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7/24/2019 Hovenia Dulcis Thunberg Las

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Hovenia dulcis Thunberg

As fores so hermaroditas, pequenas,

branco-esverdeadas a creme e numerosas.

Polinizao: Melitolia.

!isperso: "ooc#rica.

$abitat: !esenvolve-se tanto no interiorcomo em bordas de forestas na MataAtl%ntica.

!istribuio &eo&r'ca: (hina, (or)ia e*apo.


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Para debatermos:

+iblio&raa descreve eeitos inibit#rios no

crescimento de c)lulas de hepatoma humano

linha&em $ep/ e de adenocarcinoma de c#lon

humano linha&em $01/ atrav)s do e2trato

metan#lico de olhas3

Material de campo 2 material in vitro: alelopatia e

outros atores3

0empo de incubao com o rea&ente 450-63

7tilizao de leveduras.


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Sugesto de outras metodologias

M)todo M003

M)todo 8973

M)todo P03

(itoto2icidade pelo m)todo de diuso em '&ar.


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Mtodo MTT

Avalia atividade mitocondrial pelo metabolismo de

sais de tetrazolium.

()lulassemeadas em

placas

Adio docorante vital

M00

;ncubaopor cerca de

?eitura [email protected]


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Mtodo MTT

>s par%metros de avaliao so a porcenta&em de

morte celular e a ;(= concentrao que inibe =B

de crescimento celular/3

!esvanta&em: tem o mesmo princCpio do 450-6,

por)m com uma ase a mais, na adio de !M5>.


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Mtodo NRU

D um corante vermelho solEvel em '&ua que mede a atividade de

reteno do corante pelos lisossomos das c)lulas vi'veis pela

intensidade de cor da cultura3

(oncentra-se nos lisossomos, 2ando-se por li&aFes

eletrost'ticas hidro#bicas na matriz lisossomal. 5ubst%ncias que

danicam as membranas resultam no decr)scimo de captura e

li&ao do corante3

uanticao eita por espectrootometria atrav)s de leitor

autom'tico de microplacas3


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Mtodo NRU

Atrav)s da curva do &r'co com os resultados pode-seencontrar o Cndice de citoto2icidade ;(=/ que si&nica aconcentrao do e2trato que induz =B de lise ou mortecelular e como consequGncia a inibio de incorporaodo vermelho neutro.

()lulassemeadasem placas

Adio doe2trato deinteresse eincubao

Adio docorante897 e

incubao

?ava&emcom P+5

?ava&em comsoluo de 'cido

ac)tico?eitura


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Mtodo MTT e NRU

!esvanta&ens: par%metros dependentes de

condiFes siol#&icas das c)lulas, podendo ser

modicados por aspectos como densidade e

secreo celular.

Hanta&ens: estes m)todos so precisos, suIeitos a

automao e com as c)lulas crescendo em

condiFes similares, podem ser comparadas por

esses m)todos.


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M)todo P0

Jste m)todo baseia-se na adsoro, eluio e mediode densidade #tica !.>./ do corante Azul +rilhante de(oomassie que cora as proteCnas3

Mede a ta2a de crescimento celular atrav)s dadeterminao colorim)trica da quanticao deproteCnas totais contidas em cultura celular3

Avaliao do eeito de uma determinada subst%nciasobre o crescimentoKprolierao celular, ou seIa, o &raude inibio do crescimento celular provocado pelasubst%ncia em questo ornece um indicativo de suato2icidade3


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M)todo P0

!esvanta&ens: quantica as c)lulas indiretamente, ou seIa,de orma relativa L quantidade de proteCnas totais e osresultados obtidos so dependentes do tipo celular utilizado.

Hanta&ens: teste ) considerado r'pido, sensCvel,reprodutCvel, possui simplicidade de e2ecuo, custorelativamente bai2o, requer rea&entes com bai2ato2icidade, ) suIeito a automao, h' possibilidade de se

estocar as placas para um processamento posterior,repetiFes do ensaio utilizando as mesmas microplacas, eno ) to dependente das modicaFes siol#&icascelulares como os ensaios de viabilidade atrav)s daavaliao do metabolismo celular.

)


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(itoto2icidade pelo m)todo de diusoem '&ar:

Toxicidade: medio (quando houer! do halo com rguamilimtrica" # $resena de um halo claro ao redor do

material testado demonstra que houe lise e morte celular%

liberando o corante ermelho neutro incor$orado nas clulas"

()lulassemeadas

em placas dePetri

9etirada do meioe adio de

soluo com '&ar

Adio docorante897 e

incubao

An'lisemacrosc#picapresena de

halo/

An'lisemicrosc#picainte&ridade

celular/

)


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(itoto2icidade pelo m)todo de diusoem '&ar:

&antagem: uma tcnica qualitatia que $ode ser utili'ada

$ara materiais de dierentes constitui)es *sicas% inclusie

$ara materiais oleosos como os cosmticos% deido sua

$raticidade e coneni+ncia"

!esvanta&em: a medio com re&ra milim)trica )trabalhosa e subIetiva, a subst%ncia que se deseIa

testar tem que se diundir pelo '&ar, enquanto na

microplaca o contato ) direto.


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Reer+ncias

Ao anti-infamat#ria e citoto2icidade sobre c)lulas Cnte&ras e tumorais daapi&enina e 00-arnesolN O 0ese de p#s-&raduao em 5aEde e !esenvolvimento deJdilson *os) "aalon O 7M5 =6/3

Avaliao da citoto2icidade induzida por produtos cosm)ticos pelo m)todo dequanticao de proteCnas totais em c)lulas


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Reer+ncias

RPA!9>8;"A[\> !> M00 (>M> 7M 0J50J !J H;A+;?;!A!J (J?7?A9 JM9AMJ80>5 (>90;(A;5 !J 9;85 !J 9A0>5R - ?issa AYari 0utida, ?uCs Alberto+atista Peres, Maria JmClia avero, Hinicius !aher Alvares !elno - (entro de(iGncias da 5aEde, 7niversidade Jstadual de ?ondrina K 7J?/3

R5tandardization o M00-AssaS in a (old Preservation Model as a 0ool orAssessment o ]idneS (ell HiabilitSR - ?uis Alberto +atista Peres6, Hinicius!aher Alvares !elno, Altair *acob Mocelin, ?issa AYari 0utida, Maria JmCliaavero, 0iemi Matsuo - 7niversidade Jstadual do >este do Paran' K78;>J50J/3

R0este in vitro de citoto2icidade: estudo comparativo entre duas metodolo&iasR- 5izue >ta 9o&ero3 Ademar +en)volo ?u&o3 0amiYo ;chiYaTa ;Yeda3 ^urea

5ilveira (ruz - ;nstituto de Pesquisas Jner&)ticas e 8ucleares - ;PJ8K(8J8-5P3 5ite da Anvisa: http:KKTTT.anvisa.&ov.brKcosmeticosK&uiaKhtmlKpa&=.html 3
http://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.htmlhttp://www.anvisa.gov.br/cosmeticos/guia/html/pag05.html


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,-NT.NU#R"""

-s $ar/metros de aaliao obserados so a $orcentagem de morte celular e a .,01

Teste de ototoxicidade: # base deste teste a com$arao da citotoxicidade de umagente qu*mico testado com ou sem ex$osio adicional a doses no t2xicas de lu'

U" # citotoxicidade ex$ressa na determinao da dose de$endente que redu' ocrescimento celular utili'ando3se um corante ital% ermelho neutro"

# concentrao de um agente qu*mico testado relete a inibio da iabilidade celularem 014% calculada usando3se um modelo adequado de cura que ex$ressa a res$ostada cura de concentrao"

#tras desta cura $ode3se encontrar o *ndice de citotoxicidade (.,014! que signiicaa concentrao do extrato que indu' 014 de lise ou morte celular e comoconseq5+ncia a inibio de incor$orao do ermelho neutro"