Embed Size (px)
Citation preview
Slide 001
METODE KIMIA
TAHAP DASAR ORIENTASI
PEMERIKSAAN HBA1C METODE
IMMUNO TURBIDIMETRIPresentan : Tisha Patricia
Pembimbing : Dian Ariningrum, dr., M.Kes, Sp.PK,
PK 001
Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Klinik
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret
Surakarta
20161
TAHAP DASAR: ORIENTASINO
.
METODE JUDUL TANGGAL
PRESENTASI
PEMBIMBING
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Sekresi
Imuno
Serologi
Mikrobiologi
Sampling
Hematologi
Kimia-1
Analisis Cairan
Sinovial
Pemeriksaan
Toxoplasma gondii
Pada Toksoplasmosis
Serebral dengan
Metode
ELISA
Kultur Kuantitatif Ulkus
Kaki Diabetik
Preparasi Sampel:
Pipetasi
Aggregometry
Pemeriksaan HbA1c
Metode
Immunoturbidimetri
13 - 10 - 2015
27 - 11 - 2015
14 - 12 – 2015
30 – 12 - 2015
2 - 2 – 2016
21-4-2016
Yuwono Hadisuparto, dr., Sp. PK
Tonang Ardyanto, dr., Phd, Sp.PK
B. Rina Sidharta, dr., Sp.PK-K
Amiroh Kurniati, dr., M. Kes., Sp.PK
Amiroh Kurniati, dr., M. Kes., Sp.PK
Dian Ariningrum, dr., M. Kes, Sp. PK
2
Learning Objective
1. Menjelaskan metode pemeriksaan HbA1c
2. Menjelaskan prinsip pemeriksaan
turbidimetri dan immunoturbidimetri
3. Menjelaskan faktor pra-analitik, analitik
dan post analitik pemeriksaan HbA1c
metode immunoturbidimetri
Slide 002
3
BAB I PENDAHULUAN
439 juta 2030
30% tidak menyadaripenyakitnya
25% sudah menderita komplikasimikrovaskular
4
HbA1c
Skrining
Diagnosis
Monitoring
5
http://anthonycerami.org/site/hba1c/
6
8
Weykamp C, 2013. HbA1c: analytical and
clinical aspects,
www.annlabmed.org 9
Harefa E, 2010. Peran HbA1c dalam
skrining dan diagnosis diabetes melitus.
Informasi Laboratorium Klinik Prodia;3:1-3.
10
11
12
13
14
15
Prinsip turbidimetri
http://intranet.tdmu.edu.ua/data/kafedra/intern
al/pharma_2/classes_stud/en/pharm/prov_pha
rm/ptn/analytical%20chemistry/2%20course/1
9%20Optical%20methods%20of%20the%20an
alysis.htm
16
PEMERIKSAAN HBA1C
METODE
IMMUNOTURBIDIMETRI
BAB II
17
• Penentuan kuantitatif HbA1c dalam
sampel whole blood dengan antikoagulan
EDTA.
Tujuan
18
PRA ANALITIK
19
Prinsip Pemeriksaan
20
a. Automatic/semiautomatic biochemistry
analyzer
b. Haemolysis Reagent 1 mL
c. R1: 300 µl
d. R2: 100 µl
Alat dan Bahan
21
Komposisi reagen
a. Haemolysis
Reagent
– H2O
– Stabilizers
b. Reagen R1
– Latex 0,1%
– Glycine buffer, pH
3,0, 15 mmol/L
c. Reagen R2
– Goat anti-mouse IgG
polyclonal antibody 0,8mg/dl
– Mouse anti-human HbA1c
monoclonal antibody
0.05mg/ml
– Glycine buffer, pH 3.0,
60mmol/L
22
a.Pipet 20 µl dan 1 ml
b.Test tube
c.HbA1c calibrator set dan kontrol
Alat dan bahan yang dibutuhkan tetapi
tidak disediakan
23
• Pemeriksaan darah tanpa persiapan
khusus
• Sampel: darah vena dengan
antikoagulan EDTA
24
1 ml Hemolysis reagent + 20 µl whole blood diaduk
Tunggu 5’ lisis
Penundaan pemeriksaan: hemolisatdisimpan pada suhu 2-8oC, 10 hari
Preparasi Hemolisat
25
• Stabilitas reagen: pada suhu 2-
8oC
Setelah dibuka reagen stabil hingga
1 bulan
• Kalibrasi: 5 level kalibrasi
26
ANALITIK
27
Prosedur pemeriksaan
www.biowaydx.com/_pdf/Reagent/R032K11%20HbA1c.pdf28
http://pubs.rsc.org/services/images/RS
Cpubs.ePlatform.Service.FreeContent.I
mageService.svc/ImageService/Articlei
mage/2015/AY/c4ay02904f/c4ay02904f-
f2_hi-res.gif29
PASCA ANALITIK
30
Konsentrasi HbA1c disajikan langsung
dalam bentuk % HbA1c menggunakan ΔOD
untuk melihat kesesuaiannya pada kurva
kaliberasi.
Hasil
31
Non diabetes < 6%
Diabetes terkontrol HbA1c < 7%.
Setiap laboratorium diharapkan menetapkan
kisaran nilai HbA1c sendiri
Nilai yang diharapkan
32
• Hasil pemeriksaan mungkin tidak
inkonsisten pada pasien dengan
–adiksi terhadap opiate
–Alcoholism
–pasien yang menggunakan
aspirin dosis tinggi
Keterbatasan
33
• Linearity:
2%-16%
• Presisi
–Within Run: CV≤5%
–Run-to-run ≥5%
Karakteristik Performa
34
Interferensi
• Tidak ada interferensi terdeteksi untuk
kadar Bilirubin 0,5g/L (50mg/dL),
• asam askorbat 0,5g/L (50mg/dL),
• Trigliserida 20 g/L (2000 mg/dL),
• Hb Karbamasil (7,5 mmol/L), dan
• Hb asetilasi (5,0 mmol/L)
35
1. Prinsip pemeriksaan HbA1c metode
immunoturbidimetri: ikatan antibodi
dengan glukosa dan antara asam amino-
4 dengan 10 N-terminal rantai β.
Pemeriksaan tidak dipengaruhi oleh HbE,
HbD maupun carbamylated Hb.
BAB III
SIMPULAN
36
2. Pemeriksaan HbA1c metode
immunoturbidimetri sudah dapat
diotomatisasi, dapat dipakai untuk
laboratorium dengan jumlah sampel yang
lebih kecil karena diperiksa dengan
analiser untuk kimia yang lain.
37
DAFTAR PUSTAKA
ADA 2010. Diagnosis and classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Care, 2012; 35(supplement 1): S64-S71.
American Diabetes Association (ADA), 2009. Standards of Medical Care in Diabetes—. Diabetes Care; 32.
Anik Widijanti dan Resti Anggun Pertiwi, 2015. Perbandingan HbA1c Metode Immunoassay dan IE-HPLC pada Faal Ginjal Normal.
Medika. Tahun ke XLI, No. 5, 286–291
Anonim 1, Bioway Chemistry Reagent Series Glycated Hemoglobin (HbA1c) Detection Kit,
www.biowaydx.com/_pdf/Reagent/R032K11%20HbA1c.pdf
Anonim 2, Prime Evolution, Semi-automatic biochemistry analyzer / bench-top / with immunoturbidimetry dosing. http://www.
medicalexpo.com/prod/bpc-biosed/product-67898-436281.html
Anonim 3, 2013. Tina-quant® HbA1c Gen. 3 Turbidimetric inhibition immunoassay (TINIA) for the in vitro determination of hemoglobin
A1c in whole blood or hemolysate. http://www.cobas.com/content/dam/cobas_com/pdf/product/Tina-quant-HbA1c-Gen-3/Tina-
Quant%20HbA1c%20Fact%20Sheet.pdf
Anonim 4, 2014. Peran pemeriksaan HbA1c pada diabetes mellitus. http://www.abclab.co.id/?p=1209
Gallagher EJ, Roith D, Bloomgarden Z, 2009. Review of hemoglobin A1c in the management of diabetes. Journal of Diabetes; 1 : 9–17.
Gough S, Manley S, Stratton I, 2010. HbA1c in diabetes case studies using IFCC units. Wiley Blackwell; 2-61.
Harefa E, 2010. Peran HbA1c dalam skrining dan diagnosis diabetes melitus. Informasi Laboratorium Klinik Prodia;3:1-3.
Inzucchi SE, Bergenstal RM, Buse JB, et al, 2012. Management of Hyperglycemia in Type 2 Diabetes: A Patient-Centered Approach,
American Diabetic Association (ADA). Diabetes Care Journal ;10: 1- 4.
Khan MI, Weinstock RS, 2007, Carbohydrates. In Mc Pherson RA, Pincus MR, 21th eds. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by
Laboratory Methods. China: Saunders Elsivier, 185-199.
Little RR, Rohlfi ng CL, 2009. HbA1c standardization: Background, progress and current issues. Lab Med. 2009;40:368-73.
Monnier L, Collete C, 2009. Target for glycemic control concentrating on glucose. Diabetes Care 2009;32:199-203.
NGSP, 2004. IFCC Standardization of HbA1c, http://www.ngsp.org/ifccngsp.asp
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia (PERKENI), 2011. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus tipe 2 di Indonesia.,
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia, p:1-72.
Saudek CD, Derr RL, Kalyani RR. Assessing glycemia in diabetes using self-monitoring blood glucose and hemoglobin A1c. JAMA
2006;295:1688-97.
Sofronescu AG, Williams LM, Andrews DM, ZhuY. Unexpected Hemoglobin A1c Results. Clin Chem 2011;57(2):153-157.
Sri Rahayu Paputungan dan Harsinen Sanusi, 2014. Peranan Pemeriksaan Hemoglobin A1c pada Pengelolaan Diabetes Melitus. CDK-220/
vol. 41 no. 9: 650-655
WHO 2011. Use of Glycated Hemoglobin (HbA1c) in the Diagnosis of Diabetes Mellitus. 38
TERIMA
KASIH
39
