Dosen Pendamping:Dr. Riris Istighfari Jenie, M.Si., Apt.

Potensi Optimistik Ekstrak Etanolik Kayu Secang

(Caesalpinia sappan L.) sebagai Penghambat

Angiogenesis Jalur VEGF pada Sel EndotelPrisnu Tirtanirmala

10/301868/FA/08604Agam Budi Satria11/316600/FA/08862Rahmawaty Rachmady11/313038/FA/08686Denny Willianto12/333213/FA/09275

LATAR BELAKANGKANKER

LATAR BELAKANGANGIOGENESIS

VEGF

LATAR BELAKANGSECANG

BRAZILIN

BRAZILEIN

Flavonoid dapat berperan sebagai agen kemopreventive dan dapat menghambat VEGF/bFGF yang dapat menginduksi angiogenesis serta menghambat poliferasi sel tumor dan sel endotelial in vitro (Kim, 2003).

TUJUANTujuan Umum

• Mengetahui potensi ekstrak kayu secang sebagai agen kemoprevensi

Tujuan Khusus• Mengetahui penghambatan proliferasi sel endotel oleh

pemberian ekstrak kayu secang• Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak secang pada

penghambatan jalur VEGF dan menanisme molekulernya

TARGET LUARAN1. Mendapatkan koleksi bahan serbuk kayu secang

sebanyak 500 gram2. Ekstraksi serbuk kayu secang dengan etanol 70%

sebanyak 50 gram3. Mendapatkan data identifikasi senyawa flavonoid pada

ekstrak etanolik kulit kayu secang melalui uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

4. Mendapatkan data score VEGF-R terhadap VEGF, brazilin dan brazilein melalui docking senyawa

5. Mendapatkan sel endotel yang telah dipreparasi6. Mendapatkan data uji sitotoksisitas (IC50) ekstrak

etanolik kayu secang terhadap sel endotel7. Mendapatkan data pengamatan ekspresi protein VEGF

melalui metode Immunositokimia 8. Mempublikasikan hasil penelitian ke jurnal internasional

seperti: PubMed, ScienceDirect,

1. Mendapatkan koleksi bahan serbuk kayu secang sebanyak 500 gram

Mendapatkan serbuk kayu secang sebanyak 500 gram dari BP2TOOT Tawangmangu, Jawa Tengah

2. Ekstraksi serbuk kayu secang dengan etanol 70% sebanyak 50 gram

Mendapatkan ekstrak kental kayu secang

sebanyak 80,18 gram

3. Mendapatkan data identifikasi senyawa flavonoid pada ekstrak etanolik kulit kayu secang melalui uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

UV 254 nm UV 366 nmSinar tampak

4. Mendapatkan data score brazilin dan brazilein terhadap VEGF, melalui docking senyawa

Ligand Binding Energy (kkal/mol)

Protein: VEGF

5. Mendapatkan sel endotel yang telah dipreparasi

Sel endotel dapat diambil dari aorta mencit atau umbilical core manusiaKendala:

1. Waktu yang terbatas 2. Aorta mencit terlalu kecil susah mengisolasi

3. Reagen yang dibutuhkan belum tersedia4. Umbilical core sulit didapatkan

Solusi:Sel endotel diganti dengan WiDr colon cancer cell line

Mengapa WiDr?

(Riyad et al., 2008)

6. Mendapatkan data uji sitotoksisitas (IC50) ekstrak etanolik kayu secang

Pembuatan Media Kultur

Pemanenan sel

Penanaman Sel

Penghitungan sel

Inkubasi

Sel dalam 96 well plate diambil

Pemberian Reagen MTT

Treatment EtOH Secang

Penambahan Reagen Stopper

MTT Assay

Cell Viability (%)

IC50 ELISA Reader

N N

NH

N

S

N

CH3

CH3N N

NN

S

N

CH3

CH3

NADH + H

NAD + HBr

MTT (Yellow) Formazan (Purple)

Br

MTT Assay

0 20 40 60 80 100 1200.00

10.00

20.00

30.00

40.00

50.00

60.00

70.00

80.00EtOH Secang-WiDr-22.05.13 (48h)

Konsentrasi (ug/ml)

Viab

ilita

s se

l (%

)

IC50 = 14 ug/mL

Target Luaran yang Belum Terlaksana ICC akan dilaksanakan bulan Juni Mempublikasikan hasil penelitian ke jurnal

internasional

LATAR BELAKANG Kanker secara keseluruhan Ciri-ciri kanker mengarah ke metastasis Penyebab metastasis: angiogenesis Kekurangan obat2 chemoterapi yg udah ada (efek

samping) Perlu bahan alam untuk kombinasi treatment Tentang secang (kandungan zat aktif) Penelitian yg udah ada ttg secang Mekanisme penghambatan vegf oleh secang

-TERIMA KASIH-