Upload
dani11
View
264
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/23/2019 nangka contoh
1/49
EFEKTIVITAS EKSTRAK
DAUN NANGKA (Artocarpus heterophyllus)
UNTUK PENGOBATAN
INFEKSI BAKTERIAeromonas hydrophila
PADA BENIH IKAN MAS (Cyprinus carpio)
USULAN PENELITIAN
ENOK MARLINA
NPM 230110090036
UNIVERSITAS PADJADJARAN
FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
PROGRAM STUDI PERIKANAN
JATINANGOR
2013
7/23/2019 nangka contoh
2/49
EFEKTIVITAS EKSTRAK
DAUN NANGKA (Artocarpus heterophyllus)
UNTUK PENGOBATAN
INFEKSI BAKTERIAeromonas hydrophila
PADA BENIH IKAN MAS (Cyprinus carpio)
Diajukan untuk Melaksanakan Penelitian
ENOK MARLINA
NPM 230110090046
UNIVERSITAS PADJADJARAN
FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
PROGRAM STUDI PERIKANAN
JATINANGOR
2013
7/23/2019 nangka contoh
3/49
JUDUL : EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN NANGKA
(Artocarpus heterophyllus) UNTUK PENGOBATAN INFEKSI
BAKTERI Aeromonas hydrophila PADA BENIH IKAN MAS
(Cyprinus carpio)
PENULIS : ENOK MARLINA
NPM : 230110090036
Jatinangor, April 2013
Menyetujui,
Komisi Pembimbing, Dekan,
Roffi Grandiosa, S.Pi., M.Sc.
NIP. 19750716 200112 1 003
Dr. Ayi Yustiati, Ir., M.Sc.
NIP. 19620413 198603 2 003
Anggota,
Drs. Walim Lili M.Si.
NIP. 19571026 198803 1 004
7/23/2019 nangka contoh
4/49
iii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kepada Tuhan YME, yang telah memberikan berkat dan
karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan usulan penelitian yang
berjudul, Efektivitas Ekstrak Daun Nangka (Artocarpus heterophyllus) untuk
Pengobatan Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Benih Ikan Mas
(Cyprinus carpio).
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih kepada semua
pihak yang telah membantu dalam penyelesaian penelitian ini, terutama kepada:
1. Roffi Grandiosa, S.Pi., M.Sc. sebagai komisi pembimbing yang selalu
memberikan masukan dan dorongan kepada penulis.
2. Drs. Walim Lili, M.Si. sebagai anggota pembimbing sekaligus sebagai dosen
wali yang telah banyak memberikan masukan dan motivasi kepada penulis.
3. Dr. Yuli Andriani, S.Pi., M.Si. sebagai dosen penelaah, atas masukan yang
berharga untuk menyempurnakan penelitian ini.
4. Dr. Ayi Yustiati, Ir., M.Sc. sebagai Dekan Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan Universitas Padjadjaran.
5. Dr. Ir. Junianto, MP. sebagai Ketua Program Studi Perikanan Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan.
6. Orang tua, adik dan keluarga yang selalu mendoakan, memberikan motivasi
dan perhatiannya baik secara materi juga moril kepada penulis.
7. Euis Rahmawati Akbar S.Farm. dan Ayesha Putri S.Farm. yang telah banyak
membantu dan memberikan masukan dalam penulisan usulan penelitian ini.
8. Josua F. T., Nitya Dvimurti, Ratih Azizah, Murni Purnaningsih, Astri D. U.
dan Eka Hariani atas bantuan, dukungan dan perhatian yang selalu diberikan
kepada penulis.
9. Ahmad Nur Rohman, Ai Siti Rohmah, dan Cut Tsutjinurani yang telah
membantu, mendukung, menemani dan memberikan motovasi kepada
penulis.
7/23/2019 nangka contoh
5/49
iv
10. Teman-teman FPIK UNPAD angkatan 2009 yang telah membatu,
mendukung dan memberikan motivasi kepada penulis dalam menyelesaikan
penelitian ini.
11. Seluruh civitas akademi Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas
Padjadjaran atas bantuannya dalam menyelesaikan studi penulis.
12. Semua pihak yang telah membantu dalam menyelesaikan penelitian ini baik
langsung maupun secara tidak langsung.
Demikian skripsi ini penulis buat. Semoga dapat bermanfaat bagi seluruh
civitas akademika Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan (FPIK) Universitas
Padjadjaran (UNPAD). Atas perhatiannya penulis ucapkan terimakasih.
Jatinangor, April 2013
Enok Marlina
7/23/2019 nangka contoh
6/49
v
DAFTAR ISI
Bab Halaman
DAFTAR GAMBAR ................................................................ vii
DAFTAR TABEL ..................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................ xi
I PENDAHULUAN1.1 Latar Belakang ......................................................................
1.2 Identifikasi Masalah .............................................................
1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................
1.4 Kegunaan Penelitian .............................................................
1.5 Kerangka Pemikiran .............................................................1.6 Hipotesis ...............................................................................
1
3
3
3
36
II TINJAUAN PUSTAKA2.1 Ikan Mas ..............................................................................
2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas ..........................................................
2.1.2 Habitat dan Morfologi Ikan Mas .......................................
2.2 BakteriAeromonas hydrophila ............................................
2.2.1 KlasifikasiAeromonas hydrophila ...................................
2.2.2 KarakteristikAeromonas hydrophila ................................
2.2.3 Gejala Klinis SeranganAeromonas hydrophila ................
2.3 Nangka .................................................................................
2.3.1 Ekologi dan Klasifikasi Nangka .......................................2.3.2 Morfologi Nangka .............................................................
2.3.3 Jenis Nangka ......................................................................
2.3.4 Manfaat Nangka ................................................................
2.3.5 Kandungan Senyawa Daun Nangka ..................................
2.4 Kualitas Air ..........................................................................
7
7
8
9
9
9
10
11
1112
13
13
14
15
III BAHAN DAN METODE3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ..............................................
3.2 Alat dan Bahan ....................................................................
3.2.1. Alat Penelitian ..................................................................
3.2.2. Bahan Penelitian ...............................................................
3.3 Metode Penelitian..................................................................3.4 Prosedur Penelitian................................................................
3.4.1 Penelitian Pendahuluan .....................................................
3.4.2 Penelitian Utama ...............................................................
3.5 Parameter yang Diamati ......................................................
3.5.1 Gejala Klinis ......................................................................
3.5.2 Kelangsungan Hidup .........................................................
3.5.4 Kualitas Air .......................................................................
17
17
17
19
2020
20
24
25
25
26
26
7/23/2019 nangka contoh
7/49
vi
3.6 Analisis Data ........................................................................ 26
DAFTAR PUSTAKA .............................................................. 27
LAMPIRAN .............................................................................. 30
7/23/2019 nangka contoh
8/49
vii
DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Halaman
1
2
3
Ikan Mas (Cyprinus carpio) .................................................
Aeromonas hydrophila .........................................................
Daun Nangka ........................................................................
7
9
12
7/23/2019 nangka contoh
9/49
viii
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Halaman
1
2
3
Hasil Pengamatan Uji Zona Hambat pada Metode Difusi
AgarAeromonas hydrophila ...............................................
Hasil Pengamatan Kontrol Uji Zona Hambat pada Metode
Difusi Agar ...........................................................................
Hasil Uji LC50 48 Jam Ekstrak Daun Nangka pada Benih
Ikan Mas ...............................................................................
22
22
23
7/23/2019 nangka contoh
10/49
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Judul Halaman
1
2
3
4
5
6
7
8
Pembuatan Ekstrak Daun Nangka ........................................
Hasil Uji Fitokimia ...............................................................
Pembuataan Konsentrasi Ektrak Daun Nangka ....................
Pembuatan MediaNutrien Agar(NA) ................................
Pembuatan Larutan Bakteri Kepadatan 108
cfu/ml dengan
Spektrofotometer ..................................................................
Gambar Hasil Uji Zona Hambat ...........................................
Uji LC50 Perendaman Ektrak Daun Nangka .........................
Tata Letak Perlakuan ............................................................
.
31
32
33
34
35
36
37
39
7/23/2019 nangka contoh
11/49
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Sektor kelautan dan perikanan merupakan salah satu sumber andalan
dalam pembangunan perikanan di Indonesia. Dalam memenuhi besarnya
permintaan terhadap persediaan ikan maka penerapan intensifikasi budidaya tidak
dapat dihindarkan. Produksi dari perikanan budidaya sendiri secara keseluruhan
diproyeksikan meningkat dengan rata-rata 4,9 % per tahun. Target tersebut
didasarkan pada potensi pengembangan daerah perikanan budidaya yang
memungkinkan di wilayah Indonesia. Melihat besarnya potensi pengembangan
perikanan budidaya serta didukung peluang pasar internasional yang masih
terbuka luas, diharapkan sumbangan produksi perikanan budidaya semakin besar
terhadap produksi nasional dan penerimaan devisa negara, keterkaitannya dalam
penyerapan angkatan, serta peningkatan kesejahteraan petani/nelayan di Indonesia
(Sukadi 2004).
Ikan mas merupakan salah satu jenis ikan yang banyak diminati
masyarakat terutama bagi masyarakat Jawa Barat. Namun masalah yang selalumuncul dalam budidaya intensif jika tidak dikelola dengan baik adalah terjadinya
penurunan kualitas air pada media budidaya sehingga menimbulkan berbagai
dampak penyakit. Ikan mas di waduk Cirata Kecamatan Cipeundeuy Kabupaten
Bandung Barat mengalami kematian massal yang menyebabkan petani ikan
mengalami kerugian. Sedikitnya 35 ton ikan milik petani diketahui mati. Hal ini
diduga karena terjadinya perubahan cuaca dan terjangkitnya penyakit (Pikiran
Rakyat 2008a).
Parasit yang menyerang dapat berupa protozoa, cacing, bakteri, virus,
jamur dan berbagai mikroorganisme lainnya. Parasit golongan bakteri yang
sering menyerang adalahAeromonas hydrophila. Gejala yang muncul yaitu warna
tubuh ikan terlihat suram, tidak cerah, kulit kesat dan melepuh. Cara bernapas
tampak megap-megap, kantung empedu mengembung dan terjadi luka borok yang
7/23/2019 nangka contoh
12/49
2
memerah di bagian tubuh ikan seperti kulit, ginjal, hati, dan limpa (Tim Lentera
2002).
Para petani maupun pengusaha ikan banyak menggunakan berbagai bahan
kimia maupun antibiotik dalam pengendalian penyakit tersebut. Namun
pemakaian bahan kimia dan antibiotik secara terus menerus dengan konsentrasi
yang kurang tepat, akan menimbulkan masalah baru berupa meningkatnya
resistensi mikroorganisme terhadap bahan tersebut. Selain itu, masalah lainnya
adalah bahaya yang ditimbulkan terhadap lingkungan sekitarnya, ikan yang
bersangkutan, dan manusia yang mengkonsumsinya (Kompas 2013).
Berkaitan dengan permasalahan tersebut, perlunya alternatif bahan obat
yang lebih aman yang dapat digunakan dalam pengendalian penyakit ikan. Salah
satu alternatifnya adalah menggunakan tumbuhan obat tradisional yang bersifat
anti parasit, anti jamur, antibakteri, dan antiviral. Beberapa keuntungan
menggunakan tumbuhan obat tradisional antara lain relatif lebih aman, mudah
diperoleh, murah, tidak menimbulkan resistensi, dan relatif tidak berbahaya
terhadap lingkungan sekitarnya.
Beberapa tumbuhan obat tradisional yang diketahui dapat dimanfaatkan
dalam pengendalian berbagai agen penyebab penyakit ikan adalah daun sirih
(Piper betle), daun jambu biji (Psidium guajava), sambiloto
(Andrographi spaniculata), dan daun nimba (Azadirachta indica). Daun sirih
diketahui berdaya antioksidasi, antiseptik, bakterisida, dan fungisida. Tanaman
sambiloto bersifat antibakteri, sedangkan daun jambu biji selain bersifat
antibakteri juga bersifat antiviral (Sugianti 2005).
Salah satu tumbuhan yang berkhasiat sebagai tanaman obat adalah nangka
(Artocarpus heterophyllus). Daun nangka diketahui berkhasiat melancarkan air
susu dan sebagai obat koreng (Hutapea 1993). Menurut Prakash dkk.(2009), daun
nangka dalam pengobatan tradisional digunakan sebagai obat demam, bisul, luka
dan penyakit kulit. Daun nangka diketahui mengandung flavonoid, saponin dan
tanin yang berperan sebagai zat antibakteri (Tarigan dkk. 2008)
Berdasarkan kemampuan antibakteri tersebut, dalam penelitian ini
digunakan ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi Aeromonas hydrophila
7/23/2019 nangka contoh
13/49
3
khususnya yang menyerang ikan mas. Pengobatan melalui sistem perendaman
dalam ekstrak daun nangka merupakan cara yang baik karena senyawa antibakteri
yang larut dalam air dapat diserap oleh kulit, insang, hati dan ginjal benih ikan
mas (Sukamto 2007). Namun sampai saat ini belum diketahui efektivitas ekstrak
daun nangka untuk mengobati infeksi bakteri Aeromonas hydrophila yang
menyerang benih ikan mas.
1.2 Identifikasi Masalah
Sejauhmana efektivitas ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi
bakteriAeromonas hydrophila terhadap kelangsungan hidup benih ikan mas.
1.3 Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi terbaik dari ekstrak
daun nangka dalam menghasilkan kelangsungan hidup tertinggi pada benih ikan
mas yang terinfeksi bakteriAeromonas hydrophila.
1.4 Kegunaan Penelitian
Hasil dari penelitian diharapkan dapat memberikan informasi kepada
peneliti serta pembudidaya ikan mengenai konsentrasi yang efektif dari
penggunaan ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi bakteri
Aeromonas hydrophilapada benih ikan mas.
1.5 Kerangka Pemikiran
Upaya dalam melakukan budidaya untuk memenuhi kebutuhan ikan mas
sering mengalami kendala kerugian akibat serangan bakteri yang menyebabkan
tingkat kematian tinggi dan berdampak pada harga jual ikan mas melonjak tinggi
seperti yang terjadi di Kabupaten Kuningan akibat dari kurangnya stok ikan mas
yang berasal dari kolam jaring terapung Waduk Djuanda atau Waduk Jatiluhur,
Purwakarta dan di Waduk Cirata serta Saguling mengalami kasus kematian masal
(Pikiran Rakyat 2013b).
7/23/2019 nangka contoh
14/49
4
Jenis mikroorganisme yang sering menyerang benih ikan mas dari
golongan bakteri adalah Aeromonas hydrophila yang merupakan suatu bakteri
berbentuk batang, gram negatif, motil/bergerak dengan flagella polar, yang pada
umumnya terdapat pada perairan dengan bahan organik yang tinggi. Bakteri gram
negatif adalah organisme yang tidak dapat menahan zat pewarna setelah dicuci
dengan alkohol 95 % (Kabata, 1985). Penyakit yang disebabkan oleh bakteri
Aeromonas hydrophila dinamakan penyakit Motile Aeromonas Septicemia
(MAS). Nama lain dari penyakit ini adalah bacterial hemorrhagi septicemia atau
disebut hemorragic septicemia (McDaniel 1979), infectious dropsy, penyakit
merah,pastmerah (Kabata 1985) atau yang lebih dikenal dengan nama penyakit
bercak merah (Eidman dkk. 1981).
Terdapat berbagai macam cara yang dapat dilakukan untuk menanggulangi
serangan bakteri, baik itu menggunakan bahan kimia maupun tradisional. Cara
yang biasa dilakukan yaitu dengan penyuntikan, pengusapan, perendaman, atau
melalui pakan yang telah dicampur obat. Cara perendaman merupakan cara paling
efektif dibandingkan dengan penyuntikan karena dapat mempermudah dalam
proses pengobatan terutama untuk ikan dalam jumlah banyak dengan ukuran yang
kecil (Supriadi dan Rukyani 1990).
Obat yang dapat digunakan untuk menanggulangi penyakit yang
disebabkan Aeromonas hydrophila diantaranya dengan menggunakan herbal,
salah satunya adalah daun nangka. Daun nangka direkomendasikan oleh praktisi
medis ayurveda sebagai obat antidiabetes karena ekstrak daun nangka efektif
dalam mengurangi kadar glukosa darah, tidak merusak organ tubuh bagian dalam
dan bebas dari efek racun meskipun digunakan dalam jangka waktu yang cukup
lama (Chandrika dkk. 2006). Daun nangka diharapkan dapat dimanfaatkan
sebagai alternatif untuk mengatasi kendala seranganAeromonas hydrophilapada
budidaya ikan mas mengingat potensi herbal cukup tinggi dan ketersediaan di
wilayah Jawa Barat cukup tinggi.
Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang dilakukan oleh Chandrika dkk.
(2006), ekstrak daun nangka mengandung flavonoid, saponin dan tanin. Selain itu
ekstrak daun nangka juga mengandung senyawa bioaktif terpenoida (Tarigan dkk.
7/23/2019 nangka contoh
15/49
5
2008). Senyawa-senyawa flavonoid umumnya bersifat antioksidan dan banyak
digunakan sebagai salah satu komponen bahan baku obat-obatan. Senyawa-
senyawa flavonoid dan turunannya dari tanaman nangka memiliki fungsi fisiologi
tertentu. Ada dua kategori fungsi fisiologi senyawa flavonoid tanaman nangka
berdasarkan sebarannya di Indonesia. Senyawa flavonoid tanaman nangka yang
tumbuh di Indonesia bagian barat diduga berfungsi sebagai antibakteri. Sedangkan
yang tumbuh di Indonesia bagian timur berfungsi sebagai antivirus (Aryo 2007).
Mekanisme kerja senyawa flavonoid dapat mendenaturasi protein sel bakteri dan
merusak membran sel bakteri tanpa dapat diperbaiki lagi (Pelczar dan Chan
1986). Saponin merupakan senyawa yang berfungsi sebagai antimikroba
(Robinson 1995). Tanin diketahui dapat menghambat aktivitas metabolisme dan
pertumbuhan mikroba (Sugoro dkk. 2004).
Herbal dapat dipersiapkan dalam bentuk ekstrak dan filtrat. Bentuk ekstrak
tanaman nangka dapat dipersiapkan dengan ekstrak etanol yang diharapkan
mengandung zat antibakteri. Pada penelitian sebelumnya telah banyak digunakan
ekstrak tanaman yang diketahui mengandung zat antibakteri, seperti ekstrak
bawang putih dan cengkeh yang memperlihatkan aktivitas antimikroba yang
tinggi (Leuschner dan Zamparini 2002), ekstrak daun kipahit dapat digunakan
untuk menghambat dan mengobati infeksi bakteri (Maharani dan Supriadi 2006),
ekstrak daun pepaya yang diketahui memiliki sifat sebagai bakteriostatik (Rahman
2008).
Penelitian sebelumnya mengenai penggunaan ekstrak daun nangka belum
pernah dilakukan sehingga dilakukan uji pendahuluan dengan melakukan uji zona
hambat dan uji LC50 untuk memperoleh konsentrasi yang dapat diterapkan pada
aplikasi pengobatan. Berdasarkan penelitian pendahuluan, uji zona hambat ekstrak
daun nangka terhadap Aeromonas hydrophila, pada konsentrasi 100.000 ppm
dapat menghambat pertumbuhan Aeromonas hydophila terbesar dengan adanya
zona bening pada kertas saring dengan diameter rata-ratanya adalah 10,08 mm.
Konsentrasi terkecil yang dapat menghambat pertumbuhanAeromonas hydrophila
pada konsentrasi 10 ppm dengan diameter rata-ratanya 6,96 mm. Berdasarkan
7/23/2019 nangka contoh
16/49
6
hasil analisis uji in vitro, diketahui bahwa semakin tinggi konsentrasi yang
digunakan akan semakin besar zona hambat yang dihasilkan.
Hasil uji LC50 48 jam setelah dianalisis menggunakan EPA Probhit
Analysis diperoleh nilai konsentrasi 101.910 ppm yang mematikan ikan sebanyak
50 % selama 48 jam. Berdasarkan analisis uji zona hambat dan LC50 48 jam yang
dilakukan, maka konsetrasi efektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri
Aeromonas hydrophila adalah dibawah nilai LC50 48 jam dan diatas nilai uji zona
daya hambat terkecil yaitu sebesar 30 ppm.
1.6 Hipotesis
Pemberian ekstrak daun nangka pada konsentrasi 30 ppm dengan lama
perendaman 48 jam merupakan perlakuan yang efektif untuk pengobatan benih
ikan mas yang terinfeksi bakteriAeromonas hydrophila.
7/23/2019 nangka contoh
17/49
7
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ikan Mas
2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas
Ikan mas merupakan ikan yang sangat adaptif terhadap lingkungan baru
sehingga menjadikan ikan mas banyak tersebar hampir di seluruh penjuru dunia.
Ikan mas banyak memiliki sebutan. Bahasa Inggris disebut common carp. Di
Pulau Jawa, ikan mas dikenal dengan masmasan atau lauk mas. Sementara di
Sumatra, ikan mas dikenal dengan sebutan ikan rayo atau ikan mameh.
Klasifikasi ikan mas berdasarkan ilmu taksonomi dikelompokan sebagai
berikut (Khairuman dan Amri 2011) :
Filum : Chordata
Kelas : Osteichthyes
Ordo : Cypriniformes
Family : Cyprinidae
Genus : Cyprinus
Spesies : Cyprinus carpio
Gambar 1. Ikan Mas (Cyprinus carpio)
(Sumber : Dokumentasi Pribadi)
Terdapat delapan strain ikan mas yang dikenal di Indonesia. Beberapa
strain ikan mas unggulan adalah ikan mas majalaya, punten, sinyonya, merah,
taiwan, kumpay, karper, kaca, dan kancra domas. Strain ikan mas yang paling
7/23/2019 nangka contoh
18/49
8
unggul dan banyak diminati masyarakat adalah majalaya, sinyonya, taiwan dan
jenis hibrida (Tim Lentera 2002).
2.1.2 Habitat dan Morfologi Ikan Mas
Habitat yang disukai ikan mas adalah perairan dengan kedalaman 1 meter
yang mengalir pelan, dan subur yang ditandai melimpahnya pakan alami,
misalnya rotifer, rotatoria, udang-udang renik dan lain-lain. Sebaliknya larva ikan
mas menyukai perairan dangkal, tenang dan terbuka. Sedangkan benih ikan mas
yang berukuran cukup besar lebih menyukai perairan yang agak dalam, mengalir
dan terbuka. Di negara tropis ikan mas berpijah pada musim hujan. Waktu
pemijahan biasanya bertepatan dengan turunnya hujan. Kesiapan proses
pemijahan induk dapat terganggu jika media hidupnya tercemar, kandungan
oksigen terlarut menurun dan kondisi kesehatan induk menurun (Djarijah 2011)
Ikan mas memiliki ciri morfologi dengan bentuk tubuh agak memanjang
dan memipih tegak (compressed), mulut terletak dibagian tengah ujung kepala
(terminal) dan dapat disembulkan (protaktil). Dibagian anterior mulut terdapat
dua pasang sungut. Diujung dalam mulut terdapat gigi kerongkongan (pharyngeal
teet) yang terbentuk atas tiga baris gigi geraham. Secara umum hampir seluruh
tubuh ikan mas ditutupi oleh sisik. Sisik ikan mas berukuran relatif besar dan
digolongkan kedalam tipe sisik sikloid (lingkaran). Sirip punggungnya (dorsal)
memanjang dengan bagian belakang berjari keras dan bagian akhir (sirip ketiga
dan keempat) bergerigi. Letak sirip punggung bersebrangan dengan permukaan
sirip perut (ventral). Sirip duburnya (anal) mempunyai ciri seperti sirip punggung,
yakni berjari keras dan bagian akhirnya bergerigi. Garis rusuknya (linea lateralis
atau gurat sisi) tergolong lengkap, berada di pertengahan permukaan tubuh
dengan bentuk melintang dari tutup insang sampai ke ujung belakang pangkal
ekor (Khairuman dan Amri 2011).
7/23/2019 nangka contoh
19/49
9
2.2 BakteriAeromonas hydrophila
2.2.1 KlasifikasiAeromonas hydrophila
Awalnya Aeromonas hydrophila dikenal dengan nama
Bacilus hydrophilus fuscus, pertama kali diisolasi dari kelenjar pertahanan katak
yang mengalami pendarahan septicemia. Kluiver dan Van Niel pada tahun 1936
mengelompokkan genus Aeromonas. Tahun 1984, Popoff memasukan genus
Aeromonas ke dalam famili Vibrionaceae. Aeromonas hydrophila diisolasi dari
manusia dan binatang sampai dengan tahun 1950. Bakteri ini memiliki nama
sinonimA. formicans danA. liquefaciens (Sismeiro et al. 1998).
Klasifikasi bakteri Aeromonas hydrophila berdasarkan ilmu taksonomi
sebagai berikut (Holt et. al. 1994) :
Filum : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Pseudanonadeles
Family : Vibrionaceae
Genus : Aeromonas
Spesies :Aeromonas hydrophila
Gambar 2.Aeromonas hydrophila
(Sumber : http://www.trbimg.com/img-4fb27f3e/turbine/la-na-nn-flesh-eating-
bacteria-20120515-001/600)
2.2.2 KarakteristikAeromonas hydrophila
Aeromonas hydrophila merupakan bakteri yang hidup di air tawar yang
mengandung bahan organik tinggi. Ciri utama bakteri ini adalah bentuknya seperti
batang, ukurannya 14,4 x 0,41 mikron, bersifat gram negatif, tidak berspora,
bersifat motil (bergerak aktif) karena mempunyai satu flagel yang keluar dari satu
7/23/2019 nangka contoh
20/49
10
kutubnya, hidup di lingkungan bersuhu 15300C dan pH 5,59 (Afrianto dan
Liviawaty 1992). Bakteri ini dapat bertahan dalam lingkungan aerob maupun
anaerob dan dapat mencerna material-material seperti gelatin dan hemoglobin.
Aeromonas hydrophila resisten terhadap chlorine serta suhu yang dingin (Krieg
dan Holt 1984).
Aeromonas hydrophila menginfeksi semua jenis ikan air tawar. Infeksi
biasanya berkaitan dengan kondisi stres akibat kepadatan, malnutrisi, infeksi
parasit, kualitas air yang buruk dan fluktuasi suhu air yang ekstrim. Serangan
bersifat akut. Jika kualitas lingkungan air terus menurun, kematian yang
ditimbulkan bisa mencapai 100% (Bachtiar 2010).
Aeromanas hydrophila menyebabkan penyakit Motile Aeromonas
Septicemia (MAS) atau penyakit bercak merah. Bakteri ini menyerang berbagai
jenis ikan air tawar seperti lele dumbo (Clarius gariepinus), ikan mas
(Cyprinus carpio), gurami (Osphronemus gouramy) dan udang galah
(Macrobrachium rosenbergii). Pengendalian bakteri ini sulit karena memiliki
banyak strain dan selalu ada di air serta dapat menjadi resisten terhadap obat-
obatan (Kamiso dan Triyanto 1993)
2.2.3 Gejala Klinis SeranganAeromonas hydrophila
Aeromanas hydrophila dikenal juga sebagai bakteri oportunis karena
biasanya menimbulkan masalah pada ikan yang sedang mengalami stres.
Penularan bakteri ini berlangsung melalui air, kontak badan, kontak dengan
peralatan yang telah tercemar atau karena pemindahan ikan yang terserang
Aeromonas hydrophila dari satu tempat ke tempat lain. Ikan yang terserang
bakteri ini biasanya akan memperlihatkan gejala berupa (Cahyono 2011) :
Warna tubuh berubah menjadi agak gelap,
Kulit kasar, timbul pendarahan dan selanjutnya menjadi borok,
Kemampuan berenang menurun dan sering megap-megap di permukaan air
karena insang rusak dan sulit bernafas,
Sering terjadi pendarahan pada organ bagian dalam seperti hati, ginjal
maupun limpa. Perut sering terlihat agak kembung,
7/23/2019 nangka contoh
21/49
11
Seluruh sirip rusak dan berwarna keputihan,
Mata rusak dan agak menonjol.
Menurut Herwig (1979),Aeromonas hydrophila adalah penyebab penyakit
ikan yang dikenal dengan Haemorrhagic septicemia, motile aeromonas
septicaemia, ulcer disease atau red sore, red pest, dan infectious dropsy.
Gejala klinis infeksi bakteriAeromonas hydrophila yaitu :
1. Abdominal dropsy, dicirikan dengan menumpuknya/terakumulasinya cairan
pada ruang viscera,
2. Ulcerative (ulkus), dicirikan lesio pada kulit dan otot,
3. Bacterial haemoragic septicaemia, yang dicirikan oleh adanya perdarahan
pada otot, juga biasa disebut red disease, red pest dan infectious dropsy.
2.3 Nangka
2.3.1 Ekologi dan Klasifikasi Nangka
Nangka diyakini berasal dari India, yaitu di wilayah Ghats bagian barat.
Saat ini nangka telah menyebar luas di berbagai daerah tropik, terutama di Asia
Tenggara. Dalam bahasa Inggris, nangka dikenal sebagaijackfruit. Pohon nangka
umumnya berukuran sedang sampai sekitar 20 m tingginya, walaupun ada yang
mencapai 30 m. Batang bulat silindris, sampai berdiameter sekitar 1 m. Tajuknya
padat dan lebat, melebar dan membulat. Seluruh bagian tumbuhan apabila dilukai
akan mengeluarkan getah putih pekat.
Nangka dapat tumbuh baik di iklim tropis. Tanaman ini menyukai wilayah
dengan curah hujan lebih dari 1500 mm per tahun dimana musim keringnya tidak
terlalu keras. Nangka kurang toleran terhadap udara dingin, kekeringan dan
penggenangan (Sudarma 2012).
Klasifikasi tumbuhan nangka, sebagai berikut (Rukmana 2008) :
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Dicotyledonae
Ordo : Morales
Famili : Moraceae
Genus : Artocarpus
Spesies :Artocarpus heterophyllus
7/23/2019 nangka contoh
22/49
12
Gambar 4. Daun Nangka
(Sumber : Dokumentasi Pribadi)
Indonesia memiliki banyak sebutan untuk tanaman nangka seperti Panah
(Aceh), pinasa, sibodak, nangka atau naka (Batak), baduh atau enaduh (Dayak),
binaso, lamara atau malasa (Lampung), naa (Nias), kuloh (Timor), dan nangka
(Sunda dan Madura) (Rukmana 2008).
2.3.2 Morfologi Nangka
Nangka berdaun tunggal, tersebar, bertangkai 14 cm, helai daun agak
tebal, kaku, bertepi rata, bulat telur sampai memanjang dengan pangkal
menyempit sedikit demi sedikit, dan ujung pendek meruncing. Daun penumpu
bulat telur lancip, panjang sampai 8 cm, mudah rontok dan meninggalkan bekas
berupa cincin, permukaan atas daun berwarna hijau tua mengkilap, kaku, dan
permukaan bawah daun berwarna hijau muda.
Tumbuhan nangka berumah satu, perbungaan muncul pada ketiak daun
pada pucuk yang pendek dan khusus, yang tumbuh pada sisi batang atau cabang
tua. Bunga jantan dalam bongkol berbentuk gelendong, 13 38 cm berwarna
hijau tua dengan serbuk sari kekuningan dan berbau harum samar apabila masak.
Bunga nangka disebut babal. Setelah melewati umur masaknya, babal akan
membusuk (ditumbuhi kapang) dan menghitam di pohon sebelum akhirnya
terjatuh. Bunga betina dalam bongkol tunggal atau berpasangan, silindris atau
lonjong dan berwarna hijau tua (Rukmana 2008).
Buah nangka relatif besar dan berbiji banyak. Kulitnya berduri lunak.
Setiap biji dibalut oleh daging buah (endokarp) dan dami (eksokarp) yang
7/23/2019 nangka contoh
23/49
13
mengandung gelatin. Buah nangka merupakan buah majemuk yakni berbunga
banyak dan tersusun tegak lurus pada tangkai buah, membentuk bangunan besar
yang kompak, dan bentuknya bulat hingga bulat lonjong. Kulit buah berwarna
hijau hingga kuning kemerahan. Daging buah tipis hingga tebal. Setelah matang,
daging buah berwarna kuning merah, lunak, manis dan aroma spesifik. Pohon
nangka berakar tunggang dengan akar samping yang kuat dan dalam (Sunarjono
2010).
2.3.3 Jenis Nangka
Jenis kultivar tanaman nangka di Indonesia lebih dari 30 kultivar dan di
Pulau Jawa terdapat lebih dari 20 kultivar. Sehingga dilakukan pengelompokan
nangka berdasarkan kesamaannya. Beberapa macam pengelompokan tanaman
nangka (Sudarma 2012) :
Berdasarkan ukuran pohon dan buah nangka terbagi dua golongan yaitu:
Nangka buah besar : tinggi mencapai 2030 m, diameter batang mencapai
80 cm dan umur mulai berbuah sekitar 510 tahun.
Nangka buah kecil : tinggi mencapai 69 m, diameter batang mencapai
1525 cm dan umur mulai berbuah sekitar 1824 bulan.
Berdasarkan kondisi daging buah nangka dapat dibedakan menjadi :
Nangka bubur dengan daging buah tipis, lunak agak berserat dan membubur,
beraroma keras mudah lepas dari buah, rasanya asam manis, dan berbau
harum tajam.
Nangka salak dengan daging buah tebal, keras, mengeripik, agak kering, rasa
manis agak pahit, dan tidak terlalu harum/aromanya kurang keras
Nangka cempedak dengan daging buah tipis dan beraroma harum spesifik.
2.3.4 Manfaat Nangka
Tanaman nangka tergolong serba guna. Buahnya yang muda dapat disayur
dan buah yang telah matang enak dimakan serta dapat dijadikan berbagai macam
olahan makanan. Beberapa daerah di Indonesia, penduduknya tidak hanya
memanfaatkan buah nangka sebagai bahan pangan saja, tetapi juga sebagai obat
7/23/2019 nangka contoh
24/49
14
tradisional untuk mengatasi demam, disentri atau malaria. Kulit batangnya yang
berserat, dapat digunakan sebagai bahan tali serta memiliki fungsi sebagai
antikanker, anti virus, antiinflamasi, diuretil dan antihipertensi (Ersam T. 2001).
Getahnya digunakan dalam campuran untuk memerangkap burung, menambal
perahu dan lain-lain. Daun nangka merupakan pakan ternak yang disukai
kambing, domba maupun sapi. Daun tanaman ini juga direkomendasikan oleh
pengobatan ayurveda sebagai obat antidiabetes karena ekstrak daun nangka
memberi efek hipoglikemi yaitu menurunkan kadar gula darah (Chandrika dkk.
2006). Selain itu daun nangka juga berkhasiat melancarkan air susu dan sebagai
obat koreng (Hutapea 1993). Menurut Prakash dkk (2009), daun nangka dalam
pengobatan tradisional digunakan sebagai obat demam, bisul, luka dan penyakit
kulit.
2.3.5 Kandungan Senyawa Daun Nangka
Daun nangka saat ini selain digunakan sebagai pakan ternak juga telah
digunakan sebagai obat tradisional. Daun nangka mengandung flavonoid, saponin
dan tannin. Flavonoid dan saponin merupakan senyawa yang mempunyai aktivitas
antibakteri yang cara kerjanya dengan merusak membran sitoplasma dan
mendenaturasi protein sel (Robonson 1995).
Senyawa flavonoid merupakan salah satu metabolit sekunder,
kemungkinan keberadaannya dalam daun dipengaruhi oleh adanya proses
fotosintesis sehingga daun muda belum terlalu banyak mengandung flavonoid.
Senyawa flavonoid tersebut terbukti secara empirik sebagai antikanker, antivirus,
antiinflamasi, diuretik dan antihipertensi (Ersam 2001). Mekanisme kerja senyawa
flavonoid dengan cara mendenaturasi protein sel bakteri dan merusak membran
sel bakteri tanpa dapat diperbaiki lagi (Pelczar dan Chan 1986). Selain itu,
flavonoid bersifat antiinflamasi sehingga dapat mengurangi peradangan dan
membantu mengurangi rasa sakit bila terjadi pendarahan atau pembengkakan pada
luka, bersifat antibakteri dan antioksidan serta mampu meningkatkan kerja sistem
imun karena leukosit sebagai pemakan benda asing lebih cepat bekerja dan sistem
limpa lebih cepat diaktifkan (Angka 2004).
7/23/2019 nangka contoh
25/49
15
Saponin merupakan salah satu senyawa yang dihasilkan tumbuhan
berfungsi sebagai antivirus, antibakteri, meningkatkan kekebalan tubuh.
Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri adalah menurunkan tegangan
permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan
mengakibatkan senyawa intraseluler bakteri akan keluar (Robinson 1995).
Saponin sering digunakan untuk disinfeksi media budidaya sehingga peranannya
sebagai antimikroba telah diuji. Namun saponin apabila digunakan dalam
konsentrasi tinggi dapat menjadi racun kuat untuk ikan dan amfibi dan saponin
sulit untuk diidentifikasi (Sugoro dkk. 2004). Tanin merupakan senyawa fenol
yang larut dalam air dan tanin pada tanaman merupakan senyawa fenolik yang
memiliki daya antiseptik (Pelczar dan Chan 1986). Penggunaan tanin sangat
efektif untuk mencegah serangan bakteri di dareah tropis dan subtropis. Efek
antibakteri tanin melalui reaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim, dan
inaktivasi fungsi materi genetik (Ajizah 2004).
2.4 Kualitas Air
Air merupakan media yang paling utama bagi kehidupan ikan. Air yang
memadai, baik kuantitas maupun kualitas dalam budidaya ikan sangat
menentukan keberhasilan budidaya tersebut. Bila kondisi air tidak memenuhi
syarat dapat menjadi sumber penyakit yang paling berbahaya sehingga
mengakibatkan kematian bagi ikan air tawar (Effendie 2003).
Suhu merupakan salah satu faktor yang penting yaitu sebagai faktor
pengontrol yang dapat mempengaruhi aktivitas fisiologis dan kimiawi organisme
perairan. Suhu optimal di dalam air bergantung pada spesies dan berbagai
parameter seperti pertumbuhan, perkembangan, konversi pakan, dan ketahanan
penyakit (Handajani dan Samsundari 2005). Suhu air optimal untuk
pertumbuhaannya ikan mas adalah 22280C (Tim Lentera 2002).
Nilai pH menunjukan konsentrasi ion H+
dalam perairan . Semakin rendah
pH, perairan semakin asam, air yang bersifat asam tidak sesuai untuk
pemeliharaan ikan. Derajat keasaman (pH) yang ideal bagi kehidupan ikan
berkisar antara 6,78,2 (Tim Lentera 2002).
7/23/2019 nangka contoh
26/49
16
Kandungan oksigen terlarut (DO) yang baik untuk kehidupan ikan mas
ialah pada 35 mg/L (Tim Lentera 2002). Jika kandungan oksigen terlarut dalam
media pemeliharaan tidak optimal, ikan mas akan membuka mulutnya dan selalu
berada di permukaan air, bahkan bila air tidak segera diganti dapat menimbulkan
kematian.
Amonia yang terkandung dalam suatu perairan berasal dari kotoran ikan.
Amonia tingkat keseimbangannya sangat dipengaruhi oleh pH air, suhu dan
salinitas. Kadar amonia akan meningkat pada pH dan suhu tinggi serta kadar
garam dan kesadahan rendah. Kadar amonia tinggi dalam air secara langsung
dapat mematikan organisme perairan yakni melalui pengaruhnya terhadap
permeabilitas sel, mengurangi konsentrasi ion dalam tubuh, meningkatkan
konsumsi oksigen dalam jaringan, merusak insang dan mengurangi kemampuan
darah mengangkut oksigen. Kisaran amonia yang dapat ditolerir oleh ikan mas
adalah kurang dari 1 mg/L (Boyd 1982).
7/23/2019 nangka contoh
27/49
17
BAB III
BAHAN DAN METODE
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi dan
Laboratorium Akuakultur Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas
Padjadjaran. Penelitian dilaksanakan dalam dua tahap yaitu penelitian
pendahuluan dan penelitian utama. Penelitian pendahuluan dilaksanakan pada
bulan Januari 2013 sampai dengan Februari 2013. Penelitian utama dilaksanakan
pada bulan April 2013 sampai dengan Mei 2013.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1. Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah :
1. Peralatan yang digunakan untuk uji zona hambat ekstrak daun nangka
terhadap bakteri :
Alumunium foil digunakan untuk membungkus alat-alat.
Autoclave dengan tekanan 1 atm, pada suhu 1210
C untuk
mensterilkan alat dan media.
Bunsen untuk mensterilkan alat inokulasi bakteri.
Erlenmeyer 250 mL merk Pyrex sebagai alat untuk menempatkan
media agar.
Falcon Centrifuge Tube 15 mL sebagai alat untuk membuat larutan
bakteriAeromonas hydrophila.
Gelas ukur 1 L merk Pyrex sebagai alat untuk mengukur volume
bahan cair yang akan digunakan.
Hot plates dan magnetic stirer sebagai alat untuk menghomogenkan
media agar.
Inkubator sebagai tempat untuk inkubasi bakteri.
7/23/2019 nangka contoh
28/49
18
Jangka sorong digital ketelitian 0,1 mm sebagai alat untuk mengukur
zona bening yang terbentuk.
Jarum ose sebagai alat untuk mengambil biakan bakteri.
Kapas sebagai penutup pada tabung reaksi.
Kertas saring Whatman no. 42 dengan diameter 5 mm sebagai kertas
cakram untuk menentukan zona bening.
L glass sebagai alat untuk meratakan bakteri dalam petri dish.
Laminar air flow sebagai ruang kerja aseptis dengan bantuan
sterilisasi UV.
Mikropipet merk Eppendorf sebagai alat untuk mengambil suspensi.
Parafilm sebagai segel cawan petri untuk mencegah kontaminasi.
Petri dish merk Pyrex sebagai tempat pembiakan bakteri sebanyak 6
buah.
Plastik tahan panas sebagai pembungkus alat-alat setelah sebelumnya
dibungkus oleh alumunium foil untuk disterilisasi.
Spektrofotometer Genesys 10 UV sebagai alat untuk menghitung
kepadatan mikrooganisme.
Timbangan analitik merk Precisa ketelitian 0,001 g sebagai alat untukmenimbang bahan.
2. Peralatan yang digunakan untuk uji LC50 :
Aerator, selang aerasi dan batu aerasi sebagai alat untuk memasok O2
pada setiap akuarium dan bak fiber.
Akuarium ukuran 20 x 40 x 30 cm3
sebagai wadah penelitian sebanyak
8 buah.
Serok kain kasa sebagai alat untuk mengambil ikan mas.
Software Epa Probhit Analysis untuk menganalisis nilai toksisitas
ekstrak daun nangka.
7/23/2019 nangka contoh
29/49
19
3. Peralatan yang digunakan dalam penelitian utama :
Aerator, selang aerasi dan batu aerasi sebagai alat untuk memasok O2
pada setiap akuarium dan bak fiber
Akuarium ukuran 20 x 40 x 30 cm3
sebagai wadah penelitian sebanyak
15 buah.
Alat Suntik dengan ketelitian 0,1 mL sebagai alat untuk
menginfeksikan bakteri pada ikan.
Serok kain kasa sebagai alat untuk mengambil ikan
4. Peralatan yang digunakan untuk pengukuran kualitas air :
DO meter merk Hanna HI-3810 sebagai alat untuk mengukur oksigen
terlarut.
pH meter merk Lutron pH-44 sebagai alat untuk mengukur dan
mengontrol derajat keasaman air.
Termometer dengan ukuran 00C100
0C sebagai alat untuk mengukur
suhu air.
3.2.2. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
1. Ikan Uji
Ikan uji yang digunakan adalah ikan mas dengan ukuran 710 cm berasal
dari Balai Benih Ciparay.
120 ekor untuk uji pendahuluan LC50 48 jam ekstrak daun nangka dan
30 ekor untuk stok.
225 ekor untuk penelitian utama dan 75 untuk stok.
2. Daun Nangka
Daun nangka diperoleh dari PEDCA FPIK UNPAD Jatinangor-Sumedang.
3. Bakteri
Bakteri yang digunakan adalah Aeromonoas hydrophila yang berasal dari
Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar, Bogor.
7/23/2019 nangka contoh
30/49
20
4. Media Bakteri
Media yang digunakan untuk kultur adalah Nutrien Agar merk dagang
Oxoid dengan dosis pembuatan 28 gram/L.
5. Aquades dan alkohol
Aquades dan alkohol digunakan untuk mencuci preparat dan alat yang
telah digunakan.
6. Etanol 96 %
Etanol digunakan sebagai bahan pelarut ekstrak daun nangka.
7. NaCl Fisiologis 0,9 %
NaCl fisiologis sebagai larutan suspensi bakteri.
8. Pakan
Pakan yang digunakan merupakan pelet komersil merk PF-600 dengan
kandungan protein 39 %.
3.3 Metode Penelitian
Metode penelitian dilakukan secara eksperimental dengan menggunakan
Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri atas lima perlakuan. Setiap
perlakuan diulang sebanyak tiga kali. Perlakuan yang diberikan adalah
perendaman benih ikan mas dalam larutan ekstrak daun nangka dengan
konsentrasi berbeda. Konsentrasi yang digunakan dalam penelitian, didasarkan
atas penelitian pendahuluan.
3.4 Prosedur Penelitian
3.4.1 Penelitian Pendahuluan
1. Pembutan Ekstrak Daun Nangka
Pembuatan ekstrak daun nangka dilakukan untuk mendapatkan stok
ekstrak yang digunakan dalam penelitian. Tahapan pembuatan ekstrak daun
nangka (Lampiran 1).
7/23/2019 nangka contoh
31/49
21
2. Uji Fitokimia Daun Nangka
Uji fitokimia daun nangka dilakukan untuk mengetahui kandungan yang
terdapat di dalam daun nangka. Pengujian dilakukan yaitu uji kandungan alkaloid,
falvonoid, saponin dan tanin. Tahapan pengujian fitokimia (Lampiran 2).
3. Uji Zona Hambat
Uji zona hambat dilakukan untuk mengetahui kemampuan ekstrak daun
nangka sebagai antibakteri dalam menghambat metabolisme kerja bakteri
Aeromonas hydrophila. Uji zona hambat dilakukan pada berbagai konsentrasi
yaitu 100.000 ppm, 10.000 ppm, 1000 ppm, 100 ppm dan 10 ppm dengan tiga kali
ulangan dan kontrol menggunakan ampisilin dengan konsetrasi 10.000 ppm,
1000 ppm dan 100 ppm dengan dua kali ulangan.
Langkah kerja untuk uji zona hambat sebagai berikut :
1. Peralatan dan bahan yang digunakan untuk uji zona hambat disterilisasi
terlebih dahulu dengan autoclavepada suhu 1210C dan tekanan 1 atm selama
15 menit.
2. Pembuatan konsentrasi ekstrak daun nangka dilakukan dengan cara
pengenceran dengan aquades (Lampiran 3).
3. Pembuatan media NA sebagai media pertumbuhan Aeromonas hydrophila
(Lampiran 4).
4. Pembuatan larutan bakteri dengan kepadatan 108
cfu/mL pada tabung falcon
(Lampiran 5).
5. Pengambilan suspensi cairan bakteri kepadatan 108
cfu/mL sebanyak 0,1 mL
dengan pipet ukur kemudian teteskan diatas permukaan agar yang telah
memadat.
6. Meratakan penyebaran bakteri dalam media agar menggunakan L glass.
7. Meletakan kertas cakram yang telah dipersiapkan diatas media petri dish agar
NA yang telah diinokulasi dengan bakteriAeromonas hydrophila.
8. Meneteskan ekstrak daun nangka dengan konsentrasi sebesar 10 ppm, 100
ppm, 1000 ppm, 10.000 ppm dan 100.000 ppm ke atas kertas cakram.
7/23/2019 nangka contoh
32/49
22
9. Metode pengerjaan dilakukan secara steril di ruang laminar air flow untuk
mencegah kontaminasi.
10. Menginkubasikan selama 1824 jam pada suhu 270
C.
11. Diameter zona hambatan yang dihasilkan berupa zona bening pada uji ini
kemudian diamati.
Hasil pengamatan uji zona hambat yang disebabkan oleh ekstrak daun nangka
pada metode difusi agar dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2.
Tabel 1. Hasil pengamatan uji zona hambat pada metode difusi agar
Perlakuan
(ppm)
Zona Hambat Ulangan ke- Rata-rata
(mm) I II III
100.000 9,52 10,69 10,03 10,08
10.000 8,86 9,2 9,12 9,06
1000 8,24 9,16 8,79 8,73
100 8,03 8,66 7,04 7,91
10 7,27 7,21 6,41 6,96
Tabel 2. Hasil pengamatan kontrol uji zona hambat pada metode difusi agar
Perlakuan
(ppm)
Zona Hambat Ulangan ke- Rata-rata
(mm) I II
10.000 9,81 9,16 9,48
1000 8,17 8,36 8,26
100 8,07 7,94 8,01
Berdasarkan tabel diatas, diketahui konsentrasi minimum rata-rata yang
dapat menghambat pertumbuhan bakteri adalah pada konsentrasi 10 ppm dengan
diameter zona hambat rata-rata 6,96 mm dan konsentrasi yang dapat menghambat
pertumbuhan terbesar adalah 100.000 ppm dengan diameter zona hambat rata-rata
10,08 mm. Kontrol yang dilakukan untuk penelitian ini mengunakan ampisilin
karena diketahui bahwa ampisilin merupakan antibiotik yang dapat mengobati
infeksi ringan sampai sedang yang disebabkan oleh bakteri dan telah banyak
diaplikasikan dalam bidang kesehatan.
7/23/2019 nangka contoh
33/49
23
Berdasarkan hasil uji zona hambat dapat diketahui bahwa semakin
bertambahnya konsentrasi ekstrak yang diberikan, maka zona hambat yang
dihasilkan juga semakin besar (Lampiran 6). Sehingga semakin besar konsetrasi
ekstrak maka semakin efektif untuk membunuh bakteriAeromonas hydrophila.
4. Uji LC50 (Lethal Concentration 50 %) Perendaman Ekstrak Daun Nangka
Uji LC50perendaman ekstrak daun nangka dilakukan untuk mendapatkan
konsentrasi ekstrak dengan mortalitas ikan mas sebanyak 50 % selama 48 jam.
Perlakuan pada uji LC50 dilakukan dengan dua ulangan pada konsentrasi 50 ppm,
100 ppm, 300 ppm, dan 600 ppm (Lampiran 3).
Ikan uji dimasukan ke dalam wadah perlakuan berupa akuarium dengan
padat penebaran 15 ekor/akuarium. Sebelum dilakukan uji LC50 ikan mas terlebih
dahulu diaklimatisasi selama 7 hari dan diberi pakan pelet secara adlibitum.
Kemudian akuarium diisi ekstrak daun nangka sesuai perlakuan.
Hasil uji LC50 perendaman ekstrak daun nangka terhadap benih ikan mas
yang dilakukan pada penelitian pendahuluan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji LC50 48 jam ekstrak daun nangka pada benih ikan mas
PerlakuanMortalitas pada jam ke-
Jumlah24 48
A1 15 Tidak dihitung lagi 15
A2 15 Tidak dihitung lagi 15
B1 14 - 14
B2 14 - 14
C1 9 - 9
C2 11 - 11
D1 - - 0
D2 - - 0
E1 - - 0
E2 - - 0
Keterangan : A = Ekstrak daun nangka konsentrasi 600 ppm
B = Ekstrak daun nangka konsentrasi 300 ppm
C = Ekstrak daun nangka konsentrasi 100 ppm
D = Ekstrak daun nangka konsentrasi 50 ppm
E = Tanpa perendaman ekstrak daun nangka (0 ppm)
7/23/2019 nangka contoh
34/49
24
Kelangsungan hidup ikan dalam uji LC50 dianalisis melalui program Probit
Analysis menggunakan software dari US Environmental Protection Agency (US
EPA). Nilai LC50 yang diperoleh adalah 101,910 ppm ekstrak daun nangka dapat
mengaikbatkan mortalitas benih ikan mas sebanyak 50 % dalam waktu 48 jam
(Lampiran 7).
Berdasarkan hasil zona hambat dan uji LC50, konsentrasi yang efektif
untuk menghambat pertumbuhan Aeromonas hydrophila berada diatas nilai zona
hambat terkecil dan dibawah nilai LC5048 jam. Sehingga perlakuan yang
digunakan dalam penelitian ini adalah :
Perlakuan A = Tanpa perendaman ekstrak daun nangka (0 ppm)
Perlakuan B = Ekstrak daun nangka konsentrasi 20 ppm
Perlakuan C = Ekstrak daun nangka konsentrasi 30 ppm
Perlakuan D = Ekstrak daun nangka konsentrasi 40 ppm
Perlakuan E = Ekstrak daun nangka konsentrasi 50 ppm
Model umum rancangan yang digunakan adalah :
= + + (Gaspersz 1991)
Keterangan :
Xij = Hasil pengamatan pada perlakuan ke-i ulangan ke-j
I = Rata-rata umum
j = Pengaruh perlakuan ke-i
ij = Pengaruh faktor randomperlakuan ke-i ulangan ke-j
3.4.2 Penelitian Utama
Penelitian utama dilakukan dengan rancangan perlakuan berdasarkan
penelitian pendahuluan. Perlakuan tersebut yaitu pada konsentrasi ekstrak daun
nangka 0 ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm.
Prosedur yang dilakukan selama penelitian adalah sebagai berikut :
1. Persiapan wadah perlakuan sebanyak 15 buah.
2. Wadah perlakuan diisi dengan air sebanyak 15 L.
3. Penempatan wadah perlakuan.
7/23/2019 nangka contoh
35/49
25
4. Ikan uji dimasukan ke dalam wadah perlakuan yang telah disiapkan dengan
kepadatan 15 ekor per wadah.
5. Ikan dipelihara selama 7 hari dan diberi pakan pelet secara adlibitum.
6. Penginfeksian bakteri Aeromonas hydrophila dengan kepadatan
108
cfu/mL sebanyak 0,1 mL dengan cara menyuntikkan pada tubuh ikan
secara intramuscular.
7. Ekstrak daun nangka dipersiapkan sesuai perlakuan yaitu 20 ppm, 30 ppm,
40 ppm, 50 ppm (Lampiran 3).
8. Pengamatan gejala klinis. Jika gejala klinis telah nampak, baru dilakukan
perendaman dengan ekstrak daun nangka sesuai perlakuan selama 48 jam.
9. Setelah 48 jam perendaman, air pemeliharaan diganti dengan air baru tanpa
diberi ekstrak daun nangka selama masa pemeliharaan.
10. Pada masa pemeliharaan dilakukan penyiponan dan pergantian air.
11. Pemberian pakan pelet komersil secara adlibitum dengan frekuensi dua kali
sehari yaitu pukul 08.00 dan 16.00 WIB.
12. Pengamatan kelangsungan hidup dilakukan setiap hari selama masa
pengobatan (2 hari) dan masa pemeliharaan (14 hari).
3.5 Parameter yang Diamati
3.5.1 Gejala Klinis
Gejala klinis yang diamati adalah kerusakan tubuh dan tingkah laku ikan
yang mencakup respon terhadap pakan dan uji refleks (respon terhadap kejutan)
dengan cara mengetuk kaca akuarium. Perubahan gejala klinis yang disebabkan
oleh serangan bakteriAeromonas hydrophila yaitu warna tubuh ikan menjadi agak
gelap, kulit kasar dan timbul pendarahan selanjutnya menjadi borok, kemampuan
berenang turun dan sering megap-megap di permukaan air karena insang rusak
dan sulit bernapas, perut terlihat agak kembung, seluruh sirip rusak dan berwarna
keputihan, serta mata rusak dan agak menonjol (Cahyono 2011). Pengamatan
dilakukan setiap hari selama masa pengobatan (2 hari) dan masa pemeliharaan
(14 hari).
7/23/2019 nangka contoh
36/49
26
3.5.2 Kelangsungan Hidup
Kelangsungan hidup ikan mas diamati dengan cara menghitung jumlah
ikan yang mati setiap hari selama masa pengobatan. Rumus kelangsungan hidup
Effendie (1997) :
=
%
Keterangan: KH = Tingkat kelangsungan hidup ikan (%)
Nt = Jumlah ikan uji yang hidup pada akhir penelitian (ekor)
No = Jumlah ikan uji yang hidup pada awal penelitian (ekor)
3.5.3 Kualitas Air
Parameter kualitas air yang diukur antara lain suhu, pH, DO, dan amoniayang diukur dua kali, yaitu pada tahap awal penelitian (hari pertama), tahap
pertengahan penelitian (hari ketujuh), dan pada tahap akhir penelitian (hari
keempat belas).
3.6 Analisis Data
Pengaruh perlakuan perendaman benih ikan mas dalam ekstrak daun
nangka terhadap kelangsungan hidup dianalisis menggunakan Anova (Analisis of
Variance) atau uji F dan jika terdapat pengaruh pada perlakuan dilanjutkan
dengan uji jarak berganda Duncan pada taraf kepercayaan 95 % (Gasperz 1991).
Gejala klinis yang terjadi dianalisis secara deskriptif.
7/23/2019 nangka contoh
37/49
27
DAFTAR PUSTAKA
Ajizah, A. 2004. Sensitivitas Salmonella typhimurium Terhadap Ekstrak Daun
Jambu Biji (Psidium guajava) Bioscientie. Vol. 1, No 1. Program Studi
Biologi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat
Angka, S. L. 2004. Penyakit Motil Aeromonas Septicemia Pada Ikan Lele Dumbo
Clarias sp. Forum Pascasarjan. Vol :27
Aryo. 2007. Artoindonesianin untuk Anti tumor.
http://ariyo.wordpress.com/category/kimia/page/3/. Diakses pada tanggal 2
Maret 2013.
Bachtiar, E., Mulyani, Y., dan Angraeni, S., R. 2010. Petunjuk Praktikum Kimia
Bahan Hayati Laut. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas
Padjajaran.
Boyd, C. E. 1982. Water Quality in Warm Fish Pond. Auburn University,
Agricultural Experiment Nation, Alabama. 359 hal.
Cahyono, B. 2011.Budidaya Ikan di Perairan Umum. Yogyakarta : Kanisius
Chandrika, U. G. I., Wedage, W. S., Wokramasinghe, S. M. D. N1 dan Fernando
W. S2. 2006. Hypoglycaemic Action Of The Flavonoid Fraction
Of Artocarpus heterophyllus Leaf . Srilanka : University of
Jayewardenepura
Djarijah, S, A. 2011. Pembenihan Ikan Mas. Yogyakarta : Kanisius
Effendie, H. 2003. Telaah Kualitas Air Bagi Pengelolaan Sumber Daya dan
Lingkungan Perairan. Yogyakarta : Kanisius
Effendie, M. 1997.Biologi Perikanan. Yogyakarta : Yayasan Pusat Nusatama
Eidman, M. K., Sumawidjaja, S. dan Hardjosworo, A. S. L. 1981. Wabah
Penyakit Bercak Merah Ikan. Laporan Kelompok Kausal Team Crash
Program Penanggulangan Epidemi Penyakit Ikan. Institut Pertanian
Bogor.
Ersam, T. 2001. Senyawa Kimia Mikromolekul Beberapa Tumbuhan Artocarpus
Hutan Tropika Sumatra Barat. Bandung : Institut Teknologi Bandung.
Fujaya Y. 2004. Fisiologi Ikan. Rineka Cipta: Jakarta.
Gaspersz, V. 1991. Metoda Peancangan untuk Ilmu-Ilmu Pertanian dan Ilmu-
ilmu Teknik Biologi. Bandung : CV Armico.
Herwig, N. 1979. Handbook of Drugs and Chemicals used in the Treatment of
Fish Disease. United States of America: Charles C. Thomas
7/23/2019 nangka contoh
38/49
28
Holt, J. G. dan Krieg N. R., Sneath P. H. A., Staley J. T. 1994. Bergeys Manual
of Determinative Bacteriology. United States of America Baltimore:
Williams & Wilkins Company.
Hutapea, J. R. 1993.Inventaris Tanaman Obat Indonesia,edisi II. Jakarta: Depkes
RI Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.
Leuschner, R. G. K. dan Zamparini, J. 2002. Effects of spices on growth and
survival of Escherichia coli 0157 and Salmonella enterica serovar
Enteritidis in broth model systems and mayonnaise. Food Control 13: 399
404.
Kabata, Z. 1985. Parasites And Diseases Of Fish Cultured In The Tropics. Taylor
And Francis London Philadelphia. Page 92 107.
Kamiso, H. N. dan Triyanto. 1993. Vaksinasi Aeromonas hydrophila untuk
Menanggulangi Penyakit MAS pada Lele Dumbo. Abstrak. SimposiumPerikanan Indonesia I. Jakarta.
Khairuman, H. dan Amri, K. 2011. Buku Pintar Budidaya dan Bisnis 15 Ikan
Konsumsi. Jakarta : AgroMedia Pustaka.
Kompas. 2013. Penanganan Resistensi Antibiotik Mendesak.
http://health.kompas.com/read/2013/02/25/10401158/Penanganan.Resisten
si.Antibiotik.Mendesak. Diakses pada tanggal 10 Maret 2013.
Krieg, N. R. dan Holt J. G. 1984.Bergeys Manual of Systematic Bacteriology. Ed
ke-1.United States of America Baltimore: Williams & Wilkins Company.
Maharani, F. dan Supriadi, H. 2006. Evaluasi Potensi Penggunaan BeberapaMateri Bahan Alami Bagi Upaya Penanggulangan Penyakit Ikan Gurame
(Osphronnemus gouramy). Prosiding Seminar Nasional Tahunan III Hasil
Penelitian Perikanan Dan Kelautan, Yogyakarta. halaman : 227 235.
McDaniel, D. 1979. Procedures For Detection And Identification Of Certain Fish
Patogen. Reviced. Fish Health American Fisheries Society. Page 42 82.
Pikiran Rakyat. 2008a. Lima Ton Ikan Mas Mati di Waduk Cirata.
http://www.pikiran-rakyat.com/node/78516. Diakses pada tanggal 10
Maret 2013.
Pikiran Rakyat. 2013b. Harga Ikan Air Tawar di Kuningan Melonjak.http://m.pikiran-rakyat.com/node/222954. Diakses pada tanggal 11 Maret
2013.
Pleczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid 1.
Jakarta: Univeristas Indonesia
7/23/2019 nangka contoh
39/49
29
Prakash, Om., K. Rajesh., Anurag, M. dan Rajiv, G. 2009.
Artocarpus heterophyllus (Jackfruit): An overview. India : Review Article
Vol.3 Issue 6 page 353-358
Rahman, M. F. 2008. Potensi Antibakteri Ekstrak Daun Pepaya Pada Ikan
Gurami Yang Diinfeksi Bakteri Aeromonas hydrophila. Fakultas
Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Penerjemah
Padmawinata K. Bandung : Institut Teknologi Bandung
Rukmana, R. 2008.Budidaya Nangka. Yogyakarta: Kanisius
Sismeiro et al. 1998. Aeromonas hydrophila Adenylyl Cyclase: a New Class of
Adenylyl Cyclase with Thermophilic Properties and Sequences
Similiarities to Proteins From Hyperthermophilic Archaebacteria. J
Bakteriol 180: 3339-3344.
Sudarma, J. H. 2012. Pembibitan Tanaman Buah Mudah Murah & Hasil
Melimpah. Jakarta : Bola Bintang Publishing.
Sugianti, B. 2005. Pemanfaatan Tumbuhan Obat Tradisional Dalam
Pengendalian Penyakit Ikan. Institut Pertanian Bogor.
Sugoro, I.I. Gobel, N. Lelananingtyas dan W. T. Sasongko. 2004. Pengaruh
Variasi Konsentrasi Tanin Terhadap Produksi Gas Secara In Vitro.
Prosding Presentasi Ilmiah Keselamatan dan Radiasi Lingkungan X.
Puslitbang Teknologi Isotop dan Radiasi. Batan.
Sukadi, F. 2004. Kebijakan Pengendalian Hama Dan Penyakit Ikan DalamMendukung Akselerasi Pengembangan Perikanan Budidaya. Seminar
Nasional Penyakit Ikan dan Udang IV di Univ. Jenderal Soedirman,
Purwokerto, 18 19 Mei 2004.
Sukamto. 2007. Cara-Cara Pengobatan Ikan dengan Menggunakan Ekstrak
Tanaman Herbal. Warta Puslitbangbun. Vol. 13 No. 3
Sunarjono, H. 2010.Berkebun 21 Jenis Tanaman Buah. Jakarta: Penebar Swadaya
Supryadi, H. dan A. Rukyani, 1990. Imunoprofilaksis dengan Cara Vaksinasi
Pada Usaha Budidaya Ikan. Prosding Seminar Nasional II Penyakit Ikan
dan Udang. Balai Penelitian Perikanan Air Tawar. Bogor.Tarigan J. Br., Zuhra, J. F. dan Sihotang, H. 2008. Skirining Fitokimia Tumbuhan
Yang Digunakan Oleh Pedagang Jamu Gendong Untuk Merawat Kulit
Wajah Di Kecamatan Medan Baru. Sumatra : Universitas Sumatara Utara.
Tim Lentera. 2002. Pembesaran Ikan Mas di Kolam Air Deras. Jakarta : PT
AgroMedia Pustaka.
7/23/2019 nangka contoh
40/49
30
LAMPIRAN
7/23/2019 nangka contoh
41/49
31
Lampiran 1. Pembuatan Ekstrak Daun Nangka
(a) (b) (c)
(d) (e)
Keterangan :
(a) Daun nangka segar dicuci kemudian dikeringkan (kering udara) 4 - 7 hari.
(b) Daun nangka kering dihaluskan dengan cara diblender.
(c) Daun nangka halus direndam dengan etanol 96 % selama 24 jam.
Perendaman dilakukan 3 kali.
(d) Supernatan diambil, kemudian dievaporasi dengan vakum rotavapour pada
suhu 600
C dengan kecepatan 120 rpm.
(e) Ekstrak daun nangka siap pakai.
7/23/2019 nangka contoh
42/49
32
Lampiran 2. Uji Fitokimia Daun Nangka
No. Zat yangDiuji
Proses Pengujian Hasil Positif Gambar
1. Alkaloid 1 g sampel dilarutkan dalam 5 mL
kloroform, ditambah 3 tetes ammonia(NH4OH) 10% lalu dikocok. Lapisan
klorofom diambil kemudian dilarutkan
dalam 1 mL H2SO4 2N, dikocok,ditambahkan satu tetes pereaksi Meyer
(Kl+HgCl2).
Terbentuk
endapan putih
2. Flavonoid 1 g sampel dihaluskan kemudian
dididihkan dengan 25 mL metanol
selama 10 menit, disaring dan pelarutdiuapkan sampai kering. Ditambahkankloroform dan air suling (1:1) sebanyak
5 mL, dikocok dan didiamkan hinggaterbentuk dua lapisan kloroform air
(lapisan kloroform di bawah dan lapisanair di bagian atas). Lapisan air diambil
kemudian ditambahkan 0,1 g bubuk
magnesium, 5 tetes asam klorida pekatdan amil alkohol.
Terbentuk warna
kuning
kemerahansampai merah
3. Saponin 1 g sampel dimasukan kedalam beakerglass dan ditambahkan 20 mL akuades
kemudian dipanaskan selama 5 menitdan disaring dalam keadaan panaskemuidan filtrat tersebut diambil
sebanyak 10 mL dan dikocok dengan
kuat secara vertikal selama 10 detik.
Terbentuk busayang stabil tidak
kurang dari 1 -10cm, tidak hilangpada penambahan
satu tetes HCl 2N
4. Tanin 2 mL filtrat hasil penyaringan pada uji
saponin dimasukan ke dalam tabungreaksi dan ditambahkan 1 2 tetespereaksi FeCl3 1%.
Terbentuk warna
biru tua atau hijaukehitaman
Sumber : Bachtiar dkk 2010
7/23/2019 nangka contoh
43/49
33
Lampiran 3. Pembuataan Konsentrasi Ektrak Daun Nangka
Pembuatan konsetrasi ektrak daun nangka untuk uji zona hambat :
0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml
larutan stok larutan stok larutan stok larutan stok
9
0,9 ml 0,9 ml 0,9 ml 0,9 ml
akuades akuades akuades akuades
100.000 ppm 10.000 ppm 1000 ppm 100 ppm 10 ppm
(0,1 g ektrak +
0,9 ml akuades)
Pembuatan konsetrasi ektrak daun nangka untuk uji zona LC50 :
A = 600 ppm = 600 mg/L = 9 g/15 L
B = 300 ppm = 300 mg/L = 4,5 g/15 L
C = 100 ppm = 100 mg/L = 0,15 g/15 L
D = 50 ppm = 50 mg/L = 0,75 g/15 L
Pembuatan konsentrasi ekstrak daun nangka untuk penelitian utama
B = 20 ppm = 20 mg/L = 0,3 g/15 L
C = 30 ppm = 30 mg/L = 0,45 g/15 L
D = 40 ppm = 40 mg/L = 0,6 g/15 L
E = 50 ppm = 50 mg/L = 0,75 g/15 L
7/23/2019 nangka contoh
44/49
34
Lampiran 4. Pembuatan MediaNutrien Agar (NA)
Bahan
NA (28 g/L) = 1,05 g
Aquades = 37,5 ml
Cara Pembuatan Media NA:
Memasukan NA dan aquades kedalam labu Erlenmeyer
Memasukan magnetik stirer agar NA dan akuades homogen kemudian ditutup
dengan alumunium foil.
Memanaskan larutan pada hotplates sampai mendidih.
Memasukan media kedalam autoclavepada suhu 1210C pada tekanan 1 atm
selama 15 menit.
7/23/2019 nangka contoh
45/49
35
Lampiran 5. Pembuatan larutan bakteri kepadatan 108
cfu/mL dengan
Spektrofotometer
Langkah-langkah pembuatan larutan bakteri kepadatan 108
cfu/mL dengan
menggunakan spektrofotometer adalah sebagai berikut :
1. Isolasi Aeromonas hydrophila dari media NA dari tabung reaksi.
Penumbuhannya di cawan petri yang sudah berisi media NA.
2. Inkubasi dalam inkubator pada suhu 270C selama 24 jam.
3. Pemanenan bakteri secara aseptik kedalam Falcon Centrifuge Tube yang
telah berisi larutan NaCl fisiologis.
4. Penghitungan kepadatan dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang
540 nm dan absorban (OD) 0,235
5. Apabilah belum diperoleh nilai OD tersebut, penambahan larutan NaCl
fisiologis atau stok bakteri harus dilakukan hingga diperoleh absorban 0,235.
6. Dari pengukuran dapat diasumsikan bahwa OD 0,235 setara dengan
kepadatan bakteri 108cfu/mL
7/23/2019 nangka contoh
46/49
36
Lampiran 6. Gambar Uji Zona Hambat
Hasil Uji Zona Hambat
(a) (b) (c)
(d) (e) (f)
Keterangan :
(a) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 100.000 ppm
(b) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 10.000 ppm
(c) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 1000 ppm
(d) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 100 ppm
(e) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 10 ppm
(f) Zona bening pada konsentrasi 10.000 ppm 1000 ppm, 100 ppm
(ampisilin/kontrol)
7/23/2019 nangka contoh
47/49
37
Lampiran 7. Uji LC50 Perendaman Ekstrak Daun Nangka
a. Prosedur
Rancangan percobaan untuk ekstrak herbal daun nangka pada benih ikan
mas masing-masing 15 ekor menggunakan 4 perlakuan dengan 2 ulangan, lama
waktu pemeliharaan selama 2 hari, dengan prosedur kerja:
Benih ikan mas direndam menggunakan ekstrak daun nangka dengan
konsentrasi yang berbeda, diamati kematian ikan setiap jam untuk
perhitungan menentukan LC50
b. Hasil Analisis Probit
Analisis nilai toksisitas (LC50) dengan menggunakan Software Epa
Probhit Analysis Version 1,5
EPA PROBI T ANALYSI S PROGRAMUSED FOR CALCULATI NG LC/ EC VALUES
Ver si on 1. 5
LC50 daun nangka
Propor t i onObserved Respondi ng Predi ct ed NumberNumber Pr oport i on Adj ust ed f or Proport i on
Conc. Exposed Resp. Respondi ng Cont r ol s Respondi ng
50. 0000 30 0 0. 0000 0. 0000 0. 0889100. 0000 30 20 0. 6667 0. 6667 0. 4857300. 0000 30 28 0. 9333 0. 9333 0. 9795600. 0000 30 30 1. 0000 1. 0000 0. 9996
Chi - Squar e f or Het er ogenei t y ( cal cul at ed) = 10. 058Chi - Squar e f or Het er ogenei t y
( t abul ar val ue at 0. 05 l evel ) = 5. 991Mu = 2. 008218
Si gma = 0. 229437
Par amet er Est i mat e St d. Er r . 95% Conf i dence Li mi t s- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- - - - - - - - - -I nt ercept - 3. 752818 3. 349210 ( - 18. 164467, 10. 658831)Sl ope 4. 358500 1. 689636 ( - 2. 912002, 11. 629004)
Theor et i cal Spontaneous Response Rat e = 0. 0000
7/23/2019 nangka contoh
48/49
38
Lampiran 7. (lanjutan)
LC50 daun nangka
Est i mated LC/ EC Val ues and Conf i dence Li mi t s
Poi nt Exposur e Concent r at i onLC/ EC 1. 00 29. 818LC/ EC 5. 00 42. 738LC/ EC 10. 00 51. 781LC/ EC 15. 00 58. 943LC/ EC 50. 00 101. 910LC/ EC 85. 00 176. 200LC/ EC 90. 00 200. 569LC/ EC 95. 00 243. 007LC/ EC 99. 00 348. 302
Analisis nilai toksisitas (LC50) dengan menggunakan Software Epa
Probhit Analysis Version 1,5 untuk perendaman ekstrak daun nangka terhadap
benih ikan mas adalah 101.910 ppm.
7/23/2019 nangka contoh
49/49
39
Lampiran 8. Tata Letak Perlakuan
Keterangan : A, B, C, D, dan E = Perlakuan
1, 2, 3 = Ulangan
E1
A 1
D2
D1
B2
E2
B1
C2
C 1
A 2
A3
D3
E 3
B 3
C3