Algoritmos bacterianos

Algoritmos bacterianos

QBP. DOMINGO SANCHEZ FRANCIA

HOSPITAL DEL NIÑO MORELENSE

CUERNAVACA MORELOS.

I.-Puntos a tomar en cuenta en las marchas bacterianas

1.-Toma de muestra

2.-Transporte de la muestra

3.- Análisis Microscopico

4.- Cultivo y primoaislamiento

5.- Identificación Bacteriana

II.- Origen de muestras clínicas1.- Las muestras para el estudio

bacteriológico, se dividen en dos tipos:

a).- las que proceden de sitios en los que no hay flora bacteriana normal presente.

b).- aquellas que se toman de lugares que tienen flora bacteriana normal.

Flora bacteriana

Es importante que el bacteriólogo tengaconocimiento de los siguientes aspectos:

• cuales son los agentes etiológicos aislados con mayor frecuencia en procesos infecciosos de sitios anatómicos normalmente estériles.

• cuales son los microorganismos, presentes, bajo condiciones normales, en la piel y en las mucosas.

Presencia de biota normal en diferentes zonas corporales del humano.

ZONAS CORPORALES LIBRES DE BIOTA NORMAL

ZONAS CORPORALES CON DE BIOTA NORMAL

Aparato respiratorio inferior-Laringe-Traquea-BronquiolosAparato genitourinario-Ureteros-Vejiga-Riñón-ÚteroLíquidos-Sangre-Médula ósea-L.C.R.-Líquido seroso-Líquido sinovial-Líquido pleural-OrinaTejidos

PielMucosas -Boca-Orofaringe-NasofaringeOído externoOjoAparato genitourinario-Uretra anterior-VaginaAparato gastrointestinal-Estómago-Intestino delgado-Intestino grueso

III.- TRANSPORTE DE LA MUESTRA

1.-La cantidad de material debe ser adecuado.

2.-La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso (por ejemplo, expectoración, no saliva; pus de la lesión subyacente, no de su trayecto fistuloso; una muestra de lo profundo de la herida, no de la superficie).

3.-Se debe evitar la contaminación de la muestra utilizando sólo equipo estéril y precauciones asépticas.

4.-Las muestras para ser enviadas al laboratorio deben colocarse en un medio de transporte, el cual tiene como propósito mantener la viabilidad de las bacterias presentes en la muestra e impedir su multiplicación. Se han diseñado diferentes medios de transporte, el que más se utiliza es el de Stuart.

Medios de transporte de uso en Bacteriología Médica.

MEDIO PROPOSITO

STUARTSTUART REDUCIDO

Aerobios y anaerobios facultativosAnaerobios estrictos

CARY-BLAIRAMIESGLICEROLSOLUCIÓN SALINAAMIES Y DOUGLASHAJNA

Shigella y Campylobacter

CARBÓN ACTIVADOCASREGAN-LOWE2SP

Streptococcus pyogenesBordetella pertussisBordetella pertussisChlamydia

TRANSGROWNPIKECALDO UREACAMPYTIOSP4

Neisseria gonorrhoeaeStrptococcus pyogenesHelycobacter pyloriCampylobacter jejuniMicoplasma

IV.- Condiciones apropiadas para el transporte de muestras

1.-La orina, las expectoraciones y el material de absceso, se pueden colocar en frascos estériles de boca ancha.

2.-Los líquidos corporales como el Líquido Cefalorraquídeo en tubos estériles (la sangre se coloca en frascos diseñados ex profeso).

3.-Los trozos de tejido se pueden colocar en frascos estériles.

V.-Criterios para el rechazo en la evaluación de las muestras

a) Muestras no aptas para su procesamiento: • Punta de sonda foley• Orina de bolsa de sonda• Líquidos coagulados• Cultivos para anaerobios enviados en medio de

transporte inadecuado.

b).-Muestras remitidas en condiciones inadecuadas.

c).-Solicitud de estudios especiales innecesarios.

VI.- MICROSCOPIA

Este procedimiento evidencia lo siguiente:

1.- La presencia de bacterias, cantidad, morfología y agrupación.

2.-Permite evaluar el grado de respuesta inmunológica con la presencia de células fagocíticas, cuyo quimiotactismo esté orientado hacia un morfotipo bacteriano en particular (Criterios de Bartlett), donde se observen células bacterianas adheridas a la membrana de los PMN y dentro de las vacuolas digestivas formadas en el citoplasma de la células inflamatorias.

VI.- Microscopia

3.-La observación microscópica es el primer paso, el cual permitirá orientar el método a desarrollar en el estudio bacteriológico para el diagnóstico clínico.

4.-Se pueden realizar preparaciones en fresco para la observación en campo oscuro, ( treponemas y leptospiras), preparaciones en fresco de muestras de vagina para la observación de células indicativas de vaginosis bacteriana.

VII.- Tinciones

1. Simples:• Azul de metileno

• Fucsina fenicada

• Verde de malaquita

2. Diferenciales:• Gram

• Ziehl-Neelsen

• Tan Thiam-Hok

• Machiavello

• Jiménez

VIII.- Tinciones Estructurales:a) Flagelos

- Rhodes- Tribondeau

- Leifsonb) Esporas

- Shaeffer-fulton- Moeller

c) Cápsula- Hiss- Tinta china

d) Gránulos metacromáticos- Ernst-Neisser- Albert- Loeffler

Tinción Gram Tinción Gram (cultivo fresco)(cultivo fresco) ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ –– –– –– –– ––

FormaForma cocococo cocococo cocococo cocococo bastónbastón bastónbastón bastónbastón bastónbastón bastónbastón bastónbastón bastónbastón bastónbastón cocococo

AgrupaciónAgrupación racimosracimos racimosracimos cadenascadenas tetradastetradas parespares

Crecimiento Crecimiento aerobioaerobio ++ ++ ++ ++ ++ –– ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++

Crecimiento Crecimiento anaerobioanaerobio –– ++ ++ ++ ++ ++ ++ –– –– –– ++ ++ ––

EsporasEsporas –– –– –– –– –– ++ ++ ++ –– –– –– –– ––

Movilidad Movilidad –– –– –– –– –– + o –+ o – + o –+ o – + o –+ o – + o –+ o – + o –+ o – + o -+ o - ++ ––

Catalasa Catalasa ++ ++ –– –– –– –– ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++

Oxidasa Oxidasa ++ ++ –– ++ ++

Fermentación de Fermentación de glucosa a acido glucosa a acido oo a acido+gas a acido+gas

–– ++ ++ ++ ++ + (o –)+ (o –) ++ –– –– –– ++ ++ ––

O/F O/F –– OO FF FF OO

MicrococcusMicrococcus XX

StaphylococcusStaphylococcus XX

StreptococcusStreptococcus XX

LactococcusLactococcus XX

EnterococcusEnterococcus XX

LeuconostocLeuconostoc XX

PediococcusPediococcus XX XX

AerococcusAerococcus XX

LactobacillusLactobacillus XX

ClostridiumClostridium XX

BacillusBacillus XX XX

AlcaligenesAlcaligenes XX

PseudomonasPseudomonas XX

EnterobacteriasEnterobacterias XX

AeromonasAeromonas XX

ChromobacteriuChromobacteriumm

XX

NeisseriaNeisseria XX

IX.-Características fenotipicas para la identificación bacteriana A).- Criterios Generales:

• Requerimientos de Oxigeno (atmósfera) y temperatura de incubación.

• Morfología colonial. • Tipo de hemólisis en GS carnero al 5%.• Requerimientos nutricionales.• Producción de pigmentos.• Tinciones: Afinidad a la tinción de Gram. • Morfología bacteriana.• Presencia de enzimas.• Reacciones inmunoserológicas.• Sensibilidad antimicrobiana.

X.- Criterios de Cowan y SteelB).- Pruebas de selección Primaria :

• Reacción de catalasa• Reacción de oxidasa• Prueba de movilidad• Pruebas de O/F de carbohidratos• Presencia de Esporas• Tinción de Ziehel Neelsen• Tinción de Gram

XI.-Requerimientos nutricionales

1.-Conocer que suplementos nutricionales que requiere MO para crecer óptimamente.

2.-Ejemplo: dependencia de factor NAD (V) o factor Hemina (X) ó ambos en el género Haemophilus.

3.-Familia Enterobacteraceae: no son organismos nutricionalmente exigentes.

XII.- Atmósfera

1.-Conocer cuales son los requerimientos de O2 de los MO.

2.-Aerobios.

3.-Microaerofílicos.

4.-Anaerobios facultativos.

5.-Anaerobios estrictos

XIII.- Temperatura1.-Conocer la temperatura ideal para su

desarrollo.

2.-Mesofílicos (35 a 37ºC): la mayoria de las especies bacterianas de interés clínico.

3.-Termofílicos (>37ºC): Pseudomonas aeruginosa (41ºC), Campylobacterias (42ºC).

4.-Psicrofílicos(<ATM): Yersinia enterocolítica (4ºC), Listeria monocytogenes (ATM)

Morfología colonial

Tipo de hemólisis en GS carnero al 5%

XIV.-Producción de pigmentos

1.-Los pigmentos insolubles en agua incluyen los carotenoides (amarillo-naranja), la violaceína (violeta o púrpura) y las fenazinas (rojo, castaño, marrón).

2.-Los pigmentos hidrosolubles y difusibles incluyen las fluoresceínas (pioverdina), piocianinas, piorrubina, melanina y otros varios subproductos pigmentados, que cambian el color del medio de cultivo.

Pigmentos insolubles en agua

Carotenoides (amarillo-naranja)

Fenazinas (rojo, castaño, marrón)

Pigmentos hidrosolubles y difusibles

Fluoresceínas (pioverdina- piocianinas) Lampara de Wood (UV)

XV.-Tinciones: Afinidad a la tinción de Gram.

Morfología bacteriana

XVI.-Reacción de catalasa

• Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas en las Micrococcaceae.

• La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso.

• La prueba de la catalasa debe realizarse a partir de

un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil.

Prueba de la catalasa

Reacción de citocromo oxidasa

• Los citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua.

• El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos, pero nunca en anaerobios estrictos.

Dimetil-p-fenilendiamina al 1%

Prueba de movilidad

En agar semisólido ó por gota pendiente

1.-El medio OF de Hugh y Leifson contiene peptona al 0,2% y 1,0% de hidratos de carbono, de tal forma que la relación entre peptona e hidrato de carbono es 1:5, a diferencia de la relación 2:1 que existe en los medios utilizados para fermentación de hidratos de carbono.

2.-La disminución de la peptona minimiza la formación de productos de oxidación a partir de los aminoácidos, que tienden a elevar el pH del medio y pueden neutralizar los ácidos débiles producidos por los bacilos no fermentadores.

Pruebas de fermentación de carbohidratos

Medio O/F

Los microorganismos oxidativos producen ácido sólo en el tubo abierto expuesto al oxígeno atmosférico.

Los microorganismos fermentadores producen ácido

en ambos tubos.

Medio O/F

Izquierda tubo de OF inoculado con un organismo de metabolismo no fermentador y no oxidativo para la glucosa.

Observe el ligero vire a alcalino (azul) debido a la utilización de proteinas (peptonas) del medio.

XVII.-Pruebas de fermentación de carbohidratos

XVIII.-Presencia de enzimas

• Detección de enzimas y vías metabólicas

a) RM-VP (KOH + Alfa-naftol).

b) O.N.P.G.

http://bilbo.edu.uy/~microbio/RMVP.html

Prueba de la ONPG (o-Nitrofenil- β-D-

galactopiranósido)• Es un compuesto estructuralmente

similar a la lactosa, excepto en que la glucosa ha sido reemplazada por un grupo o-nitrofenilo.

• Esta prueba permite detectar con mayor rapidez la fermentación de la lactosa, al evidenciar la enzima β-galactosidasa más rápidamente.

XIX.Reacciones inmunológicasUtilización de antisueros específicos para determinar el fenotipo antigénico de grupo y tipo (seroagrupar, serotipificar)

MARCHAS BACTERIOLÓGICAS.1.- Sistema gastrointestinal

1.-Coprocultivo rutina:

A).- Salmonella sp

B).- Shigella sp

2.-Coprocultivo específico

A).- E. coli patógenas.

B).- Campylobacter sp.

C).- Vibrios.

D).- Otras entidades.

A).- Coprocultivo• Las enfermedades infecciosas del aparato

gastrointestinal representan una de las principales causas de mortalidad y morbilidad infantil por la diarrea aguda de niños menores de cinco años.

• La patogénesis de la diarrea involucra a varios microorganismos como agentes causales, pertenecientes en su mayoría a la familia Enterobacteriaceae, entre los que destacan: Salmonella, Shigella, Yersinia y Escherichia coli.

Escherichia coli

• Escherichia coli forma parte de la biota normal, sin embargo las cepas patógenas se clasifican de acuerdo con su mecanismo de patogenicidad en seis grupos:

1. Enteropatógena EPEC2. Enterohemorrágica EHEC3. Enterotoxigénica ETEC4. Enteroagregativa EaggEC5. Enteroadherente difusa DAEC6. Enteroinvasiva EIEC

• Algunas especies de Campylobacter y Helicobacter se incluyen como causantes de enfermedad en el aparato gastrointestinal, al igual que Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.

Recolección de la muestra

• Las muestras se recolectan directamente en un frasco limpio y de boca ancha con tapa hermética, al inicio de la enfermedad y preferentemente antes de iniciar tratamiento antimicrobiano.

• Cuando se sospecha de la posible recuperación de Shigella y Campylobacter, es necesario tomar dos hisopos rectales impregnados de materia fecal, los cuales se colocan en medio de transporte Cary-Blair (se pueden usar otros medios de transporte como Stuart o Amies).

MATERIA FECAL

(MEDIO DE TRANSPORTE CARY-

BLAIR)

MAC CONKEY X L D CALDO SELENITO

Seleccionar colonias Lac(+) y Lac (-). Resembrar en agar nutritivo para realizar

pbas. bioquímicas

AGAR NUTRITIVOOxidasa

OF

Pbas. Bioquímicas: KIA,ONPG,LD, OD, CIT, SIM

MR-VP, UREA, FDSerotipificar

AB CLSI

Seleccionar colonias lac (-), LD(+ ó -)

y/o producción de H2S

Resembrar en Agar SS ó VB

Identificar colonias sospechosas de Salmonella

Lac(-) H2S(+)

INCUBAR37ºC, 24h

INCUBAR37ºC, 24h

INCUBAR37ºC, 8 – 12 h

AGAR NUTRITIVOOxidasa

OF

E.coli patógenasShigella sp

Salmonella sppYersinia enterocolitica

PlesiomonasAeromonas

Pbas. Bioquímicas: KIA,ONPG,LD, OD, CIT, SIM MR-VP, UREA, FD

SerotipificarAB CLSI

OX(-)OF: (+/+)

OX(+ )OF: (+/+)

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

HISOPADO RECTAL CARY BLAIR

2.-Tracto genitourinario

• I.V.U : Urocultivo

• Vaginitis : Cultivo Vaginal

• Vaginosis: Cultivo vaginal

• Uretritis: Cultivo sec. uretral

A).- Urocultivo• La orina de personas sanas es estéril debido a su vaciado

frecuente, lo cual evita la colonización.

• La acidez inhibe algunos microorganismos, y en los pacientes masculinos, la secreción prostática contiene espermita y zinc que impiden el desarrollo de algunas bacterias.

• Cuando la orina es turbia debido a la presencia de leucocitos (piuria), en ocasiones de eritrocitos (hematuria) y de bacterias, es sugestivo de infección de las vías urinarias (IVU).

• La bacteriuria puede ser asintomática o presentarse como una enfermedad crónica o aguda.

• En la colonización de las vías urinaria, intervienen varios factores predisponentes que pueden ser de origen local como por ejemplo: la contaminación fecal del meato urinario, el cateterismo, la patología urinaria congénita o adquirida y el reflujo vesical.

• Entre los factores generales se mencionan: la diabetes mellitus, el transplante de órganos, el SIDA, el embarazo, la hipertensión arterial y la terapia con fármacos de amplio espectro.

• Escherichia coli es el agente etiológico en más del 80% de estas infecciones; ocasionalmente pueden encontrarse dos o más especies bacterianas involucradas.

• La muestra de elección, es la primera orina de la mañana; sin embargo en la IVU aguda la carga bacteriana es representativa a cualquier hora del día.

• En pacientes femeninas se indica que deben lavarse el área periuretral y la periferia del meato urinario, utilizando una gasa estéril humedecida con agua y jabón, con movimientos de adelante hacia atrás.

• posteriormente se limpiará el área con una gasa estéril humedecida con agua o solución salina estéril.

• la recolección de la orina debe hacerse separando los labios mayores con una mano, la otra mano sostiene el frasco donde se deposita la muestra.

• A los pacientes masculinos se les indica que se limpien el glande y la periferia del meato urinario con una gasa impregnada con solución salina estéril antes de la micción.

• En ambos sexos la muestra debe tomarse por el método del “Chorro medio”, que consiste en que el paciente debe desechar la primera porción de orina y recolectar la parte media del chorro en un frasco de boca ancha estéril.

• En recién nacidos, niños y ancianos la muestra puede recibirse en una bolsa de plástico estéril; las muestras tomadas en esas condiciones fácilmente se contaminan de biota fecal, en un resultado positivo debe considerarse la posibilidad de una contaminación.

• El criterio que se aplica para evaluar la presencia de bacterias en la orina es el de Kass (1957) y Sanford (1956), el cual considera que las bacterias provenientes de las porciones superiores aparato urinario durante su residencia en la vejiga, utilizan la orina como medio de cultivo, alcanzando un población superior a 100,000 UFC/ml de muestra.

• Por el contrario las bacterias que son arrastradas durante la micción, nunca llegan a esas cifras por lo que en estos casos se les considera como contaminantes.

• Cuentas menores de 100,000 UFC/ml podrían corresponder a infecciones en las vías superiores en pacientes que han recibido antimicrobianos, o en aquellos cuya orina está muy diluida por la terapia hidratante; por último cuentas menores de 10,000 UFC/ml se toman como contaminantes.

Criterios para el diagnóstico de IN

6.5 Infecciones de vías urinarias. (Sintomáticas, cont.....)Independientemente de los hallazgos de urocultivo:

6.5.1.11 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa, mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra).

6.5.1.12 Cateterismo: más de 50,000 UFC/ml (una muestra).

6.5.1.13 Punción suprapúbica: cualquier crecimiento es diagnóstico.

6.5.1.14 El aislamiento de un nuevo microorganismo en urocultivo es diagnóstico de un nuevo episodio de infección urinaria.6.5.2 Asintomáticas.

Pacientes asintomáticos de alto riesgo con un sedimento urinario que contenga 10 o más leucocitos por campo más cualquiera de los siguientes:

6.5.2.1 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra).

6.5.2.2 Cateterismo: mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra).6.5.2.3 Punción suprapúbica: cualquier crecimiento es diagnóstico.

ORINAHomogenizar

DILUIR LA MUESTRA DE ORINA EN SOLUCION SALINA ESTERIL

Inocular con asa bacterilogica de 0.01 ul o con una pipeta

automatica 10μl con una puntilla esteril

GS 5% u otro medio nutritivoEstriar de forma masiva 37ºC x

24 – 48 hrs

DILUCIÓN 1:1000.1 ml ORINA+9.9 ml SS ESTERIL

Mezclar

Agar de Mac Conkey con estria central37ºC x 24 – 48 hrs

COCOS GRAM POSITIVOSBACILOS GRAM NEGATIVOS BGN

AGAR NUTRITIVO

Lectura del Sedimento

Tinción de Gram

CONTAR EL NUM DE COLONIAS QUE DESARROLLARON Y MULTIPLICARLAS

POR EL FACT. DE DIL.REPORTAR EN UFC/ml

IDENTIFICAR Y REALIZAR AB CLSI

B).- Exudado cérvico vaginal• En las mujeres con signos y síntomas de infección

genital aguda las muestras más comunes son de cuello uterino y de uretra.

• Este estudio es util para determinar el posible

agente causal de la vaginitis e incluso de la vaginosis bacteriana.

• Las muestras cervicales se obtienen con un espéculo, después de eliminar el moco cervical con una torunda seca y esteril.

Agentes potencialmente patógenos:

Vaginitis• Neisseria gonorrhoeae • Streptococcus

agalactiae• Candida albicans• Mycoplasmas y

ureaplasmas• Chlamidia• Trichomonas vaginalis

Vaginosis• Gardnerella vaginalis• Mobiluncus • Bacteroides • Peptostreptococcus

Toma del producto• Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un

espéculo lubricado con agua ó sol. salina estéril.

• Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo de dalcrón, de la zona con mayor exudado, o en su defecto, del fondo del saco vaginal posterior. Repetir la operación con la segunda torunda.

• Se obtendrán 3 hisopados, uno destinada al estudio microscópico del Gram, otro para cultivo y el tercero para el fresco.

• El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible.

• El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene viables a los MO hasta por 3-6 horas.

Mediante el uso de un espejo vaginal estéril lubricado con agua estéril, se toman 3 hisopados de muestrra de la secreción de fondo de saco y

cervix.

2do. Hisopo medio de transporte para cultivo

Seleccionar medios de cultivo primarios

Determinar pH insito

1er. Hisopo para laminilla Gram

“Tinción de Gram compatible con vaginosis bacteriana

3er. Hisopo: ObservarFresco, KOH al 10%Criterios de Gardner y De Nugent

Pseudohifas (+)Prársitos

GS carnero 5% GCh ó TM Agar Dextrosa SabouraudAgar BiggyAagr Micosel

CGP CGPCadenas cadenasCol.βhem. Col. αβγhem.Cat(-) Cat(-)Taxo”A”= R PYR(+)TSX= R BE(+)CAMP(+) NaCl 6.5 (+)

Col. Grises, brillantes de DCGN oxidasa positiva. Cat(+)Identificación de NeisseriasGilu(+), Mal(-), Fruc(-) pruebas de sensibilidad.

Streptococcus β hem. Gpo. BEnterococos Neisseria gonorrhoeae

TG(+)Mal(+), Sac(-), Tre(+), Lac(-)Ure(-)

Candida albicans

Pruebas de susceptibilidad (CLSI)

C).-Exudado uretral masculino• El diagnóstico de gonorrea puede establecerse en los

hombres que se presentan con uretritis supurativa aguda, en quienes es posible identificar los diplococos intracelulares gramnegativos.

• Cuando la descarga uretral es escasa y los diplococos intracelulares no aparecen en una muestra al azar, la toma de la primera muestra de la mañana, antes de orinar, suele ser útil.

• La incidencia de C. trachomatis excede la de N. gonorrhoeae como causa de infecciones supurativas agudas en los genitales.

• Los signos y síntomas son indistinguibles; C. trachomatis tiende a generar menos exudado y menor concentración de neutrófilos segmentados que N. gonorrhoeae.

• Hasta un 20% de hombres y un 40% de las mujeres con gonorrea pueden estar coinfectados por C. trachomatis.

• En muchos casos pueden requerirse procedimientos de cultivo para recuperar ambos microorganismos, en particular cuando el tratamiento falla.

• Con frecuencia, tanto en hombres como en mujeres la infección es asintomática, en particular cuando el agente infeccioso es C. trachomatis.

Toma del producto• Limpiar cuidadosamente la mucosa

circundante con gasas estériles.

• Introducir el hisopo suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar unos 2 cm dentro de la uretra (3-5 cm para la investigación de Chlamydia trachomatis) y depositar en el medio 2SP.

• Repetir operación con un segundo hisopo para tinción Gram.

• El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene viables a los MO hasta por 3-6 horas.

3.- Vías respiratorias A).- Infecciones de las VRS• Exudado faringeo : Diagnóstico de Faringo

amigdalitis, amigdalitis, epiglotitis.• Portadores de patógenos oportunistas Exudado

nasal.• Exudado Otico: Diagnóstico de otitis media.

B).- Infecciones de las VRI• Cultivo de Expectoración. • Cultivo de Lavado Bronco Alveolar.• Cepillado Bronquial (CB).

A).- Exudado faringeo• Este estudio bacteriológico esta encaminado como

una herramienta para el diagnostico confirmatorio de la faringo amigdalitis de origen piógena,

• La confirmación de patologías “complejas”, tales como la difteria, la angina de Vincent, la faringitis clamidiana y micoplásmica, así como las infecciones virales, no pueden ser evidenciadas por este procedimiento.

• El clínico debe de formular el cuadro diagnóstico complementario cuando esto sea necesario.

• Los microbiólogos deben orientar a los médicos para realizar un diagnóstico adecuado entre "investigación de estreptococos" y cultivos de rutina.

• La confusión surge cuando los médicos ordenan cultivos de rutina de garganta para faringitis agudas y el laboratorio reporta la presencia de Staphylococcus aureus, Enterobacterias y BGN no fermentadores, Haemophilus influenzae y otros microorganismos que no causan faringoamigdalitis primaria.

• Bajo visión directa, con la ayuda de un depresor lingual, se tocará con un hisopo de dacrón en todas las partes con exudado, membranas o inflamación.

• Se deben frotar las criptas tonsilares y la faringe posterior.

• No tocar nunca la mucosa oral, lengua o úvula.

• Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemolítico del grupo A (S. Pyogenes), la posible presencia de los Streptococcus beta-hem. De los grupos C y G.

• Se le solicita al paciente que abra bien la boca y que emita un "ah".

• La lengua se abate suavemente con una espátula y se guía un hisopo hacia la faringe posterior.

• La mucosa detrás de la úvula y entre los pilares amigdalinos es recolectada con un movimiento suave de barrido de atrás hacia delante.

EXUDADO FARINGEOEXUDADO FARINGEO

BAC (S) 0.04UTSX (R) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Grupo “A”PYR (+)

BAC (S) 0.04UTSX (R) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Grupo “A”PYR (+)

BAC (S) 0.04UTSX (S) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Posible Grupo “C”PYR (-)

BAC (S) 0.04UTSX (S) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Posible Grupo “C”PYR (-)

BAC (R) 0.04UTSX (S) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Posible Grupo “G”PYR (-)

BAC (R) 0.04UTSX (S) 1.25/23.75 ugCAMP (-)Posible Grupo “G”PYR (-)

GS de carnero al 5%Sembrar por estría cruzada

Picar el medio 3-5 ocasionesIncubar en CO2 al 3%

24 – 48 hrs 37ºC

GS de carnero al 5%Sembrar por estría cruzada

Picar el medio 3-5 ocasionesIncubar en CO2 al 3%

24 – 48 hrs 37ºC

CGPCadenas

Col βhem.Cat(-)

CGPCadenas

Col βhem.Cat(-)

Seroagrupar preferentemente

Realizar susceptibilidad (CLSI)

B).- Cultivo nasal

• Es la muestra indicada para la investigación de Bordetella pertussis y de otros patógenos oportunistas (S. pneumoniae, H. influenzae, Neisseria meningitidis).

• En pacientes inmuno comprometidos se evaluara la colonización de:

K. pneumoniae subesp. Rhinoscleromatis

K. pneumoniae subesp. ozaenae

Toma del producto• Las muestras nasofaríngeas se obtienen usando

iluminación por encima del hombro. • Con el pulgar de la mano, se eleva delicadamente la

punta de la nariz, se humedece la punta de un hisopo nasofaríngeo delgado de alambre flexible con agua o solución salina estéril y se lo inserta con suavidad en uno de los orificios nasales.

• El hisopo se guía hacia atrás y hacia arriba a lo largo del septo hasta encontrar resistencia, que indica que se ha llegado a la faringe posterior, se retira con delicadeza y se deposita en el medio de transporte Stuart.

Secreción nasalToma de ambas narinas

GS al 5%al 5%

CO2 al 5%24-48hrs 37ºC

GChal 5%


Mac Conkey24-48 Hrs 37ºC

Agar Dextrosa Sabouraud(Opcional)

CGP racimosCol. β óγhem

Cat(+)Furazolidona(S)

Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Staphylococcus aureusAB. CLSI

Solo en manejadoresDe alimentos

CGPCat(-)

DCGPCol.αhemTaxo P(S) 16mmOPT 5ugSol. en bilis (+)

S. pneumoniaeSerotipificar

AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE

H. influenzaeSerotipificar

AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE

H. parainfluenzaeSerotipificar

AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

FENOTIPOKIA, ONPG,RM-VPCitrato,LD,OD,SIM,

URE, FD

K. RhinoscleromatisK. ozaenae BGNF

INV. Hongos más comunesEn pacientes

Inmunodeprimidos

C).- Otitis media• Se define otitis media

como la presencia de exudado en la cavidad media del oído.

• Los lactantes y niños pequeños son los más propensos a padecer otitis media,

• Los dos principales patógenos son:

• Cocos gram positivos como: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus.

• Bacilos Gram negativos como: E. coli o Pseudomonas aeruginosa,Haemophilus influenzae y anaerobios

Cultivo de secreción de oído

• El Cultivo bacteriológico de aspirado de oído medio adecuadamente recolectados, permite determinar cuáles son los microorganismos responsables de la otitis media aguda.

• La timpanocentesis para obtener líquido para cultivos, solo es útil si existe exudación.

• Puede ser necesario el cultivo simultáneo e LCR y sangre, si existen signos y síntomas sistémicos.

Exudado de oídoToma de ambas narinas

GS al 5%al 5%


GChal 5%






Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)


Solo en manejadoresDe alimentos

CGPCat(-)



AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE


AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE


AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)


URE, FD

K. RhinoscleromatisK. ozaenae

BGNF

INV. Hongos más comunesEn pacientes

Inmunodeprimidos

D).-Cultivo de expectoración

• Las infecciones del tracto respiratorio inferior son de las más frecuentes dentro del conjunto de las infecciones,tanto entre las adquiridas en el ambiente comunitario como en el medio nosocomial.

• La bronquitis crónica se define, como un proceso caracterizado por un descenso de los flujos espiratorios que no cambian de manera significativa tras varios meses de seguimiento.

• El diagnóstico viene sugerido por el cuadro clínico, por lo que el cultivo no es la herramienta de Dx de mayor utilidad para esta patología.

• Un gran número de los pacientes son fumadores,o están expuestos de forma prolongada a substancias nocivas para la mucosa bronquial, y que refiere tos y expectoración habitual; según la definición clásica, durante un mínimo de 3 meses y hasta por dos años consecutivos.

Esputo inducido

• No es el tipo de muestra más representativa de las inefcciones VRI, por su mezcla con secreciones procedentes de todo el arbol traqueo-bronquial y con la flora saprófita de la orofaringe.

• El resultado dependerá en gran medida de su correcta obtención, control de calidad antes de iniciar su proceso, tipo de agente que se pretenda detectar.

Obtención del producto.

• Enjuagar la boca con agua estéril o solución salina.• Obtener el esputo tras una expectoración profunda,

preferentemente matinal.• De no producirse expectoración espontánea, puede

inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiológico estéril (15 ml durante 10 minutos.

• Recolectar en un frasco de boca ancha esteril por lo menos 2 ml de la secreción.

• Procesar lo antes posible. • Muestra de calidad =>25 PMN CE <=10 en promedio de

30 campos a 10x.

Criterios para el diagnóstico de INInfecciones del tracto respiratorio.

6.1.2 Infecciones de vías respiratorias bajas. CIE-10 (J12-J18, J20, J86.9, J98.5).

6.1.2.1 Neumonía. CIE-10 (J12-J18).

Cuatro criterios hacen el diagnóstico.

Criterios 6.1.2.1.4 y 6.1.2.1.5 son suficientes para el diagnóstico de neumonía.

6.1.2.1.1 Fiebre, hipotermia o distermia.

6.1.2.1.2 Tos.

6.1.2.1.3 Esputo purulento o drenaje purulento a través de cánula endotraqueal que al examen microscópico en seco débil muestra <10 células epiteliales y > 20 leucocitos por campo.

6.1.2.1.4 Signos clínicos de infección de vías aéreas inferiores.

6.1.2.1.5 Radiografía de tórax compatible con neumonía.

6.1.2.1.6 Identificación de microorganismo patógeno en esputo, secreción endotraqueal o hemocultivo.

Muestra de Expectoración

GS al 5%al 5%


GChal 5%




Gram: Criterios de Murray-Bartlett

PMN =>25 CE <=10



Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Coag(-)Manitol (V)

Lac(V)


ECN

CGPCat(-)



AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE


AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE


AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

OX(+)OF: (+/+)


URE, FD

Enterobacterias BGNF Vibronaceae

INV. Hongos más comunes

E).- Neumonía adquirida en la comunidad (NAC).

• Constituye una causa muy importante de morbilidad y mortalidad.

• La mortalidad varia desde el 5% a más del 30%, según el agente causal y diversos factores de riesgo individuales.

• En los países industrializados, la NAC es la primera causa infecciosa de muerte y la sexta de mortalidad general.

• El número de personas que fallecen cada año en el mundo como consecuencia de esta infección se cifra en aproximadamente 5 millones.

• Neumonía nosocomial: La mayoría de los estudios consideran la neumonía nosocomial como la segunda causa de las infecciones adquiridas en el hospital.

• La neumonía nosocomial se adquiere a través de tres mecanismos: la aspiración, la inhalación de aerosoles y la diseminación hematógena a partir de otro foco de sepsis.

• La flora orofaríngea normal está formada principalmente por cocos grampositivos.

F).- Cultivo de LBA ó CB

• La colonización de la orofaringe por BGN se observa en menos del 10% de los individuos sanos, aumenta con hospitalizaciones prolongadas y alcanza el 60-75% en enfermos críticos ingresados en unidades críticas.

• La implicación de los bacilos gramnegativos (enterobacterias como Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter spp., y Pseudomonas aeruginosa) en la neumonía nosocomial es muy frecuente (20-60%).

• En el enfermo ventilado, Staphylococcus aureus se situaría en segundo lugar (10-30%), mientras que otros microorganismos más prevalentes en la comunidad, como Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae o Chlamydia pneumoniae serían menos frecuentes.

LBA ó CB

GS al 5%al 5%


GChal 5%




Gram: Criterios de Murray-Bartlett

PMN =>25 CE <=10Presencia de cel. ciliadas



Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Coag(-)Manitol (V)

Lac(V)


ECN

CGPCat(-)



AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE


AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE


AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

OX(+)OF: (+/+)


URE, FD



Muestras sistémicas

• LCR

• Sangre

• Médula ósea

• Líquidos diversos:

a) L. Pleural

b) L. Sinovial

c) L.Peritonial

4.- Líquido cefalorraquídeo (LCR)

• El líquido cefalorraquídeo (LCR) es la muestra clínica representativa cuando hay sospecha de meningitis séptica.

• Los agentes infecciosos más comunmente identificados incluyen N. meningitidis, S. pneumoniae , H. influenzae, S. agalactiae

• Otros agentes menos frecuentes son: Enterobacterias, C. neoformans, C. albicans, algunos BGNF, S. aureus entre otros.

Obtención de líquido cefalorraquídeo (LCR)

• La colección del LCR solamente debe ser tomada por personal especializado y bajo condiciones de estricta asepsia.

• Por lo general, se sacan tres tubos de LR para química, microbiología y citología.

• Si solamente hubiera disponible un tubo, este debe enviarse al laboratorio de microbiología para su inmediato análisis.

Transporte de las muestras de LCR

• Enviar inmediatamente al laboratorio de microbiología para su análisis (en un plazo no mayor de 1 hora a partir del momento de la obtención de la muestra

• No refrigerar ni exponer a calor extremo o a la luz solar.

LCRCentrifugar

el LCR 3000 RMP/15min

GS al 5%al 5%


GChal 5%


Mac Conkey24-48 Hrs 37ºC Agar Dex. Sabouraud

(Opcional)

SEDIMENTO:Tinciones

Gram Ziehl Neelsen

Tinta china



Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Coag(-)Manitol (V)

Lac(V)


Novobiocina (R)<16mm

S. saprophyticus

CGPCat(-)

DCGPCol.αhemTaxo P(S) 16mmOPT 5ugSol.en bilis (+)


AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE


AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE


AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

OX(+)OF: (+/+)


URE, FD



SobrenadanteAg capsulares: N. meningitidis, H. influenzae, S. pneumoniae, S. del gpo.B, Escherichia coli.

Novobiocina (S)16mm

S. epidermidisAB CLSI

CGPCol. βhem

Cadenas cortasTaxo A (R)

SXT(R)CAMP (+)

S. agalactiae

SeroagruparAB CLSI

DCGNCat(+) OX(+)Glu(+)Mal(+)Fru(-)

Neisseria meningitidis

AB CLSI

5.- Sangre (Hemocultivo)

• El estudio bacteriológico de la sangre debe realizarse principalmente en pacientes con neumonía, meningitis o fiebre de origen desconocido, entre otros síndromes.

DEFINICIONDEFINICION

Bacteriemia: es la presencia de Bacteriemia: es la presencia de bacterias viables en el torrente bacterias viables en el torrente sanguíneo, evidenciada por la sanguíneo, evidenciada por la obtención de cultivos en sangre, sea obtención de cultivos en sangre, sea por punción venosa o por aspiración a por punción venosa o por aspiración a través de un catéter intravascular.través de un catéter intravascular.

DEFINICION (NOM-045-SSA2–2005 )

Este diagnóstico se establece en un paciente con fiebre, hipotermia o distermia con hemocultivo positivo.

El diagnóstico de bacteriemia nosocomial (BN) puede darse aun en pacientes con menos de 48 horas de estancia hospitalaria si se les realizan procedimientos de diagnóstico invasivos o reciben terapia intravascular.

Interpretación del Hemocultivo Positivo.

Un hemocultivo positivo para Gramnegativos,

Grampositivos u hongos es suficiente para hacer el

diagnóstico.

En caso de aislamiento de un bacilo Grampositivo o

estafilococo coagulasa-negativo, puede considerarse

bacteriemia si se cuenta con dos o más de los

siguientes criterios:•Alteraciones hemodinámicas.•Trastornos respiratorios.•Leucocitosis o leucopenia no inducida por fármacos.•Alteraciones de la coagulación (incluyendo trombocitopenia).•Aislamiento del mismo microorganismo en otro sitio anatómico.

RHOVE-DGE

Los gérmenes identificados como causales de

Bacteriemia Nosocomial según la bibliografía

internacional son principalmente:

1.- Cocos gram positivos:•Estafilococo Coagulasa-NegativoEstafilococo Coagulasa-Negativo•Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus•Enterococcus spp.Enterococcus spp.

2.- Hongos levaduriformes:2.- Hongos levaduriformes:•Candida sppCandida spp

3.- Bacilos 3.- Bacilos Gramnegativos:Gramnegativos:Pseudomonas sppPseudomonas sppE. coliE. coliKlebsiella pneumoniaeKlebsiella pneumoniaeEnterobacter cloacaeEnterobacter cloacaeAcinetobacter sppAcinetobacter sppSerratia sppSerratia spp

Material necesario

• Guantes, jeringuilla, aguja, ligadura, torundas, contenedor de punzocortantes, botella de cultivo, tintura de yodo, alcohol isopropílico al 70%.

• El tamaño de la aguja dependerá del lugar de la del tamaño de la vena y la edad del paciente.

Venopución1) Seleccione el brazo y aplique el torniquete para restringir el paso de

la sangre venosa. 2) Normalmente se selecciona la vena más prominente para la punción.3) Limpie completamente la piel con alcohol al 70%; y a continuación

limpie con solución yodo povidona, frotando el área seleccionada y deje secar.

4) Introduzca en la vena la aguja con el bisel hacia arriba. Una vez que la vena se haya canalizado, extraiga la sangre jalando el émbolo de la jeringuilla de manera lenta y con continuidad.

5) Una vez que se ha obtenido la cantidad de sangre necesaria, retire el torniquete y coloque un algodón con alcohol sobre el sitio de Inserción.

6) Retire la aguja y haga que el paciente sostenga firmemente el algodón hasta que cese el sangrado.

7) Inocule el medio de cultivo con los volúmenes de sangre que recomienda el fabricante.

SangreInoculación de la botella

Incubar a 35ºC

Monitoreo de producciónó consumo de gas,hemólisis y turbidez

Durante las 6 -18hrs posterioresIncubando la botella 35ºC


Diariamente si se mantiene negativo

Descartar el frasco si después de 7 días de incubación

no se compruba positivo

Subcultivar en Agar Chocolate Incubar a 35-37ºC 24 – 48 y realizar tinción de Gram

Directo de la botellaRepetir la operación cda 3er. día

Cultivo (+) Cultivo (-)

ID. BacterianaAB CLSI

Médula óseaInoculación de la botella

Incubar a 35ºC


Durante las 6 -18hrs posterioresIncubando la botella 35ºC


Diariamente si se mantiene negativo

Descartar el frasco si después de 7 días de incubación

no se compruba positivo

Subcultivar en Agar Chocolate Incubar a 35-37ºC 24 – 48 y realizar tinción de Gram

Directo de la botellaRepetir la operación cda 3er. día

Cultivo (+) Cultivo (-)

ID. BacterianaAB CLSI

LIQUIDOSCentrifugar

3000 RMP/15min

GS al 5%al 5%


GChal 5%



(Opcional)

SEDIMENTO:Tinciones

Gram Ziehl Neelsen



Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Coag(-)Manitol (V)

Lac(V)



S. saprophyticus

CGPCat(-)

DCGPCol.αhemTaxo P(S) 16mmOPT 5ugSol.en bilis (+)


AB. CLSI

BGNPleomórficos

F(V) F(X)

F(V) (+)F(X) (+)

INDORNURE


AB CLSI

F(V) (+)F(X) (-)

INDORNURE


AB CLSI

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

OX(+)OF: (+/+)


URE, FD



Novobiocina (S)16mm


CGPCol. βhem

Cadenas cortasTaxo A (S)

SXT(R)CAMP (-)

S. pyogenes

SeroagruparAB CLSI

DCGNCat(+) OX(+)Glu(+)Mal(+)Fru(-)

Neisseria meningitidis

AB CLSI

6.- Piel y tejidos blandos

• Cultivo de secreción de herida

• Cultivo de absceso

• Cultivo para anaerobios

A).- Cultivos de secreción de Heridas, úlceras y abscesos

• Lavar cuidadosamente la superficie de la herida.• La aspiración percutánea requiere una desinfección severa,

previa similar a la realizada en la toma de hemocultivos.• Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando

preferentemente de zonas profundas.• Esta técnica también es adecuada para obtener muestras de

celulitis, úlceras, escaras o abscesos abiertos y heridas superficiales.

• Cuando la muestra sea insuficiente, instilar solución salina estéril y aspirarlo nuevamente en la jeringa.

• Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podrá efectuarse un frotis de las partes profundas de la herida con un hisopo para tinción de Gram.

Criterios para el diagnóstico de IN

6.8 Infección de piel y tejidos blandos.6.8.2 Infecciones de tejidos blandos. CIE-10 (L04, L08).

Fascitis necrosante, gangrena infecciosa, celulitis, miositis y linfadenitis.Con tres o más de los siguientes criterios:

6.8.2.1 Dolor localizado espontáneo o a la palpación.6.8.2.2 Inflamación.6.8.2.3 Calor.6.8.2.4 Rubor, palidez o zonas violáceas.6.8.2.5 Crepitación.6.8.2.6 Necrosis de tejidos.6.8.2.7 Trayectos linfangíticos.6.8.2.8 Organismo aislado del sitio afectado.6.8.2.9 Drenaje purulento.

6.8.2.10 Absceso o evidencia de infección durante la cirugía o por examen histopatológico.

Heridas, abscesosúlceras

GS al 5%al 5%


GChal 5%



(Opcional)

GRAMRespuesta inflamatoria

óZona de necrosis

proteolítica



Oxidasa (-)

Coag(+)Manitol(+)

Lac(+)

Coag(-)Manitol (V)

Lac(V)



S. saprophyticus

BGNPleomórficos

FositasCat(-) OX(+)

OF(-/ -))LD(+)OD(+)

E. corrodensSerotipificar

AB

F(V) (-)F(X) (-)

INDORNURE

H. aphrophilusSerotipificar

AB

BGN LAC (+ ó -)

Agar NutritivoOXOF

Pigmentos

OX(+ ó -)OF: (+/-)OF: (-/-)

OX(-)OF: (+/+)

OX(+)OF: (+/+)


URE, FD



Novobiocina (S)16mm


CGPCol. βhem

Cadenas cortasTaxo A (S)

SXT(R)CAMP (-)

S. pyogenes

SeroagruparAB CLSI

BGNbipolares

Cat(+) OX(+)Glu(+)

OF(+/ -))

Pasteurella sp

AB CLSI

B).- Cultivo de catéter• Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm

correspondiente a la zona de entrada del catéter.

• Hacerlo en forma de círculos comenzando par el centro.

• Repetir la misma operación, pero con el alcohol iodado o iodopovidona.

• Retirar el catéter con la máxma asepsia.

• Con pinzas y las tijeras estériles, cortar los 3 cm distales del catéter que corresponden a la porción intravascular.

• Introducir el segmento de catéter en un recipiente estéril correctamente identificado.

Criterios para el diagnóstico de IN Bacteriemias.

6.9.6 Bacteriemia relacionada a líneas y terapia intravascular.Hemocultivo positivo periférico y a través del catéter con dos o más de los siguientes criterios:

6.9.6.1 Relación temporal entre la administración de terapia intravascular y la aparición de manifestaciones clínicas.

6.9.6.2 Ausencia de foco evidente.

6.9.6.3 Identificación de contaminación de catéter o solución endovenosa.

6.9.6.4 Desaparición de signos y síntomas al retirar el catéter o la solución sospechosa.

6.9.6.5 Cultivo de punta de catéter >15 UFC/ml.

Cateter 3cmMétodo de Maki

AGAR NUTRTIVORodarlo sobre toda la

Superficie del agar

Incubar por 24 -48hrs Hrs35 – 37ºC

Distribuir con una asa bacterilogica en estria masiva

Agar Nutritivo35 - 37ºC x 24 – 48 hrs

COCOS GRAM POSITIVOSBACILOS GRAM NEGATIVOS

BGNAGAR NUTRITIVO

Caldo BHI

Incubar de 8 a 12 Hrs35 – 37ºC

<15 UFC no representativo

=>15 UFC RepresentativoIDENTIFICAR Y REALIZAR

AB CLSI

Documents

Algoritmos bacterianos