Naskah Proposal Penelitian

8/18/2019 Naskah Proposal Penelitian

1/90

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Penyakit disentri merupakan tipe diare yang berbahaya dan sering kali

menyebabkan kematian. Di dunia sekurangnya 200.000 kasus dan 65.000

kematian terjadi akibat disentri basiler pada anak-anak di bawah umur 5 tahun.

Pada tahun 1989, terdapat 25.010 kasus disentri yang dilaporkan ke Center of

Disease Control (CDC), 80% disebabkan oleh Shigella sonnei, sisanya terutama

disebabkan oleh Shigella flexneri, sedangkan Shigella dysentriae dan Shigella

boydii menyebabkan kurang dari 2% dari seluruh infeksi Shigella di Amerika

Serikat. Hal ini berbalikan dengan kejadian di negara-negara yang berkembang

yang higienis dan sanitasinya jelek, Shigella dysentriae dan Shigella boydii

merupakan spesies yang lebih sering diisolasi. Di Indonesia dilaporkan 5% dari

3.848 orang penderita diare berat menderita disentri basiler. Pada data Dinas

Kesehatan Provinsi Kalimantan Tengah tahun 2013 menunjukkan prevalensi diare

berdarah di Provinsi Kalimantan Tengah adalah 1.754 kasus dan di Kota Palangka

Raya adalah 416 kasus.1,2,3,4,5

Bakteri Shigella dysenteriae merupakan bakteri Gram negatif, berbentuk

batang pendek atau basil tunggal, tidak berspora, tidak berflagel sehingga tidak

bergerak. Bakteri ini menghasilkan eksotoksin yang mempunyai sifat neurotoksik dan enterotoksis sehingga anak-anak yang terjangkit disentri basiler dapat

menderita kejang. Eksotoksin ini adalah protein terlarut yang tidak tahan panas.

Darah dan lendir dalam tinja penderita penyakit diare yang mendadak merupakan

petunjuk kuat bagi disentri basiler.1,6

Sejauh ini, upaya yang dilakukan untuk mengobati penyakit disentri akibat

bakteri S. dysenteriae terbatas pada antibiotik. Selain memberikan keuntungan

bagi manusia, namun antibiotik juga menimbulkan dampak negatif yaitu


2/90

kemampuan bakteri dalam mempertahankan diri sehingga makin sulit untuk

diberantas. Selain itu penggunaan antibiotik dalam jangka panjang dan tidak tepat

dalam dosis juga dapat menganggu fungsi kinerja pada organ ginjal, jantung, dan

hati. leh karena itu, perlu dikembangkan bahan nabati yang diharapkan lebih

efektif, efisien, dan aman dalam upaya menghambat pertumbuhan bakteri S.

dysenteriae.!,"

Salah satu alternatif bahan nabati yang berpotensi mempunyai akti#itas

sebagai antibakteri adalah kunyit putih $ Kampferia rotunda L.% yang dapat

digunakan sebagai obat tradisional di &ndonesia termasuk di 'alimantan (engah.

Berdasarkan pengertian obat tradisional menurut )eraturan *enteri kesehatan

+omor 6*enkes)er/100 )asal 1 menyebutkan bah2a obat tradisional

adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan tumbuhan, bahan he2an,

bahan mineral, sediaan galenik atau 3ampuran dan bahan-bahan tersebut, yang

se3ara tradisional telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan

pengalaman.0,1,11

'unyit putih $ Kaempferia rotunda L.% merupakan tanaman semak yang

tumbuh semusim yang memiliki kandungan kimia yang akan menimbulkan efek

farmakologi jika dikonsumsi atau digunakan sebagai obat herbal diantaranya

antidiare, antiinflamasi, immunostimulan, antikanker dan penurunan panas

badan.11

)ada penelitian yang telah dilakukan )uspitasari dalam menguji daya

antibakteri minyak atsiri rimpang kunir putih $ Kaempferia rotunda L.% terhadap

Staphylococcus aureus 4(55 07 dan Escherichia coli 4(55 0 dengan

metode difusi teknik sumuran dan dilanjutkan dengan metode dilusi untuk menentukan kadar bunuh minimal $'B*% adalah 18 dan 78 untuk masing-

masing bakteri.1

Berdasarkan studi pendahuluan yang telah dilakukan di pasar 'ahayan,

)alangka 9aya berupa kuesioner dengan jumlah responden sebanyak 1 orang,

diperoleh hasil bah2a "8 responden mengenalnya dengan sebutan kunyit putih,

08 mengetahui manfaat kunyit putih sebagai obat tradisional, 68 informasi

tersebut didapatkan se3ara turun-menurun, 8 sebagai minuman yang

1

2


3/90

menyehatkan tubuh, 8 menggunakannya sebagai obat mual atau muntah, dan

8 sebagai obat diare, 08 menggunakan bagian rimpang, "8 membelinya di

pasar, "8 mengelolanya dengan 3ara direbus kemudian airnya diminum.

Berdasarkan penjelasan di atas, peneliti tertarik untuk meneliti uji akti#itas

antibakteri ekstrak etanol rimpang kunyit $ Kaempferia rotunda L.) terhadap

bakteri Shigella dysentriae dengan metode dilusi.

1.2 Rumusan Masalah

1. Berapa kadar hambat minimum $':*% ekstrak etanol rimpang kunyit

putih $ Kaempferia rotunda L.) terhadap bakteri Shigella dysentriae dengan

metode dilusi 3air;. Berapa kadar bunuh minimum $'B*% ekstrak etanol rimpang kunyit putih

$ Kaempferia rotunda L.) terhadap bakteri Shigella dysentriae dengan

metode dilusi padat;

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

*engetahui akti#itas antibakteri ekstrak etanol rimpang kunyit putih

$ Kaempferia rotunda L.) terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae.1.3.2 Tujuan husus

1. *engetahui kadar hambat minimum $':*% ekstrak etanol rimpang kunyit


metode dilusi 3air.2. *engetahui kadar bunuh minimum $'B*% ekstrak etanol rimpang kunyit


metode dilusi padat.

1.! Man"aat Penelitian

)enelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi bagi masyarakat

dan tenaga kesehatan tentang tanaman rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda

L.) memiliki manfaat sebagai antibakteri.

BAB 2

T#N$AUAN PU%TAA

3


4/90

2.1 Bakteri Shigella dysentriae

Bakteri Shigella dysentriae merupakan penyebab disentri basiler yang

ditemukan oleh ahli mikrobiologi


5/90

%. Shigella boydii

Se3ara genetik, bakteri Shigella tidak dapat dibedakan dengan E. coli.

'ebanyakan ahli taksonomi meyakini bah2a kedua organisme ini merupakan

spesies yang sama. +amun, karena kebanyakan galur Shigella menyebabkan

disentri basiler, sedangkan E. coli tidak. Shigella dibagi menjadi empat

serogroup, yaitu >6,17,1

1. Serogroup 4 > S. dysenteriae

. Serogroup B > S. flexneri

7. Serogroup 5 > S. boydii

. Serogroup D > S. sonnei

Serogroup 4, B, 5 se3ara biokimia ada kemiripan, sementara serogroup D

berbeda. Semua Shigella dapat menyebabkan disentri basiler, tetapi beratnya

penyakit, mortalitas dan epidemiologinya, ber#ariasi pada masing-masing spesies.17,1

2.1.2 M&r"&l&gi ' %i"at Biakan

Shigella dysenteriae merupakan bakteri berbentuk batang, ramping, tidak

berkapsul, tidak bergerak, tidak membentuk spora, dan Gram negatif. Bentuk

3o3obasil dapat terjadi pada biakan muda. 1,,17

Bakteri ini bersifat anaerob fakultatif tetapi paling baik tumbuh se3ara

aerob. 'oloninya kon#eks, bulat, transparan dengan pinggir-pinggir utuh

men3apai diameter kira-kira mm dalam jam $Gambar .1%. Bakteri ini sering

ditemukan pada perbenihan diferensial karena ketidakmampuannya meragikan

laktosa.1,,1

(am)ar 2.1 M&r"&l&gi Shigella dysenteriae

5


6/90


7/90

yang berbeda bila dibandingkan dengan disentri basiler klasik, dimana yang

terkena adalah usus besar. Beberapa penelitian menunjukkan peranan enterotoksin

pada disentri basiler belum jelas. Beberapa mutan Shigella dysenteriae tipe 1 yang

nontokhnsigenik tetapi mempunyai daya in#asi dapat menimbulkan penyakit.

Diduga enterotoksin bertanggung ja2ab atas terjadinya &atery diarrhea pada

tahap dini dan kemudian timbul gejala klasik disentri basiler setelah organisme

meninggalkan usus halus dan masuk ke usus besar. 6,17,1

7. Eksotoksin

Shigella dysenteriae tipe 1 $basil Shiga% memproduksi eksotoksin tidak

tahan panas yang dapat mempengaruhi saluran pen3ernaan dan susunan saraf

pusat. Eksotoksin merupakan protein yang bersifat antigenik $merangsang

produksi antitoksin% dan mematikan he2an per3obaan. Sebagai enterotoksin, ?at

ini dapat menimbulkan diare, sebagaimana halnya enterotoksin E coli yang tak

tahan panas, mungkin dengan mekanisme yang serupa. )ada manusia, eksotoksin

ini juga menghambat absorpsi gula dan asam amino pada usus ke3il. Sebagai

neurotoksinC ?at ini ikut berperan dalam menyebabkan keparahan penyakit dan

sifat fatal infeksi Shigella dysenteriae, serta menimbulkan reaksi susunan saraf

pusat $meningismus, koma%. 6,17,1

)enderita dengan infeksi Shigella flexneri atau Shigella sonnei membentuk

antitoksin yang menetralkan eksotoksin S.dysentriae in 'itro. 4kti#itas yang

bersifat toksik ini berbeda dengan sifat in#asif Shigella pada disentri. 'eduanya

dapat bekerja berurutan, toksin menyebabkan diare a2al yang en3er dan tidak

berdarah, dan in#asi usus besar mengakibatkan disentri lebih lanjut dengan tinja

yang disertai darah dan nanah. 6,17,1

. +eurotoksin dan Sitotoksin

+eurotoksin dan sitotoksin adalah protein eksotoksin yang dikeluarkan

oleh Shigella dysenteriae tipe 1, Shigella flexneri tipe a dan Shigella sonnei.

)eranan neurotoksin dan sitotoksin pada patogenesis penyakit disentri basiler

belum jelas. 6,17,1

2.2 Disentri

7


8/90

Disentri berasal dari bahasa unani, yaitu dys $gangguan% dan enteron

$usus%, yang berarti radang usus yang menimbulkan gejala meluas dengan gejala

buang air besar dengan tinja berdarah, diare en3er dengan #olume sedikit, buang

air besar dengan tinja ber3ampur lender $mucus% dan nyeri saat buang air besar

$tenesmus%.6

Disentri merupakan peradangan pada usus besar yang ditandai dengan

sakit perut dan buang air besar yang en3er se3ara terus menerus $diare% yang

ber3ampur lendir dan darah.6

Disentri merupakan suatu infeksi yang menimbulkan luka yang

menyebabkan tukak terbatas di 3olon yang ditandai dengan gejala khas yang

disebut sebagai sindroma disentri, yakni> 1% sakit di perut yang sering disertai

dengan nyeri saat buang air besar, % buang air besar, dan 7% tinja mengandung

darah dan lendir.1

2.2.1 E*iemi&l&gi

Di 4merika Serikat, insidensi penyakit ini rendah. Setiap tahunnya kurang

dari . kasus yang dilaporkan ke (enters for isease (ontrol * 5D5%. Di

Bagian )enyakit Dalam 9S) )alembang selama 7 tahun $100-100% ter3atat di

3atatan medis, dari !" kasus yang dira2at karena diare ada 16 kasus yang

disebabkan oleh disentri basiler. Sedangkan hasil penelitian yang dilakukan di

beberapa rumah sakit di &ndonesia dari


9/90

Shigella. S.sonnei adalah satu-satunya yang mempunyai serotipe tunggal. 'arena

kekebalan tubuh yang didapat bersifat serotipe spesifik, maka seseorang dapat

terinfeksi beberapa kali oleh tipe yang berbeda. Genus ini memiliki kemampuan

mengin#asi sel epitel intestinal dan menyebabkan infeksi dalam jumlah 1 -17

organisme. )enyakit ini kadang-kadang bersifat ringan dan kadang-kadang berat.

Suatu keadaan lingkungan yang jelek akan menyebabkan mudahnya penularan

penyakit. Se3ara klinis mempunyai tanda-tanda berupa diare, adanya lendir dan

darah dalam tinja, perut terasa sakit dan tenesmus.6,17,1

2.2.3 Pat&genesis an Pat&"isi&l&gi

Semua strain Bakteri Shigella menyebabkan disentri, yaitu suatu keadaan

yang ditandai dengan diare, dengan konsistensi tinja biasanya lunak, disertai

eksudat inflamasi yang mengandung leukosit polymorfonuclear $)*+% dan

darah.6

Bakteri Shigella se3ara genetik bertahan terhadap p: yang rendah, maka

dapat mele2ati barrier asam lambung. Ditularkan se3ara oral melalui air,

makanan, dan lalat yang ter3emar oleh ekskreta pasien. Setelah mele2ati lambung

dan usus halus, bakteri ini mengin#asi sel epitel mukosa kolon dan berkembang

biak didalamnya.,6,1

'olon merupakan tempat utama yang diserang Shigella namun ileum

terminalis dapat juga terserang. 'elainan yang terberat biasanya di daerah

sigmoid, sedang pada ileum hanya hiperemik saja. )ada keadaan akut dan fatal

ditemukan mukosa usus hiperemik, lebam dan tebal, nekrosis superfisial, tapi

biasanya tanpa ulkus. )ada keadaan subakut terbentuk ulkus pada daerah folikel

limfoid, dan pada selaput lendir lipatan trans#ersum didapatkan ulkus yangdangkal dan ke3il, tepi ulkus menebal dan infiltrat tetapi tidak berbentuk ulkus

bergaung.6

S.dysentriae! S.flexeneri! dan S.sonei menghasilkan eksotoksin antara lain

ShE(1, ShE(, dan toksin Shiga, yang mempunyai sifat enterotoksik, sitotoksik,

dan neurotoksik. Enterotoksin tersebut merupakan salah satu faktor #irulen

sehingga bakteri lebih mampu mengin#asi sel eptitel mukosa kolon dan

menyebabkan kelainan pada selaput lendir yang mempunyai 2arna hijau yang

9


10/90

khas. )ada infeksi yang menahun akan terbentuk selaput yang tebalnya sampai 1,

3m sehingga dinding usus menjadi kaku, tidak rata dan lumen usus menge3il.

Dapat terjadi perlekatan dengan peritoneum.6

2.2.! (ejala linis

)ada disentri basiler, masa tunas berkisar antara ! jam sampai ! hari. Fama

gejala rerata ! hari sampai minggu. )ada fase a2al pasien mengeluh nyeri perut

ba2ah, diare disertai demam yang men3apai 5. Selanjutnya diare berkurang

tetapi tinja masih mengandung darah dan lendir, tenesmus, dan nafsu makan

menurun.6,17

Bentuk klinis dapat berma3am-ma3am dari yang ringan, sedang sampai

yang berat. Sakit perut terutama di bagian sebelah kiri, terasa melilit diikuti

pengeluaran tinja sehingga mengakibatkan perut menjadi 3ekung. Bentuk yang

berat $ fulminating cases% biasanya disebabkan oleh S. dysentriae. Gejalanya

timbul mendadak dan berat, berjangkitnya 3epat, berak-berak seperti air dengan

lendir dan darah, muntah-muntah, suhu badan subnormal, 3epat terjadi dehidrasi,

renjatan septik dan dapat meninggal bila tidak 3epat ditolong. 4kibatnya timbul

rasa haus, kulit kering dan dingin, turgor kulit berkurang karena dehidrasi. *uka

menjadi ber2arna kebiruan, ekstremitas dingin dan #iskositas darah meningkat

$hemokonsentrasi%. 'adang-kadang gejalanya tidak khas, dapat berupa seperti

gejala kolera atau kera3unan makanan.6,17

'ematian biasanya terjadi karena gangguan sirkulasi perifer, anuria dan

koma uremik. 4ngka kematian bergantung pada keadaan dan tindakan

pengobatan. 4ngka ini bertambah pada keadaan malnutrisi dan keadaan darurat

misalnya kelaparan. )erkembangan penyakit ini selanjutnya dapat membaik se3ara perlahan-lahan tetapi memerlukan 2aktu penyembuhan yang lama.6,17

)ada kasus yang sedang keluhan dan gejalanya ber#ariasi, tinja biasanya

lebih berbentuk, mungkin dapat mengandung sedikit darahlendir. Sedangkan

pada kasus yang ringan, keluhangejala tersebut di atas lebih ringan. Berbeda

dengan kasus yang menahun, terdapat serangan seperti kasus akut se3ara

menahun. 'ejadian ini jarang sekali bila mendapat pengobatan yang baik.6,17

2.2./ Penatalaksanaan

10


11/90

)rinsip dalam melakukan tindakan pengobatan adalah istirahat, men3egah

atau memperbaiki dehidrasi dan pada kasus yang berat diberikan antibiotika.6,17

1. 5airan dan Elektrolit

Dehidrasi ringan sampai sedang dapat dikoreksi dengan 3airan rehidrasi

oral.


12/90

yang multiresisten terhadap obat-obat, diberikan asam nalidiksik dengan dosis 7 H

1 gramhari selama hari. 6,17

2.3 un+it Putih 0 Kaempferia rotunda L.

'unyit putih $ Kaempferia rotunda L.) atau kadang kala disebut kunir

putih, adalah sejenis rempah-rempah rimpang yang masih berkerabat dekat

dengan ken3ur. Berbeda dengan ken3ur, yang banyak dipakai sebagai bumbu

masak, kunyit putih lebih khusus dipakai untuk khasiat pengobatannya.16

2.3.1 Nama aerah an nama Asing un+it Putih 0 Kaempferia rotunda L.

Di )alangka 9aya, kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% biasa dikenal

sebagai jinger putih dan kunir putih namun kebanyakan orang tetap menyebutnya

kunyit putih. (anaman ini dikenal pula sebagai temu putri atau temu

lilin $Beta2i.%I ardong! kunir putih! kunci p+p+t $


13/90

yaitu fase tumbuh pertama adalah pertumbuhan normal dengan daun dan batang

semu atau fase #egertaif.11

a. Daun 'unyit )utih $ Kaempferia folia)

Daunnya berbentuk bundar menjorong lebar, panjang 7 3m, lebar !,-1

3m, ber2arna hijau muda. )ermukaan daun sebelah atas belang- belang 3okelat,

sementara tangkai daunnya melebar. @ase tumbuh kedua adalah fase generatif,

dimana terdapat bunga yang bermun3ulan $Gambar .%.1!

(am)ar 2.2 Daun un+it Putih 0 Kaempferia folia)

b. Bunga 'unyit )utih $ Kaempferia flos%

Bunga bermun3ulan di atas batang semu yang amat pendek dengan daun

yang menutupi permukaan tanah, agak mirip tanaman ken3ur yang sedang berbunga $Gambar .7%. Bunga tumbuh bergerombol, tabung mahkota bunga

panjangnya -!, 3m bentuknya seperti bintang. 'elopak bunga ber2arna putih

dengan mahkota bergaris-garis. Bibir bunga ber2arna ungu ber2arna ungu muda

kemerah-merahan, agak pendek, ber3uping dua. 'epala sari bergelombang,

tepinya ber3uping dua.1!

(am)ar 2.3 Bunga un+it Putih 0 Kaempferia flos

3. 9impang 'unyit )utih $ Kaempferia rhi0oma)

13


14/90

*eskipun tergolong ke3il, kunyit putih dapat berumur tahunan. 9impang

kunyit putih tumbuh pendek, ada beberapa rimpang yang sekaligus tumuh

bergerombol. 4karnya berdaging seolah membengkak, membentuk umbi yang

tidak terlalu besar, kira-kira seukuran telur puyuh. 9impang kun3i pepet ber2arna

pu3at, banyak serat, dan rasanya pahit $Gambar .%.1!

(am)ar 2.! Rim*ang un+it Putih 0 Kaempferia rhizoma)

2.3.! anungan imia un+it Putih 0 Kaempferia rotunda L.)

'unyit putih mempunyai rasa sepat dan agak sedikit pahit. Beberapa

bahan kimia yang terkandung dalam kunyit putih di antaranya alkaloida, saponin,

fla#onoid, polifenol, dan minyak asiri.11

9impang dan daun Kaempferia rotunda L. mengandung kurkuminoid,

saponin, tanin dan minyak atsiri. *inyak temu putih mengandung ,1 8 minyak

atsiri yang terdiri dari 11 senya2a dan terdapat sebagai komponen utama, yaitu

ben?yl ben?oate $7,618%, dan siklopropa?ulen $6,"8%.11

'unyit putih diketahui banyak mengandung minyak atsiri yang terdiri atas

3urdione dan 3ur3umol. *emiliki sifat antioksidan yang dapat menahan ?at

radikal bebas penyebab tumbuhnya sel kanker, antiinflamasi $peradangan% sertadapat meningkatkan sel darah merah.16'andungan kimia yang terdapat di dalam

kunyit putih antara lain saponin, polifenol, 3ur3umin, -norbornane, 7-methylene,

3aryophylen oH3ide, 3y3lopentane a3etaldehyde, 3aryophylen, dan

3innamyltiglate. (anaman ini juga memiliki sifat hemostatis $menghentikan

pendarahan%, menambah nafsu makan, analgesik, antitoksik, dan memper3epat

penyembuhan luka.1"

a. 'urkumin

14


15/90

Senya2a kurkuminoid yang mayoritas terdiri atas kurkumin dikenal

sebagai 2arna kuning alami dan termasuk ke dalam kelompok senya2a polifenol

yang dapat mengubah permeabilitas membran sehingga menyebabkan kebo3oran

nutrisi pada sel bakteri.10

'urkumin dan senya2a hasil biotransformasinya termasuk ke dalam

golongan senya2a polifenol, oleh karena itu diduga memiliki mekanisme

antibakteri yang sama, yaitu mendenaturasi protein membran. Denaturasi atau

rusaknya protein membran akan mengubah permeabilitas membran dan

menyebabkan kebo3oran nutrisi pada sel bakteri sehingga sel tersebut mati. Selain

itu kurkumin pun memiliki kemampuan untuk menipiskan dan mengubah fluditas

membran.,1

b. Saponin

Saponin merupakan glukosida yang larut dalam air dan etanol, tetapi tidak

larut dalam eter. Senya2a ini termasuk glikosida kompleks dengan berat molekul

tinggi yang dihasilkan terutama oleh tanaman. Sifat yang khas dari saponin antara

lain berasa pahit dan berbusa dalam air. Glikosida saponin adalah glikosida yang

aglikonnya berupa sogenin. Busa yang ditimbulkan saponin karena adanya

kombinasi struktur senya2a penyusunnya yaitu rantai sapogenin nonpolar dan

rantai samping polar yang larut dalam air. Saponin dapat mengabsorbsi 5a dan Si

dan memba2anya dalam saluran pen3ernaan. Sebagian besar berupa glikosida

yang dapat mengikat satu $monodesmosida%, dua $bidesmosida% atau tiga

$tridesmosida) rantai lukosa dan aglikonnya yang mengikat gugus =:, =5:

dan =5:. Sifat-sifat saponin adalah sebagai berikut>

1 Berasa pahit Berbau dalam air 7 *empunyai sifat detergen yang baik Farut dalam air dan alkohol dan tidak larut dalam eter *empunya akti#itas hemolisis, merusak sel darah merah6 (idak bera3un bagi binatang berdarah panas! *empunyai sifat antieksudatif " *empunyai sifat antiinflamatori

Berdasarkan aglikonnya $sapogeninnya%, saponin dapat dibagi dua ma3am,

yaitu tipe steroid dan tipe triterpenoid. 'edua senya2a ini memiliki hubungan

15


16/90

glikosidik pada atom 5-7 dan memiliki asal-usul biogenetika yang sama le2at

asam me#alonat dan satuan-satuan isoprenoid.7 Struktur kimia tersebut dapat

dilihat pada Gambar ..

(am)ar 2./ %truktur %a*&nin %ter&i an %a*&nin Triter*en&i

*ekanisme saponin sebagai antibakteri yaitu dengan mengganggustabilitas membran sel bakteri sehingga menyebabkan sel bakteri lisis. Senya2a

saponin termasuk senya2a polifenol yang mana senya2a ini menghambat bakteri

dengan 3ara merusak membran sitoplasma pada bakteri yang tersusun oleh 68

protein dan 8 lipid yang umumnya berupa fosfolipid. Senya2a saponin

merusak membran sitoplasma yang menyebabkan bo3ornya metabolit yang

menginaktifkan sistem en?im bakteri. 'erusakan pada membran sitoplasma dapat

men3egah masuknya bahan-bahan makanan atau nutrisi yang diperlukan bakteriuntuk menghasilkan energi akibatnya bakteri akan mengalami hambatan

pertumbuhan dan bahkan kematian.7

Setiap sel bakteri dikelilingi membran sitoplasma yang tersusun dominan

oleh ergesterol yang bersifat permeabel selektif. Selain itu, fosfolipid juga

merupakan senya2a yang penting dalam pembentukan membran sitoplasma

bakteri. )ada perusakan membran sitoplasma, senya2a saponin ion :A yang

selanjutnya menyerang gugus hidrofilik $gugus hidroksi dan fosfat% pada permukaan membran sel, mengakibatkan gugus hidroksi pada molekul ergosterol

berikatan dengan hidrogen terputus, sehingga membran sel tidak mampu menahan

tekanan dari dalam, akibatnya sitoplasma dalam sel akan menembus keluar. Selain

itu, pada molekul fosfolipid ion :A dari senya2a saponin akan menyerang gugus

polar $gugus fosfat% sehingga molekul fosfolipid akan terurai menjadi gliserol,

asam karboksilat, dan asam fosfat. :al ini mengakibatkan fosfolipid tidak mampu

mempertahankan bentuk membran sitoplasma akibatnya membran sitoplasma

16


17/90

akan bo3or sehingga ?at-?at untuk metabolisme sel bakteri terbuang keluar dan

bakteri akan mati. 7

3. *inyak 4tsiri

*inyak atsiri atau minyak terbang adalah minyak yang mudah menguap

dan tersusun dari banyak komponen senya2a kimia yang ber2ujud 3airan atau

padatan dengan komposisi dan titik didih beragam. Se3ara umum minyak atsiri

memiliki bioaktifitas sebagai antimikroba.

d. (anin

Golongan tanin merupakan senya2a fenolik yang 3enderung larut dalam

air dan pelarut polar. Senya2a ini merupakan golongan bahan alam yang

memberikan rasa kesat dan pahit dalam tanaman dan makanan. Golongan ini

terdiri atas senya2a polifenol larut-air, yang dapat memiliki bobot molekul tinggi.

Se3ara garis besar, tanin dibagi menjadi dua golongan> tanin dapat terhidrolisis,

yang terbentuk dari esterifikasi gula $misalnya glukosa% dengan asam fenolat

sederhana yang merupakan tanin turunan-sikimat $misalnya asam galat%, dan tidak

dapat terhidrolisis, yang kadang disebut tanin terkondensasi antar fla#onoid.

Sesuai dengan namanya tanin dapat terhidrolisis dan dihidrolisis oleh basa untuk

membentuk asam sederhana dan gula. Sifat utama tanin adalah kemampuannya

dalam berikatan dengan protein. Senya2a ini digunakan untuk menyamak kulit,

menjernihkan bir dan sebagai astringen dalam sediaan farmasi. (anin tersebar luas

di dunia tanaman dan dapat diproduksi oleh tanaman sebagai penghalang pakan,

karena ikatannya dengan protein membuat tanaman tersebut tidak menarik untuk

dimakan.,6

*ekanisme kerja tanin sebagai antibakteri yaitu menghambat en?imre'erse transkriptase dan D+4 topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat

terbentuk. (anin memiliki aktifitas antibakteri yang berhubungan dengan

kemampuannya untuk menginaktifkan en?im, dan mengganggu transport protein

pada lapisan dalam sel. (anin juga memiliki target polipetida dinding sel sehingga

pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna. :al ini menyebabkan sel

bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik maupun fisik sehingga sel bakteri

akan mati. Selain itu, kompleksasi dari ion besi dengan tanin dapat menjelaskan

17


18/90

toksisitas tanin. *ikroorganisme yang tumbuh di ba2ah kondisi aerobik

membutuhkan ?at besi untuk melepaskan berbagai fungsi, termasuk reduksi dari

prekursor ribonukleotida D+4. :al ini disebabkan oleh kapasitas pengikat besi

yang kuat oleh tanin.7,!,"

e. @la#onoid

@la#onoid merupakan metabolit sekunder dari tanaman yang memiliki 1

asam karbon dalam inti dasarnya, yang tersusun dalam konfigurasi 5 65756, yaitu

dua 3in3in aromatik yang dihubungkan oleh satuan 7 karbon yang dapat atau tidak

membentuk 3in3in. 'erangka dasar dari fla#onoid adalah sebagai berikut>0

(am)ar 2. %truktur ,la&n&i

@la#onoid adalah pigmen yang tersebar luas dalam tanaman, terdapat

dalam bentuk aglikon maupun heterosida. Beberapa senya2a tidak pernah

ditemukan sebagai heterosida, seperti fla#on tidak terhidroksilasi dan fla#on yang

teralkilasi penuh karena tidak memiliki gugus hidroksil dimana gula dapat

dikombinasikan.0

@la#onoid memiliki beberapa manfaat, baik bagi tumbuhan penghasil

maupun untuk manusia. @la#onoid bagi tumbuhan penghasil berfungsi sebagai

pigmen pada bunga dan untuk men3egah serangan dari serangga maupun

mikroba. Sedangkan akti#itas biologi fla#onoid untuk manusia antara lain >0

a. Sebagai antioksidan sehingga sangat baik untuk pen3egahan kanker.

b. ntuk melindungi struktur sel, memiliki hubungan sinergis dengan /itamin 5

$meningkatkan efekti#itas #itamin 5%.

3. 4ntiinflamasi

d. *en3egah keropos tulang

e. Sebagai antibiotik. @la#onoid dapat berperan se3ara langsung sebagai

antibiotik dengan mengganggu fungsi dari mikroorganisme seperti bakteri

18


19/90

atau #irus. Selain itu fla#onoid ke3enderungan menghambat akti#itas en?im

mikroba yang pada akhirnya akan menganggu proses metabolismeI fungsi

fla#onoid sebagai anti#irus telah banyak dipublikasikan, termasuk untuk #irus

:&/ $4&DS% dan #irus herpes.

2.3./ E"ek ,armak&l&gis un+it Putih 0 Kaempferia rotunda L.

'andungan kimia yang terkandung pada kunyit putih akan menimbulkan

efek farmakologi yang ditimbulkan jika dikonsumsi atau digunakan sebagai obat

herbal. Efek farmakologi dari kunyit putih diantaranya adalah astringent,

antidiare, antidisentri, antiinflamasi, immunostimulan, antikanker, dan penurunan

panas badan. Berikut akan dijelaskan efek = efek farmakologis dari kunyit putih

tersebut>11,1!

1. 4ntibiotik merupakan agen antimikroba, adalah obat yang mela2an infeksi yang

disebabkan oleh bakteri. 4ntibiotika adalah segolongan senya2a, baik alami

maupun sintetik, yang mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu

proses biokimia di dalam organisme, khususnya dalam proses infeksi oleh bakteri.

)enggunaan antibiotika khususnya berkaitan dengan pengobatan penyakit infeksi,

meskipun dalam bioteknologi dan rekayasa genetika juga digunakan sebagai alat

seleksi terhadap mutan atau transforman. Sifat antibiotik pada kunyit putih dapat

dilihat sebagai obat anti disentri, obat ken3ing nanah, dan men3ret.. 4ntiinflamasi merupakan adalah obat yang dapat menghilangkan radang yang

disebabkan bukan karena mikroorganisme $non infeksi%. Sifat anti inflamasi pada

kunyit putih tepat pada pengobatan pembengkakan dan bisul.7. 4nalgesik merupakan obat yang dapat mengurangi atau menghilangkan rasa nyeri

dan akhirnya akan memberikan rasa nyaman pada orang yang menderita.

4nalgesik merupakan lanjutan dari efek farmakologis anti inflamasi.. &mmunostimulant atau yang juga dikenal sebagai yang dikenal sebagai

immunostimulators, adalah ?at $obat-obatan dan nutrisi% yang merangsang sistem

kekebalan tubuh dengan merangsang akti#asi atau meningkatnya akti#itas dari

setiap komponen. )ada kunyit putih, efek immunostimulant ini adalah terjadinya

peningkatan daya tahan tubuh.. 4ntioksidan merupakan ?at yang berperan untuk melindungi tubuh dari serangan

radikal bebas. Beberapa ?at yang termasuk dalam antioksidan diantaranya

19

http://id.wikipedia.org/wiki/Senyawahttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawahttp://id.wikipedia.org/wiki/Biokimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Organismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Organismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Organismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Infeksihttp://id.wikipedia.org/wiki/Infeksihttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakterihttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakterihttp://id.wikipedia.org/wiki/Bioteknologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Rekayasa_genetikahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mutanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mutanhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Transforman&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Senyawahttp://id.wikipedia.org/wiki/Biokimiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Organismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Infeksihttp://id.wikipedia.org/wiki/Bakterihttp://id.wikipedia.org/wiki/Bioteknologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Rekayasa_genetikahttp://id.wikipedia.org/wiki/Mutanhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Transforman&action=edit&redlink=1


20/90

adalah polipenol! mineral! 'itamin dan karotin. )ada umumnya ?at ini sangat

berperan untuk men3egah tubuh terserang penyakit. Dalam prosesnya antioksidan

melindungi men3egah tubuh dari serangan radikal bebas dengan 3ara menekan

terjadinya kerusakan sel dalam tubuh yang disebabkan oleh proses oksidasi

radikal bebas.6. 4ntikanker merupakan senya2a kemoterapetik yang digunakan untuk pengobatan

tumor yang membahayakan kehidupan. bat antikanker sering dinamakan pula

sebagai obat sitotoksik, sitostatik atau antineoplasma. Sifat anti kanker pada

kunyit putih berhubungan erat dengan sifat immunostimlan, karena sifat

immunostimulan akan meningkatkan jumlah limfosit yang merupakan mekanisme pertahanan tubuh spesifik, meningkatkan toksisitas sel pembunuh kanker.

Sehingga dengan sifat = sifat immunostimulan tadi, kunyit putih dapat dijadikan

obat alternatif anti kanker.

2.! Tekn&l&gi Ekstraksi2.!.1 %im*lisia

Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang

belum mengalami pengolahan apapun juga dan ke3uali dikatakan lain, berupa

bahan yang telah dikeringkan. Simpllisia dibedakan atas simplisia nabati,

simplisia he2ani, dan simplisia pelikan atau mineral.7

Simplisia nabati berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan, atau eksudat

tumbuhan, yaitu isi sel yang se3ara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang

dengan 3ara tertentu dikeluarkan dari selnya atau senya2a nabati lainnya yang

dengan 3ara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senya2a

kimia murni.7

)embuatan serbuk simplisia dibuat dari simplisia dengan peralatan tertentu

sampai derajat kehalusan tertentu. )roses ini dapat mempengaruhi mutu ekstrak

dengan dasar pada beberapa hal berikut>7

1. *akin halus serbuk, proses ekstraksi makin efektif dan efisien, namun

makin rumit pula teknologi peralatan untuk tahapan filtrasi.

20


21/90

. Selama penggunaan peralatan penyerbukan, dimana ada gerakan dan

interaksi dengan benda keras $logam dan lain-lain%, maka akan timbul

panas yang dapat mempengaruhi kandungan senya2a.2.!.2 Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut

sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut 3air. Simplisia

yang diekstraksi mengandung senya2a aktif yang dapat larut dan senya2a yang

tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein dan lain-lain.7

*enurut buku @armakope &ndonesia edisi &/, Ekstrak adalah sediaan

kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senya2a aktif dari simplisia nabatiatau simplisia he2ani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau

hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan

sedemikian sehingga memenuhi baku yang telah ditentukan. *etode ekstraksi

yang dapat digunakan dalam proses ekstraksi terdapat dua 3ara, yaitu 3ara dingin

dan 3ara panas.7

2.!.3 Pelarut alam Pr&ses Ekstraksi

)emilihan pelarut merupakan faktor yang menentukan dalam ekstraksi.)elarut yang digunakan dalam ekstraksi harus dapat menarik komponen aktif dari

3ampuran. Dalam pemilihan pelarut yang akan dipakai harus diperhatikan sifat

kandungan kimia $metabolit sekunder% yang akan diekstraksi. Sifat yang penting

adalah sifat kepolaran, dapat dilihat dari gugus polar senya2a tersebut. Senya2a

polar lebih mudah larut dalam pelarut polar, dan senya2a non polar akan lebih

mudah larut dalam pelarut non polar. 71

Salah satu pelarut yang digunakan dalam ekstraksi adalah etanol. Etanol

merupakan etil alkohol dengan rumus kimia 5::, yaitu 3airan yang tidak

ber2arna, mudah menguap karena memiliki titik didih rendah, dan mudah larut

dalam air. Etanol mempunyai polaritas yang tinggi sehingga dapat mengekstraksi

lebih banyak daripada pelarut lain.7,77

Dari hasil penelitian ilmiah yang dilakukan (jukup et al., pelarut etanol

merupakan pelarut yang paling banyak melarutkan tanin dibandingkan pelarut

pelarut non polar n-heksana, pelarut polar aseton dan pelarut polar metanol.

21


22/90

4seton merupakan pelarut polar aprotik yang tidak dapat memberikan ion :,

sedangkan metanol dan etanol merupakan pelarut polar protik yang dapat

memberikan ion :- sehingga lebih mudah berinteraksi dengan gugus fungsional

pada tanin. leh karena itu aseton menghasilkan ekstrak tanin yang lebih rendah

dibandingkan pelarut polar protik $metanol dan etanol%. *eskipun pelarut metanol

dan etanol sama-sama bersifat polar protik namun pelarut etanol menghasilkan

lebih banyak ekstrak tanin dibandingkan metanol. :al ini disebabkan karena

pelarut metanol tidak mengandung air sebagai pengotor yang menyebabkan etanol

teknis lebih polar dibandingkan metanol dan pada akhirnya dapat melarutkan

lebih banyak tanin sedangkan tanin merupakan senya2a yang bersifat hidrofilik

atau larut dalam air. 77,7

'emurnian etanol yang semakin rendah menyebabkan ekstraksi tanin yang

diperoleh semakin rendah. :al ini terjadi sebagai akibat dari polaritas larutan

etanol yang menjadi lebih tinggi karena megandung lebih banyak air di dalam

pelarut maka hidroly0able tannin akan terhidrolisis. Etanol dengan kemurnian

668 atau lebih tinggi menghasilkan jumlah ekstrak yang hampir sama, namun

untuk mempermudah pemisahan hasil $tanin% pelarut yang digunakan adalah

pelarut etanol dengan kemurnian 068.77,7,7

2.!.! Maserasi

*aserasi adalah metode ekstraksi dengan 3ara proses penyaringan

simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengo3okan atau

pengadukan pada temperatur kamar. 9emaserasi berarti dilakukan pengulangan

penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama, dan

seterusnya.7,71

2./ Uji Anti)akteri

4ntibakteri adalah ?at yang menghambat pertumbuhan bakteri dan

digunakan se3ara khusus untuk mengobati infeksi. Berdasarkan 3ara kerja

antibakteri dibedakan menjadi bakterisidal dan bakteriostatik. 4ntibakteri

bakteriostatik adalah ?at yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri, sedangkan

antibakteri bakteriosidal adalah ?at yang bekerja mematikan bakteri. Beberapa ?at

22


23/90

anti bakteri bersifat bakteriostatik pada konsentrasi rendah dan bersifat

bakteriosidal pada konsentrasi tinggi.76

ji akti#itas antibakteri dapat dilakukan dengan dua metode, metode difusi

yaitu disk diffusion $tes 'irby L Bauer%, Etest! ditchplate techni1ue! cupplate

techni1ue. Sedangkan pada metode dilusi termasuk di dalamnya metode dilusi

3air dan dilusi padat.7!

2./.1 Met&e Dilusi

1. *etode Dilusi 5air

*etode ini mengukur *&5 *minimum inhibitory concentration% atau ':*

$kadar hambat minimum% dan *B5 *minimum bactericidal concentration% atau'B* $kadar bunuh minimum%. 5ara yang dilakukan adalah dengan membuat seri

pengen3eran agen antimikroba pada medium 3air yang ditambahkan dengan

mikroba uji. Farutan uji agen antimikroba pada kadar terke3il yang terlihat jernih

tanpa adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan sebagai ':*. Farutan yang

ditetapkan sebagai ':* tersebut selanjutnya dikultur ulang pada media 3air

tanpa penambahan mikroba uji ataupun agen antimikroba dan diinkubasi selama

1"- jam. *edia 3air yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi ditetapkansebagai 'B*.,17

. *etode Dilusi )adat

*etode ini serupa dengan metode dilusi 3air namun menggunakan media

padat $solid%. 'euntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen antimikroba

yang diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa mikroba uji.,17

2.6 Meia ultur Bakteri Shigella dysenteriaeShigella sp. adalah bakteri yang bersifat aerob dan anaerob fakultatif.

Bakteri ini tumbuh pada temperatur sekitar 1-o5 dengan temperatur optimum

7!o5 dan p: !.. 7"

1. +utrient agar

Bakteri Shigella sp. dapat tumbuh pada media biasa, seperti nutrient agar

dari *ueller :inton agar. Setelah dinkubasi satu malam atau jam, koloni akan

berbentuk ke3il, lingkaran, 3embung, halus dan transparan. 7"

23


24/90

. 2ac(onkey agar

)ada 2ac(onkey agar ! Shigella sp. memproduksi nonla3tose-fermenting,

koloni ber2arna merah muda dengan berbentuk ke3il. 7"

7. Sele3ti#e media

eoxyholate citrate agar $D54%, xylose lysine deoxycholate *3L) agar!

SalmonellaShigella agar $SS4% dan 4ektoen enteric $:E% agar adalah media

selektif yang biasanya digunakan untuk isolasi dari Shigella sp. )ada medium ini,

Shigella sp menunjukkan koloni yang ke3il, dimana setelah diikubasi jam

memproduksi koloni lactocefermenting . MFD dan SS agar merupakan media

selektif lain yang menunjukkan bentuk koloni ber2arna merah. )ada :E agar

menunjukkan koloni ber2arna hijau. 7"

. Li1uid media

Selenite 5! rain4eart 6nfusion dan /ramnegati'e $G+% broth adalah

media 3air yang biasanya digunakan.

BAB 3

LANDA%AN TE4R# DAN H#P4TE%#%

3.1 Lanasan Te&ri

Sanitasi lingkungan yang jelek, kurangnya sanitasi indi#idual serta

penularan le2at kontaminasi tinja ke makanan dan minuman, dengan perantara

lalat, ke3oak, kontak interpersonal, atau le2at hubungan seksual anal-oralmerupakan penularan bakteri Shigella dysentriae.

Shigella sp. masuk ke tubuh host se3ara fekal-oral. 'arena mampu bertahan

pada p: rendah, maka Shigella sp. dengan mudah dapat mele2ati barrier asam

lambung. )ada a2alnya, Shigella sp. mengin#asi sel * pada usus besar, kemudian

menuju makrofag dan menginduksi apoptosis. *akrofag yang apoptosis akan

menghasilkan sitokin, kemokin, dan &F-1. Setelah menginduksi apoptosis sel *,

Shigella sp. bergerak menuju kutub basolateral sel epitel dan masuk ke dalam

24


25/90

epitel tersebut. Dalam sel epitel usus besar, Shigella sp. akan menyebabkan

terbentuknya &F-".

Dalam epitel yang terinfeksi, Shigella sp. bergerak menuju salah satu

dinding sel dan mempengaruhi polimerisasi dinding aktin. )olimerisasi aktin ini

akan menyebabkan protrusi dinding sel epitel yang berisi bakteri Shigella sp. dan

membuat Shigella sp. dapat berpindah dari sel epitel yang terinfeksi ke sel epitel

sehat di sebelahnya.

&n#asi Shigella sp. ini menyebabkan mikroabses pada dinding usus besar

dan pada ileum terminal. Dalam in#asi ke sel epitel mukosa kolon, Shigella sp.

berreplikasi dan menghasilkan eksotoksin yaitu ShE(1, ShE(, dan toksin Shiga,

yang mana mempunyai sifat enterotoksik, sitotoksik, dan neurotoksik. 4kibat

in#asi dari bakteri ini terjadi infiltrasi sel-sel )*+ dan kerusakan sel epitel

mukosa sehingga timbul ulkus ke3il-ke3il didaerah in#asi yang menyebabkan sel-

sel darah merah, plasma protein, sel darah putih, masuk ke dalam lumen usus dan

akhirnya keluar bersama tinja.

Sejauh ini, upaya yang dilakukan untuk mengobati penyakit disentri akibat

bakteri S.dysenteriae terbatas pada antibiotik. Selain memberikan keuntungan

bagi manusia, namun antibiotik juga menimbulkan dampak negatif yaitu

kemampuan bakteri dalam mempertahankan diri sehingga makin sulit untuk

diberantas. Selain itu penggunaan antibiotik dalam jangka panjang dan tidak tepat

dalam dosis juga dapat menganggu fungsi kinerja pada organ ginjal, jantung, dan

hati. leh karena itu, perlu dikembangkan bahan nabati yang diharapkan lebih

efektif, efisien, dan aman dalam upaya menghambat pertumbuhan bakteri

S.dysenteriae.

Salah satu alternatif bahan nabati yang berpotensi mempunyai akti#itas

sebagai antibakteri adalah kunyit putih $ Kampferia rotunda L.% yang dapat

digunakan sebagai obat tradisional di &ndonesia termasuk di 'alimantan (engah.

'unyit putih $ Kaempferia rotunda L.% memiliki beberapa bagian, yaitu bunga,

daun, batang, dan rimpang. )ada penelitian ini digunakan bagian rimpang kunyit

putih $ Kaempferia rotunda L.% yang diekstrak menggunakan pelarut etanol 068.

25

25


26/90

Dalam ekstrak rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% mengandung

kurkuminoid, saponin, tanin, minyak atsiri dan fla#onoid.

'urkuminoid memiliki mekanisme mendenaturasi atau merusak protein

membran sehingga mengubah permeabilitas membran dan menyebabkan

kebo3oran nutrisi pada sel bakteri sehingga sel tersebut mati. Saponin dapat

mengganggu stabilitas membran sel bakteri sehingga menyebabkan sel bakteri

lisis. Senya2a saponin termasuk senya2a polifenol yang mana senya2a ini

menghambat bakteri dengan 3ara merusak membran sitoplasma pada bakteri yang

tersusun oleh 68 protein dan 8 lipid yang umumnya berupa fosfolipid.

Senya2a saponin merusak membran sitoplasma yang menyebabkan bo3ornya

metabolit yang menginaktifkan sistem en?im bakteri. 'erusakan pada membran

sitoplasma dapat men3egah masuknya bahan-bahan makanan atau nutrisi yang

diperlukan bakteri untuk menghasilkan energi akibatnya bakteri akan mengalami

hambatan pertumbuhan dan bahkan kematian.

(anin memiliki kemampuan aktifitas untuk menginaktifkan en?im, dan

mengganggu transport protein pada lapisan dalam sel. (anin juga memiliki target

polipetida dinding sel sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang

sempurna. :al ini menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik

maupun fisik sehingga sel bakteri akan mati.

*inyak atsiri yang aktif sebagai antibakteri pada umumnya

mengandung gugus fungsi hidroksil (!"# dan karbonil$ %urunan

fenol berinteraksi dengan sel bakteri melalui proses adsorpsi

yang melibatkan ikatan hidrogen$ &ada kadar rendah terbentuk

kompleks protein fenol dengan ikatan yang lemah dan segera

mengalami peruraian' diikuti penetrasi fenol ke dalam sel dan

menyebabkan presipitasi serta denaturasi protein$ &ada kadar

tinggi fenol menyebabkan koagulasi protein dan sel membran

mengalami lisis$ @la#onoid memiliki peranan sebagai antibakteri dengan

ke3enderungan menghambat akti#itas en?im mikroba yang pada akhirnya akan

menganggu proses metabolisme.

26


27/90

3.2 erangka Te&ri

@aktor )enyebab>• Sanitasi lingkungan yang jelek • :igiene pribadi yang kurang

• *akanan dan minuman yang ditularkan

Bakteri Shigella dysentriae

Di ilieum terminaliskolon

&n#asi ke sel epitel mukosa usus

27


28/90

(am)ar 3.1 %kema

erangka Te&ri

3.3 erangka &nse*

Bakteri bermultifikasi

)enyebaran intrasel dan interseldan memproduksi eksotoksin

1 &nfiltrasi sel radang mengakibatkan nekrosissel epitel mukosa

(imbul ulkus-ulkus ke3il3 Eristrosit dan plasma keluar ke lumen usus

(inja ber3ampur darah atau disenteri basiler

'unyit )utih $ Kaempferia rotunda F.%

9impangBatang DaunBunga

Ekstrak etanol rimpang kunyit putih

(anin *inyak 4tsiri @la#onoidSaponin

*engerutkandinding

selmembran sel

*engganggu proses

terbentuknyadinding sel dan

denaturasi protein

*endenaturasi protein membran

*enghambat

akti#itasen?immikroba

yang akanmengganggu

prosesmetabolisme

'urkuminoid

*engganggu permeabilitas sel

bakteri

*engubah permeanbilitas

membran

*erusak

membran dandinding sel

28


29/90

(am)ar 3.2 %kema erangka &nse*

'eterangan>> /ariabel yang tidak diteliti

> /ariabel yang diteliti

3.! Hi*&tesis

Ekstrak etanol rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.%

memiliki akti#itas antibakteri terhadap pertumbuhan Shigella dysentriae.

'ebo3orannutrisi

*enghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae

29


30/90

BAB !

MET4DE PENEL#T#AN

!.1 $enis an Ran5angan Penelitian

)enelitian ini merupakan penelitian eksperimental. ji antibakteri yang

dilakukan se3ara in 'itro dengan menggunakan tes dilusi. *etode dilusi ada dua

tahap, yaitu tahap pengujian dengan membuat seri pengen3eran untuk menentukan

':* $'adar :ambat *inimum% dan dilanjutkan dengan penggoresan media

nutrien agar padat untuk mengetahui 'B* $'adar Bunuh *inimum%.

!.2 %am*el an Teknik Pengam)ilan %am*el

Sampel penelitian ini adalah bakteri Shigella dysentriae yang didapatkan

dari Faboratorium ni#ersitas *uhammadiyah 'ota )alangka 9aya 'alimantan

(engah dan 9impang kunyit putih yang di peroleh dari daerah )asar 'ahayan,

)alangka 9aya.

!.3 Estimasi Besar %am*el

Besar sampel dalam penelitian ini menggunakan 9umus @ederer>

30


31/90

$r-1% H $t-1% N 1

$r-1% H $6-1% N 1

$r-1% H N 1

r N 1A

r N

r N

'eterangan>

t O jumlah perlakuan

r O jumlah pengulangan

)ada penelitian ini, dilakukan jumlah pengulangan sebanyak kali dengan

jumlah perlakuan sebanyak 6 tabung. Sehingga diperlukan tabung reaksi.

!.! riteria Pemilihan

!.!.1 riteria #nklusi

'riteria inklusi pada penelitian ini adalah koloni Shigella dysentriae yang

tumbuh pada bahan 3oba dengan perlakuan dan inkubasi pada suhu 7!o5 selama jam.

!.!.2 riteria Eksklusi

'riteria eksklusi pada penelitian ini adalah adanya kontaminasi mikroba lain

pada bahan 3oba.

31

31


32/90

!./ 6aria)el Penelitian

Ta)el !.1 6aria)el Penelitian/ariabel Definisi /ariabel 5ara ukur Skala

6aria)el Be)as7

Farutan esktrak etanol rimpang'unyit putih$ Kaempferiarotunda L.%

dengankonsentrasi 8,8, 68, "8,dan 18

6aria)el

Terikat7

)ertumbuhan bakteri Shigelladysentriae

Farutan ekstrak yangdiperolah denganmengekstraksi ?ataktif rimpang kunyit

putih menggunakan

pelarut etanol 068dengan metodemaserasi.

Bakteri gram negatif, bersifat anaerobfakultatif tetapi

paling baik tumbuh

se3ara aerob.'oloninya kon#eks,

bulat, transparandengan pinggir-

pinggir utuhmen3apai diameter kira-kira mm dalam jam.

'onsentrasi 8 diperolehdengan 3ara gram A larutanaKuades sampai dengan 1 ml'onsentrasi 8 diperolehdengan 3ara gram A larutan

aKuades sampai dengan 1 ml'onsentrasi 68 diperolehdengan 3ara 6 gram A larutanaKuades sampai dengan 1 ml'onsentrasi "8 diperolehdengan 3ara " gram A larutanaKuades sampai dengan 1 ml'onsentrasi 18 diperolehdengan 3ara 1 gram Alarutan aKuades sampaidengan 1 ml

1. ':**elihat kekeruhan yangterdapat dalam tabung danmembandingkannya dengankontrol negatif.:asil >1.


33/90

3embung, ber2arna putihdengan menggunakan colony

counter

!. De"inisi 4*erasi&nal

1. 9impang 'unyit )utih > rimpang kunyit putih ber2arna pu3at, banyak serat,

dan rasanya pahit.1!

. Ekstrak etanol 9impang 'unyit )utih > ekstrak yang diperolah dengan

mengekstraksi ?at aktif rimpang kunyit putih menggunakan pelarut etanol

068 dengan metode maserasi.71

7. Bakteri Shigella dysenteriae > bakteri gram negatif, bersifat anaerob

fakultatif tetapi paling baik tumbuh se3ara aerob. 'oloninya kon#eks, bulat,transparan dengan pinggir-pinggir utuh men3apai diameter kira-kira mm

dalam jam.6,17

. 'adar :ambat *inimum $':*% > konsentrasi minimal bahan 3oba yang

mampu menghambat pertumbuhan bakteri setelah diinkubasi jam dan

tidak tumbuh koloni bakteri yang diketahui dengan 3ara mengamati

kekeruhan pada media perbenihan dengan menggunakan metode dilusi

3air.,17

. 'adar Bunuh *inimum $'B*% > konsentrasi paling rendah dari jumlah

koloni bakteri yang kemungkinan tumbuh P ,18 dari Original 6noculum

pada media agar padat.,17,!

!.8 Alat an Bahan

!.8.1 Alat

14lat untuk membuat ekstrak yaitu alat pemotong tipis rimpang, blender, 2adah

pengering, timbangan analitik, ayakan mesh 6, toples, aluminium foil,

kertas penyaring, autocla'e, labu elenmeyer 1 ml, labu ukur, batang

pengaduk, e'aporator rotary dan 3a2an porselin. 4lat untuk uji mikrobiologi yaitu autocla'e, o#en, tabung reaksi, 3a2an petri, rak

tabung, inkubator 7!5, labu elenmeyer, labu ukur, tabung ukur, pipet ukur

1 ml dan , ml, ose, dan 3olony 3ounter.!.8.2 Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam melakukan penelitian ini yaitu rimpang

kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.%, biakan murni Shigella dysentriae, etanol

33


34/90

068, barium 3hlorida 1,1!8 dan :S 18, larutan +a5l ,08, medium 3air

rain4eart 6nfusion roth $B:&% dan medium padat +4).

!.9 Pr&seur Penelitian

Determinasi tanaman di :erbarium Bogoriense, BidangBotani )usat )enelitian Biologi = F&)& Bogor

9impang 'unyit )utih $ Koempferia rotunda Linn% yang ditimbangsebanyak kg, diiris tipis. 'emudian dikeringkan di ba2ah sinar mataharise3ara langsung.

'emudian di blender dan diayak dengan ayakan sebesar 6 meshsetelah itu ditimbang.

Shigella dysentriae

Serbuk dimasukkan ke dalam 2adah yang ditutupi olehaluminium foil dan dimaserasi dengan 3ara direndam pelarutetanol 068 selama jam dengan beberapa kali pengadukansampai ber2arna bening

Ditumbuhkan pada rain4eart 6nfusion

roth

Dilusi tabungSkrining fitokimia ekstrak se3ara kualitatif

)embuatan suspensi bakteri

Ekstrak hasil maserasi diuapkan dengan rotary e'aporator sehinggadidapatkan ekstrak kental rimpang kunyit putih $ Koempferiarotunda Linn)

'ontrol +egatif

'onsentrasiekstrak

8

'onsentrasiekstrak 8

'onsentrasiekstrak " 8

'onsentrasiekstrak 18

'ontrolekstrak

68

Diinkubasi jam pada suhu 7! 5, kemudian amati kekeruhan yang terjadi pada tabung dan bandingkan dengan tabung kontrol $menentukan ':*%

34


35/90

(am)ar !.1 %kema Pr&seur Penelitian

!.9.1 #enti"ikasi:Determinasi %am*el

Determinasi bertujuan untuk menetapkan kebenaran yang berkaitan dengan

3iri-3iri morfologi se3ara makroskopis rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda

L.% terhadap kepustakaan. &dentifikasideterminasi sampel dilakukan di :erbarium

Bogoriense, Bidang Botani )usat )enelitian Biologi-F&)& Bogor.

!.9.2 Pre*arasi %am*el an Pem)uatan %im*lisia

Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah rimpang kunyit putih

$ Kaempferia rotunda L.% yang diperoleh dari daerah 'alampangan, )alangka 9aya

sebanyak kg.

)enyiapan bahan dia2ali dengan menimbang terlebih dahulu berat rimpang

kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% lalu dibersihkan dari sisa-sisa tanah dan

kotoran kemudian di3u3i dengan air bersih. 9impang kunyit putih $ Kaempferia

rotunda L.% yang sudah bersih kemudian diiris dengan potongan yang tipis sekitar 7- mm dengan menggunakan alat pemotong pisau tipis, kemudian dikeringkan

diba2ah sinar matahari dengan ditutupi kain hitam. :al ini bertujuan untuk

mempermudah pembuatan serbuk, menurunkan kadar air sehingga tidak

ditumbuhi jamur dan menjamin agar kualitasnya tetap baik sehingga dapat

disimpan dalam 2aktu yang lebih lama. 9eaksi en?imatis serta perubahan kimia2i

juga dapat diminimalkan sehingga senya2a aktif yang terkandung dalam rimpang

kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% tidak hilang terurai.

Setelah kering rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% kemudian

diblender lalu diayak dengan ayakan " mesh. Serbuk rimpang kering akan

digunakan untuk membuat ekstrak menggunakan metode maserasi.

!.9.3 Ekstraksi Rim*ang un+it Putih

Simplisia serbuk rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% yang

dihasilkan siap untuk dimaserasi. *aserasi dilakukan dengan merendam simplisia

ke dalam pelarut etanol 068, sampai terendam seluruhnya selama Q jam

(abung dilusi yang tidak menampakkan kekeruhannya diambil satu ose , dilakukan penggoresan pada media agar padat 7utrient 8gar 9late $+4)% $menentukan 'B*%

35


36/90

dengan beberapa kali pengadukan, kemudian disaring dengan kertas penyaring.

9esidu kembali dimaserasi lagi dengan 3ara yang sama sampai ber2arna bening.

Ekstrak hasil maserasi atau filtrat yang dihasilkan ditampung menjadi satu dan

diuapkan untuk memisahkan pelarutnya. )enguapan dilakukan dengan

menggunakan rotary e'aporator sampai pelarut habis karena menguap, sehingga

didapatkan ekstrak kental rimpang kunyit putih $ Kaempferia rotunda L.% dan

kemudian ditimbang di nera3a analitik.

!.9.! %krining ,it&kimia Ekstrak %e5ara ualitati"

)engujian ini dilakukan untuk memberikan gambaran a2al tentang

senya2a kimia apa saja yang terkandung dalam ekstrak. &dentifikasi dilakukan

se3ara kualitatif menggunakan pereaksi-pereaksi yang spesifik untuk setiap

golongan senya2a. 70

1. &dentifikasi )olifenol

Ditimbang ekstrak kental , gram, panaskan dengan ml air suling

kemudian dipanaskan diatas penangas air selama 7 menit sambil diaduk sampai

mendidih. Diamkan beberapa menit, saring larutan tersebut. 4mbil filtrat tetes

masukkan ke dalam tabung reaksi. 9eaksikan dengan larutan @e5l7 $ tetes%, jika

larutan menunjukkan 2arna hitam hingga kebiruan maka positif adanya tannin

kemudian lanjutkan kembali pengujian dengan menggunakan gelatin atau

albumin.


37/90

Sebanyak 1 ml ekstrak 3air ditambahkan dengan 1 gram serbuk *g dan

beberapa :5F pekat.


38/90

'emudian disterilkan dalam autocla'e pada suhu 11o5 selama 1 menit.

Selanjutnya dituang ke dalam 3a2an petri.

7. *edia +utrient 4gar )late $+4)%

(imbang serbuk +4) sebanyak gram dan dilarutkan ke ml aKuades

pada labu erlenmeyer dan dipanaskan hingga larut sempurna. 'emudian

disterilkan dalam autocla'e pada suhu 11o5 selama 1 menit. Selanjutnya

dituang ke dalam 3a2an petri.

!.9.8 Pem)uatan %us*ensi Bakteri Uji

Stok yang sudah ada dikultur terlebih dahulu sehingga didapatkan

pertumbuhan bakteri Shigella dysentriae. Suspensi uji a2al dibuat setara dengan

kekeruhan , *3 @arland $kekeruhan 3ampuran Barium 5hlorida 1,1!8 dan

:S 1 8% atau sebanding dengan jumlah bakteri 1,H 1" bakteriml. 'oloni

bakteri dimasukkan ke dalam tabung yang berisi 7 ml larutan +a5l ,0 8 sampai

konsentrasi suspensi sesuai dengan kosentrasi , *3 @arland.

1. 'onsentrasi ekstrak 18 O 1 gram ekstrak rimpang kunyit putih dalam

1 ml aKuades. 'onsentrasi ekstrak "8 O " gram ekstrak rimpang kunyit putih dalam 1

ml aKuades7. 'onsentrasi ekstrak 68 O 6 gram ekstrak rimpang kunyit putih dalam 1

ml aKuades. 'onsentrasi ekstrak 8 O gram ekstrak rimpang kunyit putih dalam 1

ml aKuades. 'onsentrasi ekstrak 8 O gram ekstrak rimpang kunyit putih dalam 1

ml aKuades

Dengan kontrol negatif adalah media kultur B:& sebanyak 1 ml.

38


39/90

!.9.; Menentukan aar Ham)at Minimum 0HM Dengan Met&e Dilusi


40/90

. *edia yang sebelumnya ditumbuhi bakteri, plastik, botol, peralatan yang

terkontaminasi dapat disterilisasi terlebih dahulu dengan 8utocla'e pada

suhu 11T5 selama 1 menit kemudian dimasukkan dalam kantong plastik

untuk selanjutnya dibuang ke tempat pembuangan.

. *embuang langsung ke tempat sampah untuk tisu, kertas, botol dan

limbah tidak berbahaya atau tidak terkontaminasi mikroorganisme.

!.; Met&e Peng&lahan an Analisis Data

!.;.1 Peng&lahan Data

". Editing

'etika hasil penelitian sudah didapat, editing langsung dilakukan untuk

melakukan penge3ekan ulang terhadap hasil penelitian.

#. Entry

Data yang telah dilakukan editing lalu dimasukkan ke dalam lembar kerja

di komputer dengan menggunakan soft&are komputer S9SS untuk dianalisis.

$. (leaning

Dilakukan pemeriksaan jumlah data yang hilang $missing % dan analisa data

a2al dengan mulai menggolongkan, mengurutkan dan menyederhanakan data

sehingga mudah untuk diba3a dan diinterpretasikan serta pemeriksaan.

!.;.2 Analisis Data

Data yang telah terkumpul dianalisis dengan menggunakan program S)SS

yang meliputi>

1. 4nalisa ni#ariat

4nalisa uni#ariat dilakukan untuk tiap #ariabel penelitian baik #ariabel

dependen maupun independen meliputi distribusi frekuensi, uji Shapiro&ilk

untuk distribusi data dan uji Le'ene’s untuk homogenitas data. )enyajian analisis

uni#ariat akan ditampilkan dalam bentuk tabel dan grafik.

. 4nalisa Bi#ariat

ji statistik yang dilakukan adalah uji 8no'a one &ay dengan soft&are

S9SS.

Data yang diperoleh kemudian dikelompokkan sesuai dengan kelompok

perlakuan kemudian dianalisis dengan uji statistik One :ay 8no'a $uji

40


41/90

parametrik% pada taraf keper3ayaan 08 karena merupakan uji hipotesis

komparatif #ariabel numerik distribusi normal, lebih dari dua kelompok. Syarat

uji One :ay 8no'a untuk U kelompok tidak berpasangan>

1. Distribusi data harus normal $2ajib%

. /arians data harus sama $2ajib%


42/90

DA,TAR PU%TAA

1. De2i &', Global 9eport on Sur#eillan3e. eb)ubli3ation. 9F>http>222.2ho.intdrugresistan3epubli3ationsinfographi3-antimi3robial-resistan3e-17.pdf;uaO1 $diunduh tanggal " 4gustus 1%

0. Direktorat


43/90

1. De2oto :9. )engembangan bat (radisional &ndonesia *enjadi@itofarmako. /ol !. @'&, !.

11. Womarya 9&. @armakologi > 'hasiat 'un3i )epet $ Kaemferia rotunda%.Sumatera Selatan > ni#ersitas Sri2ijaya, 1.

1. )uspitasari 9D. Daya 4ntibakteri *inyak 4tsiri 9impang 'unir )utih$ Kaempferia rotunda L.% (erhadap Staphylococcus aureus 4(55 07 dan

Escherichia coli 4(55 0. ogyakarta > ni#ersitas Sanata Dharma,.

17. arnaini 5. ji Efekti#itas Ekstrak 'unyit $(urcuma domestica 'al % Sebagai4ntibakteri (erhadap )ertumbuhan Bakteri acillus sp. dan Shigelladysentriae Se3ara &n /itro. Bandung > ni#ersitas )adjadjaran, 17.

1. Gerald. iseases (aused y /ram7egati'e Enteric acilli in 4arrison 9rincipal of 6nternal 2edicine " *3Gra2 :ill 5ompany&n3,1006.

1. )a?hani G), S2apan '+, 4nil 'S, et al. *ole3ular 5hara3teri?ation of *ultidrug-resistant Shigella spe3ies isolated from epidemi3 and endemi33ases of shigellosis in &ndia. http>.repository.unhas.a3.idhandle176!"010"0.:alaman-". $diaksestanggal 1" Desember 1%

10. omah BD. 4erbs! otanicals! and Teas. )ennsyl#ania > (e3hnomi3, .

. *adigan *. rock iology of 2icroorganisms. Fondon > )renti3e-:all, .

1. :ung 5, 5hen @, Fee 55, Sun , and :uang :. > iophys? 2embranethinning effect of curcumin! "I p.0> 771-77"

43

http://var/www/apps/conversion/tmp/scratch_2/http:%2F%2F.repository.unhas.ac.id%2Fhandle%2F123456789%2F1989.Halaman4-8http://var/www/apps/conversion/tmp/scratch_2/http:%2F%2F.repository.unhas.ac.id%2Fhandle%2F123456789%2F1989.Halaman4-8


44/90

. Darsana &G, Besung &+', *ahatmi :apsari. )otensi daun binahong$ 8nredera cordidolia *tenore) Steenis% dalam menghambat pertumbuhan

bakteri Escherichia coli se3ara in 'itro. Bali> @akultas 'edokteran :e2anni#ersitas dayana &ndonesia, 1I1$7%. :al. 77!-71

7. +gajo2 *, 4bidjulu, 'amu /S. )engaruh antibakteri ekstrak kulit batangmatoa $ 9ometia pinnata% terhadap bakteri Staphylococcus aureus se3ara in#itro. 171-.

. Sastrohamidjojo :. Kimia 2inyak 8tsiri. ogyakarta > ni#eristas Gajah*ada )ress, . p."

. idad D, 4stuti ', ' arditiani +. &dentifikasi kandungan kimia ekstrak

kulit buah manggis $/arcia mangostana L.). 1.

6. :einri3h *, Barnes


45/90

7. (jukup *, Gogot :, De2i G, 4rtha )@. Ekstaksi tannin sebagai bahan pe2arna alami dari tanaman putri malu $ 2imosa pudica% menggunakan

pelarut organik X'arya &lmiahY. (eknik 'imia @akultas (eknologi &ndustrini#ersitas )embangunan +asional /eteranC ogyakarta, 1I1 $1%. :al70-.

7. 4dmadi. *empelajari Bagian (anaman dan 'onsentrasi Ekstrak 'unyit)epet $'aempferia rotunda F.% ang *empunyai Sidat 9epellan +yamuk

8edes aegepti. X 4rgoteknologi @akultas (eknologi )ertanianni#ersitas dayana, 0I 1$%> p.7-

76. )rati2i S(. *ikrobiologi @armasi. Erlangga, ". ).1""

7!. )rayitno, Endro ', +urimani2ati. )roses Ekstraksi Bahan )e2arna 4lamDari Fimbah 'ayu *ahoni. ogyakarta > )uslitbang (eknologi *aju, 7.:al !-17

7". )arija S5. Textbook of 2icrobiology and 6mmunology. nd Edition. &ndia >Else#ier, 1.

70. Ditjen )*. *aterial *edika &ndonesia.


46/90

LAMP#RAN

Lam*iran 1 %kema Pem)uatan %er)uk %im*lisia

47

9impang kunyit putih ditimbangterlebih dahuludan dibersihkandari sisa-sisa tanahdan kotoran

9impang kunyit putih dibersihkandengan air bersih

Diiris dengan potonganyang tipi sekitar 7-mm

9impang kunyit putih yang kering,diblender

Diayak denganayakan 6 mesh danditimbang lagi

Dikeringkanterkena sinar matahari

46


47/90

Lam*iran 2 %kema Pem)uatan Ekstraksi Rim*ang un+it Putih

. Serbuk dimasukkan kedalam 2adah kemudian direndam kedalam pelarut etanol 068 sampai terendam seluruhnya

selama jam dengan ditutupi aluminium foil

Setelah jam, rendaman disaringdengan kertas penyaring

9esidu kembali direndam dengan etanol 068selama jam sampai ber2arna bening

@iltrat hasil maserasi dimasukkan kedalam rotary e'aporator

Didapatkan ekstrak kentalrimpang kunyit putih.

47


48/90

Lam*iran 3 %kema Pem)uatan Meia

1 Brain Heart Infusion

Macon!ey 3. NAP

Lam*iran ! %kema ultur Biakan Bakteri Shigella dysenteriae

1," gram bubuk B:& dilarutkan di dalam ml aKuades

Farutan B:& disterilkan dalam

autocla'e 11 5 selama 1 menit

'emudian dituangkan ke dalamtabung reaksi

gram bubuk +4) dilarutkan di

dalam ml aKuades

, gram bubuk 2ac(onkey dilarutkan di

dalam ml aKuades

Farutan +4) disterilkan dalamautocla'e 11 5 selama 1 menit

Farutan 2ac(onkey disterilkandalam autocla'e 11 5 selama 1

'emudian dituangkan ke dalam3a2an petri

'emudian dituangkan ke dalam3a2an petri

4mbil menggunakan ose dari media miring Shigelladysenteriae! kemudian bakteri dimasukkan ke tabung

reaksi yang berisi media B:&

48


49/90

(abung reaksi ditutup kembali dan diinkubasi selama jam pada suhu 7!o5 dalam inkubator

Setelah jam, kultur bakteri terlihat dengan adanya pertumbuhan koloni bakteri Shigella dysenteriae

5a2an petri tersebut ditutup kembali dan inkubasiselama jam pada suhu 7! 5 dalam inkubator

Setelah jam, kultur bakteri terlihat denganadanya pertumbuhan koloni bakteri Shigella

dysenteriae

4mbil menggunakan ose dari media B:& yang telahditumbuhi bakteri Shigella dysenteriae! kemudiandigoreskan pada 3a2an petri yang berisi medium

2ac(onkey.

49


50/90

Lam*iran / %kema Pem)uatan %us*ensi Bakteri Uji

Stok bakteri dikultur dengannutrient broth 3air

Suspensi uji a2al dibuat dengan 3ara men3ampurkan arium (hlorida 1,1!8 dengan :S 1 8 atau setara

dengan kekeruhan , *3 @arland.

'oloni bakteri dimasukkan ke dalam tabung berisi 7 ml larutan +a5l ,08 sampai

kekeruhannya sama dengan suspensi uji a2al, *3 @arland.

50


51/90

Lam*iran Perhitungan &nsentrasi Ekstrak

)erhitungan konsentrasi ekstrak menggunakan rumus >? @ e 0ml : larutan 0ml 1==?

'eterangan>/e O #olume ekstrak pekat yang dibutuhkan $dalam ml%# O #olume total larutan $dalam ml%

1. Farutan ekstrak 1 8 OVe

10ml H 18

18 O 1b8/e O 1 ml

. Farutan ekstrak " 8 OVe

10ml H 18

"8 O 1b8/e O " ml

7. Farutan ekstrak 68 OVe

10ml H 18

68 O 1b8

/e O 6 ml. Farutan ekstrak 8 O

Ve

10ml H 18

8 O 1b8/e O ml

. Farutan ekstrak 8 OVe

10ml H 18

8 O 1b8/e O ml

Lam*iran 8 %kema Penentuan aar Ham)at Minimum 0HM

51


52/90

1 ml B:&21

'ontrol

negatif 43

1 ml larutan konsentrasi 18 A

1 ml B:& A ,1 ml suspensi

bakteri

431

'onsentrasi

ekstrak

18

2

1 ml larutan konsentrasi "8 A


bakteri

4321

'onsentrasi

ekstrak "8



bakteri

'onsentrasi

ekstrak 68 4321

1 ml larutan konsentrasi 8

A 1 ml B:& A ,1 ml suspensi

bakteri

'onsentrasi

ekstrak 8

'onsentrasi

ekstrak 8 4321


1 ml B:&A ,1 ml suspensi

bakteri

4321

Diinkubasi pada suhu 7! R5 selama jam. 'emudian diamati kekeruhan pada tabung

*enentukan ':*

52


53/90

Lam*iran 9 %kema Penentuan aar Bunuh Minimum 0BM

*asing-masing konsentrasi dari tabung dilusi diambilmenggunakan ose, kemudian dilakukan streaking $penggoresan% pada

medium agar 2ac(onkey

Diinkubasi pada suhu 7!o5selama jam.

Dilakukan pengamatan pada media agar 2ac(onkey

*enghitung koloni dengan menggunakan colony counter

*enentukan 'B*

53


54/90

Lam*iran ; uesi&ner %tui Penahuluan

LEMBAR UE%#4NER

Dengan hormat,

Selaku mahasis2a @akultas 'edokteran ni#ersitas )alangka 9aya yang sedang dalam

pelaksanaan tugas akhir di @akultas 'edokteran ni#ersitas )alangka 9aya, saya > +ama > @aridah

+&* > @44 111

ji 4kti#itas antibakteri ekstrak etanol rimpang kunyit putih

$ Kaempferia -otunda F.% terhadap pertumbuhan bakteri

Shigella dysentriae se3ara in 'itro

leh karena itu, saya memohon kesediaan Bapak, &bu, Saudara$i% untuk menja2ab

pertanyaan dari kuesioner ini dengan saya memberikan tanda $ % pada pilihan ja2aban

yang tersedia. (ujuan pengisian kuesioner ini untuk mengetahui gambaran pengetahuan,

sikap dan perilaku masyarakat mengenai tanaman kunyit putih sebagai obat tradisional di

kota )alangka 9aya dalam rangka memperoleh data untuk penelitian yang akan dilakukan

nantinya.


55/90

+o.9esponden >

&. &dentifikasi 9esponden1. Berapa usia 4nda saat ini;

◊ tahun◊ 1-7 tahun

◊ 71- tahun◊ 1- tahun

◊ U tahun

◊ . 4pakah jenis kelamin 4nda;

◊ Faki-laki ◊ )erempuan

7. 4pakah pendidikan terakhir 4nda;

◊ SD◊ S*)◊ S*4

◊ Diplomasederajat◊ S1

◊ )as3a Sarjana$S%

◊ Fainnya,..

. 4pakah pekerjaan 4nda;

◊ )+S◊ 4B9&)olisi◊ )ega2ai s2asta

◊ iras2astapedagang◊ (idak bekerja

&&. (anaman 'unyit )utih $ Kaempferia rotunda Finn.%

1. 4pakah 4nda mengetahui tentang tanaman kunyit putih;

◊ (idak ◊ a

◊ (urun-menurun $keluarga,

orang tua,saudara%◊ *edia 3etak

$buku,koran,internet%

◊ *edia elektronik

$tele#isi,radio,internet%◊ (emanrekan kerja◊ (abibdukun◊ Fainnya,...

. 4nda memanfaatkan kunyit putih sebagai apa saja;

◊ bat tradisional◊ ntuk memasak

◊ Fainnya,.....

7.


56/90

◊ *enyehatkan tubuh◊ *ual atau muntah◊ Diare

◊ )enurun panas atau demam◊ Fainnya,.....

. Darimana 4nda memperoleh kunyit putih tersebut;

◊ Beli dipasar ◊ )ekarangan

◊ (umbuh sendiri disekitar rumah◊ Fainnya

. Bagian kunyit putih manakah yang sering 4nda gunakan sebagai obat tradisional;

◊ 9impang◊ Daun◊ Bunga

◊ Batang◊ 4kar

6. Bagaimana 3ara 4nda mengolah tanaman kunyit putih tersebut sebelum

mengkonsumsinya sebagai obat tradisional;◊ Dimakan langsung $mentah%◊ Direbus lalu diminum◊ Direbus lalu dimakan

◊ Diparut $dilumuri didaerah sakit%◊ Fainnya,.....

!. 4pakah 4nda mengetahui nama lain dari tanaman kunyit putih yang biasa dikenal di

)alangkaraya;◊ (idak ◊ a


57/90

Lam*iran 1= Hasil %tui Penahuluan

Hasil %tui Penahuluan Man"aat un+it Putih %e)agai 4)at

Traisi&nal i Pasar aha+an Palangkara+a

3 10

14

39

34

USIA RESPONDEN

) 20 %ahun 2130 %ahun 31 40 %ahun 4150 %ahun *50 %ahun

57


58/90

5248

JENIS KELAMIN

+akilaki &erempuan

58


59/90

2

38

47

13

PENDIDIKAN TERAKHIR

,- ,.& ,./ -&+!./ ,///

59


60/90

12

80

44

PENDIDIKAN TERAKHIR

&, /,/,%/ &-// &// ,/,%/

/ &!+, %-/ /

60


61/90

85

15

MENGENAL TANAMAN KUNYIT PUTIH

:/ %-/

61


62/90

60

30

10

INFORMASI DIPEROLEH DARI :

%;;%.;; .-/


63/90

86

14

MANFAAT KUNYIT PUTIH SEBAGAI :

!/% %/-,!/+ ;%; ../,/

63


64/90

5(

25(

30(

40(

KUNYIT PUTIH DIGUNAKAN SEBAGAI OBAT TRADISIONAL UNTUK PENYAKIT :

!/% -/6 !/% .;/+' .;%/"

&6;; &//, /%/; -6./. +/:/96,6"/%/ %;;"

64


65/90

80

16

4

MEMPEROLEH KUNYIT PUTIH DI :

-&/,/ &/// +/+/

65


66/90

90

73

BAGIAN KUNYIT PUTIH YANG DIGUNAKAN :

.&/ -/; ;/ /%/

66


67/90

2(

80(

13(

5(

CARA PENGOLAHAN TANAMAN KUNYIT PUTIH SEBAGAI OBAT TRADISIONAL

-./9/ +/7,;7 -6;, +/+; -.;.

-6;, +/+; -./9/ -&/;%

67


68/90

Lam*iran 11 %urat eterangan Determinasi Tum)uhan

68


69/90

69


70/90

Lam*iran 12 $aCal Penelitian

'

e

g

i

a

t

a

n

(ahun 1-1

D

es

e

m

b

er

@ebr

S

t

u

d

i

)

e

nd

a

h

u

l

u

a

n

Z

Z Z

)

e

n

y

u

s

u

n

a

n

Z

Z

70


71/90

)

r

o p

o

s

a

l

S

i

d

an

g

)

r

o

p

o

s

a

l

)

e

n

g

u

r

u

s

a

n

S

u

r

a

t

71


72/90

i

?

in

p

e

n

e

l

i

ti

a

n

)

e

r

s

ia

p

a

n

4

l

a

t

L

B

a

h

a

n

Z

72


73/90

)

e

n

e

l

i

t

i

a

n

4

na

l

i

s

a

D

a

t

a

)

e

n

y

u

s

u

n

an

:

a

s

i

l

)

73


74/90

e

n

el

i

t

i

a

n

S

i

da

n

g

:

a

s

i

l

)

e

n

e

l

i

t

i

a

n

E

#

a

l

u

a

s

i

74


75/90

:

a

s

i

l

S

i

d

a

ng

)

e

n

e

l

i

t

i

a

n

)

e

n

y

e

r

a

h

a

n

B

e

r

k

a

75


76/90

s

76


77/90

Lam*iran 13. Rin5ian Bia+a

'

egiatan

Biaya

D )

em

buatan

pr o

posal

Determinasitanaman(ransportasi4('

)en3arian

pustaka @oto3opy )enjilidan

Biaya lain-lainT&tal

9p

9p

9p

9p

9p

9p

9p

R*

Seminar

pr o

posal

'onsumsiBiaya lain

T&tal

9p

9p

R*

@

)er si

)isauadah

pengering(oples

Biakan murni

9p

9p

77


78/90

a pa

n alat dan

ba

han

Shigella

dysentriae

Etanol 068 *edium 3air

nutrient broth

*edium padat +4)

Barium5hlorida1,1!8

:S 18 Farutan +a5l

,08 4luminium

foil (ransportasi

T&tal

9p

9p

9p.

9p.

9p

9p

9p

9p

9p

9p

9p

R*

* )

en

elitian

)eminjamanFaboratorium'onsumsiBiaya lainT&tal

9p

9p

9p

R*

@

)e

4('@oto3opy

9p

78


79/90

ngo

lahan analisis

data

(ransportasiBiaya lainT&tal 9p

9p

9p

R*

4 )

enyusunan hasil

pene

litian dan

pem

bu

4(' @oto3oy )enjilidan

(ransportasi Biaya lain

T&tal

9p

9p

9p

9p

9p

R*

79


80/90

ata

n sk r i

psi

* S

eminar hasil

'onsumsi(ransportasiBiaya lain

T&tal

9p

9p

9p

R*

Dan

a tak ter duga

R*

T&tal eseluruhan

R*

LAMP#RAN 1!. Lem)ar &nsultasi

EMENTER#AN PEND#D#AN DAN EBUDAAAN

UN#6ER%#TA% PALAN(A RAA

,AULTA% ED4TERAN '4*)S +)49


81/90

Lem)ar &nsultasi

Nama > @aridah

N#M > @44 111

$uul Penelitian > ji 4kti#itas4ntibakteri Ekstrak Etanol 9impang 'unyit )utih$ Kaempferia rotunda L.% (erhadap )ertumbuhan Bakteri

Shigella dysentriae Se3ara 6n ;itro

Pem)im)ing # > dr. Donna +o#ina 'ahanjak, *.Biomed

:

* Saran )

ar af

)em

bim

bing

Se )enghilangan beberapa

paragraf yang tidak penting pada bab 1

)erubahan padarumusan masalah

)erbaikan kalimat padatujuan umum penelitian

)erubahan pada tujuankhusus

)erubahan padamanfaat penelitianmenjadi hanya satu

bagian saja. (idakterbagi menjadi

beberapa bagian.

81


82/90

)ada taksonomi bakteriShigella dysentriae!

tidak perlumenggunakan table.

)ada paragrafmorfologi bakteri,ditambahkanketerangan gambar dantabel. Seperti

penambahan gambar.1 atau tabel .1

(idak perlu di bold atauditebalkan pada tulisan

penyabaran materi. )erbaikan pada tulisan

mucus! tenesmus!(enters for isease

(ontrol * 5D5 )!S.flexneri! S.dysentriae

agar menggunakantulisan miring

)erbaikan pada tulisankolon

)erbaikan pada tulisan persen, :S, mikroliter, )alangka 9aya,

)ada klasifikasi kunyit putih tidak perlumenggunakan tabel

)erbaikan pada kalimatseperti antibioti3 yangharus disambung

Se - (ulisan in 'itro di3etak

miring

- (ulisan nama penelitianyang dilakukan lebihdari satu, 3ukup tulissatu nama saja danditambahkandibelakangnya dkk.

- )enghapusan paragrafdari bagian manfaat

penelitian- )enambahan spasi pada

kata mm

- )enggunaan huruf

82


83/90

besar pada kata tabel.- )enjelasan tentang

ShE(1 dan ShE(- )enulisan huruf besar pada kata )alangka9aya

- )enggunaan huruf besar pada nama latin pada bagian depannya.

Se - )erbaikan pada

paragraf penelitianrele#an di bagian bab 1

- )enghilangan beberapa

kalimat pada paragraf penutup pada bab 1 bagian latar belakang

- *en3ari lebih detail penjelasan terjadinya patofisiologi daridisentri basiler

- *en3ari gambar bentuk Shigella dysentriae

menyerang bagianileum dan sel epitelmukosa kolon

- )enambahan kolom pada bagiankonsentrasi "8

- )elajari lebih dalamtentang bagaimana

pengambilankonsentrasi larutan

' - )elajari lebih dalam

tentang in#asi bakteri

Shigella dysentriae pada daerah kolon- )elajari lebih dalam

tentang penggunaanrumus @ederer dalam

besar sampel dan pengambilan berbagaikonsentrasi

- (ambahkan ujifitokimia rimpangkunyit putih

$ Kaempferia rotunda

83


84/90

L.% yang diambil daridaerah 'alimantan

(engah karenamemiliki beberapa perbedaan faktor daridaerah


85/90

EMENTER#AN PEND#D#AN DAN EBUDAAAN

UN#6ER%#TA% PALAN(A RAA

,AULTA% ED4TERAN

'4*)S +)49 @aridah

N#M > @44 111

$uul Penelitian > ji 4kti#itas4ntibakteri Ekstrak Etanol 9impang 'unyit )utih$ Kaempferia rotunda L.% (erhadap )ertumbuhan BakteriShigella dysentriae Se3ara 6n ;itro

Pem)im)ing # > Elsa (rino#ita, S. @arm., 4pt

:

*a Saran )

ar af

)

em bim

bing

85


86/90

' )ada bagian judul

menggunakan tulisan old dan

ukuran tulisan 1 )ada logo ni#ersitas )alangka

9aya menggunakan ukurandiameter 3m

)ada latar belakang susunandimulai dari tentang pre#alensi

penyakit disentri basiler, bakteriShigella dysentriae! rimpangkunyit putih $ Kaempferia

rotunda L.%, metode yangdigunakan


87/90

- )erbaikan pada kerangka teoridan kerangka konsep

Se - Gunakan huruf ke3il pada

dalam paragraph- )ada kerangka teori dan

kerangka konsep gunakan bentuk tulisan times ne2 romandan ukuran yang sama dalam

bagiannya- (ambahan penjelasan kerangka

konsep

Se - (ambahkan jarak1 kali antara

bagian yang tidak bersangkutanseperti 7.7 dengan 7.

- )ada tulisan bukan sub babtidak perlu di 3etak tebal

- )ada tulisan gambar . tidak perlu ditambahkan titik dua

- )ada bab , untuk 2aktu dantempat penelitian diletakkan di

paling belakang dari bagian bab

- )ada prosedur penelitiandihilangkan beberapa kalimatseperti tidak usah dibuat tulisandengan ditutupi kain hitam padarimpang, karena bagian rimpangtidak mudah rapuh seperti daun

- )erbaikan susunan pada prosedur penelitian dan pembuatan simplisia

- (ambahkan pengukuran yangdigunakan pada ekstrak kental

- )ada bagian a2al daftar pustaka, halaman diletakkandiba2ah

87


88/90

' - )erbaikan penamaan pada nama

latin bunga, batang, dan

rimpang- )erbaikan jenis tulisan yang

digunakan pada kerangka teori- 5ari lebih detail tentang ukuran

yang digunakan pada pengirisansimplisia

- )ada lampiran bagian a2al,halaman judul berada diba

Documents

Naskah Proposal Penelitian