PEMERIKSAAN SITOLOGI Dr. Ni Putu Ekawati, SpPA

SITOLOGIBerasal dari kata :- Sitos = Sel- Logos = Ilmu pengetahuan

Adalah suatu ilmu yang mempelajari sel-sel tubuh manusia baik terlepas sendiri atau diambil dengan cara tertentu.

SEJARAHNYADipelopori oleh George N. Papaniculoaupada tahun 1928.Bapak sitologi Di Indonesia baru mulai berkembang tahun 1970-anSampai saat ini dipakai untuk pemeriksaan massal/ screening test

KEGUNAAN DIAGNOSTIKSKRINING TERAPEUTIK

PROSEDUR MANUAL

PERSIAPAN PASIENPENGUMPULAN/PENGAMBILAN SPESIMENMELABEL SPESIMENPRESERVASI SPESIMENTRANSPORTASI

PROSEDUR MANUAL LABORATORIUM

PROSEDUR MANUAL HARUS MELIPUTI : 1. PERMINTAAN PENGAMBILAN SAMPEL DAN PROSESING 2. KRITERIA UNTUK PENOLAKAN SPESIMEN 3. PROSEDUR PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK 4. LANGKAH DEMI LANGKAH DESKRIPSI PENJELASAN PROSEDUR

TAHAPAN KERJA DALAM LABORATORIUM SITOLOGIPENGUMPULAN SPESIMEN DAN TRANSPORTASIPERSIAPAN SLIDEPEMERIKSAAN SLIDELAPORAN HASILPENYIMPANAN HASIL

FORMULIR PERMINTAAN HARUS MENCAKUP :NAMA PASIENUMUR PASIEN JENIS KELAMINNAMA DAN ALAMAT YANG MEMINTA DILAKUKAN PEMERIKSAANTANGGAL PENGAMBILAN SAMPELPEMERIKSAAN YANG AKAN DILAKUKANBAHAN SPESIMENINFORMASI TAMBAHAN LAINNYA YANG BERHUBUNGAN DAN DIPERLUKAN UNTUK PEMERIKSAAN KHUSUS

METODE PENGUMPULAN SPESIMEN

SPECIMEN COLLECTION:Exfoliated cells Sel terlepas spontan dari jaringan sputum, effusions, urine, dan cairan tubuh lainnyaBrushing/ abrasif Sel sengaja dilepaskan dari jaringan dengan teknik sikatan/abrasi pap smear, bronchial brushingBiopsi aspirasi Sel dilepaskan dengan teknik aspirasi (hisapan) (FNAB=fine needle aspiration biopsy)Imprint (Dapat dilakukan intra operatif)Scrapping

Diagnosis sitologi yang akurat tergantung dari Metode pengumpulan spesimen (specimen collection)Preservasi spesimenFiksasi dan preparasi untuk pemeriksaan mikroskopikStaining dan mounting

PRESERVASI SPESIMEN

Pre-fix : pengumpulan spesimen pada suatu medium yang akan menjaga morfologi sel seperti aslinya sampai spesimen tersebut dibuat slide

Fresh material:Spesimen/material yang dikirimkan belum ditambahkan cairan preservatifLaboratorium dekat dan spesimen bisa segera diproses

FRESH MATERIAL

PREFIXATION OF MATERIALMempertahankan morfologi sel dalam beberapa hari-mingguKekurangan: sel mengeras, kondensasi kromatin (presipitasi protein)Yang umum digunakan alkohol 50% dengan perbandingan 1:1Untuk spesimen yang tinggi protein tidak dianjurkan menggunakan alkohol dengan konsentrasi lebih dari 50%

PERBANDINGANSel terlihat lebih kecilTelur rebusMenggunakan larutan preservatifStaining:PapanicolaouEvaluasi inti sel lebih baik>> USPAP SMEARSel terlihat lebih lebarTelur gorengPengeringan di udara terbuka, bisa dengan hair dryerStaining:Romanovsky stainingEvaluasi sitoplasma lebih baik>> SkandinaviaFNAB, blood smearWET Pre-FIXDRY Pre-FIX

PREPARASI DAN FIKSASI

PREPARASIMembuat smear langsung pada glass slidePap smearFNABPick and smear technique untuk sputum

Membuat smear dari sedimen setelah di centrifuge

Cytocentrifuge preparation

Automated cytology system

PREPARASI DARI SEDIMENCentrifuge: Kapasitas tabung 10-50-ml, horizontal head. Sel sedimen terbaik didapatkan pada 600 gravity dalam waktu 10 mnt.

Skala panjang radius putaran Skala kekuatan sentrifus relatif/graviti dan kecepatan sentrifus dlm rpm (revolutions per menit

ETHANOL FIXATION95% ethyl alcohol Sampel dibuat smear/apusan, direndam dalam alkohol 95% selama minimum 15

Preparation of smears from body fluid

STAINING

PAPANICOLAOU STAINPolychrome staining reactionTerdiri dari water based nuclear stain dan 2 alcohol based counter stains

PROSEDUR 95 % ethanol (10 dips)95 % ethanol (10 dips)Distilled H20 (20 dips)Hematoxylin (3 min)Distilled H20 (20 dips)95 % ethanol (20 dips)95 % ethanol (20 dips)Orange G (3 min)

PROSEDUR95 % ethanol (20 dips) 95 % ethanol (20 dips)EA-50 (3 min)95 % ethanol (20 dips)95 % ethanol (20 dips)95 % ethanol (20 dips)95 % ethanol (20 dips)100 % ethanol (20 dips)100 % ethanol (20 dips)

PROSEDURXylene (20 dips)Xylene (20 dips)Xylene (20 dips)Xylene (20 dips)Mounting

DIFF-QUICK STAINPewarnaan modifikasi WRIGHT-GIEMSA Umumnya untuk blood smear Pewarnaan yang baik untuk bahan sitologi air-dried>>> FNAC/FNAB

Larutan yang digunakan:Fiksasi Diff Quick (Metanol)Larutan I Diff Quick (Eosin)Larutan II Diff Quick (Methylene blue)

Prosedur pewarnaan:Diff Quick fixative 5 dipsDiff Quick solution I 10 dipsDiff Quick solution II 10 dipsDistlilled water 10 dipsAir dry stained slideXylene 5 dipsmounting

RESUME

CATATANSebaiknya semua larutan yang dipakai disaring setiap hariPreparat sitologi yang memuaskan untuk dievaluasi tidak hanya tergantung dari pengecatannya, tapi juga tergantung pada teknik pengumpulan sampel, dan fiksasinya.