PRÁCTICA UNIDAD 3

“DETERMINACIÓN DE LOS PARÁMETROS DE RENDIMIENTO, EFICACIA Y VOLUMEN DE PRODUCCIÓN DE UNO DE LOS DISTINTOS REGÍMENES DE OPERACIÓN”

EQUIPOS DE TRABAJO

EQUIPO EQUIPO

EQUIPO EQUIPO

1

2 4

3

OBJETIVO

Determinar los parámetros de rendimiento de biomasa/sustrato y productividad de biomasa en un cultivo sumergido tipo batch de un hongo a escala laboratorio.

MATERIALES Y

REACTIVOS

Material / Reactivo Cantidad

Matraz Erlenmeyer 250 mL

6

Agitador orbital 1

Vidrio reloj 2

Papel filtro 1

Pinzas 1

Algodón y gasa 6

Probeta 200 mL 1

Caldo PDA 650 mL

Asa bacteriológica 1

Cultivo de hongo del suelo

1

RefractómetroMechero de alcohol

11

Material / Reactivo Cantidad

Vaso de precipitados 250 mL

1

Embudo de vidrio 1

Papel filtro (seco) 1

Refractómetro 1

PinzasPizeta con agua destilada

11

Día 1 (material por grupo)

Días 2-5 (material por equipo)

• El papel para filtrar la biomasa deberá estar seco y ser manipulado solo con las pinzas una vez seco.

MÉTODOS(día 1)

Las actividades para el día 1 han sido separadas para que

cada equipo trabaje una parte de ellas. Es importante la

organización para evitar retrasar el cumplimiento de la

preparación del cultivo inicial.

Los procedimientos deberán ser registrados por algún

miembro del equipo ya que deberán compartirse con los

demás equipos para la elaboración de su correspondiente

reporte.

Equipo 3 Preparación del caldo de cultivo

• Preparar 650 mL de caldo PDA de acuerdo a las indicaciones del fabricante.

• Tomar muestra del medio de cultivo para medición de grados Brix usando el refractómetro.

• Separar en 6 matraces Erlen Meyer, con 100 mL cada uno.

Equipo 4 Preparación del papel filtro y tapones de algodón

• Poner a secar papel filtro en la estufa a 80°C. Monitorear peso periódicamente para asegurarse de llegar a peso constante.

• Preparar 6 tapones de algodón y gasa para los matraces Erlen Meyer.

Equipo 2 ESTERILIZACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO.

• Colocarle a cada matraz un tapón de algodón y gasa.

• Realizar la esterilización del medio de cultivo.

Equipo 1 Inoculación del caldo de cultivo

• A cada matraz Erlenmeyer con medio estéril, agregar el inóculo, teniendo cuidado de no permitir la contaminación externa.

• La inoculación se realiza tomando una caja Petri de cultivo de hongo, y tomando una asada de biomasa para colocarla en el caldo.

• Ya inoculados, colocarlos en el agitador orbital, con el tapón de algodón firme. Ajustar la agitación.

• Es importante monitorear periódicamente la temperatura del medio ambiente ya que esto puede influir en la velocidad de crecimiento.

MÉTODOS(días 2 - 5)

Determinación de biomasa y sustrato

Se medirá la cantidad de biomasa mediante la técnica de peso seco:

• Trasladar el papel filtro seco a un desecador. Pesar cada uno de los papeles filtro ya secos.

• Manipular el papel filtro solo con las o bien, usar guantes.

• Seleccionar uno de los 6 matraces para el muestreo y filtrar la totalidad del contenido.

• Medir °Bx al medio filtrado.

• Puede usarse agua destilada para lavar la biomasa en el papel filtro.

• Colocar el papel húmedo con la biomasa de nuevo en la estufa a 80°C.

• Cuando el papel filtro alcance peso constante. Calcular la cantidad de biomasa por diferencia de peso.

CONSIDERACIONES

• El papel filtro nuevo deberá ser puesto a secar por lo menos 24 horas antes de utilizarlo. En todo caso registrar su peso inicial (antes de secar) y su peso tras el secado. Idealmente realizar mediciones intermedias que pudieran servir para determinar si realmente llegó a peso constante.

• La temperatura del ambiente donde se lleva a cabo el cultivo deberá ser monitoreada y registrada a diferentes intervalos de tiempo, es información importante para el reporte.

• Todos los resultados obtenidos deberán ser compartidos con el resto de los equipos, por lo que cualquier falla ocurrida durante la metodología deberá ser registrada y compartida como parte de la información para el reporte.

Valor Reactivo

10 Entrega puntual (hora y fecha solicitada)

10 Cero errores ortográficos

10 Orden y limpieza del documento escrito

40 Define el régimen de operación utilizado en el proceso

Incluye cálculos de los parámetros de rendimiento y productividad.

30 Define volumen de producción

Determina los parámetros cinéticos de biomasa, sustrato y producto.

Información de la lista de cotejo del reporte

• El formato del reporte será el acostumbrado: Portada, Introducción y objetivo, materiales y métodos, resultados (con cálculos), discusión, conclusiones, referencias.

• Puntualidad en la entrega: La entrega del reporte será para una semana después de finalizar la práctica en la hora designada para la clase (incluso si es hora no presencial). Cualquier reporte entregado fuera del día designado será tomado como recuperación.

• Cero errores ortográficos: Cuiden el uso de los verbos en pasado o futuro, casi nunca les ponen acentos y Word no los colocará por ustedes. Favor de utilizar subíndices y superíndices.

• Orden y limpieza en el escrito: Documento entendible en su secuencia de información, es importante una redacción clara.. Usen sinónimos para evitar texto repetitivo. Redáctenlo en pasado puesto que son actividades que ya realizaron.

• Definir régimen de operación: No lo incluyan como subtema o encabezado de ningún tipo, simplemente redacten esta información en un lugar conveniente de su reporte, puede ser en discusión o en conclusiones, por ejemplo, dando los argumentos que sustenten el régimen identificado.

• Cálculos: incluir los datos obtenidos durante la metodología en la sección de resultados y mostrar las ecuaciones empleadas para los cálculos y su resolución. No solo incluyan secuencias de números, traten de dejar claro qué datos están usando para ello poniendo algunas líneas de texto.

• Volumen de producción y parámetros: volumen de producción sería una forma de evaluar la productividad, qué tanta biomasa se obtiene por litro de caldo de cultivo bajo las condiciones probadas. Los parámetros, en este caso será únicamente el rendimiento biomasa/sustrato.

• Complementos: Además de lo incluido en la lista de cotejo hay ciertos aspectos que deberían incluir para darle mejor presentación a sus reportes: Referencias: incluir la fuente consultada en la información que tomen de internet o libros bajo el formato (autor, año) al final del párrafo utilizado. Tablas y figuras: Todas las tablas deben llevar su encabezado (parte superior) que las identifique y ser mencionadas en el texto; las figuras (fotos y gráficas) llevan pie de figura (parte inferior). Los datos de ésta práctica se prestan para la construcción de gráficas, aprovechen esto para darle mejor presentación y entendimiento a sus resultados.

• Referencias: Las fuentes consultadas deben ser reportadas en un formato aceptable, por ejemplo:

http://www.ehowenespanol.com/citar-fuente-internet-como_14737/

Para fuentes electrónicas.

Y el formato:

Autor (es). Año. Título (subrayado). Edición. Editorial. Página (s) consultada (s).

Para libros.

• Si su reporte no cumple con aspectos de formato solicitados aquí, puede ser regresado para que lo corrijan. Perdiendo 5% de su calificación en cada ocasión.