14
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user UJ (He FA JI SITOT edyotis co P AKULTAS TOKSIK orymbosa AYUDA S MATEM UNIV K ISOLAT a (L.) Lam ARA T47D Ast M S Juru MATIKA D VERSITAS SUR T 1 DAN mk.) TE D DAN S Oleh: tri Ariyani M0407025 SKRIPSI usan Biologi DAN ILM S SEBELA RAKARTA 2011 N 2 RUMP RHADA SERVIKS i MU PENGE AS MARE A PUT MU AP SEL K S HeLa ETAHUAN ET UTIARA KANKER N ALAM R

UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

UJ

(He

FA

JI SITOT

edyotis co

P

AKULTAS

TOKSIK

orymbosa

AYUDA

S MATEM

UNIV

K ISOLAT

a (L.) Lam

ARA T47D

AstM

S

Juru

MATIKA D

VERSITAS

SUR

T 1 DAN

mk.) TE

D DAN S

Oleh:

tri AriyaniM0407025

SKRIPSI

usan Biologi

DAN ILM

S SEBELA

RAKARTA

2011

N 2 RUMP

RHADA

SERVIKS

i

MU PENGE

AS MARE

A

PUT MU

AP SEL K

S HeLa

ETAHUAN

ET

UTIARA

KANKER

N ALAM

R

Page 2: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

Page 3: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

Page 4: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vii

MOTTO

Don’t give up (Jangan Menyerah) untuk sesuatu yang dipertaruhkan, karena kesimpulannya hanya ada dua, menang atau kalah.

Akhir dari perjalanan adalah bahagia. Jika tidak atau belum, maka itu bukan akhir dari perjalanan.

Innallaha ma'ashobirin (Sesungguhnya Allah itu amat dekat dengan orang yang sabar).

Page 5: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

viii

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan untuk:

Allah swt. Tuhan saya yang paling hebat. Sahabat sejati kehidupan.

Kedua orang tua saya, Ibu, Bapak yang selalu mendukung baik dalam

keadaaan susah maupun senang.

Mbah uti dan Mbah kung, beliau yang mau menerima saya apa

adanya, tidak ada keluh kesah yang terucap. Beribu kasih dan sayang

untukmu.

Teman-teman Biologi 2007 yang dari awal menemani saya, “second

family” saya di Solo, special untuk temen-temen LEBAY, mami

Hanum (yang bisa mengerti dan selalu member saran terbaik untukku),

Euis (pengalaman luar biasa dari awal kuliah sampe saat ini, big kiss),

Icha (my partner dan semua keajaibannya), Dea (4 Januari), and

also my girl (INTAN).

My vitamin thanks for everything.

Page 6: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ix

KATA PENGANTAR

Pertama-tama penulis memanjatkan puji syukur ke hadirat Allah swt.

yang senantiasa melimpahkan rahmat dan anugerahNya sehingga penulis dapat

menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi dengan judul : “Uji Sitotoksik

Isolat 1 dan 2 Rumput Mutiara (Hedyotis corymbosa (L.) Lamk.) Terhadap

Sel Kanker Payudara T47D Dan Serviks HeLa”. Penyusunan skripsi ini

merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar kesarjanaan strata 1 (S1) di

Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas

Sebelas Maret, Surakarta.

Selama melakukan penelitian dan penyusunan skripsi, penulis telah

mendapatkan banyak masukan dan dukungan dari berbagai pihak yang sangat

membantu dan bermanfaat dalam penyelesaian skripsi ini. Oleh karena itu, pada

kesempatan yang berbahagia ini penulis ingin mengucapkan terima kasih yang

sebesar-besarnya kepada :

Ir. Ari Handono Ramelan M.Sc., Ph.D., selaku Dekan Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta

yang telah memberikan dukungan dan dorongan.

Dr. Agung Budiharjo, M.Si., selaku Ketua Jurusan Biologi, Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta

yang telah memberikan izin dan dukungannya selama penelitian.

Rita Rakhmawati, M.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing I yang telah

memberikan saran dan bimbingannya dari awal penelitian hingga terselesaikannya

penyusunan skripsi ini.

Widya Mudyantini, M.Si., selaku Dosen Pembimbing II yang telah

memberikan proyek penelitian, saran dan bimbingan dari awal hingga

terselesaikannya penyusunan skripsi ini.

Prof. Dr. Okid Parama Astirin, M.S., selaku Dosen Penelaah I yang telah

memberikan bimbingan serta dukungan hingga terselesaikannya penyusunan

skripsi ini.

Page 7: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

x

Estu Retnaningtyas N., STP., M.Si, selaku Dosen Penelaah II yang telah

memberikan saran dan dukungan hingga terselesaikannya penyusunan skripsi ini.

Dr. Sunarto, M.S., selaku Pembimbing Akademik beserta dosen-dosen di

Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas

Sebelas Maret, Surakarta yang telah mendidik dan memberikan dorongan

sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.

Tri Yuliati, SKM selaku Pembimbing penelitian di LPPT, Universitas

Gadjah Mada Yogyakarta yang telah memberikan izin penelitian beserta sarana,

prasarana dan bantuan selama penelitian.

Nuri Aprillia Ramadhona dan Anisa Amalia yang telah membantu

selama penelitian dan memberikan motivasi. Semua pihak yang telah membantu

dalam penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu persatu.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam melakukan penelitian

hingga penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu masukan

yang berupa saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan.

Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua dan pihak-pihak yang

berkepentingan.

Surakarta, Juli 2011

Penyusun

Page 8: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING......................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN.................................................................... iii

HALAMAN PERNYATAAN ................................................................... iv

ABSTRAK................................................................................................... v

ABSTRACT................................................................................................. vi

HALAMAN MOTTO.................................................................................. vii

HALAMAN PERSEMBAHAN.................................................................. viii

KATA PENGANTAR................................................................................. ix

DAFTAR ISI................................................................................................ xi

DAFTAR TABEL........................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN................................................................................ xvi

DAFTAR SINGKATAN............................................................................. xviii

BAB I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang ............................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ....................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ........................................................................ 4

BAB II. LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka …....................................................................... 5

1. Rumput Mutiara (Hedyotis corymbosa (L.) Lamk.) …...….... 5

2. Kanker ..................................................................................... 10

3. Kanker Payudara ..................................................................... 16

4. Sel T47D ................................................................................. 17

5. Gen p53.................................................................................... 18

6. Kanker Serviks ........................................................................ 19

7. Sel HeLa .................................................................................. 21

Page 9: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xii

xii

8. Apoptosis ................................................................................. 22

9. Siklus Sel ................................................................................. 24

10. Sitotoksik ................................................................................. 26

B. Kerangka Pemikiran ...................................................................... 27

BAB III. METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 30

B. Alat dan Bahan ............................................................................. 30

C. Cara Kerja ..................................................................................... 31

D. Analisis Data ................................................................................. 33

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Uji Sitotoksik ................................................................................ 35

B. Sel HeLa ....................................................................................... 38

C. Proses terjadinya kanker serviks oleh sel HeLa............................. 44

D. Sel T47D ....................................................................................... 44

E. Proses terjadinya kanker payudara oleh T47D............................... 46

F. Dugaan mekanisme penghambata sel oleh isolat

rumput mutiara .............................................................................. 47

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan ................................................................................... 51

B. Saran ............................................................................................. 51

DAFTAR PUSTAKA.................................................................................. 52

LAMPIRAN................................................................................................. 59

RIWAYAT HIDUP..................................................................................... 79

Page 10: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Kanker merupakan penyebab kematian yang sering terjadi. Di Indonesia,

penyakit ini menduduki peringkat kelima penyebab kematian, bahkan di negara-

negara maju, kanker merupakan salah satu penyakit penyebab kematian yang

menduduki peringkat nomor dua (Anonim, 2008). Penyakit kanker yang sering

ditemui terutama pada wanita adalah kanker payudara dan kanker serviks. Sel

kanker penyebab terjadinya kanker serviks dan payudara yang sering ditemui

adalah sel HeLa dan T47D.

Berbagai pengobatan yang dilakukan untuk mengobati penyakit kanker

yang diakibatkan oleh sel HeLa dan T47D telah banyak dilakukan tetapi

pengobatan kanker yang efektif dan efisien hingga saat ini belum ditemukan

(Sugiyanto et al., 2003). Berbagai upaya penyembuhan telah dilakukan untuk

melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi.

Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut masih memiliki kelemahan

(Hoffman, 1999). Salah satu contoh pengobatan yang sering dilakukan adalah

penggunaan kemoterapi antikanker. Pengobatan ini belum dapat memberikan

hasil yang optimal karena bekerja tidak spesifik pada sel sehingga dapat merusak

sel-sel normal. Selain itu, pengobatan seperti pembedahan atau pengangkatan

kanker pada umumnya tidak efektif lagi. Pengobatan ini hanya berlaku untuk sel

kanker yang belum mengalami metastasis sedangkan penyinaran, sering kali tidak

selektif dan tidak aman untuk sel-sel normal (Supardjan dan Meiyanto, 2002).

Page 11: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

2

Berdasarkan pernyataan diatas, perlu dilakukan pencarian alternatif

pengobatan untuk mengobati penyakit kanker. Salah satu upaya adalah pencarian

bahan obat yang berasal dari bahan alam. Indonesia sangat berpotensi dalam

penemuan senyawa baru yang berkhasiat karena keanekaragaman hayatinya yang

melimpah. Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai antikanker adalah rumput

mutiara (Hedyotis corymbosa L.). Berdasarkan penelitian Hsu (1998), senyawa

ursolic acid dan oleanic acid pada H. corymbosa memiliki aktivitas

penghambatan terhadap pertumbuhan sel hep-2B dan pembesaran tumor

subcutan, sehingga tumbuhan ini berpotensi sebagai obat kanker. Selain itu,

senyawa ursolic acid mempunyai efek antiproliferatif dan antivirus terhadap sel

kanker serviks (Yim et al., 2006). Dari manfaat tersebut, maka pada penelitian ini

digunakan daun rumput mutiara untuk mengobati penyakit kanker yang

disebabkan oleh sel HeLa dan T47D.

Pada penelitian ini digunakan isolat 1 dan 2 daun rumput mutiara. Isolat

ini didapatkan dari penelitian yang dilakukan oleh Murdiyono (2008) yang berasal

dari fraksi IV hasil fraksinasi bagian fraksi larut etil asetat ekstrak kloroform daun

rumput mutiara. Dari fraksi tersebut dipartisi lebih lanjut oleh Ruwaida (2010)

dan hasilnya didapatkan 6 isolat. Dua isolat teraktif yaitu isolat 4 dan 5 telah

dilakukan uji toksisitas dan sitotoksiknya Ernawati (2010), tetapi keempat isolat

lainnya belum dilakukan pengujian secara lanjut. Pemilihan isolat 1 dan 2 pada

penelitian ini didasari oleh pengujian BST yang dilakukan oleh Ruwaida (2010).

Hasil BST menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 daun rumput mutiara, dapat

membunuh Artemia salina sebesar 58% dan 52%. Menurut Meyer et al., (1982),

Page 12: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

3

senyawa uji dikatakan toksik terhadap sel kanker jika nilai LC50 kurang dari 1000

µg/mL sehingga dapat diperkirakan bahwa nilai IC50-24 jam yang akan didapat dari

isolat 1 dan 2 terhadap sel kanker adalah kurang dari 100 µg/mL. Hal ini

menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 rumput mutiara memiliki sifat toksik dan

berpotensi sebagai antikanker.

B. Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dibuat rumusan masalah sebagai

berikut :

1. Apakah isolat 1 dan 2 rumput mutiara (H. corymbosa (L.) Lamk) memiliki efek

sitotoksik terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa ?

2. Berapakah nilai IC50 dari isolat 1 dan 2 rumput mutiara terhadap sel kanker

payudara T47D dan serviks HeLa.

C. Tujuan Penelitian

Berdasarkan permasalahan di atas, penelitian ini bertujuan untuk:

1. Mengetahui efek sitotoksik isolat 1 dan 2 rumput mutiara (H. corymbosa (L.)

Lamk) terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa.

2. Menentukan nilai IC50 dari isolat 1 dan 2 rumput mutiara terhadap sel kanker

payudara T47D dan serviks HeLa.

Page 13: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

4

D. Manfaat Penelitian

Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah :

1. Penelitian diharapkan dapat menjadi bahan informasi ilmiah, tentang efek

sitotoksik isolat rumput mutiara (H. corymbosa (L.) Lamk) sebagai sumber obat

baru antikanker khususnya terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa.

2. Sebagai informasi alternatif pengobatan penyakit kanker payudara dan serviks

dengan menggunakan rumput mutiara (H. corymbosa (L.) Lamk).

Page 14: UJI SITOTOKSIK ISOLAT 1 DAN 2 RUMP UT MUTIARA/Uji... · melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi. Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

51

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

1. Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 rumput mutiara memiliki

efek sitotoksik yang rendah terhadap sel kanker HeLa dan T47D karena memiliki

nilai IC50 lebih besar dari 100 µg/mL.

2. Isolat 1 rumput mutiara memiliki nilai IC50 sebesar 817.711 µg/mL terhadap sel

HeLa dan 604.088µg/mL terhadap sel T47D, sedangkan IC50 yang dihasilkan oleh

isolat 2 rumput mutiara terhadap sel HeLa sebesar 238.23 µg/mL dan 480.049

µg/mL terhadap sel T47D.

B. Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kandungan senyawa yang

terdapat di dalam isolat 1 dan 2 rumput mutiara.

2. Perlu dilakukan penelitian mekanisme apoptosis terhadap sel kanker HeLa dan

T47D dan proses penghambatan proliferasi sel kanker.