Upload
lunamarinaazizah
View
223
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
1/13
LAPORAN MIKROBIOLOGI PANGAN
PEMBUATAN MEDIA DAN TEKNIK ISOLASI BAKTERI
Disusun oleh:
Kelompok A V
Juli Sek! A!um "#$"%%#&
M' Ti P!(i)i "#$"%%#*
Rini( +u!i, "#$"%%$-
Si.!(llh Solh "#$"%%&"
POLTEKKES KEMENKES TANJUNG KARANG
JURUSAN GI+I
#%"$/#%"&
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
2/13
BAB I
PENDAHULUAN
Soe!'o)ino(o M0 "12-0Budidaya Jaringan dan Manfaatnya0 3o4'k!(: 5kul(s Biolo4iUni6e!si(s G,7h M,0
1.1 Latar Belakang
Ki( (hu .h) semu mkhluk hi,up mem.u(uhkn nu(!ien( un(uk pe!(um.uhn
,n !ep!o,uksin'0 Nu(!ien me!upkn .hn .ku 'n4 ,i4unkn un(uk mem.n4un
komponen/komponen selule! .!u ,n un(uk men4hsilkn ene!4' 'n4 8,i.u(uhkn
,lm p!oses kehi,upn sel0 Un(uk mem.u(uhkn ,n men4em.n4.ikkn mik!o.,ipe!lukn su(u su.s(!( 'n4 ,ise.u( me,ium0 Se,n4kn me,ium i(u sen,i!i se.elum
,i4unkn h!us ,lm ke,n s(e!il !(in' (i,k ,i(um.uhi oleh mik!o. lin 'n4
(i,k ,ih!pkn 4! mik!o. ,p( (um.uh ,n .e!kem.n4.ik ,en4n .ik ,i ,lm
me,ium9 mk ,ipe!lukn s'!( (e!(en(u 'n4 ,in(!n' .h) ,i,lm me,ium h!us
(e!kn,un4 semu unsu! h! 'n4 ,ipe!lukn un(uk pe!(um.uhn ,n pe!kem.n4n
mik!o. kemu,in susunn mknnn'9 (eknn osmosis9 ,e!7!9 kesmn p;(/>( h! nu(!ien(< 'n4
.e!4un un(uk mem.ikkn mik!o.0 Den4n mempe!4unkn .e!m8m/m8m me,i
,p( ,ilkukn isolsi9 pe!.n'kn9 pen4u7in si=(/si=( =isiolo4is ,n pe!hi(un4n
7umlh mik!o. Su(e,7o9"11?
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
3/13
kon,isi op(imum .4i pe!(um.uhn .k(e!i (e!se.u( Pel8>!9 "12?
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
4/13
BAB II
METODELOGI
2.1 Waktu dan Temat
k(u: "$0%% s, selesi
Temp(: L.o!(o!ium Te!p,u0
1.2 Alat dan Ba!an"0 Pem.u(n me,i:
Al( :
4els pil
4els uku!
(im.n4n
pen4,uk
pipe( (.un4 !eksi
8)n pe(!i
(e!mome(e!
kps un(uk sum.(
ppn mi!in4
(.un4 !eksi
inku.(o!
u(okl=
Bhn :
NA
PDA
#0 Teknik isolsi .k(e!i:Al( :
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
5/13
lmpu pi7! sp!i(us
7!um ose
7!um inokulsi
(.un4 !eksi
petridish pipe( uku! s(e!il "ml
inku.(o!
u(okl=0
Bhn :
me,i Nu(!ien( 4! (e4k
me,i Nu(!ien( 4! mi!in4
nu(!ien( 8i!
(elu!
2." Pr#$edur Per%#&aan"0 Pem.u(n nu(!ien 4!
Am.il kemsn smpel me,i9 .8 pe(un7uk pen'ipnn'0 ;i(un4 7umlh 'n4
,ipe!lukn un(uk mem.u( -% ml me,i kemu,in (im.n4lh sesui 7umlh 'n4
,ipe!lukn
Tun4kn -% ml u,es ke,lm 4els pil
@mpu!kn me,i 'n4 (elh ,i(im.n4 ke,lm u,es
Di,ihkn l!u(n me,i sm.il (e!us ,i,uk
Temp(kn me,i ,lm ),h un(uk s(e!ilissi 4! mi!in49 4! (e4k9 ,n 4!
8)n
Sum.( (.un4/(.un4 ,en4n kps9 un(uk 8)n pe(!i ,ilkukn ,en4n 8!
,i.un4kus ,en4n ke!(s
S(e!ilkn ,en4n o6en ,en4n suhu "#"o@ selm "- meni(
Un(uk 4! mi!in49 le(kkn (.un4 ,i(s ppn mi!in4 smpi ,in4in ,n p,(
#0 Pem.u(n PDA
Am.il kemsn smpel me,i9 .8 pe(un7uk pen'ipnn'0 ;i(un4 7umlh 'n4
,ipe!lukn un(uk mem.u( -% ml me,i kemu,in (im.n4lh sesui 7uml 'n4
,ipe!lukn
Tun4kn -% ml u,es ke,lm 4els pil
@mpu!kn me,i 'n4 (elh ,i(im.n4 ke,lm u,es
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
6/13
Di,ihkln l!u(n me,i sm.il (e!us ,i,uk
S(e!ilkn ,en4n o6en ,en4 suhu "#"o@ selm "- meni(
Am(i pe!u.hn ,n )!nn'
$0 ubculturingp, me,i 8i!
Pe!h(ikn (eknik sep(is ,lm inokulsi
Lkukn pemin,hn .k(e!i p, me,i 8i!
Be!i l.el p, (ip hsilsubculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-o@
selm # C #& 7m
Am(i pe!u.hn p, me,i ,en4n melih(
Keke!uhn me,i
A, (i,kn' en,pn p, me,i
&0 ubculturingp, me,i 4! (e4k
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n menusukkn 7!um ose 'n4
su,h ,i8elupkn p, suspensi .k(e!i me,i 4! (e4k
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsilsubculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-o@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn kloni p, me,i9 p!(um.uhn 'n4 le.ih .n'k p,
.4in pe!mukn menun7ukkn si=( e!o. .k(e!i9 se,n4 pe!(um.uhn ,i.4in
,s! me,i menun7ukkn si=( ne!o. .k(e!i
-0 ubcultiringp, me,i 4! mi!in4
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n men44o!eskn " ose suspensi
.k(e!i p, pe!mukn me,i 4! mi!in4
Pe!lu ,ipe!h(ikn pe!mukn me,i 7n4n smpi (e!luk !usk < p, )k(u
men44o!es
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsilsubculturing
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
7/13
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-o@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn koloni p, pe!mukn me,i
?0 ubculturingp, me,i pl(e 4! se8! 4o!esn
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n men44o!eskn " ose suspensi
.k(e!i p, pe!mukn 4! pl(e9 pe!lu ,ipe!h(ikn pe!muknme,i 7n4n
smpi (e!luk p, )k(u men44o!es
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsilsubculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-o@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn koloni p, pe!mukn me,i
*0 Pen4en8e!n suspensi .k(e!i
Se,ikn $ (.un4 N@l %92- s(e!il 1 ml
Tun4kn " ml suspensi .k(e!i p, (.un4 N@l %92- se8! sep(is9
homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh ""%C9 .e!i l.el
Am.il " ml hsil pen4en8e!n ""%C9 (un4 ke ,lm (.un4 1 ml N@l %92-
s(e!il .e!iku(n' se8! sep(is9 homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh ""%%C9 .e!i
l.el
Am.il " ml hsil pen4en8e!n ""%%C9 (un4 ke ,lm (.un4 1 ml N@l %92-
s(e!il .e!iku(n' se8! sep(is9 homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh ""%%%C9
.e!i l.el
Am(i
Pem&a!a$an '$#la$'
Pe!8o.n kli ini mem.hs (en(n4 8!/8! (u (eknik 'n4 .is ,i4unkn ,lm
men4isolsi mik!o. ,!i h.i(( lmin'0 Teknik isolsi mik!oo!4nisme ,lh su(u
ush un(uk menum.uhkn mik!o. ,i lu! lin4kun4n lmihn'0 Pemishn
mik!oo!4nisme ,!i lin4kun4nn' ini .e!(u7un un(uk mempe!oleh .ikn .k(e!i 'n4
su,h (i,k .e!8mpu! l4i ,en4n .k(e!i linn' (u 'n4 ,ise.u( .ikn mu!ni0 Di
kehi,upn no!mln' (u ,i h.i(( lmihn' mik!o. suli( ,i(emukn ,lm .en(uk
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
8/13
koloni sen,i!i0 Mik!o. ini ps(i ,i(emukn ,lm .en(uk koloni 'n4 hi,up .e!sm/sm
,en4n koloni mik!o. 'n4 linn'0 Oleh k!en i(u9 pen4isolsin ini ,ilkukn0
Pe!8o.n ini ,i)li ,en4n (hp pen4en8e!n0 Dlm hl ini9 me,ium 4! 'n4
,i4unkn ,ien8e!kn (e!le.ih ,hulu selm F"- meni( p, ;o( Pl(e ,en4n suhu $%%@0
;l ini .e!(u7un 4! me,ium 'n4 ,i4unkn ,p( men8i! se(elh ,isimpn selm
.e.e!p h!i ,i !e=!i4e!(o!0 Se(elh ,ien8e!kn ,en4n men44unkn ;o( Pl(e9 me,ium ini
,i,in4inkn seki(! - meni( nmun (i,k 7n4n smpi ,in4in sekli0 ;l ini ,ilkukn un(uk
men4hin,!i me,ium 4! (i,k kem.li men4e!s0 Se(elh 4k ,in4in9 me,ium ini pun sip
un(uk ,i4unkn0
Pen4isolsin ini ,iln7u(kn ,en4n pem.u(n me,ium (emp( mik!o. ini nn(in'
kn (um.uh (u ,en4n k( lin mem.u( h.i(us sin(e(isn'0 Me,ium ini (e!le.ih ,hulu
,is(e!ilkn ,en4n 8! meli,h/pikn mulu( .o(ol (emp( pen'impnn me,ium 4!
(e!se.u(0 Be4i(upun ,en4n 8)n pe(!i i(u sen,i!i0 Se.elum semu p!ose,u! ke!7 ,ilkukn
(e!le.ih ,hulu (n4n h!us ,is(e!ilkn men44unkn l8ohol *% 'n4 ,isemp!o(kn ke
selu!uh pe!mukn (n4n0
Dlm pe!8o.n ini9 kmi men44unkn 7!um ose se.4i me,i un(uk memin,hkn
mik!o. (e!se.u( ,!i h.i(us lmin'0 J!um ose (e!se.u( (e!le.ih ,hulu h!us ,is(e!ilkn
,en4n 8! mem.k!n' p, .unsen smpi 7!umn' pi7!0 Llu 7!um ose (e!se.u(
,i,imkn selm F# meni(9 (u7un hl ini 'i(u un(uk men,in4inkn 7!um ose/n' 'n4
h.is ,ipi7!kn (,i 4! ke(ik 7!um ose i(u ,i4o!eskn ke ,lm 8)n pe(!i 'n4 .e!isi
o.7ek mik!o. 'n4 kn ,iisolsi9 (i,k se4e! mem(ikn mik!o.n'0
P!k(ikum kli ini ,lh mempel7!i (eknik isolsi mik!o. ,en4n 8! 4o!esn0
Teknik 4o!esnn' ,ilkukn ,lm 8)n pe(!i0 Den4n men44unkn 7!um ose 'n4
se.elumn' ,ipnskn p, pi .unsen llu ,i8elupkn p, lkohol un(uk s(e!ilissi
7!umn'0 Go!esn ,i.e!ikn sn4( (ipis sekli p, pe!mukn (s me,ium ,lm 8)n
pe(!i se8! >i4/>49
P, pe!8o.n ini mik!o. 'n4 ,i4unkn hn' s(u 7enis 'i(u .k(e!i ,n
men44unkn ,u me,ium 'kni me,ium NA ,n me,ium PDA0
Me,ium NA .e!=un4si un(uk mem.ikn .e!.4i m8m mik!oo!4nisme se!( kul(u!
.k(e!i0 Se,n4kn me,ium PDA .e!=un4si un(uk menum.uhkn =un4i 7enis kpn40 P,
p!k(ikum ini ki( mempel7!i .4imn melkukn (eknik inokulsi .ikn
mik!oo!4nisme p, me,ium s(e!il sehin44 .is men,e=inisikn .h) (eknik inokulsi
,lh peke!7n memin,hkn .k(e!i ,!i me,ium lm keme,ium .!u ,en4n (in4k(
ke(eli(in sn4( (in44i ,n ,i(un(u( un(uk .eke!7 se8! sep(i8 'i(u .e.s ,!i pen4!uh
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
9/13
kon(minn mik!oo!4nisme 'n4 lin0 Teknik sep(i8 ,ilkukn ,en4n pen'e,in l(/l(
ke!7 'n4 s(e!il ,n .eke!7 ,i,ek( pi Bunsen 4! (e!hin,! ,!i kon(minn u,!0p,
)k(u inokulsi 7!um 'n4 ,i4unkn un(uk mein,hkn mik!o. h!us ,ipi7!kn ,i(s pi
se4e! se.elum ,n sesu,h melkukn pemin,hn0 Pemnsn ini men4hn8u!kn semu
.en(uk kehi,upn 'n4 , p, pe!mukn 7!um (u l( pemin,hn9 se(elh ,i inokulsi
.ikn .k(e!i ,isimpn ,n ,iinku.si ,lm lin4kun4n 'n4 sesui un(uk pe(um.uhn0
Se(elh ,iinku.si selm &2 7m ,ipe!oleh hsil pe!(um.uhn mik!o. hn' p,
me,ium NA9 se,n4kn p, me,ium PDA (i,k men4lmi pe!(um.uhn sm sekli0 ;l
ini ,ik!enkn mik!o. 'n4 ,iisolsi ,lh 7enis .k(e!i9 ,n .k(e!i hn' ,p( (um.uh
p, me,ium NA0 J,i 'n4 kn ,i.hs p, kli ini ,lh .4imn pe!(um.uhn
mik!o. p, me,ium NA0 P, 8)n pe(!i pe!(m9 7umlh koloni 'n4 (um.uh ,lh
se.n'k 2 koloni ,n memiliki mo!=olo4i sepe!(i )!n pu(ih susu9 (epi .e!lekuk9 .en(uk (k
.e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul9 ,n (eks(u! kusm0 P, 8)n pe(!i ke,u9
7umlh koloni 'n4 ,i(emukn ,lh se.n'k & koloni ,n .e!)!n k!em9 (epi .e!lekuk9
.en(uk (k .e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul9 ,n (eks(u! kusm0 P, 8)n pe(!i
ke(i4 ,n keemp(9 msin4/msin4 ,i(emukn mik!o. ,en4n 7umlh - koloni ,n "
koloni9 ,n un(uk mo!=olo4in' sm ,en4n p, 8)n pe(!i ke,u0 Un(uk 8)n pe(!i
(e!khi! ,i(emukn mik!o. se.n'k ? koloni9 ,n memiliki mo!=olo4i sepe!(i )!n k!em9
(epi (k .e(u!n9 .en(uk (k .e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul ,n (eks(u! kusm0
Be!,s!kn hsil pe!8o.n (e!se.u( ,i(s mk ,p( ,ik(kn pe!8o.n (e!se.u(
.elum .e!hsil0 Menu!u( R(n "11%
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
10/13
NA 7u4 .is ,ise.u( ,en4n nu(!ien( p,( 'n4 ,i4unkn un(uk menum.uhkn .k(e!i0
5un4si 4! H 4! hn' se.4i pen4en(l nmun .ukn >( mknn p, .k(e!i9 4!
,p( mu,h men7,i p,( p, suhu (e!(en(u0 ;l ini sesui ,en4n pen,p(
D)i,7osepu(!o "11&< 'n4 men'(kn .h) me,ium!utrient Agar ,lh slh s(u
me,ium p,( 'n4 memiliki komposisi 'i(u 4! H 4! 'n4 (elh ,i pnskn ,n men8i!
,en4n suhu 1-%@0 A4! H 4! ,lh >( pen4en(l ,n .ukn se.4i sum.e! mknn .4i.k(e!i0 Menu!u( pen,p( Ameli09 et all #%%-< 'n4 men'(kn .h) 4! H 4!
,i4unkn un(uk mem.u( me,ium p,(9 4! l!u( ,n men7,i p,( p, suhu &-%@0 NA
le.ih .e!si=( umum sehin44 mik!o. .n'k (um.uh p, me,i ini k!en s(uk(u! ,!i
nu(!ien( 4! i(u sesui ,en4n (emp( mik!o. (um.uh 'i(u suhu ,n kelem.pn n'
sehin44 mik!o. ,p( 8ep( (um.uh p, kon,isi (e!se.u(0
Ameli9G09 R9 et" al0 #%%-0 Isolsi ,n Pen4u7in Ak(i6si En>im Amilse ,n P!o(ese
Mik!o. ,!i Te!si Asl Klimn(n Timu!0 Bo4o!: Pus( Peneli(in Biolo4i0
D)i,7osepu(!o9 D0 "11&0 Ds!/,s! Mik!o.iolo4i0Jk!(: D7m.(n0
+. Pem&a!a$an
Me,ium me!upkn .hn 'n4 ,i4unkn un(uk menum.uhkn mik!oo!4nisme
,i(s (u ,i,lmn'9 me,ium (e!se.u( h!us memenuhi s'!(/s'!(9 n(! lin ,lh
h!us men4n,un4 semu >( h! 'n4 mu,h ,i4unkn oleh mik!o.9 h!us mempun'i
(eknn osmosis9 (e4n4n pe!mukn ,n p; 'n4 sesui ,en4n ke.u(uhn mik!o. 'n4kn ,i(um.uhkn9 (i,k men4n,un4 >(/>( 'n4 ,p( men4hm.( pe!(um.uhn
mik!o.9 h!us .e!, ,lm ke,n s(e!il se.elum ,i4unkn9 4! mik!o. 'n4 ,i
(um.uhkn ,p( (um.uh ,en4n .ik0 Pe!8o.n kli ini 'i(u pem.u(n me,ium NA9
PDA9 LB DAN MEA0
NA !utrien agar< ,i4unkn se.4i me,i pe!(um.uhn .k(e!i0 Pem.u(n me,ium
pe!8o.n ini ,en4n men44unkn NA Nu(!ien A4!
8/10/2019 Laporan Mikrobiologi Pangan Isolasi
11/13
,ipe!oleh * hl ini menn,kn .k(e!i ,p( hi,up p, p; (e!se.u(9 hl ini sesui ,en4n
li(e!(!u! 'n4 men'(kn .k(e!i ,p( hi,up p, p; ?92/*0 Kemu,in ,imsukkn
ke,lm u(okl6 ,en4n mulu( E!lenme'e! ,isum.( ,en4n kps ,n ,ilpisi ke!(s
,ilu!n'0 Tu7un ,!i penu(upn ini 4! meminimlkn kon(minsi0 Pem.u(n NA
.e!,s!kn konsis(enn' (e!msuk me,ium p,( ,n menu!u( ke4unnn' (e!msuk
me,ium umum0
PDA Potato Destore Agar< ,i4unkn un(uk menum.uhkn =un4i (u 7mu!0
Pem.u(n me,ium p, pe!8o.n ini ,en4n men44unkn PDA Potato Destore Agar