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Recomendaciones instrumentales para laboratorios
agrarios
AGILENT TECHNOLOGIESSeminario On-Line
27.09.2010
Para obtener voz, marquen por favor
España: 900 801 892 - Portugal: 800 782 052
Event Password: Agilent27
Juan Aybar/Julián de la Mata
Especialistas de Producto: [email protected]
Agilent Technologies
: 901.11.68.90
Recomendaciones para el
desarrollo del e-seminar Use el chat-box de la parte inferior-derecha de la pantalla o
siga las instrucciones al final de la presentación para realizar en
directo sus preguntas
Todas las preguntas serán respondidas y enviadas junto a
una copia de la presentación a todos los asistentes al
seminario
Contacte con el host para cualquier problema técnico que le
surja durante la presentación
Para cualquier cuestión relacionada con el eseminar no dude
en contacte con el soporte técnico de WebEx:
- 800-9323-9000 (España/Portugal)
Agenda
1. Introducción. Necesidades en
laboratorios agrarios
2. Importancia de la preparación
de muestra
a) Simplificación de la preparación de
muestra enanálisis de residuos. Quechers
3. Alta sensibilidad en
cuantificación de residuos
semi-volátiles
4. Soluciones dedicadas al
screening genérico de
plaguicidas
a) Kits y Analizadores de Agilent
Technologies
Atomic
Spectroscopy
GCMS/LCMS
Ion Trap
Micro-GC
Molecular
Spectroscopy Research Products
Disolution
Test,
PrepLC,
FlashLC
…
Laboratorios agrarios. Algunos problemas
habituales …
Gran cantidad de ensayos – monoresiduos, multiresiduos,
otros ensayos – foliares, nutrientes, aguas de riego, OGMs …
LMRs establecidos en legislación
local/europea/internacional. El problema de la armonización y
la falta de métodos oficiales de análisis
Eliminación práctica de los flujos de trabajo tradicionales
en análisis de residuos. Necesidad de nueva instrumentación
y de soluciones rápidas
Cumplimiento con lo establecido en los documentos de las
entidades de acreditación – SANCO/17025 …
Problemas derivados de la influencia de la matriz. P.e.
Mantenimiento de abundancias relativas entre transiciones
en presencia de matriz al trabajar en modo MS
Normativa de análisis de plaguicidas en alimentos – Reglamento 396/2005
Cubre aproximadamente 1100 plaguicidas
Se aplica un MRL por defecto de 0.01 mg/Kg para los productos para los
que no hay un MRL específico
Muchos compuestos a analizar
Diferentes propiedades químicas (pesticidas neutros, ácidos, básicos)
Matrices muy complejas
Contar con una preparación de muestra sencilla y barata
Conseguir una identificación segura
Obtener confirmación y cuantificación en la misma inyección
Requerimientos
Reto Analítico
Idealmente
Flujo de trabajo clásico en alimentación/medioambiente con QQQ
Screening Confirmación Cuantificación
Agilent 7000B GC/QQQ
1290 Infinity UHPLCAgilent 6460B
LC/QQQ
EU Pesticide DatabaseMLRs, novedades en la definicion de algunos residuos. Cada vez más sensibilidadhttp://ec.europa.eu/sanco_pesticides/public/index.cfm?event=substance.selection
http://www.crl-pesticides-datapool.eu/
Normativa de InterésPlaguicidas – ENAC/SANCO
La parte clave del documento es la que hace referencia a la
validación del método y al agrupamiento de matrices en grupos.
Finalmente los laboratorios pueden decidir por ir a alcances
abiertos/cerrados de acreditación. En estos casos el laboratorio
SIEMPRE necesita sistemas de HIGH-THROUGHPUT
Agenda
1. Introducción. Necesidades en
laboratorios agrarios
2. Importancia de la preparación
de muestra
a) Simplificación de la preparación de
muestra enanálisis de residuos. Quechers
3. Alta sensibilidad en
cuantificación de residuos
semi-volátiles
4. Soluciones dedicadas al
screening genérico de
plaguicidas
a) Kits y Analizadores de Agilent
Technologies
Agenda
1. Introducción. Necesidades en
laboratorios agrarios
2. Importancia de la preparación
de muestra
a) Simplificación de la preparación de
muestra enanálisis de residuos. Quechers
3. Alta sensibilidad en
cuantificación de residuos
semi-volátiles
4. Soluciones dedicadas al
screening genérico de
plaguicidas
a) Kits y Analizadores de Agilent
Technologies
Page 13
6430 Triple Cuadrupolo
LC/MS
Rápido, robusto,
Cuantificación con alta
sensibilidad,.
Ideal para HPLC-Chip
• Optimización rápida con Optimizer
• Rápido cambio de polaridad
•Métodos Dynamic MRM
• Análisis complejo multi-analito
• Cuantificación de proteinas target
Agilent Serie 6400. Triple CuadrupoloLa plataforma cuantitativa más completa en LC/MS (2006-2009)
6410 Triple Cuadrupolo
LC/MS
Robusto, Facilidad de Uso.
Menores coste de
mantenimiento.
• Celda de colisión con aceleración lineal axial
• Rápido cambio de polaridad
• Análisis MRM
• Robustez y sensibilidad
6460 Triple Cuadrupolo LC/MS
El Triple
Cuadrupolo LC/MS
Más sensible del mercado
• Agilent Jet Stream – sensibilidad sub-fg!
• Perfecto para las aplicaciones más exigentes
• Rápido cambio de polaridad
• Métodos Dynamic MRM
New 6490 LC Triple with iFunnel Technology
“Unrivaled Quantitative Excellence” Alta
Presión
Alta
Velocidad
La mejor
sensibilidad
1290 Infinity LC / 6490 Triple Quad : Clearly Better Together
N E W 6 4 9 0 L C T R I P L E Q U A D W I T H I F U N N E L T E C H N O L O G YNuevo 1290 Infinity LC / 6490 Triple Quad Rendimiento Cuantitativo Sin Precedentes
Agilent Jet StreamMaximizando la señal – Minimizando el ruido
-La repulsión entre las gotas cargadas en ESI tradicional hace que la liberación iónica ocurra frecuentemente en lugares alejados de la entrada del sistema MS
-Agilent JetStream impide la expansión del cono, colima la formación iónica en la entrada del MS y favorece la desolvatación
-La consecuencia es un notable incremento en S/N respecto a ESI clásica
Agilent Jet Stream
• Confinamiento térmico del cono ESI
• Desolvatación más eficiente para generar iones en fase gas
• Creación de zona de alta riqueza iónica
Capilar de entrada con seis canales
• 6 entradas al capilar
• Muestreo de 10X de gas iónico proveniente de la fuente
• Captura de la mayor parte del gas que proviene de la zona de la fuente
Dual Ion Funnel
• Elimina el gas perocaptura los iones
• Elimina el ruido de neutros
• Incrementa la vidamedia de las bombasturbo
La tecnología iFunnel captura 10X más iones
Nuevo capilar de muestreo – hexabore
sampling capillary El nuevo hexabore sampling capillary
incrementa la eficiencia del muestreo
iónico hasta 10 veces respecto al capilar
de un único orificio
La longitud del capilar se reduce un
50%
minimiza la pérdida de iones por
movilidad
permite la introducción de un
mayor volumen de gas iónico
Las ganancias de muestreo iónico
son aún mayores al combinar el
hexabore sampling capillary con la
tecnología JetStream
Agilent QQQ 6460
Bisphenol AQual ionS/N = 1070.6Peak to peak Based on height
Bisphenol AQuant ionS/N = 66.4Peak to peak Based on height
Bisphenol AQual ionS/N = 138.9Peak to peak Based on height
BenzophenonQuant ionS/N = 4670.4Peak to peak Based on height
BenzophenonQual ionS/N = 1865.9Peak to peak Based on height
BenzophenonQuant ionS/N = 2207.6Peak to peak Based on height
BenzophenonQual ionS/N = 19729.7Peak to peak Based on height
Agilent QQQ 6490Bisphenol AQuant ionS/N = 819.5Peak to peak Based on height
Bisfenol A y BenzofenonaComparación entre Agilent QQQ 6460 y 6490100 ng/ml de extracto de muesli, 5 ul de inyección
Aplicaciones vs. modos de medida GC/MS
ScanAguas de consumo
Muestras industriales
Aromas y fragancias
Análisis de no-targets
Confirmacion de compuestos
de síntesis
Alijos de droga
SIM
Agua pura
Análisis de aire
Toxicología
Disolventes residuales
DRSAguas residuales
Matrices alimentarias
Análisis toxicológico de
muestras complejas
MS/MSAguas altamente contaminadas
Matrices alimentarias complejas
Tóxicos a nivel de traza en matrices
complejas
GC/MS
GC/MS/MS
Problemas clásicos en GC/MS. Análisis de trazas y alta concentración de matrizcoextraída
Efecto sobre el
liner tradicional
empleado para
inyección de gran
volumen
Extractos
vegetales L/L para
análisis de trazas
de plaguicidas por
GC/MS
- Capacidad de programación de temperaturaHot/cold S/SL (pulsed mode), temperature programmed vaporization (PTV), solvent vent.
- Flexibilidad en los volúmenes de inyecciónAnálisis de muestras termolábiles y mínima discriminación en la inyección paracompuestos con alto peso molecular
- Mayor sensibilidad en inyecciones de gran volumen
- Compatibilidad con Tecnología de flujo CapilarVenteo de disolventes y uso de Backflush
- Totalmente integrado con Chemstation, EZChrom y MassHunter
Nuevo Inyector Multimodo para muestrascon alto contenido en matriz
Ambient In-vial Small-Volume Derivatization Dilution Internal Standard Heating/MixingHeadspace Extraction Sampling Addition Bar Code
Analizador Screening Plaguicidas GCQQQConfiguraciones disponibles
Columna(s)Tubo
desactivado
CFTs
Purged Ultimate Union
Splitter
15 x 0.25 x 0.25 30 x 0.25 x 0.25
Restrictor desactivado
(Siltek)
EPC
Inlet MS
Inlet MS
¡o divisor!
EPC
EPC¡Las configuracionesson intercambiables!
Backflush. Configuraciones con purged ultimate union y/o 2-way purged splitter
Reproducibilidad* en RT para Trifluralin en extracto de lechuga. 100 Inyecciones, 3 minutos backflush. Secuencia de 21 horas
Min 6.070
Max 6.075
Mean 6.073
Std Devn 0.00186
% RSD 0.0306RT (mins)
*Agilent 2x RTL Pesticide Method
5.950
5.970
5.990
6.010
6.030
6.050
6.070
6.090
6.110
6.130
6.150
1 11 21 31 41 51 61 71 81 91Injection Number
Ventajas del trabajo en MS/MSMejor selectividad que en SIM
Ion
Precursor
Producto 1Producto 3
Producto 2
EI-SIMLa selectividad es proporcional
a la resolución espectral. Por
tanto no hay selectividad frente
a iones de igual m/z
EI-MS/MSLa selectividad para el precursor es
igual que en SIM. Hay una alta
probablidad de que al menos un ion
producto sea diferencial entre el
compuesto de interés y la interferenciainterferencia
analito
interferencia
El precursor no debe ser usado para la medida
de ion ratios ya que las interferencias serán
idénticas a las que pueden surgir en SIM
resolución unidad
Determinación de 350 plaguicidas RAFA 2009 GC/MS/MS PosterDownload: http://www.chem.agilent.com/en-US/Events/Pages/rafafollowup.aspx
En el LaboratorioEn Fábrica
Fast Track AnalyzersListo para inyectar - GCQQQ
MRM method
for 500+
Pesticides
Dynamic MRMRetention Time
Locking (RTL)
App. specific
consumables
Sample Prep.
QuEChERS
Multi-Mode
Inlet,
Cold Splitless
Capillary Flow
Device for
Backflushing
Plug and Play
Ready for
the 1st run
Copia parámetros desde MRM Database
Pégalos en Method Editor
Batch-at-a-Glance – Detección de anómalosBatch Table: Uno o Múltiples Compuestos
Single Compound, Qualifier, ISTD, ISTD Qualifier
Multiple Compounds
Agenda
1. Introducción. Necesidades en
laboratorios agrarios
2. Importancia de la preparación
de muestra
a) Simplificación de la preparación de
muestra enanálisis de residuos. Quechers
3. Alta sensibilidad en
cuantificación de residuos
semi-volátiles
4. Soluciones dedicadas al
screening genérico de
plaguicidas
a) Kits y Analizadores de Agilent
Technologies
Documento SANCONovedades en identificación de plaguicidas en matriz alimentaria
Por primera vez la guía SANCO incorpora la posibilidad de uso de sistemas TOF para identificación
de residuos
ALTA RESOLUCION, EXACTITUD DE MASA, VELOCIDAD DE ANÁLISIS
Signal Response
Mass Spectrum
• Sensitivity
• Dynamic Range
• Linearity
• Ionization Profile
• Mass Accuracy
• Isotopic Fidelity
• Mass Resolving Power
• Acquisition Rate
• Data Mining
• Differential Profiling
• Compound ID
• Annotation
• Peak Resolving Power
• Peak Capacity
• Separation Speed
6540 Ultra High Definition
Q-TOF LC/MS
Beneficios de Agilent TOF Technology en el análisis de compuestos Non-Target
•Adquisición de espectro completo
• Todos los datos todo el tiempo
• Sin necesidad de desarrollar metodologías específicas
• Software de Data Mining exacto y automatizado para la identificación de compuestos (Molecular Feature Extractor)
• Búsquedas y Reports con la Accurate Mass Compound Database (Pesticide/Forensic PCD).
• Instrument Set-up Automatizado• Auto-tune total para uso a lo largo de todo el rango de masas
• Calibration Tune Solution y Reference Ion Introduction (CDS)
• Calibración del eje de masas conseguida en segundos y estabilidad a lo largo de toda una secuenciade análisis
• Adquisición de datos sensible y rápida• Hasta 40Hz de frecuencia de adquisición
• Permite sin problemas el trabajo con separaciones de cromatografía rápida
• Overlapped Autosampler Sample Injections para mayores ahorros de tiempo
• La mayor sensibilidad entre los sistemas TOF hasta picogramos bajos en columna
RRLC
QTOF
Q-TOF Analyzer Ion
Optics
CuadrupoloCelda colision
Analizador de tiempo
de vuelo
Agilent QTOFTrabajo en Full Scan MS y MS/MS
6230 Accurate Mass TOF LC/MS
True Hi-Def Technology
Rendimiento sin
compromisos
Exactitud de masa < 2 ppm
> 20000 Resolucion
105 Rango Dinámico
Hasta 40 espectros/s
Opciones de ultra elevada
sensibilidad
Agilent JetStream
(conventional flow)
Chip-HPLC (nanoflow)
RRLC – 6230 Accurate
Mass TOF LC/MS
6540 Ultra High Definition
Q-TOF LC/MS
6540 UHD Q-TOF LC/MS
RESEARCH PERFORMANCE ON THE BENCHTOP
Acceso rutinario a Datos de Alta Resolución/Masa Exacta• Mantenimeinto automatizado de la calibración
• Sin influencias por alteraciones en la temperatura del laboratorio
Rendimiento sin precedentes en sistemasQTOF• >40,000 resolucion a 20 espectros/s
• 5 órdenes de rango dinámico lineal
• <1 ppm MS exactitud de masa; <2 ppm MS/MS
• Sensibilidad sin rival en sistemas TOF/QTOF
El salto hacia nuevas aplicaciones• Caracterización y análisis de muestras complejas
• Mass Profiler Professional para análisis diferencial
• Screening de compuestos Non-Targeted
• Qual / Quan: Capacidades Cuantitativas Garantizadas
6540 UHD
Q-TOF
6530
Q-TOF
• Excepcional estabilidad de masasconseguida con el diseño de tubode vuelo dual con vacío internoque permite un excelenteaislamiento térmico
Tecnología Mejorada Tubo de Vuelo/Espejo IónicoEstabilidad, Sensibilidad, Alta Resolución
DC Quad
Octopole 2
Ion Pulser
Ion Mirror
Detector
TurboSistemas de investigación en el Laboratorio de Rutina
• El tubo interno estahecho de un material de bajísimaexpansión térmica(INVAR) eliminandola necesidad de recalibrar debido a fluctuacionestérmicas
Screening Rápido en Aplicaciones de SeguridadAlimentaria. Presencia de triazinas en tomate a bajaconcentración
4x10
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5
5.5
6
6.5
7
7.332
5.037
5.018
3.384
7.254
3.034
7.332
Counts vs. Acquisition Time (min)1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Ametryn
Propazine
Prometon
Simazine
Prometryn
Terbutryn
Atrazine
EICs
6x10
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4346.25850
701.42128213.14878922.00980
Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
Espectro a 5.018 min
4x10
0
0.25
0.5
0.75
1
1.25
1.5
1.75
2
2.25
2.5
2.75
3 214.15648
216.10129C8H15ClN5
Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)214 215 216 217 218 219
Atrazine
-1.1 ppm
Zoom
7x10
0
0.25
0.5
0.75
1
1.25
1.5
1.75
2
2.25
2.5
2.75
3
3.25
3.5
3.75
4
4.25
7.3327.3325.0375.0183.384 7.2543.034
Counts vs. Acquisition Time (min)1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
TIC
Compound % RSD
(3 inj.)
Simazine 0.3
Prometon 1.6
Atrazine 0.3
Ametryn 2.2
Propazine 2.6
Prometryn 2.6
Terbutryn 2.2
Masa en columna de 5 pg (10 µL x 500 ppt) Identificación por búsqueda en base de datos
6230 TOF, Modo MS, Rango Dinámico Extendido
-2.00
-1.50
-1.00
-0.50
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Mass E
rro
r (p
pm
)
Acquisition Rate (scans/second)
azoxystrobin 404 m/z
cyproconazole 292 m/z
cyprodinil 226 m/z
diazinon 305 m/z
linuron 249 m/z
paclobutrazol 294 m/z
propazine 229 m/z
tetraconazole 372 m/z
tricyclazole 190 m/z
Exactitud de masa invariable con la frecuencia de adquisiciónEjemplo de mix de pesticidas
Personal Compound Database Pesticide KitSolución de screening de plaguicidas basada en masa exacta
• Análisis cromatográficos más rápidos
• Mejor resolución para análisis multi-componenteRRLC o UHPLC
• Mejor sensibilidad en matriz complejaESI/Jet Stream Technology
• Screening rápido en análisis multi-residuos con RTs Accurate Mass Personal
Compound database
• Fácil de usar con una rápida revisión de datos obtenidosMassHunter SW
• Puesta en marcha rápida de la aplicación con chequeodel funcionamiento
Test mix, columna, CD con métodos de ejemplo
• Fácil de usar en método prechequeado
• Rápida puesta en marcha para muestras realesQuEChERS
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Agilent TOF Solución de Screening
Agilent 6220/30 TOF
• 20K Resolucion
• 5 decadas en-scan
• Sensibilidad a nivel de pg bajos
Pesticide Personal Compound Database1600 Pesticides and Related compounds
El usuario puede generar sus propias bases de datos en función de que
el método usado pueda mejorarse para una matriz en particular
Masa Monoisotópica
(varia en ppm)
Isotope spacing
(varia en ppm)
Distribucion Isotópica
(varia en %)
Scoring basado en
Importancia del uso del RT en el score(ejemplo – aldicarb sulfona / acetamiprid / butoxicarboxima)
2 ppm ventana de tolerancia de masa exactaAcetamiprid [C10H11ClN4], m/z=222.06722
Aldicarb-sulfona [C7H14N4O4S], m/z=222.06743Butoxicarboxima [C7H14N4O4S], m/z=222.06743
Resultados del Screening usando MFE + PCDB de pesticidas
COMPUESTOS TARGET - RTs conocidos – Estándares inyectados
COMPUESTOS NO TARGET - RTs desconocidos pero loresentes en la DB – Estándares no inyectados
Resumen Agilent Technologies es la única compañía del mercado capaz de proporcionar a día de hoy todo el rango de soluciones necesario en el laboratorio agrario
El concepto solución abarca desde: Preparación de muestra – SampliQ/Quechers
Aplicaciones cuantitativas en matriz compleja para el análisis de targets(GC/QQQ, LC/QQQ)
Aplicaciones cualitativas basadas en masa exacta para descubrimiento de la presencia de no-targets y/o desconocidos(LC/TOF/QTOF)
El software MassHunter proporciona las herramientas necesarias para el rápido procesado de muestras en laboratorio de rutina
Los nuevos Kits/Analizadores facilitan la rápida puesta en marcha de aplicación en el laboratorio
GC and GC/MS Euro
Tour 2010
Madrid 5 de Octubre 2010
Hotel HUSA Princesa
Barcelona 6 de Octubre 2010
WORLD TRADE CENTRE
901.11.68.90
http://www.chem.agilent.com/es-
ES/Events/Pages/eurotour-sp.aspx
Agilent SampliQQuEChERS Kits
Page 1
Julian de la Mata
Especialista de Producto
Agilent Technologies, Inc.
¿Qué es QuEChERS (pronunciado “Catchers”)• Quick, Easy, Cheap, Effective, Robust and Safe , QuEChERS
(Rápido, Fácil,Barato,Efectivo, Robusto y Seguro, RaFaBERS)
• Desarrollado conjuntamente por la USDA (2003) y por las Agencias Reguladoras de Alimentos Europeas (método prEn 15662: 2007)
• Metodología para una extracción simplificada de un gran número de residuos de pesticidas multiclase y multiresiduo en frutas y vegetales
• QuEChERS es un método de preparación de muestra rápido para hacer screening de
analitos de interés, no para concentrar muestra.
• QuEChERS está todavía en los comienzos, y se está adoptando en todo el mundo.
Page 2
Catalogo QuEChERS : Publicación #5990-3562EN
Método Luke o SPE tradicional QuEChERS Beneficio
Tiempo estimado para
procesar 6 muestras (min)
120 30 4x más rápido
Solvente usado (mL) 90 mL 10mL 9 x menos solvente
Desechos clorados (mL) 30 mL Ninguno Más seguro, más
ecológico, menos costo
Equipo especializado, material
de vidrio
Embudo, baño de agua,
contenedores de 200mL ,
evaporador, etc.
Ninguno No se necesitan
consumibles adicionales
Primer Paso- Extracción
Page 3
Representación Gráfica de los pasos QuEchERS El uso de SulfatoMagnésico en el paso de extracción ayudaa mejorar lasrecuperaciones al facilitar la partición de los pesticidas en la capa orgánica, gracias a queretiene el agua.
Segundo Paso – SPE Dispersiva
Page 4
La SPE Dispersiva implica la mezclade la sal y los sorbentes con el extracto en un tubo de centrífugapara retener las interferencias de matriz, pero no los analitos.
Representación Gráfica de los pasos QuEchERS
El modo más fácil de seleccionar el kit correctoSeleccione su kit de Extracción QuEChERS
Seleccione su kit de SPE Dispersiva ( o Kit Universal)
– Una guía de kits/alimentos puede encontrarla en
www.agilent.com/chem/quechers
-- Analize
Page 5
1
2
3
Page 6
Guía de Selección de SampliQ QuEChERS
Page 7
Kits de Extracción
Page 8
Kits de Extracción (cont’)
Page 9
Page 10
Kits de SPE Dispersiva
Page 11
Kits de SPE Dispersiva(continuación)
Page 12
Kit Dispersivo Univeral• 50 mg PSA, 50 mg C18, 7.5 mg GCB, 150 mg MgSO4
•Un kit dispersivo para todas las frutas y vegetales
•Diseñado para el desarrollo de métodos con QuEChERS
•Proporciona extractos muy limpios, para todas las matrices que
afectan a la recuperación incluso para los pesticidas planares
•Remueve la mayoría de los interferentes de matriz como
ácidos orgánicos, pigmentos, grasas, proteinas y azúcares.
•Disponible en tubos de 2 y 15 ml con o sin homogeneizadores
cerámicos.
•Agilent es el primero en el mercado en lanzar este kit (Agosto)
Kits de Extracción• AOAC,EN o bien No tamponados.
S. Lehotay, et al., J. Chromatography A 1217 (2010) 2548-2560.
Tres Variantes del Método QuEChERS
Page 13
Dispersion
Extraction
Tres Variantes del Método QuEChERS 1) El Método original QuEChERS introducido en 2003, no
tamponado, usa cloruro sódico para mejorar la extracción
2) El método tamponado AOAC 2007.01 usa acetato sódico como
tampón reemplazando el cloruro sódico y 1% de ácido acético en
acetonitrilo
Una variación posterior introduce el uso de PSA y GCB para eliminar
altos niveles de clorofila y esteroles en el extracto final sin la perdida de
pesticidas planares(aromáticos polares) usando una mezcla de
acetona:tolueno (3:1) como solvente
3) La version Europea tamponada es similar al métod AOAC,
excepto que en la la extracción se usan, cloruro sódico, citrato
sódico dihidratado y citrato sódico sesquihidrato, en vez de acetato
sódico, y porque se añade ácido al final del proceso.
Page 14
Page 15
• Método Original QuEChERS (no tamponado)
• 4 o 6 g MgSO4, 1 o 1.5 g NaCl
• Método AOAC 2007.01 (Association of Official Analytical Chemists )
• 6 g MgSO4, 1.5 g Na Acetato
• Método EN 15662 (CEN-Comité Européen de Normalisation )
• 4 g MgSO4, 1 g NaCl, 1 g NaCitrato, 0.5 g disodio citrato sesquihidrato
Comparación de los 3 Métodos (Extracción)
Los 3 métodos dan excelentes resultados: 98% de media en recuperaciones
con 10% RSDs
Fuerza íónica de los dos métodos tamponados:
•Método AOAC tamponado
• Condiciones de tamponado relativamente fuertes con el acetato (pH 4.8)
• Método EN tamponado
• Condiciones de tamponado más débiles con el citrato (pH 5-5.5)
Qué hace únicos los kit Agilent SampliQ paraQuEChERS
• Los Kits SampliQ QuEChERS tienen fuertes ventajas:
– Fácil selección: ningún otro competidor describe cómo elegir productos
basados en el análisis, metodo regulatorio o tamaño de la muestra.
– Paquetes pre-pesados y certificados: suministrados en bolsas
anhidras para asegurar que el procedimiento se sigue correctamente,
dando lugar a datos más precisos
– Inmediata implementación en laboratorios acreditados
– Agilent focaliza en la educación: Agilent proporciona un video (12min)(http://www.chem.agilent.com/en-US/products/consumables/samplepreparation/sampliqspe/sampliqquechers/video/Pages/default.aspx )
– Homogeneizadores cerámicos para los pasos de agitación
– Agilent suministra patrones para QuEChERS
– Compendio de Aplicaciones QuEChERS
para alimentos: 5990-4977EN
Page 16
Los kits SampliQ QuEChERS son lideres de mercado
La solución QuEChERS más completa en el mercado hoy
Page 17
Diferentes kits de Extracción: 16
Diferentes kits de Dispersión: 33 ( o Kit Universal)
Aplicationes: 20+
Soporte Técnico (Especialistas de Soporte Técnico,
Especialistas de Producto y distribuidores por toda Europa)
Experiencia en soluciones (GC/MS y LC/MS)
Certificado de Composición con cada kit
Clientes satisfechos por todo el mundo!
Paquetes de los Kits de Extracción
Page 18
Empaquetamiento de 3 capas
resistente al agua y UV
Sales empaquetadas bajo
corriente de nitrógeno ( no vacío)
Reduce la aglutinación de las
sales, aumentando la capacidad de
vertido
Todos los ingredientes escritos
en el paquete
Empaquetar las sales separadamente
permite a los usuarios añadir la muestra
antes de añadir las sales para:
- Prevenir reacciones exotérmicas
- Impedir la degradación de la muestra
- Asegurar las máximas recuperaciiones
Gráficos de Temperatura para los Kits de Extracción AOAC y EN
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30 40 50 60
Te
mp
era
ture
ºC
Time (seconds)
AOAC Add Buffered Salts to Sample
AOAC Sample Added to Buffered Salt
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30 40 50 60
Tem
pe
ratu
re ºC
Time (seconds)
EN Add Buffer Salts to Sample
EN Sample Added to Bufferd Salt
Representación de los datos de temperatura de los Kits de Extracción AOAC y EN.
Se observa un incremento sustancial de temperatura (aumento de aprox 25 ºC para
el método AOAC y approx 10 ºC para el método EN ) cuando se añade la muestra
a la sal de extracción en el tubo de 50 mL PP frente a cuando se añade la sal de
extracción de una bolsa anhidra a la muestra.
Efecto de la Temperatura en la Recuperación Los siguientes cuatro pesticidas se usaron para evaluar los efectos térmicos que se producen cuando la
muestra se añade a las sales de extracción.
Fenthion NicotinaIsofenfosIsocarbofos
Analisis hecho en un Agilent 6410 Triple Quad LC/MS usando una columna Phenyl- Hexyl 2.1 x 50 mm,
3.5 µm
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Reco
very
%
Pre-Spiked Extraction Salts Added to Matrix AOAC Method
Pre-Spiked Matrix Added to Extraction Salts AOAC Method
Representa el efecto
negativo en la
recuperación al añadir la
matriz del producto a la
sal durante el paso de
Extracción en el Método
QuEChERS AOAC
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Paquetes de Extracción de otras compañías
Mejoras en la Extracción de las MuestrasStep 1: Añadir Sales de Extracción a las frutas/vegetales triturados
• Consistencia en la agitación, cada uno agita de manera diferente
• Variabilidad en las aplicaciones QuEChERS,en las recuperaciones
y RSDs
• Homogeneizadores Cerámicos SampliQ• Reducen el tiempo de agitación de 1 minute a <20 segundos!• Extracción Consistente de la muestra con las sales
• Rompe los aglomerados de sales.
• Facilita la homogeinización con los angulos de corte
• Incrementa la recuperación de pesticidas de la muestra
• 3 tamaños diferentes: uno para el tubo de extracción de 50 mL y
dos para los tubos de dispersión de de 15 y 2 mL
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Extracción QuEChERS : Con y sin Homogeinizadores Cerámicos
Group/Presentation Title
Agilent Restricted
Month ##, 200X
CH no CH CH no CH
0
20
40
60
80
100
120
Reco
verie
sComparison of QuEChERS Method AOAC and EN With and Without
Ceramic Homogenizers
AOAC Method with Ceramic Homogenizers
EN Method with Ceramic Homogenizers
AOAC Method without Ceramic Homogenizers
EN Method without ceramic Homogenizers
Homogeinizadores Cerámicos• Material Cerámico Inerte
• Sin perdida en la recuperación de pesticidas
• Recuperaciones consistentes
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Homogeneizadores Cerámicos(tiempo de agitación)
Page 25
Recuperaciones medias de varias clases de Pesticidascon Homogeneizadorescerámicos
Con 20 segundos de agitacióncon homegeneizadores se consiguen recuperacionesequivalentes o mejores que 1 minuto de agitación sin ellos.
Agilent Restricted
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Aplicaciones QuEChERS en 2010: más alla de los Pesticidas en Frutas y Vegetales
Aprenda hoy más en www.agilent.com/chem/SampliQ
Aplicación Literatura Kit QuEChERSusados
Fármacos Veterinarios(antibioticos)
en tejidos animales
5990-5085EN
5990-5086EN
5982-5650
5982-4921
PAHs en Pescado 5990-5411EN 5982-5755
5982-5058
Pesticidas en Aceite de Oliva 5990-5553EN 5982-5550
5982-5122
PAH’s en Suelos (sedimentos) 5990-5452EN 5982-5755
5982-5156
Acrilamidas en Frituras 5900-5940EN 5982-5850
5982-5022
Pesticidas en Alimentos Infantiles 5990-5028EN 5982-5755
5982-5158
PCBs en Pescados y Aceite de
Pescado
Próxima Publicación
Pesticidas en Aceites Esenciales Próxima Publicación
Fármacos en compuestos biológicos Próxima Publicación
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Preocupación Solución Agilent Ventaja Agilent
Sales en el tubo Sales en Paquete de
Extracción Anhidro ☻Tubos de 50 mL extra Tubos 50mL vacíos ☻
Almacenamiento y
ubicación de los tubos de
extracción y dispersivos
Presentación en caja y
paquetes de extracción ☻
Variabilidad en la
Agitación
Homogeneinizadores
Cerámicos ☻
Preparar los estandares:
tiempo y reproducibilidad
Agilent suministra patrones
para QuEChERS ☻
Soluciones de Agilent a las preocupaciones de los clientes
Conclusión: Avances en QuEChERS
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La metodología QuEChERS es tan fácil como 1-2-3
La metodología de QuEChERS puede ser usada para
otros residuos además de pesticidas.
Gran cantidad de posibilidades, con una técnica de
preparación de muestra muy simple, “la preparación justade muestra”
Técnica relativamente “ecológica” y de bajo costocomparada con la Extracción Líquido-Líquido y la Extración
en Fase Sólida (SPE), y con altas recuperaciones
