Tiga Senyawa Triterpen-Saponin Baru Tipe Dammara Dari Daun Panax
ginseng C.A.Mayer (Disusun untuk memenuhi tugas kimia bahan
alam)
Disusun oleh
Ahmad Yogi nugraha Angga wahyu dwi kartika Ummi Badriyah
(08101003003) (08101003056) (08101003062)
Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sriwijaya 2012/2013
Tiga Triterpen Saponin Baru Tipe Damara Dari Daun Panax Ginseng
C.A. Mayer
1. Pendahuluan Panax (Gingseng) merupakan sejenis terna
berkhasiat obat yang termasuk ke dalam suku Araliaceae. Gingseng
tumbuh di belahan bumi utara terutama di Siberia, Manchuria, Korea,
dan Amerika Serikat. Di Korea daerah penghasil gingseng terletak di
kota Geusman semenanjung Korea, tepatnya di provinsi
Chungcheongnam-do. Di Indonesia juga terdapat tumbuhan yang memilik
khasiat yang sama dengan gingseng tumbuhan yang dimaksud adalah
gingseng jawa (Talinum Paniculatum). Klasifikasi ilmia tanaman
gingseng ini antara lain sebagai berikut: Kingdom Divisi Kelas Ordo
Famili Genus Spesies : Plantae : Magnoliophyta : Magnoliopsida :
Apiales : Araliacea : Panax : Gingseng C.A. Mayer Beberapa
fitokimia yang khas ditemukan pada tanaman ginseng adalah panaxans,
ginsengnoside, saponin, asam valinat dan salisilat. Gui-Ying Lieu
dkk (2010), telah berhasil mengisolasi tiga senyawa baru triterpen
saponin tipe damara dari daun panax ginseng bersamaan senyawa yang
lain. Tiga senyawa tersebut adalah ginsenoside Rh11, ginsenoside
Rh12, dan ginsenoside Rh13. Struktur ketiganya diperoleh dari
pengukuran NMR 1 D dan NMR 2 D dan spektrum massa berturut-turut
sebagai berikut. Ginsengnosida Rh11 atau
(20S)3,6,12,20-tetrahydroxydammara-25-ene-24-one
20-O--D-glucopyranosida. Ginsengnosida Rh12 atau
(20S)-3,12,20,24,25-pentahydroxydammara 20-O-D-glukopiranosa (b),
Gingsengnosida Rh13 atau
(20S,23E)-3,12,20,25tetrahydroxydammara-23-ene
20-O--D-glukopiranosa (c) dan ginsengnosida
yang sudah diidentifikasi (struktur lampiran 1) seperti
ginsenosida M7cd, ginsenosida Rg6, ginsenosida Rb3, gypenosida
XVII, gypenosida IX, and 20-(E)ginsenosida F4. (Lampiran 1)
CH2OH O O
OHOH H OH OH O
HO
OH Gambar (a) Struktur ginsengnosida Rh11
CH2OH OO
OHOH H OH OH OH
HO OH Gambar (b) Struktur ginsenosida Rh12
CH2OH O O
OHOH H OH OH OH
HO
OH Gambar (c) Struktur ginsenosida Rh13Nguyen Huu Tung dkk,
(2010) telah berhasil mengisolasi tiga senyawa baru tipe
damara-glikosida dari daun Panax ginseng dengan proses pemanasan
daun Panax gingseng. Ketiga struktur tersebut dinamakan, (1)
ginsengnosida L1, (2) ginsengnosida L2 dan (3) ginsengnosida L3.
Dan 8 senyawa lain yang sudah diketahui (20S)-ginsenosida Rh1 (4),
ginsenosida F1 (5), ginsenoside Rh4 (6), (20S)-ginsenosida Rg2 (7),
(20R)-ginsenoside Rg2 (8), ginsenosida Rg6 (9),ginsenosida F4 (10),
ginsenosida Rh3 (11), ginsenosida Rk2(12), (20S)ginsenosida Rh2
(13), dan (20R)-ginsenosida Rh2 (14).
OOH OH OH H
OH HO
Gambar (1) Struktur ginsengnosida LH1
OH H OOH
OH HO
O-Gly-Rha
Gambar (2) Struktur ginsengnosida LH2OH H OOH
OH HO
O-Gly-Rha
Gambar (3) Struktur ginsengnosida LH3
Nguyen Huu Tungb dkk (2010) juga telah berhasil mengisolasi satu
senyawa saponin tipe dammara baru yang dinamakan dengan
ginsengnosida SF dan 19 senyawa saponin yang telah diketahui
lainnya. 19 senyawa tersebut antara lain ginsenosida Rh4 (2),8
ginsenosida Rk3 (3),8 ginsenosida F1 (4),9 (20E)ginsenosida F4
(5),10 ginsenosida Rg2 (6),11pseudoginsenosida RC1 (7),4
ginsenosida Rg6 (8),12 ginsenosida F4 (9),12 ginsenosida Rg1
(10),13 6'-acetylginsenosida Rg1 (11),14 ginsenosida Rd (12),6
ginsenoside Rc (13),6 ginsenosida Rb2 (14),6 ginsenosida Re (15),6
vinaginsenosida R4 (16),6 ginsenosida Mb (17),15 ginsenosida Rb1
(18),6 ginsenosida Rs4 (19),16 dan 6'-acetyl-ginsenosida F1 (20).14
(lampiran 2)OH OH OOH
HO
Gambar (1) Struktur ginsenosida SF
Bahan aktif untuk ginseng korean adalah ginsengnoside, seperti
steroid yang memiliki sifat adaptogenik yaitu, sebagai anti stress.
Para glikosida bertindak pada kelenjar adrenal, membantu mencegah
hipertrofi adrenal dan produksi kortikosteroid berlebihan dalam
respon terhadap stres. Ginsenosides
meningkatkan sintesis protein dan aktivitas neurotransmiter di
otak. Ginseng menstimulasi pembentukan pembuluh darah dan
meningkatkan sirkulasi darah di otak, sehingga meningkatkan memori
dan kemampuan kognitif. Ginseng juga digunakan untuk perlindungan
diabetes, migrain, infeksi, radiasi dan kemoterapi,
untuk
membantu
dalam
tidur,
dan
untuk
merangsang
nafsu
makan.
Korean ginseng mengandung steroid seperti panaxtriol. Steroid
sangat mirip dengan struktur steroid anabolik ditemukan secara
alami dalam tubuh kita. Hal ini membuat yang ideal ginseng Korea
untuk atlet dan binaragawan mencari alternatif alami untuk steroid
anabolik. Korean ginseng juga digunakan oleh perempuan untuk
pengobatan gejala menopause posting. (Fitokimia.info et al). 2.
Cara Kerja Ekstraksi Isolasi Senyawa dari Daun Panax Ginseng C.A
Mayer 2.1. Material tumbuhan Daun dari panax ginseng dibudidayakan
di provinsi Jilin, China. Identifikasi botani dilakukan oleh prof.
Minglu deng (Changchun University of chinese mediciene) dengan
nomor identifikasi 200609 dan disimpan di jurusan kimia analisis
fakultas kimia, univeristas Jilin, China. 2.2. Ekstraksi dan
Isolasi 2 kg daun kering diekstraksi tiga kali dengan air dibawah
pemanasan.E kstraknya digabungkan kemudian pisahkan menggunakan
kolom macroporous absorbsi resin AB-8 dan dielusi dengan air untuk
menghilangkan pengotor, dan dielusi dengan etanol 85%. Eluatnya
dikumpulkan dan dievaporasi dalam vakum untuk menghasilkan fraksi
saponin kasar (23 gr). Yang dipartisi dalam campuran etil asetat
air (1:1 v/v). Selanjutnya Fase aqua diekstraksi dengan n-butanol.
Dari hasil ekstraksi dihasilkan fraksi etil asetat, fraksi
n-butanol, dan fraksi H20 dalam pengurangan tekanan menghasilkan 91
g, 106 g, dan 33 g. Fraksi n-butanol dipisahkan dengan kromatografi
kolom silika gel fase normal dengan menggunakan campuran eluen
(fase gerak) etil asetat-etanol-H20 dengan perbandingan 50:10:1 ,
40:10:1 , 20:10:1 , 7: 4:1 v/v/v dan dengan menggunakan etanol
murni sehingga menghasilkan tujuh farksi. Fraksi 2 (13 g)
dipisahkan lebih lanjut menggnakan kromatografi kolom silika gel
fase terbalik dengan fase gerak metanol-H2O ( 10:90 , 20: 80 , 30
:70, 40 :60, 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, metanol murni )
menghasilkan lima fraksi. Fraksi 2-2 (4 g) dipisahkan dengan
menggunakan kromatografi kolom silika gel fase normal dengan
menggunakan fhase gerak kloroform:etilasetat (10:1) dan
dimurnikan
dengan preparasi HPLC untuk menghasilkan senyawa 22 (206,2 mg),
8 (5,6 mg), 17 (20 mg), 20 (18.5 mg). Fraksi 5 (20 g) dipisahkan
dengan kromatografi kolom silika gel fase terbalik, dielusi dengan
mettanol dan air (10:90, 20:80, 30:70, 40:60, 50:50, 60:40, 70:30,
80:20 v/v) dan menggunakan metanol murni untuk menghasilkan 14
fraksi. Fraksi 5-3 dimurnikan dengan preparatif HPLC
{metanol-air (70:30)} untuk mendapatkan senyawa 14 (100,5 mg),
13 (125 mg) dan 21 (49,3 mg). Dengan cara yang sama fraksi 5-4 (2g)
dikromatogrfi untuk menghasilkan senyawa 5 (71 mg) dan 6 (16 mg),
fraksi 5-5 (3g) menghasilkan senyawa 4 (68 mg), 7 (13 mg) dan 9 (7
mg), fraksi 5-7 (4g) untuk menghasilkan 10 (145 mg), 18 (235 mg)
dan 19 (15 mg) Fraksi etil asetat (91 g) di kromatografi kolom
dengan menggunakan fasa diam silika fase normal, dengan menggunakan
eluen (fase gerak) kloroform: etanol : air [(100:10:1, 80:10:1,
60:10:1, 40:10:1, 20:10:1, 10:10:1 v/v/v)] diikuti dengan evaporasi
pelarut dengan pengurangan tekanan menghasilkan 9 fraksi. Fraksi 1
(9 g) dipisahkan dengan kromatografi kolom tekanan sedang dan HPLC
untuk mendapatkan senyawa 1 (3,5 mg), 15 (16 mg) dan 12 (56,3 mg).
Fraksi 4 (5 g) dipisahkan dengan menggunakan kromatografi kolom
silika gel fase terbalik dan kemudian fraksi ini dimurnikan
menggunakan prevaratif HPLC untuk mendapatkan senyawa 2 (5 mg), 3
(3,2 g). Dengan cara yang sama fraksi 7 (18 g) dimurnikan untuk
mendapatkan senyawa 16 (48 mg), 23 (52 mg) dan 24 (607,9 mg) dan
fraksi 9 (1 g) untuk mendapatkan senyawa 11 (100 mg). 3. Hasil dan
Pembahasan Dari proses ektraksi dan isolasi di dapatkanlah beberapa
senyawa triterpen antara lain; ginsengnosida Rh11 (1. 3,50 mg),
ginsengnosida Rh12 (2. 5,00 mg), ginsengnosida Rh13 (3. 3,20 mg),
gingsengnosida M7cd (4. 68,00 mg), ginsengnosida Rg6 (5. 71 ,00
mg), (20E)-ginsengnosida F4 (6. 16,00 mg), gypennosida XVII (7.
13,00 mg), ginsengnosida Rb3 (8. 5,60 mg), gypenosida IX (9. 7,00
mg), majorosida F4 (10. 145 mg), ginsengnosida F1 (11. 100 mg),
ginsengnosida F2 (12. 56,30 mg), ginsengnosida F3 (13. 125,0 mg),
ginsengnosida F5 (14. 100,50 mg), gingsengnosida Rd2 (15. 16,00
mg), notogingsengnosida Fe (16. 48,00 mg), 20 (S)-ginsengnosid Rh1
(17. 20,0 mg),
ginsengnosida Re (18. 235,0 mg), 20 (R) ginengnosida Rg2 (19.
15,00 mg), 20 S ginsengnosida Rg 2 (20. 18,50 mg), ginsengnosida
Rb1 (21.49,3 mg), ginsengnosida Rb2 (22. 206,2 mg), ginsengnosida
Rc (23. 52,0 mg) dan ginsengnosida Rd (24. 607.0 mg). Ginsengnosida
Rh11 didapatkan sebagai bubuk putih dengan putaran optik ([]D22,8 +
55,8 dalam metanol), dengan rumus molekul C36H60O10 yang dibuktikan
dengan puncak pada alat resolusi tinggi (HR)-ESI-MS pada m/z
675,40582 [M + Na]+ . Spektrum IR untuk senyawa 1 menunjukan pita
absorbsi yang kuat pada 3377 dan 1073 Cm-1 memberikan suatu
struktur glikosida dan pada pita 1696 dan 1647 Cm-1 menunjukkan
ikatan ganda dua dan karbonil. Selanjutnya, absorbsi maksimum
karbonil ditemukan pada 221,44 nm dalam spektrum UV. Hidrolis asam
senyawa 1 dengan campuran metanol dan asam klorida 1:1 melepaskan
gugus glukosa, yang selanjutnya dibandingkan dengan sampel 1 asli
untuk menunjukan apakah senyawa glikosida telah terlepas. Data 1H,
13C NMR disajikan pada tabel 1, dan dari spektra DEPT ditemukan
bagian glukopiranosil yang mempunyai 4 gugus hidroksil dan bagian
aglikon terdapat satu carbon carbonil dan satu ikatan rangkap dua
(C=C). Dari data 1HNMR diperoleh data untuk senyawa satu adalah [r
5.03 (1H, d, J=7,8 Hz, H-1)]. Signal untuk bagian
B-D-glukopiranosil ditemukan pada spektrum 13C pada pergeseran
kimia 98.2, 75.2, 78.6, 71.8, 78.4 dan 63.1. Signal dari C-6 pada
pergeseran kimia menunujukan aglikon dari senyawa 1 adalah sebuah
protopanaxatriol tipe 1 dengan variasi rantai cabang. Signal proton
dan karbon dalam senyawa 1 menyerupai data dari senyawa
ginsengnosida M7cd, kecuali untuk signal karbon pada rantai samping
(C22 dan C27). Pergeseran kimia pada C-24 pada 202,5 menunjukan
bahwa senyawa 1 merupakan derivat dari gingsengnosida M7cd dengan
gugus karbonil C-24, yang memyebabkan perubahan signal dua karbon
olefini menjadi 144,6 dan 125,1. Spektroskopi atom hidrogen (COSY)
senyawa 1, di cirikan dengan struktur parsial yang ditunjukan
dengan garis tebal, dan spektroskopi korelasi banyak ikatan (HMBC)
yang menunjukan ikatan antara saru dengan kroton dan carbon; H-18
dan C7, 8, 14 ; H19 dengan C-5,9, 10; H-21 dengan C-17, 20, 22 ;
H22 engan C-23, 24; H-26 dengan C-24-25; H27 dan C-24,
25. B-D-glukopiranosil yang terikat pada atom carbon C-20
aglikon ditunjukan oleh data spektrum HMBC yang menunjukkan
korelasi antara proton pada pergeseran kimia 5,03 dengan atom
carbon C-20 pada pergeseran 83,2. Dari beberapa keterangan
tersebut, senyawa 1 dipastikan sebagai
(20S)-3,6,12,20tetrahidroksidamara-25-ene-24-on-20O--D
glukopiranosida dan dikenal sebagai ginsengnosida Rh11.
Tabel 1. 13C NMR spectral data for ginsengnosida Rh11 C 1 2 3 4
5 6 7 8 9 10 11 12 Spectral 39.5 28.2 79.5 40.5 61.9 67.8 47.6 41.3
50.0 39.5 31.1 70.3 C 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Spektral
49.3 51.5 30.9 26.8 52.2 17.5 17.6 83.2 22.0 32.9 30.0 202.5 C 25
26 27 28 29 30 1 2 3 4 5 6 Spectral 144.6 125.1 17.7 32.2 16.7 18.0
98.2 75.2 78.6 71.8 78.4 63.3
4. Kesimpulan Dari hasil isolasi daun Panax ginseng dan
karakterisasi struktur melalui pengukuran NMR (Nuclear Magnetic
Resonance) didapatkanlah 3 senyawa golongan triterpen saponin yang
dinamakan dengan ginsengnosida Rh11, ginsengnosida Rh12 dan
ginsengnosida Rh13 serta 21 senyawa lainnya (lampiran 1)
LAMPIRAN I STRUKTUR
OH
OH
OH
HO
HOOGlc 2 Rha
O
2
Glc
Rha
20-(E)-ginsengnosida F4
20 -(R)-ginsengnosida Rg2
OH
HO
OH
HO
HO
HO
O
2
Glc
Rha
O
Glc
20-(S)-ginsengnosida Rg2
ginsengnosida Rh1
Glc OH
O
Glc
6
Glc OH
O
HO
OH
Glc
2
Glc
Oginsengnosida Rb1
Ginsengnosida F1
Ara(f)Ara(p)6
6
Glc OH
O
Glc OH
O
Glc Glc
2
Oginsengnosida Rb2
Glc Glc
2
Oginsengnosida Rc
Glc OH
O
Glc
2
Glc
O
Ginsengnosida Rd
Glc OH
O
HO
O
Glc
2
Rha
ginsengnosida ReOH
HO
O
Glc
2
Rha
ginsengnosida Rg6
LAMPIRAN 2 STRUKTUR
OH
OH
HO O glc
HO O glc
2
Rha
(2)
(8)
OH
OH
HO O glc
HO O glc
2 Rha
(3)glc O
(9)
OH
OH
HO OH
HO O-glc 2 Rha
(4)
(5)
OH
HO
glc OH O
HO O glc Rha
HO O glc
(6)
(10)glcAc
OHO
O
6glc OH
HO O glc
HO2Rha
O
glc
2
Rha
(11)
(15)
glc OH O
Ac glc OH O
OHO
glc
glc
OH
OH
(16)
(20)
glcOH
OH
O
glc
glc
O
O Ac glc glc
Ac
(19)
(7)
glc 6 Ara (f)glc
OHOH O
O
O glc 2 glc
O glc 2 glc
(12)
(13)
glc 6 Ara (p)glc 6 Ara (p)
OH
OOH O
O glc 2 glc
O glc
(14)
(17)
glc
6 glc
OH
O
O glc glc
(18)
Keterangan Ac Glc Ara (p) Ara (f) Rha : Acetyl :
-D-glucofiranosil : -L-arabinopiranosil : -L-arabinofuranosil :
-L-rhamnopiranosil
Daftar Pustaka
Liu, Gui-Ying, dkk. 2010. Three New Dammarane-Type Triterpene
Saponins From The Leaves Of Panax ginseng C.A. Meyer. Journal Of
asian Natural Product. Department of Analytical Chemistry, College
of Chemistry ; Jilin University. Tung, Nguyen Huua, dkk. 2010.
Steamed Ginseng-Leaf Components Enhance Cytotoxic Effects on Human
Leukemia HL-60 Cells. Chem. Pharm. Bull. 58(8) 11111115. College of
Pharmacy ; Chungnam National University. Tung, Nguyen-Huub, dkk.
2010. Dammarane-Type Glycosides from the Steamed Flower-Buds of
Panax ginseng. Bull. Korean Chem. Soc. 2010, Vol. 31, No. 5 1381
DOI 10.5012/bkcs.2010.31.5.1381. College of Pharmacy; Chungnam
National University
