Upload
others
View
0
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
KORELASI PEMBERIAN BAWANG HITAM DENGAN KADAR TRIGLISERIDA
PADA TIKUS PUTIH (Rattus Norvegicus strain wistar) JANTAN YANG
DIBERI DIET TINGGI LEMAK DAN FRUKTOSA
TUGAS AKHIR
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Gizi
Oleh :
Salsabila Absari
145070300111008
PROGRAM STUDI SARJANA ILMU GIZI
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2018
DAFTAR ISI
Halaman
Judul .......................................................................................................................... i
Halaman Pengesahan ............................................... Error! Bookmark not defined.
Pernyataan Keaslian Tulisan ..................................... Error! Bookmark not defined.
Kata Pengantar .......................................................... Error! Bookmark not defined.
Abstrak .................................................................................................................... vii
Abstract ................................................................................................................... vii
Daftar Isi ................................................................................................................. viii
Daftar Gambar ......................................................................................................... xii
Daftar Tabel ............................................................................................................ xiii
Daftar Lampiran ..................................................................................................... xiiv
Daftar Singkatan ...................................................................................................... xv
Bab 1 PENDAHULUAN ............................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang .................................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .............................................................................................. 4
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................................ 5
1.3.1 Tujuan Umum .................................................................................................. 5
1.3.2 Tujuan Khusus ................................................................................................. 5
1.4 Manfaat ................................................................ Error! Bookmark not defined.
1.4.1 Manfaat Bagi Akademik .................................... Error! Bookmark not defined.
1.4.2 Manfaat Praktis Untuk Masyarakat ................... Error! Bookmark not defined.
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA..................................... Error! Bookmark not defined.
2.1 Sindrom Metabolik ............................................... Error! Bookmark not defined.
2.1.1 Definisi ............................................................................................................. 7
2.1.2 Patogenesis ..................................................................................................... 9
2.1.2.1 Resistensi Insulin .......................................................................................... 9
2.1.2.2 Obesitas ..................................................................................................... 11
2.1.2.3 Hipertensi.................................................................................................... 12
2.2 Dislipidemia ......................................................... Error! Bookmark not defined.
2.2.1 Klasifikasi Dislipidemia ...................................... Error! Bookmark not defined.
2.3 Trigliserida ........................................................... Error! Bookmark not defined.
2.3.1 Definisi .............................................................. Error! Bookmark not defined.
2.3.2 Metabolisme Trigliserida ................................... Error! Bookmark not defined.
2.3.2.1 Jalur eksogen ................................................ Error! Bookmark not defined.
2.3.2.2 Jalur endogen ................................................ Error! Bookmark not defined.
2.3.3 Faktor – faktor yang mempengaruhi kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.
2.3.4 Diet tinggi lemak dan fruktosa ........................... Error! Bookmark not defined.
2.4 Bawang Hitam ..................................................... Error! Bookmark not defined.
2.4.1 Kandungan Bawang Hitam ............................... Error! Bookmark not defined.
2.4.2 Pengaruh Pemberian Bawang Hitam terhadap Kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.
BAB 3 KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESA PENELITIANError! Bookmark not defined.
3.1 Kerangka Konsep ................................................ Error! Bookmark not defined.
3.2 Penjelasan Kerangka Konsep Penelitian .......................................................... 26
3.3 Hipotesis .............................................................. Error! Bookmark not defined.
BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN .......................... Error! Bookmark not defined.
4.1 Rancangan Penelitian .......................................... Error! Bookmark not defined.
4.2 Populasi dan Sampel ........................................... Error! Bookmark not defined.
4.2.1 Jumlah Sampel ................................................. Error! Bookmark not defined.
4.2.2 Prosedur Pengambilan Sampel ......................... Error! Bookmark not defined.
4.2.3 Kriteria Subjek .................................................. Error! Bookmark not defined.
4.3 Variabel Penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.
4.4 Lokasi dan waktu penelitian ................................. Error! Bookmark not defined.
4.4.1 Lokasi penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.
4.4.2 Waktu penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.
4.5 Bahan dan Alat/ Instrument Penelitian ................. Error! Bookmark not defined.
4.5.1 Bahan Penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.
4.5.2 Alat Penelitian ................................................... Error! Bookmark not defined.
4.6 Definisi Operasional ............................................. Error! Bookmark not defined.
4.7 Prosedur Penelitian dan Pengumpulan Data........ Error! Bookmark not defined.
4.7.1 Persiapan ......................................................... Error! Bookmark not defined.
4.7.1.1 Pengajuan Etik ............................................... Error! Bookmark not defined.
4.7.1.2 Persiapan Bahan ........................................... Error! Bookmark not defined.
4.7.2 Pelaksanaan ..................................................... Error! Bookmark not defined.
4.7.2.1 Pembelian Hewan Coba ................................ Error! Bookmark not defined.
4.7.2.2 Pembelian Bawang Hitam .............................. Error! Bookmark not defined.
4.7.2.3 Pembuatan Pakan dan Diet Tikus .................. Error! Bookmark not defined.
4.7.3 Induksi Diet dan Bawang Hitam ....................... Error! Bookmark not defined.
4.7.4 Pembedahan Tikus ........................................... Error! Bookmark not defined.
4.7.5 Langkah-langkah Pelaksanaan Penelitian ........ Error! Bookmark not defined.
4.7.6 Prosedur Pemberian Diet Tinggi Lemak dan FruktosaError! Bookmark not defined.
4.7.7 Prosedur Pemberian Bawang Hitam ................. Error! Bookmark not defined.
4.7.8 Prosedur Pengambilan Serum .......................... Error! Bookmark not defined.
4.7.9 Perlakuan terakhir pada Tikus........................... Error! Bookmark not defined.
4.7.10 Prosedur Pengukuran Kadar Trigliserida serumError! Bookmark not defined.
4.7.11 Pengumpulan Data ......................................... Error! Bookmark not defined.
4.8 Analisa Data ........................................................ Error! Bookmark not defined.
BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA ..... Error! Bookmark not defined.
5.1 Karakteristik Sampel ............................................ Error! Bookmark not defined.
5.2 Asupan Pakan dan Zat Gizi Hewan Coba ............ Error! Bookmark not defined.
5.3 Kadar Trigliserida serum ...................................... Error! Bookmark not defined.
BAB 6 PEMBAHASAN ............................................... Error! Bookmark not defined.
6.1 Karakteristik Sampel ............................................ Error! Bookmark not defined.
6.2 Pengaruh Pemberian DTLF dan bawang hitam terhadap berat badan tikusError! Bookmark not defined.
6.3 Pengaruh Pemberian DTLF dan Bawang Hitam terhadap Kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.
6.4 Implikasi di Bidang Gizi ........................................ Error! Bookmark not defined.
6.5 Keterbatasan Penulis ........................................... Error! Bookmark not defined.
BAB 7 Kesimpulan dan Saran.................................... Error! Bookmark not defined.
7.1 Kesimpulan .......................................................... Error! Bookmark not defined.
7.2 Saran ................................................................... Error! Bookmark not defined.
DAFTAR PUSTAKA ................................................... Error! Bookmark not defined.
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 3.1 Kerangka Konsep................................................................................ 31
Gambar 5.1 Penambahan Berat Badan Hewan Coba ............................................. 43
Gambar 5.2 Rata – rata Asupan Energi Hewan Coba ............................................. 46
Gambar 5.3 Rata – rata Asupan Lemak Hewan Coba ............................................ 47
Gambar 5.4 Rata – rata Asupan Karbohidrat Hewan Coba ..................................... 47
Gambar 5.4 Rerata Kadar Trigliserida .................................................................... 49
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Kriteria Sindrom Metabolik ........................................................................ 8
Tabel 2.2 Komposisi Pakan Tikus ......................................................................... 16
Tabel 2.3 Komposisi Pakan Tikus ........................................................................... 17
Tabel 2.4 Perbedaan kandungan dalam bawang hitam dan bawang putih ............. 18
Tabel 2.5 Kandungan SAC (µg/g) bawang hitam dipengaruhi oleh suhu dan lama
pemanasan ............................................................................................................. 19
Tabel 2.6 Kandungan poliphenol dan flavonoid pada bawang hitam selama
proses pemanasan dengan suhu 70o ...................................................................... 19
Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji ............................................................... 27
Tabel 4.2 Kandungan Gizi Diet Normal Persaji (40 gram) ....................................... 27
Tabel 5.1 Karakteristik Sampel ............................................................................... 42
Tabel 5.2 Rata – rata Berat Badan Tikus Selama Penelitian ................................... 43
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Teknik Randomisasi Sampel ........................................................ 77
Lampiran 2. Diagram Alur Pembuatan Diet Normal PARS ............................... 79
Lampiran 3. Diagram Alur Pembuatan Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa .......... 80
Lampiran 4. Diagram Alur Persiapan Bawang Hitam ....................................... 81
Lampiran 5. Bahan Pembuatan Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa .................... 82
Lampiran 6. Bahan-Bahan Pembuatan Bawang Hitam .................................... 83
Lampiran 7. Dokumentasi Kegiatan Selama Penelitian .................................... 84
Lampiran 8. Hasil Penimbangan Berat Badan Tikus Selama Penelitian ........... 87
Lampiran 9. Asupan Pakan Tikus Selama Penelitian ....................................... 88
Lampiran 10. Prosedur Pembedahan Tikus ..................................................... 94
Lampiran 11. Hasil Analisis Statistik Berat Badan ............................................ 95
Lampiran 12. Hasil Analisis Statistik Asupan Pakan PARS .............................. 96
Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Asupan Pakan DTLF ............................. 100
Lampiran 14. Hasil Analisis Statistik Kadar MDA ........................................... 104
Lampiran 15. Pernyataan Kelaikan Etik Penelitian ......................................... 107
ABSTRAK
Absari, Salsabila. 2018. Korelasi Pemberian Bawang Hitam Dengan Kadar Trigliserida
Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus strain wistar) Jantan Yang Diberi Diet Tinggi Lemak Dan Fruktosa. Tugas Akhir, Program Studi Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Pembimbing: (1) Kanthi Permaningtyas T, S.Gz.MPH (2) Olivia Anggraeny, S.Gz,. M.Biomed
Sindrom Metabolik termasuk kumpulan sindroma - sindroma yang prevalensinya tinggi saat ini. Salah satu faktor risiko terjadinya Sindrom Metabolik yaitu dislipidemia yang ditandai oleh peningkatan kadar kolesterol total, kadar LDL dan kadar trgliserida serta penurunan kadar HDL. Peningkatan kadar trigliserida dapat ditangani dengan pemberian bawang hitam. Bawang hitam mengandung antioksidan seperti S-allylcysteine, polifenol, dan flavonoid yang mampu menurunkan kadar trigliserida. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida tikus putih (Rattus Novergicus Strain Wistar) jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa. Penelitian ini menggunakan metode true experimental yang menggunakan rancangan post test only control group design. Pemilihan sampel hewan coba menggunakan simple random sampling. Jumlah sampel yang digunakan sebanyak 30 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif diberi pakan diet normal berupa PARS dan sonde aquades, kontrol positif diberi pakan diet tinggi lemak dan fruktosa dan sonde aquades, kelompok P1 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 240 mg, kelompok P2 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 480 mg serta kelompok P3 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 960 mg selama 14 hari. Kadar trigliserida diukur menggunakan metode spektrofotometer dan analisis statistik menggunakan uji One Way Anova. Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa rata – rata kadar trigliserida pada kelompok (K1) = 95,6 mg/dl, (K2) = 77 mg/dl. (P1) = 85,54 mg/dl, (P2) = 91,8 mg/dl, (P3) = 87,8 mg/dl. Kemudian, dengan menggunakan One Way Anova didapatkan nilai p=0,984 (p<0.005) dan dilanjutkan dengan Uji Spearman dan uji korelasi linear sederhana dengan nilai p = 0.947 dan p = 0.971 (p>0,05). Kesimpulan dari penelitian ini adalah tidak terdapat hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida pada tikus putih jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.
Kata Kunci : bawang hitam, kadar trigliserida, diet tinggi lemak dan fruktosa*
ABSTRACT
Absari, Salsabila. 2018. The Correlation Of Black Garlic with Triglyceride Levels of White Male Rats (Rattus Norvegicus Strain Wistar) Fed with High-Fat And Fructose Diet. Final Assignment, Nutrition Program, Faculty of Medicine, Brawijaya University. Supervisors: (1) Kanthi Permaningtyas T, S.Gz.MPH (2) Olivia Anggraeny, S.Gz,. M.Biomed
Metabolic syndrome includes a highly prevalent disease nowadays. One of the factors that influence the Metabolic Syndrome is dyslipidemia characterized by elevated cholesterol, LDL and triglyceride levels and decreased HDL levels. Elevated triglyceride levels may be given by black garlic. Black garlic contain antioxidants such as S-allylcysteine, polyphenols, and flavonoids that overcome triglyceride levels. The purpose of this study was to determine the effect of black garlic on triglyceride levels of white rat (Rattus Novergicus Strain Wistar) males who were fed with high fat and fructose diet. This research used true experimental method used post test only control group design design. Selection of animal samples used simple random sampling. The samples used were 30 rats divided into 5 groups: negative control group fed with normal diet (PARS) and aquades, positive control fed with high fat and fructose diet, P1 group fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 240 mg, P2 group fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 480 mg and group P3 fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 960 mg for 14 days. Levels of triglycerides measured using spectrophotometer method and statistical analysis using One Way Anova test. The result of statistical analysis showed that the mean of triglyceride level in group (K1) = 95,6 mg / dl, (K2) = 77 mg / dl. (P1) = 85.54 mg / dl, (P2) = 91.8 mg / dl, (P3) = 87.8 mg / dl. Then, using One Way Anova obtained p value = 0,984 (p <0.005) and continued with Spearman test and simple linear correlation test with p = 0.947 and p = 0.971 (p> 0,05). The conclusion of this research is that there is no correlation of black garlic with triglyceride levels in male white rats fed with high fat and fructose diet. Keywords : black garlic, Triglycerides levels, High Fat and Fructose Diet*
1
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Sindrom metabolik bukan merupakan penyakit yang spesifik. Sindrom
metabolik adalah keadaan gangguan metabolik seperti resistensi insulin,
hiperinsulinemia, obesitas sentral, gangguan toleransi glukosa, dislipidemia,
hipertensi, dan keadaan proinflamasi dan protrombotik. Sindrom metabolik
adalah sekelompok kelainan metabolik yang membuat seseorang mengalami
peningkatan risiko penyakit kardiovaskular secara substansial - kira-kira dua kali
lebih tinggi dari orang yang tidak mengalami sindrom ini (Srikanthan et al., 2016;
Thaman et al., 2013).
Prevalensi sindrom metabolik pada orang dewasa di Amerika Serikat,
menurut kriteria diagnostik National Centers for Environmental Predictions
(NCEP), adalah 6,7% pada kelompok usia 20-29 tahun, 43,5% 60 - 69 tahun,
dan 42% paling tinggi di antara 70 tahun. Diperkirakan saat ini sekitar 100 juta
orang di dunia menderita sindrom metabolik. Prevalensi sindrom metabolik
berkisar antara 20% - 25% di antara individu dengan status gizi yang baik, 50%
pada pasien dengan glukosa darah abnormal, 80% pada pasien diabetes tipe 2.
Dan juga berkisar 12,4% sampai 28,5% pada pria dan dari 10,7% sampai 40,5%
pada wanita, sindrom ini lebih banyak terjadi pada wanita dibanding pria
(Tavares et al., 2015).
2
Komponen utama sindrom metabolik diantaranya adalah dislipidemia
(Arthur, 2009). Dislipidemia disebabkan ketidaknormalan metabolisme
lipoprotein, mencakup kolesterol total meningkat, trigliserida meningkat,
kolesterol Low Density Lipoproterin (LDL) meningkat, dan kolesterol High
Density Lipoprotein (HDL) menurun (Price, 1994). Kadar kolesterol serum dan
trigliserida yang tinggi dapat menyebabkan pembentukan arterosklerosis.
Kolesterol dan trigliserida di dalam darah terbungkus di dalam protein
pengangkut lemak yang disebut lipoprotein. Kadar trigliserida di atas 200 mg/dl
perlu diwaspadai dan perlu dikendalikan (Adiputro, 2008). Peningkatan
trigliserida darah atau hipertrigliserida dipengaruhi oleh faktor gen dan konsumsi
makanan seperti Karbohidrat, lemak, dan alkohol. Karena itu untuk menurunkan
kadar trigliserida darah selain lemak makanan, karbohidrat juga diperhitungkan.
Selain itu, kadar trigliserida darah juga dipengaruhi oleh aktivitas enzim LPL
(Lipoprotein Lipase) yang berfungsi untuk menghidralisis trigliserida menjadi
asam lemak dan gliserol. Rendahnya aktifitas LPL ini akan dapat meningkatkan
kadar trigliserida darah (Tsalissavrina et al., 2006).
Masyarakat saat ini mulai banyak mengalami perubahan gaya hidup
sejalan dengan kemajuan teknologi. Gaya hidup seperti kurangnya aktivitas fisik
dan perubahan pola konsumsi makanan ke arah makanan yang kaya lemak dan
energi, dan rendah serat mulai banyak ditemukan. Kurangnya aktivitas fisik dan
mengkonsumsi makanan tinggi lemak termasuk beberapa faktor risiko dari
dislipidemia (Rukmini, 2007; Castillo’n et al., 2007). Akhir – akhir ini terjadi
peningkatan pengonsumsian makanan tinggi lemak dan menggunakan fruktosa
sebagai pemanis yang dapat menginduksi terjadinya sindrom metabolik.
3
Indonesia memiliki ragam kekayaan alam yang sekarang ini dapat
digunakan sebagai obat tradisional seperti jeruk nipis, kulit manggis, jahe, kunyit,
dan bawang putih. Bawang putih merupakan salah satu bumbu yang pasti ada di
rumah masyarakat dan mudah untuk didapatkan. Bawang putih berisi berbagai
bio-fungsional yang dapat mempengaruhi kesehatan, tetapi tidak dinikmati oleh
banyak orang karena baunya yang menyengat. Berbagai metode pengolahan
makanan telah digunakan untuk menyingkirkan bau bawang putih. Salah satunya
adalah dengan melakukan reaksi maillard yaitu bawang putih yang dilakukan
proses pemanasan yang mengakibatkan perubahan warna pada bawang putih
(Sasaki et al., 2007). Bawang hitam dibuat dengan menggunakan rice cooker
dalam suhu 34-38ºC selama 21 hari tanpa diberi obat tambahan dan zat aditif
lainnya. Bentuknya berwarna hitam, tidak berbau menyengat seperti bawang
putih, dan dapat dimakan secara langsung tanpa harus diolah (Wang et al.,
2010). Selama proses pematangan, glyco-komponen dan asam amino dari
bawang putih mengalami reaksi pencoklatan non-enzimatik, memproduksi
melanoidins dan komponen yang larut dalam air seperti S-allylcysteine (SAC)
dan S-allyl melcaptocystein (SAMC), dan hampir menghilangkan semua zat yang
mudah menguap. Dalam ekstrak bawang hitam, isi komponen larut dalam air,
seperti SAC dan SAMC, diketahui meningkat secara signifikan selama proses
penuaan, seperti bawang putih mentah, yang mungkin berperan penting dalam
antilipidemic serta pemberian aktivitas antioksidan yang kuat (Ha et al., 2015).
Beberapa studi melaporkan bahwa 3-5% ekstrak bawang hitam secara
signifikan menghambat peningkatan kadar kolesterol darah dan trigliserida (TG)
pada tikus diabetes atau hiperkolesterol. Dalam penelitian Ha et al (2015),
suplementasi ekstrak bawang hitam secara signifikan meningkatkan ekskresi
4
fekal lipid, baik TG dan kolesterol, yang menunjukkan bahwa mekanisme ekstrak
bawang hitam tidak hanya terkait dengan mekanisme sintesis lemak, tetapi juga
bisa terkait dengan mekanisme lain yang menyebabkan peningkatan ekskresi
feses atau tingkat penyerapan lemak makanan, menghasilkan penurunan yang
signifikan dalam konsentrasi plasma profil lipid pada tikus yang diberi ekstrak
bawang hitam. Sehingga asupan yang tepat dari bawang hitam akan bermanfaat
dalam pencegahan hiperlipidemia dan hiperglikemia yang disebabkan oleh diet
tinggi lemak.
Kelebihan dari penelitian ini adalah sudah ada penelitian yang meneliti
pemberian bawang hitam terhadap kadar trigliserida pada tikus yang diberi
pakan tinggi lemak, tetapi belum ada penelitian yang mengkaitkan hubungan
pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida yang diberi pakan tinggi
lemak dan fruktosa. Pada penelitian Sasaki (2007), bawang hitam digunakan
dalam bentuk ekstrak sedangkan peneliti menggunakan bawang hitam yang
dihaluskan sehingga lebih mudah pengaplikasiannya untuk masyarakat.
Dari latar belakang di atas, peneliti akan meneliti hubungan pemberian
bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih (Rattus norvegicus
strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan fruktosa.
1.2 Rumusan Masalah
Apakah ada hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar
Trigliserida (TG) pada tikus putih j(Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi tinggi lemak dan fruktosa
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan umum
5
Tujuan umum penelitian ini dilakukan adalah untuk mengetahui hubungan
pemberian bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih
(Rattus norvegicus strain wistar) yang diberi tinggi lemak dan fruktosa
1.3.2 Tujuan khusus
Tujuan khusus penelitian ini dilakukan adalah untuk mengetahui:
1) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus
Novergicus yang diberi diet normal.
2) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus
norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa.
3) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus
norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam
dosis 1.
4) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus
norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam
dosis 2.
5) Mengetahui kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih (Rattus
norvegicus strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan fruktosa
dan bawang hitam dosis 3.
6) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan
berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi diet normal
7) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan
berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.
6
8) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan
berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis
1.
9) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan
berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis
2.
10) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan
berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan
yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis
3.
11) Mengetahui asupan pakan tikus putih Rattus norvegicus strain wistar)
jantan
1.4 Manfaat
1.4.1 Manfaat Bagi Akademik
Hasil penelitian ini dapat menjadi bahan pustaka informasi hubungan
pemberian bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih
(Rattus norvegicus strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan
fruktosa dengan berbagai dosis sehingga dapat dijadikan dasar untuk
studi lanjutan yaitu uji klinis pada manusia.
1.4.2 Manfaat Praktis Untuk Masyarakat
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
kepada masyarakat bahwa bawang hitam dapat digunakan untuk
menurunkan kadar Trigliserida.
7
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Sindrom Metabolik
2.1.1 Definisi
Sindrom metabolik adalah gabungan dari gangguan metabolik seperti
resistensi insulin, hiperinsulinemia, obesitas perut, toleransi glukosa terganggu,
dislipidemia, hipertensi, dan keadaan proinflamasi dan protrombotik. Sindrom
metabolik adalah sekelompok kelainan metabolik yang membuat seseorang
mengalami peningkatan risiko penyakit kardiovaskular secara substansial - kira-
kira dua kali lebih tinggi dari orang yang tidak mengalami sindrom ini (Srikanthan
et al., 2016; Thaman R et al., 2013).
Pada tahun 1998, WHO merupakan organisasi pertama yang
menyampaikan kriteria sindrom metabolik. Menurut WHO istilah sindrom
metabolik dapat digunakan pada populasi Diabetes Mellitus karena dapat
memenuhi kriteria tersebut dan dapat menunjukkan besarnya risiko pada
kejadian kardiovascular. Pada tahun 1999, the European Group for Study of
Insulin Resistance (EGIR) melakukan modifikasi pada kriteria WHO, EGIR lebih
menggunakan obesitas sentral dibandingkan Indeks Massa Tubuh (IMT) dan
istilah sindrom resistensi insulin tidak dapat dipakai pada penyandang DM karena
resistensi insulin merupakan faktor risiko DM. Pada tahun 2001, National
Cholesterol Education Program (NCEP) Adult Treatment Panel III (ATP III)
8
menampilkan kriteria baru yang tidak memasukkan adanya komponen resistensi
insulin, kriteria ini menganggap bahwa obesitas sentral adalah faktor utama yang
dapat mendasari kejadian sindrom metabolik. Nilai cut-off lingkar perut diambil
dari National Institute of Health Obesity Clinical Guidelines; ≥102 cm untuk pria
dan ≥88 cm untuk wanita. Etnik tertentu seperti Asia memiliki cut-off lebih rendah
dari ATP III, mudah berisiko terkena kejadian sindrom metabolik.
Tabel 2.1 Kriteria Sindrom Metabolik
Kriteria Klinis WHO 1998 ATPIII 2004 EGIR 1999 AACE 2003
Pada IGT/HOMA –IR ,DM/IFG dibutuhkan 2 dari 4
Minimal 3 dari 5 Hiperinsulinemi a puasa (kuartil tertinggi) dan 2 dari 4
2 dari 4
Ekskresi Albumin urin
>20 µg/menit - -
Ratio lingkar pinggang panggul pria
Wanita
>0.90
>0.85
Lingkar pinggang pria wanita
≥102 cm
≥88 cm
>94 cm
≥80 cm
Trigliserida ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL
Kolesterol HDL Pria
Wanita
<35 mg/dL
<39 mg/dL
<40 mg/dL
<50 mg/dL
<39 mg/dL
<39 mg/dL
<40 mg/dL
<50 mg/dL
Tekanan Darah ≥140/90 mmHg ≥130/85 mmHg ≥140/90 mmHg ≥130/85 mmHg
Glukosa darah GDP ≥110 mg/dL (DM tidak di eksklusi)
GDP ≥6.1 mmol/l (menyingkirkan
DM)
GDP 110-125 GD 2 j PP 140- 200 mg/dL
9
** Penyakit serebrovascular, hipertensi, PCOS, NAFLD, riwayat keluarga dengan
T2DM/hipertensi/ penyakit serebrovascular, riwayat diabetes gestasional, non Kaukasian,
gaya hidup kurang aktif, IMT >25, umur >40 tahun Diambil dari Bloomgarden 2004, 1 st
congress on insulin resistance syndrome
2.1.2 Patogenesis
2.1.2.1 Resistensi Insulin
Insulin adalah hormon anti-hormonal dan efek metabolik ini melibatkan
aktivasi phosphatidylinosital (PI) 3-kinase. Dalam kasus resistensi insulin, jalur PI
3- kinase terganggu dan Insulin tidak lagi antiautogenik (Wang et al., 2004).
Obesitas adipositas pada perut tertentu merupakan salah satu alasan utama
resistensi insulin. Asam lemak nonesterifikasi (NEFA) dilepaskan dari jaringan
adiposa berlebih, yang meningkatkan resistensi insulin. Dalam kasus resistensi
insulin ada peningkatan lipolisis dari jaringan adiposa yang meningkatkan asam
lemak bebas, selanjutnya menghambat efek anti-lipolitik dari Insulin (Eckel et al.,
2005). Lemak viseral atau omental nampaknya paling merugikan dan paling
berkontribusi terhadap pengembangan lipotoksisitas pada jaringan perifer oleh
sekresi adipositokin (Gill et al., 2005). Sindrom Metabolik dikaitkan dengan
jumlah lemak intra-abdomen dalam jumlah tinggi, kadar adiponektin rendah, dan
kadar sitokin yang meningkat (interleukin 1RA dan interleukin 1beta)
(Salmenniemi et al., 2004). Hiperinsulinemia dapat meningkatkan produksi
trigliserida lipoprotein densitas rendah dan dengan demikian meningkatkan
trigliserida.
Insulin mempromosikan pengambilan glukosa pada sel otot, lemak, dan
hati dan dapat mempengaruhi lipolisis dan produksi glukosa oleh hepatosit.
Kontributor utama untuk pengembangan resistensi insulin adalah asam lemak
yang beredar melebihi batas normal, yang dilepaskan dari massa jaringan
10
adiposa. Asam lemak bebas mengurangi sensitivitas insulin pada otot dengan
menghambat serapan glukosa yang dimediasi oleh insulin. Peningkatan kadar
glukosa yang beredar meningkatkan sekresi insulin pankreas yang
mengakibatkan hiperinsulinemia. Di hati, asam lemak bebas meningkatkan
produksi glukosa, trigliserida dan sekresi lipoprotein densitas sangat rendah
(VLDL). Konsekuensinya adalah pengurangan transformasi glukosa menjadi
glikogen dan peningkatan akumulasi lipid pada trigliserida (TG). Insulin adalah
hormon antilipolitik yang penting. Dalam kasus resistensi insulin, peningkatan
jumlah lipolisis dari molekul triasilgliserol yang tersimpan dalam jaringan adiposa
menghasilkan lebih banyak asam lemak, yang selanjutnya dapat menghambat
efek antilipolitik insulin, menciptakan lipolisis tambahan (Aganović et al., 2005).
Kontributor tambahan untuk resistensi insulin meliputi kelainan pada
sekresi insulin dan sinyal reseptor insulin, penurunan kadar glukosa, dan sitokin
proinflamasi. Hubungan toleransi glukosa terganggu dan resistensi insulin
terdokumentasi dengan baik. Untuk mengimbangi kekurangan aktivitas insulin,
sekresi insulin atau pembersihan perlu dimodifikasi untuk mempertahankan
kadar glukosa normal. Hiperglikemia adalah hasil akhir jika mekanisme ini gagal
(Eckel et al., 2005). Karena resistensi insulin meningkatkan risiko seseorang
terkena penyakit kardiovaskular dan diabetes tipe 2, beberapa peneliti telah
mengusulkan tindakan resistensi insulin pada individu obesitas dengan dan
tanpa Sindrom Metabolik. Reilly (2004) percaya bahwa tes insulin atau biomarker
alternatif resistensi insulin dapat memfasilitasi prediksi risiko kardiovaskular pada
individu dengan Metabolic Syndrome (Thaman R et al., 2013)
11
2.1.2.2 Obesitas
Epidemiologi obesitas dianggap sebagai salah satu pendorong utama
meningkatnya prevalensi sindrom metabolik. Obesitas berkontribusi terhadap
hiperglikemia dan hipertensi dan dikaitkan dengan risiko penyakit kardiovaskular
(CVD) yang lebih tinggi. Dalam studi klinis dan epidemiologi, obesitas sangat
terkait dengan semua faktor kardiovaskular. Namun, mekanisme yang mendasari
hubungan antara obesitas perut (terutama obesitas viseral) dan sindrom
metabolik tidak sepenuhnya dipahami dan cenderung rumit.
Beberapa perubahan yang merusak metabolisme lipid sering terlihat pada
orang yang menderita obesitas. Perubahan ini paling erat berkorelasi dengan
jumlah lemak viseral daripada lemak tubuh total. Secara umum, obesitas
cenderung meningkatkan kadar kolesterol dan trigliserida plasma puasa dan
menurunkan kadar HDL-C plasma. Meskipun tingkat kolesterol LDL-C (LDL-C)
tetap sedikit meningkat atau normal, partikel LDL aterogenik meningkat, terutama
pada pasien dengan resistensi insulin yang terkait dengan adipositas viseral.
Perubahan ini meningkatkan risiko aterosklerosis (Standl, 2005).
Lemak viseral mengeluarkan produk metabolisme langsung ke sirkulasi
portal, yang membawa darah langsung ke hati. Karena itu asam lemak bebas
dicampurkan ke dalam hati. Asam lemak bebas juga menumpuk di pankreas,
jantung dan organ lainnya. Hal ini menyebabkan disfungsi organ, yang nantinya
akan menyebabkan gangguan regulasi insulin, gula darah dan kolesterol serta
fungsi jantung yang tidak normal. Ini dikenal sebagai lipotoxicity (Harvard
College, 2006).
12
2.1.2.3 Hipertensi
Salah satu gejala utama sindrom metabolik adalah hipertensi. Ini adalah
gejala yang mungkin tidak terdeteksi dalam waktu yang lama. Ini adalah faktor
risiko penting yang dapat menimbulkan penyakit kardiovaskular. Semua
gangguan hemodinamik dan metabolik hipertensi esensial dan resistensi insulin
berhubungan erat. Hipertensi esensial sering dikaitkan dengan beberapa
kelainan metabolik, dimana obesitas, intoleransi glukosa, dan dislipidemia adalah
yang paling umum (Ferranini et al., 1991). Obesitas mungkin merupakan faktor
risiko terkuat untuk hipertensi yang tidak terkontrol. Penelitian telah menunjukkan
bahwa obesitas terdapat hubungan antara hipertensi, resistensi insulin dan
dislipidemia (Wingard et al., 1996). Di studi lain, tiga faktor ditemukan pada
pengelompokkan variabel metabolik. Ketiga faktor ini adalah resistensi insulin,
hipertensi dan dislipidemia. Baik obesitas umum maupun central dikaitkan
dengan resistensi insulin dan hipertensi dan hanya terkait erat dengan
dislipidemia (Anderson et al., 2001). Hasil studi Farmingham Heart
memperkirakan risiko kelebihan berat badan adalah penyebab hipertensi pada
78% pria dan 65% wanita (Morse et al., 2005).
Studi juga menunjukkan bahwa baik hiperglikemia dan insulin
mengaktifkan Renin-Angiotensin System (RAS) dengan meningkatkan ekspresi
angiotensinogen, AII, dan reseptor AT1, yang dapat berkontribusi pada
perkembangan hipertensi pada pasien dengan resistensi insulin (Malhotra et al.,
2001). Aktivasi RAS dapat menghambat aksi Insulin melalui jalur PI3 (Prasad et
al., 2001). Ada juga bukti yang mendukung hubungan kuat antara hipertensi dan
obesitas, yang mungkin melibatkan insulin dan leptin serta sistem saraf simpatik.
Leptin dan insulin dianggap sebagai mekanisme kompensasi yang diperlukan
13
untuk mengembalikan keseimbangan energi dengan sistem saraf simpatik
sebagai salah satu lengan efektor (Landsberg, 2001).
2.2 Dislipidemia
Dislipidemia adalah kelainan metabolisme lipid yang ditandai dengan
peningkatan atau penurunan fraksi lipid dalam plasma. Kelainan fraksi lipid yang
utama adalah kenaikan kadar kolesterol total, Low Density Lipoprotein (LDL), dan
trigliserida serta penurunan kadar High Density Lipoprotein (HDL) (Price, 2012).
2.2.1 Klasifikasi Dislipidemia
Berdasarkan proses terjadinya penyakit, dislipidemia dapat
diklasifikasikan menjadi 2, yaitu dislipidemia primer dan dislipidemia sekunder.
Dislipidemia primer disebabkan karena kelainan genetik dan bawaan.
Dislipidemia yang menyertai beberapa penyakit seperti diabetes melitus,
hipotiroidisme, sindrom nefrotik, dan gagal ginjal kronik disebut sebagai
dislipidemia sekunder (Irwan, 2008). Dislipidemia primer dapat berupa
hiperkolesterolemia poligenik, hiperkolesterolemia familial, dislipidemia remnant,
sindrom kilomikron. Hiperkolesterolemia poligenik merupakan
hiperkolesterolemia yang paling sering ditemukan yang merupakan interaksi
antara kelainan genetik, intake nutrisi dan faktor-faktor lingkungan lainnya.
Hiperkolesterolemia familial adalah kelainan yang bersifat autosomal dominan
dan terdapat dalam bentuk homozigot maupun heterozigot. Sedangkan pada
dislipidemia remnant terjadi peningkatan kolesterol dan trigliserida dengan berat
bervariasi. Dan hiperlipidemia kombinasi familial yang merupakan kelainan
genetik metabolisme lipoprotein yang sering berhubungan dengan penyakit
kardiovaskuler. Serta sindrom kilomikron, dimana terjadi kelainan enzim
lipoprotein lipase atau apolipoprotein C-II, ini merupakan penyebab
14
hipertrigliseridemia berat yang jarang ditemukan (Irwan, 2008). Sedangkan
klasifikasi dislipidemia secara klinis (menurut Eropean Atherosclerosis Society,
EAS) dibagi menjadi 3, yaitu: hiperkolesterolemia, hipertrigliseridemia, dan
campuran hiperkolesterolemia dan hipertrigliseridemia (dislipidemia campuran)
(Decroli, 2008).
2.3 Trigliserida
2.3.1 Definisi
Trigliserida adalah salah satu jenis lemak yang terdapat dalam darah dan
berbagai organ di dalam tubuh. Menurut ilmu kimia, trigliserida adalah substansi
yang terdiri dari gliserol yang mengikat gugus asam lemak (Bangun, 2003).
Sedangkan menurut Kamus Gizi (2010), trigliserida adalah istilah ilmiah untuk
bentuk umum lemak yang dapat ditemukan baik di dalam tubuh ataupun di dalam
makanan yang berbentuk ester gliserol dan asam lemak. Disebut trigliserida
karena didalamnya terkandung tiga asam lemak yang berkaitan dengan gliserol,
yang bagaimana satu asam lemak dan gliserol disebut monogliserida dan dua
asam lemak yang bergabung dengan gliserol disebut digliserida. Jika asam
lemak – asam lemak yang bergabung tersebut sama maka lemak tersebut
termasuk trigliserida sederhana dan apabila ternyata berbeda maka menjadi
trigliserida campuran (Almatsier, 2009)
Trigliserida yang biasanya terdapat di dalam tubuh manusia yaitu seperti
stearic acid yang mempunyai 18 rantai karbon yang semuanya berikatan dengan
atom hidrogen, oleic acid yang mempunyai 18 rantai karbon dan 1 ikatan ganda
di tengah rantai, serta palmitic acid yang mempunyai 16 karbon yang semuanya
berikatan (Guyton, 2006). Trigliserida ini termasuk sebagian besar bentuk dari
15
simpanan lemak di dalam tubuh yang diubah dari asam lemak bebas di dalam
jaringan tubuh menjadi cadangan energi (Wulandari, 2014).
Trigliserida yang juga dikenal sebagai triacylglycerol merupakan
kombinasi gliserol dengan tiga dari lima macam asam-asam lemak yang tersedia.
Dalam darah, trigliserida dikombinasi dengan protein untuk menghasilkan
lipoprotein. Malole (1989) menyatakan bahwa kadar trigliserida normal tikus
dewasa adalah 26 - 145 mg/dL (Baroroh, 2013), sedangkan menurut Rahayu
(2011) kadar trigliserida normal pada tikus adalah 62 – 92 mg/dl (Maris, 2015).
Kadar trigliserida normal dalam darah manusia adalah 150 mg/dL (Ramadhani,
2014).
2.3.2 Metabolisme Trigliserida
Metabolisme trigliserida dalam tubuh terutama terjadi pada hepar. Jalur
metabolisme trigliserida dibagi menjadi 2, yaitu :
2.3.2.1 Jalur eksogen
Pada jalur eksogen, trigliserida yang berasal dari makanan dalam usus
dikemas sebagai kilomikron. Kilomikron ini nantinya diangkut dalam darah
melalui ductus torasikus. Di jaringan lemak, trigliserida dan kilomikron mengalami
hidrolisis oleh lipoprotein lipase yang terdapat pada permukaan sel endotel.
Akibat hidrolisis, akan terbentuk asam lemak dan kilomikron remnan. Asam
lemak bebas akan menembus endotel dan masuk ke dalam jaringan lemak atau
sel otot untuk diubah menjadi trigliserida kembali atau dioksidasi (Wibowo, 2009).
2.3.2.2 Jalur endogen
Pada jalur endogen, trigliserida yang disintesis oleh hati akan diangkut
secara endogen dalam bentuk Very Low Density Lipoprotein (VLDL) kaya
trigliserida dan mengalami hidrolisis dalam sirkulasi oleh lipoprotein lipase yang
16
juga menghidrolisis kilomikron menjadi partikel lipoprotein yang lebih kecil yaitu
Intermediate Density Lipoprotein (IDL) dan Low Density Lipoprotein (LDL). LDL
merupakan lipoprotein yang mengandung kolesterol paling banyak (60-70%)
(Wibowo, 2009).
2.3.3 Faktor – faktor yang mempengaruhi kadar Trigliserida
Kadar trigliserida di dalam darah dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor,
yaitu seperti Diet tinggi karbohidat (60% dari intake energi) dapat
meningkatkatkan kadar trigliserida (U.S. Departement of Health and Human
Services, 2001), Faktor genetik, misalnya pada hipertrigliseridemia familial dan
disbetalipoproteinemia familial(Widiharto, 2008), Usia, semakin tua seseorang
maka terjadi penurunan berbagai fungsi organ tubuh sehingga keseimbangan
kadar trigliserida darah sulit tercapai akibatnya kadar trigliserida cenderung lebih
mudah meningkat (anonim, 2008), Stres mengaktifkan sistem saraf simpatis
yang menyebabkan pelepasan epinefrin dan norepinefrin yang akan
meningkatkan konsentrasi asam lemak bebas dalam darah, serta meningkatkan
tekanan darah (Guyton dan Hall, 1997), Penyakit hati, menimbulkan kelainan
pada trigliserida darah karena hati merupakan tempat sintesis trigliserida
sehingga penyakit hati dapat menurunkan kadar trigliserida, Vitamin niasin dosis
tinggi, menurunkan kolesterol LDL dan meningkatkan kolesterol HDL (Ganong,
1992).
2.3.4 Diet tinggi lemak dan fruktosa
Masyarakat saat ini mulai banyak mengalami perubahan pola konsumsi
makanan ke arah makanan yang kaya lemak dan energi, dan rendah serat.
Mengkonsumsi makanan tinggi lemak termasuk beberapa faktor risiko dari
17
dislipidemia (Rukmini, 2007; Castillo’n et al., 2007). Akhir – akhir ini terjadi
peningkatan pengonsumsian makanan tinggi lemak dan menggunakan fruktosa
sebagai pemanis yang dapat menginduksi terjadinya sindrom metabolik.
Diet tinggi lemak dan fruktosa pada hewan coba juga mempengaruhi
kadar trigliserida hewan coba. Hasil penelitian yang di lakukan oleh Tsalissavrina
et al., (2006) menunjukkan bahwa kadar Trigliserida darah hewan coba untuk
kelompok Diet Normal menunjukan rata-rata kadar trigliserida 81.28 ± 17,98
mg/dl. Selanjutnya pada kelompok diet tinggi karbohidrat menunjukan rata-rata
kadar trigliserida 130.28 ± 42,03 mg/dl dan nilai tertinggi adalah 169 ± 43,49
mg/dl untuk kelompok diet tinggi lemak. Sesuai dengan hasil penelitian yang
dilakukan oleh Rondonuwu et al., (2013), kadar trigliserida Rattus novergicus
strain Wistar jantan yang diberi diet standar yang terdiri dari comfeed PARS
66,67%, tepung terigu dan air 33,33% didapat rata-rata kadar trigliseridanya
adalah 84,8 mg/dL, lebih rendah dibandingkan dengan yang diberi diet tinggi
lemak yang terdiri dari PARS 50%, tepung terigu 25%, kolesterol 2%, asam kolat
0,2%, minyak babi 5%, dan air 17,8% rata-rata kadar trigliserida yang diperoleh
adalah 114,6 mg/dL.4 Penelitian yang dilakukan Wibowo (2009) mendapatkan
hasil kadar trigliserida 83,93 mg/dL pada Rattus novergicus yang diberi pakan
hiperkowiboowolesterolemik terdiri dari kolesterol 1%, kuning telur 5%, lipida
hewan 10%, minyak goreng 1 %, ditambah makanan standar sampai 100%.
Sedangkan kadar Rattus novergicus yang diberi makan standar kadar
trigliseridanya 45,22 mg/dL. Rachmandiar (2012), kadar trigliserida Rattus
novergicus strain Wistar jantan yang diberi makanan standar lebih rendah
dengan rata-rata kadar trigliserida 50 mg/dL dibandingkan dengan yang diberi
diet tinggi lemak yang rata-rata kadar trigliseridanya adalah 68,7 mg/dL.
18
Berdasarkan teori salah satu faktor yang dapat meningkatkan kadar trigliserida di
dalam darah adalah makanan yang tinggi lemak. Semakin banyak kadar lemak
yang dikonsumsi maka sintesis trigliserida di dalam tubuh juga akan meningkat
(Murray et al., 2009 ; Simanjuntak, 2009). Pemberian diet tinggi lemak yang
semakin lama akan menyebabkan peningkatan kadar trigliserida. Kadar
trigliserida yang banyak ini menyebabkan akumulasi trigliserida di apparatus
golgi meningkat sehingga menyebabkan pembengkakan pada apparatus golgi.
Apabila hal tersebut terus berlanjut maka akumulasi trigliserida ini dapat mengisi
seluruh sel. Kadar trigliserida yang tinggi juga dapat membentuk plak pada
pembuluh darah sehingga menghambat aliran darah yang menyebabkan
terjadinya aterosklerosis (Niza, 2015).
Pembuatan diet tinggi lemak dibagi menjadi 2 komposisi yang dibagi
menjadi 2 kelompok. Penelitian Hendra et al., (2011) tentang optimasi pemberian
komposisi diet tinggi lemak menggunakan komposisi diet tinggi lemak yang terdiri
dari pakan standar yang ditambah dengan kuning telur 100 g dan lemak babi 50
g. berdasarkan penelitian tersebut komposisi diet tinggi lemak yang digunakan
ditunjukkan pada tabel 2.3
19
Tabel 2.3 Komposisi Pakan Tikus
Komposisi Diet Tinggi Lemak
Komposisi 1 Komposisi 2
Modifikasi Pakan Pakan standar 300 gram
Kuning telur ayam 20 gram
Mentega 100 gram
Lemak sapi 10 gram
PTU (0,05%)
Pakan standar 50 gram
Kuning telur bebek 50 gram
Lemak sapi 50 gram
PTU (0,01%)
Emulsi Kuning telur ayam 10 gram
Lemak sapi 5 gram
Gom arab 7,5 gram
Kuning telur bebek 2,5 ml/g BB
Pada penelitian yang dilakukan oleh Tsalissavrina et al., (2006) komposisi diet
tinggi lemak dan fruktosa yang dapat meningkatkan kadar trigliserida yang
ditunjukkan oleh tabel 2.4
Tabel 2.4 Komposisi Pakan Tikus
Bahan Diet Normal Diet Tinggi Karbohidrat
Diet Tinggi Lemak
Confeed Pars (gr) 200 200 200
Terigu (gr) 100 100 100
Glukosa (gr) - 80 -
Kolesterol (gr) - - 8
Cholic Acid (gr) - - 0,8
Minyak Babi (gr) - - 20
Air (ml) 71,2 menyesuaikan 71,2
20
Konsumsi fruktosa dalam jumlah berlebihan dapat meningkatkan kadar
trigliserida dan penimbunan lemak di hati yang menyebabkan terjadinya
resistensi insulin. Konsumsi fruktosa dalam jangka panjang juga dapat
menstimulasi resistensi leptin yang berfungsi untuk menurunkan asupan makan.
Sehingga diet tinggi fruktosa dapat menyebabkan peningkatan rasa lapar dan
memicu tejadinya obesitas (Prahastuti, 2011). Pengonsumsian glukosa yang
berlebih yaitu fruktosa dalam makanan memberikan pengaruh terhadap kejadian
sindrom metabolik. Konsumsi pemanis fruktosa dalam jumlah yang tinggi dalam
makanan dan minuman dapat meningkatkan resiko dislipidemia, obesitas,
resistensi insulin, dan penyakit jantung (Lozano et al., 2016).
2.4 Bawang Hitam
Gambar 2.1 Proses Perubahan Bawang Hitam (Choi et al.,2014)
Bawang hitam adalah bawang putih yang diolah dengan cara fermentasi yang
nantinya akan menghasilkan bawang hitam atau black garlic. Bawang hitam
dibuat dengan menggunakan rice cooker dalam suhu 34-38ºC selama 21 hari
(Wang et al., 2010). Black garlic memiliki warna hitam, ringan karena kadar
airnya berkurang dan mempunyai aroma serta rasa yang tidak terlalu menyengat
seperti bawang putih. Dalam bawang putih hitam, S-allylcysteine membantu
penyerapan allicin sehingga metabolisme perlindungan terhadap infeksi bakteri
menjadi lebih mudah (Abusufyan, 2012).
21
2.4.1 Kandungan Bawang Hitam
Hasil penelitian Lee (2009) menyebutkan nilai Trolox Equivalent
Antioxidant Capacity (TEAC) antioksidan bawang putih dan black garlic adalah
13,3± 0,5 dan 59,2 ± 0,8 µmol / g basah. Black garlic mempunyai aktivitas
antioksidan lebih kuat dari bawang putih sehingga bisa digunakan untuk
mencegah komplikasi diabetes
Tabel 2.5 Perbedaan Kandungan dalam Bawang Hitam dan Bawang Putih
Bawang hitam Bawang putih
Energi (kkal/100 gram) 227,1 138
Air (%) 45,1 60,3
Protein (%) 9,1 8,4
Lipid (%) 0,3 0,1
Karbohidrat (%) 47,0 28,7
Abu (%) 2,1 ND
Na (mg) 4 ND
Ca (mg) 24 ND
ND not determined Sumber: Sasaki et al., 2007
Bawang hitam tidak mengeluarkan rasa menyengat yang kuat, seperti bawang
putih segar pada umumnya. Hal ini karena perubahan pada senyawa allicin,
yang bertanggung jawab untuk bau yang menyengat, menjadi senyawa
antioksidan larut air seperti S-allylcysteine, tetrahydro-β-carbolines, alkaloid aktif
secara biologis, dan senyawa mirip flavonoid. S-Allylcysteine dibentuk oleh
katabolisme γ-glutamylcysteine dan menghambat kerusakan oksidatif yang
terkait dengan penuaan dan berbagai penyakit. Derivat tetrahydro-β-carboline,
yang telah diidentifikasi dalam ekstrak Bawang hitam, juga menunjukkan efek
antioksidan. Derivat tetrahydro-β-carboline dibentuk oleh kondensasi antara
triptofan dan aldehid, serupa dengan produksi asam piruvat oleh jalur allin-allicin
22
atau proses reaksi Maillard. Selanjutnya, beberapa penelitian telah melaporkan
bahwa ekstrak Bawang hitam memiliki antioksidan, anti-alergi, anti-diabetes, anti-
inflamasi, hipokolesterolemik, hipolipidemia, dan efek anti karsinogenik (Choi, et
al., 2014).
Tabel 2.6 Kandungan SAC (µg/g) Bawang Hitam Dipengaruhi oleh Suhu dan
Lama Pemanasan
Lama
pemanasan
(hari)
Suhu (oC)
40 55 70 85
0 19.61 19.61 19.61 19.61
1 43.09 36.29 34.22 28.78
3 62.73 52.61 46.40 40.72
5 78.56 62.30 57.01 49.39
10 96.97 78.58 70.72 63.31
15 108.03 92.83 80.91 71.36
30 120.58 103.27 93.37 81.04
45 124.67 113.25 113.25 85.46
Sumber: Bae et al., 2014
Bawang hitam juga mengandung polifenol dan flavonoid yang berfungsi
sebagai antioksidan. Peningkatan asam polifenol berhubungan dengan
peningkatan total asam dari bawang hitam. Pemanasan pada komponen fenolik
meningkatkan fraksi dari asam polifenol, dimana hal tersebut dapat menurunkan
ester, glikosida, dan fraksi ikatan, yang menyebabkan peningkatan fenol dalam
bentuk bebas. Bawang putih yang mengalami pengolahan dapat menyebabkan
perubahan komponen bioaktif seperti polifenol, flavonoid yang berhubungan
dengan tipe dan durasi pemanasan (Gorinstein et al., 2008 dalam Choi et al.,
2014).
23
Tabel 2.7 Kandungan Poliphenol dan Flavonoid pada Bawang Hitam selama
proses pemanasan dengan suhu 70oC.
Lama pemanasan (hari)
0 7 14 21 28 35
Total polyphenol
(mg GAE/g) 13.91 25.81 35.28 58.33 55.25 48.35
Total flavonoid
(mg RE/g) 3.22 5.38 8.34 15.37 16.26 15.70
Sumber: Choi et al., 2014
2.4.2 Pengaruh Pemberian Bawang Hitam terhadap Kadar Trigliserida
Bawang hitam mengandung berbagai bahan antioksidan, salah satunya
flavonoid. Mekanisme flavonoid menurunkan kadar kolesterol adalah dengan
menurunkan aktivitas HMG-KoA reduktase, menurunkan aktivitas enzim acyl-
CoA cholesterol acyltransferase (ACAT), dan menurunkan absorbsi kolesterol di
saluran pencernaan. Flavonoid merupakan salah satu kelompok fitokimia
yang memiliki struktur polifenol. Banyak penelitian yang menyatakan bahwa
flavonoid ini dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah karena
flavonoid berperan dalam metabolisme lipid (Rumanti 2011).
Flavonoid dapat menurukan kadar kolesterol dalam darah karena
flavonoid merupakan kofaktor dari enzim kolesterol esterase selain itu flavonoid
juga dapat mengaktifkan enzim P-450 sehingga membuat peningkatan ekskresi
getah empedu. Jika terjadi peningkatan maka secara otomatis akan
24
membuat kadar kolesterol dalam darah akan menurun (Merindasari 2013).
Flavonoid memiliki berbagai potensi bagi kesehatan, flavonoid dapat
menurunkan angka kejadian penyakit kardiovaskular. Flavonoid meningkatkan
aktivitas lipoprotein lipase sehingga berpengaruh terhadap kadar trigliserida
serum (Lamson, 2000). Flavonoid adalah senyawa antioksidan polifenol alami,
terdapat pada tumbuhan, buahbuahan, dan minuman (teh dan wine) yang dapat
menurunkan kadar kolesterol dan kadar trigliserida dalam darah, melindungi
pembuluh arteri dari kerusakan, mengurangi jumlah penimbunan kolesterol di
permukaan endotel pembuluh darah arteri (Ekananda et al., 2015).
25
BAB 3
KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESA PENELITIAN
3.1 Kerangka Konsep
Gambar 3.1 Kerangka Konsep Penelitian
Keterangan :
: Variabel yang diteliti : Mempengaruhi
: Variabel yang tidak diteliti : Menghambat
Diet tinggi lemak dan
fruktosa
Antioksidan
Bawang Hitam
Resistensi
Insulin
Menurunkan aktivitas
HMG-KoA reduktase
TG
meningkat
Sindrom
metabolik
Obesitas Dislipidemia
SAC Polifenol
Kolesterol total
meningkat LDL
meningkat HDL
meningkat
Flavonoid
26
3.2 Penjelasan Kerangka Konsep Penelitian
Konsumsi tinggi lemak dan fruktosa dapat menyebabkan peningkatan
resistensi insulin, obesitas, dan dislipidemia. Dislipidemia disebabkan karena
adanya kelainan metabolisme yang ditandai dengan adanya peningkatan
trigliserida, kadar LDL, kolesterol total, serta menurunnya kadar HDL. Apabila
dislipidemia berlangsung lama dan tidak ditangani dapat menyebabkan sindrom
metabolik. Bawang hitam memiliki kandungan antioksidan yang tinggi
dibandingkan dengan bawang putih.
Bawang hitam diketahui memiliki antioksidan seperti flavonoid, SAC, dan
polifenol yang memiliki aktivitas antihiperlipidemia dengan menghambat absorbsi
lemak yang berpengaruh pula terhadap peningkatan Trigliserida. Flavonoid
nantinya yang akan menurunkan aktivitas HMG-KoA reduktase, yang akan
menghambat sistesis kolesterol pada Apo-B dan menghambat peningkatan
kadar trigliserida di hati.
3.3 Hipotesis
Terdapat hubungan pemberian bawang hitam dalam menghambat
peningkatan kadar Trigliserida pada tikus putih (Rattus norvegicus Strain Wistar)
jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.
27
BAB 4
METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan desain true experimental laboratory karena
terdapat suatu perlakuan pada hewan coba tikus. Metode yang digunakan yaitu
Randomized Post test Only Controlled Group Design karena pengukuran
parameter dilakukan di akhir perlakuan. Rancangan penelitian yang dipakai
adalah rancangan acak lengkap (RAL). Dengan metode ini peneliti dapat
membandingkan kelompok eksperimental dengan kelompok kontrol. Hal ini
dilakukan untuk mengambil hasil data pengukuran setelah diberikan perlakuan
seperti berikut :
a) Kontrol negatif (K1) : mendapatkan diet normal dan sonde plasebo berupa
akuades.
b) Kontrol positif (K2) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan
fruktosa (DTLF) dan sonde plasebo berupa akuades.
c) Perlakuan 1 (P1) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa
(DTLF) dan bawang hitam dosis 240 mg.
d) Perlakuan 2 (P2) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa
(DTLF) dan bawang hitam dosis 480 mg.
e) Perlakuan 3 (P3) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa
(DTLF) dan bawang hitam dosis 960 mg.
28
4.2 Populasi dan Sampel
4.2.1 Jumlah Sampel
Perhitungan jumlah sampel berdasarkan rumus Federer adalah
sebagai berikut :
[(t – 1) (n – 1)] ≥ 15
Dimana :
n =jumlah pengulangan/besar sampel dalam kelompok
t = jumlah perlakuan/banyaknya kelompok
Maka jumlah sampel yang dibutuhkan dalam kelompok adalah :
[(t – 1) (n – 1)] ≥ 15
[( 5 – 1) (n – 1)] ≥ 15
4n – 4 ≥ 15
4n ≥ 19
n ≥ 4,75 dibulatkan menjadi 5
Keterangan :
n : jumlah sampel
t : jumlah perlakuan dalam sampel
(Arkeman dan David, 2006)
Jumlah sampel untuk 5 kelompok adalah 5 x 5 = 25 ekor tikus.
29
Jumlah total sampel adalah 25 ekor tikus. Namun untuk mengurangi
terjadinya lose of sample di tengah-tengah penelian karena tikus mati,
maka jumlah sampel ditambah 1 tiap perlakuan menjadi 30 tikus.
4.2.2 Prosedur Pengambilan Sampel
Seluruh sampel tikus yang tersedia dikelompokkan menjadi 5 kelompok
perlakuan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) berdasarkan
simple random sampling karena hewan coba, tempat percobaan, dan bahan
penelitian lainnya dapat dikatakan homogen. Teknik randomisasi ini juga
memungkinkan tiap tikus memiliki peluang yang sama untuk semua
kelompok. Berikut langkah – langkahnya :
1) Memberi nomor urut pada masing – masing kandang mulai dari nomor
yang telah di tentukan :
206 432 611 741 837
249 481 647 759 848
252 527 651 798 857
315 530 654 809 868
342 591 678 817 923
391 604 704 828 973
2) Membuka aplikasi Microsoft Excel, masukkan formula = randbetween
(111;999) pada sel A1, kemudian klik enter dan drag hingga sel A30.
3) Mengelompokkan hasil randomisasi dalam 5 kelompok. Sel A1 – A6
masuk ke dalam kelompok K1, sel A7 – A12 masuk ke dalam
kelompok K2, sel A13 – A18 masuk ke dalam kelompok P1, sel A19 –
A24 masuk ke dalam kelompok P2, sel A25 – A30 masuk ke dalam
30
kelompok A30.
4.2.3 Kriteria Subjek
1) Kriteria Inklusi
a. Jenis kelamin jantan
b. Umur tikus 2-3 bulan
c. Berat badan tikus 150-200 gram
d. Warna bulu putih bersih
e. Gerakkan aktif
2) Kriteria Eksklusi
a. Tikus tidak mengalami cacat
3) Kriteria Dropout
a. Tikus yang mati selama proses penelitian
b. Tikus yang hilang atau lepas dari kandang
4.3 Variabel Penelitian
1) Variabel Bebas
Variabel bebas penelitian ini adalah dosis bawang hitam.
2) Variabel Terikat
Variabel terikat penelitian ini adalah kadar Trigliserida
4.4 Lokasi dan waktu penelitian
4.4.1 Lokasi penelitian
1) Perawatan tikus dilakukan di Laboratoriun Parasitologi Fakultas
Kedokteran Universitas Brawijaya.
2) Analisis kadar trigliserida pada darah hewan coba dilakukan di
Laboratorium Patologi Klinik FKUB Malang.
3) Pembuatan pakan tikus dilakukan di Laboratorium Farmakologi
31
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
4) Pembuatan bawang hitam dilakukan di Laboratorium Parasitologi
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.
4.4.2 Waktu penelitian
Waktu pelaksanaan dilakukan pada bulan November - Desember 2017.
4.5 Bahan dan Alat/ Instrument Penelitian
4.5.1 Bahan Penelitian
1. Diet Normal Tikus
Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji (40 gram)
Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji (40 gram)
Komposisi Persentase (%) Jumlah
Comfeed PARS 53 21,1 gram
Tepung terigu 23,5 9,4 gram
Air 23,5 9,4 ml Sumber: Laboratorium Farmakologi FKUB, 2013.
Kandungan gizi diet normal ditunjukkan pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Kandungan Gizi Diet Normal Persaji (40 gram)
Zat Gizi Persentase (%) Kandungan
Energi 104,9 kkal
Karbohidrat 72,7 19,06 gram
Lemak 8,0 0,93 gram
Protein 19,3 5,06 gram Sumber: Laboratorium Farmakologi FKUB, 2013.
2. Diet tinggi lemak dan fruktosa
Diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) yang digunakan pada penelitian ini
mengacu pada Octavia, dkk (2017) yang memiliki komposisi bahan terdiri dari
minyak babi 2 ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus dan
fruktosa murni sebanyak 1 ml/200g BB tikus (Octavia dkk, 2017).
32
Tabel 4.3 Kandungan Zat Gizi DTLF
Bahan Volume
(ml)
Berat (g) Energi
(kkal)
Protein (g) Lemak (g) Karbohidrat (g)
Minyak babi 2 1,9 17,14 0 1,9 0
Kuning telur
puyuh
1 1,2 0,68 0,06 0,05 0
Fruktosa 1 1,4 5,13 0 0 1,39
Total kandungan/4 ml 22,95 0,06 1,95 1,39
(Persagi, 2009)
Energi telur utuh/100 g = 116
Protein kuning/100 g = = 4,6 g
Lemak kuning/100 g = = 4,2 g
KH kuning/100 g = = 0,2 g
Energi kuning/100 g = (4,6 x 4) + (4,2 x 9) + (0,2 x 4)
= 57 kkal
3. Bawang hitam
Bawang hitam dibeli pada produsen yang beralamat di Jalan Aris Munandar,
Kota Malang, Jawa Timur (PIRT) . Bawang hitam dibuat dengan proses
pemanasan dari bawang putih China yang dipanaskan dengan menggunakan
rice cooker dengan suhu 34-380C selama 21 hari. Penentuan dosis bawang
hitam berdasarkan penelitian Miao (2014) mencampurkan 32,2 gram bawang
hitam diblender dengan air sehingga menghasilkan 100 ml larutan bawang
hitam. Pemberian bawang hitam sebanyak 1,5 ml larutan tersebut signifikan
dapat menurunkan tekanan darah. Tekanan darah yang tinggi atau disebut
hipertensi merupakan salah satu komponen dari sindrom metabolik (Miao et al.,
33
2014) Jumlah dosis yang digunakan adalah ×32,2 = 0,48 gram sama dengan
480 mg. Perhitungan dosis bawang hitam dapat menggunakan deret hitung
yang diberikan pada tikus yaitu:
Dosis I: 240 mg/200 grBB
Dosis II: 480 mg/200 grBB
Dosis III: 960 mg/200 grBB
4. Bahan untuk pemebedahan dan pemeriksaan
a. Bahan untuk pembedahan: larutan kloroform sebanyak 80ml.
b. Bahan untuk pemeriksaan hewan coba menggunakan prosedur kadar
Trigliserida
5. Bahan untuk Pemeriksaan kadar Trigliserida
a. Reagen : sampel serum, reagen kolesterol dengan komposisi yang
terdiri dari sodium kolat 0,5 mmol/L, fenol 28 mmol/L, kolesterol
esterase >0,2 U/mL, kolesterol oksidase >0,1 U/mL, peroksidase >0,8
U/mL, dan 4-aminoantipirin 0,5 mmol/L.
b. Trigliserida Standard : Glycerol equivalent ≤200 mg/dL sebanyak 2,26
mmol/L.
4.5.2 Alat Penelitian
1) Pemeliharaan hewan coba
- Bak plastik ukuran 31 cm x 23 cm x 10 cm
- Tutup kandang tikus terbuat dari anyaman kawat dengan ukuran 33
cm x 25 cm dan luas lubang kawat 1 cm2
34
- Botol air minum untuk tikus
- Sekam yang bersih dan kering
2) Pembuatan diet normal (PARS) tikus
- Baskom plastik
- Timbangan digital dengan ketelitian 0,1 gram
- Nampan
- Sarung tangan
3) Pembuatan diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF)
- Spuit 10 ml
- Gelas ukur 10 ml
- Pengaduk
- Mangkuk plastik
4) Pembuatan larutan bawang hitam
- Timbangan digital merk Portable Scale SFC dengan ketelitian 0,01
gram
- Baskom plastik
- Gelas plastik
- Gelas ukur 10 ml
- Mortar dan stamper
5) Alat pemberian dosis bawang hitam
- Sonde lambung
- Gelas ukur 10 ml
6) Pembiusan, pembedahan dan pengambilan sampel darah tikus
- Seperangkat alat bedah (gunting bedah dan papan bedah)
- Ruang kaca
35
- Spuit 5 ml
- Kapas
- Seperangkat tabung reaksi
- Tabung vial
7) Pemeriksaan kadar Trigliserida
- Centrifuge
- Pipet ukur
- Spektrofotometer
- Waterbath
- Cuvet
- Spuit
8) Alat untuk hygiene dan sanitasi
- Tempat cuci tangan
- Sarung tangan
- Jas laboratorium
- Masker
- Sabun antiseptik
9) Penguburan tikus
- Sekop
- Kain putih bersih dengan ukuran 1 m x 1 m
36
4.6 Definisi Operasional
Variabel Definisi Operasional Skala
Dosis Bawang
Hitam
Dosis bawang hitam yang akan diberikan pada hewan coba yaitu 240 mg, 480 mg, dan 960 mg. Bawang hitam yang dihaluskan dengan mortar dan pestle dan dilarutkan oleh air, diberikan kepada hewan coba dengan kelompok perlakuan dengan tanda P1, P2, P3 selama masa perlakuan 14 hari. Proses pemberian melalui sonde yang dilakukan setiap hari pada pukul 16.00
Rasio
Kadar
Trigliserida
Banyaknya trigliserida dalam tubuh tikus jantan jenis Rattus norvegicus Strain Wistar yang diukur dengan pengambilan serum darah tikus dan uji laboratorium menggunakan metode spektrofotometri pada panjang gelombang 500 nm dan dinyatakan dalam satuan mg/dl, dengan kadar normal trigliserida pada tikus adalah 62 – 92 mg/dl (Maris, 2015).
Rasio
Diet Normal Diet normal tikus yang menggunakan bahan berupa comfeed PARS yang dicampur dengan tepung terigu dan air yang diberikan kepada tikus secara ad libitum sebanyak 40 gram/tikus/hari pada semua kelompok selama masa adaptasi ( 7 hari) dan masa perlakuan (14 hari).
Rasio
Diet Tinggi
Lemak dan
Fruktosa
Diet yang mengacu pada Octavia, dkk (2017) yang dibuat dengan cara mencampurkan bahan yang terdiri dari minyak babi 2 ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus dan fruktosa murni sebanyak 1 ml/200g BB tikus menggunakan alat magnetic stirrer. Diet ini diberikan kepada tikus pada kelompok kontrol positif (K2) dan kelompok perlakuan P1, P2, P3 selama masa perlakuan yaitu 14 hari dengan menggunakan sonde lambung. Pemberian diet ini dilakukan pada pukul 09.00 WIB.
-
37
4.7 Prosedur Penelitian dan Pengumpulan Data
4.7.1 Persiapan
4.7.1.1 Pengajuan Etik
Peneliti kemudian mengajukan permohonan kelaikan etik (ethical
clearance) kepada Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUB dengan
melengkapi persyaratan dokumen-dokumen yang telah ditetapkan.
Pengajuan kelaikan etik ini dilakukan sebagai persyaratan untuk dapat
melakukan penelitian menggunakan hewan coba sebagai subyek penelitian
yaitu tikus putih jantan jenis Rattus norvegicus Strain Wistar sebanyak 30
ekor. Kemudian proposal penelitian yang telah diajukan diuji kelaikannya
oleh Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUB dan setelah proposal diterima,
komite etik menerbitkan surat kelaikan etik penelitian kepada peneliti untuk
selanjutnya dapat digunakan dalam melaksanakan penelitian. Penelitan ini
telah mendapatkan nomor etik 3577/EC/KEPK/10/2017. Surat keterangan
kelaiakan etik terlampir.
4.7.1.2 Persiapan Bahan
1. Tikus
2. Pakan Tikus
4.7.2 Pelaksanaan
4.7.2.1 Pembelian Hewan Coba
Tikus putih jantan diperoleh dari produsen tikus yang beralamat di Jalan
Sudimoro Gang 6 No. 25 RT 05/07 Malang. Pemilihan tikus dilakukan
sesuai dengan kriteria inklusi yang telah ditetapkan.
38
4.7.2.2 Pembelian Bawang Hitam
Bawang hitam dibeli pada produsen yang beralamat di Jalan Aris
Munandar, Kota Malang, Jawa Timur. Pembelian bawang hitam ini dikarenakan
dalam proses pengolahan bawang hitam yang dilakukan produsen sudah sesuai
dengan penelitian sebelumnya. Berdasarkan penelitian Choi et al (2014) proses
pengolahan yang baik untuk memaksimalkan kandungan antioksidan dilakukan
selama waktu 21 hari.
4.7.2.3 Pembuatan Pakan dan Diet Tikus
Diet normal serta diet tinggi lemak dan fruktosa dibuat di Laboratorium
Penyelenggaraan Makanan FKUB. Diet normal tikus dibuat dengan cara:
1) Menimbang bahan yang dibutuhkan yaitu comfeed PARS, tepung terigu,
dan air.
2) Mencampurkan comfeed PARS dan tepung terigu dalam baskom plastik.
3) Menambahkan air.
4) Mengaduk adonan hingga tercampur rata.
5) Membentuk adonan menjadi bulatan.
6) Menimbang adonan/ diet untuk tiap ekor tikus 40 gram
4.7.3 Induksi Diet dan Bawang Hitam
- Menyiapkan bahan yang dibutuhkan yaitu minyak babi, kuning telur
puyuh, dan fruktosa murni.
- Mengambil minyak babi sebanyak 2 ml/200g BB tikus, kuning telur
puyuh 1 ml/200g BB tikus, dan fruktosa murni 1 ml/200g BB tikus
menggunakan spuit 10 ml, kemudian dimasukkan ke dalam gelas
ukur.
39
- Mencampurkan bahan menggunakan magnetic stirrer hingga
homogen.
(Octavia dkk, 2017).
Sedangkan untuk persiapan bawang hitam :
1) Mengupas kulit dan membersihkan bawang hitam yang telah dibeli
2) Menghaluskan bawang menggunakan mortar dan pestle hingga halus
3) Menimbang bawang hitam sesuai dosis yang dibutuhkan
4) Menambahkan air pada setiap dosis bawang hitam hingga volume
mencapai 3 ml, sehingga didapatkan:
a. Dosis I = 3 ml mengandung 240 mg bawang hitam
b. Dosis II = 3 ml mengandung 480 mg bawang hitam
c. Dosis III = 3 ml mengandung 960 mg bawang hitam (Fadlia, 2011).
4.7.4 Pembedahan Tikus
Proses pembedahan tikus dilakukan di Laboratoriun Parasitologi
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya sesuai dengan prosedur.
40
4.7.5 Langkah-langkah Pelaksanaan Penelitian
Melakukan persiapan alat dan bahan untuk penelitian
Melakukan penimbangan berat badan awal semua tikus sebelum
dan setelah dilakukan masa adaptasi
Masa adaptasi dilakukan selama 7 hari dengan diberikan diet normal
(PARS) dan minum secara ad libitum
Randomisasi dengan metode
simple random sampling
K2
Selama 14 hari, sisa pakan ditimbang setiap hari untuk mengetahui
asupan makan tikus, berat badan tikus ditimbang seminggu sekali
untuk mengetahui berat badan tikus, sedangkan sekam diganti dua
kali dalam seminggu
Tikus yang sudah diberikan perlakuan
dipuasakan selama 12 jam
Melakukan pembedahan dan pengambilan
sampel darah
Analisa Data
K1 P1 P2 P3
41
4.7.6 Prosedur Pemberian Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa
a. Pemberian sonde diet tinggi lemak dan fruktosa serta sonde
bawang hitam dilakukan setelah masa adaptasi yaitu pada hari ke-
8 dan diberikan selama 14 hari sesuai dengan perlakuan pada
setiap kelompok. Selama masa perlakuan tersebut, tikus tetap
diberikan diet normal dan minuman setiap hari secara ad libitum.
Diet normal diberikan sebanyak 40 gram/tikus/hari kepada tikus
pada semua kelompok.
b. Diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan kepada tikus kelompok
kontrol positif (K2), dan kelompok perlakuan P1, P2, P3 melalui
sonde lambung dengan bahan yang terdiri dari minyak babi 2
ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus, dan
fruktosa murni 1 ml/200g BB tikus. Pemberian diet tinggi lemak
dan fruktosa dilakukan pada pukul 09.00 WIB (Pritaningtyas,
2016). Diberikan selama 14 hari karena berdasarkan hasil
penelitian Octavia, dkk (2017) menunjukkan bahwa pemberian
diet tinggi lemak dan tinggi fruktosa pada tikus selama 14 hari
dapat menginduksi tikus menjadi sindrom metabolik yang ditandai
dengan kondisi hiperglikemia, hipertrigliserida, dan memiliki HDL
yang rendah (Octavia dkk, 2017). Total volume pemberian diet
tinggi lemak dan fruktosa pada tikus dalam satu kali pemberian
adalah 4 ml sehingga tidak melebihi kapasitas maksimal lambung
tikus yaitu 5 ml (Lingga dkk, 2014).
42
4.7.7 Prosedur Pemberian Bawang Hitam
Bawang hitam diberikan kepada tikus pada kelompok perlakuan
P1, P2, dan P3 dengan dosis pada masing-masing kelompok yaitu 240
mg, 480 mg, dan 960 mg. Masing-masing dosis bawang hitam dilarutkan
dengan air hingga volume mencapai 3 ml karena jumlah sediaan normal
yang dapat diberikan pada tikus jika pelarutnya air tidak melampaui 4
ml/200 g BB dan volume tersebut tidak melebihi kapasitas maksimal
lambung tikus (BPOM RI, 2014; Lingga dkk, 2014). Pemberian bawang
hitam dilakukan pada pukul 16.00 WIB dengan cara disondekan
menggunakan sonde lambung. Bawang hitam diberikan 5 jam setelah
pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa yang disesuaikan dengan waktu
pengosongan lambung tikus yaitu 4 jam (Tarigan, 2001).
43
4.7.8 Prosedur Pengambilan Serum
Tikus dianastesi menggunakan kloroform dengan dosis 80 ml secara
inhalasi
Tikus dibiarkan lemas
Pemberian label pada tabung reaksi sesuai urutan
Pembedahan tikus
Pengambilan darah dari jantung sebanyak 3 ml dan dimasukkan ke dalam
tabung eppendorf
Tabung didiamkan selama kurang lebih tiga jam dalam posisi miring
Darah di sentrifus dengan kecepatan 3000 rpm dengan waktu 15 menit
Serum diambil dan disimpan dalam pendingin
(Laboratorium Parasitologi FKUB).
Proses pembedahan dan pengambilan serum darah tikus dilakukan oleh
tenaga ahli/ laboran.
44
4.7.9 Perlakuan terakhir pada Tikus
1. Setelah dilakukan pembedahan dan pengambilan darah pada tikus.
2. Tubuh tikus yang telah dilakukan pembedahan akan dibersihkan dan
dilakukan aseptik dengan alkohol 70%.
3. Kemudian mengubur tikus dengan kedalaman 60 cm
45
4.7.10 Prosedur Pengukuran Kadar Trigliserida serum
a. Pengukuran kadar trigliserida tikus dilakukan dengan metode
spektrofotometri menggunakan reagen Biosystems pada panjang gelombang
500 nm dengan langlah – langkah sebagai berikut :
1. Bawa Reagen ke suhu kamar.
2. Pipet ke dalam tabung uji berlabel:
Blank Standard Sample
Triglycerides Standard
(S)
- 10 µL -
Sample - - 10 µL
Reagen (A) 1.0 mL 1.0 mL 1.0 mL
3. Campur secara menyeluruh dan inkubasi tabung selama 15 menit pada
suhu kamar (16-25ºC) atau selama 5 menit pada suhu 37ºC.
4. Ukur absorbansi (A) dari Standar dan Sampel pada 500 nm terhadap
Blank. Warnanya akan stabil dengan waktu minimal 2 jam.
(Sumber: Laboratorium Patologi Klinik FKUB)
46
4.7.11 Pengumpulan Data
Pengumpulan data didapatkan dari hasil pengamatan berat badan
tikus yang diperoleh dari penimbangan yang dilakukan satu kali
seminggu, data sisa pakan tikus selama perlakuan yang diperoleh
dari hasil penimbangan berat pakan awal yang diberikan dikurangi
dengan berat pakan yang tersisa, dari hasil pengukuran trigliserida.
4.8 Analisa Data
Setelah semua data telah diperoleh, dilakukan analisa secara statistik dengan
menggunakan beberapa uji menggunakan SPSS (Statistical Package for the
Social Sciences) versi 16.0, yaitu uji kadar Trigliserida menggunakan uji statistik
Shapiro Wilk dikarenakan data terdistribusi normal. Setelah itu dilakukan uji
homogenitas dan uji beda kadar Trigliserida pada antar kelompok perlakuan
dengan menggunakan One-Way ANOVA. Kemudian, melakukan uj korelasi
untuk mengukur hubungan antara kadar trigliserida dan dosis bawang hitam 240
mg, 480 mg, dan 960 mg dengan menggunakan Uji Spearman dikarenakan data
tidak terdistribusi normal, dilanjutkan dengan uji korelasi linear sederhana. Uji
statistik dilakukan dengan tingkat kepercayaan 95% ( = 0,05), dikatakan
bermakna jika p<0,05.
47
BAB 5
HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA
5.1 Karakteristik Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah hewan coba (tikus),
tikus yang digunakan sebagai sampel penelitian ini terdiri dari 25 ekor tikus yang
terbagi dalam lima kelompok perlakuan. Masing – masing pelakuan terdiri dari K
(-) = 5 ekor, K (+) = 5 ekor, P1 = 5 ekor, P2 = 5 ekor, dan P3 = 5 ekor, dan
semua tikus memiliki kriteria inklusi dengan karakteristik seperti terlihat pada
tabel 5.1 berikut ini :
Tabel 5.1 Karakteristik Sampel
Karakteristik K1 K2 P1 P2 P3
Jumlah 5 5 5 5 5
Jenis Rattus norvegicus Strain Wistar
Jenis kelamin Jantan
Umur 2-3 bulan
Warna bulu Putih
Keadaan umum
Aktif
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Berat badan hewan coba, diukur sebelum adaptasi untuk melihat berat
badan tikus yang sesuai dengan kriteria inklusi, saat perlakuan setiap seminggu
48
sekali dan asupan pakan dihitung setiap hari untuk melihat pengaruh perlakuan
pada tikus.
Tabel 5.2 Rata-rata Berat Badan Tikus Selama Penelitian
Berat badan K1 K2 P1 P2 P3
Rata-rata berat badan awal penelitian (gram) (Mean±SD)
160.4 ± 12.05
153.2 ± 3.63
173.2 ± 15.02
166.4 ± 12.99
175.2 ± 10.76
Rata-rata berat badan akhir penelitian (gram) (Mean±SD)
210.6 ± 20.13
202.8 ± 13.50
194.4 ± 25.32
200.6 ± 6.69
221.2 ± 27.99
50.2 49.6
21.2
34.2
46
0
10
20
30
40
50
60
K1 K2 P1 P2 P3
Penambahan Berat Badan
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Gambar 5.1 Penambahan Berat Badan Hewan Coba
Berdasarkan Tabel 5.2, untuk berat badan awal tikus didapatkan hasil uji
statistik Test of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan
49
bahwa data terdistribusi normal p = 0.066 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of
Homogenity of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk
semua kelompok perlakukan p = 0.452 (p>0.05).
Pada rata – rata berat badan akhir tikus didapatkan hasil uji statistik Test
of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan bahwa data
terdistribusi normal p = 0.143 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of Homogenity
of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk semua
kelompok perlakukan p = 0.265 (p>0.05). Hasil uji One Way Anova menunjukkan
nilai p = 0.306 (p>0.05) yang dapat diartikan bahwa tidak terdapat perbedaan
rata – rata berat badan akhir tikus.
5.2 Asupan Pakan dan Zat Gizi Hewan Coba
Tabel 5.3 Asupan diet tikus Asupan Rata – rata
Asupan Diet
Normal
(gram) ± SD
P
K1 34.5120 ± 1.81
0.001
K2 29.1540 ± 1.76
P1 26.1900 ± 1.49
P2 25.4300 ± 1.52
P3 32.4500 ± 0.93
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
50
Berdasarkan tabel 5.2 untuk rata – rata asupan pakan tikus didapatkan hasil uji
statistik Test of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan
bahwa data terdistribusi normal p = 0.250 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of
Homogenity of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk
semua kelompok perlakukan p = 0.829 (p>0.05). Hasil uji One Way Anova untuk
rata – rata asupan diet normal menunjukkan nilai p = 0.001 (p<0.05) yang dapat
diartikan bahwa terdapat perbedaan rata – rata asupan pakan tikus, dan untuk
rata – rata asupan DTLF menunjukkan nilai p = 0.775 (p>0.05) yang dapat
diartikan bahwa tidak terdapat perbedaan rata – rata asupan diet tinggi lemak
fruktosa tikus. Perbedaan antar dua kelompok tersebut yaitu pada kelompok K1
dengan kelompok P1, kelompok K1 dengan kelompok P2, kelompok P1 dengan
kelompok P3, dan kelompok P1 dengan kelompok P3. Pada tabel dapat
disimpulkan dimana asupan makan pada kelompok K1 dan kelompok P3 lebih
banyak dibandingkan dengan kelompok lain.
Sehingga dapat ditampilkan dalam bentuk gambar dengan sebagai berikut
90.51
99.4191.06 89.54
109.2
0
20
40
60
80
100
120
K1 K2 P1 P2 P3
Tota
l Asu
pan
En
erg
i He
wan
Co
ba
(kka
l)
Kelompok Perlakuan
Rata - Rata Asupan Energi Hewan Coba (g)
51
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Gambar 5.2 Rata – rata Asupan Energi Hewan Coba
Rata – rata asupan energi PARS + DTLF pada hewan coba paling tinggi
adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok P2, dan untuk
kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk
asupan energy PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga
paling rendah yaitu P3, P1, dan P2.
Pada total asupan energi diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa
dilakukan uji statistik menggunakan uji One Way Anova karena data terdistribusi
normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang signifikan
antar kedua kelompok dengan nilai p=0,013. Selanjutnya dilakukan uji Pos Hoc
Tukey didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok K1 dengan P3, P1
dengan P3, namun tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok K2 dan
P3.
52
0,8
2.63 2.56 2.54 2.7
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
K1 K2 P1 P2 P3
Tota
l Asu
pan
Le
mak
He
wan
Co
ba
(g)
Kelompok Perlakuan
Rata - rata Asupan Lemak Hewan Coba (g)
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Gambar 5.3 Rata – rata Asupan Lemak Hewan Coba
Rata – rata asupan lemak PARS + DTLF pada hewan coba paling tinggi
adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok K1, dan untuk
kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk
asupan lemak PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga
paling rendah yaitu P3, P2, dan P1.
Pada total asupan lemak diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa
dilakukan uji statistik menggunakan uji Kruskal Wallis karena data tidak
terdistribusi normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang
signifikan antar kedua kelompok dengan nilai p=0,000. Selanjutnya dilakukan uji
53
Mann Whitney U didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok K1
dengan K2, K1 dengan P1, K1 dengan P2, K1 dengan P3, dab P2 dengan P3
Asupan Karbohidrat Hewan Coba (gram)
16,45 15,2813,87
16,85 13,51
0
5
10
15
20
25
K1 K2 P1 P2 P3
Perlakuan Hewan Coba
Tota
l Asu
pan
Kar
bo
hid
rat
Hew
an C
ob
a (g
ram
)
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Gambar 5.4 Rata – rata Asupan Karbohidrat PARS + DTLF Hewan Coba
Rata – rata asupan karbohidrat PARS + DTLF pada hewan coba paling
tinggi adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok P2, dan
untuk kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk
asupan karbohidrat PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga
paling rendah yaitu P3, P1, dan P2.
Pada total asupan karbohidrat diet normal dan diet tinggi lemak dan
fruktosa dilakukan uji statistik menggunakan uji One Way Anova karena data
54
terdistribusi normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang
signifikan antar kedua kelompok dengan nilai p=0,009. Selanjutnya dilakukan uji
Pos Hoc Tukey didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok P1 dengan
P3 dan P2 dengan P3.
5.3 Kadar Trigliserida serum
Kadar serum trigliserida didapatkan hasil uji statistik Test of Normality
dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan bahwa data terdistribusi
tiak normal p = 0.035 (p<0.05) dan hasil uji statistik Test of Homogenity of
Variance menunjukkan kadar trigliserida homogen p = 0.769 (p>0.05), karena
data tidak terdistribusi normal maka dilakukan uji transformasi data terlebih
dahulu. Dari hasil transformasi data, kemudian diuji normalitas datanya, dan di
dapatkan hasil p = 0.403 (p>0.05) yang menunjukkan data terdistribusi normal,
dengan demikian maka analisa data dapat dilakukan dengan menggunakan uji
One Way Anova.
87,8 ± 31.7691,8 ± 42.1785,54 ± 36.3 77 ± 21.05
95,6 ± 52,16
0
20
40
60
80
100
120
K1 K2 P1 P2 P3
Kelompok Perlakuan
Rat
a -
Rat
a K
adar
Trig
lise
rid
a
Rerata Kadar Trigliserida
Keterangan:
Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades
Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo
Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 240 mg
55
Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 480 mg
Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam
dosis 960 mg
Gambar 5.5 Rerata Kadar Trigliserida
Uji One Way Anova digunakan untuk mengetahui apakah terdapat
perbedaan kadar serum trigliserida tikus yang signifikan antar kelompok dengan
sebaran data yang tidak normal. Berdasarkan tabel uji One Way Anova
didapatkan nilai p = 0.984, sehingga p > 0.05 yang dapat diartikan bahwa tidak
terdapat perbedaan kadar trigliserida tikus.
Uji statistik selanjutnya yaitu uji korelasi antara dosis bawang hitam dan
kadar trigliserida pada kelompok perlakuan P1, P2, dan P3. Uji korelasi
menggunakan Uji Spearman dikarenakan ada salah satu data yang terdistribusi
tidak normal. Berdasarkan hasil uji analisis Spearman didapatkan hasil nilai p =
0,947 ( p > 0,05) yang menunjukkan tidak terdapat korelasi yang bermakna
antara dua variabel yang diuji yaitu dosis bawang hitam dan kadar trigliserida.
Kekuatan korelasi sangat lemah dengan nilai 0,019 dan arah korelasi
menunjukkan negatif yaitu semakin besar nilai dosis bawang hitam maka
semakin kecil nilai kadar trigliserida.
Selanjutnya dilakukan uji statistik regresi linier sederhana, didapatkan
nilai hasil p = 0,971 (p>0.05) sehingga dapat disimpulkan bahwa tidak ada
hubungan dosis bawang hitam dengan kadar trigliserida.
56
BAB 6
PEMBAHASAN
6.1 Karakteristik Sampel
Penelitian ini menggunakan true experimental dengan metode Post Test
Only Controlled Group Design. Subyek penelitian yang digunakan dalam
penelitian ini adalah tikus jantan (Rattus Norvegicus Strain Wistar) sebanyak 25
ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok pelakuan. Pemilihan tikus untuk kelompok
perlakuan dipilih dengan teknik randomisasi yang memungkinkan setiap hewan
coba memiliki peluang yang sama. Tikus yang dipilih pun disesuaikan dengan
kriteria inklusi dengan tujuan mengurangi bias pada penelitian yaitu tikus berjenis
kelamin jantan, bulu putih bersih, berusia 2 – 3 bulan, berat badan tikus 150 –
200 gram, dan bergerak aktif. Menggunakan tikus berkelamin jantan yaitu agar
tidak terdapat pengaruh hormonal dan kehamilan, yaitu seperti hormone
esterogen pada tikus betina yang dapat mempengaruhi kerja lemak dan
kolesterol (Yusuf, 2005 dalam Sabrina, 2014)
Sebelum dilakukan perlakuan, hewan coba diadaptasi terlebih dahulu
selama 7 hari dan diberikan diet normal (diet PARS). Setelah 7 hari adaptasi,
hewan coba diberi perlakuan selama 14 hari yaitu dengan diet tinggi lemak dan
fruktosa melalui sonde yang bertujuan untuk meningkatkan kadar Trigliserida
darah dalam tikus, serta untuk variabel yang diuji adalah bawang hitam dengan
berbagai dosis pemberian yang berbeda. Diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa
pada hewan coba diberikan berdasarkan DTLF pada penelitian Octavia karena
57
sudah terbukti dapat menginduksi hewan coba menjadi sindrom metabolik
(Octavia, 2017).
Setiap satu minggu satu kali tikus dilakukan penimbangan berat badan
untuk mengetahui perubahan berat badan tikus. Setelah dilakukan uji, data
terdistribusi normal dan data homogen sehingga dapat mengurangi bias. Pada
berat badan akhir, hasil uji menunjukkan tidak adanya perbedaan rata – rata
berat badan akhir pada tikus. Dibandingkan dengan rerata berat badan akhir
tikus pada kelompok kontrol positif (K2) yaitu 202,8 gram, tikus dengan
pemberian bawang hitam berat badan akhirnya lebih rendah yaitu P1 194,4 gram
dan P2 200,6 gram, namun pada P3 lebih tinggi yaitu 221,2 gram.
6.2 Pengaruh Pemberian DTLF dan bawang hitam terhadap berat badan
tikus
Pada kelompok kontrol negatif yang diberikan diet normal (K1) rata rata
penambahan berat badan 50,2 gram sedangkan pada kelompok kontrol positif
yang diberikan diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa (K2) rata – rata
penambahan berat badannya adalah 49, 6 gram. Berdasarkan hasil statistik
pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa tidak terdapat perbedaan peningkatan
berat badan dibandingkan dengan yang diberi diet normal. Pada penelitian
Castillo dkk (2012), menunjukkan bahwa pemberian diet tinggi lemak dan tinggi
karbohidrat tidak signifikan meningkatkan berat badan dibandingkan yang diberi
diet normal. Dan juga pada penelitian Shabbir dkk (2016), pemberian diet tinggi
lemak tidak secara signifikan meningkatkan berat badan. Berbeda dengan
pernyataan Octavia dkk., (2017) yang menyatakan diet tinggi lemak dan fruktosa
dapat mempengaruhi metabolisme lemak dalam tubuh yang menyebabkan
timbunan lemak sehingga dapat meningkatkan berat badan. Menurut James
58
(2005), diet tinggi lemak akan menurunkan kadar hormone leptin. Semakin
rendah kadar leptin akan semakin meningkatkan nafsu makan. Dan juga
pemberian fruktosa dapat menurunkan kadar leptin (Tsalissavrina, 2006).
Pemberian fruktosa akan mempengaruhi otak yang nantinya akan memberikan
efek adiksi dan resistensi leptin sehingga konsumsi fruktosa dalam jangka yang
panjang akan mengakibatkan hilangnya sinyal kenyang di otak dan akan
berakibat meningkatkan asupan energi yang dapat menambah berat badan
(Prahastuti, 2011). Antara kelompok kontrol negatif yang hanya diberi diet normal
(K1) dan kelompok kontrol positif yang diberi diet normal dan diet tinggi lemak
dan fruktosa (K2) tidak terdapat perbedaan penambahan berat badan. Walaupun
K2 diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa, penambahan berat badan pada K1
tidak jauh berbeda dapat disebabkan karena K1 tingkat asupan pakannya tinggi,
sehingga besarnya asupan makan yang masuk ke dalam tubuh akan
mempengaruhi kepada besarnya asupan energi yang kemudian disimpan
sebagai lemak dalam tubuh dan akhirnya akan berefek terhadap penambahan
berat badan dari hewan coba (Tsalissavrina, 2006).
Rata – rata penambahan berat badan pada kelompok perlakuan yang
diberikan bawang hitam (P1, P2, dan P3) jika dibandingkan dengan kelompok
control positif (K2) terdapat perbedaan yaitu penambahan berat badan pada P1,
P2, dan P3 lebih rendah dibandingkan K2 disebabkan karena pada kelompok
perlakuan yang diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan bersamaan
dengan pemberian sonde bawang hitam. Hal tersebut bisa disebabkan pada
bawang hitam terdapat polifenol. Polifenol memiliki potensial untuk mencegah
obesitas dengan menghambat enzim yang berkaitan dengan metabolisme lemak
seperti pancreatic lipase, lipoprotein lipase atau dengan meregulasi hemeostasis
59
lipid (Chen, 2014). Pada penelitian yang dilakukan Chen (2014), pemberian
bawang hitam secara signifikan dapat menurunkan berat badan, sehingga dapat
disimpulkan bahwa bawang hitam memiliki efek anti-obesitas. Mekanisme
polifenol dalam menurunkan berat badan yaitu dengan meningkatkan gelombang
otak neurotransmitter dan metabolisme tubuh yang dapat meningkatkan energi
dan menurunkan nafsu atau selera maka, dan juga dapat meningkatkan
konsumsi oksigen dan oksidasi lemak yang pada akhirnya dapat membantu
menurunkan berat badan (Murase dkk, 2009).
Pada penelitian ini, kelompok perlakuan setelah diberikan bawang hitam
yang memiliki rata – rata penambahan berat badan dari yang paling rendah
adalah P1 dan paling tinggi adalah P3. Berdasarkan teorinya bawang hitam
dapat menurunkan berat badan, yang seharusnya penambahan berat badan
pada kelompok P2 dan P3 lebih sedikit jika dibandingkan dengan P1. Hal ini
dapat berkaitan dengan pada kelompok P3 mengonsumsi pakan diet normal
lebih tinggi dibandingkan dengan P1 dan P2. Sehingga P3 mengalami
penambahan berat badan yang paling tinggi dibandingkan kelompok perlakuan
yang lain.
6.3 Pengaruh Pemberian DTLF dan Bawang Hitam terhadap Kadar
Trigliserida
Pada kelompok kontrol negatif yang hanya diberikan diet normal (K1)
memiliki kadar trigliserida 95,6 mg/dl dan pada kelompok kontrol positif yang
diberikan diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa (K2) kadar trigliseridanya
adalah 77 mg/dl. Sehingga kelompok K1 kadar trigliseridanya lebih tinggi
dibandingkan dengan kelompok K2, yang dapat disimpulkan tidak ada
perbedaan antara kelompok yang diberi diet normal dan kelompok yang
60
diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa. Namun, kadar trigliserida pada kelompok
K1 masih pada kadar normal trigliserida tikus yaitu 26 – 145 mg/dl (Bresnahan,
2004). Pada penelitian Octavia dkk., (2017), kadar trigliserida pada tikus setelah
pakan tinggi lemak tinggi fruktosa menunjukkan tidak terdapat perbedaan
perubahan kadar trigliserida tikus yang bermakna. Pada penelitian yang
dilakukan Al-Numair (2009), kadar trigliserida pada tikus setelah pakan tinggi
lemak menunjukkan tidak terdapat perbedaan perubahan kadar trigliserida pada
tikus.
Menurut Faisal Baraas (2003), konsumsi diet tinggi lemak dan karbohidrat
akan meningkatkan jumlah lemak yang terdeposit pada jaringan adipose.
Nantinya setiap jumlah lemak dan karbohidrat yang berlebih dan tidak digunakan
oleh tubuh akan disimpan di jaringan adipose dalam bentuk trigliserida. Yang
nantinya jika tubuh memerlukan trigliserida, trigliserida tersebut akan dihidrolisis
menjadi asam lemak bebas dan gliserol. Lalu asam lemak bebas akan
mengalami oksidasi untuk menghasilkan energi dan melepasnya ke dalam
pembuluh darah. Asupan energi yang berlebih maupun asupan lemak dari
makanan pada kelompok diet tinggi lemak akan mengakibatkan aktivitas
lipogenesis meningkat, serta asam lemak bebas yang terbentuk akan semakin
banyak. Selanjutnya akan terjadi mobilisasi asam lemak bebas dari jaringan
lemak ke hepar lalu berikatan dengan gliserol membentuk trigliserol (TG). Maka,
semakin tinggi pengonsumsian lemak maka akan semakin tinggi pula sintesis
triasilgliserol di hepar yang menyebabkan semakin tinggi juga kadar trigliserida
dalam darah (Myers, 2003). Kadar trigliserida akan meningkat pada kelompok
yang diberi diet tinggi karbohidrat dikarenakan akan meningkatkan kadar fruktosa
2,6 bifosfat lalu fosfofruktokinase-1 akan lebih aktif dan akan merangsang reaksi
61
glikolisis. Peningkatan reaksi glikolisis akan mengakibatkan peningkatan glukosa
yang diubah menjadi asam lemak bebas. Asam lemak bebas nantinya akan
membentuk Triasilgliserol (TG) bersama – sama dengan gliserol. Sehingga
pengonsumsian tinggi fruktosa akan meningkatkan kadar TG di dalam darah
(Tsalissavria dkk., 2006).
Pada penelitian ini walaupun kadar trigliserida pada kelompok K2 lebih
rendah dibandingkan K1, tetapi kadar trigliserida pada K2 masih dalam taraf
normal yaitu pada range 26 – 145 mg/dl. Dapat terjadi karena pemberian diet
tinggi lemak dan fruktosa pada kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan
yaitu hanya dilakukan selama 14 hari. Menurut penelitian yang dilakukan
Suliburska (2013) dan Chang et al., (2017), untuk meningkatkan trigliserida
dibutuhkan waktu 6 minggu masa perlakuan pemberian diet tinggi lemak dan
fruktosa. Pada penelitian yang dilakukan Matos (2005) dan penelitian yan di
lakukan Ble-Castillo et al., (2012) , untuk meningkatkan kadar trigliserida
dilakukan selama 8 minggu. Sedangkan untuk dapat meningkatkan trigliserida
secara signifikan diperlukan waktu yang lebih lama yaitu 6 – 8 minggu (Coelho et
al., 2011; Altunkaynak, 2005). Sedangkan dalam penelitian yang dilakukan
Tsalissavria dkk., (2006), kadar trigliserida yang diberikan diet tinggi lemak dan
tinggi karbohidrat secara signifikan meningkat dengan pemberian 12 minggu.
Pada kelompok K2 yang hanya diberi diet tinggi lemak dan fruktosa kadar
trigliserida nya lebih rendah dibandingkan kelompok perlakuan P1, P2, dan P3
yang diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam. Pada kelompok
perlakuan yang diberikan bawang hitam (P1, P2, dan P3) didapatkan hasil
bahwa tidak terdapat perbedaan pada kadar trigliserida tikus. Hal ini berbanding
terbalik dengan penelitian yang dilakukan oleh Seo Yeong-Ju dkk., (2009) yang
62
menyatakan bahwa bawang hitam secara signifikan dapat menurunkan kadar
trigliserida. Hal ini di karenakan zat gizi allicin yang menjadi komponen aktif
dalam penanganan efek hipolipidemia. Pada penelitian Chang Wei-Tang dkk.,
(2017), mengatakan bahwa tikus yang diberikan diet tinggi lemak dan bawang
hitam secara signifikan dapat menurunkan kadar serum trigliserida. Pada
penelitian yang dilakukan Kim dkk., (2011), ekstrak bawang hitam secara
signifikan dapat meningkatkan profil lipid dengan menurunkan kadar serum
trigliserida. Dan juga pada penelitian Chang et al., (2017), bawang hitam secara
signifikan dapat menurunkan kadar serum trigliserida. Namun, kadar trigliserida
pada kelompok perlakuan P1, P2, dan P3 masih pada dalam kadar normal
trigliserida tikus yaitu 26 – 145 mg/dl.
Bawang hitam sendiri berasal dari bawang putih. Bawang putih memiliki
senyawa yang mengandung sulfur allin, yang diubah menjadi bahan aktif yaitu
allicin. Senyawa ini memiliki efek menghambat enzim kunci yang terlibat dalam
biosintesis kolesterol, seperti HMG CoA reduktase. Efek hipokolesterolemik
bawang putih diberikan dengan menurunkan biosintesis kolestrol hati, sedangkan
efek menurunkan trigliserida tampaknya disebabkan oleh penghambatan sintesis
asam lemak oleh enzim malic, sintase asam lemak dan glukosa-6-fosfat
dehidrogenase. Di antara senyawa larut air sallylcysteine, s-ethylcysteine dan s-
propylcysteine mengurangi sintesis kolesterol hingga 40-60%. Senyawa sulfur
larut seperti diallylsulphide, dipropylsulphide dan di-propyldisulphide
menghambat sintesis kolesterol sebesar 10–15% (Choudhary, Prema Ram et al.,
2013). Bawang hitam juga mengandung polifenol dan flavonoid yang berfungsi
sebagai antioksidan. Peningkatan asam polifenol berhubungan dengan
peningkatan total asam dari bawang hitam. Pemanasan pada komponen fenolik
63
meningkatkan fraksi dari asam polifenol, dimana hal tersebut dapat menurunkan
ester, glikosida, dan fraksi ikatan, yang menyebabkan peningkatan fenol dalam
bentuk bebas. Bawang putih yang mengalami pengolahan dapat menyebabkan
perubahan komponen bioaktif seperti polifenol, flavonoid yang berhubungan
dengan tipe dan durasi pemanasan (Gorinstein et al., 2008).
Pada penelitian ini hewan coba diberi perlakuan bawang hitam selama 14
hari (2 minggu). Sedangkan menurut Chang et al., (2017), bawang hitam secara
signifikan dapat menurunkan kadar trigliserida dalam masa perlakuan 6 minggu.
Pada penelitian Kim (2011), bawang hitam juga dapat menurunkan kadar
trigliserida serum dengan lama pemberian bawang hitam yaitu 5 minggu.
Hasil penelitian pemberian sonde bawang hitam terhadap tikus jantan
Rattus norvegicus strain wistar belum dapat mencegah peningkatan kadar
trigliserida secara signifikan. Hal ini disebabkan karena kurangnya lama waktu
pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa ataupun lama waktu pemberian bawang
hitam. Oleh karena itu, masih perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai
pemberian bawang hitam yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa dengan
jangka waktu pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa yang lebih lama, dan
dosis yang efektif agar dapat menurunkan kadar serum trigliserida tikus.
6.4 Implikasi di Bidang Gizi
Perlunya dilakukan langkah penelitian lebih lanjut dengan menggunakan
bahan penelitian yang sama berupa bawang hitam. Pembuatan bawang hitam
lebih baik dilakukan sendiri yaitu pemanasan selama 21 hari, agar dapat
mengontrol suhu, kualitas, dan agar tidak ada terjadinya bias pada penelitian.
Penelitian selanjutnya dapat dilakukan dengan menggunakan dosis yang
64
berbeda dan lama pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa lebih lama
dibandingkan penelitian ini.
6.5 Keterbatasan Penulis
Keterbatasan dalam penelitian yang telah berlangsung, yaitu berupa :
1) Dosis bawang hitam yang sudah ditentukan belum memberikan efek
secara nyata yaitu untuk menurunkan kadar trigliserida.
2) Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah Post Test Only
Control Group Design sehingga tidak bisa melihat kadar trigliserida awal
sebelum dilakukan perlakuan
3) Pada penelitian ini pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan
selama 14 hari, sehingga belum menghasilkan hasil yang signifikan untuk
meningkatkan kadar trigliserida pada tikus.
65
BAB 7
Kesimpulan dan Saran
7.1 Kesimpulan
1. Tidak terdapat hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar
trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar) jantan yang diberi
diet tinggi lemak dan fruktosa
2. Rata – rata asupan pakan tikus semua kelompok berbeda secara
signifikan. Rata – rata asupan pakan tertinggi adalah kelompok K1 yang
hanya mendapatkan diet normal, sementara asupan paka terendah
adalah pada kelompok P2 yang mendapatkan diet normal, diet tinggi
lemak dan fruktosa, serta bawang hitam dosis 480mg.
3. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)
jantan yang diberi diet normal adalah 95,6 mg/dl dan tikus yang diberikan
diet tinggi lemak dan fruktosa memiliki rerata kadar trigliserida 77 mg/dl.
4. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)
jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian
perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 240 mg adalah 85,54
mg/dl
5. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)
jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian
perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 480 mg adalah 91,8 mg/dl
66
6. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)
jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian
perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 960 mg adalah 87,8 mg/dl
7. Pemberian bawang hitam tidak signifikan dapat menurunkan kadar
trigliserida pada tikus (Rattus Norvegicus strain wistar) jantan yang diberi
diet tinggi lemak dan fruktosa.
7.2 Saran
1. Diperlukan menggunakan metode penelitian pre-post test group
control untuk menguji kadar trigliserida pada tikus sebelum diberikan
perlakuan dan untuk melihat homogenitas data sebelumnya.
2. Meningkatkan dosis bawang hitam untuk memperbesar kemungkinan
untuk menurunkan kadar trigliserida.
3. Memperpanjang jangka waktu pemberian diet tinggi lemak dan
fruktosa untuk meningkatkan kadar trigliserida, disarankan dilakukan
pemberian selama 5 – 8 minggu.
67
DAFTAR PUSTAKA
Adam, John M.F. 2006. Dislipidemia dalam : Aru W. Sudoyo, editor : Buku Ajar
Ilmu Penyakit Dalam. edisi 4. Jakarta : Pusat Penerbitan FK UI. Hal 1926-
31.
Adiputro, D. L., Widodo, M. A., Romdoni, R., & Sargowo, D. 2013. Extract of
mangosteen increases high density lipoprotein levels in rats fed high lipid.
Jurnal Universa Medicina, 32(1), 37–43.
Aganović, I., Dušek, T. 2005. Pathophysiology of Metabolic Syndrome. In: Topić,
E., Brguljan, P.M., Blaton, V. New Trends In Classification, Monitoring
and Management of Metabolic Syndrome. Forum of the European
Societies of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Croatia; 1:1-5.
Arthur SL. 2009. Dislipidemia and Risk of Coronary Heart Disease : Role of
Lifestyle Approaches for its Management. American Journal of Lifestyle
Medicine; 3(4) : 257-273
Baroroh, Y. M. 2013. Pengaruh Pemberian Diet Tinggi Lemak terhadap Profil
Lipid dan Serum MDA (malonaldehida) pada Tikus Percobaan. Bogor :
Fakultas Ekologi Manusia Institut Pertanian Bogor.
Brooks. G, Butel. J, dan Morse. S. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba
Medika. Jakarta
68
Castillo’n, PG, et al. 2007. Intake of fried foods is associated with obesity in the
cohort of Spanish adults from the European Prospective Investigation into
Cancer and Nutrition. Am J Clin Nutr Vol.86:198–205. 9
http://www.ajcn.org/content/86/1/198.f ull.pdf.
Castillo, J. L., Aparicio-Trapala, M. A., Juárez-Rojop, I. E., Torres-Lopez, J. E.,
Mendez, J. D., Aguilar-Mariscal, H., Diaz-Zagoya, J. C. 2012. Differential
effects of high-carbohydrate and high-fat diet composition on metabolic
control and insulin resistance in normal rats. International Journal of
Environmental Research and Public Health, 9(5), 1663–1676.
https://doi.org/10.3390/ijerph9051663
Chao, J. S., Einosuke, L., Mami, M., & Katsunori, T. 2007. Processed Black
Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance Anti-Tumor Potency against
Mouse Tumors. Medicinal and Aromatic Journal of Plant Science and
Biotechnology, 1(2), 278–281.
Chang, W., Shiau, D., Cheng, M., Tseng, C., & Chen, C. 2017. Black Garlic
Ameliorates Obesity Induced by a High-fat Diet in Rats, 5(10), 736–741.
https://doi.org/10.12691/jfnr-5-10-3
Chen, Y. C., Kao, T. H., Tseng, C. Y., Chang, W. T., & Hsu, C. L. 2014.
Methanolic extract of black garlic ameliorates diet-induced obesity via
regulating adipogenesis, adipokine biosynthesis, and lipolysis. Journal of
Functional Foods, 9(1), 98–108. https://doi.org/10.1016/j.jff.2014.02.019
69
Choi, I. S., Cha, H. S., & Lee, Y. S. 2014. Physicochemical and Antioxidant
Properties of Black Garlic, 16811–16823.
https://doi.org/10.3390/molecules191016811
Decroli eva., et al., 2008. The Profile of Diabetic Ulcer on Hospitalized Patiens in
Internal Medicine Departement, Dr M Djamil Hospital, Padang. The Journal
of the Indonesian Medical Association Volume 58 Nomor 1 pp 4
Eckel RH, Grundy SM, Zimmet P. The Metabolic Syndrome. Lancet. 2005;
365:1415-28
Ekananda N. 2015. Bay Leaf in Dyslipidemia Therapy. 2015;4:64-69.
Gentilcore, D., Chaikomin, R., Jones, K. L., Russo, A., Feinle-Bisset, C., Wishart,
J. M., … Horowitz, M. 2006. Effects of fat on gastric emptying of and the
glycemic, insulin, and incretin responses to a carbohydrate meal in type 2
diabetes. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 91(6), 2062–
2067. https://doi.org/10.1210/jc.2005-2644
Gill dan J.M. Harrington.2005. Buku Saku Kesehatan Kerja Edisi 3.
Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta
Grundy,M.S.,Cleeman I.J.,Merz C.N.B et al.,. 2004. NCEP Report: Implications of
Recent Clinical Trials for the national Cholesterol Education Program Adult
Treament Panel III Guidelines.pp. 227-34. Diakses : 18 Maret 2011 dari
http://www.nhlbi.nih.gov/guidelines/cholesterol/atp3upd04.pdf.
70
Gupta PK, Roy JK, Prasad M. 2001. Single nucleotide polymorphisms: A new
paradigm for molecular marker technology and DNA polymorphism
detection with emphasis on their use in plants. Current Sci 80:524–535.
Guyton A. C., Hall J. E. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta :
EGC. P. 208 – 212, 219 – 223, 277 – 282, 285 – 287.
Guyton, A.C. and Hall, J.E., 2006. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.
Philadelphia, PA, USA: Elsevier Saunders.
Ha, A. W., Ying, T., & Kim, W. K. 2015. The effects of black garlic (Allium
satvium) extracts on lipid metabolism in rats fed a high fat diet. Nutrition
Research and Practice, 9(1), 30–36. https://doi.org/10.4162/nrp.9.1.30
Hartwig, MS. 2012. Penyakit Serebrovaskular. Dalam: Price SA, Wilson LM,
penyunting. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Edisi ke-6.
(diterjemahkan oleh: Pendit B.U., Hartanto, H., Wulansari P., Mahanani,
D.A.). Jakarta: EGC. hlm. 1105-32
Hendra, P., Wijoyo, Y., Fenty & Dwiastuti, R. 2011. Optimasi Lama Pemberian
Dan Komposis Formulasi Sediaan Diet Tinggi Lemak Pada Tikus Betina,
Lembaga Penelitian Dan Pengabdian Masyarakat, Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta, online,
(http://www.usd.ac.id/lembaga/lppm/detail_penelitian.php?bidang=a&kod
e=b3&id=5&id_bi=3&noid=156 , diakses 15 Desember 2012)
Hunt, J. 1983. Mechanisms and disorders of gastric emptying. Annu Rev Med,
34(2), 219–229. https://doi.org/10.1146/annurev.me.34.020183.001251
71
James WP, Haslam DW. 2005. Obesity Lancet Neurol 2005;366:1197–1209
Jung, Y. M., Lee, S. H., Lee, D. S., You, M. J., Chung, I. K., Cheon, W. H., … Ku,
S. K. 2011. Fermented garlic protects diabetic, obese mice when fed a high-
fat diet by antioxidant effects. Nutrition Research, 31(5), 387–396.
https://doi.org/10.1016/j.nutres.2011.04.005
Kim, I., Kim, J., Hwang, Y., Hwang, K., Om, A., Kim, J., & Cho, K. 2011. The
beneficial effects of aged black garlic extract on obesity and hyperlipidemia
in rats fed a high-fat diet. Journal of Medicinal Plants Research, 5(14),
3159–3168.
Lee, Y.-M., Gweon, O.-C., Seo, Y.-J., Im, J., Kang, M.-J., Kim, M.-J., and Kim,
J.-I. 2009. Antioxidant effect of garlic and aged black garlic in animal model
of type 2 diabetes mellitus. Nutrition Research and Practice, 3(2), 156.
https://doi.org/10.4162/nrp.2009.3.2.156
Lozano, I., Van der Werf, R., Bietiger, W., Seyfritz, E., Peronet, C., Pinget, M., …
Dal, S. 2016. High-fructose and high-fat diet-induced disorders in rats:
impact on diabetes risk, hepatic and vascular complications. Nutrition &
Metabolism, 13(1), 15. https://doi.org/10.1186/s12986-016-0074-1
Maris, F. N. (2015). Pengaruh Pemberian Ekstrak Tauge (Vigna Radiata)
terhadap Kadar Serum Trigliserida pada Tikus Wistar Jantan yang Diinduksi
Kuning telur. Jember: Fakultas Kedokkteran Universitas Jember.
Matos, S. L., De Paula, H., Pedrosa, M. L., Dos Santos, R. C., De Oliveira, E. L.,
Júnior, D. A. C., & Silva, M. E. 2005. Dietary models for inducing
72
hypercholesterolemia in rats. Brazilian Archives of Biology and Technology,
48(2), 203–209. https://doi.org/10.1590/S1516-89132005000200006
Merindasari, Neny. “Pengaruh Pemberian Jus Biji Pepaya (Carica Papaya L)
terhadap kadar kolesterol total tikus Sprague Dawley Dislipidemia.” 2013.
McCowen K, Malhotra A Bistrian BC. 2001. Stress induced Hyperglicemia.
Critical Care Clinic. Vol 17 (1) p.107-124. Murray RK, Granner DK, Mayes
PA, Rodwell VM. Biokimia harper. Edisi 27. Jakarta: EGC; 2009. p.239-49.
Niza, Renti S., et al. 2015. Hubungan Lama Pemberian Diet Aterogenik terhadap
Kadar Trigliserida Rattus novergicus Jantan Strain Wistar. Jom FK Volume
2 No. 2 Oktober 2015.
Octavia, Z. F., Djamiatun, K., & Suci, N. 2017. Pengaruh pemberian yogurt
sinbiotik tepung pisang tanduk terhadap pro fi l lipid tikus sindrom metabolik,
13(4), 159–169.
Prahastuti, S., 2011, Konsumsi Fruktosa Berlebihan dapat Berdampak Buruk
bagi Kesehatan Manusia, JKM, 10 (2) : 173-189.
Price, Sylvia A., Lorraine, Wilson. 1994. Patofisiologi : Konsep Klinis Proses –
Proses Penyakit. Jakarta : EGC
Rachmandiar R. Perbedaan pengaruh jus kacang merah, yoghurt susu dan
yoghurt kacang merah terhadap kadar kolesterol total dan trigliserida serum
pada tikus dislipidemia. (skripsi). Semarang: Fakultas Kedokteran
Universitas Diponegoro; 2012.
73
Ramadhani, azhoranezar. 2014. Perbedaan Kadar Trigliserida Sebelum dan
Setelah Pemberian Sari Bengkuang (Pachyrrhizus erosus) pada Wanita.
Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro.
Rondonuwu RE, Setijowati N, Sarwono I. Efek pemberian ekstrak biji srikaya
(Annona squamosa) terhadap kadar trigliserida tikus (Rattus norvegicus)
galur wistar dengan diet aterogenik. [Skripsi]. Universitas Brawijaya; 2013.
Rukmini, Ambar. 2007. Regenerasi Minyak Goreng Bekas dengan Arang Sekam
Menekan Kerusakan Organ Tubuh. Seminar Nasional Teknologi 2007 ( SNT
2007 ).
Rumanti, Rizna T. “Efek Propolis terhadap Kadar Kolesterol Total pada Tikus
Model Tinggi Lemak.” 2011
Salmenniemi U, Ruotsalainen E, Pihlajamaki J. Multiple abnormalities in glucose
and energy metabolism and coordinated changes in levels of adiponectin,
cytokines, and adhesion molecules in subjects with metabolic syndrome.
Circulation. 2004; 110 (25): 3842-48.
Sasaki, J., Chao, Einosuke, L., Mami, M., & Katsunori, T. 2007. Processed Black
Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance Anti-Tumor Potency against
Mouse Tumors. Medicinal and Aromatic Journal of Plant Science and
Biotechnology, 1(2), 278–281.
Seo, Y.-J., Gweon, O.-C., Im, J.-E., Lee, Y.-M., Kang, M.-J., Kim, J.-I. 2009.
Effect of Garlic and Aged Black Garlic on Hyperglycemia and
74
Dyslipidemia in Animal Model of Type 2 Diabetes Mellitus. Preventive
Nutrition and Food Science, 2009, 14(1), 1–7.
Shabbir, F., Khan, S., Yousaf, M. J., Khan, M. A., & Rajput, T. A. 2016.
Comparison of Effect of High Fat Diet Induced Obesity and Subsequent
Atorvastatin Administration on Different Anthropometric Measures in
Sprague Dawley Rats. High Fat Diet Induced Obesity And Atorvastatin
Pak Armed Forces Med J, 66(5), 699–704.
Simanjuntak K. Pengaruh diet tinggi lipid terhadap timbulnya penyakit. Bina
Widya. 2011; 4(22): 191-9.
Srikanthan, K., Feyh, A., Visweshwar, H., Shapiro, J. I., & Sodhi, K. 2016.
Systematic Review of Metabolic Syndrome Biomarkers : A Panel for Early
Detection , Management , and Risk Stratification in the West Virginian
Population, 13. https://doi.org/10.7150/ijms.13800
Standl, E. 2005. Artiology and consequences of the metabolic syndrome. Eur
Heart J.pp.7(supplement):10-13
Suliburska, J. 2013. A six-week diet high in fat, fructose and salt and its influence
on lipid and mineral status, in rats. Acta Scientiarum Polonorum,
Technologia Alimentaria, 12(2), 195–202. https://doi.org/10.1007/s13105-
013-0276-1
Tavares, P., Gelaleti, R., Picolo, F., Beatriz, S., Prata, M., Marini, G. Campos, P.
A. De. 2015. Metabolic Syndrome : Consensus and Controversy : State of
75
the Art. Journal of Endocrine and Metabolic Diseases, 5(September), 124–
130. https://doi.org/10.4236/ojemd.2015.59016
Thaman R, & Arora GP. 2013. Metabolic Syndrome: Definition and
Pathophysiology– the discussion goes on! Metabolic Syndrome: Definition
and Pathophysiology– the discussion goes on! Introduction and Definition. J
Phys Pharm Adv Journal of Physiology and Pharmacology Advances
THAMAN AND ARORA J. Phys. Pharm. Adv. J. Phys. Pharm. Adv, 3(33),
48–5648. https://doi.org/10.5455/jppa.20130317071355
Tsalissavrina, Iva., Djoko Wahono, Dian H. 2006. PENGARUH PEMBERIAN
DIET TINGGI KARBOHIDRAT DIBANDINGKAN DIET TINGGI LEMAK
TERHADAP KADAR TRIGLISERIDA DAN HDL DARAH PADA Rattus
novergicus galur wistar. Ilmu Gizi Kesehatan Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya, Laboratorium Ilmu Penyakit Dalam Fakultas
Kedokteran Universitas Brawijaya/ RSU Dr. Saiful Anwar Malang, XXII.
Retrieved from http://jkb.ub.ac.id/index.php/jkb/article/viewFile/229/220
Wang, D., Feng, Y., Liu, J., Yan, J., Wang, M., Changlong, J. S. 2010. Black
Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance the Immune System.
Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology, 2010, 4(1),
37–40.
Wibowo. 2009. Pengaruh Pemberian Seduhan Kelopak Rosela (Hibiputih Scus
Sbdariffa) Terhadap Kadar Trigliserida Darah Tikus. Pengaruh Pemberian
Seduhan Kelopak Rosela (Hibiputih Scus Sbdariffa) Terhadap Kadar
Trigliserida Darah Tikus.
76
Wulandari, Widya Ayu and Pramono, Adriyan. 2014. PENGARUH PEMBERIAN
YOGHURT KORO PEDANG (Canavalia ensiformis) TERHADAP KADAR
TRIGLISERIDA SERUM TIKUS SPRAGUE DAWLEY
HIPERTRIGLISERIDEMIA. Undergraduate thesis, Diponegoro University.
Yusuf, A Muri. 2014. Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan Penelitian
Gabungan. Jakarta: Prenadamedia Gro