INFECÇÃO HOSPITALAR POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS COM RESISTENTÊNCIA À METICILINA

(MRSA)

Beatriz Villas Bôas Gabriela Carnevale Giovana Giacomini Milena do Valle

PROBLEMA:

A resistência bacteriana a antibióticos é um grave problema de saúde pública. Você foi convidado para fazer parte da comissão de infecção hospitalar de um hospital da rede pública para investigar a origem clonal de cepas de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) em pacientes internados. Proponha uma estratégia baseada em tecnologia de DNA, indicando as etapas e métodos a serem utilizados para fazer essa investigação.

BRAINSTORM

Coleta de sangue dos pacientes

Cultura de S.aureus com

Meticilina

Extração de DNA

Sequenciamento

Genômico (total)

Hot Spot (parcial)

PCR

SSP ou RFLPDigestões

(polimorfismos bem descritos)

ESCOLHAS

Quais são os polimorfismos relacionados à resistência de Staphylococcus aureus a meticilina?

Hospital público --- Relação custo X benefício

STAPHYLOCOCCUS AUREUS O Staphylococcus aureus é encontrado colonizando a

microbiota normal, podendo tornar-se patogênico em condições como a quebra da barreira cutânea ou diminuição da imunidade. É umas das causas mais comuns de infecções nosocomiais (infecção hospitalar).

RESISTÊNCIA À METICININA _ O QUE É?

Resistência à penincilina.----

 

Beta-lactamases são enzimas produzidas por algumas bactérias e são responsáveis por sua resistência a antibióticos beta-lactâmicos.

Foi criado o beta-lactâmico sintético meticilina, que era resistente à ação das beta-lactamases que o S. aureus produzia.

MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina) -penicillin-binding protein, PBP2 e são resistentes a todos os antimicrobianos beta-lactâmicos.

RESISTÊNCIA À METICININA _ COMO SE DÁ?

fonte: http://www.staphylococcus.net/

 "cassete cromossômico estafilocócico mec"

ISS- 3’ orfx

TIPOS DE SCC Existem 7 tipos de SCC (I - VII), sendo que o SCCI -III estão

relacionados à infecções hospitalares (HA-MRSA)

Todos possuem a estrutura geral: (mec element)

(40 to 60

kb) mec element

2.1-kb mecA

mecA

ESCOLHA JUSTIFICADA - IMPLEMENTAÇÃO

Swab das feridas dos pacientes

Cultura de S. aureus em meio met+

Extração de DNA

PCR do gene mecA

Sequenciamento do gene mecA

Sequência

mecA iguai

s

MESMA

ORIGEM

CLONAL

QUESTÕES

Onde estão os polimorfismos?

Quantos são conhecidos?

Qual seria o tamanho ideal do fragmento para sequenciamento ou digestão?

Quantas etapas seriam necessárias no processo?

Relação custo X benefício no uso de enzimas de restrição (eletroforese de campo pulsado).

Polimorfismos existentes no complexo mec.

Análise genética de diversidade e os segmentos de DNA amplificados são aleatórios.

Resolução ideal X urgência.