Imunohistologické Imunohistologické vyšetřenívyšetření

u peroperační biopsie u peroperační biopsie

Marcela ŠtecherováMarcela ŠtecherováFTNsP Praha 4 - KrčFTNsP Praha 4 - Krč

Nový Jičín 16.-Nový Jičín 16.-17.10.200917.10.2009

Otevření nového, vysoce Otevření nového, vysoce specializované pracoviště na specializované pracoviště na chirurgické klinice ve FTNsP, které chirurgické klinice ve FTNsP, které je zaměřeno na vyšetření, operace je zaměřeno na vyšetření, operace a následnou léčbu plicních a následnou léčbu plicních karcinomů.karcinomů.

Naše oddělení navázalo s tímto Naše oddělení navázalo s tímto pracovištěm velice úzkou spoluprácipracovištěm velice úzkou spolupráci

Rozšířilo spektrum svých vyšetření Rozšířilo spektrum svých vyšetření tímto směrem.tímto směrem.

Peroperační vyšetřeníPeroperační vyšetření

Standardně provádíme peroperační Standardně provádíme peroperační vyšetření z tkání odebraných při vyšetření z tkání odebraných při operaci plicoperaci plic

Tkáň před krájením zmrazíme na -Tkáň před krájením zmrazíme na -232300CC

Řezy fixujeme acetonemŘezy fixujeme acetonem A barvíme současně metodami - A barvíme současně metodami -

hematoxylin-eosin a toluidinová modřhematoxylin-eosin a toluidinová modř

Kryostat – LeicaKryostat – Leica

CM 1850 UVCM 1850 UV Lampa s UV Lampa s UV

zářením na zářením na dezinfekci dezinfekci vnitřního prostoru vnitřního prostoru kryostatukryostatu

TBCTBC

Jestliže lékař diagnostikuje Jestliže lékař diagnostikuje karcinom plic, následuje karcinom plic, následuje imunohistochemické vyšetření. imunohistochemické vyšetření.

Termínem imunohistochemie Termínem imunohistochemie označujeme všechny techniky využívající označujeme všechny techniky využívající mono nebo polyklonální protilátky, mono nebo polyklonální protilátky, kterými lokalizujeme a vizualizujeme kterými lokalizujeme a vizualizujeme příslušné tkáňové antigeny. Předmětem příslušné tkáňové antigeny. Předmětem zkoumání je detekce antigenů zkoumání je detekce antigenů sdružených s nádorovými buňkami a sdružených s nádorovými buňkami a možnosti imunohistochemické možnosti imunohistochemické klasifikace nádoru podle původuklasifikace nádoru podle původu

Metoda je nasazována v Metoda je nasazována v diagnostice plicních nádorů pouze diagnostice plicních nádorů pouze u nativních vzorků.u nativních vzorků.

Velká opatrnost, zručnost a Velká opatrnost, zručnost a kvalitní zmrazené řezykvalitní zmrazené řezy

Detekce antigenu protilátkou TTF-Detekce antigenu protilátkou TTF-1, clone: 8G7G3/11, clone: 8G7G3/1

Stručný popis metodyStručný popis metody Kryořezy sušené proudem vzduchuKryořezy sušené proudem vzduchu Fixace acetonemFixace acetonem Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 Aplikace Primární protilátky při teplotě Aplikace Primární protilátky při teplotě

3737ooC 4 minutyC 4 minuty Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 Aplikace sekundární protilátky 4 minutyAplikace sekundární protilátky 4 minuty Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6Olpach TBS pufrem pH 7,4 – 7,6 Vizualizace DAB+ 4 minutyVizualizace DAB+ 4 minuty Mayerůr hematoxylin 10 sekundMayerůr hematoxylin 10 sekund Modrání jader, odvodnění, SolakrylModrání jader, odvodnění, Solakryl Negativní a pozitivní kontrolaNegativní a pozitivní kontrola

Vyhodnocení Vyhodnocení preparátupreparátu Pozitivita – Pozitivita – téměř vždy se jedná téměř vždy se jedná

o primární nádor plico primární nádor plic

Negativita – Negativita – podle morfologie se podle morfologie se patolog spíše přikloní k tomu, že patolog spíše přikloní k tomu, že se jedná o metastázu, převážně z se jedná o metastázu, převážně z adenokarcinomuadenokarcinomu

Přínosy pro pacientaPřínosy pro pacienta

odpadají náročná, zdlouhavá a odpadají náročná, zdlouhavá a bolestivá vyšetřeníbolestivá vyšetření

léky jsou ordinovány cíleně a v léky jsou ordinovány cíleně a v potřebném množstvípotřebném množství

v neposlední řadě jsou to i v neposlední řadě jsou to i

ekonomické výhodyekonomické výhody

Děkuji Vám za pozornost.Děkuji Vám za pozornost.