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Auditorio Ligia Aguirre de Sánchez
3° piso, Fundación Cardiovascular.
29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.
Centro de Medicina
Genómicade la FCV
PRIMER DÍA MUNDIAL
DE LAS LEUCODISTROFIASEN COLOMBIA
Isidro Arévalo Vargas M. Sc
Departamento de Ciencias Biológicas
Centro de Investigaciones en Bioquímica
Universidad de los Andes
Bogotá, Colombia 2
Las enfermedades de depósito lisosomal (EDL) pertenecen a un grupo
de errores innatos del metabolismo que se caracterizan por el bloqueo en
una ruta metabólica de una o varias enzimas lisosomales.
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.3
(Hayashi, Nakamura et al. 2011).
(Figura modificada el día 14 de mayo de 2012 de Pollitt et.al., 1997)
Figura tomada el dia 16 de mayo de de gauchercare.com
Acumulación
No producciónAusencia
Clasificación ruta
afectada:
Mucopolisacaridosis
Esfingolipidosis
Glucoproteinosis
(Martins 1999; Mehta, Beck et al. 2006)
Modo de herencia:
Autosómico dominante
Autosómico recesivo
Ligado al cromosoma X.
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Frecuencia
Muy baja
Gaucher 1:57000
Sialidosis 1:4.2 Mill.
• Distrofia muscular de Duchene
• Hunter (MPS II)/ Fabry• Gaucher
(Marsden and Levy 2010). (Staretz, et al., 2009).
Alta incidencia entre 1:5000-7000 recién
nacidos
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(Kohlschütter & Eichler, 2011)
DETERIORO
SUSTANCIA
BLANCA.
Enfermedades geneticas
Perdida de habilidades
adquiridas.
Devastación
neurologica.
Degeneración
mielina vainas
SNC.
Defecto: Sintesis
y mantenimiento
de mielina.
Progresivo deterioro
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Desmielinización
(Pérdida de mielina
formada previamente
normal tanto morfológica
como funcionalmente)
Dismielinización
(Anormalidades en la
formación y mantenimiento
de mielina).
Sustancia blanca del CNS.
CLASIFICACIÓN BIOQUIMICA
1) Metabolismo lipídico.
2) Proteínas
3) Ácidos orgánicos
4) Otras causas
(Tsuji, 2007; Kanekar and Gustas, 2011).
METABOLISMO LIPIDICO DESORDEN PROTEÍNA
MIELINA
DESORDENES ACIDOS
ORGANICOS
OTRAS
LEUCODISTROFIAS
Adrenoleucodistrofia Pelizaeus-Merzbacher
(Ligado-X).
Def. Proteolipido proteico.
Canavan (AR).
Def. Aspartoacilasa
Alexander.
Def. Proteína gliofibrilar
ácida (GFAP)
Krabbe Desvanecimiento de la
sustancia blanca.
Síndrome de Sjögren-
Larsson (AR).
Def. Lipoaldehído
deshidrogenasa
Arteriopatía cerebral
autosómica dominante
con infartos subcorticales
y leucoencefalopatía
Xantomatosis
cerebrotendinosa (AR).
Def. Esterol 27-hidroxilasa.
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(Tsuji, 2007.)
Alteración en la ruta de los esfingolípidos
en el metabolismo lisosomal.
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Enzima Arilsulfatasa A (ASA)
Cofactor Saposin B (SapB)
(Kolter and Sandhoff , 2006)
(Figura tomada de Huwiler, Kolter et al. 2000)
(Natowicz, Prence et al. 1996;
Cesani, Capotondo et al. 2009)
(Deconincka, Messaaoui et al. 2008).
Deficiencia
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Imagen tomada de internet el día 15 de mayo de 2012 de http://www.glycoforum.gr.jp/index.html
(Saravanan, Büssow et al. 2007).
(Baumann, Turpin et al. 2002; Colsch, Afonso et al.
2008; Faust, Kaye et al. 2010)
Sulfatidios.
DesmielinizaciónOligodendrocitos (SNC).
Células de Schwan (SNP).
Enzima ASA / Cofactor SapB.
Catalizan cerebrósido 3-sulfato (Sulfatidio).
Componente principal en la formación de la mielina
4%. (Riñón, epitelio ducto biliar).
(Gieselmann, 2008)
La desmielinización generalizada es lo que conlleva a presentar un deterioro en la
función neurológica y por último la muerte.
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(Tan, Fuller et al. 2010).
Tres etapas (infantil, juvenil y adulta)
Deterioro progresivo de
varias destrezas
adquiridas.
•Hipotonía
•Marcha inestable
•Retraso mental
(Wang, 2007)(Von Figura, Gieselmann et al. 2001)
Deterioro rendimiento:
laboral o escolar.
Trastornos emocionales,
comportamiento.
Síntomas psiquiátricos
Estado vegetativo en todas las fases de la
enfermedad(Kolter and Sandhoff 2006).
Cromatografía capa fina (CCF)
• Valoración de sulfatidios en la orina.
Actividad de ASA en
leucocitos.
• Colorimétrico.
• Fluorométrico.
Biología Molecular.
• Mutaciones.
• Pseudodeficiencias (PD-ASA).
Deficiencia Múltilple de Sulfatasas
• Fluorométrico.
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(Rafi, Coppola et al. 2003)
(Baum, Dodgson et al. 1959; Cordoba 1991)
(Shapira, Blitzer et al. 1989)
(Gieselmann, Polten et al. 1989; Qu, Miller
et al. 1997; Pedron, Gaspar et al. 1999)
(Artigalás, Roberto da Silva et al. 2009)
Limitaciones en cuanto al acceso de los pacientes a los procesos de diagnóstico.
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Estudios aislamientos leucocitarios.
Son muy difíciles de cumplir en algunas ciudades intermedias, lo que genera una
serie de inconvenientes que en un buen número de casos dejan las muestras
inservibles para procesos de análisis bioquímico.
Estandarizar.
Protocolo fluorométrico mas sensible.
Establecer y comparar valores.
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Resolución No. 008430 de 1993 de
la República de Colombia.
Consentimiento informado.
85 muestras de sangre total de
pacientes control (1-68 años).
(2009-2012) 85 muestras de
individuos TND (0.15-47 años).
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Pacientes remitidos. Daño
sustancia blanca.
Neuroimágen.
Muestras de orina.
Extracción sulfatidios –
Cromatografía (Rafi, Coppola et
al., 2003).
POSITIVO.
Muestra sangre total.
Aislamiento leucocitos
(Shapira et al., 1989)
Prueba FL (Shapira et al., 1989).
4-metilumberilferona sulfato (4-MUS)
Análisis estadístico.
SPSS
Prueba COL (Baum, et al 1954 y Córdoba, 1995)
p-nitrocatecol sulfato (p-NCS)
Prueba β-GAL (Shapira et al., 1989.)
4-metilumbeliferona-β-D-galactosidasa
Prueba FL ASA B GSSPF
Valoración proteína. FL-
BCA
NEGATIVO.
Otra enfermedad neurodegenerativa.
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CCF. Prueba sulfatidios diagnostico
diferencial de la LM.
Cofactor SapB.
PD-ASA.
Método de tamizaje.
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4 Pacientes detectados ASA.
4 Pacientes confirmados LM.
2 Pacientes confirmados GM1. 7.05 % alto riesgo.
Es importante concluir que ante casos en los cuales se tengan la prueba FL
positiva de ASA y la presencia de sulfatidios es necesario que se haga al menos
una prueba de una sulfatasa diferente, con el fin de poder descartar una posible
DMS.
Método tamizaje GSSPF. Ventajas sobre los leucocitos con respecto al manejo,
transporte y mantenimiento de la muestra.
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Es importante que nosotros como laboratorio de referencia a nivel nacional e
internacional tengamos las técnicas apropiadas para la detección temprana y de
esta manera que el paciente y la familia tengan la oportunidad de recibir
tratamiento oportuno y mejorar su calidad de vida, que en últimas es nuestro
principal objetivo.
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Dedicación especial a todas las familias y
pacientes que fueron participes de este estudio.
Familia Zapata Moncada, Medellín.
Familia Henao García, Bogotá.
Centro de Medicina
Genómicade la FCV
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“No pretendamos que las cosas cambien, si siempre hacemos lo mismo.
La crisis es la mejor bendición que puede sucederle a personas y países, porque
la crisis trae progresos. La verdadera crisis es la crisis de la incompetencia.
El inconveniente de las personas y los países es la pereza para encontrar las
salidas y soluciones. Hablar de crisis es promoverla, y callar en la crisis es
exaltar el conformismo. En vez de esto, trabajemos duro. Acabemos de una vez
con la única crisis amenazadora, que es la tragedia de no querer luchar por
superarla”.
Albert Einstein
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