resena de um halo claro ao redor do

    material testado demonstra que houe lise e morte celular%

    liberando o corante ermelho neutro incor$orado nas clulas"

    ()lulassemeadas

    em placas dePetri

    9etirada do meioe adio de

    soluo com '&ar

    Adio docorante897 e

    incubao

    An'lisemacrosc#picapresena de

    halo/

    An'lisemicrosc#picainte&ridade

    celular/

    )

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    (itoto2icidade pelo m)todo de diusoem '&ar:

    &antagem: uma tcnica qualitatia que $ode ser utili'ada

    $ara materiais de dierentes constitui)es *sicas% inclusie

    $ara materiais oleosos como os cosmticos% deido sua

    $raticidade e coneni+ncia"

    !esvanta&em: a medio com re&ra milim)trica )trabalhosa e subIetiva, a subst%ncia que se deseIa

    testar tem que se diundir pelo '&ar, enquanto na

    microplaca o contato ) direto.

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Reer+ncias

    Ao anti-infamat#ria e citoto2icidade sobre c)lulas Cnte&ras e tumorais daapi&enina e 00-arnesolN O 0ese de p#s-&raduao em 5aEde e !esenvolvimento deJdilson *os) "aalon O 7M5 =6/3

    Avaliao da citoto2icidade induzida por produtos cosm)ticos pelo m)todo dequanticao de proteCnas totais em c)lulas

  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    Reer+ncias

    RPA!9>8;"A[\> !> M00 (>M> 7M 0J50J !J H;A+;?;!A!J (J?7?A9 JM9AMJ80>5 (>90;(A;5 !J 9;85 !J 9A0>5R - ?issa AYari 0utida, ?uCs Alberto+atista Peres, Maria JmClia avero, Hinicius !aher Alvares !elno - (entro de(iGncias da 5aEde, 7niversidade Jstadual de ?ondrina K 7J?/3

    R5tandardization o M00-AssaS in a (old Preservation Model as a 0ool orAssessment o ]idneS (ell HiabilitSR - ?uis Alberto +atista Peres6, Hinicius!aher Alvares !elno, Altair *acob Mocelin, ?issa AYari 0utida, Maria JmCliaavero, 0iemi Matsuo - 7niversidade Jstadual do >este do Paran' K78;>J50J/3

    R0este in vitro de citoto2icidade: estudo comparativo entre duas metodolo&iasR- 5izue >ta 9o&ero3 Ademar +en)volo ?u&o3 0amiYo ;chiYaTa ;Yeda3 ^urea

    5ilveira (ruz - ;nstituto de Pesquisas Jner&)ticas e 8ucleares - ;PJ8K(8J8-5P3 5ite da Anvisa: http:KKTTT.anvisa.&ov.brKcosmeticosK&uiaKhtmlKpa&=.html 3

    http://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.html
  • 7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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    ,-NT.NU#R"""

    -s $ar/metros de aaliao obserados so a $orcentagem de morte celular e a .,01

    Teste de ototoxicidade: # base deste teste a com$arao da citotoxicidade de umagente qu*mico testado com ou sem ex$osio adicional a doses no t2xicas de lu'

    U" # citotoxicidade ex$ressa na determinao da dose de$endente que redu' ocrescimento celular utili'ando3se um corante ital% ermelho neutro"

    # concentrao de um agente qu*mico testado relete a inibio da iabilidade celularem 014% calculada usando3se um modelo adequado de cura que ex$ressa a res$ostada cura de concentrao"

    #tras desta cura $ode3se encontrar o *ndice de citotoxicidade (.,014! que signiicaa concentrao do extrato que indu' 014 de lise ou morte celular e comoconseq5+ncia a inibio de incor$orao do ermelho neutro"