View
89
Download
3
Category
Tags:
Preview:
Citation preview
5/24/2018 infectii urinare genitale
1/55
Diagnosticul de
laborator in infectii
urinare si genitale
Prof. Dr. Olga Mihaela Dorobat
5/24/2018 infectii urinare genitale
2/55
Organ sterilexceptie uretra
Rezista invaziei bacteriene
Secretor
mucoasa produce mediatori solubili-proteina Tamm-Horsfall
adera la pilii bacteriilor/impiedica aderarea IgA
Lactoferina restrictioneaza cantitatea de Fe
Lipocalin necesara bacteriilor
Peptide constitutive/ inductibile- actiune bactericida
defensive - produse de epiteliul renal
defensineproduse de leucocitein cursul inf. urinare
cathlicidinepeptide antimicrobiene
Tractul urinar
5/24/2018 infectii urinare genitale
3/55
Raspuns imun celular mediatori ai inflamatiei IL-6 si IL-8
cu actiune chemotactica pentru neutrofile
Receptori prezenti la suprafata celulelor TLR4 controleaza producerea
de chemokine si citokine
TLR2 stimuleaza producerea de TNF TLR5 recunoaste flagelina bacteriana
TLR11 previne infectiile tract urinar
Urinalichide, dieta, medicatie
Mediu bun de cultura
Bacteriileaerobe cresc bine
anaerobe nu cresc
vagincresc
5/24/2018 infectii urinare genitale
4/55
Bacteriile Supravietuire
Crestere in urina
Aderare la mucoasa
Reziste la scurgerea urinii
Tract urinar superior
Steril- rata scurgerii 0.35ml/min
Bacteriile aderauroepiteliu, pietre
Tract urinar inferiorMediu static de cultura
Mucusul inhiba aderarea
Descuamarea
IgA. IgGinhiba aderarea
5/24/2018 infectii urinare genitale
5/55
Recoltare Jet mijlociu - Recipient steril 5cm
Instruire toaleta localaMomentdimineata /3- 4h de la ultima mictiune
Inaintea administrarii de antibiotice
Nr.probe 1/zi 1-2 la barbat 2-3 la femeie
F.subclinice
Punga sterila- nn, sugar
Punctie suprapubianann, sugari, femei, suspiciune
bacterrii anaerobe
Cateterreduce riscul contaminarii probei
bolnavi neooperanti.
Cateter permanent - Nudin punga, cu seringa din sonda
5/24/2018 infectii urinare genitale
6/55
PRELUCRARE IMEDIATA max 2h PASTRARE40C
Consevareacid boric24 h la TC
Urocultura
Metoda ansei calibrate Calibrare anse
0,01ml 5mm Din 0,1 ml 10 anse
0,001 ml 2,5 mm 100 anse
Dilutii - 0,1 din dil. 1/10
CLED
gel sange
5/24/2018 infectii urinare genitale
7/55
Examen microscopic IUrina necentrifugata - camera de numarat
Nr.leucocite /l sau mm3
Nr.hematii /l
Piurie 10 leucocite/ mm
3
10x106leucocite/l *
Centrifugarese pierd 20 - 80% celule
Frotiu colorat Gram0,001 ml 2,5 mm1 bacterie/camp >105UFC/ml
1 leucocit/camp Piurie
*European Urinalysis Guidelines
5/24/2018 infectii urinare genitale
8/55
Examen microscopic II
Celule eptelialescuamoasemarker
tehnica recoltare necoprespunzatoare
Exceptiegravide- crescuta exfolierea celulelor
epiteliale
Celule epiteliale mici rotunde
Celule urotheliale
Celule epiteliu tubular renal
greu de deosebit
indica leziune renala
5/24/2018 infectii urinare genitale
9/55
Citire - interpretare
Limitabacteriurie semnificativa se bazeaza: Simptome clinice
Specie bacteriana
Numarul de specii izolate Metoda de recoltare
Sex
Infectii tract urinar necomplicate
majoritatea o specie
Flora normal din uretra/org.genitale - contaminanti
5/24/2018 infectii urinare genitale
10/55
Interpretarea cantitativa a cresterii
Volum inocul
(ansa )
Nr.colonii pe placa Nr. colonii in urina
(CFU/ml)
1l ( 2,5 mm)
1 103
10 104
100 105
10l ( 5 mm)
1 102
10 103
100 104
5/24/2018 infectii urinare genitale
11/55
Citire - interpretare > o specie- interpretarea conditionata:
Daca o specie este dominanta
Cum a fost recoltata - jet mijlociu / cateter cronic
Prezenta de leucocite / celule epiteliale
Simptome clinice
Istoric
Infectie adevarata cu 2-3 specii poate aparea
A se repeta - purttori sond
Trei sau > specii - de obicei
se raporteaza cultura mixta
5/24/2018 infectii urinare genitale
12/55
Citire - interpretare Interpretare Kass1957 - 95% femei cu pieleonefrita
105UFC/ml Pozitiv
specificitate > sensibilitate 102104UFC/ml + piurie + rspuns terapeutic 103UFC/ml specificitate > sensibilitate >
sensibilitatea fr sa 10
leucocite/ml
Nitraimaj. patogeni reduc nitraii nitrii
106UFC/ml Neg. - streptococi, enterococi
Impreun sensibilitate 79%
Specificitate Leucocite 87%, Nitrati 100%Proteine Sange Glucoza Corpi cetonici pH Densitate
2 mincitire pe urina proaspat emis
5/24/2018 infectii urinare genitale
19/55
METODE ALTERNATIVE IV
Reactia catalazei2ml urin + 4 pic. H2O2 10% 2min. Bule gaz + reactie pozitiv
Bioluminiscenaadenosin trifosfatul
sensibilitatea 93%, specificitatea 78%
Test screening
Fals neg. Stafilococi, Enterobacter aerogenes,
Pseudomonas Metode automate
Flowcitometrie
5/24/2018 infectii urinare genitale
20/55
Erori in efectuarea uroculturii I
Recoltarea din primul jet de urina Recoltare la < 4h de la utima mictiune
Recoltarea in recipiente nesterile
Trimiterea unei probe din toata cantitatea de urina
Pastrarea > 2 h la TC pana la prelucrare
Utilizarea de medii lichide
Utilizarea urinii centrifugate pentru insamantare
Folosirea de anse cu calibru neverificat
Culturi de rutina pentru bacterii anaerobe
5/24/2018 infectii urinare genitale
21/55
Erori in efectuarea uroculturii II
Utilizarea de sisteme miniaturizate cu suprafete mici
de medii gelozate care nu permit obtinerea unui
numar suficient de colonii
Efectuarea sistematica a antibiogramelor din directdin urina
Neincubarea placilor necrescute la 24h timp de 48h
in conditiile in care s-au observat bacterii / leucocite
la ex.microscopic direct
Necorelarea nr/ml si a felului bacteriilor cu starea
clinica a bolnavului
PIELONEFRITA
5/24/2018 infectii urinare genitale
22/55
PIELONEFRITADebut- brusc Febr39-400C oscilant
Frisoane Durere lombar
Simptome mictionale - arsuri
pot lipsi disuriepolakiurie
Femei Persoane in vrst Brbati- uzual initial prostatita
Obstructiilitiaza, apoi inf. urinarGg, tumori - compresiuni
Aderente, stricturi ureter,Reflux vezico-uretral
Ex. Urinaleucocitepiurienu intotdeauna
Lipsaindiciu localizarebazinet
Fara atingere parenhim renalEx.gravide
- bacteriiE.coli, Proteus, Klebsiella
ComplemantarHemoculturapozitiva
Nr.leucocite >, VSH >, Uree, Creatinina
5/24/2018 infectii urinare genitale
23/55
Infecii urinare joase CISTITE
Urgena, frecvena Femein perioada de activ. sexualPolakiurie 10-20 % cel puin odat / via
Disurie 5 % inf recidivante < 21 zile
Dureri suprapubiene aceeai bacteriecistalgia reinfecie > 21 zile
Febraabsenta bacterii diferite
Diagnostic diferential inf ginecologice
inf digestive
5/24/2018 infectii urinare genitale
24/55
Infeciiurinare joase CISTITE Patogenie
Contaminare din apropiereintestin, genital Incapacitatea de a goli complet vezica
Ex. uriniiindispensabil
leucocite 10 / mm3 bacterii 105UFC /ml........... 103UFC /ml
E.coli S.saprophyticus
Streptococ B Enterococcus
SupraveghereLa 2 zile de la oprire tratament
2 - 4 sptmni pt. depistare recidive
5/24/2018 infectii urinare genitale
25/55
Infecia urinarla gravide
Factori favorizani compresie ciurinaredilatare uretereimunodepresie oarecare
Frecvent5-10 %
Nu este banal/ benignMulte asimptomatice
Polakiuria confund
Durerea suprapubian sarcina
Risc copiln. prematur, hipotrofie fetalainf. neonatale(meningita, sepsis)
mama- pieleonefrit
5/24/2018 infectii urinare genitale
26/55
Infeciaurinarla gravide
Inf. urinar
bine tolerat 6-7 luni - neglijata
brusctablou grav- 8-9 lun
nastere fat mort
mamasoc septic
Necesara depistare sistematic
Febra - Ex. urin- Hemocultur
5/24/2018 infectii urinare genitale
27/55
Infecia urinara la copil
0,2% .........5,8% spitalizai0-2 luni (nn)urmare tulburarilor digestive,
fr febr primele 10 zile
> baiei malformaii, megaureter,
sindrom de jonctiune,
diverticul vezical
2 luni - 6 anifrecventa > predominant fete
febra 50%, tulburari digestive 25%
enuresis, falsa albuminurie
5/24/2018 infectii urinare genitale
28/55
Infecia urinar la purtatori de sond
permanent
Infecia 8% - I zi Schimbare2 luni
17% - II zi eroziuni
75% - III zi bacteriemie
100% - IV zi febra - soc
Pentru retenie acut de urin sonda nu > 48 h
Ex. urin febra
- cu o sptmn inaintea schimbrii
5/24/2018 infectii urinare genitale
29/55
Infecia urinar la persoanele in varst
1020 %
Factori favorizani
Femeicistocel,diabet, tulburari neurologice reziduu
Barbati - adenom prostat, scleroza col vezical vezical
Intervenii chirurgicale Adenocarcinom
Polipi vezicali
Ureterotomie
Extirpare calculi
5/24/2018 infectii urinare genitale
30/55
Vezica neurologic
Malformaii congenitale spina bifida
Tumori
Accidenteseciune medular
Reziduu vezical asociatReflux vezico-uretral
Favorizeaz infecia urinar
PseudomonasProteus Insuficien renal Pielonefrit
E.coli
5/24/2018 infectii urinare genitale
31/55
Izolare patogeni specifici
Mycobacterium tuberculosis
Recoltare -3 zile - 50ml
Centrifugare 15min. 13000g*- Tratare -idem sputa
Frotiu Ziehl-Neelsen - Cultivare -Lowenstein
Salmonella typhi Jet mijlociu 20ml - centrifugare 3000g 30 min
Insamantare selenit - trecere Mac Conkey, SS..
Leptospira Jet mijlociu 20ml - centrifugare 3000g 30 min
Insamantare Korthof cu 200-400 g/ml fluorouracil/ml
300C30 zile
*Buiuc D, Negut M - Tratat de microbiologie clinica ed II
Secretia retrala
5/24/2018 infectii urinare genitale
32/55
Secretia uretrala
Recoltareprelucrare La 2h dup miciune
Scurgere spontana -tampon
Fara - se inser tampon fin alginat/ dacron 2-4 cm
se rotete, se las cteva sec., se retrage
Pentru Trichomonasinainte de prima mictiune
se imerseaza in 1ml sol salina izotona 370C
examinare rapida
Pentru ex.microscopic
efectuarea frotiurilor si fixare imediat dupa
recoltare
5/24/2018 infectii urinare genitale
33/55
Secretia uretrala
Recoltareprelucrare
N.gonorrhoeae insamantare imediata pe placamediu la 370C
mediu transport Stuart /Amies
Chlamydia trachomatis mediu conservant SPG sau 2SP -2ml
Congelare -700C
Micoplasme
Bulion tripticaz soia 2ml40C zile, -700C ani
Urina matinala primii 10ml, 100ml WC, 10ml
Diferentiere uretrita/cistita
Secretia uretrala
5/24/2018 infectii urinare genitale
34/55
Secretia uretrala
Examinare microscopica
Frotiu Gram Normalflora mixta, levuri extracelular
Coci Gram negativi intracelularN.gonorrhoeae
Frotiu Giemsa
Incluzii Chlamydia trachomatis
Preparat proaspatI proba
Trichomonas
Geloza chocolat, mediu Thayer Martin - N.gonorrhoeae
Incubare atm 5% CO2 ID Testare sensibilitate
Cultivare
i l
5/24/2018 infectii urinare genitale
35/55
Secretia uretrala
Probe urina
Examen macroscopic
Filamente mucusin prima proba
sugereaza
Examen microscopic
Centrifugare 300g5 min
Sedimentlama/lamela X400Leucocite 15/camp in prima proba
indica
5/24/2018 infectii urinare genitale
36/55
Diagnostic
Chlamydia trachomatis Cultivare
ELISA
imnunofluorescenta Tehnici moleculare
Mycoplasma/ Ureaplasma
Seturi comerciale izolare/ identificare (cantitativa) Serologie
Mycoplasma genitalium
Evidentierea ADN-ului -urina
5/24/2018 infectii urinare genitale
37/55
Studiu 2007 SUA tineri
Mycoplasma genitaliumdepaseste prevalenta
gonoreeidevine a 3-a cauza BTS
4,2% Chlamydia
2.3% Trichomonas
1,0 % M. genitalium 0.4 % N. gonorrhoeae
Boskey E, About.com Guide Updated May 24, 2009
http://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htm5/24/2018 infectii urinare genitale
38/55
Prostatite
Probe - dimineata
1. Primii 5-10 ml urina
2. Urina din jetul mijlociu
3. Secretie prostata dupa masaj
4. Primul jet dupa masaj prostata
Examen citobacteriologic
Cuantificarea bacteriilorgeloza sange + Mac Conkey
Prostatita bacteriananr.bacterii 10X in proba 3 si 4
10 leucocite/camp -marire x400
5/24/2018 infectii urinare genitale
39/55
Prostatite
Tuseu rectal orienteaz
Agenti etiologiciE.coli 10-20 % Alte enterobacterii Proteus,
Enterococcus KlebsiellaS.aureus discutabil U. urealyticum
S. saprophyticus C. trachomatis
Prostata
Prostatita acuta Edematiata , dureroasa
Prostatita cronica Dura, nedureroasa
Epididimita Normala, durere discreta
5/24/2018 infectii urinare genitale
40/55
EPIDIDIMITE Clinic
tumefiere dureroasa-unulaterala- scrot
Scurgere uretrala
Iritatie tract urinar
Diagnosticexaminare
Prelevat de electiecultura din ureter Prima urina si jet mijlociu
Aspirat din epididim sau testicol dupa dezinfectia
pielii cu dezinfectant chirurgical
Agenti etiologici
C.trachomatis N.gonorrhoeae
Enterobacteriaceae , Pseudomonas > 35 ani
M.tuberculosis
5/24/2018 infectii urinare genitale
41/55
Adeseori virale - V.urlian,Coxsakie B, Prelevate intraoperatoriu
Examinare
Microscopica
Cultivare bacterii aerobe
Agenti etiologici
E coli K.pneumoniae P.aeruginosa
Stafilococi Streptococi
ORHITE
5/24/2018 infectii urinare genitale
42/55
Tract genital feminin
Superiorsteril bacteriologic
Inferiorcontaminat cu florapiele / tract digestiv
Variaii Vagin/ cervix Vrsta Ciclul
Graviditate Imunodepresie
Flora influenat de estrogeni Nou-nascut6 spt- estrogeni de la mam lactobacili
Pan la pubertate-flor de pe piele - Stafilococi cg. neg,
difteromorfi, bacterii / fecale - E.coli
Dupa pubertatepredomina lactobacilii
Menopauza- lacobacili
5/24/2018 infectii urinare genitale
43/55
Femeia adulta In absenta infectiei 106-109bacterii/gram secretie vaginala
Frecventa izolarii speciilor Portaj obisnuit Portaj frecvent
Portaj exceptional
% %
Lactobacili (Flora Doderlein) >80 Bacili anaerobi (Bacteroides,
prevotella, Mobiluncus)
20
Streptococi negrupabili >60 Stafilococi coagulazo-negativi 20
Enterococi >30 S.aureus 10
Candida albicans 30 Mycoplasma hominis
5/24/2018 infectii urinare genitale
44/55
Vaginite- vaginozeRecoltare secretie
3 tampoane fund de sac vaginal posteriorPrelucrare
Tampon 1- in 0,5 ml solutie salina isotona 370C
Examinare lama/lamela x100 x400
Trichomonas, levuri inmugurite, pseudofilamente
Raportul PNM/ celule epiteliale
Reactie inflamatorie
Intensa - Trichomonas DiscretaCandidoza
Absenta- vaginoza
Tampon 2Frotiu Gram
5/24/2018 infectii urinare genitale
45/55
Interpretarea frotiu Gram pentru vaginoza bacteriana
Numar bacterii/camp microscopic imersie Nugent modificat
4+ = >303+ = 6 -12 Interpretare SCOR
2+ = 15 03 Flora normala
1+ =
5/24/2018 infectii urinare genitale
46/55
Vaginite- vaginoze Tampon 3
Cultivare pentru Candida- Sabouraud cu cloramfenicol saumediu cromogen
La solicitare cultura pentru
N.gonorrhoeae
S.aureus- in sindromul socului toxic evidentierea toxineiELISA, reverse pasive latex agglutination
Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
Listeria monocytogenes
Shigella spp.- fetite
Enterobacteriile nu se comunica- fac parte din flora normala
a vaginului
d
5/24/2018 infectii urinare genitale
47/55
Caractere diagnostice pentru vaginite
si vaginoza
Boala sau conditie pH Observatii la ex.
preparat umed
Miros de
amina
Alte teste
Normal 4-4,5 Bacili lungi Absent
Atrofie >6 Absent
Candidoza 4-4,5 Pseudohife sau
levuri inmugurite
Absent Cultura pentru
levuri
Vaginoza
bacteriana
>4,5 Clue cells Prezent Coloratie Gram
Thricomoniaza 5-6 Paraziti flagelati Prezent in modobisnuit
CulturaTrichomonas
Testul Whiff= testul aminelor volatile
10% KOH
l
5/24/2018 infectii urinare genitale
48/55
Vulva
Recoltare-durere, eritem, edem
Curatirea cu sol. 0.85% NaCl
Exsudat/ eritem cu tamponpentru culturi levuri
Vezicule
Ruptecolectare lichid cu tampon
Aspirat cu seriga cu ac 26-27gauge
Crustese indeparteaza
Tampon umezit sol. 0.85% NaCl
Examinare
MicroscopicaTrichomonas
Gram- reactie inflamatorie, bacterii
Cultivarepentru S.aureus, S.pyogenes ..
5/24/2018 infectii urinare genitale
49/55
Streptococ grup B
Evidentiere la gravide s 35-37 gestatie Recoltare - tampon vaginal
Metoda de electie
Bulion LIM (Todd Hewitt)
colistin 10g/ml, ac nalidixic 25 g/ml
Bulion Trans Vag
Trecere pe geloza sange
Latex aglutinare Insamantare directa mediu Granada
20-60% dintre pozitivi
Necesita atm. anaeroba
5/24/2018 infectii urinare genitale
50/55
Streptococ grup B
Dificultati
Inhibitia cresterii in prezenta EnterococcusLIM
2% nu produc hemoliza
3-4% nu produc pigment
Clasic rezultatul 48 ore
Metode moleculare AccuProbe
Cepheid Real time PCR
5/24/2018 infectii urinare genitale
51/55
Glanda Bartholin
Recoltare
Decontaminarepovidone/iodine- alt preparat
Aspirare din canal
Frotiuin momentul recoltarii
Transport rapid in mediu Amies /Stuart Examinare
Microscopica- frotiu Gram
Cultivare pentru
N.gonorrhoeae Enterobacterii (E.coli, Proteus)
S.aureus Streptococi Haemophilus
Anaerobi Pasteurella bettyae
Teste pentru Chlamydia trachomatis, Ureaplasma
C i it
5/24/2018 infectii urinare genitale
52/55
Cervicite Recoltare scurgere mucopurulenta
Se indeparteaza secretiaexocolcomprese sterile Se introduc tampoanele(3) in endocol 1-2 cm
Tampon 1- frotiu Gram
Tampon 2 -cultivare N.gonorrhoeae Tampon 3C.trachomatis-Frotiu Giemsa
Alte teste Imunofluorescenta
ELISA
Cultivare
Metode moleculare
5/24/2018 infectii urinare genitale
53/55
Endometrite
Recoltare transvaginala prin aspirare
Transport in conditii de anaerobioza
Examinare
Microscopica- Frotiu Gram Cultivare bacterii aerobe si anaerobe
Agenti etiologici
Actinomycetes Bacteroides spp C. trachomatisEnterococcus spp. E.coli G.vaginalis
H.influenzae Klebsiella L.monocytogenes
Prevotella S.agalactiae S.pyogenes
Isenberg HD- Clinical Microbiology Procedures Handbook
5/24/2018 infectii urinare genitale
54/55
Salpingite Recoltare
Aspirat si probe biopsice prin laparascopie
Examinare
Microscopica- Frotiu Gram
Cultivarebacterii aerobe / anaerobe
Agenti etiologici
Actinomycetes Bacteroides spp C. trachomatis
Enterococcus spp. E.coli H.influenzaeN.gonorrhoeae Pasteurella Prevotella
S.aureus S.epidermidis S.agalactiae Streptococi
Sit tii ti l
5/24/2018 infectii urinare genitale
55/55
Situatii particulare
Daca Proba a fost obtinuta invaziv
Cultura abundenta predominenta
Se identifica
Haemophilus spp
Bacilii Gram negativi enterici (exceptie enterobacteriile din vagin - Nu se raporteaza)
Pseudomonasspp. /alti Gram negativi nefermentativi
Pasteurella bettyaela nn.
Capnocytophaga spp. Campylobacter fetus
S. aureus S. pneumoniae N. meningitidis
G.vaginalis
Recommended