kulit, tinjauan pustaka mengkudu.pdf

8/20/2019 kulit, tinjauan pustaka mengkudu.pdf

1/121

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Penuaan adalah sesuatu yang pasti terjadi pada manusia. Bertambahnya

usia dan menjadi tua adalah sesuatu yang tidak dapat dihindari. Pada umumnya

manusia menganggap bahwa keluhan-keluhan yang berhubungan dengan proses

penuaan adalah sesuatu yang tidak dapat dihindari, dan merupakan proses alamiah

yang sewajarnya muncul pada usia tua, sehingga bila timbul keluhan mereka tidak

cepat-cepat berusaha untuk mencari pengobatan. Bila keluhan semakin berat

barulah mencari pertolongan dokter. Mereka tidak menyadari bahwa sebenarnya

manusia dapat hidup dengan umur lebih panjang dengan kualitas hidup yang tetap

baik.

Ada banyak faktor yang menyebabkan orang menjadi tua. Penyebab

penuaan dapat dikelompokkan menjadi faktor internal dan faktor eksternal.

Beberapa faktor internal ialah radikal bebas, hormon berkurang, proses glikolisasi,

metilasi, apoptosis, sistem kekebalan yang menurun, dan gen. Faktor eksternal

yang utama ialah gaya hidup tidak sehat, kebiasaan salah, polusi lingkungan,

stress, dan kemiskinan (Pangkahila, 2011).

Beberapa teori menjelaskan mengapa seseorang menjadi tua. Salah satu

teori penuaan yang sangat berkembang adalah Teori Radikal Bebas. Teori ini

menjelaskan bahwa suatu organisme menjadi tua karena terjadi akumulasi

kerusakan oleh radikal bebas dalam sel sepanjang waktu. Radikal bebas akan

merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal bebas tersebut sehingga


2/121

2

menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan kematian sel. Molekul

utama di dalam tubuh yang dirusak oleh radikal bebas adalah desoxyribonucleic

acid (DNA), lemak, dan protein (Suryohudoyo, 2000).

Kulit manusia seperti organ tubuh lainnya juga mengalami penuaan.

Fungsi kulit manusia yang menurun seiring usia adalah fungsi barier, pergantian

sel, pembersihan zat kimia, persepsi sensoris, mekanisme proteksi, penyembuhan

luka, respon imun, termoregulasi, produksi keringat, produksi sebum, produksi

vitamin D dan perbaikan DNA. Perubahan histologis paling mencolok dan

konsisten adalah penyempitan dermal – epidermal juction dengan penipisan pada

papila dermal dan epidermal rete pegs. Pemisahan ini menyebabkan orang tua

cenderung mudah terjadi luka pada kulit, abrasi superfisial pada trauma minor dan

pembentukan bula pada lokasi oedem.

Luka adalah hilang atau rusaknya sebagian dari jaringan tubuh. Luka juga

didefinisikan sebagai kerusakan fisik akibat dari terbukanya atau hancurnya kulit

yang menyebabkan ketidakseimbangan fungsi dan anatomi kulit normal (Nagori

and Solanki, 2011). Keadaan luka ini banyak faktor penyebabnya di antaranya

trauma benda tajam atau tumpul, ledakan, zat kimia, perubahan suhu, sengatan

listrik, gigitan hewan.

Pada manusia dan golongan vertebrata yang lebih tinggi penyembuhan

luka terjadi melalui suatu proses perbaikan dimana hasil yang dicapai bukan

berupa restorasi secara anatomi namun lebih kepada hasil yang fungsional

(Falanga, 2007). Berbeda dengan mekanisme yang terjadi pada amphibi dan reptil


3/121

3

yang mampu mengalami regenerasi ke bentuk dan susunan asli dari suatu organ

atau bagian anatomi tubuh seperti sebelum terjadi perlukaan.

Penyembuhan luka merupakan suatu proses kompleks yang melibatkan

interaksi yang terus menerus antara sel dengan sel dan antara sel dengan matriks

yang terangkum dalam tiga fase yang saling tumpang tindih. Tiga fase mekanisme

penyembuhan luka yang terjadi yaitu fase inflamasi (0-3 hari), fase proliferasi dan

pembentukan jaringan (3-14 hari) (Reddy et al ., 2012) serta fase remodeling

jaringan (bisa dimulai pada hari ke 8 dan berlangsung sampai 1 tahun) (Broughton

et al ., 2006)). Hasil dari mekanisme penyembuhan luka ini tergantung dari

perluasan dan kedalaman luka, serta ada tidaknya komplikasi yang mengganggu

perjalanan proses penyembuhan luka yang alami. Gangguan pada proses

perbaikan jaringan yang menyebabkan proses penyembuhan luka yang lama,

terjadi pada berbagai kondisi seperti pada orang yang berusia lanjut, pengobatan

dengan steroid, dan yang menderita penyakit diabetes dan kanker (Gurtner et al .,

2008). Pada kondisi tersebut kemungkinan terjadinya infeksi lebih besar.

Proses penyembuhan luka merupakan proses biologik dimulai dari adanya

trauma dan berakhir dengan terbentuknya luka parut. Tujuan dari manajemen luka

adalah penyembuhan luka dalam waktu sesingkat mungkin, dengan rasa sakit,

ketidaknyamanan, dan luka parut yang minimal pada pasien (Soni and Singhai,

2012), meminimalkan kerusakan jaringan, penyediaan perfusi jaringan yang

cukup dan oksigenasi, nutrisi yang tepat untuk jaringan luka (Reddy et al ., 2012).

Pengobatan dari luka bertujuan untuk mengurangi faktor-faktor risiko yang


4/121

4

menghambat penyembuhan luka, mempercepat proses penyembuhan dan

menurunkan kejadian luka yang terinfeksi (Soni and Singhai, 2012).

Sampai saat ini tidak ada substansi yang sangat efektif untuk

mempercepat proses penyembuhan luka walaupun banyak usulan dalam ilmu

pharmaceutical. Sebagai akibatnya, perhatian meningkat dalam menemukan

ekstrak tanaman untuk meningkatkan regenerasi penyembuhan luka, meskipun

penggunaan dari ekstrak tanaman untuk pengobatan luka umumnya baru

merupakan kebiasaan yang dilakukan oleh masyarakat tradisional (Mathivanan et

al ., 2006). Di negara berkembang, 25 persen dari pengobatan didasarkan pada

pemakaian tanaman obat, yang secara luas digunakan pada masyarakat pedesaan.

Nenek moyang menemukan kekuatan penyembuhan dari tumbuhan melalui proses

trial and error (Soni and Singhai, 2012). Banyak tanaman obat yang biasa dipakai

untuk mempercepat penyembuhan luka, diantaranya adalah tanaman mengkudu

(Morinda citrifolia) (Nagori and Solanki, 2011).

Mengkudu atau noni adalah satu dari tumbuhan tropikal penting yang

berasal dari Polynesia. Disebut penting karena fungsinya yang banyak untuk

kesehatan (Pal, 2012). Secara tradisional dari daun segar mengkudu dipakai

sebagai obat untuk patah tulang, luka sayat atau potong yang dalam, luka bakar

dan nyeri (Rasal et al ., 2008).

Komposisi mengkudu adalah sebagai berikut : scopoletin, octoanoic acid,

potassium, ascorbic acid (vitamin C), triterpenoids, alkaloids, anthraquinones,

sitosterol, beta carotene, vitamin A, flavones glycosides dan linoleic acid (Rasal

et al ., 2008), saponin (Satwadhar et al ., 2010), tannin (Nayak et al ., 2009),


5/121

5

xeronin (Peter, 2007). Phytoconstituent dari semua tumbuhan obat yang

berpengaruh dalam mekanisme penyembuhan luka adalan tannins, flavonoids,

saponins, sterol dan polyphenols serta triterpenoid (Soni and Singhai, 2012).

Daun mengkudu mengandung semua kandungan tersebut. Kandungan daun

mengkudu yang kaya antioksidan terutama vitamin C, catalase, beta karoten,

flavonoid glycosides dan iridoid glycosides dianggap paling berperan penting

dalam mekanisme penyembuhan luka (Rasal et al ., 2008). Kandungan zat-zat

aktif ini berperan pada semua fase penyembuhan luka.

Vitamin C, catalase, dan terutama flavonoid diduga dapat memperpendek

fase inflamasi dengan cara mengeliminasi reactive oxygen species (ROS),

detoksifikasi hidrogen peroksida (H2O2) sehingga menurunkan level lipid

peroksida (Rasal et al ., 2008), meningkatkan kadar enzim antioksidan dalam

jaringan luka sehingga menghambat efek berantai radikal bebas (Thakur et al .,

2011), serta efek antibakteri. Pada fase proliferasi dan remodelling jaringan,

flavonoid pada daun mengkudu berperan dalam meningkatkan vaskuler,

meningkatkan sintesis kolagen (Patil et al ., 2012), meningkatkan kekuatan serat

kolagen (Thakur et al ., 2011; Nayak et al., 2009), merangsang platelet derived

growth factor (PDGF) yang berperan dalam merangsang dan mengatur migrasi

fibroblas, mitogenik untuk fibroblas, sel otot polos dan sel endotel (Fitzpatrick

and Mehta, 2009). Semua proses ini akan meningkatkan kecepatan epitelisasi

jaringan luka.

Penelitian oleh Nayak et al. (2009) menyebutkan bahwa pemberian

ekstrak etanol daun mengkudu secara oral pada tikus yang dilukai menghasilkan


6/121

6

secara signifikan meningkatan kecepatan kontraksi luka, kecepatan pembentukan

kolagen dan hidroksiprolin, waktu epitelisasi yang lebih singkat. Rasal et al .

(2008) juga melaporkan ekstrak daun mengkudu per oral dapat meningkatkan

kontraksi luka, memperkuat jaringan penyembuhan luka, meningkatkan kolagen

dan hidroksiprolin, mempercepat epitelisasi dan menurunkan level

malondialdehyde (MDA). Secara histopatologis Rasal et al. (2008) juga

melaporkan peningkatan secara signifikan neovaskularisasi, fibroblas dan

epitelisasi.

Penelitian ekstrak daun mengkudu secara topikal untuk penyembuhan

luka, belum pernah dilakukan sebelumnya, padahal masyarakat turun temurun

telah menggunakanya secara tradisional, dan produk topikal dengan bahan

mengkudu sudah beredar tanpa penelitian yang jelas. Selain itu, untuk obat luka,

biasanya masyarakat lebih menyukai pemakaian produk topikal yang bisa

langsung diaplikasikan ke jaringan luka karena lebih praktis.

Berdasarkan hal tersebut diatas, maka dilakukan penelitian dengan

menggunakan formula ekstrak daun mengkudu dalam bentuk salep untuk

mengetahui efeknya terhadap regenerasi luka dengan parameter neovaskularisasi,

epitelisasi dan fibroblas, pengamatan hari ke 4 dan hari ke 8. Penentuan hari ke 4

dan ke 8 ini berdasarkan laporan jurnal dari Li et al. (2007) yang menyebutkan

bahwa pembentukan kembali dermis di mulai kira-kira hari ke 3-4 setelah

perlukaan, dengan ciri pembentukan neovaskularisasi dan penumpukan fibroblas,

juga laporan yang menyebutkan bahwa kolagen tipe III disekresikan maksimal


7/121

7

oleh fibroblas antara hari ke 5 dan 7, dan setelah itu terjadi perubahan fenotip

fibroblas menjadi miofibroblas.

Pemilihan sediaan salep disebabkan karena telah dilakukan penelitian

sediaan ini sebelumnya terhadap daun Cajanus scarabaeoides yang mengandung

zat aktif flavonoid glycosides untuk regenerasi jaringan luka, dengan formulasi

salep hidrofilik (Pattanayak et al ., 2011), juga salep merupakan sediaan yang

stabilitasnya baik, berupa sediaan halus, mudah digunakan, mampu menjaga

kelembaban kulit, tidak mengiritasi kulit, mempunyai tampilan yang lebih

menarik, dan lebih lama berada di jaringan luka dibandingkan dengan bentuk

sediaan lain.

Walaupun tidak ada perbedaan nilai hematologi, biokimia, maupun bobot

organ antara tikus jantan dan betina (Sihombing and Tuminah, 2011), untuk

mendapatkan sampel yang homogen, dipilih tikus jantan pada penelitian ini.

1.2 Rumusan Masalah

Dari uraian latar belakang diatas, dapat dibuat rumusan masalah penelitian

sebagai berikut :

1. Apakah pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan epitelisasi

jaringan luka pada tikus putih wistar jantan?

2.

Apakah pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan fibroblas

jaringan luka pada tikus putih wistar jantan?

3.

Apakah pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan

neovaskularisasi jaringan luka pada tikus putih wistar jantan?


8/121

8

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui efek pemberian salep ekstrak daun mengkudu efektif

dapat meningkatkan proses regenerasi jaringan luka pada tikus putih wistar jantan.

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Untuk mengetahui efek pemberian salep ekstrak daun mengkudu dapat

meningkatkan epitelisasi jaringan luka pada tikus putih wistar jantan.


meningkatkan fibroblas jaringan luka pada tikus putih wistar jantan.


meningkatkan neovaskularisasi jaringan luka pada tikus putih wistar jantan.

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat Ilmiah

1. Memberi informasi ilmiah mengenai fungsi salep ekstrak daun mengkudu

untuk meningkatkan regenerasi jaringan luka.

2. Sebagai dasar untuk digunakan sebagai penelitian lebih lanjut pada manusia.

1.4.2 Manfaat Praktis

Diharapkan masyarakat mengetahui manfaat salep ekstrak daun

mengkudu dalam meningkatkan regenerasi jaringan luka sehingga dapat

digunakan dalam kehidupan sehari-hari.


9/121

9

BAB II

KAJIAN PUSTAKA

2.1 Teori Penuaan

Populasi orang tua di dunia mencapai laju yang sangat luar biasa. Sebagian

besar berhubungan dengan penurunan laju kelahiran dan peningkatan angka

harapan hidup dalam 20 tahun terakhir. Perkembangan ilmu kedokteran, dalam

hal ini Ilmu Kedokteran Anti Penuaan (KAP) atau Anti-Aging Medicine (AAM)

telah membawa konsep baru dalam dunia kedokteran. Penuaan diperlakukan

sebagai penyakit, sehingga dapat dan harus dicegah atau diobati bahkan

dikembalikan ke keadaan semula sehingga usia harapan hidup dapat menjadi lebih

panjang dengan kualitas hidup yang baik (Goldman and Klatz, 2007; Pangkahila,

2011). Dengan mencegah proses penuaan, fungsi berbagai organ tubuh dapat

dipertahankan agar tetap optimal. Hasilnya organ tubuh dapat berfungsi seperti

pada usia yang lebih muda, walaupun usia sebenarnya bertambah. Dengan

demikian penampilan dan kualitas hidupnya lebih muda dibandingkan dengan

sebenarnya (Pangkahila, 2011).

Para ahli mengemukakan banyak teori mengapa kita menjadi tua. Namun

tidak satupun teori yang dapat menjelaskan secara tuntas. Teori terbaru dari aging

tingkat seluler hingga molekuler secara umum terdiri dari 2 latar belakang, yaitu

aging adalah program dan aging adalah kebetulan. Teori program berdasarkan

pemikiran bahwa sejak konsepsi hingga kematian, perkembangan manusia

diperintah oleh jam biologis. Jam ini mengatur waktu yang tepat untuk sejumlah


10/121

10

perubahan. Teori kebetulan menyatakan organisme menjadi tua oleh sejumlah

kejadian acak. Contohnya kerusakan desoxyribonucleic acid (DNA) oleh radikal

bebas atau hanya wear and tear dari kehidupan sehari-hari. Terdapat 4 prinsip

teori penuaan menurut Goldman and Klatz (2007) :

1. Teori Wear and Tear

Tubuh dan sel-selnya rusak karena banyak dipakai secara berlebihan (overuse)

dan disalahgunakan (abuse). Proses penuaan yang lebih cepat berkaitan dengan

adanya toksin dalam diet dan lingkungan; mengkonsumsi makanan yang

banyak lemak, gula, kafein, alkohol, nikotin, paparan sinar ultraviolet dan stres

emosional.

2. Teori Neuroendokrin

Teori ini berdasarkan peranan berbagai hormon bagi fungsi organ tubuh.

Hormon dikeluarkan oleh beberapa organ yang dikendalikan oleh hipotalamus,

sebuah kelenjar yang terletak di otak. Hipotalamus membentuk poros dengan

hipofise dan organ target yang kemudian mengeluarkan hormonnya. Dengan

bertambahnya usia, tubuh memproduksi hormon dalam jumlah kecil, yang

akhirnya mengganggu berbagai sistem tubuh.

3.

Teori Kontrol Genetik

Teori ini berfokus pada program genetik DNA, dimana kita dilahirkan dengan

kode genetik yang unik, sehingga penuaan dan lama usia hidup telah

terprogram dan diwariskan secara genetik untuk tiap-tiap spesies. Tiap spesies

di dalam inti selnya mempunyai suatu jam genetik yang telah diputar menurut


11/121

11

suatu replikasi tertentu. Jam ini akan menghitung mitosis dan menghentikan

replikasi sel bila berhenti berputar.

4. Teori Radikal Bebas

Teori ini menjelaskan bahwa suatu organisme menjadi tua karena terjadi

akumulasi kerusakan oleh radikal bebas dalam sel sepanjang waktu. Radikal

bebas adalah suatu atom atau molekul yang mempunyai susunan elektron tidak

berpasangan sehingga bersifat amat tidak stabil. Untuk menjadi stabil, radikal

bebas menyerang sel-sel untuk mendapatkan elektron pasangannya dan

terjadilah reaksi berantai yang menyebabkan kerusakan jaringan yang luas.

Molekul utama di dalam tubuh yang dirusak oleh radikal bebas adalah DNA,

lemak, dan protein (Suryohudoyo, 2000). Dengan bertambahnya usia maka

akumulasi kerusakan sel akibat radikal bebas semakin mengambil peranan,

sehingga mengganggu metabolisme sel, juga merangsang mutasi sel, yang

akhirnya bisa berakibat kanker dan kematian.

2.2 Kulit

Secara mikroskopis struktur kulit manusia terdiri dari : epidermis, dermis

dan subkutis (Baumann et al ., 2009). Dua struktur yaitu epidermis dan dermis

saling berhubungan dibatasi dermal epidermal junction.

1. Lapisan epidermis

Merupakan lapisan terluar. Bervariasi ketebalannya antara 0,04 mm (kulit

kelopak mata) sampai 1,5 mm (kulit telapak tangan) (Jain, 2012). Keratinosit atau

dikenal juga dengan sebutan korneosit, adalah sel utama pada lapisan epidermis.

Keratin filamen merupakan komponen utama dari keratinosit, dan berfungsi


12/121

12

sebagai jaringan pendukung. Keratinosit permulaan terdapat pada basal epidermis

dan di dermal-epidermal junction. Diproduksi oleh stem cell , dan ketika stem cell

membelah, menghasilkan sel serupa, dengan lambat berpindah ke lapisan atas

epidermis. Proses ini disebut keratinisasi (Baumann et al ., 2009). Lapisan

epidermis dibagi menjadi empat lapisan berdasarkan ciri-ciri bentuk sel dan

protein intraseluler yaitu dari luar ke dalam stratum korneum, stratum

granulosum, stratum spinosum, dan stratum basale (germinativum).

Gambar 2.1 Struktur anatomi kulit (Dikutip dari : Anonym, 2009)

Stratum Basale

Lapisan terdalam kulit, terletak diatas membran dasar, mengandung sel

keratinosit, melanosit, sel merkel, dan sel Langerhans (utamanya terletak di

stratum spinosum). 10% dari sel basal merupakan stem cell , 50% amplifying cell ,

dan 40% postmitotic cell (Baumann et al ., 2009). Normalnya, stem cell


13/121

13

membelah dengan lambat, tetapi pada kondisi tertentu seperti pada proses

penyembuhan luka atau pengaruh growth factors, akan membelah dengan cepat

(Baumann et al ., 2009). Dibentuk oleh sel kolumnar dan terjadi multiplikasi pada

lapisan ini, dan juga terjadi ekspresi dari ornithine decarboxylase (ODC) sebagai

marker dari aktivitas proliferasi (Jain, 2012).

Stratum Spinosum

Terdiri dari 5-12 lapisan dengan bentuk sel polyhedral, inti sel bulat dan

„spiny‟ . Lapisan ini mengandung sel keratinosit dan sel Langerhans. Sel-sel

mengandung granula lamellar yang membawa lipid intraseluler, mengandung

glikoprotein dan prekursor lipid, terlibat dalam pembentukan lapisan barier

kutaneus (Jain, 2012). Pelepasan lipid melapisi permukaan memberikan fungsi

barrier (Baumann et al ., 2009).

Stratum Granulosum

Lapisan tipis, terdiri dari 1-3 lapisan, merupakan lapisan sel fusiform,

datar dan mengandung granuler keratohialin.

Stratum Korneum

Merupakan lapisan teratas dari epidermis, disebut juga horny layer .

Keratinosit menetap pada lapisan ini, menjadi matang, dan terjadi proses

keratinisasi yang sempurna. Keratinosit tidak mengandung organel dan tersusun

menyerupai dinding batu bata (Baumann et al ., 2009). Melindungi kulit secara

mekanik, kehilangan cairan, dan impermeabiliti. Korneosit mengandung keratin

yang tertanam dalam matriks kaya filaggrin. Hasil dari degradasi filaggrin adalah

urocanic acid yang mengabsorbsi radiasi ultra violet dan membentuk secara alami


14/121

14

moisturization factor , sehingga terhindar dari kekeringan kulit. Seramid

merupakan barrier lipid utama untuk kulit, barrier lipid lainnya meliputi

cholesterol, cholesterol sulfat dan asam lemak (Jain, 2012).

Membran Basalis

Barier selektif antara epidermis dan dermis, mengikat epidermis ke

dermis. Ada dua membran basalis yaitu dermo-epidermal junction dan dermal

pembuluh darah.

2. Lapisan Dermis

Lapisan yang tebalnya 15 – 40 x tebal epidermis, mengandung komponen

mesoderm, dibagi menjadi lapisan superfisial yaitu papila dermis dan lapisan

dalam yaitu retikular dermis (mengandung sejumlah besar kolagen dan serat-serat

elastin, pembuluh darah, saraf, limfatik, otot, pilosebasea, kelenjar apokrin dan

ekrin).

Kolagen

Kolagen merupakan satu dari sejumlah protein alam terkuat dan

jumlahnya terbanyak dan berlimpah pada manusia yaitu di bagian kulit,

memberikan ketahanan dan daya lentur pada kulit (Baumann et al ., 2009).

Merupakan protein fibrous, 70 -80% berat dari dermis, komponen terpenting dari

dermis (Jain, 2012). Kolagen disintesa dalam fibroblas dalam bentuk prekursor

kolagen yaitu prokolagen. Sisa prolin dalam rantai prokolagen diubah menjadi

hidroksiprolin oleh enzim prolyl hydroxylase. Sisa lisin pada rantai prokolagen

juga diubah menjadi hidroksilisin oleh enzim lysyl hydroxylase. Kedua reaksi ini

membutuhkan Fe++, vitamin C, dan α-ketoglutarate (Baumann et al ., 2009).


15/121

15

Kolagen dihancurkan oleh metalloprotein, sintesisnya dirangsang oleh asam

retinoat, dihambat oleh IL-1, glukokortikoid, D-penicillamine, radiasi ultraviolet

(Jain, 2012 ).

3. Lapisan subkutis

Merupakan lapisan di bawah dermis atau hipodermis yang terdiri dari

lapisan lemak. Lapisan ini terdapat jaringan ikat yang menghubungkan kulit

secara longgar dengan jaringan di bawahnya. Jumlah dan ukurannya berbeda-beda

menurut daerah di tubuh dan keadaan nutrisi individu. Berfungsi menunjang

suplai darah ke dermis untuk regenerasi (Baumann et al ., 2009).

Banyak fungsi dari kulit, yaitu: fungsi barier, mengatur suhu, sintesa

vitamin D3, melindungi dari sinar ultraviolet yang merusak, melindungi dari

mikro organisme patogen, fungsi sensasi, ekskresi dan metabolisme (Baumann et

al ., 2009). Dari berbagai fungsi itu, kulit sebagai barier adalah yang terpenting.

Kulit berfungsi sebagai barier antara bagian luar dan dalam untuk melindungi dari

agen-agen mekanik, kimia, dan serangan mikroba di lingkungan sekitar (Elias et

al ., 2007).

2.3 Luka

2.3.1 Definisi Luka

Berdasarkan Wound Healing Society, luka adalah kerusakan fisik sebagai

akibat dari terbukanya atau hancurnya kulit yang menyebabkan

ketidakseimbangan fungsi dan anatomi kulit normal (Nagori and Solanki, 2011).

Luka juga didefinisikan sebagai gangguan dari seluler, anatomi, dan fungsi yang

berkelanjutan dari jaringan hidup yang disebabkan oleh trauma fisik, kimia, suhu,


16/121

16

mikroba, atau imunologi yang mengenai jaringan (Thakur et al ., 2011).

Disebutkan juga luka adalah kerusakan dari integritas epitel kulit diikuti dengan

terganggunya struktur dan fungsi dari jaringan normal sebagai akibat dari luka

memar, luka lebam, luka robek, luka koyak atau luka lecet (Soni and Singhai,

2012). Luka ini mengakibatkan kehilangan kesinambungan dari epitel dengan atau

tanpa kehilangan dari jaringan penunjangnya.

Menurut Nagori and Solanki (2011), klasifikasi luka berupa luka terbuka

dan tertutup berdasarkan penyebab dasar dari luka, serta luka akut dan kronis

berdasarkan fisiologi dari penyembuhan luka. Meliputi :

Luka terbuka : terjadi perdarahan yang terlihat secara kasat mata dimana darah

keluar dari tubuh. Luka terbuka meliputi luka insisi, luka laserasi, abrasi atau luka

dangkal, luka tusukan kecil, luka penetrasi, dan luka tembak

Luka tertutup : pada luka jenis ini darah keluar dari sistem sirkulasi darah tetapi

tersisa di dalam tubuh. Telihat dalam bentuk luka memar. Luka tertutup sedikit

penggolongannya tetapi lebih berbahaya dari luka terbuka. Luka tertutup meliputi

benturan atau luka memar, hematoma atau tumor darah, dan cedera yang keras.

Luka akut : merupakan cedera pada jaringan yang normalnya dilanjutkan dengan

proses perbaikan yang tersusun rapih dan tepat waktu, mengakibatkan pemulihan

integritas jaringan secara anatomi dan fungsi dapat dipertahankan. Biasanya

disebabkan oleh luka terpotong atau insisi bedah dan proses penyembuhan luka

yang lengkap dalam kerangka waktu yang diharapkan.

Luka kronis : terjadi karena kegagalan penyembuhan luka dalam tahap yang

normal dan kemudian masuk ke dalam tahap inflamasi yang patologi. Luka kronis


17/121

17

membutuhkan periode waktu penyembuhan yang lama, tidak sembuh, atau

kekambuhan yang sering. Merupakan sebab utama ketidakmampuan secara fisik.

Infeksi lokal, hipoksia, trauma, benda asing dan problem sistemik seperti diabetes

mellitus, malnutrisi, defisiensi fungsi imun atau obat-obatan seringkali

menyebabkan luka kronis.

2.3.2 Penyembuhan Luka

Luka dapat menyebabkan ketidakmampuan seseorang secara fisik.

Penyembuhan luka merupakan reaksi kompleks yang saling mempengaruhi dari

kegiatan seluler dan biokimia, yang mengatur pemulihan integritas struktural dan

fungsional jaringan luka (Thakur et al ., 2011). Penyembuhan luka terdiri dari

serangkaian proses yang tersusun rapih sehingga jaringan yang rusak dapat

bersatu seperti semula.

Penyembuhan luka yang normal dipengaruhi banyak faktor. Bila proses

penyembuhan ini gagal dapat berkembang menjadi luka yang kronis (Nagori and

Solanki, 2011). Luka yang tidak sembuh secara terus menerus menghasilkan

mediator inflamasi yang menyebabkan sakit dan bengkak di tempat luka. Luka

tersebut menyebabkan infeksi dan pemulihan luka yang panjang. Selain infeksi,

komplikasi yang sering dihubungkan dengan penyembuhan luka yang buruk

meliputi selulitis, deformitas, keloid, gangrene, sepsis, tetanus, infeksi fatal dari

sistem saraf. Pada luka terbuka sering terjadi isemik dan nekrosis yang bisa

mengakibatkan amputasi (Reddy et al ., 2012).


18/121

18

Faktor-faktor yang mempengaruhi penyembuhan luka diantaranya adalah :

Diet yang salah: penyembuhan luka adalah suatu proses anabolik yang

membutuhkan energi dan nutrisi. Serum albumin 3,5 gram/dl atau lebih

dibutuhkan untuk penyembuhan luka. Protein penting untuk sintesa kolagen pada

luka. Keadaan malnutrisi berakibat menurunnya kecepatan sintesa kolagen pada

jaringan luka dan meningkatkan kejadian infeksi (Nagori and Solanki, 2011).

Infeksi di daerah luka : Infeksi pada luka merupakan alasan terkuat bagi

kegagalan penyembuhan luka. Organisme terpenting adalah Staphylococcus

aureus, Streptococcus pyogenes, Corynebacerium sp, Escherichia coli dan

Pseudomonas aeruginosa (Nagori and Solanki, 2011).

Kekurangan asupan oksigen dan perfusi jaringan ke daerah luka : misalnya

dalam keadaan sakit yang sangat, dingin, atau cemas dapat menyebabkan

vasokonstriksi lokal dan meningkatkan waktu penyembuhan. Merokok dan

penggunaan tembakau menurunkan perfusi jaringan dan tekanan oksigen pada

luka (Nagori and Solanki, 2011).

Obat-obatan : kemoterapi untuk kanker merupakan grup obat-obatan yang

memperlambat proses penyembuhan luka. Glukokortikoid sistemik juga

mempengaruhi proses penyembuhan yang normal, dengan menurunkan sintesa

kolagen dan proliferasi fibroblast (Nagori and Solanki, 2011).

Umur tua : Pada usia lanjut terjadi keterlambatan penyembuhan luka yang

disebabkan karena aktifitas dan pertumbuhan fibroblas yang berkurang dan

produksi kolagen menurun, juga kontraksi luka yang melambat (Nagori and

Solanki, 2011).


19/121

19

Diabetes dan kondisi penyakit lainnya : Pasien diabetes lebih memungkinkan

terjadinya infeksi pada luka, juga terjadi pada gangguan fungsi imun tubuh.

Keterlambatan penyembuhan luka juga terjadi pada pasien dengan penyakit akut

dan kronik liver (Nagori and Solanki, 2011).

Gambar 2.2 Fase Penyembuhan Luka (dikutip dari : Vowden, 2002)

Penyembuhan luka merupakan suatu proses yang kompleks dibagi menjadi

tiga fase yang saling overlapping yaitu fase inflamasi, proliferasi dan remodeling.

Disebut overlapping karena mediator yang dikeluarkan pada fase-fase tersebut

sering sama. Ini menunjukkan seluruh fase berjalan secara berurutan dan juga

menerangkan hubungan secara linear mengenai penyembuhan luka mulai dari

terjadinya luka sampai dengan terjadinya perbaikan, bahkan sampai bisa menjadi

luka kronis. Beberapa penulis membagi fase penyembuhan luka menjadi empat

fase dimana fase pertama merupakan proses hemostatis yang lebih menekankan

pada respon vaskuler (Li et al ., 2007). Yang menjadi perhatian adalah penjabaran

mengenai seluruh proses perbaikan luka sulit dijelaskan atau digolongkan dalam


20/121

20

fase-fase yang tepat dan hal ini harus menjadi pertimbangan karena fase-fase

tersebut sering overlapping (Falanga, 2007).

Fase Inflamasi

Inflamasi merupakan reaksi awal bila tubuh terkena luka ( Li et al ., 2007).

Fase ini terjadi segera setelah cedera dan dapat berlangsung sampai 4-6 hari

(Broughton et al ., 2006). Reaksi awal adalah terjadinya vasodilatasi lokal,

keluarnya darah dan cairan menuju ruangan ekstravaskuler, dan terhambatnya

aliran limfatik. Semua ini mengakibatkan timbulnya tanda-tanda utama untuk

terjadinya suatu inflamasi, termasuk bengkak, merah dan panas. Respon inflamasi

akut ini biasanya antara 24-48 jam dan dapat menetap diatas 2 minggu untuk

beberapa kasus ( Li et al ., 2007). Fase ini merupakan tahap awal yang alami untuk

mengangkat jaringan debris dan mencegah infeksi yang invasif (Gurtner, 2007).

Gambar 2.3 Regenerasi Luka (Dikutip dari : Schafer, 2012)

Fase ini dibagi menjadi dua yaitu respon vaskular dan respon seluler (Li

et al ., 2007). Pada respon vaskular, perdarahan terjadi segera sesudah jaringan


21/121

21

cedera sebagai akibat dari terganggunya atau rusaknya pembuluh darah. Langkah

pertama dari proses penyembuhan luka adalah hemostasis. Hemostasis terdiri dari

dua proses utama: pembentukan fibrin clot dan koagulasi. Platelet adalah sel

pertama yang muncul sesudah terjadinya cedera dan mengatur hemostasis normal.

Perubahan trombin menjadi fibrinogen dan kemudian menjadi fibrin selama

agregasi platelet, menyebabkan fibrin clot terbentuk dan menghentikan

perdarahan.

Komponen ke dua dari hemostasis adalah koagulasi melalui intrinsik dan

ekstrinsik coagulation pathways. Kerusakan jaringan melepaskan lipoprotein yang

dikenal sebagai tissue factor . Platelet meningkatkan pembentukan jaringan baru

melalui pelepasan beberapa growth factors kuat yang berpengaruh pada perbaikan

luka, seperti transforming growth factor alpha (TGF-α), transforming growth

factor beta (TGF-β) , dan platelet-derived growth factor (PDGF) ( Li et al ., 2007).

Pada respon seluler, ciri-ciri fase inflamasi adalah masuknya lekosit ke

daerah luka Segera setelah terjadinya luka sel netrofil dalam jumlah besar

berpindah dari kapiler menuju jaringan luka, kemudian jumlah netrofil menurun

dan digantikan dengan makrofag (perubahan dari monosit). Monosit segera

berubah menjadi makrofag pada jaringan luka fase selanjutnya, kurang lebih

dalam 48 sampai 72-96 jam setelah luka (Broughton et al ., 2006; Gurtner, 2007).

Monosit ini ditarik ke jaringan luka oleh chemoattractans yang sama dengan

netrofil, juga oleh monocyte chemoattractant protein dan macrophage

inflammatory protein, oleh produk dari degradasi matriks ekstraseluler seperti

fragmen kolagen, fragmen fibronectin, dan trombin ( Li et al ., 2007).


22/121

22

Makrofag berperan penting dalam pengaturan sel seperti fungsi

fagositosis, memakan dan mencerna serta membunuh organisme patogen,

membersihkan debris jaringan dan merusak sisa netrofil, menarik fibroblas ke

jaringan luka dan memicu pembuluh darah baru. Makrofag merupakan pabrik

produksi growth factors seperti PDGF, fibroblast growth factor (FGF), vascular

endothelial growth factor (VEGF), TGF- β , dan TGF-α.

Dalam fase inflamasi ini, netrofil dan makrofag menghasilkan sejumlah

besar anion superoksid radikal, yang sering digambarkan sebagai „respiratory

burst‟ . Kemudian sel lain seperti fibroblas dirangsang oleh sitokin pro inflamasi

untuk memproduksi reactive oxygen spesies (ROS) (Keller et al ., 2006). Selain

efek positif untuk membunuh bakteri, ROS ini juga berdampak negatif,

menghambat migrasi sel, merusak jaringan dan bahkan berubah menjadi

neoplasma (Keller et al ., 2006). Untuk melindungi dari stres oksidatif, sel-sel

mempunyai beberapa sistem untuk mendetoksifikasi ROS, yaitu secara non-

enzimatik dan enzimatik. (Keller et al ., 2006).

Suatu luka disebut luka kronis bila fase inflamasi menetap berbulan-bulan

bahkan tahunan. Fase inflamasi menetap pada keadaan luka yang hipoksia,

infeksi, defisiensi nutrisi, penggunaan obat-obatan tertentu, atau faktor lain yang

dihubungkan dengan respon imun pasien (Reddy et al ., 2012). Luka kronis

membentuk jaringan nekrotik yang tercemar oleh organisme patogen atau

mengandung material asing yang tidak dapat di fagositosis selama fase akut

inflamasi. Granulosit tidak muncul, sebaliknya sel mononuklear terutama limfosit,

monosit, dan makrofag menetap pada daerah inflamasi. Tidak ada tanda-tanda


23/121

23

inflamasi. Makrofag menarik fibroblas dan dalam waktu yang lama memproduksi

sejumlah besar kolagen, membentuk masa encapsulated dari jaringan fibrous

dengan lambat, suatu granuloma (Li et al ., 2007).

Fase Proliferasi

Pada fase ini aktifitas seluler lebih utama. Tahap-tahap utama meliputi

pembentukan barier permeabilitas (epitelisasi), kecukupan suplai darah

(angiogenesis) dan pembentukan kembali jaringan dermis pada jaringan yang luka

(fibroplasia) (Li et al ., 2007). Ciri-ciri fase proliferasi adalah angiogenesis,

deposit kolagen, pembentukan jaringan granulasi, epitelisasi, dan kontraksi luka

(Nayak et al ., 2007). Fase ini akan dimulai pada hari ke 3 bersamaan dengan

memudarnya fase inflamasi dan terus sampai pada hari ke 14, bahkan lebih

setelah luka, didominasi dengan pembentukan jaringan granulasi dan epitelisasi

(Reddy et al ., 2012). Broughton et al . (2006) menyebutkan fase proliferasi

dimulai segera setelah fase inflamasi yang berlangsung 4 - 6 hari.

Epitelisasi

Proses ini mengembalikan epidermis utuh seperti semula. Faktor yang

terlibat adalah migrasi keratinosit pada jaringan luka, proliferasi keratinosit,

diferensiasi neoepitelium menjadi epidermis yang berlapis-lapis, dan

mengembalikan basement membrane zone (BMZ) menjadi utuh yang

menghubungkan epidermis dan dermis (Li et al ., 2007). Epidermal growth factor

(EGF), keratinocyte growth factor (KGF), dan TGF-α merupakan faktor penting

untuk merangsang migrasi keratinosit, proliferasi, dan epitelisasi. Hari ke 7-9


24/121

24

sesudah epitelisasi, BMZ terbentuk. Struktur kulit pada BMZ terdiri dari banyak

protein matriks ekstraseluler seperti kolagen dan laminins.

Pembentukan kembali dermis dimulai kira-kira hari ke 3-4 setelah

perlukaan, dengan ciri klinik pembentukan jaringan granulasi, meliputi

pembentukan pembuluh darah baru atau angiogenesis, dan penumpukan fibroblas

atau fibroplasia ( Li et al ., 2007).

Fibroplasia

Adalah suatu proses proliferasi fibroblas, migrasi fibrin clot ke daerah

luka, dan produksi dari kolagen baru dan matriks protein lainnya, yang terlibat

dalam pembentukan jaringan granulasi. Respon awal saat terjadinya luka,

fibroblas di pinggir luka memulai proliferasi dan kira-kira hari ke 4 dimulai

migrasi menuju matriks dari bekuan luka yang kaya kolagen, proteoglikan, dan

elastin. PDGF, TGF-β , EGF dan FGF merangsang dan mengatur migrasi fibroblas

dan mengatur ekspresi dari reseptor integrin. Proliferasi fibroblas diatur dan

dirangsang oleh EGF, FGF, kondisi asam rendah oksigen yang ditemukan pada

pusat luka. Sekali fibroblas bermigrasi ke daerah luka, selanjutnya akan berubah

fenotipnya secara bertahap menjadi profibrotic phenotype yang fungsi utamanya

juga berubah yaitu untuk sintesa protein. Selain itu fibroblas juga berubah

fenotipnya menjadi myofibroblast yang berperan pada kontraksi luka (Li et al .,

2007)


25/121

25

Gambar 2.4 Fase Inflamasi (1), Fase Proliferasi (2), Fase Remodelling (3a, 3b) (dikutip dari : Romo, 2012)

Fibroblas tampak berbentuk fusiformis diantara serabut-serabut jaringan,

memiliki tonjolan-tonjolan sitoplasma yang tidak teratur, inti bulat telur, besar,

kromatin halus, dan memiliki nukleus yang jelas (Kalangi, 2004). Pada jaringan

ikat longgar dijumpai berbentuk bintang atau stelata sebagai akibat serabut-

serabut jaringan ikat yang tidak teratur. Fibroblas memiliki banyak mikrofilamen

proaktin serta mikrotubul. Fibroblas berfungsi untuk mensintesis matriks

ekstraseluler seperti serabut kolagen, serbut elastin, dan zat-zat amorf.

Angiogenesis (Neovaskularisasi)

Angiogenesis ditandai dengan migrasi sel endotel dan pembentukan

kapiler (Broughton et al ., 2006). Terjadi pertumbuhan kapiler baru pada daerah

yang berdekatan dengan luka berupa tunas-tunas yang terbentuk dari pembuluh


26/121

26

darah dan akan berkembang menjadi percabangan baru pada jaringan luka (Singer

and Clark, 1999).

Selama angiogenesis, sel endotelial juga memproduksi dan mengeluarkan

substansi biologikal aktif atau sitokin. Beberapa growth factor terlibat dalam

angiogenesis adalah VEGF , angiopoietins, FGF , dan TGF-β. Berbagai tipe sel

termasuk keratinosit, fibroblas, dan sel endotelial menghasilkan endothelial

growth factor. VEGF ini terdapat dalam kadar rendah pada kulit normal,

sebaliknya kadarnya tinggi pada waktu penyembuhan luka. Keadaan

mempengaruhi timbulnya growth factor (Li et al ., 2007). Angiogenesis

berlangsung proporsional untuk perfusi darah dan tekanan parsial oksigen arteri

(Ueno et al ., 2006).

Kontraksi Luka

Kontraksi dari luka dimulai segera sesudah terjadinya perlukaan dan

mencapai puncaknya 2 minggu. Derajat kontraksi luka bervariasi tergantung

kedalaman luka. Untuk luka yang dalam, kontraksi merupakan bagian penting dari

penyembuhan dan lebih dari 40% menurun dalam ukuran luka. Luka dengan

kedalaman yang parsial, kontraksi kurang penting ( Li et al ., 2007).

Myofibroblast adalah mediator utama dari proses kontraksi karena

kemampuannya untuk meluas dan menarik. Selama pembentukan jaringan

granulasi, secara bertahap fibroblas berubah menjadi myofibroblast yang

memegang peranan pada kontraksi luka (Broughton et al ., 2006), dengan ciri

ikatan mikrofilamen aktin (tidak terlihat pada kulit yang normal) ( Li et al ., 2007)


27/121

27

yang mampu meregenerasi matriks dan kontraksi (Gurtner, 2007). Fibronectin

membantu dalam kontraksi luka.

Fase Remodeling

Merupakan fase terpanjang penyembuhan luka yaitu pematangan proses,

yang meliputi perbaikan yang sedang berlangsung pada jaringan granulasi yang

membentuk lapisan epitel yang baru dan meningkatkan tegangan pada luka (Ueno

et al ., 2006). Remodeling meliputi deposit dari matriks ( Li et al ., 2007), deposit

kolagen pada tempatnya (Broughton et al ., 2006), dan kontraksi scar (Gurtner,

2007).. Pada fase remodeling kekuatan peregangan jaringan ditingkatkan karena

cross-linking intermolekular dari kolagen melalui hidroksilasi yang membutuhkan

vitamin C (Reddy et al ., 2012).

Satu dari ciri-ciri fase ini adalah perubahan komposisi matriks

ekstraseluler. Kolagen tipe III muncul pertama kali sesudah 48 – 72 jam dan

maksimal disekresi antara 5 – 7 hari. Jumlah kolagen total meningkat pada awal

perbaikan, mencapai maksimum antara 2 sampai 3 minggu sesudah cedera (Li et

al ., 2007). Kolagen tipe III yang diproduksi oleh fibroblas selama fase proliferasi

akan diganti oleh kolagen tipe I selama beberapa bulan berikutnya melalui proses

yang lambat dari kolagen tipe III (Gurtner, 2007).

Selama periode 1 tahun atau lebih, dermis secara bertahap kembali kepada

fenotip yang stabil seperti sebelum cedera, dan komposisi terbanyak adalah

kolagen tipe I. Kekuatan regangan yang merupakan penilaian dari fungsi kolagen,

meningkat 40% kekuatannya dalam jangka waktu 1 bulan dan terus meningkat


28/121

28

sampai 1 tahun, mencapai lebih dari 70% kekuatannya dari normal pada akhir

fase remodeling ( Li et al ., 2007).

Proses perubahan dari dermis dilaksanakan melalui kontrol yang ketat

antara sintesa kolagen baru dan lisis dari kolagen lama yang dilakukan oleh matrix

metalloprotein (MMP). MMP biasanya tidak terdeteksi atau kadarnya sangat

rendah pada jaringan sehat, dan timbul selama perbaikan luka. Aktifitas katalitik

dari MMP juga dikontrol oleh inibitor jaringan dari metaloprotein. Keseimbangan

antara aktifitas MMP dan inhibitornya juga merupakan hal penting dalam

perbaikan luka dan remodeling ( Li et al ., 2007). Ketidakseimbangan yang terjadi

dapat menyebabkan keterlambatan penyembuhan luka atau berlebihnya jaringan

fibrosis sehingga menyebabkan jaringan parut, hipertropi scar atau bahkan keloid.

Keadaan ini dapat terjadi pada penderita diabetes, infeksi, usia lanjut, dan nutrisi

yang buruk ( Li et al ., 2007).

2.4 Radikal Bebas dan Antioksidan

Radikal bebas didefinisikan sebagai berikut: Radikal bebas adalah atom

yang memiliki elektron bebas atau elektron yang tidak berpasangan. Elektron ini

bersifat tidak stabil sehingga bersifat liar dan mudah menggandeng molekul lain

yang ada di sekitarnya. Ikatan tersebut menimbulkan reaksi yang tidak diinginkan.

Definisi lain radikal bebas adalah senyawa oksigen reaktif yang memiliki elektron

yang tidak berpasangan dan mencari pasangannya dengan cara mengikat elektron

yang ada di sekitarnya (Lingga, 2012).

Radikal bebas dihasilkan oleh tubuh sendiri (endogen), dan yang berasal

dari luar tubuh (eksogen). Radikal bebas endogen berasal dari proses biokimia


29/121

29

yang berlangsung di dalam mitokondria, membran plasma, lisosom, retikulum

endoplasma, dan inti sel. Ketika sel membutuhkan oksigen untuk menghasilkan

energi, timbul radikal bebas sebagai akibat dari produksi adenosine triphosphate

(ATP) oleh mitokondria. Hasil akhirnya berupa ROS, yang mempunyai dua sifat

yang berlawanan, racun dan komponen yang berguna (Huy et al ., 2008).

Pembentukan ROS terjadi pada rantai respirasi, fagositosis, sintesa prostaglandin,

dan sistem sitokrom P450 (Huy et al ., 2008).

Sedangkan radikal bebas eksogen berasal dari polusi udara dan air, asap

rokok, alkohol, logam berat (Cd, Hg, Pb, Fe, As), radiasi ultraviolet, obat-obatan

tertentu (cyclosporine, tacrolimus, gentamycin, bleomycin), pestisida, dan proses

memasak (daging asap, penggunaan minyak, lemak). Sesudah mencemari tubuh

dari berbagai jalan yang berbeda, komponen eksogen di metabolisme menjadi

radikal bebas (Huy et al ., 2008).

Radikal hidroksil merupakan senyawa yang paling berbahaya karena

reaktivitasnya sangat tinggi. Radikal hidroksil dapat merusak tiga jenis senyawa

yang penting untuk mempertahankan integritas sel, yaitu : asam lemak, khusus

asam lemak tak jenuh yang merupakan komponen penting fosfolipid penyusun

membran sel; DNA, merupakan perangkat genetik sel; protein, memegang

berbagai peran penting sesperti enzim, reseptor, antibodi, dan pembentuk matriks

sitoskeleton. Perusakan membran sel dan lipoprotein ini disebut lipid peroksidase.

Hal ini bisa terjadi pada keadaan stres oksidasi yang disebabkan

ketidakseimbangan antara pembentukan dan netralisasi radikal bebas. Radikal

bebas ini dapat dinetralisir bila kecukupan antioksidan di dalam tubuh terpenuhi.


30/121

30

Antioksidan adalah zat atau senyawa alami yang dapat melindungi sel

tubuh dari kerusakan dan penuaaan yang disebabkan oleh radikal bebas (Lingga,

2012).

Secara alami tubuh kita memiliki antioksidan endogen yang dihasilkan

sendiri oleh tubuh. Kapasitas antioksidan yang dimiliki oleh setiap individu

berbeda-beda, tergantung pola hidup yang dijalani masing-masing individu, serta

faktor usia. Sistem pertahanan tubuh yang utama dilakukan oleh antioksidan

endogen, selebihnya dilakukan oleh antioksidan eksogen. Antioksidan endogen

merupakan antioksidan alami yang dihasilkan tubuh atau disebut pula sebagai

antioksidan primer, sedangkan antioksidan eksogen terdiri atas antioksidan

sekunder, tersier, pengikat oksigen (oxygen scavenger ), dan pengikat logam

(chelator atau sequestrans) (Lingga, 2012). Macam-macam antioksidan adalah

sebagai berikut:

Antioksidan primer

Antioksidan primer berbentuk enzim sehingga disebut juga sebagai

antioksidan enzimatis. Disebut primer karena bekerja secara cepat memberikan

atom hidrogen kepada senyawa radikal, sehingga berubah menjadi stabil

(Suwardi, 2011; Lingga, 2012), merupakan antioksidan enzimatik utama yang

terlibat langsung menetralkan ROS (Huy et al ., 2008). Antioksidan enzimatis

diantaranya adalah superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathion peroksidase

(GPx).

Radikal bebas oksigen atau superoksid dinetralkan oleh SOD menjadi

H2O2. Enzim catalase menetralkan H2O2 dengan menguraikannya menjadi air


31/121

31

dan oksigen. Sedangkan glutathion peroksidase berfungsi seperti katalase

menguraikan H2O2 menjadi air dan oksigen (Huy et al ., 2008).

Antioksidan sekunder

Disebut juga antioksidan non-enzimatis, berfungsi menangkap radikal

bebas serta mencegah terjadinya reaksi berantai sehingga menghindari kerusakan

sel yang lebih parah (Lingga, 2012). Antioksidan ini dibagi menjadi antioksidan

metabolik dan antioksidan nutrient.

Antioksidan metabolik yang termasuk antioksidan endogen diproduksi

oleh metabolisme tubuh, seperti asam lipoid , glutation, L-arginin, coenzim Q10,

melatonin, uric acid, bilirubin, metal-chelating protein, transferrin (Huy et al .,

2008). Sedangkan antioksidan nutrient yang termasuk antioksidan eksogen adalah

komponen yang tidak dapat diproduksi tubuh dan hanya didapat dari makanan

atau suplemen, misalnya vitamin A, C, dan E, serta beberapa macam zat nirgizi

antara lain karotenoid, flavonoid, tanin dan sejumlah fitokimia lainnya (Lingga,

2012), trace metals (selenium, manganese, zinc), omega-3, dan omega-6 (Huy et

al , 2008).

Antioksidan tersier

Antioksidan kelompok ini adalah enzim DNA-repair. Enzim ini

memperbaiki biomolekuler yang rusak akibat reaktivitas radikal bebas (Suwardi,

2011). Antioksidan tersier berupa enzim metionin sulfoksida (Lingga, 2012). Cara

kerjanya memperbaiki kerusakan DNA melalui proses metilasi, yakni

terbentuknya sadenosylmetionin (SAMe) dari asam amino metionin yang bereaksi


32/121

32

dengan ATP. Kekurangan metilasi ini salah satunya dapat menimbulkan penuaan

dini (Suwardi, 2011).

Cara kerja antioksidan

Cara kerja antioksidan melalui satu dari dua cara yaitu: memutus rantai

atau pencegahan. Antioksidan pemutus rantai (Vitamin C, E, karotenoid,

flavonoid dan lain-lain), memutus rantai pembentukan radikal bebas yang

berantai, misalnya memutus rantai lipid peroksidase. Untuk pencegahan, berperan

antioksidan enzim (SOD , catalase, dan GPx), yang mencegah proses oksidasi

rantai awal, misalnya membasmi radikal bebas sejak awal pembentukan atau

menstabilkan radikal logam seperti tembaga dan besi (Huy et al ., 2008).

Antioksidan nutrient

Antioksidan yang didapat dari makanan memegang peranan penting dalam

membantu antioksidan endogen untuk mengatasi stres oksidatif. Masing-masing

nutrient ini unik dalam struktur dan fungsi sebagai antioksidan.

Vitamin E. Merupakan vitamin yang larut dalam lemak dan mempunyai

potensi antioksidan yang tinggi. Karena larut dalam lemak, vitamin E dalam

bentuk α-tocopherol melindungi membran sel dari kerusakan akibat radikal bebas

(Huy et al ., 2008).

Vitamin C. Merupakan vitamin yang larut dalam air. Sangat penting

untuk biosintesa kolagen, karnitin, dan neurotransmiter. Vitamin C bekerja

sinergis dengan vitamin E untuk menghilangkan radikal bebas dan juga

memperbaharui bentuk vitamin E (Huy et al ., 2008).


33/121

33

Beta karoten. Sifat larut dalam lemak, termasuk karotenoid yang

berbentuk provitamin, karena dapat diubah menjadi vitamin A aktif. Merupakan

antioksidan kuat dan terbaik menghilangkan singlet oksigen (Huy et al ., 2008).

Selenium (Se). Merupakan trace mineral ditemukan dalam tanah, air,

sayur-sayuran (bawang putih, bawang merah, kaacang-kacangan), sea food,

daging, hati. Untuk mengaktifkan glutathion peroksidase (Huy et al ., 2008).

Zinc (Zn). Merupakan ko-faktor berbagai sistem enzim termasuk zinc-

dependent matrix metalloproteinase (Thakur et al ., 2011).

Flavonoids . Merupakan komponen polyphenolic yang terdapat pada

banyak tanaman. Berdasarkan struktur kimia, diketahui terdapat lebih 4000

flavonoid , yang efeknya menguntungkan bagi kesehatan tubuh, utamanya sebagai

antioksidan yang kuat dan kemampuan mengikat zat tertentu yang berbahaya bagi

tubuh (chelat ). Efek perlindungan dari flavonoid dalam sistem biologikal adalah

kapasitasnya untuk mentransfer elektron kepada radikal bebas, mengikat katalis

logam, mengaktifkan antioksidan enzimatik, mengurangi radikal α-tocopherol,

dan menghambat oksidase (Heim et al ., 2002). Kemampuan untuk membasmi

radikal bebas utamanya disebabkan karena reaktifitas yang tinggi dari gugus

hydroxyl flavonoid dengan reaksi sebagai berikut ;

F-OH + R . F-O.+ RH

Efek chelating dari flavonoid dengan menetralkan ion besi dari kelebihan besi

dalam sel hepar, sehingga menghambat kerusakan oksidatif. Reaksi dari besi fero

dengan hidrogen peroksida menghasilkan radikal hidroksil yang kemudian

mengoksidasi biomolekul di sekitarnya. Dikenal sebagai reaksi Fenton, yang


34/121

34

berhubungan dengan konsentrasi tembaga atau besi. Reaksi Fenton ini dihambat

dengan kuat oleh flavonoid (Heim et al ., 2002).

Saponins . Merupakan komponen sekunder yang ditemukan dalam banyak

tanaman dapat berbentuk busa stabil dalam larutan yang mengandung air, seperti

sabun. Secara kimiawi, saponin sebagai sebuah grup yang meliputi glycosylated

steroid, triterpenoids dan steroid alkaloids. Sebagai antioksidan, saponin

mempunyai kekuatan mereduksi, aktivitas membasmi radikal superoksid, aktivitas

mengikat logam, dan antibakteri (Li et al ., 2009).

Tannins . Berfungsi sebagai antioksidan untuk mencegah kerusakan

oksidatif DNA dengan dua cara, yaitu mengikat logam terutama besi dan secara

langsung membasmi radikal bebas (Lodovici et al ., 2001).

2.5 Tanaman Obat

Tumbuh-tumbuhan mempunyai kemampuan yang besar dalam mengobati

berbagai macam luka. Sejumlah besar tumbuh-tumbuhan digunakan oleh berbagai

suku bangsa di banyak negara untuk mengobati luka dan luka bakar. Bahan-bahan

alami ini dapat mengobati dan meregenerasi jaringan yang rusak dengan berbagai

mekanisme. Tanaman obat ini tidak hanya murah harganya dan mempunyai

kemampuan mengobati yang baik, tetapi juga aman (Thakur et al ., 2011).

Menurut Nayak and Pereira (2006), keberadaan dari berbagai kandungan utama

dalam tumbuh-tumbuhan mendesak para ilmuwan untuk meneliti yang

berpengaruh pada penyembuhan luka. Kandungan obat yang bernilai pada

tumbuh-tumbuhan berupa kandungan bioactive phytochemical . Kandungan


35/121

35

tersebut meliputi berbagai macam unsur kimia seperti alkaloid, minyak esensial,

flavonoids, tannins, terpenoids, saponins, dan phenolic (Edeoga et al ., 2005).

Perlukaan pada kulit rentan terjadi infeksi mikroba yang dapat

berkembang menjadi sepsis pada luka. Hal ini dapat terjadi karena daerah yang

terluka merupakan media yang ideal bagi berkembangnya organisme penyebab

infeksi. Pengobatan dengan topikal antibakteri merupakan salah satu cara

terpenting dalam perawatan luka. Ekstrak tanaman obat efektif menghentikan

perdarahan dari luka baru, menghambat pertumbuhan bakteri dan meningkatkan

penyembuhan luka (Okoli et al ., 2007).

Banyak tanaman obat dilaporkan mempunyai aktifitas penyembuhan luka

dan berguna untuk pengobatan luka. Tanaman obat merupakan sumber penting

dari substansi kimia baru yang mempunyai fungsi dan efek terapeutik (Nagori and

Solanki, 2011). Dilaporkan baru-baru ini beberapa tanaman obat secara signifikan

terlibat dalam proses penyembuhan luka yaitu Alternanthera sessilis, Morinda

citrifolia, Lycopodium serratum, Sesamum indicum, Catharanthus roseus,

Cecropia peltata, Euphorbia hirta, Ginkgo biloba, Clerodendrum serratum,

Pterocarpus santalinus, Lawsonia alba, Napoleona imperialis, Kaempferia

galangal, Radix paeoniae, Prosopis cineraria dan Trigonella foenum-graecum

(Nagori and Solanki, 2011). Khusus untuk Morinda citrifolia akan dibahas berikut

ini.


36/121

36

Phytoconstituent

Gambar 2.5 Mekanisme Penyembuhan Luka

(dikutip dari : Soni and Singhai, 2012)

Tannins Flavonoids Saponins Sterols dan

polyphenol

Triterpenoid

Sebagai pembasmi

radikal bebas

Efek astringent dan

anti mikroba

Antioksidan kuat dan efek

pembasmi radikal bebas,

memperbesar level enzim

antioksidan pada jaringan

granuloma

Aktivitas antioksidan dan

antimikroba,

berpengaruh pada

kontraksi luka dan

meningkatkan kecepatan

epitelisasi

Berpengaruh pada penyembuhan luka dengan aktivitas antioksidan dan

pembasmi radikal bebas, mengurangi lipid peroksidasi, mengurangi

nekrosis sel dan meningkatkan vaskularisasi

Meningkatkan

penyembuhan luka

dengan efek astringent

dan antimikroba

Mekanisme Penyembuhan Luka


37/121

37

2.6 Mengkudu (Morinda citrif olia)

2.6.1 Deskripsi dan Karakteristik Tumbuhan Mengkudu

Genus Morinda (Rubiaceae), meliputi spesies Morinda citrifolia L,

seluruhnya terdapat 80 spesies. Hanya sekitar 20 spesies Morinda yang

mempunyai nilai ekonomis, antara lain : Morinda bracteata, Morinda officinalis,

Morinda fructus, Morinda tinctoria dan Morinda citrifolia. Morinda citrifolia

adalah jenis yang paling populer, sehingga sering disebut sebagai “Queen of The

Morinda” (Waha, 2001; Suwardi, 2011).

Penyebarannya cukup luas, meliputi seluruh kepulauan Pasifik Selatan,

Malaysia, Indonesia, Taiwan, Filipina, Vietnam, India, Afrika, dan Hindia Barat

(Djauhariya et al ., 2006). Mengkudu tumbuh hampir di seluruh wilayah

kepulauan Indonesia. Ada dua jenis tumbuhan keluarga mengkudu yang terkenal

di Indonesia, yaitu : Morinda bracteata dan Morinda citrifolia. M.citrifolia atau

mengkudu adalah spesies yang lebih populer digunakan untuk pengobatan dan

bahan makanan (Waha, 2001).

Tumbuhan mengkudu mudah sekali tumbuh, terutama di daerah tropis dan

sekitarnya. Biasanya tumbuh secara liar di pantai, hutan, ladang, atau ditanam di

pekarangan sebagai tanaman sayur atau tanaman obat (Dalimartha, 2006).

Tumbuhan mengkudu termasuk tumbuhan tahunan (parenial), berbatang kecil,

dan berdaun lebar (Tadjoedin and Iswanto, 2002) Bagian tumbuhan ini terdiri

dari akar, batang, daun, bunga, buah dan biji. Khusus untuk daun karakteristiknya

sebagai berikut :


38/121

38

Daun : berbentuk tunggal, letak berhadapan, bertangkai pendek, tebal mengkilap,

berbentuk bulat telur lebar sampai berbentuk elips, ujung runcing, pangkal

menyempit, tepi rata, pertulangan menyirip, panjang 10-40 cm, lebar 5-17 cm, dan

berwarna hijau tua (Dalimartha, 2006).

Gambar 2.6 Pohon Mengkudu

2.6.2 Kandungan Utama Mengkudu

Selama satu abad, para ilmuwan dan dokter profesional telah meneliti

kandungan kimia dalam semua bagian dari mengkudu, meliputi daun, buah, kulit

kayu dan akar (Pal et al ., 2012). Berdasarkan hasil penelitian, senyawa metabolit

sekunder yang terkandung pada mengkudu telah banyak dilaporkan sejumlah

literatur dan publikasi ilmiah. Ternyata hampir semua bagian tumbuhan

mengkudu mengandung berbagai macam metabolit sekunder yang berguna bagi

kesehatan manusia. Awalnya ilmuwan menduga ada zat yang berbeda dalam buah

mengkudu yang bekerja secara bersama-sama menghasilkan efek yang baik bagi


39/121

39

tubuh. Namun setelah ditelusuri ternyata dalam akar, kulit, daun, dan bunganya

juga mengandung senyawa metabolit sekunder yang berkhasiat sebagai obat

(Kandi, 2006).

Sekitar 160 kandungan fitokimia telah diidentifikasi dari tumbuhan

mengkudu dan mikronutrien utama adalah kandungan fenol, asam organik, β -

sitosterol, caroten, flavon glikosid, rutin, terpenoid, dan alkaloid (Pal et al .,

2012). Kandungan zat penting dari mengkudu adalah anthraquinones, flavonol

glycosides, idridoid glycosides, lipid glycosides, dan triterpenoids (Su et al .,

2005).

Mengkudu mempunyai kandungan antioksidan yang banyak dan

merupakan sumber utama dari antioksidan natural atau phytochemical

(Ramamoorthy and Bono, 2007).

Kandungan kimia yang terdapat dalam daun mengkudu adalah sebagai

berikut: asam amino, mineral (kalsium, besi, zinc, magnesium, selenium, kalium,

natrium, fosfor) (Suwardi, 2011), vitamin (asam askorbat, beta karoten, niasin,

riboflavin, tiamin, beta sitosterol, asam ursolat), alkaloid (antrakuinon, glikosida,

resin) (Waha, 2001), saponin, tannins, triterpenoid, flavonoid (Nayak et al .,

2009), flavone glycosides, iridoid glycosides (Rasal et al ., 2008).


40/121

40

Tabel 2.1

Analisis Fitokimia dari Ekstrak Methanol Morinda citrifolia (mg/g)

(Sibi et al ., 2012)

EKSTRAK PHENOL FLAVONOID ALKALOID TANNIN SAPONIN TRITERPENOID STEROID GLIKOSIDA

DAUN + + ++ ++ + ++ - ++

BATANG - - + + - + - +

AKAR ++ ++ - ++ + - ++ +

2.6.3 Daun mengkudu dan Penyembuhan Luka

Pada penelitian akhir-akhir ini dilaporkan bahwa mengkudu secara

signifikan dapat meningkatkan kecepatan kontraksi luka, meningkatkan kekuatan

kulit sebagai akibat dari meningkatnya kolagen. Peningkatan berat kering

granuloma dan kekuatan granuloma sebagai indikasi pematangan yang baik dari

kolagen karena meningkatnya cross-linking . Scar yang terjadi juga lebih dangkal.

Semua ini didukung secara histopatologi. Semua bukti memperkuat bahwa

mengkudu mempercepat penyembuhan luka pada berbagai fase proses

penyembuhan luka (Pal et al ., 2012).

Penelitian oleh Nayak et al (2009) melaporkan bahwa ekstrak etanol dari

daun Morinda citrifolia secara signifikan meningkatkan kontraksi luka, kecepatan

epitelisasi dan berat jaringan granulasi. Sehingga pemberian ekstrak mengkudu

dapat meningkatkan pembentukan kolagen pada fase proliferasi penyembuhan

luka.

Penelitian oleh Rasal et al (2008) melaporkan bahwa ekstrak daun

Morinda citrifolia secara signifikan dapat meningkatkan kecepatan kontraksi luka,


41/121

41

kekuatan kulit sebagai cermin dari meningkatnya level kolagen. Dilaporkan juga

scar yang terbentuk lebih dangkal, kadar MDA menurun, dan secara histopatologi

digambarkan secara signifikan peningkatan neovaskularisasi, epitelisasi dan

fibroblas.

Kandungan triterpenoid dan flavonoid dari daun mengkudu diketahui

memegang peranan penting dalam meningkatkan proses penyembuhan luka.

Kedua zat tersebut diketahui mempunyai efek astringent, antimikroba, dan

antioksidan yang kuat diduga bertanggungjawab dalam kontraksi luka dan

peningkatan kecepatan dari epitelisasi (Nayak et al ., 2009; Saroja et al ., 2012).

Selain itu efek mengurangi dampak ROS dilaporkan merupakan strategi

penting dalam peningkatan proses penyembuhan luka. Disini berperan beberapa

antioksidan dalam kandungan daun mengkudu seperti asam askorbat, catalase

(Pal et al ., 2012).

Kandungan mineral dalam daun mengkudu bertindak sebagai ko-faktor

enzim, misalnya Mn, Cu, Zn, Mg, Fe, dan Se mengaktifkan antioksidan endogen

SOD dan glutation peroksidase (Suwardi, 2011).

Pada penelitian terbaru, penurunan kadar lipid peroksida terjadi pada

pemberian daun mengkudu, karena kandungan β -carotene, flavonol glycosides

dan iridoid glycosides yang berperan dalam aktivitas antioksidan, sehingga

menyebabkan percepatan dalam penyembuhan luka (Rasal et al ., 2008).

Pengaruh berbagai asam lemak dalam kandungan mengkudu juga terutama

asam linoleik menyebabkan percepatan penyembuhan luka. (Cardoso et al .,

2004).


42/121

42

Zat aktif tannins dan saponin juga berperan sebagai antioksidan dan

antimikroba, meningkatkan kontraksi luka dan meningkatkan kecepatan

epitelisasi (Thakur et al ., 2011).

Penemuan zat-zat anti bakteri dalam mengkudu mendukung kegunaanya

untuk merawat penyakit infeksi termasuk pada kulit dan terhadap proses

penyembuhan luka. Acubin, L.asperuloside, alizarin dan beberapa zat

anthraquinone telah terbukti sebagai zat anti bakteri, efektif melawan golongan

bakteri Pseudomonas aeruginosa, Proteus morganii, Staphylococus aureus,

Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella, dan Shigela (Peter, 2007). 5,15-

dimethyl-morindol adalah anthraquinone utama yang terkandung dalam buah dan

daun mengkudu (> 60% dari total anthraquinone), merupakan indikator utama

dari kandungan anthraquinone (Zhoe and Jensen, 2009).

Penelitian terakhir menyebutkan bahwa daun mengkudu mempunyai

mekanisme merangsang PDGF dan merangsang reseptor Adenosin A2A sehingga

meningkatkan penutupan luka (Palu et al ., 2010; Fitzpatrick and Mehta, 2009;

Chan et al ., 2006).

2.7 Amoxicillin

Farmakodinamik :

Amoxicillin (alpha-amino-p-hydroxy-benzyl-penicillin) merupakan

antibiotik semisintetik, mempunyai struktur penicillin, analog dengan ampicillin,

derivat dari 6 aminipenicillonic acid, merupakan antibiotik dengan spektrum luas

yang mempunyai daya kerja bakterisidal melawan mikroorganisma gram positif


43/121

43

dan gram negatif. Keberadaan cincin benzyl pada rantai samping memperluas

aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram negatif (De Abreu, et al ., 2003).

Bakteri gram positif: Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridan,

Streptococcus faecalis, Diplococcus pnemoniae, Corynebacterium sp,

Staphylococcus aureus, Clostridium sp, Bacillus anthracis.

Bakteri gram negatif: Neisseria gonorrhoeae, Neisseria menigitidis,

Haemophillus influenzae, Bordetella pertussis, Escherichia coli, Salmonella sp,

Proteus mirabillis, Brucella sp.

Farmakokinetik :

Amoxicillin diserap secara baik sekali pada saluran pencernaan, dan tidak

berubah walau bersamaan dengan penyerapan makanan. Kadar bermakna di

dalam serum darah dicapai 1 jam setelah pemberian per-oral, ikatan rendah

dengan protein plasma (17%), didistribusikan cepat ke seluruh badan, dan

eliminasi setengahnya dalam 1 jam. Kadar puncak di dalam serum darah 5,3

mg/ml dicapai 1,5-2 jam setelah pemberian per-oral. Kurang lebih 60% pemberian

per-oral dan 75% pemberian parenteral akan diekskresikan melalui urin dalam 6

jam (De Abreu et al ., 2003).

Indikasi :

1. Infeksi saluran pernafasan atas: tonsilitis, pharingitis (kecuali pharyngitis

gonorrhoeae), sinusitis, laringitis, otitis media.

2. Infeksi saluran pernafasan bawah: acute dan chronic bronchitis, bronchiectasis,

pneumonia.


44/121

44

3. Infeksi saluran kemih dan kelamin: gonorrhoeae yang tidak terkomplikasi,

sistitis, pielonefritis.

4. Infeksi kulit dan selaput lendir: celulitis, luka, karbunkel, furunkulosis.

5. Menurut Harianto et al . (2006), amoxicillin dapat dipakai sebagai profilaksis

untuk pencegahan terhadap infeksi sekunder.

Mekanisme kerja :

Amoxicillin mengikat penicillin-binding protein 1A (PBP-1A) yang

lokasinya berada di dalam sel bakteri. Menghambat aktifasi dari enzim penicillin-

sensitive transpeptidase C-terminal dengan membuka cincin lactam, sehingga

mencegah pembentukan dari cross-link dua tali peptidoglycan yang bekerja

menghambat stadium akhir dari sintesa dinding sel bakteri (De Abreu et al .,

2003).

Farmakologi :

Amoxicillin biasanya merupakan drug of choice pada kelasnya karena

lebih baik diabsorbsi pada pemberian oral dibandingkan dengan antibiotik beta-

lactam lainnya. Amoxicillin peka terhadap penurunan bakteri yang memproduksi

beta lactamase, dan kombinasi pemberian dengan clavulanic acid dapat

meningkatkan kepekaan.

Dosis :

Untuk infeksi pada kulit yang ringan sampai sedang: dosis dewasa adalah

250 – 500 mg setiap 8 jam, untuk infeksi pada kulit yang berat: dosis dewasa

adalah 500 – 875 mg setiap 8 jam.


45/121

45

2.8 Salep

Salep merupakan sediaan farmasi dalam bentuk semipadat. Sediaan

semipadat digunakan untuk penggunaan topikal, baik dengan tujuan sebagai

pengobatan suatu penyakit dan sebagai kosmetik (Anwar, 2012). Kandungan

salep terdiri dari lebih dari 50% bahan minyak (hydrocarbon, waxes, polyethelene

glycols) dan kurang dari 20% bahan air (Buhse et al ., 2005). Bahan obatnya harus

larut atau terdispersi homogen dalam basis salep yang cocok.

Definisi salep menurut Farmakope Indonesia Edisi IV adalah sediaan

setengah padat ditujukan untuk pemakaian topikal pada kulit atau selaput lendir.

Salep tidak boleh berbau tengik. Pemilihan basis salep yang tepat juga diperlukan

untuk formulasi sehingga didapatkan sifat yang paling diharapkan dalam salep

tersebut. Basis dapat pula dikatakan sebagai eksipien (bahan tambahan) utama

pada salep dan eksipien salep sendiri adalah bahan tambahan pendukung dari

salep seperti humektan, pengawet, dan sebagainya (Anwar, 2012).

Basis salep digolongkan menjadi empat kelompok besar, tergantung dari

sifat bahan obat dan tujuan pemakaian (Anwar, 2012), yaitu :

1. Basis salep hidrokarbon.

Basis golongan ini bersifat lemak dan bebas air. Preparat yang mengandung air

masih dapat diberikan namun dalam jumlah yang relatif kecil. Basis ini

memiliki waktu bertahan pada kulit, cenderung stabil dan tidak dipengaruhi

oleh waktu. Contoh vaseline flavum dan vaseline album.


46/121

46

2. Basis Absorpsi

Basis absopsi adalah dasar salep yang memungkinkan penambahan sedikit

larutan berair kedalamnya. Basis ini dibentuk dengan penambahan zat-zat yang

dapat bercampur dengan hidrokarbon dan zat-zat yang memiliki gugus polar.

Basis ini tidak mudah tercuci oleh air. Contoh petrolatum hidrofilik dan

lanolin.

3.

Basis salep tercuci air

Basis ini adalah emulsi yang dapat dibersihkan dari kulit dengan air. Basis ini

bersifat seperti krim dan dapat diencerkan dengan air atau larutan berair,

memiliki kemampuan untuk mengabsorpsi cairan serosal yang keluar dalam

kondisi dermatologis. Contoh salep hidrofilik yang mengandung natrium lauril

sulfat sebagai bahan pengemulsi dengan alkohol stearat dan petrolatum putih

mewakili fase berlemak serta propilen glikol dan air mewakili fase air.

4. Basis larut dalam air

Berbeda dengan basis salep lainnya, basis yang larut dalam air disebut sebagai

greaseless karena tidak mengandung bahan berlemak. Larutan air tidak efektif

bila dicampurkan dengan basis ini karena sifat basis yang mudah melunak

dengan penambahan air.

2.9 Tikus Wistar (Rattus norvegicus)

Mamalia kecil menjadi pilihan untuk berbagai penelitian karena

mempunyai beberapa keuntungan, yaitu tidak mahal, mudah didapat, hanya

membutuhkan sedikit ruang, makan, dan minum, mudah dalam pemeliharaan, dan

dapat diubah secara genetik. Hewan kecil biasanya mempunyai cara mempercepat


47/121

47

penyembuhan dibandingkan manusia, dengan jangka waktu beberapa hari,

sedangkan pada manusia dalam beberapa minggu atau bulan (Thakur et al ., 2011).

Syarat hewan yang digunakan untuk penelitian farmakologi harus

terpenuhi yaitu harus jelas fisiologinya, bebas dari penyakit, didapat dari Breeding

Centre yang baik atau dibiakkan sendiri (Syamsudin and Darmono, 2011).

Etika terhadap hewan percobaan juga harus diperhatikan berdasarkan

pada hasil lokakarya Pembentukan Panitia Etik Penelitian Kedokteran tahun 1986.

Salah satu butir dalam etika tersebut disebutkan bahwa bila percobaan

menimbulkan sesuatu yang lebih dari sekadar rasa nyeri atau penderitaan ringan

dalam waktu singkat, harus dilakukan dengan premedikasi yang memadai dan

dibawah anesthesia sesuai dengan praktik kedokteran hewan yang lazim.

Kemudian pada butir yang lain disebutkan bahwa pada akhir percobaan, hewan

yang akan menanggung nyeri hebat atau kronik penderitaan, rasa tidak enak, cacat

yang tidak dapat disembuhkan, harus dibunuh dengan cara yang layak

(Syamsudin and Darmono, 2011).

Persentase penggunaan hewan percobaan pada penelitian secara invivo

adalah sebagai berikut: tikus (80%), mencit (11%), kelinci dan babi (4%), dan

ayam (1%) (Thakur et al ., 2011). Bulu tikus yang tidak tebal mempunyai

beberapa keuntungan dalam penelitian yang menggunakan model perlukaan pada

epidermis. Pertama, epidermis yang tidak tertutup bulu tebal mengganggu

pemisahan epidermis dari dermis; kedua, ukuran dari bulu tikus yang tidak tebal

membuat model yang ideal untuk penilaian efek dari bahan farmakologi pada

proses penyembuhan luka (Choi et al ., 2001).


48/121

48

Tikus wistar lebih besar dari mencit, maka untuk beberapa macam

percobaan, tikus lebih menguntungkan. Tikus liar semarga dengan tikus

laboratorium dan diberi nama ilmiah Rattus rattus, walaupun mirip tetapi jarang

dipakai sebagai hewan laboratorium (Smith and Mangkoewidjojo, 1988).

Tikus laboratorium jantan jarang berkelahi seperti mencit jantan. Tikus

dapat tinggal sendirian dalam kandang, asal dapat melihat atau mendengar tikus

lain. Jika dipegang dengan cara yang benar, tikus-tikus ini tenang dan mudah

ditangani di laboratorium. Pemeliharaan dan makanan tikus lebih mahal daripada

mencit tetapi tikus berbiak sebaik mencit (Smith and Mangkoewidjojo, 1988).

Tikus wistar panjangnya dapat mencapai 40 cm diukur dari hidung sampai

ujung ekor, dan berat 140-500 gram. Tikus jantan biasanya memiliki ukuran yang

lebih besar dari tikus betina, berwarna putih, memiliki ukuran ekor yang lebih

panjang dari tubuhnya (Kusumawati, 2004). Tikus jantan tua dapat mencapai 500

gram tetapi tikus betina jarang lebih dari 350 gram (Smith and Mangkoewidjojo,

1988). Tidak ada perbedaan nyata pada nilai hematologi, biokimia darah dan

bobot organ pada tikus putih jantan dan betina (Sihombing and Tuminah, 2011).

Pada penelitian dengan menggunakan tikus, dosis obat-obatan untuk tikus

dikonversi dari dosis untuk manusia. Menurut Ings et al (1990) dosis konversi

ditentukan dengan membandingkan luas permukaan tubuh hewan percobaan dan

berat badan yaitu 70 kg manusia : 200 gr tikus = 1: 0,018 (Syamsudin and

Darmono, 2011)


49/121

49

BAB III

KERANGKA BERPIKIR, KONSEP, DAN HIPOTESIS PENELITIAN

3.1 Kerangka Berpikir

Luka pada kulit mengakibatkan hilangnya sebagian bahkan seluruh

fungsi lapisan kulit yang terkena, timbulnya perdarahan, respon stres simpatis,

kontaminasi bakteri bahkan bisa terjadi kematian sel.

Pada proses regenerasi jaringan luka terjadi tiga proses yaitu inflamasi,

proliferasi dan remodeling . Pada serangkaian proses ini terjadi pelepasan platelet,

koagulasi, pembentukan fibroblas, neovaskularisasi atau angiogenesis, migrasi

keratinosit, pembentukan fibronectin, asam hialuronat, kolagen dan terakhir

kontraksi luka.

Proses regenerasi jaringan luka ini berlangsung lambat bahkan terhambat

pada kulit yang mengalami penuaan, kekurangan nutrisi, terdapat penyakit

penyerta dan bila terjadi infeksi. Hal ini bila tidak ditanggulangi bisa

menimbulkan kesakitan yang lama, komplikasi infeksi yang bisa berakibat fatal

atau penyembuhan luka yang tidak sempurna. Pada kulit yang menua hal ini bisa

terjadi karena semua faktor yang berperan dalam mekanisme penyembuhan luka

sudah menurun fungsinya seiring usia.

Mengkudu dalam hal ini daunnya mengandung berbagai macam

antioksidan yaitu vitamin C, catalase, beta caroten, flavonoid , saponin, tannin,

berbagai macam asam lemak terutama asam lemak linoleik, beberapa mineral dan


50/121

50

juga zat aktif antraquinone yang bersifat antibakteri. Kandungan berbagai zat

aktif tersebut dapat mempercepat proses penyembuhan luka.

3.2 Konsep Penelitian

Bagan 3.1 Kerangka Konsep

3.3 Hipotesis Penelitian

Berdasarkan kerangka konsep maka hipotesis yang dapat diajukan adalah :

1. Pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan epitelisasi jaringan

luka pada tikus putih wistar jantan.

Faktor eksternal:

- Infeksi

- Dalamluka

-

Luas luka

- Makanan

- Penyakit

Salep ekstrak

daun mengkudu

Faktor internal :

- Genetik

- Metabolisme

-

Usia

- Jenis kelamin

Tikus dilukai

Fibroblas

Epitelisasi

Neovaskularisasi


51/121

51

2. Pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan fibroblas jaringan

luka pada tikus putih wistar jantan.

3. Pemberian salep ekstrak daun mengkudu meningkatkan neovaskularisasi

jaringan luka pada tikus putih wistar jantan.


52/121

52

BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan

randomized post test only control group design (Marczyk et al ., 2005).

Gambar 4.1 Skema Rancangan Penelitian

Keterangan Gambar :

P = populasi

S = sampel

R = random

O1 = observasi epitelisasi, fibroblas dan neovaskularisasi hari ke 4 kelompok

kontrol

O2 = observasi epitelisasi, fibroblas dan neovaskularisasi hari ke 4

kelompok perlakuan

O3 = observasi epitelisasi, fibroblas dan neovaskularisasi hari ke 8 kelompok

P S R

O1

O2

O3

O4

P0

P1

P2

P3


53/121

53

kontrol

O4 = observasi epitelisasi, fibroblas dan neovaskularisasi hari ke 8

kelompok perlakuan

P0 = perlakuan pada kelompok kontrol dengan salep plasebo + oral

amoxicillin selama 4 hari

P1 = perlakuan pada kelompok perlakuan dengan salep ekstrak daun

mengkudu + oral amoxicillin selama 4 hari

P2 = perlakuan pada kelompok kontrol dengan salep plasebo + oral

amoxicillin selama 8 hari

P3 = perlakuan pada kelompok perlakuan dengan salep ekstrak daun

mengkudu + oral amoxicillin selama 8 hari

4.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratory Animal Unit , Bagian Farmakologi

Fakultas Kedokteran Universitas Udayana Denpasar Bali. Penelitian dilakukan

bulan Juli 2013. Pemeriksaan Histopatologi dilakukan di Laboratorium Patologi

Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana Denpasar Bali.

4.3 Subjek dan Besar Sampel

4.3.1 Variabilitas Populasi

Populasi pada penelitian ini adalah tikus putih yang sesuai dengan sampel

yang telah ditentukan dalam penelitian.

4.3.2 Kriteria Subjek

Sampel dalam penelitian ini adalah tikus yang memenuhi kriteria inklusi

sebagai berikut:


54/121

54

Kriteria Inklusi :

1.

Tikus putih galur wistar ( Rattus norvegicus) dewasa dan sehat.

2. Jenis kelamin jantan.

3. Umur 3 – 4 bulan.

4. Berat 200-250 gram.

Kriteria Drop out : tikus mati saat penelitian sedang berlangsung.

4.3.3 Besaran Sampel

Besar sampel yang diperlukan dalam penelitian ini berdasarkan rumus

Federer (1999) : (n – 1) (t – 1 ) ≥ 15

(n – 1) (4 – 1 ) ≥ 15

3 n – 3 ≥ 15

3n ≥ 18

n ≥ 6

Keterangan : n = Banyaknya sampel setiap perlakuan

t = Banyaknya perlakuan

Berdasarkan perhitungan dengan rumus diatas maka diperoleh n = 6. Karena pada

penelitian ini terdapat 4 perlakuan, maka jumlah sampel seluruhnya adalah 24.

Sampel ditambah 15% untuk menjaga kemungkinan drop out, sehingga jumlah

sampel seluruhnya adalah 28.


55/121

55

4.3.4 Teknik Pengambilan Sampel

Semua sampel yang memenuhi kriteria penelitian (yang memenuhi

kriteria eligibilitas) dimasukkan dalam sampel penelitian. Dua puluh delapan ekor

tikus putih wistar jantan diambil dan dibagi menjadi empat kelompok secara acak

sederhana. Dua kelompok merupakan kelompok kontrol dan dua kelompok yang

lain merupakan kelompok perlakuan. Kelompok kontrol diolesi salep plasebo,

sedangkan kelompok perlakuan diolesi salep ekstrak daun mengkudu. Keempat

kelompok diberi oral amoxicillin.

4.4 Variabel Penelitian

4.4.1 Klasifikasi Variabel

1. Variabel bebas adalah variabel yang akan mempengaruhi hasil penelitian

secara langsung yaitu salep ekstrak daun mengkudu.

2. Variabel tergantung adalah variabel yang merupakan hasil perlakuan variabel

bebas yaitu fibroblas, neovaskularisasi, dan epitelisasi.

3. Variabel kendali adalah variabel yang dapat dikendalikan antara lain jenis tikus,

umur, sehat, jenis kelamin yang sama, berat badan, tempat luka yang sama,

makanan dan minuman, temperatur.


56/121

56

4.4.2 Hubungan Antar Variabel

Bagan 4.2 Hubungan Antar Variabel

4.4.3 Definisi Operasional Variabel

1. Salep ekstrak daun mengkudu adalah sediaan salep dengan formulasi tertentu

( sodium lauryl sulphate, propylene glycol, stearyl alcohol, white petrolatum,

purified water ) ditambah ekstrak maserasi bertingkat daun mengkudu (pelarut

etanol 96% dan etil asetat) dengan konsentrasi 15%, diaplikasikan sebanyak 2

kali sehari.

2. Salep plasebo adalah sediaan salep yang hanya mengandung bahan dasar salep

( sodium lauryl sulphate, proylene glycol, stearyl alcohol, white petrolatum,

Variabel Tergantung :

- Fibroblas

- Epitelisasi

- Neovaskularisasi

Variabel Bebas :

Salep ekstrak daun

mengkudu

Variabel Kendali :

- Umur tikus

- Jenis tikus

- Jenis kelamin

- Berat badan

- Makanan dan minuman

- Temperatur

- Tempat luka yang sama


57/121

57

purified water ) tanpa penambahan zat aktif , diaplikasikan dalam jumlah yang

sama dengan salep mengkudu sehari 2 kali.

3. Amoxicillin adalah antibiotik yang digunakan untuk mencegah infeksi

sekunder, diberikan secara oral dengan dosis 70/60 kg bb x 1500 mg

amoxicillin x 0,018 (untuk bb tikus 200 gram) = 31,5 mg amoxicillin sehari.

Dosis per sekali minum 31,5 : 3 = 10,5 mg. Diberikan selama 3 hari.

4. Regenerasi jaringan luka adalah proses penyembuhan jaringan luka dengan

parameter fibroblas, epitelisasi dan neovaskularisasi.

5. Fibroblas adalah sel-sel yang berbentuk fusiformis diantara serabut-serabut

jaringan ikat yang berpengaruh dalam proses penyembuhan luka. Dihitung

jumlahnya dengan menggunakan mikroskop elektron pembesaran objektif 40x.

Adanya peningkatan regenerasi jaringan luka, dilihat dari perbedaan jumlah

fibroblas secara signifikan dibandingkan dengan kontrol.

6. Epitelisasi adalah tahapan perbaikan luka, terjadi migrasi keratinosit, proliferasi

keratinosit, diferensiasi neoepitel menjadi epitel berlapis-lapis. Dihitung

tingkat kerapatannya dengan menggunakan metoda morfometri, satuannya

mikrometer. Adanya peningkatan regenerasi jaringan luka, dilihat dari

perbedaan ukuran kerapatan epitel yaitu perbedaan ketebalan epitel dan lebar

celah epitel luka secara signifikan dibandingkan dengan kontrol.

Ketebalan epitel adalah ukuran ketebalan lapisan-lapisan epidermis yang

terbentuk pada daerah luka. Lebar celah epitel luka adalah ukuran celah pada

lapisan epitel di daerah luka yang belum menutup sempurna.


58/121

58

7. Neovaskularisasi adalah pertumbuhan kapiler baru pada daerah luka berupa

tunas-tunas yang terbentuk dari pembuluh darah dan akan berkembang menjadi

percabangan baru pada jaringan luka. Dihitung jumlahnya dengan

menggunakan mikroskop elektron pembesaran objektif 40x. Adanya

peningkatan regenerasi jaringan luka, dilihat dari perbedaan jumlah

neovaskularisasi secara signifikan dibandingkan dengan kontrol.

8.Tikus putih jantan jenis Wistar adalah hewan percobaan yang berupa tikus jenis

Wistar umur 3-4 bulan, jenis kelamin jantan, dengan berat 200-250 gram.

4.5 Bahan dan Instrumen Penelitian, Hewan Percobaan

4.5.1 Bahan Penelitian

Bahan penelitian yang digunakan adalah: sediaan salep ekstrak daun

mengkudu, sediaan salep plasebo, larutan neutral buffer formalin 10% untuk

fiksasi, kapas, ketamin dan xylazin untuk anestesi, dan bahan-bahan untuk sediaan

histopatologi yaitu larutan Mayer‟s Hematoxylin, larutan eosin, alkohol dengan

konsentrasi yang bert

Documents

kulit, tinjauan pustaka mengkudu.pdf