31
https://megapertiwi019.wor dpress.co m/  Ta nggal : 03 Desember 2014 Wa ktu : 10:00 12:40 WIB Dosen: HermawanSeftiono SSi! "!Si #$%&'$( %'$)TI)*" BI&)I"I$ +%,(,T$%$( )$D$' -IT . ",T&D, I&D&",T'I// )elomok 1 : "ega %ertiwi 131000 'iska Helana $lma 'a5mawati I66a5 "ubaroka5 I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$( 8$)*# T $S BI& I(D*ST'I *(I-,'SIT$S T'I#&7I 2014 B$B I %,(D$H*#*$( 1!1 #atar Belakang -i tamin meruakan suatu molekul organik ang ibutu5kan ole5 tubu5 alam 9u mla5 keil  berfungsi sebagai koen6im aa reaksi metabolisme! -i tamin umumna tiak aat ibuat ole5 tubu5 manusia karena itu ;itamin 5arus ierole5 ari ba5an angan ang ikonsumsi! -itamin . aala5 ;itamin ang tergolong larut alam air an mua5 mengalami oksiasi! -itamin . aat terbentuk sebagai asam #<askorbat an asam #<e5iroaskorbat keuana memunai keaktifan sebagai ;itamin .! $sam askorbat sangat mua5 teroksiasi seara re;ersible men9ai asam #<e5iroaskorbat! $sam #<e5iroaskorbat seara kimia sangat labil an mengalami

Vit c Iodometri

Embed Size (px)

Citation preview

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 1/31

https://megapertiwi019.wordpress.com/

  Tanggal : 03 Desember 2014Waktu : 10:00 – 12:40 WIB

Dosen: HermawanSeftiono SSi! "!Si

#$%&'$( %'$)TI)*"

BI&)I"I$+%,(,T$%$( )$D$' -IT . ",T&D, I&D&",T'I//

)elomok 1 :

"ega %ertiwi 131000'iska Helana

$lma 'a5mawati

I66a5 "ubaroka5

I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$(

8$)*#T$S BI& I(D*ST'I*(I-,'SIT$S T'I#&7I

2014

B$B I

%,(D$H*#*$(

1!1 #atar Belakang-itamin meruakan suatu molekul organik ang ibutu5kan ole5 tubu5 alam 9umla5 keil

 berfungsi sebagai koen6im aa reaksi metabolisme! -itamin umumna tiak aat ibuat ole5

tubu5 manusia karena itu ;itamin 5arus ierole5 ari ba5an angan ang ikonsumsi! -itamin. aala5 ;itamin ang tergolong larut alam air an mua5 mengalami oksiasi! -itamin .

aat terbentuk sebagai asam #<askorbat an asam #<e5iroaskorbat keuana memunai

keaktifan sebagai ;itamin .! $sam askorbat sangat mua5 teroksiasi seara re;ersible men9aiasam #<e5iroaskorbat! $sam #<e5iroaskorbat seara kimia sangat labil an mengalami

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 2/31

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 3/31

%embuatan an Stanarisasi (a2S2&3 01 (

%embuatan (a2S2&3 01 (

Ditimbang se9umla5 kristal 24C2 g (a2S2&3!>H2& kemuian imasukan kealam beaker glass1000 ml ilarutkan engan 1000 ml a?uaest itamba5kan 3 tetes 5loroformE01 g (a2.&3

agar larutan (a2.&3 awet an tiak mua5 rusak an iauk larutan 5ingga 5omogen

Stanarisasi (a2S2&3 01 (Ditimbang se9umla5 0> g kristal )2.r2& kemuian imasukan ke alam labu ukur 100 ml

larutkan engan a?uaest 5ingga tana batas lalu i5omogenkan an iberi label larutan

)2.r2& 01 (! Diiet 10 ml larutan )2.r2& 01 ( an imasukan ke alam enlenmeer2>0 ml! Ditamba5kan 3 ml larutan )I 10F an 10 ml larutan H2S&4 1 ( itutu erlenmeer

engan alumunium foil iauk 5omogen an iiamkan selama 3 menit itemat gela!

Buret ibilas engan a?uaest lalu larutkan (a2S2&3 01 ( i5ilangkan gelembung uara aa

 buret kemuian iisi buret engan larutan (a2S2&3 01 ( 5ingga tana 0! #arutan samelititrasi engan larutan (a2S2&3 01 ( 5ingga warna kuning mua! Ditamba5kan 3 tetes

inikator kan9i @ amlum A 1F terbentuk warna biru gela! Dititrasi lagi engan larutan

 (a2S2&3 01 ( 5ingga warna biru gela beruba5 men9ai 5i9au terang! Diatat ;olume larutan

 (a2S2&3 01 ( ang terakai engu9ian ilakukan ulo atau 2 kali engu9ian!'umus:

 ( (a2S2&3 @mg )2.r2& AE-bstf

)et:- -olume enitar 

8 8aktorengeneran @100 ml E10 mlA

Bst Bobotsetara @ekui;alenA )2.r2& 4G032 gEmol

2!3 $lat an ba5an$lat ang igunakan alam raktikum enetaan kaar ;itamin aala5 buret >0 ml 1 bua5

 iet ;olume 10 ml an 2> ml 1 bua5 iet ukur 10 ml 1 bua5 beaker glass 100 mlseatulaerlenmer 2>0 ml 4 bua5 statif buret 1 bua5 timbangan analitik an labu ukur 100 ml!Seangkan ba5an ang igunakan alam raktikum enetaan kaar ;itamin aala5 a?uaest

 bua5 9eruk H2S&4 1 ( aluminium foil (a2S2&3 01 ( kristal (a2S2&3!>H2& kristal

 (a2.&3 kristal )2.r2& an larutan ioine 01 (!

2!4 Waktu an Temat%raktikum ini ilaksanakan aa 5ari 'abu tanggal 03 Desember 2014! %aa ukul 10!00 –

12!40 WIB! Tematna i #aboratorium Biokimia lt!4 *ni;ersitas Trilogi!

B$B III

H$SI# D$( %,"B$H$S$(

3!1 Hasil engamatan

Berat samel 1 : 2>0401 gram 2>0401 mg

Berat samel 2 : 2>12CC gram 2>12CC mgStanarisasi (a2S2&3 01 (

Berat kristal )2.r2& : 04G2C gram 4G2C mg

 (o Data )elomok -olume

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 4/31

)2.r2& 01 ( -olume titrasi (a2S2&3 01 (

1 I 10 ml 1020 ml

2 II 10 ml 1020 ml3 III 10 ml 1100 ml

'ata rata ;olume titrasi (a2S2&3 01 ( 104C ml

"etoe Tiak #angsung @IoometriA

Samel Berat @grA -olum TioSulfat 0!1 ( @mlAI II I II Blanko

Bua5 =eruk 2>!0401 2>!12CC 23!>0 23! 2>!

=us =eruk 2>!11 2>!0C>3 2> 24!C 2!G-itamin . Bubuk 0!10C3 0!122 ! 11! 2>!>

3!2 %er5itungan

 (ormalitas (a2S2&3

 ( (a2S2&3 @mg )2.r2& AE-bstf

 ( (a2S2&3 @4G2C mgAE@104Cml4G032@100E10AA00G>G (

%enetaan )aar -itamin . aa samel bua5 9eruk 

Samel 1 :

)aar -it .@@-b<-A @(E01A CC0AE@mg samelA 100Fa F)aar -it .@@2><23>A @00G>GE01A CC0AE@2>0401 mg A 100F0042 F

Samel 2 :

)aar -it .@@2><23A @00G>GE01A CC0AE@2>12CC mg A 100F002 F

%enetaan )aar -itamin . aa samel 9us 9eruk 

Samel 1F -itamin . @@-b<-A (E0!1 C!C0AE@mg samelA 100F

@@2>!<23!>A 0!0G0E0!1 C!C0AE2>1!1 100F 0!03GF

Samel 2

F -itamin . @@-b<-A (E0!1 C!C0AE@mg samelA 100F

@@2>!<23!>A 0!0G0E0!1 C!C0AE2>0C>!3 100F 0!041F

%enetaan )aar -itamin . aa samel -itamin .bubuk 

Samel 1F -itamin . @@-b<-A (E0!1 C!C0AE@mg samelA 100F @@2>!<23!>A 0!0G0E0!1 C!C0AE10C!3 100F

1!1F

Samel 2F -itamin . @@-b<-A (E0!1 C!C0AE@mg samelA 100F

@@2>!<23!>A 0!0G0E0!1 C!C0AE122! 100F

1>!1F

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 5/31

3!3 %emba5asan

-itamin . meruakan sala5 satu ;itamin ang ierlukan ole5 tubu5 an berfungsi untuk

meningkatkan sistem imunitas tubu5! Bila alam tubu5 kebutu5an ;itamin an mineralmenukui maka segala 9enis enakit aat iega5! "engkonsumsi ;itamin . ang 9uga

 berfungsi sebagai antioksian terbukti aat menangkal ;irus<;irus seerti ;irus flu se5ingga

 bila kita uku memenu5i kebutu5an ini maka kita akan lebi5 9arang mengalami flu!-itamin ini mua5 larut alam air se5ingga bila ;itamin ang ikonsumsi melebi5i ang

ibutu5kan kelebi5an tersebut akan ibuang alam urine! )arena tiak isiman alam tubu5

;itamin . sebaikna ikonsumsi setia 5ari! Dosis ang rata<rata ibutu5kan bagi orang ewasaaala5 0<G0 mgE5ari! Tai bisa 9uga lebi5 tergantung konisi tubu5 an aa ta5an masing<

masing orang ang berbea<bea! Batas maksimum ang ii6inkan untuk mengkonsumsi ;itamin

. aala5 1000 mgE5ari!

)ekurangan ;itamin ini aat menebabkan gusi berara5 sariawan neri otot atau gangguansaraf! )ekurangan lebi5 lan9ut mengakibatkan anemia sering mengalami infeksi an kulit

kasar! Sementara kelebi5an ;itamin . aat menebabkan iare! Bila kelebi5an ;itamin . akibat

 enggunaan sulemen alam waktu ang uku lama aat mengakibatkan batu gin9al

seangkan bila kelebi5an ;itamin . ang berasal ari bua5<bua5an umumna tiakmenimbulkan efek saming!

"akanan ang menganung ;itamin . umumna aala5 bua5<bua5an an sauran! Bua5 angmenganung ;itamin . tiak selalu berwarna kuning misalna aa 9ambu bi9i ang meruakan

 bua5 engan kanungan ;itamin . aling tinggi ang aat kita konsumsi! Ba5kan aa

 beberaa bua5 kulitna menganung ;itamin . lebi5 tinggi ariaa bua5na! "isalna aakulit bua5 ael an 9eruk walauun tiak semua kulit bua5 bisa imakan!)anungan ;itamin .

 aa bua5 9eruk aala5 >0 mgE100 gr 

%raktikum analisa kuantitatif ;itamin . alam samle ilakukan engan menggunakan metoe

titrasi ioometri @titrasi tiak langsungA! %enentuan ini ilakukan engan menggunakan larutan (a2S2&3 01 ( ang tela5 istanarisasi sebagai titrant an larutan I2 sebagai titrat!

Samle ang iergunakan saat raktikum aala5 bua5 9eruk ang banak i9ual i asaran!

Sua5 banak iketa5ui ba5wa bua5 9eruk menganung -itamin . akan tetai belum iketa5uikaarna @*ntuk itu ilakukan enetaan kaar ;itamin iniA!

-itamin . atau asam askorbat memunai berat molekul 113 engan rumus molekul

.HC&! Dalam bentuk )ristal tiak berwarna -itamin . memiliki titik air 1G0<1G2o. bersifat larut alam air an seikit larut alam aseton atau alko5ol ang memunai berat

molekul rena5! $kan tetai ;itamin . sukar larut alam elarut organik ang aa umumna

aat melarutkan lemak!

Hal ang ertama kali ilakukan alam analisa kuantitatif ;itamin . aala5 stanarisasi larutan (a2S2&3 01 ( roses ini ilakukan engan menggunakan larutan I2 ! Berasarkan 5asil

 raktikum an er5itungan iketa5ui ba5wa konsentrasi normalitas ang tela5 istanarisasi

larutan (a2S2&3 01 ( aala5 00G>G (!Titrasi ioometri ilakukan engan menggunakan kan9i @amlumA sebagai inikator! Seerti ang

sua5 iketa5ui ba5wa rinsi ari titrasi ioometri aala5 reuksi analat ole5I2 men9ai I<!

%enentuan kaar ;itamin . engan metoe titarsi ioometri ini iasarkan aa rinsitereuksina analat ole5 I2 men9ai ion I<!

$ 'e I2 $ oks I<

Io meruakan oksiator ang tiak terlalu kuat se5ingga 5ana 6at<6at ang meruakan

reuktor ang uku kuat ang aat ititrasi! Se5ingga eneraanna tiak terlalu luas sala5

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 6/31

satu eneraan titrasi engan metoe ioometri aala5 aa enentuan bilangan io minak an

lemak 9uga ;itamin .!

%roses engu9ian untuk bua5 9eruk engan 5ana mengambil sarina an tiak ilakukan engeneran untuk samel tersebut! Sari bua5 9eruk ang iaat ari 5asil emerasan langsung

ibagi men9ai 2 @alam erlenmeerA engan berat samel masing<masing kurang lebi5 2> gram!

%engu9ian samel ilakukan sebanak ua kali @uloA! Titrasi blanko ilakukan 1 kali @simloAan stanarisasi (a2S2&3 01 ( ilakukan 3 kali @triloA!

%roses titrasi ilakukan samai larutan alam erlenmeer beruba5 warna men9ai biru warna

 biru ang i5asilkan meruakan io<amilum ang menanakan ba5wa roses titrasi tela5menaai titik ak5ir inikator ang iergunakan alam analisa ;itamin . engan metoe

ioometri aala5 larutan amilum @inikator kan9iA!

Dari 5asil titrasi tersebut maka aat isimulkan ba5wa stanarisasi (a2S2&3 iaatkan

normalitas 00G>G ( an 5asil titrasi ari samel bua59erukaala5samel1 sebanak 2>0401gram engan ;olume titrasi 23>0 ml iaatka kaar ;itamin . sari 9eruk aitu 0042F! %aa

samel ke 2 sebanak 2>12CC gram engan ;olume titrasi 230 ml iaat kaar ;itamin . sari

 9eruk aitu 002 F!Seangkanaasamel 9us 9erukiaatkan5asilsamel 1 aitu 0!03G F

anaasamel 2 0!041F! Dan ang ketigaaa -itamin . bubukiaatkan5asilsamel 1 aitu11F anaasamel 2 aitu 1>!1F!

Dari 5asiliataskanungan ;itamin aabua59erukan 9us 9erukkanungannatiak9au5berbeaatausama! Seangkankanungan ;itamin tertinggiaaaa

;itamin bubuk! Hal iniikarenakan ;itamin bubukmurnimenganung ;itamin

an5anaseikitba5antamba5an lain tiakseertibua59erukan 9us 9eruk ang teraatkanunganlain selain ;itamin seerti sari bua5 karbo5iratan lain lain

B$B I-

SI"%*#$(

%engu9ian kaar ;itamin . alam samle ilakukan engan menggunakan metoe ioometriaitu oksiasi analat ole5 I2 se5ingga I< tereuksi men9ai ion ioia! %engu9ian ilakukan 2 kali@uloA aamasing<masingsamel!

Berasarkan 5asil er5itungan maka aat iketa5ui ba5wa aa 1 bua5 9eruk engan massa

2>0401 gram an 2>12CC 5asil emerasan ierole5 ;olume titrasi sari 9eruk aitu 23>0 ml an230 ml iaatkan kaar ;itamin . ang terkanung aitu 0042 F an 02 F! Dan aa

 9us 9erukmenganungkaar ;itamin sebesar003GF an 0041F! Seangkanaabubuk

;itamin menganungkaar ;itamin sebesar 11F an 1>1F!Dari 5asiliataskanungan ;itamin aabua59erukan 9us

 9erukkanungannatiak9au5berbeaatausama! Seangkankanungan ;itamin tertinggiaaaa

;itamin bubuk! Hal iniikarenakan ;itamin bubukmurnimenganung ;itamin

an5anaseikitba5antamba5an lain tiakseertibua59erukan 9us 9eruk ang teraatkanunganlain selain ;itamin seerti sari bua5 karbo5iratan lain lain

D$8T$' %*ST$)$

'i;ai H!1GG> + $sas %emeriksaan )imia +*ni;ersitas Inonesia %ress : 9akarta

Wunas=!Sai S!1GC +$nalisa )imia 8armasi )uantitatif *(H$S "akasar 122<123*nerwoo$#!Da'!$!1GG3 +$nalisa )imia )uantitatif ,isi - $5li Ba5asa :

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 7/31

'!Soeonro ,rlangga Surabaa302<304

'ot5=!Blas5ke7!1GCC +$nalisa 8armasi *7" %ressJogakarta21<2G

Dir9en %&"1GG + 8armakoe Inosesia,isi III Deartemen )ese5atan 'I! =akarta1431>C>C14

Dir9en %&" 1GG4 +8armakoe Inonesia ,isi I- Deartemen )ese5atan 'I =akarta!

Des11

Laporan Biokimia Enzim

  Tanggal : 2 (o;ember 2014

  Waktu : 10:00 – 12:40 WIB

  Dosen: Hermawan Seftiono SSi! "!Si#$%&'$( %'$)TI)*"

BI&)I"I$

+ID,(TI8I)$SI ,(KI" %$%$I( B'&",#I( D$( %&#I8,(&# &)SID$S,

)elomok 1 :

"ega %ertiwi 131000

'iska Helana$lma 'a5mawati

I66a5 "ubaroka5

 I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$(

8$)*#T$S BI& I(D*ST'I

*(I-,'SIT$S T'I#&7I

2014B$B I

%,(D$H*#*$(

1!1 #atar Belakang,n6im rotase ang tela5 lama igunakan untuk engemukan aging berasal ari tanaman

misalna en6im ari alam en6im aain rennin fisin an bromelin! )ebanakan en6im ari

alam teraat aa ba5an angan misalna bromelin teraat aa tanaman nanas an aainteraat aa tanaman aaa!

%aain meruakan en6im roteolitik ang iambil ari eaa @.aria aaaA!%aain igunakan

untuk engemukan aging ba5an en9erni5 aa inustri minuman bir inustri tekstil inustri

 enamakan kulit inustri farmasi an alat alat keantikan @kosmetikA an lain lain! %aain biasaieragangkan alam bentuk serbuk uti5 kekuningan an 5arus isiman

ibawa5temeratur 4 L. @8itriani 200A! %aain meruakan sala5 satu en6im roteolitik ang

i5asilkan ari isolasi enaaan geta5 bua5 eaa! ,n6im aain berasal ari bua5 eaaseangkan kanungan tertinggi aain teraat aa bua5 eaa mua! Dalam geta5 eaa

ang masi5 mua teraat tiga 9enis en6im aitu en6im aain kimoaain an liso6im! ,n6im

 aain an kimoaain ini memunai kemamuan menguraikan ikatan<ikatan alam molekul rotein se5ingga rotein terurai men9ai olietia an ietia! $kan tetai untuk roses

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 8/31

 engemukkan aging lebi5 efektif menggunakan en6im aain

,n6im bromelin aala5 en6im ang seara alami teraat aa bua5 an batang nanas ! bromelin

meruakan sala5 satu 9enis en6im! %rotease sulf5iril ang mamu meng5irolisis ikatan etia aa rotein atau olietia men9ai molekul ang lebi5 keil aitu asam amino! ,n6im ini

memunai berat molekul 33!000! ,n6im Bromelain iergunakan alam inustri makanan

minuman farmasi an obat<obatan!%enelitian en6im Bromelain tela5 ilakukan ole5 %ekolt @1C0A .5ittenen @1CG2A an

.alwell@1G0>A! %enelitian ang ilakukan ole5 akar tersebut meliuti ara<ara isolasi en6im

 bromelain ari sari bua5 nanas! %enelitian untuk memrouksi en6im bromelain untuk skalainustri ilakukan ole5 Balls an kawan<kawan aa ta5un 1G42!

$kti;itas en6im bromelain iengaru5i ole5 beberaa in5ibitorna seerti

iisoroilfosfofluoriat@DI%8A ang ilaorkan ole5 "ura5i T an Jasui!" aa ta5un 1G>

aat meng5ambat akti;itas katalitik ari en6im bromelain! Disaming itu Husain S an #owe 7 9uga meneliti bagian aktif ari en6im bromelain seara seer5ana igambarkanna eretan asam

amino aa usat aktif ari en6im bromelain sebagai berikut:

.s – 7l – $la – .sM – Tr

Dalam 5al ini .sM meruakan bagian aktif ari bromelain!,n6im olifenol oksiase @%%&A aala5 en6im oksioreuktase ang menganung tembaga @.uA

ang umumna ikenal bereran alam roses melanisasi aa 5ewan an enoklatan aatanaman! ,n6im %%& tersebar luas i alam memunai berat molekul 12C!000 alam keaaan

murni tiak berwarna an stabil aa H netral! %ertama kali iientifikasi aa ta5un 1G>

ari 9amur! )onsentrasi en6im ang tinggi itemukan aa 9amur umbi kentang ael isangalukat aun te5 bi9i koi an aun tembakau! Selain aa tanaman en6im %%& 9uga

itemukan aa bakteri an mamalia!

,n6im %%& teraat alam lastia an klorolas 9uga itemukan terlarut alam sitolasma

 aa tanaman ang tua an sebagai fraksi terlarut ari 5omogenat beberaa saur! ,n6im olifenol oksiase atau %%& @%ol5enol &iaseA tela5 banak ilaorkan ole5 beberaa

 eneliti ba5wa en6im tersebut i alam tanaman bereran ter5aa sistem keta5anan an

 enembu5an 9aringan ang terluka! %enega5an roses enoklatan sangat enting alaminustri makanan karena warna seringkali iangga sebagai tolak ukur konsumen alam

memili5 makanan!

1!1 Tu9uan %raktikum1! "engeta5ui 9enis en6im alami ang bermanfaat alam biang angan

2! "engeta5ui ara ker9a en6im rotease alam meng5irolisis rotein

3! "engata5ui roses browning seara en6imatis an mengeta5ui roses enega5anna

B$B II",T&D&#&7I

2!1 "etoe ang igunakan

"etoe ang igunakan alam raktikum ientifikasi en6im kali ini aala5 menggunakan *9i,n6im %aain *9i ,n6im Bromelin an *9i ,n6im %olifenol &ksiase!

1! *9i ,n6im Bromelin

,n6im bromelin ang akan iambil aitu ari isolasi filtrat bua5 nenas ole5 karena itula5 bua5nenasna i5aluskan terlebi5 a5ulu samai lembut engan blener! %aa roses ini igunakan

a?uaes sebanak 100 m# enamba5an air aa roses ini 5arus iusa5akan seminimal

mungkin karena bila terlalu banak akan memengaru5i 9umla5 en6im ang ierole5!

%enaringan imaksu untuk memisa5kan amas an filtrat! 8iltrat ini la5 ang igunakan untuk 

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 9/31

 roses isolasi en6im seangkan amasna ibuang! 8iltrat ari enaringan tiak aat langsung

igunakan namun 5arus iiamkan terlebi5 a5ulu selama 1> menit! Tu9uan iiamkan ini aitu

untuk mengenakan serat<serat nenas ang masi5 ikut tersaring aa roses enaringan%roseur ker9ana aitu sebanak 3 bua5 beaker glass ang iisi otongan aging! Beaker glass

 ertama bereran sebagai kontrol! beaker glass keua an ketiga iisi engan filtrat nenas!

Beaker glass keua isiman ke alam lemari eningin an beaker glass ketiga isiman aasu5u kamar an imati setela5 satu 9am an ua 9am! %eruba5an ang ter9ai iamati aa saat

 raktikum!

2! *9i ,n6im %aain

Selan9utna menggunakan *9i %aain! ,n6im aain ang akan iambil aitu ari isolasi bua5 eaa ole5 karena itula5 bua5 nenasna i5aluskan terlebi5 a5ulu samai lembut engan

 blener! %aa roses ini igunakan a?uaes sebanak 100 m# enamba5an air aa roses ini

5arus iusa5akan seminimal mungkin karena bila terlalu banak akan memengaru5i 9umla5en6im ang ierole5! %enaringan imaksu untuk memisa5kan amas an filtrat! 8iltrat ini la5

ang igunakan untuk roses isolasi en6im seangkan amasna ibuang! 8iltrat ari

 enaringan tiak aat langsung igunakan namun 5arus iiamkan terlebi5 a5ulu selama 1>menit! Tu9uan iiamkan ini aitu untuk mengenakan serat<serat nenas ang masi5 ikut

tersaring aa roses enaringan!

%roseur ker9ana aitu "asukkan 1 m# larutan asam amino ke alam tabung reaks kemuian

tamba5kan > tetes larutan (n5irin an masukkan alam enangas air selama 2 menit!

3! *9i ,n6im %olifenol &ksiase

%raktikum u9i oksiase alam kentang an ael ini bertu9uan untuk mengeta5ui roses oksiase

senawa fenol an irogalol ole5 en6im olifenol oksiase @%%&A an 9uga untuk

memerli5atkan efek emberian antioksian berua ;itamin . ter5aa oksiasi fenol an irogalol ole5 en6im %%& kentang! Ba5an ang igunakan aala5 bua5 ael an kental ang

tela5 iotong au!%roseur ker9ana aitu Bua5 ael an kentang iotong<otong 5ingga membentuk aukemuaian iisa5kan men9ai > bagian! Bagian ertama isiman alam beaker glass atau

waa5 lastik sebagai kontrol! Bagian keua renam otongan ael alam larutan asam askorbat

@;itamin .A! Bagian ketiga irenam alam larutan garam! Bagian keemat irenama alam air!Bagian kelima irenam alam air 5angat aa su5u 0L. selama 10 menit! )emuian amati

setelea5 1 an 2 9am erobaan

2!2 $lat Dan Ba5an

  $lat ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 beaker glass 100 ml seatulawater bat5 isau gelas lastik blener saringan filtrat an gelas ukur!

  Seangkan ba5an ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 bua5 eaa bua5

nanas bua5 ael kentang larutan asam askorbat @ -it . 10 F A larutan garam air an air 5angat

2!3 Waktu an Temat%raktikum ini ilaksanakan aa 5ari 'abu tanggal 2 (o;ember 2014! %aa ukul 10!00 –

12!40 WIB! Tematna i #aboratorium Biokimia lt!4 *ni;ersitas Trilogi!

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 10/31

B$B III

H$SI# D$( %,"B$H$S$(

3!1 Hasil %engamatan

1! *9i ,n6im Bromelina! %engamatan setela5 1 9am :

 (o )eterangan $roma Warna Tekstrur 

1 Beaker I @ .ontrolA )5as aging "era5 tua @ segar A )eras atau liat2 Beaker II @ Su5u DinginA $mis k5as aging @beramur aroma nanasA "era5 era5

@seikit uatA

  lebi5 keras ariaa aging ang itaru5 aa su5u ruang3 Beaker III @ Su5u ruangan A $mis k5as aging @beramur aroma nanasA "era5 %uat

,muk @lunak 

 b! %engamatan setela5 2 9am :

 (o )eterangan $roma Warna Tekstrur 1 Beaker I @ .ontrolA )5as aging "era5 tua @ segar A )eras atau liat

2 Beaker II @ Su5u DinginA $mis k5as aging @beramur aroma nanasA "era5 uat

,muk @lunakA tai lebi5 keras ariaa aging ang aa aa su5u ruangan

3 Beaker III @ Su5u ruangan A $mis k5as aging @beramur aroma nanasA "era5 Sangat%uat Sangat ,muk @lunakA

2! *9i ,n6im %aain

a! %engamatan setela5 1 9am :

 (o )eterangan $roma Warna Tekstrur 

1 Beaker I @ .ontrolA )5as aging "era5 tua @ segar A )eras atau liat2 Beaker II @ Su5u DinginA $mis k5as aging @beramur aroma eaaA "era5 era5

@seikit uatA  ,muk atau lunak 

3 Beaker III @ Su5u ruangan A $mis k5as aging @beramur aroma eaaA "era5 %uat

,muk atau lunak 

 b! %engamatan setela5 2 9am : (o )eterangan $roma Warna Tekstrur 

1 Beaker I @ .ontrolA )5as aging "era5 tua @ segar A )eras atau liat

2 Beaker II @ Su5u DinginA $mis k5as aging @beramur aroma eaaA "era5 uat

  ,muk atau lunak 3 Beaker III @ Su5u ruangan A $mis k5as aging @beramur aroma eaaA "era5 %uat

,muk atau lunak 

3! *9i %olifenol &ksiasea! %engamatan setela5 1 9am :

 (o )eterangan Bua5 ael Bua5 kentang

1 .ontrol @ I A "engalami enoklatan "engalami enoklatan

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 11/31

2 #ar! -it . 10 F @IIA Tiak mengalami enoklatan Tiak mengalami enoklatan

3 #ar! 7aram @IIIA Tiak mengalami enoklatan "engalami seikit enoklataan

4 $ir @I-A "engalami seikit enoklataan Tiak mengalami enoklatan> $ir Hangat 0o. @-A "engalami enoklatan @ tekstur men9ai emuk A Tiak

mengalami enoklatan

  b! %engamatan setela5 2 9am :

 (o )eterangan Bua5 ael Bua5 kentang

1 .ontrol @ I A #ebi5 oklat #ebi5 oklat2 #ar! -it . 10 F @IIA Tiak mengalami enoklatan Tiak mengalami enoklatan

3 #ar! 7aram @IIIA Tiak mengalami enoklatan @Tekstur lebi5 emuk A .oklat mengalami

5iertonik 

4 $ir @I-A "engalami seikit enoklataan @Teksture lebi5 emuk A Tiak mengalami enoklatan

> $ir Hangat 0o. @-A "engalami enoklatan @ tekstur men9ai emuk A Tiak

mengalami enoklatan

1!2 %emba5asan

1! *9i ,n6im Bromelin an %aain

%aa raktikum u9i en6im bromelin iseiakan 3 bua5 gelas lastik ang akan iambil 5asilna

setela5 1 9am! Beaker – beaker tersebut akan iletakkan aa su5u ruang tana iberikan en6im aain an bromelin sebgai kontrol iletakan kealam lemari es ang tela5 ioleskan en6im

sebanak 1 bua5 1 bua5 lagi akan ibiarkan aa su5u ruangan! "asing – masing beaker glass

iisi engan filtrat bua5 eaa an nanas ang tela5 i blener an isaring otongan aging0> ruas ibu 9ariwarna aging aa saat sebelum imasukkan kealam lemari es an su5u

ruangan mera5 segar aroma amis k5as aging an tekstur liat seratna aat!

,n6im Bromelin

%aa su5u ruang aging berwarna mera5 uat aroma amis aging an tekstur ari agingtersebut emuk! Seangkan aa aging ang imasukkan alam lemari es aging tersebut

 berwarna mera5 era5 engan aroma amis tai aa aroma nanas an teksturna lebi5 keras

ariaa ang beraa aa su5u ruang! )emuian iseiakan 2 bua5 beaker glass ang akaniambil 5asilna setela5 2 9am! Beaker – beaker tersebut akan iletakkan kealam lemari es

sebanak 1 bua5 an 1 bua5 lagi akan ibiarkan aa su5u ruangan! "asing – masing beaker

glass iisi engan aa5an nanas an aging aa su5u ruang aging berwarna mera5 uataroma amis aging an tekstur ari aging tersebut emuk!

Seangkan aa aging ang imasukkan alam lemari es aging tersebut berwarna mera5

segar engan aroma amis tai aa aroma nanas an teksturna emuk tetai lebi5 keras ariaaang beraa aa su5u ruang!

,n6im aain%aa su5u ruang aging berwarna mera5 uat aroma amis aging an tekstur ari aging

tersebut keras tai tiak lembek @emuk agingA! Seangkan aa aging ang imasukkan

alam lemari es aging tersebut berwarna agak mera5 seang engan aroma amis aging an

teksturna lebi5 keras ariaa ang beraa aa su5u ruang!)emuian iseiakan 3 bua5 beaker glass ang akan iambil 5asilna setela5 2 9am! Beaker –

 beaker tersebut akan iletakkan kealam lemari es sebanak 1 bua5 an 1 bua5 lagi akan

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 12/31

ibiarkan aa su5u ruangan! "asing – masing beaker glass iisi engan en6im aain an

aging aa su5u ruang aging berwarna mera5 uat aroma amis aging an tekstur ari

aging tersebut emuk! Seangkan aa aging ang imasukkan alam lemari es agingtersebut berwarna mera5 uat engan aroma amis an teksturna lebi5 kerass ariaa ang

 beraa aa su5u ruang!

%en9elasan tentang mekanisme en6im aain an bromelin aa aging

,n6im akan beker9a seara otimal tergantung ari konsentrasi ang iberikan ole5 su5u! Sama5alna engan en6im aain ang beker9a otimal aa su5u tertentu! ,n6im bromelin mamu

menguraikan serat<serat aging se5ingga aging men9ai lebi5 emuk!

%roses engemukan ter9ai karena roteolisis aa berbagai fraksi rotein aging ole5 en6im!%roteolisis kolagen men9ai 5iroksirolin mengakibatkan s5ear fore kolagen berkurang

se5ingga keemukan aging meningkat ! %roteolisis miofibril meng5asilkan fragmen rotein

engan rantai etia lebi5 enek! Semakin banak ter9ai roteolisis aa miofibril makasemakin banak rotein terlarut alam larutan garam ener! Ter5irolisisna kolagen an

miofibril menebabkan 5ilangna ikatan antarserat an 9uga emea5an serat men9ai fragmen

ang lebi5 enek men9aikan sifat serat otot lebi5 mua5 terisa5 se5ingga aging semakinemuk!

Dalam tabel 5asil engamatan aat ili5at ba5wa aging ang iberi en6im bromelin alam

su5u kamar lebi5 beker9a otimal mengemukkan aging sai ibaningkan engan aging sai

ang iberi en6im bromelin aa su5u lemari es! Sama 5alna engan aging sai ang iberien6im aain an itematkan alam su5u kamar 5asilna lebi5 otimal aat mengemukkan

aging sai ibaningkan engan aging sai ang iberi en6im aain an i tematkan aa

su5u lemari es! #ebi5 lan9ut sebagian rotein akan mengalami enaturasi bila su5una inaikkanang mengakibatkan konsentrasi efektif en6im akan menurun an aa ker9a en6im akan

menurun ula! Su5u otimum en6im bromelin aala5 >0 samai 0o. tetai aa kisaran 30

samai 0o. en6im masi5 bisa beker9a engan baik !

Berasarkan erobaan terbukti ba5wa su5u berengaru5 ter5aa otimalna ker9a en6imengan kata lain baik en6im bromelin mauun en6im aain aat bereaksi otimal aa su5u

kamar! %erbeaan antara enggunaan en6im bromelin an en6im aain aitu aa waktu

 enimananna aa raktikum ini aa membutu5kan waktu 1 9am an 2 9am!%aa enimanan selama 1 9am ang aa aa su5u ruang keaaan agingna baik ang

menggunakan en6im aain mauun en6im bromelin sama – sama emuk! Seangkan aa su5u

ingin aging ang menggunakan en6im bromelin an en6im aain sama –sama keras @tiakemukA! %aa enimanan selama 2 9am ang aa aa su5u ruang keaaan agingna baik

ang menggunakan en6im aain mauun en6im bromelin sama – sama emuk! Seangkan aa

su5u ingin aging ang menggunakan en6im bromelin an en6im aain sama – sama lebi5keras ariaa ang imasukkan ibiarkan aa su5u ruangan!

%aa inustri angan emanfaatan en6im aain an bromelin untuk ba5an erena5 aa

 ermukaan kue kering seerti raker ba5an en9erni5 aa minuman te5 an sebgai ba5an enggumal susu embuatan ke9u se5ingga mengilangkan keraguan sebgai konsumen tentang

 emakaian renin ari usus babi!

2! *9i ,n6im %olifenol oksiase

$ntioksian aala5 senawa ang aat menega5 ter9aina reaksi oksiasi ang bisameng5asilkan substansi<substansi berba5aa ari 5asil oksiasi misalna eroksia an raikal

 bebas!

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 13/31

%enoklatan @browningA meruakan roses embentukan igmen berwarna kuning ang akan

segera beruba5 men9ai oklat gela! %embentukan warna oklat ini iiu ole5 reaksi oksiasi

ang ikatalisis ole5 en6im fenol oksiase atau olifenol oksiase! )eua en6im ini aatmengkatalis oksiasi senawa fenol men9ai ?uinon an kemuian iolimerasi men9ai igmen

melaniain ang berwarna oklat @"aria5 1GGA! Ba5an angan tertentu seerti aa saur an

 bua5 senawa fenol an kelomok en6im oksiase tersebut terseia seara alami! &le5 karenaitu enoklatan ang ter9ai isebut 9uga reaksi enoklatan en6imatis!

,n6im ang bertanggung 9awab alam reaksi enoklatan en6imatis aala5 oksiase ag isebut

fenolase fenoloksiase tirosinase olifenolase atau katekolase! Dalam tanaman en6im ini lebi5sering ikenal engan olifenol oksiase @%%&A! Substrat untuk %%& alam tanaman biasana

asam amino tirosin an komonen olifenolik seerti katekin asam kafeat irokatekol atau

katekol an asam klorogenat! Tirosin ang meruakan monofenol ertaama kali 5i5iroksilasi

men9ai 34<i5iroksifenilalanin an kemuian ioksiasi men9ai ?uinon ang akanmembentuk warna oklat! %enggunaan ;itamin . aat mereuksi kembali ?uinon berwarna

5asil oksiasi @o<?uinonA men9ai senawa fenolat @o<ifenolA tak berwarna! $sam askorbat

selan9utna ioksiasi men9ai asam e5iroaskorbat! )etika ;itamin . 5abis komonen

 berwarna akan terbentuk sebagai 5asil reaksi olimerisasi an men9ai rouk antara angirre;ersibel! =ai rouk berwama 5ana akan ter9ai 9ika ;itamin . ang aa 5abis ioksiasi

an ?uinon terolimerisasi!

 B$B I-

SI"%*#$(

,n6im bromelin an aain mamu menguraikan serat<serat aging se5ingga aging men9ai

lebi5 emuk! Su5u memengaru5i ker9a en6im aitu ba5wa su5u kamar akan membuat en6im bereaksi lebi5 otimal!

%aa u9i olifenol oksiase menggunakan larutan ;itamin . larutan garam air an air 5angatmemengaru5i untuk meng5ambat rekasi browning atau enoklatan tetai ang lebi5 efektifalam eng5ambatan rekasi tersebut aala5 ;itamin . ang keua larutan garam ang ketiga air 

5angat 0o . an ang ke emat aala5 air biasa!

D$8T$' %*ST$)$

Santoso!B 200! Biologi! %erustakaan nasional : Surabaa$nna! % 1GGC! Dasar<asar Biokimia! Jaasan .enrawasi5 : Banung

Saikin "! 2002! Biokimia en6im! Wia "eika : =akarta!

Soearno 1GG2! Ilmu an Teknologi Daging! 8akultas %eternakan *7" 7a9a5 "aa *ni;ersit

%ress : SurabaaSunarto! 200C! ,n6im %angan!! %T! 7rameia : =akarta

Winarno 1GG>! ,n6im %angan! .etakan ke 2! %T! 7rameia : =akarta

"aria5 ,! 1GG! %enentuan akti;itas an in5ibisi en6im olifenol oksiase ari ael @%rusmalus #inn!A! =urnal )imia $nalas 2: 2!

'a5mawati 8! 200C! %engaru5 ;itamin . ter5aa akti;itas olifenol oksiase bua5 $el mera5

@%rus malusA seara in ;itro NskrisiO! Surakarta: *ni;ersitas "u5ammaia5 Surakarta!.5eng 7W .risosto .7! 200>! Browning otential 5enoli omosition an

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 14/31

 ol5enoloiase ati;it of buffer etrats of ea5 an netarine skin tissue! =! $mer! So!

Horts! St! 120 @>A:C3><C3C!

Harol Hart! 1GC3! &rgani .5emistr a S5ort .ourse Sit5 ,ition "i5igan State*ni;ersit : Houg5ton "ifflin .o!

 'al =! 8essenen an =oan S! 8essenen + &rgani .5emistr T5ir ,ition *ni;ersit &f

"ontana 1GC Waswort5 In Belmont .aliffornia G4002 "assa5uset *S$! 2002

igiti6e b *S* igital librar C

#$"%I'$(

1! *9i ,n6im %aaain

2! *9i ,n6im Bromelin

 

3! *9i ,n6im %olifenol &ksiase

Bua5 ael an kentang ang ilarutakan engan air air 5angat -itamin . an larutan garamserta ang tiak iberi larutan sama sekali sebagai kontrol atau embaning

Des0

Laporan Praktikum Protein dan

Asam Amino

Tanggal : 1C (o;ember 2014

Waktu : 10:00 – 12:40 WIBDosen: Hermawan Seftiono SSi! "!Si

#$%&'$( %'$)TI)*"

BI&)I"I$

+ID,(TI8I)$SI $S$" $"I(& D$( %'&T,I()elomok 1 :

"ega %ertiwi 131000

'iska Helana

$lma 'a5mawatiI66a5 "ubaroka5

I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$(

8$)*#T$S BI& I(D*ST'I*(I-,'SIT$S T'I#&7I

2014

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 15/31

B$B I

%,(D$H*#*$(

1!1 #atar Belakang$sam amino aala5 senawa organik ang meruakan satuan enusun rotein ang memunai

gugus amino an karboksilat @7ambar 1A! &le5 karena itu asam amino memunai sifat<sifatasam mauun basa! $sam amino bersifat tiak seerti senawa<senawa organik tetai miri

engan garam<garam anorganik! %aa umumna asam amino larut alam air tetai 5ana larutsebagian ialam elarut organik! Titik lele5 asam<asam amino sangat tinggi untuk senawa<

senawa organi engan massa molekul relatif rena5 an kebanakan lebi5 besar ari 200L.!

Hal ini aat i9elaskan karena asam amino i alam larutan netral akan membentuk 6witter ion@ion ang bermuatan ganaA! Titik lele5 ang tinggi aat ula i9elaskan alam 5ubunganna

engan energi ang ibutu5kan untuk memea5kan ikatan<ikatan ionik alam kisi kristalna!

7ambar 1 Struktur asam amino

Beberaa asam amino menganung gugus terionisasi aa rantai saming ' 5al inimemengaru5i karakteristik aaka5 asam amino tersebut bebas i alam larutan atau bergabung

engan asam amino ang lain! %aa kenataanna sifat muatan ari rotein itentukan

 banakna gugus ang terionisasi aa rantai saming asam amino! Dalam rotein asam amino

satu engan asam amino ang lain bergabung melalui ikatan etia @<.&P(H<A! Ikatan etia

ibentuk <.&&H ari asam amino ang satu engan gugusαengan konensasi gugus <(H2

ari asam amino ang lain!

%rotein meruakan olimer ari asam amino imana struktur ari rotein aa 4 maam aitu :struktur rimerQ sekunerQ tersierQ an kuarterner! Struktur rimer rotein itentukan ole5 ikatan

ko;alen antara resiu asam amino ang berurutan membentuk ikatan etia! Struktur sekuner

ter9ai karena iktan 5irogen antara atom & ari gugus karbonil engan atom H ari gugus amina

alam suatu rantai olietia membentuk konfirmasi siral ang isebut struktur 5eli! Bilaikatan 5rogen tersebut ter9ai antara ua rantai olietia maka membentuk rantai !β arallel

engan bentuk berkelok<kelok ang isebut konfirmasi Struktur tersier terbentuk karena

ter9aina eliatan @folingA rantai mauun gulungan suatu olietia membentuk β<5eli

konfirmasi α rotein globular! Sebagian besar rotein berbentuk globular ang >0!000

meruakan suatu oligomer ang ter9ai≥memunai berat molekul ari bebraa beberaa rantai

 olietia ang terisa5! 'antai olietia ini mengakan interaksi membentuk struktur

kuartener ari rotein oligomer!%rotein meruakan ba5an embentuk mak5luk 5iu katalisatororganik atau biasa isebut en6im an bagian enting ari nuleorotein!

1!2 Tu9uan %raktikum

1! "emela9ari sifat<sifat reaksi asam amino!2! "elakukan ientifikasi asam amino an rotein!3! "enentukan senawa<senawa asam amino seara kualitatif 

B$B II

",T&D&#&7I

2!1 "etoe ang igunakan"etoe ang igunakan alam raktikum asam amino an rotein kali ini aala5 menggunakan

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 16/31

*9i )elarutan asam amino an rotein 'eaksi (in5irin Denaturasi rotein ole5 anas an H

an *9i Biuret!

1! *9i )elarutan $sam $mino an %rotein%aa umumna asam amino larut alam air an tiak larut alam elarut organik non olar

seerti eter aseton an kloroform! Sifat asam amino ini berbea engan asam karboksilat

mauun engan sifat amina! $sam karboksilat alifatik mauun aromatik ang teriri ari beberaa atom karbon umumna kurang larut alam air tetai larut alam elarut organik!

Demikian ula amina aa umumna tiak larut alam air tetai larut alam elarut organik!

%roseur ker9ana aitu $mbil kira<kira 01 g asam<asam amino masukkan masing<masing kealam tabung reaksi! *ntuk masing<masing asam amino eriksa kelarutanna engan elarut<

 elarut sebagai berikut : air asam ener basa ener etanol kloroform!

2! 'eaksi (in5irin

Selan9utna menggunakan *9i (in5irin (in5irin meruakan reagen engoksiasi ang sangatkuat akan bereaksi engan semua asam <amino aa H antara 4 samai C membentuk senawa

 berwarna ungu! 'eaksi ini 9uga ositif untuk amina rimer atau amonia tana aana .&2 ang

ibebaskan! $sam imino rolin an 5iroksi rolin engan nin5irin memberikan warna kuning!

'eaksi ini sangat sensitif an sesuai untuk enentuan asam amino seara kuantitatif!%roseur ker9ana aitu "asukkan 1 m# larutan asam amino ke alam tabung reaks kemuian

tamba5kan > tetes larutan (n5irin an masukkan alam enangas air selama 2 menit!

3! Denaturasi %rotein ole5 %anas an HDenaturasi rotein meruakan suatu roses imana ter9ai eruba5an atau moifikasi ter5aa

konformasi rotein lebi5 teatna ter9ai aa struktur tersier mauun

kuartener ari rotein! %aa struktur tersier rotein misalna teraat emat 9enis interaksi aarantai saming seerti ikatan 5irogen 9embatan garam ikatan isulfia interaksi non olar

 aa bagian non 5irofobik! $aun enebab ari enaturasi rotein bisa berbagai maam

antara lain anas alko5ol asam<basa mauun logam berat!

%roseur ker9ana aitu %iet > m# ari setia larutan rotein an masukkan alam 3 tabungreaksi! Tamba5kan 0> m# H.l aa tabung ke<1 0> m# (a&H aa tabung keua! #etakkan

 aa enangas air selama 10 menit kemuian inginkan aa temeratur kamar an amati!

4! *9i Biuret)uri sulfat alam suasana basa bereaksi engan senawa ang menganung 2 atau lebi5 ikatan

 etia akan meng5asilkan senawa komleks ang berwarna ungu! Intensitas warna ang

i5asilkan tergantung aa banakna ikatan etia ang teraat aa rotein!%roseur ker9ana aitu Tamba5kan > tetes larutan kurisulfat ke alam tabung reaksi ang tela5

 berisi 2 m# larutan rotein kemuian itamba5 2 m# (a&H kook an atat warna ang

ter9ai!

2!2 $lat Dan Ba5an$lat ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 tabung reaksi rak tabung reaksi

 beaker glass 100 ml seatula water bat5 iet ukur > ml iet tetes timbangan analitik bulb

 batang engauk an botol semrot!Seangkan ba5an ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 glisin tirosin asam

glutamat rolin albumin ke9u an ta5u! %ereaksi ang igunakan aala5 air H.l 0!1 ( ,tanol

kloroform larutan (n5irin (a&H 10 ( an .uS&4!>H2& 10 gE#!

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 17/31

2!3 Waktu an Temat

%raktikum ini ilaksanakan aa 5ari 'abu tanggal 1C (o;ember 2014! %aa ukul 10!00 –

12!40 WIB! Tematna i #aboratorium Biokimia lt!4 *ni;ersitas Trilogi!

B$B III

H$SI# D$( %,"B$H$S$(

4!1 Hasil %engamatan

1! )elarutan $sam $mino an %rotein

 (o (ama Samel %ereaksi$ir H.l 01 ( (a&H 01 ( ,tanol )loroform

1 7lisin – – 

2 %rolin – – 3 $s! glutamat – – – – – 

4 Tirosin – – – –

)eterangan :

: #arut – : Tiak #arut

2! *9i (n5irin

 (o (ama Samel Hasil %eruba5an Warna

1 7lisin Bening *ngu ekat2 Tirosin Bening Tiak beruba5

3 )e9u %uti5 susu Tiak beruba5

4 $sam 7lutamat Bening *ngu mua aa enaan

> %rolin Bening )uning mua $lbumin )uning "era5 mua

Ta5u %uti5 %uti5 keru5 aa enaanC $ir @ blankoA Bening Bening

3! Denaturasi %rotein &le5 %anas an H

 (o (ama samel %ereaksi

H.l 0> ml (a&H0> ml $ir 0> ml

1 7lisin Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening2 $lbumin %uti5 aat %uti5 aat aa fase i bawa5 berwarna oklat %uti5 aat

3 $s!glutamat Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening4 %rolin Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening Tiak Beruba5 bening> Ta5u )eru5 aa enaan ta5u )uning )eru5 )eru5 aa enaan ta5u

Tirosin Beningtiak aa enaan uti5 Beningtiak aa enaan uti5 Beningtiak aa

enaan uti5 )e9u Tiak Beruba5 uti5 susu Tiak Beruba5 uti5 susu Tiak Beruba5 uti5 susu

4! *9i Biuret

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 18/31

 (o (ama samel %ereaksi .uS&4!>H2& > tts (a&H 2 ml

Warna $wal Warna ak5ir 

1 7lisin Bening Biru mua2 $lbumin )uning *ngu

3 $s!glutamat Bening Biru mua

4 %rolin Bening Biru mua> Ta5u %uti5 Susu *ngu

Tirosin Bening Biru mua

)e9u %uti5 susu *ngu muaC $ir @ Blanko A Bening Biru mua

1!2 %emba5asan

1! *9i )elarutan $sam $mino

Struktur asam amino seara umum aala5 satu atom . ang mengikat emat gugus aitu gugusamina @(H2A gugus karboksil @.&&HA atom 5irogen @HA an satu gugus sisa @'A atau isebut

 9uga gugus atau rantai saming ang membeakan satu asam amino engan asam amino lainna!

%aa umumna asam amino larut alam air an tiak larut alam elarut organik non olarseerti eter aseton an kloroform! Sifat asam amino ini berbea engan asam karboksilat

mauun engan sifat amina! $sam karboksilat alifatik mauun aromatik ang teriri ari

 beberaa atom karbon umumna kurang larut alam air tetai larut alam elarut organik!

Demikian ula amina aa umumna tiak larut alam air tetai larut alam elarut organik!Setela5 ilakukan erobaan ierole5 5asil asam amino @7lisin an %rolinA larut alam air H.l

01 ( an (a&H 01(! 7lisin an rolin tiak larut alam etanol an kloroform! )arena glisin

memunai gugus H aa rantai samingna an rolin memuna bentuk entosa aa u9ungaminana ole5 karena itu glisin an rolin tiak larut alam elarut non olar! $sam glutamat

an tirosin aa umumna mua5 larut alam elarut organik seerti air $sam glutamat

memunai rantai saming etanoat @.2H>.&&HA bersifat netral an olar an tirosin

memunai rantai saming ben6ene ang berbentuk inin an gugus alko5ol bersifat netral an olar alam raktikum ini asam glutamat an tirosin tiak larut alam elarut organik! Tetai

tirosin seikit larut alam kloroform 5al ini isebabkan karena tirosin memunai gugus ben6ene

an alko5ol aa rantai samingna!2! *9i (n5irin

Berasarkan raktikum ang tela5 ilakukan tentang u9i nin5irin aat ibuktikan ba5wa

nin5irin senawa oksiator kuat bereaksi engan tritofan an trosin karena 5 ari roteintersebut menaai 4<C!)elarutan rotein ialam suatu airan sesunggu5na sangat iengaru5i

ole5 beberaa faktor antara lain H su5u kekuatan ionik an konstanta ielektrik elarutna!

%aa asam amino glisin an asam glutamat ter9ai eruba5an setela5 ianaskan men9ai warnaungu 5al ini ikarenakan asam amino tersebut menganung gugus amino bebas se5ingga

ikatakan reaksi ini ositif ter5aa u9i nin5irin! Semakin ekat warna ungu ang i5asilkan

maka akan semakin besar konsentrasina ikarenakan intensitas warna ang i5asilkan! (amun berbea engan rolin ang warnana beruba5 9ai warna kuning 5al ini ikarenakan rolin

tiak teraat gugus amino bebas gugus aminona tersubstitusi se5ingga ikatakan reaksi

negatif ter5aa u9i nin5irin!

3! Denaturasi rotein ole5 anas an HDenaturasi rotein aat iartikan suatu eruba5an atau moifikasi ter5aa struktur sekuner

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 19/31

tertier an kuartener molekul rotein tana ter9aina emea5an ikatan<ikatan ko;alen! )arena

itu enaturasi aat iartikan suatu roses terea5na ikatan 5irogen interaksi 5irofobik

ikatan garam an terbukana liatan molekul rotein! Denaturasi rotein meliuti gangguan ankerusakan ang mungkin ter9ai aa struktur sekuner an tersier rotein! Se9ak iketa5ui

reaksi enaturasi tiak uku kuat untuk memutuskan ikatan etia imana struktur rimer

 rotein teta sama setela5 roses enaturasi! Denaturasi ter9ai karena aana gangguan aastruktur sekuner an tersier rotein! %aa struktur rotein tersier teraat emat 9enis interaksi

ang membentuk ikatan aa rantai saming seertiQ ikatan 5irogen 9embatan garam ikatan

isulfia an interaksi 5irofobik non olar ang kemungkinan mengalami gangguan!Denaturasi ang umum itemui aala5 roses resiitasi an koagulasi rotein

Denaturasi koagulasi an reenaturasi aat ibeakan sebagai berikut! Denaturasi rotein

aala5 suatu keaaan tela5 ter9aina eruba5an struktur rotein ang menaku eruba5an

 bentuk an liatan molekul tana menebabkan emutusan atau kerusakan liatan antar asamamino an struktur rimer rotein! )oagulasi aala5 enaturasi rotein akibat anas an alko5ol!

'eenaturasi aala5 enaturasi rotein ang berlangsung seara re;eresibel!

%anas aat igunakan untuk mengaaukan ikatan 5irogen an interaksi 5irofobik non olar!

Hal ini ter9ai karena su5u tinggi aat meningkatkan energi kinetik an menebabkan molekul enusun rotein bergerak atau bergetar sangat eat se5ingga mengaaukan ikatan molekul

tersebut! %rotein telur mengalami enaturasi an terkoagulasi selama emasakan! Beberaamakanan imasak untuk menenaturasi rotein ang ikanung suaa memua5kan en6im

 enernaan alam menerna rotein tersebut!

%aa araktikum ini samel albumin @ utik telur A mengalami roses enaturasi engan eruba5an bentuk fisik ang awalna albumin air men9ai memaat!Tirosin mengalami

 eruba5an bentuk awalna berwarna bening an aa enaan uti5 setela5 ianaskan enaan

5ilang an 5ana meninggal warna bening tana enaan!

%emanasan akan membuat rotein ba5an terenaturasi se5ingga kemamuan mengikat airnamenurun! Hal ini ter9ai karena energi anas akan mengakibatkan terutusna interaksi non<

ko;alen ang aa aa struktur alami rotein tai tiak memutuskan ikatan ko;alenna ang

 berua ikatan etia! %roses ini biasana berlangsung aa kisaran su5u ang semit!4! *9i Biuret

'eagen biuret berfungsi untuk mengu9i kanungan rotein alam suatu 6at @makananA aabila

setela5 itetesi biuret makananE sari makanan ang menganung rotein akan beruba5 men9ai berwarna ungu! *9i ini iasarkan aa reaksi embentukan komleks .u2 engan gugus <.&

an <(H ari rantai etia alam suasana basa!Hasil ositifna akan membentuk warna ungu!

*9i Biuret aala5 u9i umum untuk rotein@ikatan etiaA tetai tiak aat menun9ukkan asam

amino bebas! Kat ang mula<mula itetesi larutan (a&H kemuian itamba5nkan .uS&4!>H2&! =ika terbentuk warna ungu berarti samel itu ositif menganung rotein!

Dari 5asil raktikum ini albumin ta5u an ke9u meng5asilkan warna ungu seangkan glisin

asam glutamat air tirosin an rolin berwarna biru mua! "aka ang ositif menganung rotein aala5 samel ke9u albumin an ta5u!

B$B I-

SI"%*#$(

%aa raktikum ientifikasi rotein an asam amino ilakukan emat engu9ian aitu antara lainu9i )elarutan asam amino an rotein u9i (n5irin enaturasi rotein ole5 anas an H an

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 20/31

*9i biuret! %aa u9i kelarutan glisin an rolin larut alam air H.l an (a&H 01 ( seangkan

tirosin 5ana aat larut alam kloroform an asam glutamat tiak larut alam semua elarut!

%aa u9i nn5irin ang ositif ter5aa u9i nin5irin aala5 glisin an asam glutamatmeng5asilkan warna ungu! Seangkan rolin mengasilkan berwarna kuning 5al ini isebabkan

karena ikarenakan rolin tiak teraat gugus amino bebas gugus aminona tersubstitusi

se5ingga ikatakan reaksi negatif ter5aa u9i nin5irin!%aa u9i Denaturasi rotein albumin memaat setela5 ianaskan selama 10 menit 5al ini

ikarenakan emanasan akan membuat rotein ba5an terenaturasi se5ingga kemamuan

mengikat airna menurun! Hal ini ter9ai karena energi anas akan mengakibatkan terutusnainteraksi non<ko;alen ang aa aa struktur alami rotein tai tiak memutuskan ikatan

ko;alenna ang berua ikatan etia!

Dan aa u9i Biuret ang meng5asilkan reaksi ositif ter5aa u9i biuret ini aala5 samel

albumin ta5u an ke9u memberikan warna ungu 5al ini isebabkan karena reaksi embentukankomleks .u2 engan gugus <.& an <(H ari rantai etia alam suasana basa setela5

 enamba5an (a&H 10 (!

D$8T$' %*ST$)$8essenen 'al5 =! =oan S! 8essenen! 1GG! Dasar<asar )imia &rganik! Binarua $ksara

=akarta!

#e5ninger 1GC2! Dasar<asar Biokimia! =akarta : ,rlangga!

%oe9iai $! 1GG4! Dasar<asar Biokimia! *ni;ersitas Inonesia %ress =akarta!Tim %enusun! 200! %enuntun %raktikum Biokimia *mum! #aboratorium Biokimia! *ni;ersitas

Hasanuin "akassar!

8essenen '!= an 8essenen =!S 1GCG )imia &rganik 9ili 2 ,rlangga =akarta!7irina $ 1GG0 Bio5emistr %rintia Hall (ew Jork!

HartH 1GC )imia &rganik ali5 ba5asa: Sumanir $5mai ,rlangga =akarta!

Winarno 8!7 1GG )imia %angan Dan 7i6i 7rameia %ustaka *tama =akarta!

 (o;2

laporan praktikum lipida

Tanggal : 2G &ktober 2014

Waktu : 10:00 – 12:40 WIBDosen: Hermawan Seftiono SSi! "!Si

#$%&'$( %'$)TI)*"

BI&)I"I$

+ID,(TI8I)$SI #I%ID)elomok 1 :

"ega %ertiwi 131000

'iska Helana$lma 'a5mawati

I66a5 "ubaroka5

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 21/31

I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$(

8$)*#T$S BI& I(D*ST'I

*(I-,'SIT$S T'I#&7I2014

B$B I

%,(D$H*#*$(

1!1 #atar Belakang#iia meruakan golongan senawa organik ang teraat i alam meruakan suatu komonen

makanan untuk ma5luk 5iu! #iia enting bagi manusia karena beberaa ;itamin ang larut

alam lii @ $Q DQ ,Q an )A maka lii aat igunakan ole5 tubu5 i saming untukmemenu5i kebutu5an lemak essensial 9uga meruakan sumber energi ang lebi5 efektif

ibaning karbo5irat an rotein karena kalorina lebi5 tinggi!

#iia aala5 senawa organik berminak atau berlemak ang tiak larut alam air aatiekstrak ari sel an 9aringan ole5 elarut nonolar seerti kloroform an eter! $sam lemak

aala5 komonen unit embangun aa 5amir semua lii! $sam lemak aala5 asam organik

 berantai an9ang ang memunai atom karbon ari 4 samai 24! $sam lemak memiliki guguskarboksil tunggal an ekor 5irokarbon nonolar ang an9ang! Hal ini membuat kebanakan

lii bersifat tiak larut alam air an tamak berminak atau berlemak!

#iia tiak memunai rumus emeris an struktur ang sama tetai teriri atas beberaa

golongan! #iia meruakan komonen enting alam membrane sel termasuk iantaranafosfolii glikolii an alam sel 5ewan aala5 kolesterol! )olesterol meruakan senawa

inuk bagi steroi lain ang isintesis alam tubu5! Steroi aala5 5ormon<5ormon ang enting

seerti 5ormone korteks arenal 5ormone seks ;itamin D an asam emeu! 8ungsi liiiantarana sebagai sumber energi ang efisien ketika tersiman alam 9aringan aiose sebagai

 enekat anas i sekeliling organ tertentu an sebagai enekat listrik untuk erambatan eat

 aa saraf bermelin!

1!2 Tu9uan %raktikum1! "emela9ari sifat<sifat ari liia!

2! "engerti reaksi<reaksi ang ter9ai aa liia

3! "elakukan analisa liia seara kualitatif 

B$B II",T&D&#&7I

2!1 "etoe ang igunakan

"etoe ang igunakan alam raktikum liia kali ini aala5 menggunakan *9i )elarutan *9i

)etiak =enu5an *9i $krolein an *9i (oa1! *9i )elarutan

%aa umumna lemak an minak tiak larut alam air tetai seikit larut alam alo5ol an

larut semurna alam elarut organik seerti eter kloroform aseton ben6ene atau elarutnonolar lainna! "inak alam air akan membentuk emulsi ang tiak stabil karena bila

ibiarkan maka keua airan akan memisa5 men9ai ua laisan! Sebalikna minak alam

soa @(a2.&3A akan membentuk emulsi ang stabil karena asam lemak ang bebas alam alamlarutan lemak bereaksi engan soa membentuk sabun! Sabun memunai aa aktif ermukaan

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 22/31

se5ingga tetes<tetes minak men9ai tersebar seluru5na! Tu9uan aa erobaan ini aala5

untuk mengeta5ui kelarutan liia aa elarut tertentu

%roseur ker9ana aitu seiakan 3 tabung reaksi masing<masing tabung iisi engan 2 ml airet5anol kloroform an larutan (a2.&3 2F! )emuian masing<masing tabung teteskan

lemakEminak engan menggunakan rouk minak sawit margarine gliserol minak kelaamentega asam stearat minak 6aitun S% an maonaise 2<3 tetes! %er5atikan kelarutan rouk

tersebut kemuian atat elarut mana ang aling semurna!

2! *9i )etiak9enu5an

)omosisi asam lemak alam trigliseria teriri atas asam lemak 9enu5 an asam lemak tiak

 9enu5! $sam lemak 9enu5 aala5 asam lemak ang tiak memunai ikatan rangka seangkanasam lemak tiak 9enu5 aala5 asam lemak ang memunai satu atau lebi5 ikatan rangka!

Sumber asam lemak 9enu5 banak teraat alam 5ewan @lemak 5ewaniA seerti asam almitat

an asam stearat seangkan asam lemak tiak 9enu5 kebanakan berasal ari tanaman @minak

nabatiA an beberaa i antarana meruakan asam lemak esensial seerti asam oleat asam

linoleat an asam linolenat! Tu9uan ari erobaan ini aala5 untuk mengeta5ui sifatketiak9enu5an minak atau lemak aa suatu rouk!

. . Br2 . .

Br Br %roseur ker9ana aitu larutkan 1 tetes masing<masing rouk kealam masing<masing tabung

reaksi kemuian samel imasukan engan kloroform 1 ml! Setela5 itu tamba5kan 2<3 tetes

larutan o!Hubl @lugolA 5omogenkan! %er5atikan eruba5an warna ang ter9ai aa tabungreaksi

3! *9i $krolein

Dan terak5ir ari erobaan ari u9i liia ini menggunakan u9i $krolein aitu #emak

meruakan ikatan ester antara asam lemak engan gliserol! 7liserol larut alam air an alo5oltetai tiak larut alam eter kloroform an ben6ene! %engu9ian ke5airan gliserol aat

ilakukan engan u9i akrolein!Tu9uan ari erobaan ini aala5 untuk mengeta5ui ke5airangliserol!

%roseur ker9ana aitu seiakan tabung reaksi masing<masing tabung reaksi iisi engan

samel rouk kelaa sawit margarine gliserol minak kelaa mentega asam stearat minak

6aitun S% an maonaise masing<masing 10 tetes samel! Tamba5kan aa masing<masingtabung reaksi serbuk )HS&4 anaskan 5ati<5ati i atas ai siritus er5atikan asa ang

terbentuk! $krolein itanai engan asa uti5!

4! *9i (oa

*9i noa ini imaksukan agar kita aat mengeta5ui aa atau tiakna noa alam samel liiang kita gunakan! Biasana samel atau rouk engan ke9enu5an ang tinggi akan

meninggalkan noa aa kertas saring ang igunakan!

%roseur ker9ana aitu teteskan larutan engan iet tetes aa larutan erobaan aa engu9ian kelarutan iatas engan menggunakan kertas saring! Diamkan samai larutan

mengering an li5at aa atau tiakna noa aa kertas saring ang iteteskan lii tersebut!

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 23/31

2!2 $lat Dan Ba5an

$lat ang igunakan alam raktikum u9i liia ini aala5 tabung reaksi rak tabung reaksi

 beaker glass 100 ml seatula siritus iet ukur > ml iet tetes timbangan analitik bulb batang engauk an botol semrot an kertas saring!

Seangkan ba5an ang igunakan alam raktikum u9i liia aala5 samel rouk kelaa

sawit margarine gliserol minak kelaa mentega asam stearat minak 6aitun S% anmaonaise! %ereaksi ang igunakan aala5 reagen beneit an larutan ioine! %elarut ang

igunakan aala5 etanol G>F air suling kloroform an (a2.&3 2F! %erekasi ang igunakan

aala5 o Hubl @lugolA!

2!3 Waktu an Temat%raktikum ini ilaksanakan aa 5ari 'abu tanggal 2G &ktober 2014! %aa ukul 10!00 – 12!40

WIB! Tematna i #aboratorium Biokimia lt!4 *ni;ersitas Trilogi!

B$B III

H$SI# D$( %,"B$H$S$(

3!1 Hasil %engamatan

1! *9i )elarutan

 (o %rouk )elarutan )eterangan

$ir ,t5anol kloroform (a2.&3 2F1 "! sawit – : #arut

 – : Tiak larut

2 "argarin – – 3 7liserol –

4 "! kelaa – – 

> "entega – – –  $s!Stearat – –  "! Kaitun – – 

C S – – 

G "aonaise – – 

2! *9i )etiak =enu5an

 (o %rouk Hasil

1 "! sawit "era5 "ua

2 "argarin "era5 "ua keru5

3 7liserol "era5 "ua4 "! kelaa "era5 "ua

> "entega "era5 "ua enaan

$s!Stearat "era5 "ua )eru5 "! Kaitun "era5 "ua

C S "era5 "ua keru5

G "aonaise )uning keru5

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 24/31

 (o %rouk Warna Bau $sa

1 "! sawit )uning %ekat Tengik Tiak aa

2 "argarin Tiak Beruba5 Bau margarin $a3 7liserol Tiak Beruba5 Bau menengat $a

4 "! kelaa .oklat Tengik Tiak aa

> "entega .oklat Tengik Tiak aa $s!Stearat .oklat Tengik Tiak aa

"! Kaitun )uning Bening Seerti bau keelai Tiak aa

C S )uning Bening Tiak bau Tiak aaG "aonaise )uning Bening Bau asam Tiak aa

3! *9i $krolein

4! *9i (oa

 (o %rouk $aEtiak aana noa

$ir ,t5anol kloroform (a2.&3 2F

1 "! sawit Tiak aa Tiak aa $a Tiak aa2 "argarin Tiak aa Tiak aa $a Tiak aa

3 7liserol Tiak aa Tiak aa $a Tiak aa

3!2 %emba5asan#iia aa umumna tiak larut alam air tetai seikit larut alam alko5ol an larut semurna

alam elarut organik seerti: eter kloroform aseton ben6ena atau elarut non olar lainna!

"inak alam air akan membentuk emulsi ang tiak stabil karena bila ibiarkan keua airanakan terisa5 men9ai ua laisan!

Dalam raktikum ientifikasi lemak ini ertama<tama ilakukan aala5 u9i kelarutan engan

menggunakan ba5an air kloroformetanol an (a2.&3 2F! Selan9utna 9enis<9enis ba5an lii

atau lemak ang akan iu9i aala5 minak sawit margarine gliserol minak kelaa mentegaasam stearat minak 6aitun S% an maonaise! Dalam samel atau li minak kelaa sawit

lii tersebut larut aa elarut organik aitu kloroform an etaanol! (amun tiak larut alam air an (a2.&3 2F! (amun minak sawit an gliserolaat larut alam (a2.&3 2F air an

kloroform! *ntuk lii margarin minak kelaa asam stearate minak 6aitun S an

maonaise aat larut alam etanol an kloroform! Tetai untuk lii aa mentega 5ana aat

larut alam kloroform! *9i ini teriri atas analisis kelarutan lii mauun eri;at lii ter5aa berbagai maam elarut! Dalam u9i ini kelarutan lii itentukan ole5 sifat keolaran elarut!

$abila lii ilarutkan kealam elarut olar maka 5asilna lii tersebut tiak akan larut! Hal

tersebut karena lii memiliki sifat nonolar se5ingga 5ana akan larut aa elarut ang sama<sama non olar!

Selan9utna untuk engu9ian ketiak 9enu5an aa liiEminak igunakan elarut kloroform an

 ereaksi o! HublE lugol!*9i ketiak9enu5an igunakan untuk mengeta5ui asam lemak 9enu5atau tiak 9enu5 engan menggunakan ereaksi io Hubl! Io Hubl ini igunakan sebagai

inikaor eruba5an! $sam lemak ang iu9i itamba5 kloroform sama banakna! Tabung

ikook samai ba5an larut! Setela5 itu tetes emi tetes ereaksi io Hubl imasukan ke alam

tabung reaksi sambil ikook an eruba5an warna ang ter9ai ter5aa amuran angiamati! $sam lemak aat ibeakan ari asam lemak tiak 9enu5 engan meli5at strukturna!

$sam lemak tiak 9enu5 memiliki ikatan rangka aa gugus 5irokarbonna! 'eaksi ositif

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 25/31

ketiak9enu5an asam lemak itanai engan timbulna warna mera5 asam lemak lalu warna

kembali lagi ke warna awal aitu kuning bening! Warna mera5 ang kembali uar menanakan

 ba5wa teraat banak ikatan rangka aa rantai 5irokarbon asam lemak!Trigliseria ang menganung asam lemak ang memunai ikatan rangka aat i5iasi ole5

golongan 5alogen! %aa u9i ketiak9enu5an ereaksi io 5ubl akan mengoksiasi asam lemak

ang memunai ikatan rangka aa molekulna men9ai berikatan tunggal! Warna mera5mua ang 5ilang selama reaksi menun9ukan ba5wa asam lemak tak 9enu5 tela5 mereuksi

 ereaksi io Hubl! "inakElii 9enu5 aitu rouk minak kelaa mentega asam stearate S

an maonaise! Seangkan untuk rouk ang tiak 9enu5 aitu rouk kelaa sawit margaringliserol an minak 6aitun!

Selan9utna untuk engu9ian lii ang ketiga aala5 u9i $krolein aitu untuk mengeta5ui

ke5airan gliserol alam suatu rouk ang akan iu9i! *9i akrolein 9ika teraat asa aa saat

ianaskan maka minakElii tersebut ositif menganung gliserol! %aa raktikum iniiaatkan 5asil aitu rouk ang menganung gliserol aala5 margarine an gliserol murni itu

seniri engan intanai keluarna asa ari tabung reaksi aa saat ianaskan iatas siritus!

)etika lemak ianaskan setela5 itamba5kan agen ene5irasi @)HS&4A ang akan menarik

air maka bagian gliserolakan tere5irasi ke alam bentuk ale5i tiak 9enu5 atau ikenalsebagai akrolein @.H2.H.H&A ang memiliki bau seerti lemak terbakar an itanai engan

asa uti5!*9i ang terak5ir aala u9i noa aa engu9ian kelarutan engan meneteskan larutan iatas

kertas saring 5al ini imaksukan agar kita aat mengeta5ui aa atau tiakna noa alam

samel lii ang kita gunakan! %aa minakElii ang ilarutkan engan kloroformmeninggalkan berakEnoa aa kertas saring

B$B I-

SI"%*#$(

%aa raktikum u9i liia ilakukan emat engu9ian aitu antara lain u9i kelarutan u9i ketiak 9enu5an u9i akrolein an u9i noa! Samel ang igunakan untuk ke emat engu9ian ini aala5minak sawit margarine gliserol minak kelaa mentega asam stearat minak 6aitun S% an

maonaise! %aa u9i kelarutan ang larut aa elarut ,tanol kloroform an (a2.&3 2F aala5

"inak sawit an gliserol! Seangkan samel ang larut aa elarut ,tanol an kloroformmargarin minak kelaa mentega asam stearat minak 6aitun S an "aonaise! *ntuk

samel mentega 5ana larut aa elarut kloroform!

%engu9ian ang keua aala5 u9i ketiak 9enu5an! *ntuk samel minak kelaa mentega asamstearat S an maonaise meruakan asam lemak 9enu5! Seangkan asam lemak tiak 9enu5

teraat aa samel minak sawit margarin minak 6aitun S maonaise!

%engu9ian ang ketiga aala5 u9i akrolein itanai engan aana asa aa minakElii aa

saat roses emanasan setela5 i berikan )HS&4! Diaatkan 5asil ang ositif aitu aasamel margarin an gliserol!

%engu9ian ang terak5ir aala5 u9i noa! *9i noa ilakukan aa saat setela5 engu9ian

kelarutan ilakukan engan meneteskan larutan iatas kertas saring! %aa erobaan u9i noa iniiaatkan kasil ang meninggalkan berak atau noa aitu samel ang ilarutka! engan

 elarut kloroform!

D$8T$' %*ST$)$

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 26/31

8essenen R fessenen eisi ke<3! 1GC2! )imia &rganik =ili II: #ii an %rouk $lam ang

 ber5ubungan @5al 40A! %enerbit ,rlangga! =akarta!

#e5ninger $!#! 1GC2! Dasar<asar Biokimia! %enerbit ,rlangga! =akarta!"at5ens .! )et! 2000! Bio5emistr! t5ir eition! $ison<Wesle %ublis5ing .oman! San

8ransiso!

%oe9iai $nna! 1GG4! Dasar<asar Biokimia: #ii @5al >1A! %enerbit *ni;ersitas Inonesia!=akarta!

 (o;0

laporan praktikum biokimia uji karbohidrat

  Tanggal : 22 &ktober 2014Waktu : 10:00 – 12:40 WIB

Dosen: Hermawan Seftiono SSi! "!Si

#$%&'$( %'$)TI)*"

BI&)I"I$+ID,(TI8I)$SI )$'B&HID'$T

)elomok 1 :

"ega %ertiwi 131000'iska Helana

$lma 'a5mawati

I66a5 "ubaroka5

I#"* D$( T,)(&#&7I %$(7$(

8$)*#T$S BI& I(D*ST'I*(I-,'SIT$S T'I#&7I

2014B$B I

%,(D$H*#*$(

1!1 #atar Belakang

)arbo5irat iientifikasi sebagai senawa ang unsur<unsurna teriri atas atom . H an &engan erbaingan emiris unsur<unsurna @.H2&An! Senawa karbo5irat ibagi alam

tiga golongan utama ang teiri ari monosakaria oligosakaria an olisakaria!

"onosakaria meruakan suatu senawa oli5iroksi ale5i @alosaA atau oli5iroksil keton!

%aa umumna monosakria bersifat otis aktif mua5 larut alam air berua 6at aat uti5 bila ianaskan akan berbau karamel an memunai sifat meruuksi! .onto5 ari senawa

monosakria aitu glukosa galaktosa fruktosa an sebagaina!

&ligosakaria teriri ari ua atau lebi5 monosakaria ang i5ubungkan engan ikatanglikosia! Senawa tersebut aat i5irolisa alam suasana asam meng5asilkan monosakaria!

.onto5 ari senawa ini antara lain sukrosa laktosa an maltosa! %olisakaria meruakan

 olimerari monosakaria! .onto5 ari olisakaria ini antara lain amilum selulosa anglikogen $milum meruakan 6at teung alam tumbu5an ang aat i9umai aa

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 27/31

 berasganum mauun umbi<umbian! $milum teriri ari amilosa an amiloektin! $milosa

menganung 300 unuit glukosa engan ikatan <14 glukosiik seangkan amiloektin teriri

ari 1000 unit glukosa ang bergabung membentuk rantai lurus engan ikatan <14 glukosiikan aa setia 2> atau 30 unit glukosa teraat rantai abang engan ikatan <1 glukosiik!

Selulosa teriri ari 000 unit glukosa ang i5ungkan engan ikatan U<14 glukosiik

membentuk rantai linier! 7likogen meruakan karbo5irat aangan ang 5ana teraat aa5ewan an manusia n memunai struktur amiloektin alam 5al unit ang menusun molekul

aala5 glukosa 9enis ikatan aa abang! 7likogen memunai masa molekul relatif 30!000 an

 aa tia 10 unit glukosa alam rantai lurus teraat rantai abang! .onto5 lain ari olisakariaaala5 5itin 5emiselulosa an etin!

1!2 Tu9uan %raktikum

1! "a5asiswa ientifikasi senawa<senawa karbo5irat

2! "engeta5ui reaksi<reaksi ang ter9ai3! "enentukan senawa<senawa karbo5irat seara kualitatif 

B$B II",T&D&#&7I

2!1 "etoe ang igunakan"etoe ang igunakan alam raktikum karbo5irat kali ini aala5 menggunakan *9i Beneit

*9i Ioine an Isolasi )arbo5irat!

1! *9i Beneit*9i Beneit meruakan u9i umum untuk karbo5irat ang memiliki gugus ale5i atau keton

 bebas!*9i beneit berasarkan reuksi .u2 men9ai .u ole5 gugus ale5i atau keton bebas

alam suasana alkalis!*9i Beneit itu9ukan untuk ientifikasi gula<gula ereuksi! %aa roses

reuksi ion kuri alam suasana basa erlu itamba5kan 6at engomleks seerti sitrat ang berfungsi untuk menega5 engenaan .u.&3 alam larutan natrium karbonat! Hasil ari

oksiasi karbo5itar alam larurtan basa sangat komleks an banak 9umla5na an 9uga belum semuana aat iientifikasi! "altosa an #aktosa memberikan u9i ositif engan reagenBeneit seangkan laritan sukrosa tiak bereaksi karena tiak memiliki gugus ale5i atau

gugus keto bebas!

%roseur ker9ana aitu tamba5kan 3<> tetes reagen Beneit ke alam tabung reaksi ang sua5teriisi samel ang akan iu9i an 5omogenkan!Setela5 itu anaskan iatas enangas air 5ingga

 beruba5 warna selama 3 menit inginkan an baningkan serta amati sensiti;itas ari reagen

 beneit engan merekasikanna engan larutan glukosa ener 2! *9i Ioine

Selan9utna menggunakan u9i ioine igunakan untuk menun9ukkan aana olisakaria!Ioine

 bila iasorsi ole5 larutan olisakaria akan memberikan warna! Warna ang i5asilkan akan

 bergantung aa 9enis olisakaria engasorsi! #arutan amilum engan ioine akanmemberikan warna biru seangkan laruran glikogen atau larutan amilum ang ter5irolisa

seara arsial akan meng5asilkan warna oklat kemera5an!

%roseur ker9ana aitu larutan ioine imasukan kealam tabung reaksi engan menggunakan iet tetes ang berisi samel ang ingin iu9i 2<3 tetes! Homogenkan an atat eruba5an warna

ang ter9ai aa semua samel an baningkan!

3! Isolasi karbo5iratDan terak5ir ari erobaan ari u9i karbo5irat ini menggunakan isolasi karbo5irat aitu

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 28/31

menentukan kaar star5 alam samel kentang engan ara isolasi berasarkan rinsi

5omogenisasi enaringan susensi ekantasi engan elarut air an etamol!

%roseur ker9ana aitu kentang ikuas iui an iotong<otong kemuian itimbnagsebanak 100 gram! "asukan ke alam blener an tamba5kan 20 ml air i5omogenkan selama

30 etik! .amuran isaring meelalui searik kain an filtrar itamung alam gelas kimia >00

ml! Tamba5kan air lalu kook amuran ibiarkan mengena kemuian iekantasi! $k5irna ati isusensikan engan etanol G>F 100 ml saring melalui kertas saring! %ati ikeringkan

 aa su5u kamar an itimbang!

2!2 $lat Dan Ba5an

$lat ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 tabung reaksi rak tabung reaksi beaker glass 100 ml seatula kaa arlo9i 5ote late blener iet ukur > ml iet tetes

timbangan analitik bulb batang engauk an botol semrot!

Seangkan ba5an ang igunakan alam raktikum u9i karbo5irat aala5 kentang glukosamurni mai6ena #<men Teung Troiana slim 7ula air Star5 Teung gula an %oari

sweat! %ereaksi ang igunakan aala5 reagen beneit an larutan ioine! %elarut ang

igunakan aala5 etanol G>F an air suling!2!3 Waktu an Temat

%raktikum ini ilaksanakan aa 5ari 'abu tanggal 21 &ktober 2014! %aa ukul 10!00 – 12!40

WIB! Tematna i #aboratorium Biokimia lt!4 *ni;ersitas Trilogi!

B$B IIIH$SI# D$( %,"B$H$S$(

3!1 Hasil %engamatan

1! *9i Beneit

 (& #$'*T$( H$SI# %,'*B$H$( W$'($

1 D<7lukosa Bening .oklat mua2 "ai6ena %uti5 keru5 Biru tua

3 #<"en Bening .oklat mua4 Teung Beras %uti5 keru5 %uti5 keru5 aa enaan

> Troiana slim %uti5 kebiruan Tiak beruba5

7ula air %uti5 kebiruan %uti5 bening

Star5 Bening Bening enaan kuningC Teung 7ula Bening Biru bening

G %oari sweat Bening agak keru5 Biru bening

10 "au )uning keoklatan &range

2! *9i Ioine (& #$'*T$( H$SI# %,'*B$H$( W$'($

1 D<7lukosa Bening )uning keoklatan

2 "ai6ena %uti5 keru5 Hitam3 #<"en Bening .oklat tua

4 Teung %uti5 keru5 *ngu ekat aa enaan

> Troiana slim Bening )uning mua 7ula air Bening )uning mua

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 29/31

Star5 %uti5 keru5 *ngu gela aa enaan

C Teung 7ula Bening )uning keoklatan

G %oari sweat %uti5 agak keru5 .oklat10 "au )uning keoklatan oklat

3! Isolasi )arbo5iratDiketa5ui :

  Berat kertas saring : @bA¬

1! 100>2 gram

2! 103G gram

20421 gram

  Berat )entang sebelum i5anurkan : @aA¬

1! 100>G2 gram

2! 1000>>0 gram

3! 1000>20 gram 300GG gram

  Berat ati kertas saring setela5 engeringan : @A¬1! 3GG gram2! C140 gram

1> >3 gram

'umus untuk meng5itung 'enemen ati alam kentang :

)eterangan :a Berat samel awal @gramA

 b Berat kertas saring @gramA

Berat keertas saring samel setelang engeringan @gramAF 'enemen @<bAEa 100F

F 'enemen ati alam ketang @1>>3<20421AE300GG 100F

4>0 F3!2 %emba5asan

)arbo5irat @V5irat ari karbon/ 5irat arangA atau sakaria @ari ba5asa Junani XYZ[\]

s^k5aron berarti +gulaA aala5 segolongan besar senawa organik ang aling melima5 i bumi! )arbo5irat memiliki berbagai fungsi alam tubu5 mak5luk 5iu terutama sebagai

 ba5an bakar @misalna glukosaA aangan makanan @misalna ati aa tumbu5an an glikogen

 aa 5ewanA an materi embangun @misalna selulosa aa tumbu5an kitin aa 5ewan an 9amurA!

Bentuk molekul karbo5irat aling seer5ana teriri ari satu molekul gula seer5ana ang

isebut monosakaria misalna glukosa galaktosa an fruktosa! Banak karbo5iratmeruakan olimer ang tersusun ari molekul gula ang terangkai men9ai rantai ang an9angserta aat ula berabang<abang isebut olisakaria misalna ati kitin an selulosa! Selain

monosakaria an olisakaria teraat ula isakaria @rangkaian ua monosakariaA an

oligosakaria @rangkaian beberaa monosakariaA!&le5 karena itu alam raktikum ientifikasi karbo5irat ini ilakukan beberaa u9i aitu

mengenai ientifikasi umum aana karbo5irat aa suatu ba5an! Dimana ba5an ang

igunakan alam 5al ini aala5 D<glukosa mai6ena #<men teung Troiana slim gula air

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 30/31

Stra5 teung gulamau an oari sweat! Dalam ientifikasi umum karbo5irat u9i ang

igunakan aala5 *9i Beneit! *9i Beneit meruakan u9i umum untuk karbo5irat ang

memiliki gugus ale5i atau keton bebas!*9i beneit berasarkan reuksi .u2 men9ai .uole5 gugus ale5i atau keton bebas alam suasana alkalis!*9i Beneit itu9ukan untuk

ientifikasi gula<gula ereuksi! %aa roses reuksi ion kuri alam suasana basa erlu

itamba5kan 6at engomleks seerti sitrat ang berfungsi untuk menega5 engenaan.u.&3 alam larutan natrium karbonat! Hasil ari oksiasi karbo5itar alam larurtan basa

sangat komleks an banak 9umla5na an 9uga belum semuana aat iientifikasi! "altosa

an #aktosa memberikan u9i ositif engan reagen Beneit seangkan laritan sukrosa tiak bereaksi karena tiak memiliki gugus ale5i atau gugus keto bebas!

)emuian itu alam u9i beneit aat ieteksi engan aana enaan .u2& berwarna mera5!

Dalam samel ang tela5 ierole5 tiak semua samel ter9ai eruba5an warna! Dalam

 raktikum u9i beneit ini samel ang meng5asilkan eruba5an warna aitu D<glukosa beruba5warna ari bening kebiruan men9ai oklat #<men beruba5 warna ari bening kebiruan men9ai

oklat mua an star5 beruba5 warna men9ai bening aa enaan! %aa *9i ioine larutan

ang meng5asilkan warna reaksi ositif aala5 samel #<men beruba5 warna men9ai boklat

tua teung beras beruba5 warna men9ai ungu ekat teraat enaan mai6ena beruba5 warnamen9ai 5ittam an star5 beruba5 warna men9ai ungu gela an teraat enaan! Hal ini

ikarenakan ter9ai reaksi antara kanung olisakaria ialam samel mengasorsi larutanioine!

%aa erobaan u9i isolasi karbo5irat aa samel kentang iaatkan 5asil renemen ati

alam kentang aala5 4>F! %aa 9urnal isolasi karbo5irat renemen ati berkisar antara 1<10F!

B$B I-

SI"%*#$(

%aa raktikum karbo5irat ilakukan tiga engu9ian aitu antara lain u9i Ioine u9i Beneitan isolasi karbo5irat aa kentang!Samel ang iakai untuk u9i Beneit an u9i Ioine aituD<glukosa "ai6ena #<men teung beras Troiana slim 7ula air star5 teung gula oari

sweat an mau! %aa u9i Beneit larutan ang bereaksi ositif atau mengalami eruba5an

warna aa saat roses emanasan aala5 D<glukosa #<men an star5! Seangkan aa u9iIoine ang mengalami reaksi ositif aitu #<men teung "ai6ena an star5! %aa isolasi

karbo5irat alam kentang iaatkan renemen ati sebesar 4>F!

D$8T$' %*ST$)$

$ieia! 2012! 5tt:EEwww!aieia!omE2012E12Ekarbo5irat<an<u9i<analisa<kualitatif!5tml! 

Diakses 2> &ktober 2014$lmatsier! S! 2010! %rinsi Dasar Ilmu 7i6i! =akarta : 7rameia %ustaka *tama

"urra '! )! kk! 200G! Biokimia Harer! =akarta : %enerbit Buku )eokteran

,7.Sira9uin S an (a9amuin *! 2011! %enuntun %raktikum Biokimia! "akassar : 8akultas

)ese5atan "asarakat *ni;ersitas Hasanuin

5tt:EEe9ournal!uni!a!iEine!5EksaEartileE;iewE3C4 ! Diakses 2> &ktober 2014

8/17/2019 Vit c Iodometri

http://slidepdf.com/reader/full/vit-c-iodometri 31/31

#$"%I'$(

1! *9i Ioine

Warna larutan samel sebelum i teteskan engan larutan ioine

*9i ioine setela5 enamba5an laruran ioin ke alam samel D<glukosa Q berwarna kuningkeoklatan "ai6ena Q berwarna 5itam #<men Q berwarna biru ongker atau biru tua

2! *9i Beneit

Warna larutan samel sebelum i teteskan engan larutan ioine

3! Isolasi )arbo5irat

 (o;03

Buat situs web atau blog gratis i Wor%ress!om! _ Tema 'ele!

Ikuti 

Ikuti “megapertiwi019

)irimkan setia os baru ke )otak "asuk $na!

Buat situs engan Wor%ress!om