Laporan Lengkap Kimia Analisis II

PERCOBAAN IPENETAPAN KADAR SENYAWA YANG MEMILIKI WARNA ASLI

PENENTUAN KADAR SENYAWA YANG MEMILIKI WARNA ASLI

A. TUJUAN Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mentukan kadar senyawa yang memiliki warna asli dengan menggunakan spektrofotometri UV.

B. LANDASAN TEORIDalam bidang farmasi, pemeriksaan mutu obat sangat diperlukan agar obat dapat sampai pada titik tangkapnya dengan kadar yang tepat, sehingga dapat memberikan efek terapi yang diinginkan, antara lain digunakan dalam golongan obat antibiotik. ini terjadi karena pemakaian antibiotik dengan kadar atau dosis yang tidak tepat akan menyebabkan timbulnya bakteri atau mikroba menjadi resistensi terhadap antibiotik tersebut (Susidarti, 2008).Spektrofotometri UV-Visibel merupakan metode spektrofotometri yang didasarkan pada adanya serapan sinar pada daerah ultra violet (UV) dan sinar tampak (Visibel) dari suatu senyawa. Senyawa dapat dianalisis dengan metode ini jika memiliki kemampuan menyerap pada daerah UV atau daerah tampak. Senyawa yang dapat menyerap intensitas pada daerah UV disebut dengan kromofor, sedangkan untuk melakukan analisis senyawa dalam daerah sinar tampak, senyawa harus memiliki warna (Fatimah, 2003).Spektrofotometri serap merupakan suatu metode pengukuran interaksi antara radiasi elektromagnetik panjang gelombang tertentu yang sempit dan mendekati cahaya monokromatik, dengan molekul atau atom dari suatu zat kimia. Spektrofotometri UV-Vis digunakan untuk menganalisis secara kuantitatif dan juga analisa kualitatif. Penggunaan untuk analisa kuantitatif didasarkan pada hukum Lambert-Beers yang menyatakan hubungan empirik antara intensitas cahaya yang ditransmisikan dengan tebalnya larutan (Hukum Lambert /Bouguer), dan hubungan antara intensitas tadi dengan konsentrasi zat (Hukum Beers) (Hendry, 2002).Pengukuran konsentrasi cuplikan didasarkan pada hukum Lambert-Beer, yang menyatakan hubungan antara banyaknya sinar yang diserap sebanding dengan konsentrasi unsur dalam cuplikan, dengan rumus sebagai berikut: atau A = a.b.cdengan A = absorbansi, a = koefisien serapan molar, b = tebal media cuplikan yang dilewati sinar, c = konsentrasi unsur dalam larutan cuplikan, Io = intensitas sinar mula-mula, I = intensitas sinar yang diteruskan. Aplikasi rumusan tersebut dalam pengukuran kuantitaf dilaksanakan dengan cara komparatif menggunakan kurva kalibrasi dari hubungan konsentrasi deret larutan standar dengan nilai absorbansinya. Konsentrasi cuplikan ditentukan dengan substitusi nilai absorban cuplikan ke dalam persamaan regresi dari kurva kalibrasi (Dalimunthe, 2011). Rivanol merupakan zat kimia (etakridin laktat) yang berbentuk serbuk hablur , berwarna kuning, rasa pahit dan tidak berbau. Serta rivanol larut dalam 50 bagian air, 90 bagian air panas dan 100 ml etanol 95% P mendidih yang tersimpan dalam wadah yang tertutup baik (Dirjen POM, 1979).

C. ALAT DAN BAHAN1. AlatAlat-alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Beker gelas 200 ml Filler Gelas ukur Gelas kimia Labu takar 25 ml, 100 ml dan 500 ml Botol semprot Pipet tetes Mikropipet Kuvet Timbangan analitik Spektrofotometer UV

2. Bahan Bahan-bahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Asam sulfat Akuades Rivanol

3. Uraian Bahana. Rivanol (Dirjen POM, 1979. : 62)Nama resmi: Aethacridini LactasNama lain: RivanolRM: C18H21N3O4H2OPemerian: Serbuk hablur, kuning, tidak berbau, rasa sepat dan pahit Kelarutan: Larut dalam 50 bagian air, dalam 9 bagian air panas dan dalam 100 ml etanol (95%)P mendidih Penyimpanan: Dalam wadah tertutp rapatKegunaan: Antiseptik b. Asam Sulfat (Dirjren POM, 1979. : 58)Nama resmi: Acidum SulfuridumNama lain: Asam sulfatRM/BM: H2SO4/98,7Pemerian: Cairan kental seperi minyak, korosif dan tidak berwarna, menimbulkan panas jika ditambahkan airKelarutan: Larut dalam air dan dalam etanolPenyimpanan: Dalam wadah tertutup rapatKegunaan: Zat tambahan

c. Akudes (Dirjen POM, 1979. : 96)Nama resmi: Aqua DestillataNama lain: Air SulingRM/BM: H2O/18,2Pemerian: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbauKelarutan: Larut dalam pelarut organik polarPenyimpanan: Dalam wadah tertutup baikKegunaan: Zat tambahan

D. Prosedur Kerja1. Pembuatan larutan H2SO4 0,1 NAsam sulfat pekat

Diambil sebanyak 1,39 ml menggunakan filler Dimasukkan ke dalam labu takar 500 ml Ditambahkan air hingga tanda tera Dikocok perlahan-lahanLarutan H2SO42. Pembuatan larutan induk dari rivanol murni Rivanol murni

Ditimbang sebanyak 0,1 gram Dimasukkan ke dalam gelas kimia 250 ml Ditambahkan larutan H2SO4 0,1 N Diaduk menggunakan batang pengaduk Dimasukkan kedalam labu takar 100 ml Diencerkan menggunakan H2SO4 0,1 N hingga tanda tera Dikocok perlahan-lahan Larutan induk rivanol

3. Pembuatan larutan baku dari sampel rivanol murniSampel rivanol murni

Dipipet sebanyak 0,75 ml menggunakan mikropipet Dimasukkan kedalam labu takar 25 ml Diencerkan dengan menggunakan H2SO4 0,1 N hingga tanda tera Dikocok perlahan-lahan Larutan baku dari sampel rivanol murni

4. Penetapan kadar sampel dengan menggunakan spektrofotometri Larutan baku rivanol murni

Dipipet kedalam kuvet menggunakan pipet tetes hingga tanda tera Ditentukan kadarnya pada panjang gelombang 410 nm, menggunakan larutan H2SO4 0,1 N sebagai larutan blanko Diulangi perlakuan yang sama pada sampel rivanol 0,075 mg/ml

E. Hasil Pengamatan

1. Tabel pengamatanNoPerlakuanHasil

1Larutan blanko H2SO4 diukur absorbansinya pada panjang gelombang 410 nm1,456 A

2Sampel diukur absorbansinya pada panjang gelombang 410 nm1,061 A

3Larutan baku rivanol diukur absorbansinya pada panjang gelombang 410 nm1,068 A

4Kadar rivanol dalam larutan baku diukur absorbansinya pada panjang gelombang 410 nm0,075 mg/ml

2. Perhitungan Dik : Absorbansi blanko: 1,456 AAbsorbansi sampel: 1,061 AAbsorbansi larutan baku: 1,068 AKonsentrasi larutan baku: 0,075 ADit :Konsentrasi sampel?Peny : Konsentrasi saapel x Konsentrasi bakuKonsentrasi sampel x 0,075 mg/ml = 0,0745 mg/ml

F. Pembahasan Kimia analitik dalam bidang analisis di bagi menjadi dua yaitu analisis kualitatif dan analisis kuantitatif. Analisis kualitatif merupakan suatu bentuk analisis yang berhubungan dengan identifikasi zat zat yang ada dalam suatu sampel sehingga kandungan kimia yang ada didalamnya akan dapat diketahui. Sedangkan analisis kuantitatif merupakan analisis yang berkaitan dengan penetapan kadar atau banyaknya suatu zat yang terkandung di dalam suatu sampel. Penentuan baik secara kualitatif maupun kuantitatif dapat dilakukan dengan metode spektrofotometri, kromatografi, titrimetri, dan sebagainya.Spektrofotometri adalah suatu metode analisis yang berdasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang yang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dan detector vacuum phototube atau tabung foton hampa. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer, merupakan suatu alat yang digunakan untuk menentukan dan menetapkan suatu senyawa baik secara kuantitatif maupun kualitatif dengan mengukur transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsi dari konsentrasi. Pada titrasi spektrofotometri, sinar yang digunakan merupakan satu berkas yang panjangnya tidak berbeda banyak antara satu dengan yang lainnya. Prinsip kerja spektrofotometer ini adalah bila cahaya (monokromatik maupun campuran)jatuh pada suatu medium homogen, sebagian dari sinar masuk akan dipantulkan, sebagian di serap dalam medium itu, dan sisanya diteruskan. Nilai yang keluar dari cahaya yang diteruskan dinyatakan dalam nilai absorbansi karena memiliki hubungan dengan konsentrasi sampel.Penentukan kadar senyawa yang memiliki warna asli dalam percobaan ini digunakan rivanol. Rivanol merupakan suatu senyawa yang yang mempunyai sifat bakteriostatik (menghambat pertumbuhan kuman) biasanya efektif pada kuman gram positif daripada gram negatif. Sifat tidak terlalu menimbulkan iritasi. Sebelum kadar rivanol ditentukan terlebih dahulu dibuat larutan asam sulfat 0,1 N yang dilarutkan dalam akuades. Pembuatan larutan ini bertujuan untuk melarutkan rivanol secara menyeluruh. Setelah itu di buat larutan induk rivanol yang dilarutkan dalam asam sulfat 0,1 N dan dari larutan induk dibuatkan larutan baku atau larutan standar. Larutan standar merupakan larutan yang telah diketahui konsentrasinya yang berfungsi menghasilkan kurva kalibrasi pada pengukuran nantinya. Lalu dibuat larutan sampel. Pembuatan larutan sampel menggunakan bahan obat yang mengandung rivanol dengan dilarutkan dalam larutan asam sulfat 0,1 N.Penetuan kadar senyawa rivanol menggunakan metode spektrovotometri UV yang didasarkan pada adanya serapan sinar pada daerah ultra violet (UV) dari suatu senyawa. Senyawa dapat dianalisis dengan metode ini jika memiliki kemampuan menyerap pada daerah UV atau daerah tampak. Senyawa yang dapat menyerap intensitas pada daerah UV disebut dengan kromofor. Penggunaan metode spektrofotometri UV pada penentuan kadar rivanol dikarenakan rivanol merupakan senyawa yang memiliki warna asli dimana terdapat gugus ausokrom yang membantu menyerap intensitas cahaya sehingga dapat berikatan dengan gugus kromofor untuk menghasilkan atau membentuk warna. Dan juga penentuan kadar senyawa rivanol membutuhkan energi yang besar untuk dapat mengeksitasi eketronnya untuk mampu menyerap cahaya sehingga membutuhkan panjang gelombang yang kecil yaitu antara 200 nm 400 nm. Panjang gelombang yang kecil terdapat pada spektrofotometri UV sehingga digunakanlah metode spektrofotometri UV.Dengan menggunakan metode spektrofotometri dapat ditentukan nilai konsentrasi suatu sampel. ini sesuai dengan hokum lambert beer, dimana sampel yang encer dan disinari cahaya monokromatik, absorbansi berbanding lurus dengan konsentrasi. Nilai absorbansi dari sampel rivanol adalah 1.061 A dan absorbansi blanko sebesar 1,456 A. Konsentrasi baku sebesar 0,075 mg/ml, sehingga kadar rivanol yang diperoleh dengan menggunakan data tersebut adalah 0,0745 mg/ml.

G. Kesimpulan Dari hasil percobaan yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa kadar rivanol dalam sediaan obat yang ditentukan dengan metode spektrofotometri UV sebesar 0,0745 mg/ml

PERCOBAAN IIPENETAPAN KADAR SENYAWA TIDAK BERWARNA (TETAPI MEMILIKI KROMOFOR) SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRA-VIOLET)

PENETAPAN KADAR SENYAWA YANG TIDAK BERWARNA (TETAPI MEMILIKI KROMOFOR) SECARA SPEKTROFOTOMETRIULTRA-VIOLET (UV)

A. TUJUAN Tujuan untuk mengetahui senyawa yang tidak berwarna (tetapi memiliki kromofor) secara spektrofotometri ultraviolet (UV).

B. LANDASAN TEORISpektrofotometri UV-Visibel adalah alat yang umum digunakan dalam laboratorium kimia. Alat ini biasanya digunakan untuk analisa kimia kuantitatif.Namun dapat juga digunakan untuk analisa semi kuantitatif. Spektrofotometri adalah alat yang terdiri dari spektrofotometer dan fotometer. Spektrofotometer menghasilkan sinar dengan panjang gelombang tertentu, dan fotometer megukur intensitas sinar. Suatu spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum yang kontinyu monokromator, sel pengabsorpsi untuk sampel serta blanko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorbsi antara sampel dengan blanko tersebut (Huda, 2001).Setelah analisis dengan menggunakan kedua eluen dan reaksi warna, dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum dari larutan baku pembanding dalam etanol 96% dengan spektrofotometri UV-VIS panjang gelombang yang diperoleh akan digunakan untuk identifikasi densitametri (Hidayati, 2007).Selain gelombang cahaya tampak, spektrofotometer juga menggunakan panjang gelombang pada panjang gelombang ultra violet dan inframerah. Dimana jumlah cahaya yang diabsorpsi oleh larutan sebanding dengan konsetrasi kontaminan dalam larutan yang menghubungkan antara absorbannsi dengan cahaya konsentrasi pada suatu bahan yang mengabsorpsi (Lestari, 2010)Struktur azo sebagai komponene atau senyawa azo adalah senyawa organic yang mengandung gugus N=N- terikat pada gugus lain. Zat warna harus terdiri dari kromofor dan ausokrom. Zat golongan azo merupakan gugus zat warna yang memiliki kromofor. Kromofor adalah senyawa yang memberikan zat warna, bukan sebagai zat warna karena kain yang terkena warna ini akan terwarnai sementara dan tidak permanen, kromofor akan terikat dalam bahan bila ada radikal yang mengikatnya yaitu ausokrom (Lestari, 2010).

C. ALAT DAN BAHAN 1. AlatAlat-alat yang digunakan pada percobaan ini adalah: Batang pengaduk Gelas kimia Gelas piala Pipet mikro Pipet tetes Spektrofotometri UV Sendok tanduk Labu takar 100 ml Timbangan analitik2. BahanBahan-bahan yang digunakan pada percobaan ini adalah: Akuades Alkohol Sulfadiazine murni Tissu Trisulfa (mengandung sulfadiazine

3. Uraian Bahan a. Sulfadiazine (Dirjen POM, 1979) 579 Nama resmi: Sulfadiazinum Nama lain: Sulfadiazin BM: 250, 27 Rumus molekul: C10H10N4O2S Pemerian : Serbuk putih sampai agak kuning, tidak berbau atau hampir tidak berbau, stabil diudara tetapi pada pemaparan terdapat cahaya perlahan-lahan menjadi hitam.Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air mudah larut dalam asam mineral encer, dalam larutan kalsium hidroksida, dalam larutan natrium hidroksida, amonium hidroksida, agar sukar larut dalam etanol dan dalam aseton: sukar larut dalam serum manusia pada suhu 37o.Penyimpanan: Dalam wadah tertutup baik.Khasiat: Sebagai antibiotik.b. Etanol (Dirjen POM, 1979) 65Nama lain: Etyl alkoholNama lain: AlkoholBM: 46, 07Rumus molekul: C2H5OHPemerian : Cairan jernih, berbau khas dan menyebabkan rasa terbakar pada lidah.Kelarutan : Bercampur dengan air dan praktis bercampur dengan pelarut organik.Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik.Khasiat : Sebagai antiseptik topikal, pelarut organik.c. Akuades (Dirjen POM, 1979) 96Nama resmi: Aqua destilataNama lain : Air sulingBM: 18, 02/H2OPemerian : Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, tidak mempunyai rasa.Penyimpanan: Dalam wadah tertutup baikKegunaan: Sebagai pelarut

D. PROSEDUR KERJA 1. Pembuatan Larutan Induk Sulfadiazine murni

Ditimbang sebanyak 100 mg Dimasukkan dalam gelas kimia Dilarutkan dengan alkohol 70% sedikit demi sedikit Dimasukkan dalam labu takar 100 ml Diencerkan dengan etanol hingga tanda tera

Larutan sulfadiazine 100 ml (Larutan Induk) 2. Pembuatan Panjang Gelombang Maksimum ( max)Larutan Induk

Dipipet sebanyak 100 ml dengan menggunakan mikropipet 25 ml sebanyak 4 kali Dimasikkan kedalam labu takar 25 ml Diencerkan dengan alkohol 70% hingga tanda tera Dimasukkan kedalam erlenmeyer Ditentukan panjang gelombangnya

max= 210 nm

3. Pembutan Kurva Baku Larutan Induk

Diambil 0,1 l sebanyak 10 pipet Dimasukkan dalam labu takar 25 ml Diencerkan dengan alkohol 70% hingga tanda teraLI 250 l

Diambil 0,1 l sebanyak 8 pipet Dimasukkan dalam labu takar 25 ml Ditambahkan dengan alkohol 70% hingga tanda teraLI 250 l




Diukur masing-masing absorbansi larutan diatas pada spektrofotometri UV pada panjang gelombang 270 nm.

Standar I= 0, 169Standar II= 0, 338Standar III= 0, 507Standar IV= 0, 679Standar V= 0, 8444. Pembuatan Larutan StandarSulfadiazin Sampel

Digerus menggunakan mortal dan alu Ditimbang sebanyak 100 mg Dimasukkan dalam gelas kimia 100 ml Ditambahkan alkohol sedikit demi sedikit Dimasukkan kedalam labu takar 100 ml Diencerkan dengan akuades sampai tanda tera Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometri UV-VIS pada panjang gelombang 270 nm 0,391

F. PEMBAHASANSpektrofotometri merupakan metode analisis yang didasarkan pada besarnya nilai absorbansi suatu zat terhadap radiasi sinar elektromagnetik. Prinsip kerja spektrofotometri adalah dengan menggunakan spektrofotometer yang pada umumnya terdiri dari unsur-unsur seperti sumber cahaya, monokromator sel, fotosel dan detektor. Suatu senyawa hanya dapat dianalisis menggunakan spektrofotometer apabila senyawa tersebut memiliki kromofor dan ausokrom. Gugus kromofor merupakan gugus yang menghasilkan warna atau gugus yang mengasorbsi energi dari perpindahan elektron. Gugus ausokrom yaitu gugus fungsi yang tidak mengasorbsi gelombang ultraviolet sebagaimana gugus kromofor, namun adanya ikatan gugus ausokrom pada gugus kromofor suatu senyawa dapat meningkatkan intensitas senyawa tersebut. Salah satu contoh alat instrumental yang lebih kompleks adalah spektrofotometer UV-VIS. Alat ini banyak digunakan untuk penentuan konsentrasi ultra violet (200-400nm) atau daerah sinar tampak (400-800nm). Cara kerja spektrofotometer dimulai dengan dihasilkannya cahaya monokromatik dari sumber sinar. Cahaya tersebut kemudian menuju kekuvet (tempat sampel/sel). Banyaknya cahaya yang diteruskan maupun yang diserap oleh larutan akan dibaca oleh detektor yang kemudian menyampaikan kelayar pembaca.Hukum lambert-beer yakni intensitas cahaya yang diabsorbsi oleh medium berbanding eksponensial dengan konsentrasi larutan. Adapun penyimpangan dari hukum lambert-beer antara lain: larutan pekat, pada konsentrasi larutan yang terlalu pekat, absorbansi yang terbaca terlalu tinggi, sehingga grafik tidak linear. Jadi, agar tidak terjadi tersebut sebaiknya larutan yang diukur harus encer. Kedua faktor instrumentasi, yakni sinar yang diserap tidak monokromatis sehingga menyebabkan 2 panjang gelombang maksimum.Percobaan ini mempunyai tujuan yaitu dapat menetapkan kadar senyawa tidak berwarna namun memiliki kromofor yang senyawa tersebut diubah menjadi senyawa yang berwarna hingga spektrofotometri UV. Dalam percobaan ini, sampel yang digunakan adalah trisulfa yang mengandung sulfadiazine. Sulfadiazine adalah salah satu contoh senyawa yang tidak berwarna namun memiliki kromofor. Gugus kromofor pada sulfadiazine yaitu gugus benzen yang merupakan kromofor tunggal. Pada sulfadiazine yang akan dihitung kadarnya terlebih dahulu dilariutkan dengan etanol fungsi penambahan etanol yaitu untuk membantu menghubungkan kelarutan sulfadiazine dalam air karena etanol memiliki gugus polar dan non polar. Pada gugus non polar dari etanol berikatan dengan gugus non polar sulfadiazine dan gugus polar sulfadiazine mengikat gugus polar air, sehingga sulfadiazine dapat larut. Karena pada dasarnya sulfadiazine tidak larut dalam air karena perbedaan kepolaran dimana air bersifat polar sedangkan sulfadiazine meskipun memiliki gugus polar dan non polar tetapi energi non polarnya lebih besar maka tidak dapat larut dalam air, sehingga harus diencerkan dengan menggunakan etanol. Percobaan ini penentuan kadar sampel dilakukan dengan terlebih dahulu mengukur absorbansi dari beberapa laritan baku. Larutan baku ini juga mengandung senyawa kompleks yang sama dengan konsentrasi yang telah diketahui. Langkah ini bertujuan untuk menyatakan hubungan antara konsentrasi larutan dan nilai absorbansinya dalam suatu persamaan garis yang diperoleh dari kurva standar. Dengan menggunakan kurva tersebut, kadar senyawa kompleks yang juga merupakan kadar awal sulfadiazine dalam sampel dapat ditentukan dengan memasukakkan nilai absorbansinya dalam persamman yang diperoleh dari kurva standar. Adapun kadar sulfadiazine yang terdapat pada sampel obat trisulfa diperoleh nilai absorbansi dari beberpa konsentrasi larutan baku pada panjang gelombang 270 nm yakni: pada konsentrasi 0, 05 diperoleh nilai absorbansi sebesar 0, 169, konsentrasi 0, 01 diperoleh nilai absorbansi sebesar 0, 378, konsentrasi 0, 15 diperoleh nilai absorbansi sebesar 0, 507, konsentrasi 0,20 diperoleh nilai absorbansi sebesar 0, 678 dan pada konsentrasi 0,25 diperoleh nilai absorbansinya sebesar 0, 884. Dari persamman ini diperoleh nilai y= 2, 581x+ 0, 174 sehingga didapatkan kadar sulfadiazine pada sampel sebesar 0, 219 g/ml. Pada konsentrasi larutan yang dianalisis sebanding dengan jumlah sinar yang diserap oleh zat yang terdapat dalam larutan tersebut. ini sesuai dengan teori hukum lambert-beer yang menyatakan hubungan antara serapan cahaya dengan konsentrasi zat dalam larutan berbanding lurus.

G. KESIMPULAN Berdasrkan percobaan yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa kadar sulfadiazine dalam sampel obat trisulfa sebesar 0, 219 g/ml.

PERCOBAAN IIIPENETAPAN KADAR CAMPURAN ASETOSAL DAN ASAM SALISILAT SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV

PERCOBAAN IIIPENETAPAN KADAR CAMPURAN ASETOSAL DAN ASAM SALISILAT SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV

PENETAPAN KADAR CAMPURAN ASETOSAL DAN ASAM SALISILAT SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV

A. TUJUAN Tujuan dari praktikum kali ini adalah untuk mengetahui kadar asetosal dan asam salisilat secara spektrofotometri UV.

B. LANDASAN TEORISpektrofotometri merupakan suatu meyode analisa yang didasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dengan tabung foton hampa. Metode spektrofotometri memiliki keuntungan yaitu dapat digunakan untuk menganalisa suatu zat dalam jumlah kecil (Harini dkk, 2012).Spektrofotometri UV-Visibel merupakan metode spektrofotometri yang didasarkan pada adanya serapan sinar pada daerah ultra violet (UV) dan sinar tampak (Visibel) dari suatu senyawa. Senyawa dapat dianalisis dengan metode ini jika memiliki kemampuan menyerap pada daerah UV atau daerah tampak. Senyawayang dapat menyerap intensitaspada daerah UV disebut dengan kromofor, sedangkan untuk melakukan analisis senyawa dalam daerah sinar tampak, senyawa harus memiliki warna (Fatimah, 2003).Metode pengukuran menggunakan spektrofotometri, berdasarkan absorbs cahaya pada panjang gelombang tertentu melalui suatu larutan yang mengandung kontaminan yang akan ditentukan konsentrasinya, proses ini disebut absorbsi spektrofotometri dan jika panjang gelombang yang digunakan adalah gelombang cahaya tampak, maka disebut sebagai kalorimetri karena memberikan warna. Selain gelombang cahaya tampak, spektrofotometri juga menggunakan panjang gelombang pada gelombang UV dan IR. Prinsip kerja dari metode ini adalah jumlah cahaya yang absorbs oleh larutan sebanding dengan konsentrasi kontaminan dalam larutan. Prinsip ini dijabarkan dalam hukum lambert-beer (Lestari, 2007).Hukum lambert-beer menyatakan bahwa intensitas yang diteruskan oleh larutan zat penyerapan berbanding lurus dengan tebal dan konsentrasi larutan. Pembatasan dalam hukum lambert beer : sinar yang digunakan dianggap monokromatis, penyerapan terjadi dalam suatu volume yang mempunyai penampang lurus yang sama, senyawa yang menyerap dalam larutan tersebut, tidak terjadi peristiwa flouresensi atau forisensi (Gandjar dan Rochman, 2007).Asam salisilat merupakan senyawa golongan asam karboksilat yang digunakan pertama kali sebagai analgesik. Karena sifatnya yang sangat iritatif, penggunaannya secara oral dihindari. Telah banyak dilakukan berbagai modifikasi terhadap struktur asam salisilat untuk memperkecil efek samping dan untuk meningkatkan aktivitas dari senyawa ini disamping untuk menghasilkan senyawa- senyawa yang dapat digunakan secara per oral. Modifikasi struktur yang telah dilakukan yaitu pada gugus karboksil, gugus hidroksi fenolik, maupun pada cincin benzena. Senyawa hasil modifikasi gugus hidroksi fenolik antara lain ialah asam asetil salisilat yang berkhasiat sebagai analgesik-antipiretik, antiinflamasi dan antiplatelet (Rudyanto dan Suzana, 2005).C. ALAT DAN BAHAN1. Alat Alat- alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Batang pengaduk Botol semprot Gelas kimia 50ml Lumpang dan alu Sendok tanduk Timbangan analitik Labu takar 10 ml dan 100 ml Pipet mikro Pipet tetes2. Bahan Bahan-bahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Aquades Asam salisilat Asetosal Aspilets (sampel yang mengandung asam salisilat dan asetosal)

3. Uraian Bahana. Aquadest (Depkes RI, 1979 : 96)Nama resmi: Aqua destillataNama lain: Air suling, AquadestRumus kimia: H2OBerat molekul: 18,02Pemerian: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, tidak mempunyai rasa.Penyimpanan: Dalam wadah tertutup.Kegunaan: Sebagai pelarutb. Asam Salisilat ( Dirjen POM, 1979 : 102)Nama Latin: Acidum SalicylumNama Lain: Asam SalisilatRumus kimia: C7H6O3BM: 138,12Pemerian: Hablur putih; biasanya berbentuk jarum us atau serbuk hablur us putih; rasa agak manis, tajam dan stabil diudara. Bentuk sintesis warna putih dan tidak berbau. Jika dibuat dari metil salisilat alami dapat berwarna kekuningan atau merah jambu dan berbau lemah mirip mentol.Kelarutan: Sukar larut dalam air dan dalam benzene; mudah larut dalam etanol dan dalam eter; larut dalam air mendidih; agak sukar larut dalam kloroform.Titik leleh: Suhu lebur antara 158,50 dan 1610Penyimpanan: Wadah dan penyimpanan dalam wadah tertutup baik.Kegunaan: Sebagai sampel.c. Aspirin (Dirjen POM Edisi IV, 1995 : 95)Nama IUPAC: Acidum acetylsalicyliumSinonim: Asam asetilsalisilatBerat molekul: 180,16Pemerian: Hablur tidak berwarna, atau serbuk hablur putih, tidak berbau atau hampir tidak berbau, rasa asamKelarutan: Agak sukar larut dalam air, mudah larut dalam etanol, larut dalam kloroformKegunaan umum: Analgetikum, antipiretikum D. PROSEDUR KERJAProsedur kerja pada percobaan ini adalah :1. Asam salisilat Asam salisilat

Ditimbang sebanyak 0,1 gram Diencerkan dalam labu takar 100 ml dengan akuades

Larutan induk asam salisilat

Dipipet sebanyak 0,1 ml Dimasukkan dalam labu takar 10 ml Dincerkan dengan akuades

Larutan sampel asam salisilat

Diukur absorbansinya pada = 278 nm dan 308 nm

278, A = 0,2629 308, A = 0,3316 2. Asetosal Asetosal


Larutan induk asetosal

Dipipet sebanyak 0,1 ml Diencerkan dalam labu takar 100 ml Diencerkan dengan akuades

Larutan sampel asetosal

Diukur absorbansinya pada = 278 nm dengan 308 nm

278, A= 0,1860 308, A= 0,18723. Aspilets Aspilets


Larutan sampel asam salisilat

Diukur absorbansinya pada = 278 nm dan 308 nm

278 = 0,8784308 = 0,1834

E. HASIL PENGAMATAN1. Tabel hasil pengamatanNo.SampelAbsorbsi 278 nmAbsorbsi 308 nm

1.Asam salisilat0,26290,3316

2.asetosal0,18600,1872

3.Aspilets0,07840,1894

2. PerhitunganDik:massa asetosal= 0,1 grMassa asam salisilat= 0,1 grMr asetosal=180 gr/molMr asam salisilat= 138 gr/molV1= 100 ml = 0,1 lV2 = 10 ml

Sampel asetosalM1. V1 = M2. V20,0055 mol/l . 0,1 L = M2. 10 ml

M2 = 0,00055 Mol/LSampel asam salisilatM1. V1 = M2. V20,0072 mol/l . 0,1 L = M2. 10 ml M2 = 0,00072 Mol/LNilai asetosalPada 308 A = .b.c0,187 = . 0,1 cm. 0,0055 mol/L = -1 cm-1Pada 278 A = .b.c0,187 = . 0,1 cm. 0,0055 mol/L = -1 cm-1

Nilai asam salisilatPada 308 A = .b.c0,391 = . 0,1 cm. 0,0072 mol/L = -1 cm-1Pada 278 A = .b.c0,2629 = . 0,1 cm. 0,0079 mol/L = -1 cm-1A308 = A301 asetosal + A308 as. Salisilat= (.b.c) + (.b.c)= (340. 0,1.c) +(459,12.0,1.c)= 3,4 c asetosal +45,97 c as. Salisilat (pers II)Misalkan c asetosal x asam salisilat = y, makaA278= 30,818x + 36,38 y (pers III)A308= 34,035 + 46,055 y (pers IV)Pers A 278= 33,818x + 36,38yPers A0,8784= 33,818x + 36,38yY=Y = Subtitusi ke persamaan IVA 308 = 34,036x + 46,055y0,1834 = 34,036x + 46,055 0,1834 = 34,036x + 1,105320,1834 - 1,10532 = 34,036x 42,05x-0,92192 = -8,614xX = X = 0,107 mol/LSubtitusi persamaan VI ke persamaan IIIA 278= 33,818x + 36,38y0,8784= 33,818x (0,107) + 36,5130,8784= 3,6185 + 36,513y0,8784-3,6185 = 36,513yY = Y= - 1,075 mol/LX = asetosalY = asam salisilatJadi, kadar asetosal adalah 0,107 mol/L dan kadar asam salisilat adalah -1,075 mol/L.

F. PEMBAHASANSalah satu analisis untuk menentukan kadar suatu senyawa pada suatu sampel adalah dengan cara spektrofotometri. Spektrofotometri merupakan metode analisis yang didasarkan pada besarnya nilai absorbsi suatu zat terhadap radiasi sinar elektrimagnetik. Prinsip kerja spektrofotometri yang pada umumnya terdiri dari unsur-unsur seperti sumber cahaya, minokromator, sel, fotosel, dan detektor. Sumber radiasi didaerah sinar ultraviolet sampai 350 nm, sinar yang dikeluarkan sumber radiasi merupakan sinar polikromatis sehingga harus dibuat menjadi sinar monokromatis oleh monokromator. Radiasi yang melewati monokromator diteruskan kezat yang akan diukur dan sebagian radiasinya akan diserap oleh zat tersebut. Zat yang akan diukur nilai absorbansinya diletakkan pada sel dengan wadah kuvet. Sinar yang diteruskan akan mencapai fotosel dan energi sinar diubah menjadi energi listrik. Dalam percobaan ini karena sampel yang digunakan adalah larutan tidak berwarna maka spektrofotometer yang digunakan adalah jenis spektrofotometer UV. Berbeda dengan spektrofotometer visibel, pada spektrofotometer UV berdasarkan interaksi sampel dengan sinar UV memiliki panjang gelombang 190-380 nm. Sebagai sumber sinar dapat digunakan lampu deuterium, deuterium disebut juga heavy hidrogen, inti atom deuterium mempunyai satu proton dan satu neutron.Karena sinar UV tidak dapat dideteksi oleh mata maka senyawa yang dapat menyerap sinar ini terkadang merupakan senyawa yang tidak memiliki warna, oleh karena itu sampel tidak berwarna tidak perlu dibuat berwarna dengan penambahanreagent tertentu bahkan sampel dapat langsung dianalisa meskipun tanpa preparasi. Namun perlu diingat sampel keruh tetap harus dibuat jernih dengan filtrasi atau centrifugasi. Prinsip dasar pada spektrofotometri adalah sampel harus jernih dan larut sempurna tidak ada partikel koloid apalagi suspensi.Spektrofotometri UV memang lebih simpel dan mudah dibanding spektrifotometri visibel terutama pada bagian preparasi sampel. Namun harus hati-hati juga karena banyak kemungkinan terjadi inteferensi dari senyawa lain selain analat yang juga menyerap pada pada panjang gelombang UV. ini berpotensi menimbulkan bias pada hasil analisaPenentuan kadar sampel dilakukan dengan pembuatan larutan induk terlebih dahulu yaitu dengan melarutkan asetosal dan asam salisilat dengan akuades. Pada saat mengukur menggunakan spektronik dimasukkan blanko terlebih dahulu dengan tujuan untuk mengoreksi adanya pengaruh materi. Digunakan akuades sebagai pelarut karena pada percoban ini kloroform yang akan digunakan tidak ada. Seharusnya pelarut yang digunakan adalah kloroform karena asam asetil salisilat larut dalam kloroform 1:17, dalam air 1:300, dalam etanol 1:5 dan dalam eter 1:10-15Asam salisilat memiliki rumus molekul C6H4COOHOH berbentuk kristal kecil berwarna merah muda terang hingga kecoklatan memiliki berat molekul 138 g/mol dengan titik leleh sebesar 156oC dan densitas pada 25oC sebesar 1,443 9/ml. Asetosal mempunyai nama sinonim asam asetil salisilat, serbuk tidak berwarna, atau kristal putih, atau serbuk granul kristal yang berwarna putih, stabil dalam udara kering tapi terdegradasi perlahan jika terkena uap air menjadi asam asetat dan asam salisilat, titik leburnya 135oC.Kadar asam salisilat yang beredar dipasaran tidak kurang dari 1 gr, pada percobaan ini kadar asam salisilat sebesar -1,075 mol/L sehingga tidak akan menimbulak efek yang membahayakan bagi tubuh begitu pula dengan asetosal yang beredar dipasaran 0,107 mol/L dan tidak akan menimbulkan efek yang berbahaya bagi tubuh. Akan tetapi pada percobaan ini kadar asam salisilat menunjukkan nilai negatif ini disebabkan kesalah pada saat praktikum, mungkin tidak hanya karena kesalahan larutan blanko tetapi terdapat kesalahn-kesalahan lain seperti terkontaminasinya sampel yang digunakan dan masih banyak lagi kesalahan lainnya.

G. KESIMPULANKesimpulan yang dapat diambil dari percobaan ini yaitu kadar asetosal 0,107 mol/L dan kadar asam salisilat sebesar -1,075 mol/L.

PERCOBAAN IVPENETAPAN KADAR SENYAWA YANG TIDAK BERWARNA(TETAPI MEMILIKI KROMOFOR) KEMUDIAN DIUBAH MENJADI SENYAWA BERWARNA YANG SELANJUTNYA DITETAPKAN SECARA SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL

PENETAPAN KADAR SENYAWA YANG TIDAK BERWARNA(TETAPI MEMILIKI KROMOFOR) KEMUDIAN DIUBAH MENJADI SENYAWA BERWARNA YANG SELANJUTNYA DITETAPKAN SECARA SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL

A. TUJUAN Tujuan dari percobaan kali ini adalah untuk menentukan kadar senyawa yang tidak berwarna (tetapi memiliki kromofor) kemudian diubah menjadi senyawa berwarna yang selanjutnya ditetapkan secara spektrofotometri.

B. LANDASAN TEORISpektrofotometri adalah suatu metode analisis yang berdasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang yang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dan detektor vacum phototube atau tabung foton hampa. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer, yaitu sutu alat yang digunakan untuk menentukan suatu senyawa baik secara kuantitatif maupun kualitatif dengan mengukur transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsi dari konsentrasi (Harjadi, 1990).Pada spektrofotometri konvensional, spektrum serapan merupakan plot serapan (A) terhadap panjang gelombang (). Pada metode spektrofotometri derivatif, plot A lawan , ditransformasikan menjadi plot dA/d lawan untuk derivatif pertama, dan d2A/ d2 lawan untuk derivatif kedua, dan seterusnya. Panjang gelombang serapan maksimum suatu senyawa pada spektrum normal akan menjadi zero crossing pada spektrum derivative pertama. Panjang gelombang tersebut tidak mempunyai serapan atau dA/d = 0. Metode spektrofotometri derivatif dapat digunakan untuk analisis kuantitatif zat dalam campuran (Hayun, dkk., 2006).Spektrofotometri UV-Visibel merupakan metode spektrofotometri yang didasarkan pada adanya serapan sinar pada daerah ultra violet (UV) dan sinar tampak (visibel) dari suatu senyawa. Senyawa dapat dianalisis dengan metode ini jika memiliki kemampuan menyerap pada daerah UV atau daerah tampak. Senyawa yang dapat menyerap intensitas pada daerah UV disebut dengan kromofor, sedangkan untuk melakukan analisis senyawa dalam daerah sinar tampak, senyawa harus memiliki warna. Identifikasi kualitatif dari suatu senyawa serapan kromofor adalah berupa Spektra yang ditunjukkan dari panjang gelombang () versus absorbansi. Setiap kromofor akan memberikan suatu titik spesifik yang disebut dengan panjang gelombang maksimum (maks). Selanjutnya, untuk analisis sampel murni, identifikasi pada panjang gelombang maksimum dapat digunakan untuk analisis kuantitatif, karena absorbansi sampel akan berbanding lurus dengan konsentrasi sampel, sesuai dengan hokum Lambert-Beer (Fatima, 2003).Metoda spektrofotometri uv-vis adalah salah satu metoda analisis kimia untuk menentukan unsur logam, baik secara kualitatif maupun secara kuantitatif. Analisis secara kualitatif berdasarkan pada panjang gelombang yang ditunjukkan oleh puncak spektrum (190 nm s/d 900 nm), sedangkan analisis secara kuantitatif berdasarkan pada penurunan intensitas cahaya yang diserap oleh suatu media. Intensitas ini sangat tergantung pada tebal tipisnya media dan konsentrasi warna spesies yang ada pada media tersebut. Pembentukan warna dilakukan dengan cara menambahkan bahan pengompleks yang selektif terhadap unsur yang ditentukan (Fatimah, dkk., 2009).Asam salisilat merupakan senyawa golongan asam karboksilat yang digunakan pertama kali sebagai analgesik. Karena sifatnya yang sangat iritatif, penggunaannya secara oral dihindari. Telah banyak dilakukan berbagai modifikasi terhadap struktur asam salisilat untuk memperkecil efek samping dan untuk meningkatkan aktivitas dari senyawa ini disamping untuk menghasilkan senyawa-senyawa yang dapat digunakan secara per oral. Modifikasi struktur yang telah dilakukan yaitupada gugus karboksil, gugus hidroksi fenolik, maupun pada cincin benzena (Rudyanto, dkk., 2005).

C. ALAT DAN BAHAN1. AlatAlat-alat yang digunakan pada percobaan ini, yaitu: Spektrofotometer Gelas kimia Gelas ukur Labu takar Pipet ukur Filler Labu takar Pipet tetes Batang pengaduk Timbangan analitik Lumpang Lumpang dan Alu Spatula Botol semprot2. BahanBahan-bahan yang digunakan pada percobaan ini, yaitu: Sulfadiazine Akuades NaOH 0,5 N FeCl33. Uraian Bahana. Sulfadiazin (Dirjen POM, 1979:579)Nama lazim: Sulfadiazinum/sulfadiazineRumus kim: C10H10N4O2SBM: 250,27Pamerian: Putih, putih kekuningan atau putih agak merahjambu; hampir tidak berbau; tidak berasa.Kelarutan: Praktis tidak larut dalam air; agak sukar larut dalam etanol (95%) P dan dalam aseton P; mudah larut dalam asam mineral encer dan dalam larutan alkali hidroksida.Khasiat dan penggunaan: AntibakteriDosis maksimun: Sekali 2 g, sehari 8 g b. Akuades (Dirjen POM, 1979:96)Nama resmi: Aqua destillataNama lain: Air suling, AquadestRumus kimia: H2OBerat molekul: 18,02Pemerian: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, tidak mempunyai rasaPenyimpanan: Dalam wadah tertutup

c. FeCl3 (Dirjen POM, 1979:659)Nama resmi: Ferii chloridumNama lain: Besi (III) kloridaRM/BM: FeCl3 / 162,2Pemerian: Hablur atau serbuk hablur, hitam kehijauan Kelarutan: Larut dalam air, larutan berfluorosensi berwarna jingga Kegunaan: Larutan pewarna d. NaOH (Dirjen POM, 1979:712)Nama resmi: Natrii Hidrocidum Nama lain: Natrium HidroksidaRumus kimia: Na(OH)Berat molekul: 40 gram/molPemerian: bentuk batang massa hablur air keping-keping, keras dan rapuh dan menunjukkan susunan hablur putih mudah meleleh basa sangat katalis dan korosif segera menyerap karbondioksida.Kelarutan: sangat mudah larut dalam airKegunaan: sebagai zat tambahan.

D. ROSEDUR KERJA1. Pembuatan larutan sampelTrisulfa

Digerus Ditimbang sebanyak 100 mg Dimasukkan ke dalam gelas kimia Dilarutkan dengan NaOH 0,5 N Dimasukkan dalam labu takar 100 ml Dilarutkan dengan NaOH hingga tanda tera Dipipet 10 ml Dimasukkan dalam labu takar 100 ml Diencerkan dengan akuades hingga tanda tera Ditambahkan FeCl3 Diukur absorbansinya pada max = 545 nm

0,044 A

2. Pembuatan Larutan standar SulfadiazinLarutan standar Sulfadiazin

Ditimbang sebanyak 100 mg Dimasukkan ke dalam gelas kimia Dilarutkan dengan NaOH 0,5 N Dimasukkan dalam labu takar 100 ml Dilarutkan dengan NaOH hingga tanda tera Diambil masing-masing 200 l,300 l,400 l,500 l dan 600 l dan dimasukkan dalam labu takar Diencerkan dengan akuades hingga tanda tera Ditambahkan FeCl3 Diukur absorbansinya pada max = 545 nm Dihitung konsentrasinyaAbsorbansi SD 200 l: 0,019 AAbsorbansi SD 300 l: 0,042 AAbsorbansi SD 400 l: 0,048 AAbsorbansi SD 500 l: 0,061 AAbsorbansi SD 600 l: 0,044 A

NaOH 0,5 N

Dipipet Diambil 10 ml Dimasukkan dalam labu takar 100 ml Diencerkan dengan akuades hingga tanda tera Ditambahkan FeCl3 Diukur absorbansinya pada max = 545 nm Dihitung konsentrasinyaLarutan blankoE. HASIL PENGAMATAN1. Tabel PengamatanNo.PerlakuanHasil

1. Sulfadiazine 100 mg + Diencerkan dalam labu takar dengan NaOH 0,5 N + pelarut FeCl lalu diukur absorbansi, dihitung konsentrasinyaLarutan sampel sulfadiazine 0,044 A

2. Pembuatan larutan standar sulfadiazine 0,1 gramSulfadiasin + NaOH 0, 5 N sampai tanda tera, diambil masing-masing 200 l, 300 l, 400 l, 500 l, 600 l + larutan FeCl hingga tanda tera diukur absorbansinyaStandar 1 = 0,019 AStandar2 = 0,042 AStandar 3 = 0,048 AStandar 4 = 0,061 AStandar 5 = 0,084 A

3. Pembuatan larutan blanko 10 ml NaOH 0,5 N + FeCl3 5 ml dimasukkan dalam labu takar dan diencerkan hingga tanda tera, diukur absorbansinya Larutan blanko

2. Grafik

3. Perhitungan Kadar Dik : Absorbansi sampel : 0,044 APeny : Y = 0,0149x + 0,0088 0,044 = 0,0149x + 0,0088 0,044 + 0,0088 = 33,75x

= 3,543 mg/mL

F. PEMBAHASANSpektrofotometri adalah suatu metode analisis yang berdasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang yang spesifik dengan menggggnakan monokromator prisma atau kisidifraksi dan detector vacuum phototube atau tabung foton hampa. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer, yaitu suatu alat yang digunakan untuk menentukan suatu senyawa baik secara kuantitatif maupun kualitatif dengan mengukur transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsi dari konsentrasi. Suatu spektrofotometer standar terdiri atas spektrofotometer untuk menghasilkan cahaya dengan panjang gelombang terseleksi yaitu bersifat monokromatik serta suatu fotometer yaitu suatu piranti untuk mengukur intensitas berkas monokromatik, digabungkan bersama dinamakan sebagai spektrofotometer. Bila cahaya (monokromatik maupun campuran) jatuh pada suatu medium homogen, sebagian dari sinar masukakan dipantulkan, sebagian di serap dalam medium itu, dan sisanya diteruskan.Sulfadiazin dikenal sebagai antibiotic, menghambat pertumbuhan bakteri dan jamur termasuk spesies yang telah resisten terhadap sulfonamide khususnya Ag-sulfadiazin. Ag-sulfadiazin juga digunakan untuk mengurang jumlah koloni mikroba dan mencegah infeksi luka bakar akan tetapi tidak dianjurkan untuk pengobatan luka yang besar dan dalam. Akan tetapi pada umumnya digunakan untuk penyakit infeksi pada saluran urin.Sulfadiazine merupakan ligan yang sering digunakan untuk obat antibakteri.Sulfadiazin merupakan turunan dari sulfonamid yang penggunaannya secara luas untuk pengobatan infeksi yang disebabkan oleh bakteri Gram-positif dan Gram-negatif tertentu, beberapa jamur. Mekanisme kerja umum dari sulfadiazin sebagai antibakteri adalah protozoa dengan menbentuk kompleks Zn(II) - sulfadiazin dimana sulfadiazin terkoordinasi secara bidentat terhadap atom pusat Zn2+ melalui atom NH sekunder dan N tersier.Percobaan kali ini dilakukan penentuan kadar sulfadiazine. Sampel yang digunakan pada percobaan kali ini adalah trisulfa. Prinsip dari percobaan ini adalah membuat sampel sulfadiazine menjadi berwarna dengan cara reaksi dengan FeCl diazotasi antara amin aromatis primer pada sulfadiazine, yang diikuti dengan penggabungan dengan pereaksi Pereaksi N-(1-Naftil) Etilen Diamin Dihidroklorida (NED). Warna ungu yang terbentuk nantinya akan diukur absorbansinya dengan cara spektrofotometri visible (sinar tampak).Penentuan kadar larutan dibagi menjadi beberapa tahapan. Tahapan tersebut antara lain pembuatan larutan baku, pengenceran larutan sampel, pembuatan deret standar dan pengukuran dengan spektrofotometer UV. Pertama-tama dibuat larutan sampel kemudian dibuat lagi larutan standar dengan berbagai konsentrasi dari konsentrasi 200 l, konsentrasi 300 l, konsentrasi 400 l, konsentrasi 500 l hingga konsentrasi 600 l, yang kemudian diukur absorbansi masing-masing pelarut dan didapatkan berturut-turut sebesar 0,044; 0,019; 0,042; 0,048 ; 0,061; dan 0,084. Dengan didapatkan data tersebut maka kita dapat membuat kurva baku standar larutan sulfadiazin yang merupakan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi. Dengan menggunakan metode spektrofotometri, dapat ditentukan nilai konsentrasi suatu sampel. Kurva yang didapatkan merupakan garis lurus yang sesuai dengan hukum lamber-beer. Dimana hukum ini menyatakan bahwa absorbansi sampel akan berbanding lurus dengan konsentrasi sampel. Anjuran ini beranggapan bahwa pada kisaran nilai absorbansi tersebut, kesalahan fotometrik yang terjadi adalah yang paling minimal.Pengukuran absorbansi dari sampel ini, dilakukan pada panjang gelombang yaitu 545 nm yang merupakan panjang gelombang maksimal dari sampel sulfadiazine. Digunakan panjang gelombang maksimal sebab pada panjang gelombang maksimal akan memberikan kepekaan yang tinggi dan kesalahan paling kecil. Pengukuran absorbansi dari larutan baku dengan konsentrasi yang berbeda-beda dengan bertujuan untuk mendapatkan nilai kurva standard an persamaan yang nantinya akan digunakan untuk menghitung konsentrasi dari sampel sulfadiazine. Dari persamaan regresi yang didapat dari kurva baku standar yaitu y = 0,0149x - 0,0088, maka dapat diperoleh kadar sulfadiazin sebesar 3,543 mg/ml.

G. KESIMPULANBerdasarkan percobaan yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa kadar sampel sulfadiazine yang diukur adalah sebesar 3,543 mg/ml.

PERCOBAAN VPENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL SECARA SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL

PENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL SECARA SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL

A. TUJUANTujuan dari percobaan ini adalah untuk mengetahui kadar flavonoid total secara spektrofotometri visibel.B. LANDASAN TEORIAnalisis kimia dikenal berbagai cara untuk mengetahui data kuantitatif dan kualitatif baik yang menggunakan suatu peralatan optik (instrument) ataupun dengan cara basah. Alat instrument biasanya dipergunakan untuk menentukan suatu zat berkadar rendah, biasanya dalam satuan ppm (per million) atau ppb (part per billion). Salah satu metode sederhana untuk menentukan zat organic secara kualitatif dan kuantitatif dalam spektrofotometri ultra-violet dan sinar tampak (Triyati, 1985).Metode spektrofotometri uv-vis juga merupakan salah satu metode analisis kimia untuk menentukan unsure logam, baik secara kualitatif maupun secara kuantitatif. Analisis secara kualitatif berdasarkan pada panjang gelombang yang ditunjukan oleh puncak spectrum (190 nm/900 nm). Sedangkan analisis secara kuantitatif berdasarkan pada penurunan intensitas cahaya yang diserap oleh suautu media. Intensitas ini sangat tergantung pada tebal tipisnya media dan konsentrasi warna spesies yang ada pada metode tersebut. Pembentukan warna dilakukan dengan cara menambahakan bahan pengompleks yang selektif terhadap unsure yang ditentukan (Fatimah, 2009).Spektrofotometri uv-vis prinsipnya sama dengan kalorimetri yaitu senyawa yang akan diukur harus berwarna. Hanya jika pada kalorimetri mengandalkan kepekaan mata kita untuk menentukan konsentrasi. Sedangkan pada spektrofotometri uv vis menggunakan alat bernama spektrofotometer sebagai pengamatnya. Dalam spektrofotometri uv-vis kita mencari dahulu panjang gelombang yang digunakan untuk mengukur intensitas atau absorbansi larutan yang akan kita analisa. Menggunakan panjang maksimal sinar atau cahaya akan ditransmisikan paling banyak oleh larutan yang ada dalam sel, sehingga perubahan konsentrasi larutan sekecil apapun akan terdeteksi (Vogel, 1991).Radiasi didaerah uv-visibel diserap melalui eksitasi electron-elektron yang terlibat dalam ikatan-ikatan antara atom-atom pembentuk molekul sehingga electron menahan atom-atom bersama-sama mendistribusikan kembali atom-atom itu sendiri dari orbital yang ditempati oleh electron-elektron pengikat tidak lagi bertumpang tindih. Radiasi uv-visibel diserap melalui panjang gelombang pendek 200 nm (>6,2 ev), yang terdapat pada panjang gelombang yang lebih panjang dari pada daerah ditempat udara dan pelarut-pelarut umum mengabsorbsi (Watson, 2000).Flavonoid merupakan salah satu dari sekian banyak senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan oleh suatu tanaman yang biasa dijumpai pada bagian daun, akar, kayu, kulit tepung sari, bunga dan biji. Secara kimia, flavonoid mengandung cincin aromatic tersusun dari 15 atom karbon dengan inti dasar tersusun dalam konjugasi C6 - C3 - C6 (dua inti aromatic terhubung dengan 3 atom karbon). Keberadaan cincin aromatic ini menyebabkan pitanya terserap didaerah uv-vis (Sriningsih, 2007).

82

C. ALAT DAN BAHAN 1. AlatAlat yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Batang pengaduk Gelas kimia 25 ml Gelas ukur 10 ml 5 buah Labu takar 250 ml Lumpang dan alu Mikropipet 0,25 ml Pipet tetes Spatula Spektrofotometri visible Timbangan analitik2. BahanBahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah : Akuades Alkohol 70 % FeCl3 NaNO3 NaOH Supravit (Rutin) Tisu3. Uraian Bahana. Akuades (FI Edisi III, 1979, : 996)Nama resmi: Aqua destilataNama lain: Air sulingBerat molekul: 18,2Rumus molekul: H2ORumus struktur: O H HPemerian: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berasa, tidak berbau.Kelarutan: Larut dalam etanol dan gliserolKegunaan: Sebagai pelarutb. Alkohol (FI Edisi III, 1979, : 65)Nama resmi: EthanolumNama lain: Alkohol, etanolBerat molekul: 46,07Rumus struktur: C2H4OPemerian: Jernih, berbau khas, rasa terbakar pada lidah, cairan pelarutKelarutan: Sangat larut dalam air, kloroform P, dan dalam eter PPenyimpanan: Dalam wadah tertutup rapat, terlindung dari cahaya, ditempat yang sejuk, jauh dari nyala api.c. Natrium nitrat (FI Edisi III, 1979, : 764)Nama resmi: Natrium nitratNama lain: Natrium nitratBerat molekul: 69,00Rumus struktur: NaNO3Pemerian: Hablur atau granul, tidak berwarna atau putih kekuningan Kelarutan: Larut dalam 1,5 bagian air, agak sukar larut dalam etanol 95 % PPenyimpanan: Dalam wadah tertutup baikd. Natrium Hidroksida (FI Edisi III, 1979, : 384)Nama resmi: Natrium hidroksidaNama lain: Natrium hidroksidaBerat molekul: 40,00Rumus struktur: NaOHPemerian: Bentuk batang, berwarna, hablur atau kering, rapuh, mudah meleleh Kelarutan: Sangat mudah larut dalam etanol dan airPenyimpanan: Dalam wadah tertutup baike. Rutin (ISO, 2012. : 23)Nama resmi: RutinNama lain:Glycopiranosida, Querzetin-3-6-0- (6-deoxy-olptaq-L-monopyranosit)-beta-n-3-31-3,7-pentanydroxy-flavono, 3-rutinosideBerat molekul: 610,52Rumus molekul: C27H30O16, 3 H2OPemerian: Bubuk kuning kehijauan Kelarutan: Dalam air 12,3-13 mg/100 mlPenyimpanan: Stabil pada suhu kamar, dalam wadah tertutup, dibawah kondisi normalKegunaan: Zat aktif, sampel

D. PROSEDUR KERJASuprafit (Rutin)

digerus di timbang 0,25 gram dilarutkan etanol 250 mlTabung 1

Tabung 5Tabung 4Tabung 3Tabung 2

dimasukkan- dimasukkan- dimasukkan- dimasukan - dimasukkan 100 ml 200 ml 300 ml 400 ml 500 ml ditambahkan NaNo2 tetes didiamkan 6 menit ditambahkan FeCl3 5 tetes didiamkan 5 menit ditambahkan NaOH 4 pipet dan akuadessampai 100 ml didiamkan selama 15 menit diukur absorbansinya pada 410 nm

Hasil pengamatan..?

E. HASIL PENGAMATAN1. Tabel PengamatanKonsentrasiAbsorbansi

100 l0,007

200 l0.011

300 l0,189

400 l0,270

500 l0,263

2. Grafik

3. Perhitungana. Dik : A Sampel = 0,007Dit: Konsentrasi Sampel..?A Standar = 0,189Konsentrasi sampel = = = 0,000376 mol= Penye: Konsentrasi sampel = =

b. Dik : A Sampel = 0,011Dit: Konsentrasi Sampel..?A Standar = 0,189Penye:Konsentrasi sampel = = c. Dik : A Sampel = 0,270Dit: Konsentrasi Sampel..?A Standar = 0,189Penye:Konsentrasi sampel = = d. Dik : A Sampel = 0,263Dit: Konsentrasi Sampel..?A Standar = 0,189Penye:Konsentrasi sampel = =

F. PEMBAHASANSpektrofotometri merupakan suatu metode analisis yang didasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatik oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dengan detector fototube. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer. Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmittan atau absorban suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Prinsip kerja spektrofotometer berdasarkan hukum Lambert-Beer yaitu bila cahaya tersebut diserap, sebagian akan dipantulkan dan sebagaian lagi dipancarkan. Banyaknya cahaya yang diserap oleh larutan akan dibaca oleh detector yang kemudian menyampaikan ke layar pembaca.Spektrofotometer yang dipakai dalam praktikum ini adalah spektrofotometer uv-vis, yang merupakan alat dengan teknik spektrofotometer pada daerah ultraviolet dan sinar tampak oleh suatu materi dalam bentuk larutan. Konsentrasi larutan yang dianalisis sebanding dengan jumlah sinar yang diserap oleh zat yang terdapat dalam larutan tersebut. Dalam ini, hukum Lambert-Beer dapat menyatakan hubungan antara serapan cahaya dengan konsentrasi zat dalam larutan. Spektrofotometri ini mengukur dan membaca melalui gugus kromofor. Spectrum absorbs yang diperoleh dari hasil analisis dapat memberikan informasi pajang gelombang dengan absorban maksimum dari senyawa atau unsur. Panjang gelombang dan absorban yang dihasilkan selama proses analisis digunakan untuk membuat kurva standar. Konsentrasi suatu senyawa atau unsur dapat dihitung dari kurva standar yang pada panjang gelombang dengan absorban maksimum.Sampel yang digunakan pada percobaan ini adalah suprafit yang mengandung rutin. Rutin merupakan senyawa yang mengandung flavonoid. Flavonoid termasuk dalam senyawa fenolik alam yang potensial sebagai antioksidan. Tujuan dilakukannya penentuan kadar senyawa rutin dalam sampel obat suprafit yaitu untuk mengetahui berapa kadar total rutin dalam sampel obat suprafit yang merupakan obat suplemen makanan.Senyawa rutin pada percobaan ini menggunakan variasi konsentrasi yang berbeda. Variasi konsentrasi yang digunakan adalah 100, 200, 300, 400 dan 500 l. Percobaan ini digunakan FeCl3 yang bertujuan untuk membentuk kompleks dengan senyawa rutin yang ada didalam sampel obat. Senyawa rutin dalam sampel dapat diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer uv-vis karena senyawa rutin merupakan senyawa flavonoid yang memiliki system aromatis yang terkonjugasi dan dapat menunjukan sita serapan kuat pada daerah uv-vis. Hasil pengukuran diperoleh absorbansi sampel yaitu pada konsentrasi 100 l diperoleh absorbansi 0,007, pada konsentrasi 200 l diperoleh absorbansi 0,011, pada konsentrasi 300 l diperoleh absorbansi 0,189, pada konsentrasi 400 l diperoleh absorbansi 0,270 dan pada konsentrasi 500 l diperoleh absorbansi 0,263.G. KESIMPULANBerdasarkan hasil percobaan dapat disimpulkan bahwa pada konsentrasi 100 l diperoleh absorbansi 0,007, pada konsentrasi 200 l diperoleh absorbansi 0,011, pada konsentrasi 300 l diperoleh absorbansi 0,189, pada konsentrasi 400 l diperoleh absorbansi 0,270 dan pada konsentrasi 500 l diperoleh absorbansi 0,263.

DAFTAR PUSTAKA

DAFTAR PUSTAKADalimunthe, G.B. 2011. Penetapan Kadar Famotidin Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet. Kultura. 12 (1), 11.

Dirjen POM. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi III, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.

Fatimah, Is. 2003. Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan Spektrofotometri Derivatif. Logika. 10 (9), 23.

Fatimah, S dan Agus Jamaluddin. 2009. Pengaruh Uranium Terhadap Analisis Thorium Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis.Seminar Nasional V Teknologi Nuklir. Yogyakarta, 574.Gandjar, Ibnu Gholib. Abdul R., 2007. Kimia Farmasi Analisis. Penerbit Pustaka Pelajar. Yogyakarta.

Harini., Wuri, B., Rini D., Lucia, W., 2012, Aplikasi Metode Spektrofotometri Visible Untuk Mengukur Kadar Curcuminoid Pada Rimpang Kunyit, Seminar Nasional Aplikasi Sains Dan Teknologi Periode III, 32.

Hendry A., Suryadi MT dan Yanuar Ari., 2002. Analisis Spektrofotometri UV-Vis Pada Obat Influenza dengan Menggunakan Aplikasi Sistem Persamaan Linier. Proceeding. 1 (4), 34.

Hidayati Heid, 2007. Analisis Zat Warna Sintetik Terlarang Untuk Makanan YangBeredar di Pasaran. Jurnal Ilmu Kefarmasian. IV (1), 21.

Huda Nurul, 2001. Pemeriksaan Kinerja Spektrofotometer UV Vis GBC 911A Menggunakan Pewarna Tartrazine CL 19140. Jurnal Sigma Epiloson. 1 (I), 07.

Lestari Fatma, 2010. Bahaya Kimia .Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.

Lestari S.R. dan Stia D. 2010. Dekolisasi Limbah Batik Tulis Menggunakan Jamur Indiegenous Hasil Isolasi Pada Konsentrasi Limbah Yang Berbeda . Jurnal Molekul. 5 (2), 75-82.

Lestari, Fatma., 2007. Bahaya Kimia. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.

Rudyanto, Marcellino, Sujana, Astika, G.N., 2005. Sintesis N-Metilsalisilamida, N-N Dimetilsalisilamida Dan Salisipiperidida. Jurnal Akta Kinindo. 1 (1), 271.

Sriningsih, dkk. 2007. Analisa Tempuyung Golongan Flavonoid Herba Tempuyung. Jurnal Farmasi, 2(1), 6.

Susidarti, R.A., Rianti A dan Martono S., 2008. Penetapan Kadar Sefadroxil Secara Spektrofotometri Visible Menggunakan Pereaksi Etil Asetoasetat dan Formaldehid. Majalah Farmasi Indonesia. 19 (1), 6.Triyati Ety. 1985. Spektrofotometri Ultra Violet dan Sinar Tampak Serta Aplikasinya Dalam Oseanologi. Oseana. X(I), 39. Vogel. 1991. Buku Ajar Vogel : Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.Watson Davis G. 2000. Analisis Farmasi. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.PERCOBAAN VPENETAPAN KADAR SENYAWA TIDAK BERWARNA (TETAPI MEMILIKI KROMOFOR) SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRA-VIOLET)

Documents

Laporan Lengkap Kimia Analisis II