infectii urinare genitale

5/24/2018 infectii urinare genitale

1/55

Diagnosticul de

laborator in infectii

urinare si genitale

Prof. Dr. Olga Mihaela Dorobat


2/55

Organ sterilexceptie uretra

Rezista invaziei bacteriene

Secretor

mucoasa produce mediatori solubili-proteina Tamm-Horsfall

adera la pilii bacteriilor/impiedica aderarea IgA

Lactoferina restrictioneaza cantitatea de Fe

Lipocalin necesara bacteriilor

Peptide constitutive/ inductibile- actiune bactericida

defensive - produse de epiteliul renal

defensineproduse de leucocitein cursul inf. urinare

cathlicidinepeptide antimicrobiene

Tractul urinar


3/55

Raspuns imun celular mediatori ai inflamatiei IL-6 si IL-8

cu actiune chemotactica pentru neutrofile

Receptori prezenti la suprafata celulelor TLR4 controleaza producerea

de chemokine si citokine

TLR2 stimuleaza producerea de TNF TLR5 recunoaste flagelina bacteriana

TLR11 previne infectiile tract urinar

Urinalichide, dieta, medicatie

Mediu bun de cultura

Bacteriileaerobe cresc bine

anaerobe nu cresc

vagincresc


4/55

Bacteriile Supravietuire

Crestere in urina

Aderare la mucoasa

Reziste la scurgerea urinii

Tract urinar superior

Steril- rata scurgerii 0.35ml/min

Bacteriile aderauroepiteliu, pietre

Tract urinar inferiorMediu static de cultura

Mucusul inhiba aderarea

Descuamarea

IgA. IgGinhiba aderarea


5/55

Recoltare Jet mijlociu - Recipient steril 5cm

Instruire toaleta localaMomentdimineata /3- 4h de la ultima mictiune

Inaintea administrarii de antibiotice

Nr.probe 1/zi 1-2 la barbat 2-3 la femeie

F.subclinice

Punga sterila- nn, sugar

Punctie suprapubianann, sugari, femei, suspiciune

bacterrii anaerobe

Cateterreduce riscul contaminarii probei

bolnavi neooperanti.

Cateter permanent - Nudin punga, cu seringa din sonda


6/55

PRELUCRARE IMEDIATA max 2h PASTRARE40C

Consevareacid boric24 h la TC

Urocultura

Metoda ansei calibrate Calibrare anse

0,01ml 5mm Din 0,1 ml 10 anse

0,001 ml 2,5 mm 100 anse

Dilutii - 0,1 din dil. 1/10

CLED

gel sange


7/55

Examen microscopic IUrina necentrifugata - camera de numarat

Nr.leucocite /l sau mm3

Nr.hematii /l

Piurie 10 leucocite/ mm

3

10x106leucocite/l *

Centrifugarese pierd 20 - 80% celule

Frotiu colorat Gram0,001 ml 2,5 mm1 bacterie/camp >105UFC/ml

1 leucocit/camp Piurie

*European Urinalysis Guidelines


8/55

Examen microscopic II

Celule eptelialescuamoasemarker

tehnica recoltare necoprespunzatoare

Exceptiegravide- crescuta exfolierea celulelor

epiteliale

Celule epiteliale mici rotunde

Celule urotheliale

Celule epiteliu tubular renal

greu de deosebit

indica leziune renala


9/55

Citire - interpretare

Limitabacteriurie semnificativa se bazeaza: Simptome clinice

Specie bacteriana

Numarul de specii izolate Metoda de recoltare

Sex

Infectii tract urinar necomplicate

majoritatea o specie

Flora normal din uretra/org.genitale - contaminanti


10/55

Interpretarea cantitativa a cresterii

Volum inocul

(ansa )

Nr.colonii pe placa Nr. colonii in urina

(CFU/ml)

1l ( 2,5 mm)

1 103

10 104

100 105

10l ( 5 mm)

1 102

10 103

100 104


11/55

Citire - interpretare > o specie- interpretarea conditionata:

Daca o specie este dominanta

Cum a fost recoltata - jet mijlociu / cateter cronic

Prezenta de leucocite / celule epiteliale

Simptome clinice

Istoric

Infectie adevarata cu 2-3 specii poate aparea

A se repeta - purttori sond

Trei sau > specii - de obicei

se raporteaza cultura mixta


12/55

Citire - interpretare Interpretare Kass1957 - 95% femei cu pieleonefrita

105UFC/ml Pozitiv

specificitate > sensibilitate 102104UFC/ml + piurie + rspuns terapeutic 103UFC/ml specificitate > sensibilitate >

sensibilitatea fr sa 10

leucocite/ml

Nitraimaj. patogeni reduc nitraii nitrii

106UFC/ml Neg. - streptococi, enterococi

Impreun sensibilitate 79%

Specificitate Leucocite 87%, Nitrati 100%Proteine Sange Glucoza Corpi cetonici pH Densitate

2 mincitire pe urina proaspat emis


19/55

METODE ALTERNATIVE IV

Reactia catalazei2ml urin + 4 pic. H2O2 10% 2min. Bule gaz + reactie pozitiv

Bioluminiscenaadenosin trifosfatul

sensibilitatea 93%, specificitatea 78%

Test screening

Fals neg. Stafilococi, Enterobacter aerogenes,

Pseudomonas Metode automate

Flowcitometrie


20/55

Erori in efectuarea uroculturii I

Recoltarea din primul jet de urina Recoltare la < 4h de la utima mictiune

Recoltarea in recipiente nesterile

Trimiterea unei probe din toata cantitatea de urina

Pastrarea > 2 h la TC pana la prelucrare

Utilizarea de medii lichide

Utilizarea urinii centrifugate pentru insamantare

Folosirea de anse cu calibru neverificat

Culturi de rutina pentru bacterii anaerobe


21/55

Erori in efectuarea uroculturii II

Utilizarea de sisteme miniaturizate cu suprafete mici

de medii gelozate care nu permit obtinerea unui

numar suficient de colonii

Efectuarea sistematica a antibiogramelor din directdin urina

Neincubarea placilor necrescute la 24h timp de 48h

in conditiile in care s-au observat bacterii / leucocite

la ex.microscopic direct

Necorelarea nr/ml si a felului bacteriilor cu starea

clinica a bolnavului

PIELONEFRITA


22/55

PIELONEFRITADebut- brusc Febr39-400C oscilant

Frisoane Durere lombar

Simptome mictionale - arsuri

pot lipsi disuriepolakiurie

Femei Persoane in vrst Brbati- uzual initial prostatita

Obstructiilitiaza, apoi inf. urinarGg, tumori - compresiuni

Aderente, stricturi ureter,Reflux vezico-uretral

Ex. Urinaleucocitepiurienu intotdeauna

Lipsaindiciu localizarebazinet

Fara atingere parenhim renalEx.gravide

- bacteriiE.coli, Proteus, Klebsiella

ComplemantarHemoculturapozitiva

Nr.leucocite >, VSH >, Uree, Creatinina


23/55

Infecii urinare joase CISTITE

Urgena, frecvena Femein perioada de activ. sexualPolakiurie 10-20 % cel puin odat / via

Disurie 5 % inf recidivante < 21 zile

Dureri suprapubiene aceeai bacteriecistalgia reinfecie > 21 zile

Febraabsenta bacterii diferite

Diagnostic diferential inf ginecologice

inf digestive


24/55

Infeciiurinare joase CISTITE Patogenie

Contaminare din apropiereintestin, genital Incapacitatea de a goli complet vezica

Ex. uriniiindispensabil

leucocite 10 / mm3 bacterii 105UFC /ml........... 103UFC /ml

E.coli S.saprophyticus

Streptococ B Enterococcus

SupraveghereLa 2 zile de la oprire tratament

2 - 4 sptmni pt. depistare recidive


25/55

Infecia urinarla gravide

Factori favorizani compresie ciurinaredilatare uretereimunodepresie oarecare

Frecvent5-10 %

Nu este banal/ benignMulte asimptomatice

Polakiuria confund

Durerea suprapubian sarcina

Risc copiln. prematur, hipotrofie fetalainf. neonatale(meningita, sepsis)

mama- pieleonefrit


26/55

Infeciaurinarla gravide

Inf. urinar

bine tolerat 6-7 luni - neglijata

brusctablou grav- 8-9 lun

nastere fat mort

mamasoc septic

Necesara depistare sistematic

Febra - Ex. urin- Hemocultur


27/55

Infecia urinara la copil

0,2% .........5,8% spitalizai0-2 luni (nn)urmare tulburarilor digestive,

fr febr primele 10 zile

> baiei malformaii, megaureter,

sindrom de jonctiune,

diverticul vezical

2 luni - 6 anifrecventa > predominant fete

febra 50%, tulburari digestive 25%

enuresis, falsa albuminurie


28/55

Infecia urinar la purtatori de sond

permanent

Infecia 8% - I zi Schimbare2 luni

17% - II zi eroziuni

75% - III zi bacteriemie

100% - IV zi febra - soc

Pentru retenie acut de urin sonda nu > 48 h

Ex. urin febra

- cu o sptmn inaintea schimbrii


29/55

Infecia urinar la persoanele in varst

1020 %

Factori favorizani

Femeicistocel,diabet, tulburari neurologice reziduu

Barbati - adenom prostat, scleroza col vezical vezical

Intervenii chirurgicale Adenocarcinom

Polipi vezicali

Ureterotomie

Extirpare calculi


30/55

Vezica neurologic

Malformaii congenitale spina bifida

Tumori

Accidenteseciune medular

Reziduu vezical asociatReflux vezico-uretral

Favorizeaz infecia urinar

PseudomonasProteus Insuficien renal Pielonefrit

E.coli


31/55

Izolare patogeni specifici

Mycobacterium tuberculosis

Recoltare -3 zile - 50ml

Centrifugare 15min. 13000g*- Tratare -idem sputa

Frotiu Ziehl-Neelsen - Cultivare -Lowenstein

Salmonella typhi Jet mijlociu 20ml - centrifugare 3000g 30 min

Insamantare selenit - trecere Mac Conkey, SS..

Leptospira Jet mijlociu 20ml - centrifugare 3000g 30 min

Insamantare Korthof cu 200-400 g/ml fluorouracil/ml

300C30 zile

*Buiuc D, Negut M - Tratat de microbiologie clinica ed II

Secretia retrala


32/55

Secretia uretrala

Recoltareprelucrare La 2h dup miciune

Scurgere spontana -tampon

Fara - se inser tampon fin alginat/ dacron 2-4 cm

se rotete, se las cteva sec., se retrage

Pentru Trichomonasinainte de prima mictiune

se imerseaza in 1ml sol salina izotona 370C

examinare rapida

Pentru ex.microscopic

efectuarea frotiurilor si fixare imediat dupa

recoltare


33/55

Secretia uretrala

Recoltareprelucrare

N.gonorrhoeae insamantare imediata pe placamediu la 370C

mediu transport Stuart /Amies

Chlamydia trachomatis mediu conservant SPG sau 2SP -2ml

Congelare -700C

Micoplasme

Bulion tripticaz soia 2ml40C zile, -700C ani

Urina matinala primii 10ml, 100ml WC, 10ml

Diferentiere uretrita/cistita

Secretia uretrala


34/55

Secretia uretrala

Examinare microscopica

Frotiu Gram Normalflora mixta, levuri extracelular

Coci Gram negativi intracelularN.gonorrhoeae

Frotiu Giemsa

Incluzii Chlamydia trachomatis

Preparat proaspatI proba

Trichomonas

Geloza chocolat, mediu Thayer Martin - N.gonorrhoeae

Incubare atm 5% CO2 ID Testare sensibilitate

Cultivare

i l


35/55

Secretia uretrala

Probe urina

Examen macroscopic

Filamente mucusin prima proba

sugereaza

Examen microscopic

Centrifugare 300g5 min

Sedimentlama/lamela X400Leucocite 15/camp in prima proba

indica


36/55

Diagnostic

Chlamydia trachomatis Cultivare

ELISA

imnunofluorescenta Tehnici moleculare

Mycoplasma/ Ureaplasma

Seturi comerciale izolare/ identificare (cantitativa) Serologie

Mycoplasma genitalium

Evidentierea ADN-ului -urina


37/55

Studiu 2007 SUA tineri

Mycoplasma genitaliumdepaseste prevalenta

gonoreeidevine a 3-a cauza BTS

4,2% Chlamydia

2.3% Trichomonas

1,0 % M. genitalium 0.4 % N. gonorrhoeae

Boskey E, About.com Guide Updated May 24, 2009
http://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htmhttp://std.about.com/bio/Elizabeth-Boskey-Ph-D-25525.htm


38/55

Prostatite

Probe - dimineata

1. Primii 5-10 ml urina

2. Urina din jetul mijlociu

3. Secretie prostata dupa masaj

4. Primul jet dupa masaj prostata

Examen citobacteriologic

Cuantificarea bacteriilorgeloza sange + Mac Conkey

Prostatita bacteriananr.bacterii 10X in proba 3 si 4

10 leucocite/camp -marire x400


39/55

Prostatite

Tuseu rectal orienteaz

Agenti etiologiciE.coli 10-20 % Alte enterobacterii Proteus,

Enterococcus KlebsiellaS.aureus discutabil U. urealyticum

S. saprophyticus C. trachomatis

Prostata

Prostatita acuta Edematiata , dureroasa

Prostatita cronica Dura, nedureroasa

Epididimita Normala, durere discreta


40/55

EPIDIDIMITE Clinic

tumefiere dureroasa-unulaterala- scrot

Scurgere uretrala

Iritatie tract urinar

Diagnosticexaminare

Prelevat de electiecultura din ureter Prima urina si jet mijlociu

Aspirat din epididim sau testicol dupa dezinfectia

pielii cu dezinfectant chirurgical

Agenti etiologici

C.trachomatis N.gonorrhoeae

Enterobacteriaceae , Pseudomonas > 35 ani

M.tuberculosis


41/55

Adeseori virale - V.urlian,Coxsakie B, Prelevate intraoperatoriu

Examinare

Microscopica

Cultivare bacterii aerobe

Agenti etiologici

E coli K.pneumoniae P.aeruginosa

Stafilococi Streptococi

ORHITE


42/55

Tract genital feminin

Superiorsteril bacteriologic

Inferiorcontaminat cu florapiele / tract digestiv

Variaii Vagin/ cervix Vrsta Ciclul

Graviditate Imunodepresie

Flora influenat de estrogeni Nou-nascut6 spt- estrogeni de la mam lactobacili

Pan la pubertate-flor de pe piele - Stafilococi cg. neg,

difteromorfi, bacterii / fecale - E.coli

Dupa pubertatepredomina lactobacilii

Menopauza- lacobacili


43/55

Femeia adulta In absenta infectiei 106-109bacterii/gram secretie vaginala

Frecventa izolarii speciilor Portaj obisnuit Portaj frecvent

Portaj exceptional

% %

Lactobacili (Flora Doderlein) >80 Bacili anaerobi (Bacteroides,

prevotella, Mobiluncus)

20

Streptococi negrupabili >60 Stafilococi coagulazo-negativi 20

Enterococi >30 S.aureus 10

Candida albicans 30 Mycoplasma hominis


44/55

Vaginite- vaginozeRecoltare secretie

3 tampoane fund de sac vaginal posteriorPrelucrare

Tampon 1- in 0,5 ml solutie salina isotona 370C

Examinare lama/lamela x100 x400

Trichomonas, levuri inmugurite, pseudofilamente

Raportul PNM/ celule epiteliale

Reactie inflamatorie

Intensa - Trichomonas DiscretaCandidoza

Absenta- vaginoza

Tampon 2Frotiu Gram


45/55

Interpretarea frotiu Gram pentru vaginoza bacteriana

Numar bacterii/camp microscopic imersie Nugent modificat

4+ = >303+ = 6 -12 Interpretare SCOR

2+ = 15 03 Flora normala

1+ =


46/55

Vaginite- vaginoze Tampon 3

Cultivare pentru Candida- Sabouraud cu cloramfenicol saumediu cromogen

La solicitare cultura pentru

N.gonorrhoeae

S.aureus- in sindromul socului toxic evidentierea toxineiELISA, reverse pasive latex agglutination

Streptococcus pyogenes

Streptococcus agalactiae

Listeria monocytogenes

Shigella spp.- fetite

Enterobacteriile nu se comunica- fac parte din flora normala

a vaginului

d


47/55

Caractere diagnostice pentru vaginite

si vaginoza

Boala sau conditie pH Observatii la ex.

preparat umed

Miros de

amina

Alte teste

Normal 4-4,5 Bacili lungi Absent

Atrofie >6 Absent

Candidoza 4-4,5 Pseudohife sau

levuri inmugurite

Absent Cultura pentru

levuri

Vaginoza

bacteriana

>4,5 Clue cells Prezent Coloratie Gram

Thricomoniaza 5-6 Paraziti flagelati Prezent in modobisnuit

CulturaTrichomonas

Testul Whiff= testul aminelor volatile

10% KOH

l


48/55

Vulva

Recoltare-durere, eritem, edem

Curatirea cu sol. 0.85% NaCl

Exsudat/ eritem cu tamponpentru culturi levuri

Vezicule

Ruptecolectare lichid cu tampon

Aspirat cu seriga cu ac 26-27gauge

Crustese indeparteaza

Tampon umezit sol. 0.85% NaCl

Examinare

MicroscopicaTrichomonas

Gram- reactie inflamatorie, bacterii

Cultivarepentru S.aureus, S.pyogenes ..


49/55

Streptococ grup B

Evidentiere la gravide s 35-37 gestatie Recoltare - tampon vaginal

Metoda de electie

Bulion LIM (Todd Hewitt)

colistin 10g/ml, ac nalidixic 25 g/ml

Bulion Trans Vag

Trecere pe geloza sange

Latex aglutinare Insamantare directa mediu Granada

20-60% dintre pozitivi

Necesita atm. anaeroba


50/55

Streptococ grup B

Dificultati

Inhibitia cresterii in prezenta EnterococcusLIM

2% nu produc hemoliza

3-4% nu produc pigment

Clasic rezultatul 48 ore

Metode moleculare AccuProbe

Cepheid Real time PCR


51/55

Glanda Bartholin

Recoltare

Decontaminarepovidone/iodine- alt preparat

Aspirare din canal

Frotiuin momentul recoltarii

Transport rapid in mediu Amies /Stuart Examinare

Microscopica- frotiu Gram

Cultivare pentru

N.gonorrhoeae Enterobacterii (E.coli, Proteus)

S.aureus Streptococi Haemophilus

Anaerobi Pasteurella bettyae

Teste pentru Chlamydia trachomatis, Ureaplasma

C i it


52/55

Cervicite Recoltare scurgere mucopurulenta

Se indeparteaza secretiaexocolcomprese sterile Se introduc tampoanele(3) in endocol 1-2 cm

Tampon 1- frotiu Gram

Tampon 2 -cultivare N.gonorrhoeae Tampon 3C.trachomatis-Frotiu Giemsa

Alte teste Imunofluorescenta

ELISA

Cultivare

Metode moleculare


53/55

Endometrite

Recoltare transvaginala prin aspirare

Transport in conditii de anaerobioza

Examinare

Microscopica- Frotiu Gram Cultivare bacterii aerobe si anaerobe

Agenti etiologici

Actinomycetes Bacteroides spp C. trachomatisEnterococcus spp. E.coli G.vaginalis

H.influenzae Klebsiella L.monocytogenes

Prevotella S.agalactiae S.pyogenes

Isenberg HD- Clinical Microbiology Procedures Handbook


54/55

Salpingite Recoltare

Aspirat si probe biopsice prin laparascopie

Examinare

Microscopica- Frotiu Gram

Cultivarebacterii aerobe / anaerobe

Agenti etiologici

Actinomycetes Bacteroides spp C. trachomatis

Enterococcus spp. E.coli H.influenzaeN.gonorrhoeae Pasteurella Prevotella

S.aureus S.epidermidis S.agalactiae Streptococi

Sit tii ti l


55/55

Situatii particulare

Daca Proba a fost obtinuta invaziv

Cultura abundenta predominenta

Se identifica

Haemophilus spp

Bacilii Gram negativi enterici (exceptie enterobacteriile din vagin - Nu se raporteaza)

Pseudomonasspp. /alti Gram negativi nefermentativi

Pasteurella bettyaela nn.

Capnocytophaga spp. Campylobacter fetus

S. aureus S. pneumoniae N. meningitidis

G.vaginalis

Documents

infectii urinare genitale