Upload
hamal
View
188
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Základní hematologická vyšetření. Ústav patologické fyziologie 1.LF UK. Co vyšetřujeme?. Krev Kostní dřeň - aspirační punkce - trepanobiopsie Lymfatické uzliny - extirpace. Přehled metod. FW Krevní obraz Koagulace Cytochemie Vyšetření metabolizmu Fe - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
Základní hematologická Základní hematologická vyšetřenívyšetření
Ústav patologické fyziologieÚstav patologické fyziologie
1.LF UK1.LF UK
Co vyšetřujeme?Co vyšetřujeme?
1.1. KrevKrev
2.2. Kostní dřeň Kostní dřeň
- aspirační punkce- aspirační punkce
- trepanobiopsie - trepanobiopsie
3.3. Lymfatické uzliny - extirpaceLymfatické uzliny - extirpace
Přehled metodPřehled metod
1.1. FWFW2.2. Krevní obrazKrevní obraz3.3. KoagulaceKoagulace4.4. CytochemieCytochemie5.5. Vyšetření metabolizmu FeVyšetření metabolizmu Fe6.6. Vyšetření metabolizmu HGBVyšetření metabolizmu HGB7.7. ImunologieImunologie8.8. Průtoková cytometriePrůtoková cytometrie9.9. Cytogenetika a molekulární biologieCytogenetika a molekulární biologie
Sedimentace erytrocytů (FW)Sedimentace erytrocytů (FW)
Rychlost sedimentace závisí na Rychlost sedimentace závisí na tvorbě agregátů tvorbě agregátů erytrocytů – penízkovatěníerytrocytů – penízkovatění (suspenzní stabilitě) (suspenzní stabilitě)
ZrychleníZrychlení - - fibrinogen, imunoglobuliny, CRP a fibrinogen, imunoglobuliny, CRP a jiné proteiny akutní fáze, anémiejiné proteiny akutní fáze, anémie
ZpomaleníZpomalení - - albumin, polycytémiealbumin, polycytémie
Metoda Fahreus-Westergrenova (Metoda Fahreus-Westergrenova (FWFW))
Norma:Norma: 2-5 mm/h u mužů 2-5 mm/h u mužů
3-8 mm/h u žen (3-8 mm/h u žen (↓ ery, ↑↓ ery, ↑ fibrinogen) fibrinogen)
Nespecifické vyšetření – screening, sledování Nespecifické vyšetření – screening, sledování průběhu (dynamiky) nemociprůběhu (dynamiky) nemoci
Krevní obraz (KO)Krevní obraz (KO)
HemoglobinHemoglobin ( (HGBHGB)) Hematokrit Hematokrit ((HCTHCT)) Počet erytrocytůPočet erytrocytů ( (RBCRBC)) Objem RBC (Objem RBC (MCVMCV)) Množství HGB v RBC Množství HGB v RBC
((MCHMCH)) Koncentrace HGB v RBC Koncentrace HGB v RBC
((MCHCMCHC)) Distribuční šíře RBC (Distribuční šíře RBC (RDWRDW)) Retikulocyty (Retikulocyty (retret))
Počet trombocytůPočet trombocytů ( (PLTPLT)) Distribuční šíře PLT (Distribuční šíře PLT (PDWPDW)) Objem PLT (Objem PLT (MPVMPV)) Počet leukocytůPočet leukocytů ( (WBCWBC)) Diferenciální rozpočet WBC Diferenciální rozpočet WBC
- segmenty a tyče- segmenty a tyče
- eozinofily- eozinofily
- bazofily- bazofily
- monocyty- monocyty
- lymfocyty - lymfocyty
kvantitativní vyšetření
kvalitativní vyšetření
Automatické stanovení hematologickými Automatické stanovení hematologickými analyzátoryanalyzátory
Jak funguje analyzátor ? Jak funguje analyzátor ?
- - impedančníimpedanční – při průchodu částice mezi elektrodami – při průchodu částice mezi elektrodami vzroste impedancevzroste impedance
- počet impulzů = počet částic- počet impulzů = počet částic
- amplituda = objem částice- amplituda = objem částice
- - optickéoptické – při průchodu částice přes fokusovaný – při průchodu částice přes fokusovaný světelný paprsek dojde k rozptylu světlasvětelný paprsek dojde k rozptylu světla
Klasický krevní nátěr Klasický krevní nátěr
- při patologickém nálezu na analyzátoru- při patologickém nálezu na analyzátoru - zhodnocení morfologie buněk- zhodnocení morfologie buněk
← sférocyty
schistocyty →
HemoglobinHemoglobin
Stanovení spektrofotometricky po hemolýze erytrocytů a přeměně na hemiglobinkyanid
Normální hodnotyženy: 120 – 160 g/lmuži: 130 – 175 g/l
Zvýšení: polycytémie, dehydratace
Snížení: anémie, hyperhydratace
HematokritHematokrit
HCT udává procentuelní zastoupení erytrocytů v objemové jednotce krve
(analyzátor vypočítá HCT z RBC a MCV)
Normální hodnotyženy: 0,35 – 0,46 35 - 46 % muži: 0,40 – 0,50 40 – 50 %
Zvýšení: polycytémie, dehydratace
Snížení: anémie, hyperhydratace
Počet erytrocytůPočet erytrocytů
udáván v množství x1012/l nebo x106/μl
Normální hodnotyženy: 3,8 – 5,2 x 1012/l muži: 4,2 – 5,8 x 1012/l
Zvýšení: polycytémie, dehydratace
Snížení: anémie, hyperhydratace
MCVMCV – – mmean ean ccell (corpuscular) ell (corpuscular) vvolumeolume
Výpočet:
- určen přímo analyzátorem !
Normální hodnota: 80 – 99 fl
Rozlišení - normocyty
- mikrocyty
- makrocyty
MCHMCH – – mmean ean ccell (corpuscular) ell (corpuscular) hhemoglobinemoglobin
Výpočet:
Normální hodnota: 27 – 33 pg
Rozlišení - normochromní RBC (normo nebo makrocyty)
- hypochromní RBC (většinou mikrocyty)
MCHCMCHC – – mmean ean ccell (corpuscular) ell (corpuscular) hhemoglobin emoglobin cconcentrationoncentration
Výpočet:
Normální hodnota: 33 - 37 %
Hodnocení obdobné jako u MCH
RDW – RDW – rred cell ed cell ddistribution istribution wwidthidth
Analyzátor vytvoří v paměti Priceovu-Jonesovu křivku, RDW Analyzátor vytvoří v paměti Priceovu-Jonesovu křivku, RDW je šířka distribuce (obdobně se stanovuje PDW)je šířka distribuce (obdobně se stanovuje PDW)
(RDW je mírou anizocytózy)(RDW je mírou anizocytózy)
3 5 7 9 11 13 um
poče
t norma
mikrocytární anémie
makrocytární anémie
Počet retikulocytůPočet retikulocytů
Stanovení z krevního nátěru obarveného brilantkrezylovou modří (počet / 1000 RBC)
(analyzátorem – absolutní hodnoty)
Normální hodnota: 0,5 – 1,5 %
Zvýšení: zvýšená tvorba RBC v kostní dřeni (krvácení, hemolýza)
Snížení až vymizení: útlum erytropoézy, útlum dřeně
Počet trombocytůPočet trombocytů
Udává se v množství x10Udává se v množství x1099/l nebo x10/l nebo x1033//μl
Normální hodnoty: 150 – 450 x 109/l
Zvýšení: trombocytóza
Snížení: trombocytopenie
Funkční porucha: trombocytopatie
Počet leukocytůPočet leukocytů
Udává se v množství x109/l nebo x103/μl
Normální hodnoty: 4 – 10 x 109/l
Zvýšení: leukocytóza
Snížení: leukopenie
Diferenciální rozpočet leukocytůDiferenciální rozpočet leukocytů
Udává zastoupení jednotlivých druhů leukocytů v krviUdává zastoupení jednotlivých druhů leukocytů v krvi
Vyjadřuje se v Vyjadřuje se v relativnímrelativním (%) nebo (%) nebo absolutnímabsolutním počtu počtu
Poruchy:Poruchy:
neutrofilie x neutropenie neutrofilie x neutropenie
eozinofilie x eozinopenieeozinofilie x eozinopenie
bazofilie x bazopeniebazofilie x bazopenie
lymfocytóza x lymfopenielymfocytóza x lymfopenie
AnémieAnémie
35 letá těhotná žena byla vyšetřena pro 35 letá těhotná žena byla vyšetřena pro progredující progredující únavuúnavu a a zadýchávánízadýchávání při při minimální zátěži. Klinické vyšetření až na minimální zátěži. Klinické vyšetření až na bledé spojivkybledé spojivky v normě. v normě.
Bylo vysloveno podezření na anémii, provedeno Bylo vysloveno podezření na anémii, provedeno vyšetření krevního obrazuvyšetření krevního obrazu
HGB 71 g/l HGB 71 g/l ((120 – 160 g/l)
HCT 23% HCT 23% ((35 - 46 %)
RBC 2,5 x 10RBC 2,5 x 1012 12 ((3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV 74 fl MCV 74 fl ((80 – 99 fl)
MCH 22 pg MCH 22 pg ((27 – 33 pg)
RDW 17,1% RDW 17,1% (13 – 15 %)(13 – 15 %)
ret 0,2% ret 0,2% (0,5 – 1,5 %)(0,5 – 1,5 %)
WBC 5,4 x 10WBC 5,4 x 109 9 ((4 – 10 x 109/l) PLT 450 x 10PLT 450 x 109 9 ((150 – 450 x 109/l)
Který parametr krevního obrazu diagnostikuje anémii? Proč není anémie definována hodnotami RBC a HCT? Jak lze anémii na základě hodnot KO blíže charakterizovat?
mikrocytárníhypochromnís anizocytózouhypoproliferativní
Anémie(patofyziologická klasifikace)
hyperproliferativní(zvýšené ztráty)
hypoproliferativní(nedostatečná tvorba)
krvácení hemolýza
nedostatek erytropoetinu
porucha krvetvorné
tkáně
nedostatek faktorů
důležitých pro erytropoezu
Anémie(morfologická klasifikace)
mikrocytární(hypochromní)
normocytární(normochromní)
makrocytární
sideropenická anémie
talasémie
anémie chronických
chorob
deficit vitaminu B12
MDS jaterní choroby
hypotyreóza
deficit kyseliny listové
anémie chronických
chorobkrvácení
aplastická anémie
některé hemolytické
anémie
Vyšetření metabolizmu železaVyšetření metabolizmu železa
S-FeS-Fe S-feritinS-feritin S-transferinS-transferin
Saturace transferinuSaturace transferinu
Celková vazebná kapacita transferinuCelková vazebná kapacita transferinu (Solubilní transferinový receptor)(Solubilní transferinový receptor)
Vyšetření metabolizmu železaVyšetření metabolizmu železa
Tranzitní pool Fe je stanovován jako Tranzitní pool Fe je stanovován jako sérové železosérové železo (veškeré železo je vázáno na transferin) a jako (veškeré železo je vázáno na transferin) a jako TIBCTIBC (celková vazebná kapacita)(celková vazebná kapacita)
Pool Fe v zásobárnách je Pool Fe v zásobárnách je stanovován jako stanovován jako sérový feritinsérový feritin
Vyšetření metabolizmu železaVyšetření metabolizmu železa
TIBCTIBC se zvyšuje při sníženém Fe v séru (více se zvyšuje při sníženém Fe v séru (více neobsazeného transferinu) a při zvýšení sérového neobsazeného transferinu) a při zvýšení sérového transferinutransferinu
Saturace transferinuSaturace transferinu je vypočtená jako S-Fe/ TIBC je vypočtená jako S-Fe/ TIBC
sTfR vzniká proteolýzou membránového TfR, je nepřímým ukazatelem exprese TfR v organismu
=> zvýšen u deficitu železa a intenzivní erytropoézy
mikrocyty
mitózy
prodloužená hemoglobinizace
nedostatek Fe
Proč je sideropenickáanémie mikrocytární?
Proč je přítomna anizocytóza?
50 letá žena přichází pro 50 letá žena přichází pro zhoršení dechuzhoršení dechu v v několika posledních týdnech. Také si stěžuje několika posledních týdnech. Také si stěžuje na na mravenčení prstůmravenčení prstů na levé noze. Při na levé noze. Při fyzikálním vyšetření zjišťujeme fyzikálním vyšetření zjišťujeme žlutě žlutě zabarvené skléryzabarvené skléry, červený a , červený a vyhlazený jazykvyhlazený jazyk. .
Pro podezření na anémii byl vyšetřen krevní Pro podezření na anémii byl vyšetřen krevní obraz:obraz:
HGB 65 g/l HGB 65 g/l ((120 – 160 g/l)
HCT 19,3% HCT 19,3% ((35 - 46 %)
RBC 1,7 x 10RBC 1,7 x 1012 12 ((3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV 114 fl MCV 114 fl ((80 – 99 fl)
MCH 33 pg MCH 33 pg ((27 – 33 pg)
RDW 22 % RDW 22 % (13 – 15 %)(13 – 15 %)
ret 0,4% ret 0,4% (0,5 – 1,5 %)(0,5 – 1,5 %)
WBC 2,0 x 10WBC 2,0 x 109 9 ((4 – 10 x 109/l) PLT 140 x 10PLT 140 x 109 9 ((150 – 450 x 109/l)
O jaký typ anémie se jedná?
Anémie(morfologická klasifikace)
mikrocytární(hypochromní)
normocytární(normochromní)
makrocytární
sideropenická anémie
talasémie
anémie chronických
chorob
deficit vitaminu B12
MDS jaterní choroby
hypotyreóza
deficit kyseliny listové
anémie chronických
chorobkrvácení
aplastická anémie
některé hemolytické
anémie
Vyšetření sérové koncentrace:Vyšetření sérové koncentrace:
vitaminu B12vitaminu B12
kyseliny listovékyseliny listové
Proč je anémie makrocytární?Proč je anémie makrocytární?
makrocyty
↑
prodloužená doba mezi bb děleními
↑
nedostatek kyseliny listové a vitaminu B12
HGB 65 g/l HGB 65 g/l ((120 – 160 g/l)
HCT 19,3% HCT 19,3% ((35 - 46 %)
RBC 1,7 x 10RBC 1,7 x 1012 12 ((3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV 114 fl MCV 114 fl ((80 – 99 fl)
MCH 33 pg MCH 33 pg ((27 – 33 pg)
RDW 22 % RDW 22 % (13 – 15 %)(13 – 15 %)
ret 0,4% ret 0,4% (0,5 – 1,5 %)(0,5 – 1,5 %)
WBC 2,0 x 10WBC 2,0 x 109 9 ((4 – 10 x 109/l) PLT 140 x 10PLT 140 x 109 9 ((150 – 450 x 109/l)
Proč má pacientka pancytopenii ?
Proč má pacientka parestézie?
hypochromní mikrocytární anémie
makrocytární anémie hypersegmentovaný neutrofil
Hemolytické anémieHemolytické anémie
Vyšetření metabolizmu hemoglobinuVyšetření metabolizmu hemoglobinu
S-bilirubinS-bilirubin – koncentrace odráží degradaci hemu – koncentrace odráží degradaci hemu (zvýšen u hemolytických anémií)(zvýšen u hemolytických anémií)
S-haptoglobin S-haptoglobin (váže hemoglobin)(váže hemoglobin) S-hemopexin S-hemopexin (váže hem)(váže hem)
(sníženy u hemolytických anémií)(sníženy u hemolytických anémií)
Elektroforéza hemoglobinu Elektroforéza hemoglobinu – zjištění abnormálních – zjištění abnormálních hemoglobinů (hemoglobin S)hemoglobinů (hemoglobin S)
Vyšetření antierytrocytových protilátekVyšetření antierytrocytových protilátek((→→ dg. autoimunitních hemolytických anémií)dg. autoimunitních hemolytických anémií)
Přímý antiglobulinový test (Coombsův)Přímý antiglobulinový test (Coombsův) - průkaz protilátek na povrchu erytrocytů pomocí - průkaz protilátek na povrchu erytrocytů pomocí
antiglobulinového séraantiglobulinového séra
Nepřímý antiglobulinový testNepřímý antiglobulinový test
- průkaz volných protilátek v séru (po inkubaci RBC se - průkaz volných protilátek v séru (po inkubaci RBC se sérem se přidá antiglobulinové sérum)sérem se přidá antiglobulinové sérum)
Imunologická vyšetřeníImunologická vyšetření
Vyšetření krevních skupinVyšetření krevních skupin
(Přímý antiglobulinový test)(Přímý antiglobulinový test) (Nepřímý antiglobulinový test)(Nepřímý antiglobulinový test)
Vyšetření krevních skupinVyšetření krevních skupin
ABO systémABO systém
- vyšetření RBC pomocí diagnostických sér anti-A - vyšetření RBC pomocí diagnostických sér anti-A
a anti-Ba anti-B
- vyšetření sérových aglutininů anti-A a anti-B pomocí - vyšetření sérových aglutininů anti-A a anti-B pomocí typových erytrocytůtypových erytrocytů
Rh(D) systémRh(D) systém
- vyšetření pomocí anti-Rh(D) séra- vyšetření pomocí anti-Rh(D) séra
bed-side test
CytochemieCytochemie
Průkaz látek v buňkách pomocí chemických reakcí, Průkaz látek v buňkách pomocí chemických reakcí,
hodnocení hodnocení periferní krve periferní krve i i kostní dřeněkostní dřeně
Reakce na železo (Perlsova reakce)Reakce na železo (Perlsova reakce)
- průkaz železa v erytroblastech (sideroblasty), - průkaz železa v erytroblastech (sideroblasty), erytrocytech (siderocyty) a makrofázích (siderofágy)erytrocytech (siderocyty) a makrofázích (siderofágy)
Vyšetření některých enzymů (ALP, NE)Vyšetření některých enzymů (ALP, NE)
- dg. a dif. dg. hematologických malignit- dg. a dif. dg. hematologických malignit
Průtoková cytometrie (flow cytometry)Průtoková cytometrie (flow cytometry)
technika umožňující kvantitativně i kvalitativně analyzovat částice – buňky – v suspenzi. Umožňuje cíleně separovat buňky na základě jejich fyzikálních a chemických vlastností
FACS (Fluorescence-activated-cell-sorting) - třídění buněčné suspenze dle odlišného rozptylu světla a fluorescenční charakteristiky buňky
Užití v hematologii:
imunofenotypizace myeloproliferací a lymfoproliferací pomocí fluorescenčně značených monoklonálních protilátek
Děkuji za pozornost!Děkuji za pozornost!Dotazy?Dotazy?