Kuliah 1 Isolasi Alkaloid

7/26/2019 Kuliah 1 Isolasi Alkaloid

1/54

FITOKIMIA II

Lusi Indriani, M. Farm, Apt

METODE ISOLASI ALKALOID


2/54

DEFINISI

Alkaloida

Senyawa organik yg banyak ditemukan di alam

berasal dari tumbuhan, hewan dan mikroba.

mengandung atom nitrogen yang bersifat basa

lemah

mempunyai cincin nitrogen yg sebagian besar

heterosiklik dan bersifat aktif digunakan sebagai obat : atropin (obat kejang),

kokain (obat bius), reserpin (obat penenang).


3/54

Sifat-sifat Alkaloid

1. Mengandung atom nitrogen yang umumnya

berasal dari asam amino.

2. Padatan kristal halus (TL) tertentu yg + asam

garam.3. Alkaloid berbentuk cair dan kebanyakan tidak

berwarna.

4. Dalam tumbuhan berada dalam bentuk bebas,bentuk N-oksida atau bentuk garamnya.


4/54

5. Umumnya pahit.

6. Alkaloid bentuk bebas tidak larut dalam air,

tetapi larut dalam kloroform, eter dan pelarut

organik lainnya yg bersifat relative non polar.

7. Bentuk garamnya mudah larut dalam air,contohnya Strychnine HCl lebih larut dalam air

daripada bentuk basanya.

8. Alkaloid bebas bersifat basa karena adanya

pasangan elektron bebas, garam pada atom N-

nya.


5/54

Sumber Alkaloid

Tanaman berbunga, angiosperma (famili Leguminoceae,

Rubiaceae, Solanaceae) dan tumbuhan monokotil

(famili Solanaceae dan Liliaceae).

Penemuan berikutnya sejumlah besar alkaloid terdapat

pada hewan.

Kebanyakan famili Liliaceae, Solanaceae dan

Rubiaceae. Yg tidak lazim mengandung alkaloid adalah

Papaveraceae.

Dalam tanaman yang mengandung alkaloid, alkaloid

mungkin terdapat pada bagian tertentu. Namun ada

bagian tertentu yg tidak mengandung alkaloid.


6/54

Klasifikasi Alkaloid

1. Berdasarkan jenis cincin heterosiklik nitrogen yang

merupakan bagian dari struktur molekul, dibedakan atas

beberapa jenis seperti alkaloida pirolidin, alkaloida

piperidin, alkaloida isokuinolin, alkaloida kuinolin,

alkaloida indol, alkaloid tropan dan alkaloid steroid.

2. Berdasarkan jenis tumbuhan darimana alkaloida

ditemukan. Cara ini digunakan untuk menyatakan jenis

alkaloida yang pertama-tama ditemukan pada suatu

jenis tumbuhan, dapat dibedakan atas beberapa jenisyaitu alkaloida tembakau, alkaloida erythrine dan

sebagainya. Cara ini mempunyai kelemahan yaitu

beberapa alkaloida yang berasal dari tumbuhan tertentu

dapat mempunyai struktur yang berbeda-beda.


7/54

3. Berdasarkan asal-usul biogenetik. Cara ini sangat

berguna untuk menjelaskan hubungan antara

berbagai alkaloida yang diklasifikasikanberdasarkan berbagai jenis cincin heterosiklik. Dari

biosintesa alkaloida menunjukkan bahwa alkaloida

berasal hanya dari beberapa asam amino tertentu

saja. Berdasarkan hal tersebut maka alkaloidadapat dibedakan atas tiga jenis utama, yaitu :

a. Alkaloida alisiklik yang berasal dari asam-asam

amino ornitin dan lisin.

b. Alkaloida aromatik jenis fenilalanin yang berasal

dari fenilalanin, tirosin dan 3,4-dihidrofenilalanin.

c. Alkaloida aromatik jenis indol yang berasal dari

triptofan.


8/54

4. Sistem klasifikasi berdasarkan Hegnauer yang

paling banyak diterima, dimana alkaloida

dikelompokkan atas :

a. Main Alkaloid

Alkaloid ini merupakan racun. Senyawa tersebut

menunjukkan aktivitas fisiologis yang luas,hampir tanpa terkecuali bersifat basa, umumnya

mengandung nitrogen dalam cincin heterosiklik,

diturunkan dari asam amino, biasanya terdapat

dalam tanaman sebagai garam asam organik.


9/54

b. Protoalkaloid

Protoalkaloid merupakan amin yang relatifsederhana dimana nitrogen asam amino tidak

terdapat dalam cincin heterosiklik. Protoalkaloid

diperoleh berdasarkan biosintesis dari asam

amino yang bersifat basa.c. Pseudoalkaloid

Pseudoalkaloid tidak diturunkan dari prekursor

asam amino. Senyawa ini biasanya bersifat

basa. Ada dua alkaloid yang penting dalam

kelompok ini yaitu alkaloid steroidal dan purin.


10/54

Kegunaan Alkaloid

1. Hasil buangan nitrogen seperti urea dan asam urat

hewan.

2. Sebagai tendon penyimpanan nitrogen meskipun banyak

alkaloid ditimbun dan tidak mengalami metabolisme.

3. Melindungi tumbuhan dari serangan parasit atau

pemangsa tumbuhan.

4. Pengatur tumbuh, ada sebagian alkaloid yang

merangsang perkecambahan dan ada sebagian yang

menghambat.

5. Dapat mengganti basa mineral dalam mempertahankan

kesetimbangan ion dalam tumbuhan.


11/54

Isolasi dan Identifikasi Alkaloid

Isolasi Alkaloid

Melalui metode ekstraksi antara lain :

1. Sokletasi

Ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru,

menggunakan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi

konstan dengan adanya pendingin balik (kondensor).

Sampel disimpan dalam alat soxhlet dan tidak dicampur

langsung dengan pelarut dalam wadah yang di

panaskan, yang dipanaskan hanyalah pelarutnya,pelarut terdinginkan dalam kondensor dan pelarut dingin

inilah yang selanjutnya mengekstraksi sampel.


12/54

Prinsip sokletasi :

Penarikan komponen kimia yg dilakukan dengan

penempatan serbuk simplisia dalam klonsong yang telahdilapisi kertas saring sedemikian rupa, cairan penyari

dipanaskan dalam labu alas bulat sehingga menguap

dan dikondensasikan oleh kondensor menjadi molekul-

molekul cairan penyari yang jatuh ke dalam klonsong

menyari zat aktif di dalam simplisia dan jika cairanpenyari telah mencapai permukaan sifon, seluruh cairan

akan turun kembali ke labu alas bulat melalui pipa

kapiler hingga terjadi sirkulasi.

Ekstraksi sempurna ditandai bila cairan di sifon tidakberwarna, tidak tampak noda jika di KLT, atau sirkulasi

telah mencapai 20-25 kali. Ekstrak yang diperoleh

dikumpulkan dan dipekatkan.


13/54

Keuntungan metode ini adalah :

a. Dapat digunakan untuk sampel dengantekstur yang lunak dan tidak tahan

terhadap pemanasan secara langsung.

b. Digunakan pelarut yang lebih sedikitc. Pemanasannya dapat diatur


14/54

Kerugian metode ini adalah:

a. Karena pelarut didaur ulang, ekstrak yang terkumpul

pada wadah di sebelah bawah terus-menerusdipanaskan sehingga dapat menyebabkan reaksi

peruraian oleh panas.

b. Jumlah total senyawa-senyawa yang diekstraksi akan

melampaui kelarutannya dalam pelarut tertentu sehingga

dapat mengendap dalam wadah dan membutuhkan

volume pelarut yang lebih banyak untuk melarutkannya.

c. Bila dilakukan dalam skala besar, mungkin tidak cocok

untuk menggunakan pelarut dengan titik didih yang

terlalu tinggi, seperti metanol atau air, karena seluruhalat yang berada di bawah kondensor perlu berada pada

temperatur ini untuk pergerakan uap pelarut yang efektif.


15/54

Alat Soklet


16/54

2. Refluks

Ekstraksi dengan pelarut pada temperaturtitik didihnya, selama waktu tertentu dan

jumlah pelarut yang relatif konstan dengan

adanya pendingin balik. Ekstraksi refluks digunakan untuk

mengektraksi bahan-bahan yang tahan

terhadap pemanasan.


17/54

Prinsip refluks:

Penarikan komponen kimia yang dilakukan dengan carameletakkan sampel ke dalam labu alas bulat bersama-

sama dengan cairan penyari lalu dipanaskan, uap-uap

cairan penyari terkondensasi pada kondensor menjadi

molekul-molekul cairan penyari yang akan turun kembali

menuju labu alas bulat, akan menyari kembali sampel

yang berada pada labu alas bulat, demikian seterusnya

berlangsung secara berkesinambungan sampai

penyarian sempurna, penggantian pelarut dilakukan

sebanyak 3 kali setiap 3-4 jam. Filtrat yang diperolehdikumpulkan dan dipekatkan.


18/54

Keuntungan metode ini adalah :

Digunakan untuk mengekstraksi sampel-sampel yang mempunyai tekstur kasar

dan tahan pemanasan langsung.

Kerugian metode ini adalah :

Membutuhkan volume total pelarut yang

besar dan sejumlah manipulasi darioperator.


19/54

Alat Refluks


20/54

Identifikasi Alkaloid

Identifikasi alkaloid dapat dilakukan dengan

reaksi-reaksi berikut :

a. Reaksi Pengendapan

1. Reaksi Dragendorf

Pereaksi dragendorf mengandung bismut nitrat

dan merkuri klorida dalam nitrit berair. Ketika

suatu alkaloid ditambahkan pereaksi dragendorfmaka akan menghasilkan endapan jingga.


21/54

2. Reaksi Mayer

Pereaksi mayer mengandung kalium iodida danmerkuri klorida. Ketika sampel ditambah

pereaksi meyer maka akan timbul endapan

kuning atau larutan kuning bening lalu ditambah

alkohol endapannya larut.Tidak semua alkaloid mengendap dengan reaksi

mayer. Pengendapan yang terjadi akibat reaksi

mayer bergantung pada rumus bangun

alkaloidnya.


22/54

3. Reaksi Bouchardat

Pereaksi bouchardat mengandung kalium

iodida dan iod. Sampel ditambah pereaksi

bouchardat menghasilkan endapan coklat

merah lalu ditambah alkohol endapannya

larut.


23/54

b. Reaksi Warna

1. Reaksi dengan asam kuat

Asam kuat seperti H2SO4 pekat dan HNO3pekatmenghasilkan warna kuning atau merah.

2. Reaksi Marquis

Pereaksi marquis mengandung formaldehid (1 bagian)

dan H2SO4 pekat (9 bagian). Sampel ditambah pereaksimarquis akan menghasilkan warna jingga.

3. Reaksi Warna AZO

Sampel ditambah diazo A (4 bagian) dan diazo B (1

bagian), ditambah NaOH, dipanaskan lalu ditambahamyl alkohol menghasilkan warna merah.


24/54

Alkaloid terdiri dari beberapa jenis. Untuk

identifikasi jenis alkaloid lainnya bisa

menggunakan reaksi berikut diantaranya :

Reaksi untuk alkaloid benzil isokuinolon

contohnya morfin

1. Reaksi Frohde

Pereaksi frohde mengandung larutan 1%

NH4molibdat dalam H2SO4 pekat. Sampel

ditambah pereaksi frohde menghasilkanwarna kuning kehijauan.


25/54

2. Reaksi Mandelin

Pereaksi mandelin mengandung amoniumvanadat dalam air ditambah H2SO4 pekat.

Sampel ditambah pereaksi mandelin berwarna

kuning kehijauan.

Selain itu, identifikasi alkaloid bisa juga dengan

menggunakan pereaksi erlich (p-dimetilamino

benzaldehide yang diasamkan) memberikan

warna biru atau abu-abu hijau untuk alkaloid

ergot.


26/54

Metode Sokletasi

Bahan :

Sampel, petroleum eter, kloroform, metanol

80%, larutan amonia 10%, Al2O3.

Cara kerja:

1. Ditimbang sampel kemudian dibungkus dengan

kertas saring dan dimasukkan ke dalam alat

soxhlet.2. Ditambahkan pelarut petroleum eter melalui

mulut soxhlet yang sebelumnya sudah

terpasang tegak lurus, sehingga terjadi

pengaliran kedalam labu pemanas.


27/54

3. Dilakukan soxhletasi kemudian ekstrak hasil soxhletasi

didinginkan dan disaring dengan kertas

saring yang terpasang pada corong.4. Ampas dari penyaringan diangin-anginkan untuk

menghilangkan pelarut. Ampas diekstraksi kembali

dengan pelarut yaitu kloroform dan metanol 80%.

Ekstraksi dengan kloroform diperoleh ekstrak kloroform

dan ampasnya yang telah diangin-anginkan diekstrak

lagi dengan metanol 80% hingga diperoleh ekstrak

metanol dan ampas.

5. Ekstrak kloroform dipekatkan, lalu diambil sebagai

bahan penjaringan alkaloid dengan menambahkan

larutan amonia 10% dan Al2O3, diaduk selama beberapa

menit.


28/54

6. Campuran yang diperoleh dimasukkan ke dalam

kolom selanjutnya dialiri dengan kloroform. Eluat

yang diperoleh ditampung untuk uji warnadengan penambahan pereaksi dragendorf.

Apabila reaksi positif, eluat dipergunakan

sebagai sampel untuk KLT.

Begitu juga dengan ekstrak metanol dipekatkan,

ditambah larutan ammonia sambil diaduk.

Dipanaskan pada suhu 60C di atas penangas

air, kemudian disaring dalam keadaan panas.Filtrat yang diperoleh digunakan untuk uji warna

dengan penambahan pereaksidragendorf.

Apabila reaksi positif, filtrat digunakan untuk

sampel KLT dan kromatografi kolom.


29/54

Metode Refluks

Alat :

Labu alas bulat, kondensor spiral, selang masuk

selang keluar, sirkulator, heat mantel, kertas

saring, corong, cawan porselin, waterbath,batang pengaduk, vial.

Bahan :

Sampel, etanol 70%, air, asam klorida

Cara kerja :

1. Dimasukkan sampel didalam labu alas bulat

bersama-sama dengan pelarut etanol lalu

dipanaskan.


30/54

2. Uap-uap cairan penyari terkondensasi pada

kondensor menjadi molekul-molekul cairan

penyari yang akan turun kembali menuju labualas bulat. Pergantian pelarut dilakukan 3 kali

setiap 3 sampai 4 jam.

3. Kemudian diperolehlah filtrat dan residu.Setelah dingin dan disaring, residu dicuci

dengan etanol dan kumpulan filtrat diuapkan.

4. Residu yang tertinggal dilarutkan kedalam air,

lalu disaring dan diasamkan dengan asamklorida.


31/54

5. Alkaloid diendapkan dengan pereaksi

mayer. Bila hasil tes positif, maka dites

kembali dengan cara membasakan larutan

yang bersifat asam, kemudian alkaloid

diekstrak kembali ke dalam larutan asam.

Jika larutan asam ini menghasilkanendapan dengan pereaksi tersebut maka

tanaman ini mengandung alkaloid.


32/54

Pemurnian Alkaloid

Hasil ekstraksi kloroform dipekatkan sampai

terbentuk krud. Krud yang diperoleh dilakukan

identifikasi dengan kromatografi lapis tipis untuk

mengetahui jumlah komponennya. Untuk tahap selanjutnya dilakukan pemisahan

lebih lanjut sampai didapatkan kristal. Kristal

yang diperoleh diidentifikasi dengan

spektrofotometer, titik leleh, dan kromatografilapis tipis.


33/54

Karakterisasi Alkaloid

Ekstrak kloroform diuapkan sampai didapatkan

krud, kemudian dilarutkan dalam aseton dan

ditambahkan air tanpa dilakukan pengadukan.

Hasil penambahan air menimbulkan kristal padalapisan bawah kemudian dilakukan rekristalisasi

dengan berbagai pelarut.

Hasil rekristalisasi yang terbaik dengan

menggunakan pelarut metanol : air (4:1)menghasilkan kristal berwarna jarum putih.


34/54

Penentuan Kemurnian Dengan

Kromatografi Lapis Tipis

Pemurnian menggunakan kromatografi lapis

tipis dengan fase diam silika gel dan berbagai

fase gerak, serta menggunakan lampu UV

sebagai penampak noda. Bila berbagai fase gerak menunjukkan noda

tunggal, maka komponen dapat dinyatakan

sudah murni dan penampak noda digunakan

pereaksi Dragendroft, menunjukkan nodatunggal merah bata, ini menunjukkan kristal

yang diperoleh sudah satu komponen.


35/54

Contoh gambar hasil kromatografi lapis tipis ekstrak

kloform dengan fase diam silika gel G dan fase gerak

metanol- etol asetat (4:1)


36/54

Contoh gambar hasil kromatografi lapis tipis kristal

alkaloid dengan fase diam silika gel G dan fase gerak

kloroform


37/54


alkaloid fase diam silika gel G dan fase gerak aseton


38/54


alkaloid fase diam silika gel G dan fase gerak metanol


39/54

Identifikasi Alkaloid

Filtrat yang diperoleh dari hasil soxhletasi

diidentifikasi dengan penambahan pereaksi

dragendorf. Sedangkan filtrat yang diperoleh

dari hasil refluks diidentifikasi denganpenambahan pereaksi mayer.

Identifikasi Bisa dilakukan dengan 3 cara, yaitu :

1.Berdasarkan Sifat fisika suatu senyawa

2. Berdasarkan Sifat kimia (melibatkan reaksi

kimia)

3. Berdasarkan Sifat fisiko kimia


40/54

1) Identifikasi senyawa berdasarkan Sifat

fisika Suhu, organoleptis, Viskositas, dan

sebagainya.

2) Berdasarkan Sifat kimia (melibatkanreaksi kimia), yaitu dengan bermacam-

macam reaksi kimia, diantaranya :


41/54

a. Reaksi Pengendapan

1. Reaksi Dragendorf Alat : Tabung reaksi, spatula, pipet tetes,

penjepit.

Bahan : Sampel, pereaksi dragendorf (bismut

nitrat, merkuri klorida dalam nitrit berair).

Cara kerja :

Sampel ditambah pereaksi dragendorf terbentuk

endapan jingga.


42/54

2. Reaksi Mayer

Alat : Tabung reaksi, spatula, pipet tetes,penjepit.

Bahan : Sampel, pereaksi meyer (kalium

iodida, merkuri klorida), alkohol.

Cara kerja :

1. Sampel ditambah pereaksi meyer terbentuk

endapan kuning atau larutan kuning bening.2. Ditambah alkohol endapannya larut.


43/54

3. Reaksi Bouchardat


Bahan : Sampel, pereaksi bauchardat (kalium

iodida, iood), alkohol.

Cara kerja :

1. Sampel ditambah pereaksi bauchardat

terbentuk endapan coklat merah.

2. Ditambah alkohol endapannya larut.


44/54

b. Reaksi Warna

1. Reaksi dengan asam kuat

Alat : Tabung reaksi, spatula, pipet tetes,

penjepit.

Bahan : Sampel, H2SO4 pekat dan HNO3 pekat.

Cara kerja :

Sampel ditambah H2SO4 pekat danHNO3terbentuk warna kuning atau merah.


45/54

2. Reaksi Marquis


Bahan : Sampel, pereaksi marquis (formaldehid,

H2SO

4pekat).

Cara kerja :

Sampel ditambah pereaksi marquis terbentuk

warna jingga.


46/54

3. Reaksi Warna AZO

Alat : Tabung reaksi, spatula, pipet tetes,penjepit, hot plate, beker glass.

Bahan : Sampel, diazo A, diazo B, NaOH, amyl

alkohol, air.

Cara kerja :

1. Sampel ditambah diazo A dan diazo B.

2. Ditambah NaOH lalu dipanaskan.

3. Ditambah amyl alkohol menghasilkan warna

merah.


47/54

3) Berdasarkan Sifat fisiko kimia

Identifikasi dengan Spektroskopi UV Vis,FTIR, LC-MS, X-ray, dan NMR.

Isolat alkaloid murni kemudian dianalisis

menggunakan spektrofotometer UV-Vis, FTIR,

dan LC-MS.

Sebagai contoh, hasil spektrum UV-Vis, FTIR,

dan LC-MS dari penelitian yang dilakukan oleh

Yazid Mrtadlo,dkk (2013), sebagai berikut :


48/54

Gambar Spektra UV-Vis isolat alkaloid daun tempuyung


49/54

Contoh gambar Spektogram FTIR isolat alkaloid daun

tempuyung


50/54

Contoh gambar spektrogram LC-MS.isolat alkaloid daun

tempuyung


51/54

Kesimpulan

Alkaloida adalah senyawa yang mengandung

sebuah atom nitrogen yang bersifat basa lemah,

mempunyai cincin nitrogen heterosiklik karena

itu dapat larut dalam asam-asam sertamembentuk garamnya dan umumnya

mempunyai aktifitas fisiologis yang baik

terhadap manusia ataupun hewan.

Alkaloid umumnya bersifat tidak larut dalam airdan larut dalam kloroform, eter dan pelarut

organik lain, kecuali dalam bentuk garamnya.

Alkaloid mempunyai rasa pahit.


52/54

Isolasi alkaloid dapat dilakukan dengan cara

ekstraksi yaitu dengan cara soxhletasi dan

refluks.

Sedangkan identifikasinya dapat dilakukandengan cara direaksikan dengan pereaksi

dragendorf, mayer dan bouchardat.

Ff i d id/RPKPS/M t d k t k i df


53/54

Ffarmasi.unand.ac.id/RPKPS/Metoda_ekstraksi.pdf.

Diakses tanggal 13 Maret 2014.

Graviti. 2010. Ekstraksi Lemak Kasar Menggunakan Soxhlet

Extractor.http://eskariachandra.wordpress.com/2010/03/04/soklet/. Diakses tanggal 11 Maret 2014.

Hamdani, S. 2012. Metode Ekstraksi.

http://catatankimia.com/catatan/metoda-ekstraksi.html.


Meronda, Rahma. 2009. Isolasi dan Identifikasi Alkaloid.http://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-

fito_alkaloid.pdf. Diakses tanggal 10 Maret 2014.

Mj, Hudspith dan Evans RM. 2009. Pharmacopoeilal and

Related Drugs Of BiologicalOrigin.http.academia.idu/5971646/evans_978-0-7022933-

2. Diakses tanggal 12 Maret 2014.
http://eskariachandra.wordpress.com/2010/03/04/soklet/http://eskariachandra.wordpress.com/2010/03/04/soklet/http://catatankimia.com/catatan/metoda-ekstraksi.htmlhttp://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-fito_alkaloid.pdfhttp://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-fito_alkaloid.pdfhttp://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-fito_alkaloid.pdfhttp://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-fito_alkaloid.pdfhttp://rgmaisyah.files.wordpress.com/2009/10/tgs-fito_alkaloid.pdfhttp://catatankimia.com/catatan/metoda-ekstraksi.htmlhttp://catatankimia.com/catatan/metoda-ekstraksi.htmlhttp://catatankimia.com/catatan/metoda-ekstraksi.htmlhttp://eskariachandra.wordpress.com/2010/03/04/soklet/http://eskariachandra.wordpress.com/2010/03/04/soklet/


54/54

Murtadlo, Yazid. 2013. ISOLASI, IDENTIFIKASI SENYAWA

ALKALOID TOTAL DAUN TEMPUYUNG (Sonchus arvensis

Linn) DAN UJI SITOTOKSIK DENGAN METODE BSLT (Brine

Shrimp Lethality Test). Semarang : UniversitasDiponegoro. ejournal-s1.undip.ac.id/index.php/kimia

/article/view/1956. Diakses tanggal 25 Maret 2014.

Pranata, F. Sinung. 2012. Isolasi Alkaloid dari Bahan Alam

(Alkaloid Insulation of Natural Materials).Yogyakarta : Fakultas

Biologi Universitas Atma Jaya.http://yustikaforict.files.wordpress.com/2012/12/jurnal-5.pdf.


Wijaksono, Aris. 1989. Isolasi Alkaloid dari Akar Tuba Biji

(Anamirta cocculus L). Surabaya: IntitutTeknologi Nopember.http://digilib.its.ace.id/public/ITS-

undergraduate-21984-1841 400034-

cover.pdf. Diakses tanggal 8 maret 2014.
http://yustikaforict.files.wordpress.com/2012/12/jurnal-5.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://digilib.its.ace.id/public/ITS-undergraduate-21984-1841%20400034-%20cover.pdfhttp://yustikaforict.files.wordpress.com/2012/12/jurnal-5.pdfhttp://yustikaforict.files.wordpress.com/2012/12/jurnal-5.pdfhttp://yustikaforict.files.wordpress.com/2012/12/jurnal-5.pdf

Documents

Kuliah 1 Isolasi Alkaloid