Apresentao do PowerPoint

TESTE BIOQUMICO

Teste de Condutividade EltricaTeste de TetrazlioMestranda: Elizabeth Nunes GonzagaProf. Coimbra

Maio/2014UFMT UNIVERSIDADE FEDERAL DO MATO GROSSO Campus SinopPrograma de Ps-Graduao Mestrado em AgronomiaAvaliao e Qualidade de Sementes

INTRODUOSementeTestesConceito de Teste BioqumicoTeste de Condutividade EltricaTeste de TetrazlioO QUE UMA SEMENTEPela Legislao Brasileira (Lei n 10711, de 5 de agosto de 2003)

Semente como o material de reproduo vegetal de qualquer gnero, espcie ou cultivar, proveniente de reproduo sexuada ou assexuada, que tenha finalidade especfica de semeadura.

Fonte: http://www.ecoarflorestal.org.br/imagens/proj_sementes_01.jpgPela definio botnica: semente o vulo desenvolvido aps a fecundao, que contm embrio, reservas nutritivas e tegumento.

Longevidade

VigorVigor em semente remonta as evidencias de que os indivduos se desenvolvem em taxas diferentes, o que leva naturalmente, a classificao em fortes, fracos, etc (MOREIRA 1994).

Vigor tem sido definido com a utilizao de termos com integridade, adaptabilidade, resistncia, mas nenhum deles cientificamente respeitvel ; a semente, no o ambiente, deve receber as maiores atenes nas definies de vigor (Heydecker, 1972).

Vigor pode ser definido como o potencial para a germinao rpida e uniforme e um crescimento rpido de plntula, em condies normais de campo (Ching, 1973).

TIPOS DE TESTES Testes FsicosTestes FisiolgicosTestes BioqumicosTestes de Resistncia

TESTES PADRONIZADOS PELA ISTA e AOSATESTE BIOQUMICOAvaliar alteraes bioqumicas associadas ao vigor das sementes.Testes de respiraoTeste ADAGTeste de tetrazlioTeste de condutividade eltricaTeste de lixiviao de potssioTeste dos aldedos volteisTeste dos cidos graxos livresTESTE DE CONDUTIVIDADE ELTRICA um teste para observar a qualidade fisiolgica das sementes

A organizao do sistema de membranas em sementes pode refletir o seu estdio de deteriorao e, consequentemente, a qualidade fisiolgica.

Fonte: http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/semente/semente.phpSementes de Sibipiruna (Caesalpinea Peltophoroides ). Trs sementes normais, mostrando o eixo embrionrio e cotildones e uma semente deteriorada.A medio da condutividade eltrica por meio da quantidade de eletrlitos liberados pela semente na gua de embebio;

Tem sido aplicada, de modo mais freqente, em uma amostra de sementes representativa de uma populao (mtodo massal). DESVANTAGEMOs resultados expressam a condutividade mdia de um grupo de sementes, onde poucas sementes mortas podem afetar a condutividade de um lote com muitas sementes de alta qualidade.

Para minimizar esse problema, recomenda-se escolher as sementes, excluindo-se as sementes danificadas.

METODOLOGIAQuatro repeties de 50 sementes puras

Pesadas e, posteriormente, colocadas em copos plsticos contendo 75mL de gua deionizada (h trabalhos com 25ml e 50ml)

Manter em germinador regulado a temperatura de 25C, durante 24 horas

Aps o perodo de embebio a condutividade eltrica deve ser medida.

O resultado obtido no condutivmetro dever ser dividido pelo peso da amostra, para que o resultado final seja expresso em mS cm-1 g-1.

Uma poro significativa dos eletrlitos liberados pelas sementes, durante a embebio representada por vrios ons inorgnicos, dentre estes destacam-se o Na, K, Ca e Mg.

O potssio (K), porm, tem merecido especial ateno por se tratar do principal on em termos de quantidade lixiviada.

Sementes envelhecidas lixiviam maiores quantidades de potssio e essas quantidades tm sido utilizadas como um indicador da integridade do sistema de membranas celulares.

TESTE DE TETRAZLIOO teste de tetrazlio (Tz) rpido e grande importncia para a avaliao da qualidade das sementes, porque, alm da viabilidade, o mesmo pode informar sobre o vigor e ainda identificar diversos problemas que afetam o desempenho das sementes (Marcus Filho, 2005).

A metodologia do teste vem sendo aperfeioada constantemente, de modo que existem manuais que indicam a execuo para vrias espcies, tais como a soja, milho, trigo, feijo, algodo e amendoim.Baseia-se na atividade das enzimas desidrogenases, como a desidrogenase do cido mlico que catalizam a reao de reduo do sal de tetrazlio (2,3,5 trifenil cloreto de tetrazlio), nas clulas vivas.

Por exemplo: nas sementes de soja imersa na soluo de tetrazlio, esta difundida atravs dos tecidos, ocorrendo nas clulas vivas a reao de reduo que resulta na formao de um composto vermelho, no-difusvel, conhecido por formazan.

Se o sal de tetrazlio reduzido, formando o composto vermelho, houve atividade respiratria nas mitocndrias, significando que h viabilidade celular e do tecido.

Os tecidos no viveis no reagem e, conseqentemente, no so coloridos.

A formao de um vermelho carmim claro indica tecido vigoroso e um vermelho mais intenso para o tecido em deteriorao.

O Tz identifica, em soja, deteriorao por umidade, danos mecnicos e de percevejos. A interpretao do teste exige que as sementes sejam avaliadas individualmente, quando o exame das partes vitais, a localizao e intensidade da colorao indicaro a condio da semente.

METODOLOGIASal de tetrazlio a 0,075% (75 ml e soluo estoque (1,0%) + 925 ml de gua

100 sementes ( 2 repeties com 50 sementes cada)

Sementes mantidas umedecidas em papel toalha, por um perodo de 16 horas, na temperatura de + 25 C

Aps o pr-acondicionamento, as sementes so colocadas em bquer ou copinhos de plsticos, sendo totalmente submersas na soluo de tetrazlio (0,075%)

As sementes devem permanecer assim a uma temperatura de 35C a 40C por aproximadamente 150 a 180 minutos.

A soluo de tetrazlio sensvel luz, por isso a operao deve ser realizada no escuro.

Alcanada a colorao adequada as sementes devem ser lavadas em gua e posteriormente avaliadas, sendo no mximo 12 horas o tempo de armazenamento em refrigerador.

Muitos outros mtodos, para a determinao rpida da qualidade das sementes, vm sendo pesquisados, porm vrios ainda no mostraram resultados consistentes, outros apresentam dificuldades na padronizao, alguns se mostram promissores, mas devem ser mais avaliados antes de sua recomendao

Classes de QualidadeA identificao feita por 8 classes de qualidade, as quais foram descritas por (FRANA NETO ET AL.,1988).

Classes de 1 a 3 identificam sementes viveis e vigorosas,Classes de 4 a 5 identificam sementes viveis, porm no vigorosas,Classes de 6 a 8 englobam sementes que no germinam

A somatria dos percentuais das classes 1 a 3 nos d o ndice de vigor e a somatria dos valores das classes de 1 a 5 nos d a viabilidade do lote de semente.

Classificao pelo VigorO nvel de vigor pode ser interpretado de acordo com a seguinte classificao (FRANA NETO, 1989):Vigor muito alto: superior a 80%Vigor alto: entre 70 a 79%Vigor mdio: entre 50 a 69%Vigor baixo: entre 30 a 49%Vigor muito baixo: inferior a 29%

Bhering et al. (1996)

VIABILIDADE DAS SEMENTES DE BRAQUIRIA PELO TESTE DE TETRAZLIO Objetivando estimar a viabilidade de sementes de braquiria (Brachiaria brizantha) pelo teste de tetrazlio, foram estudadas as condies para a hidratao e a colorao das sementes.

Para tanto, utilizando oito lotes de sementes, foram variados os perodos e as temperaturas (2, 4, e 6 horas a 35C e 40C; 6 e 16 horas a 30C) de hidratao e os perodos e as temperaturas (1, 2 e 4 horas a 35C, 40C e 45C; 6 horas a 30C) de colorao, em soluo 0,075% de tetrazlio.

As sementes foram classificadas em viveis e no viveis.Revista Brasileira de Sementes, vol. 28, n 2, p.147-151, 2006Os resultados do teste de tetrazlio (Tabela 1) indicaram que a hidratao das sementes, dos oito lotes de braquiria, por seis horas temperatura de 30C (6h a 30C/2h a 40C) apresentou semelhana estatstica com os resultados de germinao de todos os lotes. Esse perodo de hidratao das sementes est de acordo com uma das recomendaes das Regras para Anlise de Sementes (Brasil, 1992), embora as regras no especifiquem a temperatura a ser utilizada.

Com relao colorao das sementes, os resultados indicaram (Tabela 2) que o perodo de uma hora a 45C (6h a 30C/1h a 45C), independentemente do lote considerado, apresentou semelhana estatstica com os resultados de germinao para os oito lotes.

FIGURA 1. Teste de tetrazlio: sementes viveis (A) e no viveis (B) de braquiriaConclusoO teste de tetrazlio, eficiente para estimar a viabilidade de sementes de Brachiaria brizantha, pode ser conduzido com a hidratao das sementes por seis horas a 30C (sementes com 25% de gua) e com a colorao por duas horas a 40C.OBRIGADO!!!