INFORME DE PRCTICAS

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PRACTICA DE LABORATORIO NRO. 2 DETERMINACIN DE GLUCOSA

1. INTRODUCCINLa glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas.La glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa al combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el pncreas (islotes pancreticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos. Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagn que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugarar una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin la provocan. El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones muy bajas o muy altas aparecen sntomas de confusin mental e inconsciencia.El mantenimiento de la glucemia, o concentracin plasmtica de glucosa, en los organismos superiores el fundamental para el funcionamiento de todos los rganos, al ser la glucosa un metabolito energtico principal.La coordinacin de los procesos metablicos implicados en este cometido se lleva a cabo por la relacin insulina/glucagn. La ingestin de glucosa o sustancias que la produzcan (almidn, fructosa, galactosa, protenas, pero no grasas) va seguida, en las personas sanas, por un aumento de la glucosa en sangre. Este aumento origina la puesta en marcha del mecanismo regulador: aumento de la utilizacin de glucosa (por gluclisis, entre otras), aceleracin de la glucogenognesis y disminucin de la glucogenlisis; todo ello ocurre principalmente mediante la secrecin de insulina, una hormona pancretica de tipo polipeptdico. En el caso de que la produccin de insulina est disminuida, la glucosa no puede ser utilizada por las clulas, lo cual ocasiona niveles elevados de glucosa en sangre (hiperglucemia); as ocurre en las personas que sufren diabetes del tipo denominado "dependiente de insulina" o "tipo 1".El diagnstico de la diabetes dependiente de insulina es sencillo y se basa en antecedentes, sntomas clnicos y comprobacin de una hiperglucemia significativa. Las determinaciones de glucemia basal permiten el diagnstico de la diabetes, pero constituyen valores puntuales y aislados en el tiempo que no reflejan los niveles medios de glucemia ni la duracin de la misma. Por lo tanto, es necesario disponer de pruebas que indiquen el grado del control metablico de la enfermedad a corto y medio plazo. Estas pruebas estn basadas en el fenmeno de unin de la glucosa a diversas protenas. Esta glucosilacin tiene lugar por una reaccin no enzimtica y afecta tanto a protenas de vida media corta (albmina, hemoglobina, etc.) como de vida media larga (colgeno, mielina, etc.). La intensidad de la glucosilacin depende de varios factores, siendo los ms importantes los niveles medios de glucemia, la duracin de la hiperglucemia, la vida media de las protenas y la concentracin de stas. Como consecuencia, la medida de la glucosilacin proteica constituye un buen marcador bioqumico del grado de compensacin del enfermo diabtico.2. OBJETIVO: Capacitar al alumno para que conozca, maneje y determine el valor de la glucosa en sangre, utilizando el anlisis objetivo para la deduccin de un resultado real.

3. PARTE TERICA:3.1. La glucosa Es un glcido o carbohidrato, ms precisamente un monosacrido, la estructura ms sencilla dentro de los azcares simples, presente en forma libre en las frutas y la miel. Entre los carbohidratos de absorcin rpida,la glucosa es la que se absorbe ms rpidamente.La glucosa es una fuente importante de energa para la mayora de las clulas del cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas, los cereales, el pan, la pasta y el arroz se transforman rpidamente en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azcar en la sangre.Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagn ayudan a controlar los niveles de azcar en la sangre. Es un examen que mide la cantidad de un azcar llamado glucosa en una muestra de sangre.

3.2. Caractersticas

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgnico ms abundante de la naturaleza. Es la fuente primaria de sntesis de energa de las clulas, mediante su oxidacin catablica, y es el componente principal de polmeros de importancia estructural como la celulosa y de polmeros de almacenamiento energtico como el almidn y el glucgeno.A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclacin hacia su forma hemiacetlica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-glucopiranosa) que a su vez presentan anmeros alfa y beta. Estos anmeros no presentan diferencias de composicin estructural, pero si diferentes caractersticas fsicas y qumicas.La glucosa es uno de los tres monosacridos dietticos, junto con fructosa y galactosa, que se absorben directamente al torrente sanguneo durante la digestin. Las clulas lo utilizan como fuente primaria de energa y es un intermediario metablico. La glucosa es uno de los principales productos de la fotosntesis y combustible para la respiracin celular.Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con fructosa), que puede extraerse y concentrarse para preparar un azcar alternativo. Sin embargo, a escala industrial tanto el jarabe de glucosa (disolucin de glucosa) como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de la hidrlisis enzimtica de almidn de cereales (generalmente trigo o maz).3.3. Biosntesis Los organismos fotoauttrofos, como las plantas, sintetizan la glucosa en la fotosntesis a partir de compuestos inorgnicos como agua y dixido de carbono, segn la reaccin:

Los seres hetertrofos, como los animales, son incapaces de realizar este proceso y toman la glucosa de otros seres vivos o la sintetizan a partir de otros compuestos orgnicos. Puede obtenerse glucosa a partir de otros azcares, como fructosa o galactosa. Otra posibilidad es la sntesis de glucosa a partir de molculas no glucdicas, proceso conocido como gluconeognesis. Hay diversas molculas precursoras, como el lactato, el oxalacetato y el glicerol. Tambin existen ciertas bacterias anaerobias que utilizan la glucosa para generar dixido de carbono y metano segn esta reaccin:

3.4. Forma en que se realiza el examen: Se necesita una muestra de sangre. Esto se realizar antes del procedimiento de la glucosa a travs de la venopuncin o flebotoma. 3.5. Preparacin para el examen: Despus de nohaber comida nada (en ayunas) durante 7-8 horas.

3.6. Lo que se siente durante el examen: Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.

3.7. Razones por las que se realiza el examen: El mdico puede solicitar este examen si uno tiene signos de diabetes. Sin embargo, otros exmenes (prueba de tolerancia a la glucosa y examen de glucemia en ayunas) son mejores para diagnosticar la diabetes. El examen de glucemia tambin se utiliza para monitorear a pacientes que padezcan diabetes. Tambin se puede hacer si usted presenta: Un cambio en el comportamiento Episodios de desmayo Convulsiones por primera vezPor qu se hace esta prueba? Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la diabetes mellitus. Recomendaciones para el anlisis de glucosa? La forma ms fcil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azcar en la sangre (glucosa) antes de que el paciente coma o beba algo por la maana. En la mayora de los casos, el paciente deber ayunar durante la noche anterior, no comer ni beber nada ms que agua despus de la cena y por la maana antes de la extraccin de sangre.

4. PARTE PRCTICA

4.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMACul es el mtodo, tcnica ms adecuado para determinar la glucosa en sangre y por qu no se puede trabajar con sangre total; (mtodo trinder) punto final? 4.3. PLANTEAMIENTO DE LA HIPTESIS Todos los mtodos y tcnicas son vlidos por lo tanto cada prueba se realiza con su respectivo mtodo. se determina sea con suero, plasma y sangre total.

4.3.1. Mtodos: Enzimtico: 10 ul + 1 ml de reactivo (glucosa-biosistem), se deja en bao mara 5 minutos a 37C y se lee en espectrofotmetro a 500 nm contra blanco de reactivo. Glucometria: se toma una muestra de sangre capilar y se lee con un glucmetro Glicemia preprandia: prueba donde se toma una muestra de sangre perifrica con un ayuno mnimo de 8 horas Glicemia Postprandial: prueba donde se toma muestra de sangre perifrica en cualquier momento del da Curva de tolerancia oral a la glucosa: se da una carga de glucosa al paciente y se toma a la hora, dos horas, 3 horas para ver la respuesta del organismo a esa carga. Test O`sullivan: a una mujer entre la semana 24 y 28 de embarazo se le dan 50 gr de glucosa y se toma la prueba 2 horas despus. Hemoglobina Glicosilada: sirve para ver el nivel de glicemia que manejo un paciente en los ltimos 3 meses

4.4. PROCEDIMIENTOS DE EXPLORACIN

Organizados en grupos de trabajo dispongan en la mesa de trabajo los siguientes materiales y reactivosMATERIALES Y EQUIPOSREACTIVOS

Micropipetas de 10ul y 1.0ml 6 tips descartables para micropipetas Cronometro 2 tubos vacutainer 2 agujas vacutainer Capuchn Gradillas para tubo de ensayo Ligadura Algodn Esparadrapo Centrifuga 3 tubos de ensayo de 6 ml Cubetas para espectrofotmetro Bao mara a 37C Espectrofotmetro Reactivo glucosa enzimtica Alcohol.

MTODO TRINDER PUNTO FINAL

4.4.1. PRINCIPIO:La glucosa oxidasa (GOD) oxida a la glucosa en cido glucnico y forma el perxido hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) el peroxido hidrgeno reacciona con el fenol y 4-aminofenazona y produce un complejo coloreado, cuya intensidad de color es directamente proporcional a la concentracin de glucosa en la muestra.4.4.2. MUESTRA: (Suero/Plasma) Evitar muestras hemolizadas. Separar tan pronto sea posible las clulas de la sangre puesto que la gliclisis consume la glucosa (aproximadamente 5% por hora) y proporciona falsamente valores disminuidos. La glucosa en suero es estable hasta 3 das de 2-8 C.

4.4.3. ESTABILIDAD:

Los reactivos estn listos para su uso. Almacenar de 2- 8C y protegerlo de la luz los reactivos son estables hasta la fecha de expiracin indicada en el rtulo. No congelar. Una vez abiertos los reactivos son estables por 2 meses de 2- 8C si se evita la contaminacin. Mantener los frascos cerrados cuando no estn en uso. No usar los reactivos en caso de turbidez.

4.4.4. PROCEDIMIENTO: calibracin y absorbancia del espectrmetro

Mtodo:. punto final en Incremento Longitud de onda:.510 nm (500-520 ) Cubeta:.1 cm de va ptica Temperatura:37C Tiempo de reaccin:5 - 10 minutos Lectura:...Contra reactivo blanco Reactivo/Muestra:....1/100

Toma de muestra travs de la venopuncin o flebotoma se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La estudiante encargada de tomar la muestra utilizar guantes, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin). le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre ya parezcan ms visibles y accesibles. limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor. Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco). al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas Colocar en bao mara de 5-10 min para que se coagule la muestra Centrifugacin de la muestra 3000 rpm 3-5 min Rotular los 3 tubos de ensayo R. Blanco, Estndar y muestra.

4.4.5. PREPARACION DE SOLUCIONES:

Mezclar e incubar de 5-10 minutos a 37C en bao mara. luego leer la absorbancia del estndar (abstd) y la muestra (absm) contra el blanco de reactivo en el espectrofotmetro. Los volmenes de reaccin pueden ser variados proporcionalmente sin ninguna modificacin en el clculo.

4.4.6. RESULTADOS DE CLCULOS:CALCULAR LA CONCENTRACIN DE GLUCOSA EN LA MUESTRA USANDO LA SIGUIENTE FRMULA:

4.4.7. VALORES:VALORES DE REFERENCIALES:

PREMATUROS: 30mg/dl(1.6 mmol/L) RECIN NACIDOS: 40-60mg/dl(2.2 3.3 mmol/L) NIOS: 60 - 100 mg/dl (3.8 6.10 mmol/L) ADULTOS: 70 - 110 mg/dl (3.8 6.10 mmol/L)VALORES NORMALES:Si le hicieron unexamen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 miligramos se considera normal.Si le hicieron un examen de glucemia aleatorio, los resultados normales dependen de cundo fue la ltima vez que comi. La mayora de las veces, los niveles de glucemia estarnpor debajo de 125 mg/dL.Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen.Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de estas pruebas. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o puedenevaluar distintas muestras.4.4.8. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALESSI LE HICIERON UN EXAMEN DE GLUCEMIA EN AYUNAS: Unnivelde 100a 125 mg/dL significa que usted tiene una alteracin de la glucosa en ayunas, un tipo de prediabetes. Esto incrementa elriesgo para la diabetes tipo 2. Un nivel de 126 mg/dL o mayor casi siempre significa que usted tiene diabetes. Los niveles aleatorios de glucosa en la sangre superiores a los normalespueden ser un signo de diabetes. En alguien que tenga diabetes, puede significar que la enfermedad no est bien controlada. El mdico probablemente ordenar una glucemia en ayunas o un examen de tolerancia a la glucosa, dependiendo del resultado del examen aleatorio.OTROS PROBLEMAS MDICOS TAMBIN PUEDEN PROVOCAR NIVELES DE GLUCOSA EN LA SANGRE SUPERIORES A LO NORMAL, COMO: Hipertiroidismo Cncer pancretico Pancreatitis Tumores raros, entre ellos feocromocitoma, acromegalia, sndrome de Cushing o glucagonoma LOS NIVELES DE GLUCOSA EN LA SANGRE INFERIORES A LO NORMAL (HIPOGLUCEMIA) PUEDEN DEBERSE A: Hipopituitarismo (un trastorno de la hipfisis) Hipotiroidismo Insulinoma (muy poco comn) Muy poco alimento Demasiada insulina u otros medicamentos para la diabetes 4.4.9. RIESGOS:Las venas y las arterias varan de tamao de un paciente otro y de un lado del cuerpo a otro, razn por la cual obtener una muestra de sangre de algunas personas puede resultar ms difcil que de otras.OTROS RIESGOS ASOCIADOS CON LA EXTRACCIN DE SANGRE SON LEVES, PERO PUEDEN SER: Sangrado excesivo Desmayo o sensacin de mareo Hematoma (acumulacin de sangre debajo de la piel) Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)

4.5.0. CONSIDERACIONES:Muchas formas de estrs intenso (por ejemplo, traumatismo, accidente cerebrovascular, ataque cardaco y ciruga) pueden aumentar temporalmente los niveles de glucosa en la sangre.ENTRE LOS FRMACOS QUE PUEDEN AUMENTAR LAS MEDICIONES DE LA GLUCOSA ESTN LOS SIGUIENTES: Ciertos medicamentos para tratar la esquizofrenia y la psicosis Betabloqueadores (como propanolol) Corticosteroides (como prednisona) Estrgenos Glucagn Isoniazida Litio Anticonceptivos orales (pldoras anticonceptivas) Fenotiazinas Fenitona Salicilatos (ver sobredosis de cido acetilsaliclico (aspirin)) Diurticos tiazdicos (como hidroclorotiazida) Triamtereno Antidepresivos tricclicos ENTRE LOS FRMACOS QUE PUEDEN DISMINUIR LAS MEDICIONES DE GLUCOSA ESTN LOS SIGUIENTES: Paracetamol Alcohol Esteroides anablicos Clofibrato Disopiramida Gemfibrozilo Inhibidores de la monoaminoxidasa (IMAO) Pentamidina5. REFLEXIN: Qu es la prueba de glucosa en la sangre? Esta prueba mide la cantidad de glucosa (azcar) que hay en la sangre. El azcar es una fuente importante de energa, especialmente para el cerebro. El sistema endcrino (glandular) controla con exactitud la cantidad de glucosa en la sangre. Este sistema hace que el azcar se almacene o se utilice para energa, segn las necesidades de su cuerpo.Usted puede obtener la glucosa directamente de algunos alimentos, como el azcar de mesa. El cuerpo tambin puede producir glucosa cuando se digieren otros alimentos, como el pan y los cereales.Por qu se hace esta prueba? Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la diabetes mellitus.

Cmo preparar a los nios para esta prueba?La forma ms fcil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azcar en la sangre (glucosa) antes de que el nio coma o beba algo por la maana. En la mayora de los casos, su nio deber ayunar durante la noche anterior, no comer ni beber nada ms que agua despus de la cena y por la maana antes de la extraccin de sangre.Es posible que el nio deba evitar tomar ciertos medicamentos antes de la prueba, ya que podran afectar los resultados. Asegrese de que su profesional mdico est al tanto de cualquier medicamento, hierbas medicinales o suplemento que tome su hijo. Su hijo no debe dejar de tomar ninguno de sus medicamentos habituales sin consultar antes con su profesional mdico.Si tiene preguntas, hable con el profesional mdico de su hijo.

Cmo se hace esta prueba? El profesional mdico de su hijo le pinchar el dedo con una lanceta y llenar un pequeo tubo con la sangre. A veces, se extrae sangre del brazo de su hijo con una aguja. Esta prueba solamente tardar unos pocos minutos.

Cmo conocer el resultado de la prueba? Pregunte a su profesional mdico cmo le entregarn los resultados de la prueba de su hijo.

Qu significa el resultado de la prueba? El intervalo normal de glucosa en la sangre en ayunas para nios en la mayora de los laboratorios es de 70 a 99 miligramos por decilitro (3.9 a 5.5 milimoles por litro). El intervalo de valores normales puede variar ligeramente de laboratorio a laboratorio. Los intervalos de valores normales generalmente se muestran junto a los resultados en el informe del laboratorio. Un nivel de azcar en la sangre en ayunas de 100 a 125 mg/dl (5.5 a 6.9 mmol/l) se denomina alteracin de la glucosa en ayunas o prediabetes. Un nivel de 126 mg/dl (7.0 mmol/l) o ms puede indicar que su hijo tiene diabetes.El nivel de glucosa en la sangre puede ser superior a lo normal (se llama hiperglucemia) si: Su hijo tiene prediabetes, una afeccin que puede convertirse en diabetes. Su hijo tiene diabetes. A su hijo se le diagnostic anteriormente diabetes y: No ha estado tomando insulina o medicamentos para controlar la diabetes, o los medicamentos para la diabetes no estn controlando la afeccin correctamente Su hijo no ha estado siguiendo una dieta para diabticos. Su hijo tiene enfermedad del hgado o de los riones. El pncreas de su hijo est inflamado. El cuerpo de su hijo se ve gravemente afectado por una lesin o infeccin importante. El nivel de glucosa en la sangre de su hijo puede ser inferior a lo normal (se llama hipoglucemia) si: Su hijo es diabtico y: La dosis de insulina u otro medicamento utilizado para controlar la diabetes es muy alta Su hijo tom medicamentos para la diabetes y luego no comi. La glndula tiroides, pituitaria o adrenal no est funcionando correctamente. Su hijo tiene enfermedad del hgado. Su hijo tiene problemas para absorber los alimentos. Su hijo no recibe los nutrientes necesarios de su dieta.

6. APLICACIN:1. Averiguar cuantos tcnicas y mtodos existe para determinar la glucosa2. Qu otras pruebas complementarias sern necesarias para complementar la prueba de tolerancia a la glucosa? 3. Cmo es la glucosa a falta de insulina?

7. BIBLIOGRAFA: -http://colombiamedica.univalle.edu.co/Vol38No1/html/v38n1a10.pdf-http://www.netdoctor.es/XML/verArticuloMenu.jsp?XML=000437-http://www.ferato.com/wiki/index.php/Glucosa-http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/glicemia.htm-http://external.doyma.es/pdf/277/277v27n106a13105169pdf001.pdf-http://www.uned.es/pea-nutricion-y-dietetica-I/guia/diabetes/prodinsu.htm-http://jama.ama-assn.org/cgi/data/297/2/230/DC1/1

ENFERMERA 2014 - II