ORTHOMIXOVIRUSURI-V. GRIPALE A, B, C

GRIPA • FEBRA

• ASTENIE

• CEFALEE

• MIALGII

• TUSE NEPRODUCTIVA

• FARINGITA

• SEMNE OCULARE

• RINITA Diagnostic virusologic obligatoriu cu identificarea subtipului viral (hemaglutinoinhibare)!

OMS- infectii gripale-anual pe glob:

5-15% din totalul populatiei

3-5 milioane cazuri de infectii severe,

250.000 - 500.000 decese

tip A, B, C : NP, M

subtipuri: HA si NA –16 tipuri HA si 9 NA

tip/subtip/ loc, an izolare/nr. pasaje- A/H5N1/Guangdong/1996/1

ARNss(-) segmentat -8minigene+ transcriptaza

ORTHOMYXOVIRIDAE

HEMAGLUTININA Virusul gripal tip A Receptorul

Uman SA-2-6-beta Gal

Aviar; ecvin SA-2-3-beta Gal

Suin SA-2-3- beta Gal si

SA-2-6-beta Gal

REASORTANTI

determinanti antigenici implicati in virus neutralizare- evidentierea

izolarii virale- hemaglutinare/ hemadsorbtie si identificarea subtipului

viral- hemaglutinoinhibare cu antiseruri specifice

hemadsorbtie hemaglutinare

hemaglutinoinhibare

Proteaze celulare - clivarea HA si activarea infectivitãtii -schimbari conformationale -

expunere peptid N-terminal HA2

Decapsidare- Proteina virala M- rol de canal ionic

INHIBITORII DECAPSIDARII- AMANTADINA SI RIMANTADINA blocarea canalul ionic al proteinei virale M2, reducerea efectul acesteia asupra

decapsidãrii si modificãrii pH-ului din celulele infectate

endocitoza mediata de

receptor– complex

ribonucleoproteic

transportat in nucleu

complex ribonucleoproteic

transportat in nucleu

INHIBITORII DE NEURAMINIDAZA -analogi de acid N-acetil neuraminic

(receptorul pentru virusurile gripale), blocheazã situl activ al neuraminidazei

OSELTAMIVIR (Tamiflu) –administrat pr os, 75 mg x 2/zi

ZANAMIVIR(Relenza) -10 mg (2 inhalatii de 5 mg/zi)

Neuraminidaza- faciliteaza eliberarea virionilor progeni si previne agregarea acestora

la nivelul membranei celulare, favorizeaza diseminarea infectiei

DRIFT (alunecare) ANTIGENIC- mutatii punctiforme la nivelul genelor pt HA si NA- EPIDEMII

V. GRIPALE A: VARIABILITATE

VARIABILITATEA VIRUSURILOR GRIPALE tip A • SHIFT ANTIGENIC (comutare)-aparitia unor noi subtipuri virale- PANDEMII

1. reasortarea genicã între tulpini gripale de la specii diferite

2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificãri conformationale in

structura hemaglutininei pentru traversarea barierei de specie:

Toate virusurile gripale umane au singur reziduu bazic de argininã la nivelul sitului de clivare a hemaglutininei. Achizitia unor aminoacizi bazici suplimentari (situri de clivare multiple) - permite si altor proteaze sã cliveze hemaglutinina - alterarea tropismului tisular (afectarea tesutului cerebral, miocardic si vaselor de sânge) si cresterea virulentei

3.re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

Pãsãri acvatice sãlbatice

(rate, gâste, pescãrusi)-

rezervorul natural al

virusurilor gripale A

La pãsãrile domestice gripa poate evolua în douã forme:

-minorã (LPAI) sau asimptomaticã, - afecteazã productia ouã in crescãtorii

- majora (HPAI), înalt contagioasã, mortalitate 50-100% (aa bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

SHIFT ANTIGENIC reasortarea genicã între tulpini

gripale de la specii diferite

Epiteliul traheal al suinelor are ambele tipuri de receptori SA-2,3Gal beta si SA-2,6Gal

beta

Porcii sunt infectati in vivo si in vitro cu virusuri aviare

Replicarea continua a unui virus aviar la suine duce la selectia unor tulpini ce recunosc

preferential receptorii umani

Reasortanti virusuri suine si aviare pot infecta omul si determina infectii severe

Transferul interspecii si reasortarea - stabilirea a 2 noi linii de tulpini suine din 1979

Influenza A H1N1/2009 –

6 Minigene de la tulpinile

porcine Nord America

(reasortant 1998

suin/aviar/uman) si

2 de la tulpinile porcine izolate

in Europa/Asia

Aceste tulpini au coexistat

pentru mai mult de 10 ani -

Reasortarea actuala

probabil la porc- gazda

ramane totusi necunoscuta

(supraveghere insuficienta;

infectie asimptomatica la

porc, reasortare recenta?)

A/H1N1/ 2009 pandemic

414,000 cazuri confirmate de

laborator

cca 5000 decese raportate OMS

Pandemii gripale

1918-H1N1 “gripa spaniola” -20-50 milioane decese Virus aviar

1957- H2N2 “gripa asiatica”-1-2 milioane decese reasortant

1968- H3N2 “gripa Hong Kong ”-700,000 decese- reasortant

1977- H1N1 “gripa ruseasca”-re-emergenta

SHIFT ANTIGENIC –V GRIPALE A • transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om

Pãsãri acvatice sãlbatice

(rate, gâste, pescãrusi)-

rezervorul natural al

virusurilor gripale A

La pãsãrile domestice gripa poate evolua în douã forme:

-minorã (LPAI) sau asimptomaticã, - afecteazã productia ouã in crescãtorii

- majora (HPAI), foarte severã, înalt contagioasã, cu mortalitate 50-100%

(aminoacizi bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

SHIFT ANTIGENIC-

Pandemii gripale

1918-H1N1 “gripa spaniola” -20-50 milioane decese Virus aviar

1957- H2N2 “gripa asiatica”-1-2 milioane decese reasortant

1968- H3N2 “gripa Hong Kong ”-700,000 decese- reasortant

1977- H1N1 “gripa ruseasca”-re-emergenta

Conditii necesare izbucnirii unor pandemii

• noutatea antigenica a virusului

• lipsa imunitãtii în populatia umanã

• facilitatea transmiterii interumane a noilor tulpini.

1. reasortarea genicã între tulpini gripale de la specii diferite

2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificãri

conformationale in structura hemaglutininei.

3. Re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

• VACCIN INACTIVAT CU VIRUS INTREG SAU SUBUNITAR -HA(1931-izolare in OGE, 1940- vaccin inactivat)

- Virus izolat in OGE- lichid alantoidian imbogatit, particule virale centrifugate in gradient de densitate pentru concentrare si purificare- inactivare cu formaldehida sau ß-propiolactona +/_ tratare cu detergent si purificare HA si NA- vaccin trivalent (3 subtipuri circulante prevalente)

- Petrescu si colab., 1980 - NIVGRIP- administrarea intranazalã a vaccinului inactivat preparat cu virusul întreg –prioritate româneascã.

• VACCIN VIU ATENUAT CU TULPINI “RECI”

-Tulpina master atenuata, adaptata pentru crestere la 250 C (A /H2N2 /Ann Arbor/6/60 si B/Ann Arbor/1/66) in care se insera genele pentru HA/NA-mutatii stabile in genele complexului polimerazic PA, PB1, and PB2, propagate în pasaje seriate la temperaturi din ce în ce mai scãzute pe celule renale de pui de gãinã SPF (specific pathogen free)

Fiecare dozã de vaccin contine

hemaglutinina corespunzãtoare a 10

miliarde de virioni în cazul cultivãrii

virusului pe OGE (15 ug per 0.5 ml) .

Cantitatea de neuraminidazã nu este

standardizatã -proteinã labilã în cursul

procesului de preparare si stocare a

vaccinului.

VACCINURI ANTIGRIPALE

PB2 PB1 PA

HA NA NP

M NS

PB2 PB1 PA

HA NA NP

M NS

PB2 PB1 PA

HA NA NP

M NS

TULPINA MATCA –

PR8 (H1N1 A/PR/8/34) –

atenuata, nonpatogena,

incapabila de replicare la om

TULPINA NOUA

ANTIGENIC

X

REASORTANT virus cu 6 gene PR8, dar HA

si NA tulpinii circulante

VACCINURI ANTIGRIPALE

REACTUALIZATE ANUAL

Criteriu Vaccinuri vii Vaccinuri inactivate

Cale de administrare Intra-nazal, bucal Intra-muscular

Vârsta recomandatã 5-49 ani Peste 6 luni

Replicarea virusului la vaccinati Da Nu

Imunizarea contactilor Da Nu

Risc aparitie recombinanti Da Nu

Administrarea altor vaccinuri simultan* Da Da

Administrare la imunosupresati** Nu Da

Persoane cu risc înalt de complicatii

copii < 2 ani (rate de spitalizare de 2.3 ori > ca cei 2- 4 ani, complicatii mai frecvente)

adulti > 65 ani

femeile gravide în trimestrele II si III de sarcinã, 2 saptamani postpartum, inclusiv

dupa pierdere sarcina

pacienti institutionalizati

adulti si copii cu boli cardiace (cu exceptia HTA) si pulmonare cronice (inclusiv astm),

boli metabolice (inclusiv diabet zaharat), disfunctii hepatice, renale, hematologice

imunosupresie (inclusiv cei HIV pozitivi)

Obezitate (BMI 30-35), mai ales obezitate morbida (BMI )>40- virusul A/H1N1 2009

Persoane care pot transmite infectia gripalã celor cu risc de complicatii

personalul medico-sanitar

angajatii institutiilor psihiatrice si cei ce îngrijesc bolnavi cronici

membrii familiilor persoanelor la risc

Persoane la care vaccinarea poate fi recomandatã

persoane care cãlãtoresc în zone cu epidemii de gripã

persoane implicate în servicii comunitare esentiale

copiii din gradinite si scoli, studentii, militarii

GRUPE DE RISC pentru care se recomanda vaccinare anuala

Vaccin impotriva H5N1 (virus aviar ce a fost transmis la om, doar prin contact direct cu pasarie

bolnave, fara cazuri secundare interumane) - reasortant H5N1/PR8- in plasmide cu cDNA pentru

6 gene din tulpina de referinta H1N1 se insera cDNA al genelor HA, NA din izolate din Asia, dupa

deletie sit de clivare polibazic pentru generare tulpina nonvirulenta

GENETICA INVERSA

UP TO DATE

• http://ec.europa.eu/health/ph_threats/com/Influenza/h1n1_en.htm

• http://ec.europa.eu/health-eu/newsletter/influenza/m

• http://www.emea.europa.eu/influenza/vaccines/home.htm

• http://www.euro.who.int/surveillance

• http:// www.cdc.gov/flu/weekly

• http://www.ecdc.eu.int/

• http://www.oie.int Organizatia Mondiala Pentru Sanatatea Animala

• www.who.int/csr/disease/avian-influenza

• http://www.efsa.eu.int/science/- The European Food Safety Authority

• http://europa.eu.int/comm/food/animal/diseases/controlmeasures/avian/avain_influenza_22092005.pdf

• Taubenberger et al in Nature ( VOL. 437 October 6th 2005 ) http://www.nature.com/news/2005/051003/full/437794a.html http://www.nature.com/news/2005/051003/full/nature04230.html

• Tumpey et al in Science (2005; 310: 77-80).