41
Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng truyền lây: Miễn dịch và sinh học phân tử PGS.TS.BS Nguyễn Thu Hương

Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

  • Upload
    others

  • View
    6

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec phương phaacutep tiếp cận mới trong

chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

Miễn dịch vagrave sinh học phacircn tử

PGSTSBS Nguyễn Thu Hương

Nội dung trigravenh bagravey

Caacutec phương phaacutep xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng hiện nay

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Nội dung trigravenh bagravey

Caacutec phương phaacutep xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng hiện nay1

3

2

Vị triacute

kyacute

sinh

trugraveng

gacircy

bệnh

Một số Kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

người vagrave động vật

Bệnh đơn bagraveo Bệnh giun saacuten Bệnh ngoại kyacute sinh

Giardia lambliaBalantidium coli Entamoeba histolytica Cryptosporidium sppToxoplasma gondiiTrypanosoma sppPlasmodium knowlesi

Schistosoma mansoni Oesophagostomum sppEnterobius vermicularisStrongyloides sppCapilaria sppEchinococcus sppTeania sppToxocara spFasciola spTrichinellaGnathostoma spp

Sarcoptes sppDeer tickRickettsia (Orientiatsutsugamush)Pediculus humanus corporisPediculus humanus capitisHaematopinidae spMallophaga sp

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 2: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nội dung trigravenh bagravey

Caacutec phương phaacutep xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng hiện nay

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Nội dung trigravenh bagravey

Caacutec phương phaacutep xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng hiện nay1

3

2

Vị triacute

kyacute

sinh

trugraveng

gacircy

bệnh

Một số Kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

người vagrave động vật

Bệnh đơn bagraveo Bệnh giun saacuten Bệnh ngoại kyacute sinh

Giardia lambliaBalantidium coli Entamoeba histolytica Cryptosporidium sppToxoplasma gondiiTrypanosoma sppPlasmodium knowlesi

Schistosoma mansoni Oesophagostomum sppEnterobius vermicularisStrongyloides sppCapilaria sppEchinococcus sppTeania sppToxocara spFasciola spTrichinellaGnathostoma spp

Sarcoptes sppDeer tickRickettsia (Orientiatsutsugamush)Pediculus humanus corporisPediculus humanus capitisHaematopinidae spMallophaga sp

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 3: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nội dung trigravenh bagravey

Caacutec phương phaacutep xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng hiện nay1

3

2

Vị triacute

kyacute

sinh

trugraveng

gacircy

bệnh

Một số Kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

người vagrave động vật

Bệnh đơn bagraveo Bệnh giun saacuten Bệnh ngoại kyacute sinh

Giardia lambliaBalantidium coli Entamoeba histolytica Cryptosporidium sppToxoplasma gondiiTrypanosoma sppPlasmodium knowlesi

Schistosoma mansoni Oesophagostomum sppEnterobius vermicularisStrongyloides sppCapilaria sppEchinococcus sppTeania sppToxocara spFasciola spTrichinellaGnathostoma spp

Sarcoptes sppDeer tickRickettsia (Orientiatsutsugamush)Pediculus humanus corporisPediculus humanus capitisHaematopinidae spMallophaga sp

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 4: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Vị triacute

kyacute

sinh

trugraveng

gacircy

bệnh

Một số Kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

người vagrave động vật

Bệnh đơn bagraveo Bệnh giun saacuten Bệnh ngoại kyacute sinh

Giardia lambliaBalantidium coli Entamoeba histolytica Cryptosporidium sppToxoplasma gondiiTrypanosoma sppPlasmodium knowlesi

Schistosoma mansoni Oesophagostomum sppEnterobius vermicularisStrongyloides sppCapilaria sppEchinococcus sppTeania sppToxocara spFasciola spTrichinellaGnathostoma spp

Sarcoptes sppDeer tickRickettsia (Orientiatsutsugamush)Pediculus humanus corporisPediculus humanus capitisHaematopinidae spMallophaga sp

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 5: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Một số Kyacute sinh trugraveng truyền lacircy

người vagrave động vật

Bệnh đơn bagraveo Bệnh giun saacuten Bệnh ngoại kyacute sinh

Giardia lambliaBalantidium coli Entamoeba histolytica Cryptosporidium sppToxoplasma gondiiTrypanosoma sppPlasmodium knowlesi

Schistosoma mansoni Oesophagostomum sppEnterobius vermicularisStrongyloides sppCapilaria sppEchinococcus sppTeania sppToxocara spFasciola spTrichinellaGnathostoma spp

Sarcoptes sppDeer tickRickettsia (Orientiatsutsugamush)Pediculus humanus corporisPediculus humanus capitisHaematopinidae spMallophaga sp

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 6: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Bệnh lacircy truyền do veacutec tơ

Bệnh Kiacute sinh trugraveng Cocircn trugraveng (vector)

African trypanosomiasis

(bệnh ngủ)

Trypanosoma brucei

gambiense Trypanosoma

brucei rhodesiense

Ruồi Tsetse

Babesiosis Babesia microti vagrave caacutec loagravei khaacutecBabesia microti Ixodes

bọ ve (thacircn cứng)

Bệnh Chagas Trypanosoma cruzi Rệp triatomine

Leishmaniasis Leishmania species Ruồi caacutet Phlebotomine

Bệnh Sốt reacutet Plasmodium species Muỗi Anopheles

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 7: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Xếp hạng Bệnh BOD (triệu DALYs)

1 Cryptosporidiosis 837

2 Giun trograven đường ruột 516

3 Leishmaniasis 332

4 Schistosomiasis 331

5 Lymphatic filariasis 278

Gaacutenh nặng bệnh tật (BOD) ước tiacutenh của 5 bệnh kyacute sinh

trugraveng động vật nhiệt đới bị latildeng quecircn nổi bật nhất

WHO2016

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 8: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

httpsonlinelibrarywileycomdoifull101002fsn3530

Sơ đồ lacircy truyền vagrave chẩn đoaacuten kyacute sinh trugraveng lacircy qua đường thực phẩm từ động vật sang người

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 9: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

PP XN

Trực tiếp

Kiểu higravenh

Higravenh thaacuteiKiểu gen

Giaacuten tiếp

Miễn dịch

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 10: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec phương phaacutep chẩn đoaacuten

KIỂU HIgraveNH

HIgraveNH THAacuteI - KHV

Mẫu vật

Phacircn maacuteu dịchcơ thể nước

tiểu mocirc

Phương phaacutep

Tiecircu bản nhuộmsoi lắng đọng nổi nuocirci cấyhellip

KIỂU GEN - PCR

Mẫu vật

AND

Phương phaacutep

PCR RT-PCR Điện di giải trigravenh

tựhellip

MIỄN DỊCH

Mẫu vậtPhacircn maacuteu dịch

cơ thể nướctiểu mocirchellip

Phương phaacutepTest nhanh IFA

ELISA LUMINEX

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 11: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Ưu điểm

Chẩn đoaacuten vagraveng

Độ đặc hiệu cao

Nhanh dễ thực hiện chi phiacute thấp

Aacutep dụng tại thực địa tốt

Tốn thời gian chiacute phiacute cao

Yecircu cầu đagraveo tạo chuyecircn sacircu

Maacutey moacutec TTB Hoacutea chất xeacutet nghiệm phức tạp

Dễ tạp nhiễm ảnh hưởng hoacutea chất độc hại

Khoacute aacutep dụng tại thực địa

Dễ thực hiện (test nhanh)

Nguồn mẫu sẵn

Phaacutet hiện sớm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 12: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nhược điểm

Yecircu cầu kỹ năng vagrave kinh nghiệm

Ngưỡng phaacutet hiện cao- độ nhạy thấp

Khoacute phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ nhạy cao

Phaacutet hiện sớm

Định lượng

Phacircn biệt loagravei phacircn biệt taacutei phaacutet taacutei nhiễm

Coacute thể phacircn tiacutech mẫu với số lượng lớn

Độ đặc hiệu thấp dễ nhiễm cheacuteo

Khoacute thực hiện tại thực địa

Kỹ thuật định lượng đogravei hỏi maacutey moacutec đắt tiền

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 13: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nội dung trigravenh bagravey

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacutesinh trugraveng

1

3

2

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 14: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Tăng Chất lượng

- Tăng độ nhạyđộ đặc hiệu- Giảm ngưỡngphaacutet hiện

Giảm Chi phiacute

- Dễ thực hiện

-Giảm giaacute thagravenh- Thuận tiện

Ứng dụng rộng

- Aacutep dụng cộngđồng

- Chẩn đoaacuten sớm

Mục tiecircu

Hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 15: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Xu hướng mới trong xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt

Test nhanh siecircu nhạy

Queacutet kỹ thuật số phacircn tiacutech higravenh ảnh

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 16: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Higravenh thaacutei Maacutey queacutet coacute độ

phacircn giải cao tiacutech hợp phần

mềm phacircn tiacutech higravenh ảnh dựa

trecircn thống kecirc mẫu lớn

Kết quả chiacutenh xaacutec khocircng phụ

thuộc vagraveo con người

Miễn dịch - test nhanh

- Caacutec test miễn dịch (phaacutet hiện

khaacuteng nguyecircn) siecircu nhạy vagrave độ

đặc hiệu cao

- Độ nhạy tương đương với kỹ

thuật PCR coacute thể phaacutet hiện

khoảng 2 - 10 KSTmicroL maacuteu

Sinh học phacircn tử

-Giảm thiểu taacutech chiết

-Khuếch đại đẳng nhiệt

-Phaacutet hiện trực tiếp

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 17: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Real-time PCR

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 18: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Luminex

Phaacutet hiện caacutec protein

(khaacuteng nguyecircn)

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 19: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

LAMP

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 20: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

ƯU ĐIỂM CỦALAMP

- Độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao tương đương với caacutec

phương phaacutep PCR

- Thời gian xeacutet nghiệm nhanh (15 đến 60 phuacutet)

- ADN khuocircn khocircng đogravei hỏi độ tinh sạch cao

- Phản ứng xảy ra ở điều kiện đẳng nhiệt

- Khocircng đogravei hỏi caacutec thiết bị đắt tiền (bể ổn nhiệt

thiết bị gia nhiệt hoạt động ở nhiệt độ 650C)

- Phaacutet hiện sản phẩm trực tiếp bằng mắt thường

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 21: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Linh hoạt trong đọc kết quả

Tủa Mg Dye magraveu

SYBgreen

HNB MG

Calcein

Agarose Gel Real Time Turbidity

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 22: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Kỹ thuật PCR-Luminex

Ưu điểm

- Đơn giản nhanh rẻ

tiền

- Tiết kiệm mẫu

- Coacute thể phaacutet hiện nhiều

mầm bệnh trong một

mẫu

Nhược điểm

- Thaacutech thức trong việc

thiết kế caacutec khaacuteng thể

vagrave mồi của caacutec mầm

bệnh

- Trang thiết bị đắt tiền

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 23: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Tiến bộ của cocircng nghệ phacircn tử được aacutep dụng

cho kyacute sinh trugraveng học theo mốc thời gian

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 24: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Ưu điểm Khoacute khăn

Định lượng tuyệt đối khocircng coacute

đường cong chuẩn

Khối lượng hỗn hợp phản ứng coacute

hạn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi chất ức

chế mẫu

Định lượng iacutet chiacutenh xaacutec hơn

amplicon lớn hơn

Iacutet bị ảnh hưởng bởi hiệu quảkhuếch đại keacutem

Thocircng số thấp

Chiacutenh xaacutec hơn Hạn chế gheacutep kecircnh nếu xeacutet

nghiệm yecircu cầu kiểm soaacutet nội bộ

Phaacutet hiện tốt hơn caacutec biến thểcoacute số lượng bản sao thấp

Dải động nhỏ hơn

Cải thiện khả năng thử nghiệm

liecircn phograveng

Dụng cụ vagrave thuốc thử đắt tiền hơn

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 25: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nội dung trigravenh bagravey

Một số ứng dụng chẩn đoaacuten kyacutesinh trugraveng truyền lacircy

1

3

2

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 26: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasi

s Trypanosoma

brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Trypanosom

a cruzi

Leishmania

sis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodiu

m species

Toxoplasmo

sis

Toxoplasma

gondii

Kiacutenh hiển vi x x x x x mdash

Huyết thanh

miễn dịch

bull ELISA x x x mdash mdash x

bull FAST-ELISA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull Dot-ELISA

Dipstick

x mdash x x mdash mdash

bull RIPA-ELISA mdash mdash x mdash mdash mdash

bull DHA IHA x mdash mdash x mdash mdash

bull DFA IFA x x mdash mdash x x

bull Immunoblot mdash mdash x mdash mdash x

bull PRISM mdash mdash x mdash mdash mdash

bull RDT mdash mdash x mdash x mdash

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 27: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec phương phaacutep phaacutet hiện KST đường maacuteuKỹ thuật chẩn đoaacuten African

trypanosomiasis

T brucei

Babesiosis

Babesia

microti

Chagas

disease

Tcruzi

Leishmaniasis

Leishmania

species

Malaria

Plasmodium

species

Toxoplasmo

sis

T gondii

Sinh học phacircn tử

bull PCR x x x x x x

bull RT-PCR x mdash mdash x x x

bull QT-NASBA mdash mdash mdash x x mdash

bull RT-QB-NASBA mdash mdash mdash mdash x mdash

bull LAMP x mdash x mdash x mdash

bull Luminex mdash mdash mdash mdash x mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash x x mdash

bull OC-PCR x mdash mdash x mdash mdash

PROTEOMICS

bull Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-TOF

SELDI-TOF)

x mdash mdash mdash x mdash

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 28: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporidio

sis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporidiu

m parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MICROSCOPY x x x x x x x

SEROLOGY

BASED

ASSAYS

bull ELISA x x x x x x x

bull FAST-

ELISA

mdash x x mdash mdash mdash mdash

bull Dot-ELISA

or Dipstick

mdash x x mdash x x mdash

bull DHA or IHA mdash mdash x mdash x x x

bull DFA or IFA x mdash mdash mdash mdash mdash x

bull Immunoblot mdash x x x x mdash x

bull LIPS mdash mdash mdash mdash mdash x x

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 29: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Phương phaacutep phaacutet hiện bệnh KST đường ruột

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomiasis Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasis

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica

F gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia solium Echinococcus

granulosus

E multilocularis

Wuchereria

bancrofti Brugia

malayi B timori

Loa loa

Strongyloides

stercoralis

MOLECULAR-BASED ASSAYS

bull PCR x mdash x x x x x

bull RT-PCR x mdash x mdash mdash mdash x

bull LAMP x mdash mdash x mdash mdash mdash

bull Luminex x mdash mdash mdash mdash mdash mdash

bull PCR-ELISA mdash mdash mdash mdash mdash x mdash

bull OC-PCR mdash mdash x x x mdash mdash

PROTEOMICS

Mass

Spectrometry

(LDMS MALDI-

TOF SELDI-

TOF)

mdash x mdash x mdash mdash mdash

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 30: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh kyacute sinh trugraveng đường ruột

do CDC vagrave NRCP cung cấp

Kỹ thuật

chẩn đoaacuten

PROTOZOA TREMATODES CESTODES NEMATODES

Cryptosporid

iosis

Fasciolosis Schistosomia

sis

Taeniasis

Cysticercosis

Hydatidosis Filariasis Strongylodiasi

s

Cryptosporid

ium parvum

C hominis

Fasciola

hepatica F

gigantica

Schistosoma

mansoni

Taenia

solium

Echinococcu

s granulosus

E

multilocularis

Wuchereria

bancrofti

Brugia malayi

B timori Loa

loa

Strongyloides

stercoralis

CDC KHV EIA

PCR RT-

PCR

mdash KHV FAST-

ELISA IB

Immunoblot IB KHV EIA KHV EIA

NRCP KHV EIA KHV EIA KHV EIA IB EIA KHV EIA KHV nuocirci cấy

EIA IB

CDC Centre for Disease Control Atlanta Georgia USA NRCP National Reference Centre for Parasitology Montreal General Hospital Montreal Quebec Canada

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 31: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Chẩn đoaacuten phaacutet hiện caacutec bệnh KST lacircy qua đường maacuteu

Kỹ thuật chẩn

đoaacuten

African

trypanosomiasis

Babesiosis Chagas

disease

Leishmaniasi

s

Malaria Toxoplasmosi

s

Trypanosoma

brucei species

Babesia

microti

Trypanosoma

cruzi

Leishmania

species

Plasmodium

species

Toxoplasma

gondii

CDC KHV KHV

IFA PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA EIA

KHV nuocirci

cấy

IFA

KHV

PCR IFA

KHV

IFA EIA

NRCP KHV nuocirci cấy

CATT PCR

KHV

IFA

KHV nuocirci

cấy

EIA RT-PCR

KHV nuocirci

cấy

IFA RT-PCR

KHV

IFA IB PCR

RT-PCR

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 32: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Caacutec chỉ định sử dụng kỹ thuật xeacutet nghiệm kyacute sinh trugraveng

Kỹ thuật Chẩn đoaacuten KST Nghiecircn cứu KST

Khaacutei niệm Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten bệnh liecircn

quan đến kyacute sinh trugraveng

Lagrave những xeacutet nghiệm dugraveng

để chẩn đoaacuten mầm bệnh

liecircn quan đến kyacute sinh trugraveng

Chỉ định bệnh nhacircn bị nghi ngờ

nhiễm kyacute sinh trugraveng hoặc coacute

yếu tố nguy cơ nhiễm

Mocirci trường sống KST

Vật chủ trung gian

Vật chủ

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 33: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Phương phaacutep PCR

Taacutech chiết DNAThecircm caacutec thagravenh phần

của phản ứng PCR

Tiến hagravenh chạy PCR

Primer

Taq polymerase

Nucleotides

Điện di sản phẩm PCRĐọc kết quả

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 34: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Khocircng cần biến tiacutenh toagraven bộ ADN

khuocircn

Đẳng nhiệt sử dụng một nhiệt độduy nhất (60- 65⁰C)

Khocircng cần thiết bị luacircn

nhiệt đắt tiền

Độ nhạy cao vagravei nanogram

Kiểm tra sản phẩm bằng

mắt thường

ADN khuocircn khocircng cần tinh

sạch cao

Biến tiacutenh hoagraven toagraven ADN khuocircn

3 giai đoạn nhiệt khaacutec nhau

bull Biến tiacutenh (95⁰C)

bull Gắn mồi (50-

60⁰C)

bull Khuếch đại (72⁰C)

Cần maacutey luacircn nhiệt chuyecircn dụng

Độ nhạy từ vagravei picrogam đến

fetogram

Điện di kiểm tra sản phẩm trecircn

gel

ADN khuocircn phải tinh sạch

Loop-mediated Isothermal

Amplification - LAMPPolymerase Chain Reaction - PCR

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 35: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Malaria-LAMP lagrave một cocircng cụ mới phaacutet hiện những người mang KST khocircng triệu chứng

httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 36: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Nghiecircn cứu ứng dụng

Coronavirus gacircy hội chứng (SARS)

vi ruacutet cuacutem A

virus Dengue

virus viecircm gan B

vi khuẩn Lao

caacutec loại KST sốt reacutet saacuten laacute gan lớn saacuten laacute gan

nhỏ giun lươn đường ruộthellip

Covid 19

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 37: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Malaria SHERLOCK Diagnostic

httpswwwpnasorgcontent1174125722

Specific High-sensitivity Enzymatic Reporter unlocking Chẩn đoaacuten 4 loagravei KSTSR coacutekhocircng

triệu chứng gen khaacuteng thuốc SR

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 38: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Kiacutet LAMP chẩn đoaacuten SR SLGL GLĐR SLGN

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 39: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Năm 2021 - HUPH đang nghiecircn cứu phaacutet triển bộsinh phẩm chẩn đoaacuten saacuten dacircy choacute Echinococcus

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 40: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Tagravei liệu tham khảo1 Momar Ndao (2009) Diagnosis of Parasitic Diseases Old and New Approaches

doiorg1011552009278246

2 Konrad Pisarski (2019) The Global Burden of Disease of Zoonotic Parasitic Diseases Top 5

Contenders for Priority Consideration doi 103390tropicalmed4010044

3 httpswwwpnasorgcontent1174125722

4 httpswwwhumandelab-professionalstrends-topicsvector-borne-diseases-malaria

5 httpswwwhindawicomjournalsipid2009278246

6 httpwwwbaltimorevetnetblog15458-intestinal-and-external-parasites-and-zoonotic-impactư

7 Surveillance and diagnosis of zoonotic foodborne parasites doiorg101002fsn3530

8 Baacuteo caacuteo kết quả đề tagravei cấp nhagrave nước KC101616-20

Thank you

For you and pet safety

Page 41: Các phương pháp tiếp cận mới trong chẩn đoán ký sinh trùng

Thank you

For you and pet safety