Embed Size (px)
DESCRIPTION
Proposal pengajuan sintesis dan analisis pembuatan salep obat luka.
Citation preview
PEMBUATAN DAN ANALISIS SALEP OBAT LUKA DARI EKSTRAK PEGAGAN (Centella Asiatica (L.) Urban)
Proposal Praktik Kimia Terpadu Tahun Ajaran 2012/2013
oleh:
Ayu Wulandari Suyoto XIII-4/NIS 09.55.06395
Arrovi Septian XIII-4/NIS 09.55.06389
Tamara Dayu Oktaviani XIII-4/NIS 09.55.06591
KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA
Pusat Pendidikan dan Pelatihan Industri
Sekolah Menengah kejuruan – SMAK
Bogor
2012
LEMBAR PERSETUJUAN DAN PENGESAHAN
Disetujui dan disahkan oleh:
Disetujui oleh,
Dra. Rini Kusmawati, M.Pd
NIP. 19671221 199303 2 003
Pembimbing
Disahkan oleh,
Hj. Sulistiowati, S.Si., M.Pd.
NIP. 19590506 198403 2 001
Wakil Bidang Sarana Prasarana dan Pendidikan Keterampilan
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Tidak kurang dari 7.000 dari 30.000 spesies tanaman di Indonesia berpotensi
sebagai tanaman obat dan masyarakat telah mengenal secara luas dan turun – temurun
penggunaan obat – obat tradisional. Salah satunya adalah Pegagan (Centella Asiatica(L.)
Urban). Pegagan ini dimanfaatkan dalam bentuk bahan segar, kering maupun dalam bentuk
ramuan atau jamu. Efek pengobatan dari pegagan secarara tradisional dan secara ilmiah
sudah lama berkembang. Pegagan telah dikenal sebagai obat untuk revitalisasi tubuh dan
pembuluh darah serta mampu memperkuat struktur jaringan tubuh. Pegagan dapat
diberikan sebagai obat kepada penderita insomnia, penderita stress, dan penderita kelainan
mental.
Pegagan (Centella Asiatica) dapat dikatakan sebagai tanaman liar karena banyak
sekali tumbuh di pekarangan, ladang, pinggir jalan, perkebunan, atau di pematang sawah.
Tanaman Pegagan menyukai tanah yang banyak mengandung air dan cukup mendapat
sinar matahari atau teduh.
Tanaman ini berasal dari daerah Asia tropik, tersebar di Asia Tenggara, termasuk
Indonesia dan negara-negara seperti India, China, Jepang, dan Australia kemudian
menyebar ke berbagai negara-negara lain. Tanaman Pegagan ini memiliki nama unik di
setiap daerah di Indonesia misalnya daun kaki kuda (Melayu), antanan (Sunda/Jawa Barat),
Pegaga (Aceh), ampagaga (Batak), gagan-gagan/rendeng (Jawa), taidah (Bali), paiduh
(Nusa Tenggara), wisu-wisu, kisu-kisu (Sulawesi), sandanan (Irian). Selain di Indonesia
tanaman Pegagan ini juga memiliki sebutan disalah satu Negara seperti : broken copper
coin, buabok (Inggris), paardevoet (Belanda), gotu kola (India), ji xue cao(Hanzi).
Pegagan merupakan tumbuhan kosmopolit atau memiliki daerah penyebaran yang
sangat luas, terutama di daerah tropis dan sub tropis. Tanaman ini menyebar liar dan dapat
tumbuh subur di atas tanah dengan ketinggian 1-1250 m dari permukaan laut. Tumbuhan ini
berasal dari Asia tropis dan sering ditemui tumbuh melimpah di tempat-tempat terbuka,
seperti tegalan, dan tempat yang agak terlindung. Pegagan menyukai lingkungan yang
basah, seperti selokan, areal persawahan, tepi-tepi jalan, padang rumput, dan bahkan tepi-
tepi tembok atau pagar.
1
Ciri fisik tanaman ini, tumbuh merayap menutupi tanah, tidak berbatang, tinggi
tanaman antara 10 – 15 cm, memiliki daun satu helaian yang tersusun dalam roset akar dan
terdiri dari 2 – 10 daun. Umumnya daun berwarna hijau, berbentuk seperti kipas, buah
pinggang atau ginjal, permukaan dan punggungnya licin, bagian tepinya agak melengkung
ke atas, bergerigi dan kadang-kadang berambut, tulangnya berpusat di pangkal dan
tersebar ke ujung, berdiameter 2 – 7 cm.Tangkai daun berbentuk seperti pelepah, agak
panjang berukuran 5 – 15 cm. Sepanjang tangkai daun beralur dan di pangkalnya terdapat
daun sisik yang sangat pendek, licin, tidak berbulu dan berpadu dengan pangkal tangkai
daun.
Pegagan yang simplisianya dikenal dengan sebutan Centella Herba memiliki
kandungan asiaticoside, thankuniside, isothankuniside, madecassoside, brahmoside,
brahmic acid, brahminoside, madasiatic acid, meso-inositol, centelloside, carotenoids,
hydrocotylin, vellarine, tanin serta garam mineral seperti kalium, natrium, magnesium,
kalsium dan besi. Diduga glikosida triterpenoida yang disebut asiaticoside merupakan
antilepra dan penyembuh luka yang sangat luar biasa. Zat vellarine yang ada memberikan
rasa pahit.
B. Pentingnya Masalah
Dalam pengertian modern, salep adalah krim yang digunakan untuk menyembuhkan
luka pada kulit yang luka atau terinfeksi. Seiring dengan kemajuan zaman beberapa salep
tidak hanya berfungsi menyembuhkan luka tetapi juga menjadi katalis dalam proses
penghilangan bekas luka.
Selama ini, tidak banyak manusia yang mengetahui manfaat lain dari pegagan
sebagai tumbuhan yang dapat menyembuhkan luka sekaligus menghilangkan bekas luka
yang efektif. Hanya saja pemanfaatan dari tumbuhan pegagan ini kurang bila dibandingkan
dengan tanaman herbal lainnya.
Salep obat luka yang beredar dipasaran sangat banyak, tetapi yang menggunakan
bahan aktif dari ekstrak pegagan sangat jarang. Sehingga, analisis terhadap kandungan
suatu produk salep obat luka perlu dilakukan terlebih dahulu agar masyarakat dapat
menggunakannya dengan aman dan nyaman.
2
C. Tujuan
Praktikum kimia terpadu dilaksanakan dengan tujuan untuk menambah pengetahuan
siswa-siswi Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK Bogor dalam mengetahui kandungan
komoditi yang biasa digunakan oleh masyarakat yang keberadaannya beredar bebas.
Analisis yang dilakukan bertujuan untuk mengetahui kualitas salep yang kami buat. Analisis
yang dilakukan mencakup keseluruhan parameter yang dicantumkan dalam keputusan
Menteri Kesehatan Republik Indonesia nomor: 661/menkes/sk/VII/1994 untuk sediaan salep
obat luka.
3
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Salep
Salep atau krim adalah sediaan setengah padat yang mudah dioleskan. Bahan
bakunya berupa sediaan galenik yang larut atau terdispersi homogen dalam dasar salep/
krim yang cocok dan digunakan sebagai obat luar.
a. Dasar Salep
Dasar salep yang digunakan sebagai pembawa dibagi dalam 4 kelompok, yaitu dasar
salep senyawa hidrokarbon, dasar salep serap, dasar salep yang dapat dicuci dengan air,
dasar salep larut dalam air. Setiap salep obat menggunakan salah satu dasar salep
tersebut.
1). Dasar Salep Hidrokarbon
Dasar salep ini dikenal sebagai dasar salep berlemak, antara lain vaselin putih dan
salep putih. Hanya sejumlah kecil komponen berair yang dapat dicampurkan
kedalamnya. Salep ini dimaksudkan untuk memperpanjang kontak bahan obat dengan
kulit dan bertindak sebagai pembalut penutup. Dasar salep hidrokarbon digunakan
terutama sebagai emolien, sukar dicuci, tidak mengering dan tidak tampak berubah
dalam waktu lama.
2). Dasar Salep Serap
Dasar salep serap ini dibagi dalam 2 kelompok. Kelompok pertama terdiri atas dasar
salep yang dapat bercampur dengan air membentuk emulsi air dalam minyak (parafin
hidrofilik dan lanolin anhidrat), dan kelompok kedua terdiri atas emulsi air dalam
minyak yang dapat bercampur dengan sejumlah larutan air tambahan (lanolin). Dasar
salep ini juga berfungsi sebagai emolien.
3). Dasar Salep yang dapat dicuci dengan air.
Dasar salep ini adalah emulsi minyak dalam air, antara lain salep hidrofilik (krim).
Karena mudah dicuci dari kulit atau dilap basah sehingga lebih dapat diterima untuk
dasar kosmetika. Beberapa bahan obat dapat menjadi lebih efektif menggunakan
dasar salep ini dari pada dasar salep hidrokarbon. Keuntungan lain dari dasar salep ini
4
adalah dapat diencerkan dengan air dan mudah menyerap cairan yang terjadi pada
kelainan dermatologik.
4). Dasar Salep Larut Dalam Air
Kelompok ini disebut juga dasar salep tak berlemak dan terdiri dari konstituen larut air.
Dasar salep jenis ini memberikan banyak keuntungannya seperti dasar salep yang
dapat dicuci dengan air dan tidak mengandung bahan tak larut dalam air, seperti
parafin, lanolin anhidrat atau malam. Dasar salep ini lebih tepat disebut gel.
Beberapa contoh – contoh dasar salep :
1 Dasar salephidrokarbon Vaselin putih ( white petrolatum : white soft parafin), vaselin
kuning (yellow petrolatum : yellow soft parafin), campuran
vaselin dengan cera, parafin cair, parafin padat, minyak
nabati.
2 Dasar salep serap
(dasar salep absorbsi)
Adeps lanae, unguentum simpleks (cera flava : oleum
sesami = 30 : 70), hydrophilic petrolatum ( vaselin alba : cera
alba : stearyl alkohol : kolesterol = 86 : 8 : 3 : 3 ).
3 Dasar salep dapat
dicuci dengan air
Dasar salep emulsi tipe m/a (seperti vanishing cream),
emulsifying ointment B.P., emulsifying wax, hydrophilic
ointment.
4 Dasar salep larut air Poly Ethylen Glycol (PEG), campuran PEG, tragacanth,
gummi arabicum.
Kualitas dasar salep yang baik adalah:
1. Stabil, selama dipakai harus bebas dari inkompatibilitas, tidak terpengaruh oleh
suhu dan kelembaban kamar.
2. Lunak, semua zat yang ada dalam salep harus dalam keadaan halus, dan seluruh
produk harus lunak dan homogen.
3. Mudah dipakai.
4. Dasar salep yang cocok.
5. Dapat terdistribusi merata.
5
b. Ketentuan Umum Cara Pembuatan Salep
(1) Peraturan Salep Pertama
Zat-zat yang dapat larut dalam campuran lemak dilarutkan kedalamnya, jika perlu
dengan pemanasan.
(2) Peraturan Salep Kedua
Bahan-bahan yang dapat larut dalam air, jika tidak ada peraturan-peraturan lain
dilarutkan lebih dahulu dalam air, asalkan air yang digunakan dapat diserap
seluruhnya oleh basis salep. Jumlah air yang dipakai dikurangi dari basis.
(3) Peraturan Salep Ketiga
Bahan-bahan yang sukar atau hanya sebagian dapat larut dalam lemak dan air, harus
diserbuk lebih dahulu kemudian diayak dengan pengayak B40.
(4) Peraturan Salep Keempat
Salep-salep yang dibuat dengan jalan mencairkan, campurannya harus digerus
sampai dingin.
B. Pegagan (Centella Asiatica)
Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) merupakan tanaman liar yang banyak tumbuh
di perkebunan, ladang, tepi jalan, pematang sawah ataupun di ladang agak basah (Besung,
2009). Pegagan tumbuh merayap menutupi tanah, tidak memiliki batang, tinggi tanaman
antara 10 – 50 cm. Pegagan memiliki daun satu helaian yang tersusun dalam roset akar dan
terdiri dari 2 – 10 helai daun. Daun berwarna hijau dan berbentuk seperti kipas,buah
berbentuk pinggang atau ginjal. Pegagan juga memiliki daun yang permukaan
danpunggungnya licin, tepinya agak melengkung ke atas, bergerigi, dan kadang-
kadangberambut, tulangnya berpusat di pangkal dan tersebar ke ujung serta daunnya
memilikidiameter 1-7 cm.
Pegagan memiliki tangkai daun berbentuk seperti pelepah, agak panjang dan
berukuran 5 - 15 cm. Pada tangkai daun pegagan dipangkalnya terdapat daun sisik yang
sangat pendek, licin, tidak berbulu, berpadu dengan tangkai daun. Pegagan memiliki bunga
putih atau merah muda yang tersusun dalam karangan yang berbentuk payung. Buah
pegagan berbentuk lonjong atau pipih, berbau harum dan rasanya pahit, panjang buah 2 –
6
2,5 mm. Buah pegagan berdinding agak tebal, kulitnya keras, berlekuk dua, berusuk
jelas,dan berwarna kuning.
Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) merupakan tumbuhan berbiji tertutup dan
berkeping dua. Merupakan tanaman herbal yang berpotensi dalam hal farmakologi.
Pegagan memiliki akar rimpang yang pendek serta mempunyai geragih, akar keluar dari
buku dan berupa akar tunggang berwarna putih. Stolon tumbuh dari system perakaran,
memilki ukuran yang panjang dan tumbuh menjalar . Pada setiap buku dari stolon akan
tumbuh tunas yang akan menjadi cikal bakal tumbuhan pegagan baru.
a. Klasifikasi Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban)
Berdasarkan pemaparan tentang pegagan diatas maka klasifikasi dari pegagan (Centella
asiatica (L.) Urban) adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Divisio : Spermatophyta
Sub divisio : Angiospermae
Class : Dicotyledone
Ordo : Umbilales
Family : Umbilaferae (Apiaceae)
Genus : Centella
Gambar 1. Centella asiatica (L.) Urban
b. Kandungan Bahan Aktif Pegagan
Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) mengandung berbagai bahan aktif
mempunyai peran penting untuk menyembuhkan penyakit, antara lain:
1) Triterpenoid saponin
2) Triterpenoid genin
3) Minyakessensial
4) Flavonoid
5) Fitosterol
Kandungan bahan aktif yang terpenting dari beberapa bahan aktif lainnya adalah
triterpenoid saponin. Bahan aktif triterpenoid saponin meliputi:
7
1) Asiatikosida
2) Centellosida
3) Madekossida
4) Asamasiatik
Pegagan (Centella asiatica (L) Urban) yang banyak digunakan sebagai obat alami
mengandung berbagai bahan aktif, kandungan bahan aktif itu adalah triterpenoid saponin.
Bahan aktif triterpenoid saponin itu meliputi asiatikosida, centellosida, madekossida,
asamasiatik dan komponen yang lain adalah minyak volatile, flavonoid, tanin, fitosterol,
asam amino dan karbohidrat.
Triterpenoid saponin pada pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) berfungsi untuk
meningkatkan aktivasi makrofag. Bahan triterpenoid saponin mampu memacu produksi
kolagen I, yaitu protein pemacu proses penyembuhan luka.
Asiatikosida diketahui dapat mempercepat penyembuhan luka dengan jalan
meningkatkan kandungan hidroksiprolin dan mukopolosakarida, meningkatkan sintesa
kolagen, angiogenesis, epitelisasi dan meningkatkan sintesa matriks ekstra seluler.
8
BAB III
METODE PEMBUATAN DAN ANALISIS
A. Metode Pembuatan
a. Proses ektraksi Asiaticosida
9
Daun pegagan
Keringkan (Oven 40 °C)
Maserasi dengan Etanol 70%
Dalam 24 jam sesekali diaduk
Saring dengan corong Buchner
Etanol diuapkan dengan rotary evaporator
Ekstrak kental
b. Proses Pembuatan
10
Fase Air
Gliserin, metil paraben, propil
paraben, TEA mentol
Lebur 70 °C
Fase Minyak
Vaselin putih, asam stearat
Lebur 70 °C
Homogenkan (Mixing)
Setelah stabil
Pada suhu 50 °C, ditambahkan ekstrak pegagan
Homogenkan (Mixing)
Salep Obat luka ekstrak pegagan
B. Metode Analisis
a. Analisis Kimia
1. Penetapan pH
Dasar
Suatu contoh dapat diketahui sifat asam/basa melalui derajat
keasaman (pH) yang dimilikinya. Dengan mengukur pH salep maka sifat
salep tersebut dapat diketahui.
Cara Kerja
1) Ditimbang salep ekstrak Pegagan sebanyak 5 gram.
2) Dilarutkan dengan menggunakan pelarut netral.
3) Dipanaskan hingga meleleh pada suhu 70 °C.
4) Diukur pHnya dengan menggunakan pH meter.
2. Identifikasi Zat Aktif Saponin
Dasar
Saponin yang tidak larut dalam eter akan memberikan reaksi yang
spesifik dengan air, yaitu menimbulkan busa.
Cara kerja
1) Dipipet ± 5 ml ekstrak Pegagan.
2) Dimasukan ke dalam kemudian ditambahkan air suling dimasukkan ke
dalam tabung reaksi dan dipanaskan.
3) Setelah dingin tabung dikocok kuat-kuat selama 1-2 menit. Terjadinya
busa dengan ketinggian sekitar 1 cm dan tetap selama 5 menit serta
tidak hilang pada penambahan satu tetes HCl encer menunjukan
adanya saponin.
11
3. Penetapan Kadar Sitronellal
Dasar
Dengan hidroksilamin ditambah HCl (NH2OH.HCl), sitronellal akan
bereaksi membentuk suatu senyawa oksima (N-OH) yang melepaskan air
dan HCl yang jumlahnya setara dengan sitronellal. Kemudian HCl dinetralkan
oleh KOH-alkohol berlebih terukur, sisa KOH-alkohol dititar dengan HCl
menggunakan indikator BTB sebagai penunjuk dengan titik akhir hijau
kekuningan.
Cara Kerja
1) Ditimbang ± 0,7 gram ekstrak Pegagan.
2) Ditambahkan 15 ml NH2OH.HCl netral.
3) Ditambahkan 10,00 ml KOH-alkohol berlebih terukur.
4) Ditambahkan batu didih.
5) Direfluks hingga mendidih selama 5 menit.
6) Didinginkan cepat, lalu dititar dengan HCl 0,5 N hingga titik akhir hijau
kekuningan.
7) Dikerjakan blanko (tidak perlu direfluks).
4. Cemaran Logam Timbal Dengan Metode AAS
Dasar
Contoh diabukan dan dijadikan garam kloridanya, lalu dengan bahan
bakar dibuat aerosol dan atom bebas. Atom-atom bebas dapat menyerap
energi cahaya sehingga membentuk atom yang tereksitasi dan absorbansi
sinar dapat dibaca pada spektrofotometer serapan atom.
Cara Kerja
1) Timbang 2 gram sampel ke cawan porselin.
2) Sampel ditambahkan 15-20 ml HNO3 (p), lalu di digest.
3) Lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml.
4) Dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml dan diimpitkan dengan air
suling. Untuk logam Pb dibuat deret standar dengan konsentrasi
0,00;1,00;2,00;4,00;8,00; dan 12,00 ppm.
5) Disiapkan blanko.
6) Larutan sampel, standar dan blanko ditambahkan 5 ml HNO3 4N lalu
diencerkan dengan air suling. Himpitkan dan homogenkan.
12
7) Diukur dengan AAS.
5. Uji Tanin/Polyphenol
Dasar
Tanin yang larut dalam air diambil filtratnya kemudian dibagi menjadi
2 bagian lalu diuji dengan menambahkan larutan FeCl3 yang apabila positif
mengandung tanin/polyphenol akan menghasilkan warna biru hitam.
Cara Kerja
1) Siapkan daun pegagan yang sudah digerus dengan air.
2) Dididihkan selama 5 menit, kemudian didinginkan.
3) Disaring dan diambil filtratnya.
4) Di uji adanya dengan penambahan FeCl3 1%.
6. Uji Glikosida Triterpenoid
Dasar
Glikosida Triterpenoid dilarutkan dengan eter yang akan diambil
residunya, kemudian diteteskan Liebermann-Burchard apabila positif maka
larutan akan memberikan warna ungu.
Cara kerja
1) Siapkan ekstrak pegagan.
2) Dimasukan ke tabung reaksi.
3) Di uji adanya dengan ditambahkan 5 mi asam asetat anhidrat dan 5
ml H2SO4 pekat (pereaksi Liebermann-Burchard).
b. Analisis Mikrobiologi
13
1. Penetapan Jumlah Kapang dan Khamir
Dasar
Pertumbuhan kapang dan khamir dalam media yang cocok, setelah
diinkubasikan pada suhu 25 °C atau pada suhu kamar selama 5 hari. Koloni
kapang buram dan berbulu, sedangkan koloni khamir berwarna putih dan
licin.
Cara Kerja
1) Ditimbang 5 gram salep pegagan ditambahkan 50 ml BPW
(pengenceran 10-1)
2) Dibuat pengenceran contoh salep Pegagan 10-2-10-3 atau
secukupnya.
3) Dipipet 0,1 ml dari masing-masing pengenceran ke dalam cawan petri
steril secara simplo dan duplo.
4) Dituangkan media PDA yang bersuhu 45 °C sebanyak 15-20 ml ke
cawan petri.
5) Dihomogenkan, dan dibiarkan membeku.
6) Diinkubasi dalam keadaan terbalik dengan suhu 25 °C selama 5 hari.
7) Dihitung koloni kapang dan khamir.
8) Dicatat jumlah kapang dan khamir per ml contoh.
2. Penetapan Uji Salmonella sp. , E. coli, dan S. aureus
Dasar
Pertumbuhan bakteri mesofil Salmonella sp., E. coli, dan S. aureus
setelah contoh diinkubasikan dalam pembenihan media yang cocok selama
24-48 jam pada suhu 35-36 °C.
Cara Kerja
1) Dimasukkan 1 ml pengenceran contoh salep Pegagan ke dalam
cawan petri.
2) Dituangkan 10-15 ml media selektif sesuai bakteri yang diinginkan, E.
coli dengan Mc. Conkey Agar, S. aureus dengan media Manitol Salt
Agar dan Salmonella sp. Dengan Brilliant Green Agar yang bersuhu
45 °C kedalam cawan petri.
14
3) Cawan petri digoyangkan hingga media dan contoh homogen, lalu
dibiarkan media membeku.
4) Diinkubasikan dalam keadaan terbalik pada suhu 37 °C selama 24
jam.
5) Diamati dan dicatat perubahan yang terjadi, hasil dicocokkan dengan
tabel dibawah ini:
3. Penetapan Angka Lempeng Total
Dasar
.Perhitungan bakteri dengan menggunakan pengenceran 10-1 -10-3
dimana contoh dipipet tiap 1 ml kedalam petri lalu dituangkan media PCA.
Kemudian diinkubasikan dalam pembenihan yang cocok selama 24-48 jam
pada suhu 35-36 °C.
Cara Kerja
1) Disiapkan 5 buah tabung reaksi dan 7 buah cawan petri steril.
2) Ditimbang 5 gram contoh larutkan dalam labu ukur dengan 50 ml BPW
menjadi 10-1.
3) Disiapkan media PCA (Plate Count Agar) yang hangat 40 °C.
4) Dipipet 9 ml larutan BPW, kemudian dimasukan ke dalam tabung
reaksi secara aseptik dan diberi label pengenceran 10-2 ,10-3 dan
blanko.
5) Dipipet 1 ml contoh, dimasukan ke dalam tabung reaksi 10-1 kemudian
di kocok dan dihomogenkan.
6) Dari tabung 10-1 dipipet 1 ml kemudian dimasukan ke dalam tabung
reaksi 10-2 dikocok dihomogenkan.
15
Koloni Mikroorganisme
Koloni kecil transparan tidak berwarna atau
pink sampai putih kadang di keliling zona
pink sampai merah.
Salmonella sp.
Koloni merah sedikit keunguan. E. coli
Koloni kuning disekitar zona bening. Staphilococcus aureus
7) Diulang pekerjaan no. 4 sampai tabung reaksi 10-3.
8) Dipipet 1 ml dari masing-masing pengenceran contoh ke dalam cawan
petri steril secara simplo dan duplo.
9) Dituangkan sebanyak 12-15 ml media PCA yang telah dicairkan ke
dalam cawan petri.
10) Digoyangkan atau dihomogenkan cawan petri dengan hati-hati sampai
contoh tercampur rata dengan media.
11) Dikerjakan pemeriksaan blanko dengan cara dipipet 1 ml larutan
fisiologis ke dalam cawan petri, kemudian dituangkan 12-15 ml media
PCA ke dalam cawan petri tersebut.
12) Didiamkan hingga campuran didalam cawan petri membeku.
13) Dimasukkan semua cawan petri ke dalam inkubator dengan keadaan
terbalik dan diinkubasikan pada suhu 34-36 °C selama 24-48 jam.
14) Dicatat pertumbuhan koloni pada setiap cawan petri.
15) Dicatat angka lempeng total per-ml contoh.
4. Uji Potensi Terhadap Obat
Dasar
Kemampuan daya desinfektan (antibiotik) berbeda-beda dari
konsentrasi zat terhadap pertumbuhan bakteri kemudian diinkubasikan pada
suhu 37 °C selama 24 jam.
Cara Kerja
1) Siapkan suspensi bakteri E. coli yang telah dirontokkan dan
dipindahkan ke dalam tabung kosong.
2) Ditambahkan ± 10 ml BPW (tinggi BPW ½ tabung).
3) Setelah suspensi bakteri siap lalu siapkan media antibiotik no. 1 (AM
1).
4) Kemudian tambahkan suspensi bakteri sebanyak 1 ml ke dalam
kedua cawan petri (beri label).
5) Ditambahkan media ke dalam kedua cawan petri masing-masing 20
ml.
6) Biarkan beku.
7) Lalu buatlah lubang (sumur) sebanyak 3 buah menggunakan cock
borrer (pipa kaca), beri label (low, medium, high).
16
8) Teteskan contoh pada setiap lubang sebanyak 0,1 ml dengan
konsentrasi 4 mcg, 8 mcg, 16 mcg.
9) Diamkan 15 menit agar contoh berdifusi.
10) Ukur zona hambat (bening) pada setiap lubang (konsentrasi).
c. Analisis Fisika
1. Penetapan Homogenitas
Dasar
Suatu contoh baru dapat dikatakan homogen bila campuran partikel-
partikelnya tersebar secara merata. Dengan melihat sampel yang telah
diratakan diatas suatu kaca alas maka tingkat homogenitasnya dapat
diketahui.
Cara Kerja
1) Ditimbang 2 gram salep Pegagan.
2) Diratakan diatas sebuah kaca alas yang telah disiapkan.
3) Tingkat homogenitas diamati.
*) Semua penetapan diatas berdasarkan keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
nomor: 661/menkes/sk/VII/1994 kecuali uji kualitatif, cemaran logam Pb dan kadar
sitronellal.
17
BAB IV
PELAKSANAAN
A. Pelaksanaan PKT
Praktik kimia terpadu yang berjudul “Pembuatan dan Analisis Salep dengan
Bahan Aktif Ekstrak Pegagan” dilaksanakan oleh kelompok PKT 46 kelas XIII-4
yang terdiri dari:
Ketua : Ayu Wulandari Suyoto
Anggota : 1. Arrovi Septian
2. Tamara Dayu Oktaviani
B. Tempat pelaksanaan
Kegiatan PKT ini dilaksanakan di Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK Bogor,
jalan binamarga I Ciheuleut, kotak POS 2017, Baranangsiang, Bogor timur 16143,
telepon (0251) 8323128 dengan menggunakan sarana antara lain:
1. Laboratorium PKT 2
2. Laboratorium Analisis Instrumen
3. Laboratorium Mikrobiologi
C. Waktu Pelaksanaan
Waktu pelakasanaan PKT yang dilakukan dari bulan Juli - Oktober dilihat pada
tabel berikut:
18
Rencana Kegiatan PKT 46 Kelas XIII-4
Tahun Ajaran 2012/2013
No. KegiatanJuli Agustus September Oktober
ParafII
III IV V I II III
IV V I II III IV
V I II III IV V
1. Pembagian kelompok, materi, pembimbing, materi, laboratorium PKT, serta penyelesaian SK PKT
2. Rapat pembimbing PKT3. Konsultasi dengan pembimbing dalam hal pemilihan judul
dan studi literatur
4. Libur awal puasa
5. Qiyamu ramadhan
6. Pengumpulan proposal
7. Pelaksanaan PKT/Project work
8. Libur hari raya Idul Fitri
9. Lanjutan pelaksanaan PKT
10. Kunjungan industri
11. Lanjutan pelaksanaan PKT
12. Wisudan lulusan angkatan 54
13. Pembuatan makalah, konsultasi laporan, dan latihan seminar
14. Seminar PKT15. Pelaksanaan UAS dan ujian mid semester
16. Penyerahan laporan proyek tugas akhir PKT
19
BAB V
ALAT DAN BAHAN
A. BahanBerikut ini adalah daftar dari bahan-bahan yang kami perlukan selama sintesis:
Tabel 1. Bahan-Bahan Untuk Pembuatan
Berikut ini adalah daftar dari bahan- bahan yang kami perlukan selama analisis:
Tabel 2. Bahan-bahan Analisis Mikrobiologi
No. Metode Parameter Uji Bahan Jumlah1. Penetapan Jumlah Kapang dan Khamir Contoh salep
Larutan fisiologisLarutan BPWMedia PDAAlkohol 70%Spiritus
5 gram10 ml100 ml150 ml20 ml20 ml
2. Penetapan Uji Salmonella sp.E. coliS. aureus
Contoh salepLarutan fisologisMedia Mc. Conkey AgarMedia Briliant Green AgarMedia Manitol Salt AgarAlkohol 70%Spiritus
1 gram10 ml40 ml40 ml40 ml20 ml20 ml
3. Angka Lempeng Total Jumlah total bakteri Contoh salepLarutan fisiologisMedia PCAAlkohol 70%Spiritus
5 gram10 ml150 ml20 ml20 ml
4. Potensi terhadap Obat - Contoh salepHCl 0,1 NAntibiotik medium tipe 1Air sterilBuffer 5,8
5 gram300 ml100 ml50 ml50 ml
Tabel 3. Bahan-bahan Analisis Kimia
20
No Nama bahan Jumlah1. Pegagan 1 Kg2. mentol 50 ml3. Asam stearat 50 gram4. Gliserin 50 gram5. TEA 10 gram6. Metil Paraben (nipagin) 1 gram7. Propil paraben (nipasol) 1 gram8. Vaselin putih 500 gram9. Etanol 70 % 700 ml
No. Metode Parameter Uji Bahan Jumlah1. pH metri pH Contoh salep
Air sulingBuffer pH 4Buffer pH 7
1 gram100 ml50 ml50 ml
2. - Saponin Ekstrak PegaganHCl 1 NAir suling
2 ml5 ml20 ml
3. - Tanin/Polyphenol ekstrak PegaganAir sulingFeCl3
2 ml50 ml10 ml
4. - Glikosida Triterpenoid Ekstrak pegaganAir sulingAsam asetat anhidratH2SO4 (p)
1 gram50 ml5 ml5 ml
5. Titrasi kembali Kadar sitronellal Ekstrak PegaganNH2OH.HClKOH-alkoholHCl 0,5 NIndikator BPBAir suling
2 gram50 ml50 ml70 ml3 ml250 ml
6. Cemaran Pb, Zn, Cu Salep PegaganAir sulingLarutan std. Cu 1000 ppmLarutan std. Zn 1000 ppmLarutan std. Pb 1000 ppmHNO3pekatHNO3 4 N
2 gram1500 ml30 ml30 ml30 ml50 ml70 ml
Tabel 4. Bahan-bahan Analisis Fisika
No. Metode Parameter Uji Bahan Jumlah1. Non Instrumental Tekstur Contoh salep 5 gram2. Non Instrumental Homogenitas Contoh salep 5 gram
B. Alat
Berikut ini adalah daftar dari alat-alat yang kami perlukan selama pembuatan:
Tabel 5. Alat-alat Sintesis
No. Jenis Alat Jumlah1 Alat timbang (neraca) 12 Wadah kaleng
tertutup1
3 Microwave 14 Pengaduk 15 Rotary evaporator 16 Mixer 17 Wadah kemasan 30
Berikut ini adalah daftar dari alat-alat yang kami perlukan selama analisis:
21
Tabel 6. Alat-alat Analisis
No. Metode Parameter Uji Jenis Ukuran Jumlah1. Penetapan Jumlah Kapang dan Khamir Tabung reaksi
Cawan petriKoranKapasKertas rotiTali kasurPembakar spiritusOvenRak tabungSprayerLabu ukurLabu semprotErlenmeyerAutoklafNeraca kasarPenangas airGelas ukurBulbPipet serologiPipet serologiInkubatorColoni counterLemari es
----------100 ml-100 ml---50 ml-10 ml1 ml---
58311111111111111111111
2. Penetapan Uji Salmonella sp.E. coliS. aureus
Tabung reaksiCawan petriKoranKapasKertas rotiTali kasurPembakar spiritusOvenRak tabungSprayerLabu ukurLabu semprotErlenmeyerAutoklafNeraca kasarPenangas airGelas ukurBulbPipet serologiPipet serologiInkubatorColoni counterLemari es
----------100 ml-100 ml---50 ml-10 ml1 ml---
58311111111111111111111
3. Angka Lempeng Total Jumlah total bakteri Tabung reaksiCawan petriKoranKapas
----
5831
22
Kertas rotiTali kasurPembakar spiritusOvenRak tabungSprayerLabu ukurLabu semprotErlenmeyerAutoklafNeraca kasarPenangas airGelas ukurBulbPipet serologiPipet serologiInkubatorColoni counterLemari es
------100 ml-100 ml---50 ml-10 ml1 ml---
1111111111111111111
4. Potensi terhadap obat - Labu ukurLabu ukurLabu ukurLabu ukurTabung reaksiBakiRak tabungCawan petriErlenmeyerPembakar spiritusPipet tetesGelas ukurPipet serologiPipet serologiPipa cock barrierInkubator
250 ml100 ml50 ml25 ml----200 ml--25 ml10 ml1 ml--
1111611221111111
5. pH metri pH Pipet tetesPiala gelaspH meterLabu semprot
-400 ml--
1111
6. - Saponin Tabung ReaksiPipet TetesTekluLabu Semprot
----
3111
7. - Tanin/Polyphenol Tabung reaksiPenangas airPipet tetesPiala gelas
---400 ml
1111
8. - Glikosida Triterpenoid
Tabung reaksiPenangas airPipet tetesPiala gelas
---400 ml
1111
9. Intrumen Cemaran Pb, Cu, Zn Neraca elektrikCawan PorselainSegitiga PorsellainLabu semprot
----
1111
23
Labu ukurPiala gelasTekluKaki tigaSegitiga PorselainGelas ukurBuretStatifKlemCorongPipet tetesPipet volumetriPipet VolumetriKertas berlipatAAS
100 ml400 ml---50 ml50 ml----10 ml25 ml--
841111111111111
10. Titrasi kembali Kadar sitronellal ErlenmeyerNeracaLabu semprotPipet volumePiala gelasBuretStatifKlem
100 ml--10 ml400 ml50 ml--
31112111
11. Non Instrumental Tekstur Piring kecilBaki
--
31
12. Non Instrumental Homogenitas Piring kecilBaki
--
31
BAB VI
ANGGARAN
24
Berikut ini adalah tabel rencana total pengeluaran bahan yang dilakukan untuk pembuatan dan analisis salep obat luka:
No Nama bahan Jumlah Harga1 Pegagan 1 Kg Rp 20.0002 Mentol 50 ml Rp 2.0003 Asam stearat 50 gram Rp 1.5004 Gliserin 50 gram Rp 12005 TEA 10 gram Rp 3.0006 Metil Paraben (Nipagin) 5 gram Rp 6007 Propil paraben (nipasol) 5 gram Rp 5008 Vaselin putih 500 gram Rp 17.5009 Etanol 70 % 1 Liter Rp 40.000
Jumlah Rp 85.500 Tabel 7. Biaya Pembuatan
Tabel 8. Biaya Analisis
No Nama Bahan Konsentrasi Jumlah Harga1 Contoh salep - 40 gram Rp 8.0002 Larutan fisiologis 0,85 % 1 gram Rp7003 Media PCA - 5 gram Rp 13.5004 Media PDA - 5 gram Rp 10.0005 Media Mc. Conkey - 3 gram Rp 7.2006 Media BGA - 3 gram Rp 12.4507 Media MSA - 3 gram Rp 17.2008 Alcohol 70 % 150 ml Rp 21.0009 Spirtus - 100 ml Rp 1.000
10 Buffer pH 5,8 - 50ml -11 Antibiotk medium 1 - 100 ml -12 Buffer Pepton Water (BPW) - 100 ml Rp 135.00013 HCl 0,1 N 300 ml Rp 80014 HCl 0,5 N 100 ml Rp 1.20015 Buffer pH 4 - 50 ml Rp 32.00016 Buffer pH 7 - 50 ml Rp 30.00017 Indicator BPB - 0,2 gram Rp 31.00018 NH2OH.HCl 3% 2,5 gram Rp 9.80019 KOH-alkohol 0,5 N 2 gram Rp 60020 Asam asetat anhidrat - 5 ml Rp 7.40021 H2SO4 pekat 98% 5 ml Rp 80022 HNO3 pekat 65% 50 ml Rp 12.80023 HNO3 4N 70 ml Rp 5.00024 FeCl3 1% 0,2 gram Rp 50025 PbNO3 1000 ppm 0,5 gram Rp 1.00026 CuSO4. 5H2O 1000 ppm 0,5 gram Rp 50027 ZnSO4. 7H2O 1000 ppm 0,5 gram Rp 50028 Air Suling - 3 liter Rp 7.50029 Biaya takterduga Rp 50.000
Jumlah Rp 417.410
25
Jumlah Total Biaya Pembuatan dan Analisis Rp. 502.910
26
BAB VII
DAFTAR PUSTAKA
Prawira Sujanto, Drs. Sunarto. 1977. Materia Medika Indonesia Jilid I. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Wahjoedi, Bambang dan Pudjiastuti. 2005. Prosiding Seminar nasional Tumbuhan
Obat Indonesia XXVIII Review Hasil Penelitian Pegagan (Centella asiatica (L)
Urban). Bogor: Badan Litbang Kesehatan Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.
http://herbaltama.com
http://id.wikipedia.org/pegagan
27
![KEANEKARAGAMAN TANAMAN PEGAGAN (Centella asiatica L. …etheses.uin-malang.ac.id/17438/1/14620073.pdf · 2020. 6. 24. · keanekaragaman tanaman pegagan (centella asiatica l. [urb.])pada](https://img.dokumen.tips/doc/110x75/60991324f9788930be49acb9/keanekaragaman-tanaman-pegagan-centella-asiatica-l-2020-6-24-keanekaragaman.jpg)
