U N I DA D I I M I C R O B I O LO G Í A

TINCIONES DE LOS HONGOS

INTRODUCCIÓN

El examen microscópico es de gran importancia en micologíapara la observación de las diferentes especiesde hongos de interés clínico. Se deben utilizar tincionesque logren preservar la integridad de las estructurasfúngicas.18 Para la correcta identificación de hongosde interés clínico, ya sea con fines de diagnósticoo estudios taxonómicos, es necesario observar lasestructuras fúngicas con una alta calidad y contraste;para ello se utilizan diversos compuestos químicos quepermitan la tinción entre la pared y el citoplasma delas células fúngicas

HONGOS

• Son heterótrofos (quimioorganòtrofos) se alimentan de materia de materia orgánica.

• Son eucariotas, presentan núcleo diferenciado con membrana bien organizada.

• Presentan una pared celular formada por polisacáridos, polipéptidos y quitina.• Unicelulares y pluricelulares.• La estructura fúngica (pluricelular) consta de un complejo llamado talo o

micelio, que a su vez está constituida por múltiples filamentos o hifas.

TINCIONES SIMPLES

SAFRANINA: • Útil para el estudio de cultivos y productos biológicos

líquidos.• Los elementos fúngicos se tiñen de color rojo intenso, y el

resto del campo toma un tono incoloro o rosa pálido.

TINCIÓN DE AZUL ALGODÓN DE LACTOFENOL

• NO es considerada una tinción diferencial, sin embargo, posee características tintoriales que permiten observar cada uno de los componentes fúngicos y apreciar fácilmente las estructuras para una adecuada identificación.

• El fenol destruye la flora acompañante.• El ácido láctico conserva las estructuras fúngicas al provocar un

cambio de gradiente osmótico con relación al interior del fúngico generando una película por así llamarlo protectora.

• Es útil para realizar el examen directo de cultivos, ya que es una técnica rápida que permite visualizar perfectamente las estructuras fúngicas.

• El colorante es fuertemente ácido y se usa para la tinción directa del micelio micólico, el cual toma un delicado color azul claro.

TINCIÓN DE AZUL ALGODÓN DE LACTOFENOL

Preparación de la impronta • Colocar el material necesario en la

campana de seguridad tipo 2A. • Seleccionar las colonias para realizar

las improntas.• Cortar segmentos de cinta adhesiva

transparente aproximadamente de 1 cm.

• Pegar los segmentos de cinta en un asa micológica.

• Poner una gota de azul de algodón en el portaobjetos.

• Con el lado adhesivo de la cinta, tocar la parte superior de hongo.

• Colocar la cinta sobre la gota de azul de algodón y poner otra gota de azul de algodón.

• Poner un cubreobjetos sobre la preparación.

• Observar en 40x.

ANARANJADO DE ACRIDINA

• Se utiliza para la detección de bacterias y hongos en muestras clínicas.

FUNDAMENTO:El pigmento se intercala con el àcido nucleico (nativo y desnaturalizado). Con pH neutro las bacterias, hongos y material celular se tiñen de naranja rojizo. Con pH ácido las bacterias se mantienen de color naranja rojizo, pero el material de fondo se tiñe de amarillo verdoso.

ANARANJADO DE ACRIDINA

TINCIONES DIFERENCIALES

Son técnicas que utilizan dos o mas colorantes y/o principios activos.• Tinción de Gram• Tinción Ziehl-Neelsen • Tinción de Schiff