SKRIPSI
NIKEN RETNO PALUPI
UJI EFEKTIVITAS BENZALKONIUM KLORIDA
KONSENTRASI 0,001% DENGAN pH 8
(Terhadap Aktivitas Bakteri Staphylococcus aureus)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2016
ii
iii
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur atas rahmad dan hidayah Allah SWT sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi yang berjudul “EFEKTIFITAS BENZALKONIUM
KLORIDA KONSENTRASI 0,001% DALAM pH 8 (Terhadap Aktivitas
Bakteri Staphylococcus aureus)” untuk memenuhi salah satu persyaratan
akademik dalam menyelesaikan Program Sarjana Farmasi Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Dalam proses penyusunan skripsi ini, penulis tidak terlepas dari berbagai
pihak yang memberikan bantuan, bimbingan serta doa sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Untuk itu penulis menyampaikan rasa
terimakasih yang sebesar-besarnya kepada :
1) mama, papa, adik dan kaka yang telah memberikan semangat, nasehat, dukungan
moral dan materi secara langsung maupun tidak langsung, serta doa yang tulus
untuk kesuksesan saya.
2) Drs.sugiyarto selaku pembimbing I dan Ibu Arina Swastika M, S.Farm., Apt
selaku pembimbing II yang dengan ikhlas meluangkan waktu untuk
membimbing saya dengan penuh kesabaran sehingga skripsi ini dapat
diselesaikan dengan baik.
3) Bapak Drs. H. Achmad Inoni, Apt dan Ibu Dian Ermawati, S.Farm.,
M.Farm.,Apt selaku tim penguji yang telah memberikan saran, masukan dan
kritik yang membangun terhadap skripsi yang telah saya kerjakan.
4) Bapak Yoyok Bekti P, M.Kep., Sp. Kom, selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang.
5) Nailis Syifa’, S.Farm., M.Sc., Apt selaku ketua Program Studi Farmasi Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
6) Seluruh Dosen dan staf Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang yang telah mendidik dan mengajarkan
saya ilmu yang berharga selama saya mengikuti program sarjana.
7) Laboran Laboratorium Teknologi Sediaan Farmasi dan Laboratorium Biomedik:
mas ferdi, mas dani, mbak susi, mbak fat dan pak joko yang telah banyak
membantu saya.
v
8) Teman dekat pendengar setia: tika, luluk dan intan, yang telah banyak
memberikan semangat, dukungan, dan waktu untuk selalu menemani.
9) Pendengar ,pemberi semangat dan satu-satunya relawan membantu mencari
bahan skripsi terbaik yang pernah ada, Bare terimakasih untuk selalu ada.
10) Teman-teman seperjuangan skripsi Steril “Pengebut Semhas”:Nadia, Nada,
Nabila, Atira, Atika, Agung dan Yuda Terimakasih atas kerjasama, dan menjadi
teman skripsi yang menyenangkan
11) Hap-hap,Iwang dan Mas Aris terimakasih telah mengantarkan bimbingan setiap
saat.
12) Teman-teman Farmasi UMM angkatan 2012, terimakasih sudah menjadi bagian
dari perjalananku selama menempuh program sarjana ini.
13) Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah banyak
memberikan bantuan, dukungan, serta doa kepada saya dalam penyelesaian
skripsi ini.
Akhir kata semoga Allah SWT membalah kebaikan bapak, ibu, dan
saudara sekalian. Semoga skripsi yang saya buat ini dapat memberikan
sumbangan bagi perkembangan ilmu pengetahuan dan kita semua. Amin.
Terimakasih.
Malang, 19 April 2016
Niken Retno Palupi
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN
JUDUL ................................................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. ii
LEMBAR PENGUJIAN ..................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ......................................................................................... iv
RINGKASAN ...................................................................................................... vi
ABSTRAK ......................................................................................................... viii
ABSTRACT ......................................................................................................... ix
DAFTAR ISI ........................................................................................................ xi
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xv
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xviii
BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
1.1 LATAR BELAKANG ........................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .................................................................................. 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 4
2.1 Benzalkonium klorida ............................................................................ 4
2.1.1 Sturktur Kimia ............................................................................. 4
2.1.2 Kategori Fungsional .................................................................... 4
2.1.3 Aplikasi Pada Formulasi Farmasi ................................................ 4
2.1.4 Deskripsi ...................................................................................... 5
2.1.5 Aktifitas Mikroba ........................................................................ 5
2.1.6 Inkontabilitas ............................................................................... 6
2.1.7 Keamanan .................................................................................... 6
2.1.8 Mekanisme Pengawet .................................................................. 7
2.2 Tinjauan Bakteri Staphylococcus .......................................................... 8
2.2.1 Klasifikasi .................................................................................... 8
2.2.2 Morfologi dan Identifikasi ........................................................... 8
2.2.3. Epidemiologi Staphylococcus aureus ......................................... 9
2.3. Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme .... 10
vii
2.4. Tinjauan pengaruh pH dengan pengawet ........................................... 11
2.5. Tinjauan pengaruh pH dengan bakteri ................................................ 12
2.6.Tinjauan pustaka tentang sterilitas....................................................... 13
2.6.1 Definisi Sterilitas ....................................................................... 13
2.6.2 Tujuan sterisasi .......................................................................... 13
2.6.3 Metode Sterilisasi ...................................................................... 13
2.7 Tinjauan Uji Sterilitas .......................................................................... 16
2.7.1 Metode Uji Sterilitas .................................................................. 16
2.7.2 Media Uji Sterilitas .................................................................... 17
2.8. Prosedur Umum .................................................................................. 20
2.9 Kontrol Uji Sterilitas............................................................................ 21
2.10 Penafsiram Hasil Uji Sterilitas........................................................... 23
2.11 Tinjauan tentang Teknik Aseptis ....................................................... 23
2.12.1Pengertian Dapar ...................................................................... 26
2.13 Tinjauan Dapar Borat ........................................................................ 27
2.13.1 Pengertian ................................................................................ 27
2.14 Tinjauan Uji Efektifitas Pengawet ..................................................... 28
2.14.1 Kategori Produk ....................................................................... 28
2.14.2 Uji Organisme ......................................................................... 28
2.14.3 Media ....................................................................................... 29
2.14.4 Persiapan Inokulum ................................................................. 29
2.14.5 Prosedur ................................................................................... 29
3.1. Uraian Kerangka Konseptual .............................................................. 33
BAB IV METODE PENELITIAN ..................................................................... 38
4.1. Desain Penelitian ................................................................................. 38
4.2 Lokasi Penelitian .................................................................................. 38
4.3. Waktu Penelitian ................................................................................. 38
4.4 Sterilisasi Ruangan ............................................................................... 38
4.5. Sterilisasi Alat ..................................................................................... 38
4.5.1 Bahan dan Alat ........................................................................... 38
4.6. Preparasi Sediaan ................................................................................ 40
4.6.1 Sediaan ........................................................................................ 40
viii
4.6.2 Langkah Kerja ............................................................................. 40
4.7. Uji Inaktivasi Pengawet ...................................................................... 41
4.7.1. Penyiapan Unit Laminar Air Flow Cabinat ............................... 41
4.7.2 Kontrol Lingkungan diluar dan di dalam LAFC ......................... 42
4.7.3 Kontrol Lingkungan suhu dan Kelembapan di luar LAFC ........ 43
4.7.4 Penyiapan Media ........................................................................ 43
4.7.5Uji Sterilitas Media(Kontrol Negatif) .......................................... 43
4.7.6 Uji Fertilitas Media (Kontrol Positif) .......................................... 44
4.8 Inaktivasi Pengawet ............................................................................. 44
4.8.1 Pengenceran Sampel ................................................................... 44
4.8.2 Inokulasi Sampel ......................................................................... 45
4.9 Uji Sterilitas ......................................................................................... 46
4.10 Uji Efektifitas ..................................................................................... 46
4.10.1 Penyiapan Unit Laminar Air Flow Cabinet untuk Uji
Efektifitas ................................................................................. 46
4.10.2 Kontrol Lingkungan diluar dan di dalam LAFC ....................... 47
4.10.3 Penyiapan Media ....................................................................... 47
4.10.4 Pembuatan Suspensi Mikroba Uji ............................................. 47
4.10.5 Tahapan Kerja ........................................................................... 48
4.10.6 Penanaman Sampel ................................................................... 48
4.10.7. Perhitungan Jumlah Mikroba ................................................... 49
4.10.8. Pengamatan dan Penafsiran Sampel Uji .................................. 49
BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 51
5.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan pada Laminar Air Flow Cabinet(LAFC)
............................................................................................................... 51
5.1.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar LAFC
sebelum dan selamat Pembuatan Sediaan Benzalkonium
Klorida dengan pH 8 ................................................................... 53
5.1.2.Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar LAFC
Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet ............................ 53
5.1.3.Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar LAFC
sebelum dan selama Pengujian Sterilitas Sediaan ...................... 55
ix
5.2 Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino .................. 56
5.3 Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino .................. 57
5.4 Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Mengunakan Media
Tioglikolat Cair dan Kasamino ............................................................ 57
5.5.Hasil Uji Sterilitas Sediaan Pengawet Benzalkonium Klorida dengan
pH 8 dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino
.............................................................................................................. 58
5.6.Hasil Uji Efektivitas Benzalkonium Klorida Konsentrasi 0,001%
Sebagai Pengawet Sediaan dengan pH 8 Terhadap Aktivitas
Bakteri Staphylococcus aureus ............................................................. 59
5.6.1 Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet.................. 60
5.6.2 Jumlah Awal Rata-Rata Mikroba Uji dalam cfu per ml untuk
Uji Efektivitas Pengawet ............................................................. 60
5.6.3 Jumlah Mikroba dalam cfu/ ml Pada Uji Efektivitas Pengawet
................................................................................................... 61
BAB VI PEMBAHASAN.............................................................. .................... 64
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 67
7.1 Kesimpulan .......................................................................................... 69
7.2 Saran... .................................................................................................. 69
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 70
x
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
II.1. MIC mikroorganisme ................................................................................... 5
II.1.MIC mikroorganisme .................................................................................... 6
II.2 Jumlah Pengambilan untuk Bahan Cair ...................................................... 21
II.3.Klasifikasi atau Grade Ruangan Steril ........................................................ 24
II.4 Batas Mikroba yang Disarankan untuk Pemantauan Area Bersih
Selama Kegiatan Berlangsung ..................................................................... 26
II.5 Perbandingan Jumlah yang Digunakan untuk Membuat Larutan
Dapar Borat dengan pH Tertentu ................................................................. 27
II.6. Kondisi Inokulum dalam Kultur .................................................................. 30
II.7 Kriteria Untuk Tes Mikroorganisme ............................................................ 31
IV.8 Penyajian Hasil ........................................................................................... 51
V.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC)
Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan Benzalkonium klorida dengan
pH 8 .............................................................................................................. 52
V.2 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC)
Sebelum dan Selama Pengerjaan Uji Inaktivasi Bakteri ............................. 54
V.3 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC)
Sebelum dan Selama Uji Sterilitas Sediaan Benzalkonium klorida
dengan pH 8 ................................................................................................. 55
V. 4 Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Positif)
................................................................................................................... 56
V.5 Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Negatif)
................................................................................................................... 57
V.6 Hasil Uji Inaktivasi Pengawet Benzalkonium Klorida dengan
Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino ................................. 58
V.7 Hasil Uji Sterilitas Sterilitas Sediaan pengawet Benzalkonium chloride
dengan pH 8 dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino
...................................................................................................................... 59
V.8 Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet .................................. 60
xi
V.9 Jumlah Awal Rata-rata Mikroba Uji dalam cfu (Colony Forming Units)
per ml untuk Uji Efektivitas Pengawet ....................................................... 61
V.10 Jumlah Mikroba dalam cfu (Colony Forming Units) per ml Pada
Uji Efektivitas Pengawet` ............................................................................ 61
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
3.1 Skema Kerangka Konseptual ..................................................................... 38
4.1 Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Sebelum
Pengujian Sterilitas................................. ................................................... 42
4.2 Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Saat
Pengujian Sterilitas Berlangsung ............................................................... 43
4.3 Kerangka Operasional ................................................................................ 50
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1.Daftar Riwayat Hidup .................................................................................... 72
2.Surat Anti-Plagiasi ........................................................................................ 73
3. Perhitungan Bahan Sediaan Benzalkonium Klorida ..................................... 75
4. Sertifikasi Bahan ........................................................................................... 76
5.Sertifikasi Pengawet ..................................................................................... .78
6. Sertifikasi Bakteri ......................................................................................... 79
7. Foto Alat dan Bahan .................................................................................... .82
8.Skema Tahapan Pembuatan Sediaan ............................................................. 85
9. Foto Hasil Kontrol Lingkungan Pada Proses Pembuatan Sediaan
Benzalkonium Klorida... ............................................................................... 86
10. Skema Kerja Uji Inaktivasi Pengawet Benzalkonium Klorida ................. ..88
11. Foto Hasil Kontrol Lingkungan Pada Uji Inaktivasi Pengawet .................. 89
12. Foto Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dan Uji Fertilitas Serta Uji
Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino .......................................... .90
13.Skema Kerja Uji Sterilitas Sediaan .............................................................. 92
14. Foto Hasil Kontrol Lingkungan Pada Uji Sterilitas ................................... .93
15. Foto Hasil Uji Sterilitas Sediaan Benzalkonium Klorida ........................... 95
16.Skema Uji Efektifitas Pengawet .................................................................. 96
17. Foto Hasil Uji Efektifitas Benzalkonium Klorida 0,001% ......................... 97
18. Perhitungan Persentase dan Logaritma Penurunan Jumlah
Bakteri ........................................................................................................ .10
xv
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, Goeswin. 2013. Seri Farmasi Industri4: Sediaan Farmasi Steril.
Bandung : ITB.
Agoes, Goeswin. 2009. Pengembangan Sediaan Farmasi. Edisi Revisi dan
Perluasan. Bandung: Penerbit ITB
Ansel, Howard C., 2008. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Keempat.
Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press).
Anonim. 2007. United State Pharmacopoeia, Edisi 30. Rockville : USP
Convention, Inc.
Anderson, Kelsi L, dkk. 2010. Characterizing the Effects of Inorganic Acidand
Alkaline Shock on the Staphylococcus aureus Transcriptome and
Messenger RNA Turnover.National Inatitutes of Health
Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2006. Pedoman Cara Pembuatan Obat
Yang Baik. Jakarta : Badan POM.
Campos, A Miguel, dkk. 2004. Capsule Polysaccharide Mediates Bacterial
Resistance to Antimicrobial Peptide. Infection and Immunity.
Cooper, J. W., 1975, Dispensing for Pharmaceutical Students, twelfth Ed.10,
pitman medical Publishing co. ltd, London
Denyer dan Steward. 1998. Mechanisms of action of disinfectants. International
biodeterioration and biodegradation 41 261-268
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi
keempat. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2009. Farmakope Indonesia. Edisi
kelima. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Elder, David. Crowlwy, Patrick. 2012. Antimicrobial Preservatives Part Two:
Choosing a Preservative. The review of America Pharmaceutical
Business and Technology
Fischetti, A.V., R.P. Novick, J.J. Ferreti, D.A. Portnoy, and J.I. Rood. 2000.
Gram Positif. Washington DC: ASM Press. Page 315
Jawetz, Melnick, & Adelberg’s. 2001. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi dua
puluh dua. Jakarta : Penerbit Salemba Medika
Kumar, Surinder. 2012. Textbook of Microbiology. New Delhi : Jaypee Brothers
Medical Publishers
xv
Lukas, Stefanus. 2006. Formulasi Steril. Penerbit Andi. Yogyakarta. Parrot
Mcdonnell Gerald, Rusell denyer. 1999. Antiseptics and Disinfectants: Activity,
Action, and Resistance.Clinical Microbiology p. 147–179
Pratiwi Syivia T., 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Erlangga
Prescott, L.M., J.P. Harley, and D.A. Klein. 2003. Microbiology. 5 ed. New York
: Mc Graw Hill.
Ramussen, Kaufman Paul, Kiland Julie. 2014. Benzalkonium chloride and
glukoma. Journal of ocular pharmacology and theraupeutic Vol
30.number 2 and 3
Rowe, C Raymond, dkk. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Edisi
keenam. London : Pharmacetical Press.
Siswandono, Soekardjo Bambang. 2008. Kimia Medisinal Edisi Pertama’.
Surabaya : Pusat Penerbit dan Percetakan Unair
Suhardiyanti. 2015. Efektivitas Benzalkonium klorida konsentrasi 0,001%
sebagai pengawet sediaan tetes mata zink sulfat(terhadap bakteri
Staphylococcus aureus). Skripsi : Malang Fakultas Ilmu kesehatan.
Universitas muhammadiyah malang
Stefanus Lukas. 2006. Formulasi Steril. Yogyakarta : Penerbit ANDI
Voigt, R. 1995. Buku Ajar Teknologi Farmasi. Edisi kelima. Yogyakarta :
Gadjah Mada University Press.
Recommended
