Terapi gen, yang novel pengobatan untuk banyak penyakit, ini mudah berlaku untuk pengobatan kanker pasien.Kanker payudara adalah kanker paling umum di kalangan perempuan.Ada banyak protokol klinis untuk pengobatan kanker payudara, dan terapi gen sekarang sedang dipertimbangkan dalam protokol. saat iniKajian ini akan fokus pada konsep dasar terapi gen kanker strategi ( gen, bunuh diri gen penekan tumor, , anti-angiogenesis imunoterapi, oncolytic virus dan ribozyme / antisense menargetkan ) dan saat ini mendekati untuk terapi gen kanker payudara.

Pengenalan kanker payudara adalah besar kanker pada wanita di negara maju.Saat ini terapi kanker payudara terdiri dari operasi, kemoterapi, radioterapi dan terapi hormon.Semua memiliki efek samping dan keterbatasan.Apalagi mereka tidak menjamin lengkap pemberantasan sel tumor dari tubuh dan berkepanjangan hidup.Sebuah terapi kanker adalah pendekatan baru untuk terapi gen.Terapi gen manusia ( 1 ) telah terbukti efektif tidak hanya dengan kanker, tapi juga dengan banyak jenis lain dari penyakit.Kajian ini akan fokus pada pendekatan baru untuk terapi gen kanker pada umumnya dan kanker payudara pada tertentu.

Terapi gen kanker dapat didefinisikan sebagai pengiriman gene(s) untuk sel-sel kanker dalam tubuh. Gen ini kemudian harus masukkan sel kanker dan memiliki efek terapeutik langsung atau tidak langsung pada orang. Pengiriman terapi gen melibatkan penggunaan kendaraan pengangkut, vektor, yang dapat secara khusus ditargetkan untuk jaringan kanker atau sel yang disebut. Untuk efek terapeutik optimal persyaratan tertentu yang harus dipenuhi oleh vektor dan gene(s) untuk dibebaskan: i) vektor harus memenuhi persyaratan ketat seperti memiliki efisiensi transfeksi tinggi, vektor ii) yang harus secara khusus menargetkan sel-sel tumor yang termasuk metastasis sel, iii) untuk ekspresi gen yang optimal harus dikontrol gen yang dapat dikombinasikan dengan urutan sesuai promoterenhancer

Metode pengiriman gen dapat diklasifikasikan sebagai vektor virus (2,3) dan nonviral vektor (4,5). Tabel 1 menunjukkan distribusi vektor yang saat ini sedang digunakan dalam uji klinis terapi gen klinis. Meskipun tabel daftar vektor terlibat dalam semua percobaan terapi gen, baik dalam kemajuan atau selesai, pada lebih dari 60% dari percobaan ini penyakit target adalah/adalah kanker [situs web resmi dari Journal of gen Medicine (6)]. Dilihat dari tabel 1, vektor virus (71.8%) lebih sering digunakan daripada nonviral vektor (24.4%). Vektor virus memiliki efisiensi transfeksi yang lebih tinggi dibandingkan dengan vektor nonviral. Efisiensi transfeksi adalah salah satu perhatian utama dalam terapi gen kanker karena tujuan keseluruhan adalah untuk transduce sel-sel kanker sebanyak mungkin dengan gene(s) terapeutik yang (Lihat tabel 2). Retrovirus adalah vektor virus yang paling umum saat ini digunakan untuk terapi dalam semua penyakit, termasuk kanker. Retrovirus paling umum berasal dari Moloney tumore leukemia virus. Di beberapa hadir

pengembangan pseudotyped retrovirus (7). Adenovirus adalah yang kedua paling sering digunakan vektor. Meskipun berguna, mereka menyebabkan reaksi imunologi dan inflamasi yang dapat membuat ulang administrasi mustahil. Penggunaan adenoviral vektor serotipe yang berbeda dapat membantu untuk memecahkan masalah ini. Perbaikan yang masih sedang dibuat di adenoviral vektor, sebagai generasi ketiga adenoviral gutless vektor telah diperkenalkan yang tanpa semua gen virus (8). Namun, sangat bergantung pada virus penolong untuk berfungsinya. Saat ini ada beberapa upaya untuk menggabungkan keuntungan dari retrovirus dan adenovirus melalui virus chimeric (9). Selain itu, vektor kurang sering digunakan, virus Adeno terkait (10), terintegrasi di lokus pada kromosom manusia 19, yang tidak kode untuk setiap penting gen (11). Herpes simplex virus (12) berbasis vektor juga sedang bekerja di beberapa pendekatan untuk terapi gen

Meskipun vektor nonviral jarang digunakan mereka memiliki beberapa keuntungan yang sangat kritis atas vektor virus. Lipofection, liposom sebuah dimediasi transfer gen (13-16), adalah ketiga paling umum sistem vektor dalam terapi gen uji klinis. Selain itu, transfer DNA telanjang (17) oleh sarana fisik adalah metode lain untuk transfer gen. Perbandingan antara vektor virus dan vektor nonviral ditampilkan dalam tabel 3. Sementara vektor virus memiliki banyak kelemahan atas nonviral vektor, fakta bahwa vektor virus memiliki efisiensi transfeksi yang lebih tinggi membuat mereka lebih baik.

Strategi dalam kanker terapi gen dapat diklasifikasikan menjadi beberapa pendekatan, seperti ada sasaran yang berbeda dan alasan-alasan terlibat

pengiriman gen bunuh diri bunuh diri gen dapat diartikan sebagai gen yang dapat mengubah nontoxic prodrug ke beracun obat.Dengan demikian, hanya sel yang transfected akan dibunuh.Ada beberapa bunuh diri prodrug / gen saat ini terapi obat yang digunakan dalam protokol.Ini termasuk virus herpes simpleks thymidine kinase ( hsv-tk ) / acyclovir ( acv ) atau ganciclovir ( gcv ), dan bakteri atau jamur sitosina deaminase ( cd ) / 5-florocytosine ( 5-fc ) ( 18 ).Terapi gen bunuh diri juga memulai pengamat efek.Ini muncul ketika intracellularly diproduksi beracun obat membunuh target sel kanker dan juga tetangga sel.Fenomena ini mengakibatkan sel unsatisfied tewas di atas transfection efisieOrang lain efek terjadi ketika obat beracun ditransfer melalui celah neuromuskular ( 18,19 ) atau dengan sederhana difusi ( 20 ).Orang lain efek yang sangat bergantung pada gen / prodrug kombinasi dan target sel ( 21 ).

b) pengiriman gen supresor tumor banyak tumor supresor gen hilang selama oncogenesis (22). Membangun kembali efek terapeutik p53 (23) dan peningkatan kuantitas kinase bergantung (CDK) inhibitor pendekatan umum dalam terapi gen kanker. Ketika mengevaluasi efek terapeutik p53, p21WAF1/CIP1 (p21) dan p16INK4a (p16) dibandingkan dalam sel-sel kanker; P16 dan p21 memberikan efek supresor tumor yang lebih tinggi daripada p53 (24). Selain itu, saat efektivitas kinase bergantung siklin dibandingkan, tampaklah bahwa sel-sel transfected dengan p16, p18INK4c (hal 18) dan p27KIP2 (hal 27) disebabkan jumlah terbesar dari kematian sel dan induksi apoptosis. Selain itu, pembentukan semula p27 dan p16 adalah yang paling efektif dalam menghambat pertumbuhan

kanker (25). Namun, dalam hal p27, juga dilaporkan bahwa p27 mutan diinduksi penindasan pertumbuhan tumor lebih kuat dan penyumbatan G1-S dalam semua baris sel kanker yang diuji dibandingkan dengan jenis liar (26)

c.Angiogenesis merupakan target yang baik untuk terapi gen kanker karena tumor padat tidak bisa tumbuh melampaui 2-3 mm tanpa oksigen dan nutrisi yang cukup. Beberapa kesamaan gen anti-angiogenik adalah reseptor faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), angiostatin, tertentu sitokin dan jaringan inhibitor membentuk matriks logamprotein (27). Agen anti-angiogenesis paling umum melibatkan penggunaan untai antisense dan ribozymes terhadap produk gen angiogenik sel tumor.

d.

Immunotherapy tergantung pada peningkatan pengakuan kebal terhadap antigen tumor melalui hubungan mereka dengan molekul seperti sitokin (28). Sitokin yang telah dievaluasi dalam kanker imunoterapi adalah IL-1, 2, 4, 5 dan 12, INF-a, b, dan g, GMCSF dan TNF (29). Karena aplikasi sistemik sitokin ini tidak mungkin untuk diperpanjang jangka waktu pada pasien, karena banyak efek samping beracun, pemanfaatan gen sitokin dalam terapi gen kanker saat ini adalah pendekatan baru dalam terapi gen kanker.

e.

Oncolytic virus tidak dirancang untuk membawa gen target sel kanker, tetapi bukan untuk melisiskan sel-sel di pasca infeksi. Beberapa virus oncolytic, yang sedang menjalani uji klinis, melibatkan adenovirus mutan ONYX-015 (dl1520), mutan HSV-1 G207, reovirus manusia (ketegangan tipe 3 Dearing), vesicular stomatitis virus (VSV) (30), dan virus Epstein-Barr, dan virus penyakit Newcastle (31). Adenovirus mutan ONYX-015 memiliki mutasi omong kosong dan penghapusan dalam wilayah pengkodean untuk E1B-55 kb, yang dikenal untuk mengikat ke domain transactivation p53 jenis liar dan memblokir aktivitas transcriptional (32). Dengan demikian, virus ini hanya dapat mereplikasi dalam sel-sel mutan p53, mana masuknya ke dalam fasa S diperbolehkan terlepas dari E1B-55 kb status. Namun, sel normal tidak berada dalam bahaya karena mereka memiliki p53 fungsional yang dapat menyebabkan sel penangkapan dan/atau apoptosis berdasarkan infeksi virus. Meskipun hasil dengan ONYX-015 sangat menjanjikan, ada argumen mengenai ketergantungan dari virus itu pada sel p53 status ( 33 ).Sementara kontroversi di onyx- 015 adalah melanjutkan, mempelajari telah berkembang ke tahap ii uji klinis ( 34 ) dan banyak perbaikan pada arus vektor sekarang yang dilaporkan ( 35 )

F ) ribozyme / antisense menargetkan sasaran utama jenis ini strategi terapi adalah pada dna ekspresi tingkat, penurunan ketersediaan mrna untuk terjemahan.Ribozyme menargetkan ( membelah dari dipilih mrna ) ( 36 ) dan antisense ( mengganggu dengan strategi transkripsi ) ( 37 ) konsep yang baru untuk terapi gen aplikasi, terutama mengenai inhibisi dari oncogenes.Kemampuan yang engineered untuk target urutan tertentu membuat mereka sangat menarik untuk terapi gen kanker tertentu.

TARGETTINGUntuk kanker terapi gen, ada dua strategi utama dalam vektor untuk penargetan metastasis dan / atau nonmetastatic sel kanker: saya ) vektor menargetkan, ii ) transcriptional menargetkan.Vektor menargetkan dapat sub-divided hanya menjadi penargetan fisik dan biologi menargetkan.Penargetan fisik tergantung pada rute aplikasi vektor sistem, seperti intra-cancer jaringan.Saat ini hampir semua aplikasi vektor melibatkan penargetan fisik.Apa yang lebih dari tantangan yang mengincar biologis arah itu sendiri.Dalam kasus virus, permukaan vektor dapat diubah sedemikian rupa sehingga sel tumor tropism diperkuat ( 31 ).Strategi yang sama juga berlaku untuk nonviral vektor.Baik melalui permukaan modifikasi atau melalui pembentukan virus-liposome ( virosomes ) chimeras ( 38 ), vektor nonviral menargetkan dapat mencapai.Misalnya, menargetkan sel-sel endotel daripada sel kanker menawarkan sebuah pendekatan potensial untuk pengiriman gen ( anti-angiogenesis ) ( 39 ).Transcriptional menargetkan bertujuan tingkat ekspresi gen, yang dapat dikontrol oleh promotor cocok/penambah unsur-unsur yang unik untuk sel-sel yang ditargetkan (40). Dalam perspektif ini, promotor yang didasarkan pada biologi tumor, Jaringan kekhususan promotor, dan potensi inducibility sedang dipelajari (41). Konsep-konsep virus penargetan (42), termasuk protease penargetan (43) dan beberapa retroviral penargetan strategi (44), dibahas sebelumnya.

Sudah ada beberapa penelitian pada penargetan vektor vektor untuk ekspresi gen dalam sel-sel kanker payudara. Ini telah menunjukkan bahwa dia-4 target, menggunakan vektor retroviral di kanker payudara, dan dia-2 menghasilkan mekanisme yang efektif pengiriman melalui interaksi ligan-diarahkan reseptor (45). Antibodi juga telah digunakan untuk menargetkan eksogen DNA untuk sel-sel kanker payudara melalui erbB2 (46). Pendekatan lain yang penargetan dipekerjakan urutan peraturan hulu dari gen manusia yang lactalbumin dan ovine b-lactoglubin dalam upaya untuk mengendalikan ekspresi gen HSV-tk (47). Para peneliti yang sama diulang pekerjaan mereka menggunakan sistem gen/5-FU Candida albicans CD dan memperoleh hasil paralel (48). Ketika heat shock protein 70 (HSP70) promotor digunakan untuk mengendalikan ekspresi gen HSV-tk, hasil secara in vitro menunjukkan bahwa sel-sel kejutan diperlakukan panas adalah 50.000 kali lebih sensitif terhadap GCV daripada kelompok kontrol (49). Ada banyak demonstrasi penargetan transcriptional sel-sel kanker payudara melalui promotor hibrida, yang direkayasa dari unsur-unsur responsif estrogen, dan juga unsur-unsur responsif hipoksia (50). Dalam mengevaluasi bunuh diri pendekatan terapi gen, sel-sel yang terinfeksi dengan vektor retroviral yang membawa Vericella zoster virus thymidine kinase (VZV-tk) yang menantang terapi gen kanker payudara manusia

dengan prodrug; sangat efektif membunuh keduanya secara in vitro dan pada tikus telanjang athymic diamati (51). Ketika HSV-tk disampaikan melalui vektor adenoviral, menggunakan meningkatkan dosis, hasilnya adalah toksisitas. Namun, ketika gen yang diletakkan di bawah kendali promotor diinduksi tetrasiklin, induksi menyebabkan peningkatan kepekaan untuk GCV (52). Membangun retroviral, yang memiliki kemampuan untuk diri dihapus dalam sel-sel yang memiliki p53 fungsional, membawa gen HSV-tk menunjukkan efektif menghapus diri dan

membunuh sel di kedua normal, dan sel-sel kanker payudara masing-masing, di vivo dan in-vitro di (53).Pengiriman gen supresor tumor sel-sel kanker payudara juga diuji dalam beberapa pengaturan percobaan. Penelitian telah menunjukkan bahwa transfeksi jenis liar p53 gen ke dalam sel-sel yang memiliki bermutasi atau malfunctional p53 tidak berpengaruh pada chemosensitivity; Namun, radiosensitivity adalah sangat dipengaruhi (54). Penelitian lain melibatkan vektor adenoviral sebagai alat-alat pengiriman gen telah menunjukkan bahwa regresi tumor ditingkatkan dengan penambahan doxorubicin (55). Ini hasil konflik dengan hasil studi lain yang melaporkan kombinasi dengan doxorubicin, VP-16 dan paclitaxel tidak bertambah kematian selama terapi gen, tetapi kombinasi dengan p53 eksogen dan radioterapi menunjukkan angka kematian sel kanker meningkat secara in vitro (56). Ketika gen supresor tumor lain, p21, diletakkan di bawah kendali promotor diinduksi tetrasiklin, pertumbuhan sel secara in vitro signifikan dihambat dan volume tumor pada tikus yang jauh lebih kecil (57). Berbagai jalur sel kanker manusia, termasuk tiga payudara kanker sel baris, diuji untuk efek transecting dengan p16. Mereka menunjukkan peningkatan kadar ditandai p16 selama siklus sel penangkapan, tapi ini terjadi hanya dalam sel-sel yang mengungkapkan fungsional pRb endogen (58). Studi tertentu model tikus menunjukkan penghambatan pertumbuhan tumor ketika ekspresi p16 eksogen diberikan (59). Tumor penekan gen pengiriman strategi telah digabungkan dengan lain beberapa rejimen terapi (radioterapi dan kemoterapi) untuk meningkatkan membunuh potensi kanker. Penelitian secara in vitro tertentu menunjukkan p27 akan lebih efektif daripada p16 (60), dan penelitian lain di vivo mengungkapkan peningkatan apoptosis pada sel-sel tumor dan meningkatkan regresi tumor ketika p27 intravena diberikan melalui vektor adenoviral (61). Dari hasil ini, membangun gen fusion baru p16 dan p27 adalah lebih kuat daripada molekul baik secara terpisah (62). Selain langsung membangun kembali fungsi gen supresor tumor, gen tertentu unik untuk kanker payudara, seperti diperkirakan BRCA1, telah ditransfer menggunakan vektor, yang ditunjukkan untuk menjadi efektif dalam mengurangi pertumbuhan sel tumor dan juga meningkatkan proporsi sel akan siklus sel penangkapan (63). Ketika anti kanker strategi anti-angiogenesis, terapi gen biasanya melibatkan penggunaan vektor nonviral untuk terapi gen kanker payudara (64). Hasil pengiriman liposomal endostatin dan angiostatin secara terpisah untuk sel-sel kanker payudara yang tumbuh pada tikus telanjang menunjukkan penghambatan pertumbuhan tumor (65). Pengiriman TIMP-2, melalui vektor adenoviral, menyebabkan lebih apoptosis sel yang kurang bervaskularisasi (66). Namun, TIMP-4, bila diberikan otot, mengakibatkan efek stimulasi pada payudara tumorigenesis (67)

Remedies untuk imunoterapi kanker payudara telah berusaha. Satu agen adalah TNFa, yang merupakan racun ketika berdifusi langsung ke dalam darah. Mutan TNFa, ketika dikirim melalui vektor adenoviral dan diberikan langsung ke sel-sel tumor diinduksi efek antitumor yang ampuh (68). Dalam fase aku percobaan dari IL-2 pada kanker payudara 8 dan 15 melanoma pasien, hasilnya tidak memuaskan karena satu suntikan vektor adenoviral menghasilkan peradangan dalam mayoritas pasien dan pengurangan dalam ukuran tumor di hanya minoritas pasien (69). Sementara hasil di vivo adenovectors membawa IL-12 menunjukkan penghambatan pertumbuhan tumor tergantung dosis, kelangsungan hidup lama dan penolakan terhadap

tantangan berikutnya dalam model metastasis kanker payudara (70). Sebaliknya, regresi tumor lengkap tidak dirayakan ketika IL-12 disampaikan melalui vektor adenoviral. Namun, ketika hewan model bantalan bilateral tumor disuntik dengan vektor bantalan IL-12 dan chemokime, bersaing regresi di tempat suntikan dalam tumor dan regresi total tumor 60% binatang itu di seberang situs tumor diamati (71). Strategi imunoterapi lain melalui adenoviral vektor juga dibahas sebelumnya (72). Dalam suasana eksperimental, efek dari adenovirus mengekspresikan ribozymes atau antisense konstruksi melawan dia-2/neu dalam model kanker payudara diselidiki. Hasilnya menunjukkan bahwa di kedua tinggi versus rendah dia-2/neu mengungkapkan di vivo sel baris model pertumbuhan sel tumor dan antitumor efek dari vektor adenoviral ribozymeexpressing yang lebih besar daripada antisense yang mengekspresikan setara (73).

.Terapi gen kanker adalah pada titik di mana kebutuhan untuk pengiriman gen optimal vektor telah menjadi tingkat membatasi langkah. Strategi mapan dengan banyak pendekatan yang berbeda; setidaknya pendekatan dan strategi telah mengembangkan lebih cepat daripada optimal vektor. Vektor virus adalah satu langkah maju dalam perlombaan untuk vektor optimal, karena mereka secara alami telah mendapatkan mekanisme terbaik untuk pengiriman gen ke sel-sel lain selama evolusi. Ada banyak laporan pada pengembangan baru vektor virus untuk pengiriman gen, selain yang saat ini digunakan. Fakta yang mencolok adalah bahwa antara vektor-vektor virus yang digunakan dalam aplikasi terapi gen kanker, vektor adenoviral jauh lebih sering digunakan daripada vektor retroviral, meskipun tabel 1 menunjukkan sebaliknya. Namun, salah satu harus diingat bahwa meja mengacu pada semua gen terapi aplikasi. Vektor retroviral lebih sering digunakan ketika penyakit ditargetkan memerlukan koreksi gen, daripada hanya cel

Situasi untuk kanker payudara tidak berbeda dari kanker lainnya. Setiap terapeutik strategi (gen bunuh diri, gen supresor tumor, gen anti-angiogenesis, immunotherapy, oncolytic virus dan ribozyme antisense penargetan) telah berhasil digunakan dalam eksperimen kanker payudara. Ada saat ini penelitian berusaha untuk mengoptimalkan sistem ini untuk terapi pengobatan pada pasien kanker payudara. Berbagai laporan juga menunjukkan bahwa terapi gen dapat digunakan sebagai obat lain dalam gabungan terapi menggunakan saat ini rezim terapeutik. Pengenalan gen supresor tumor eksogen dapat dikombinasikan dengan baik kemoterapi dan/atau radioterapi, seperti dalam kasus p53 (74) dan p14, yang ditampilkan untuk mengurangi resistensi obat (75). Selain itu, tidak hanya dapat pendekatan terapeutik yang berbeda ini dikombinasikan untuk memberikan terapi yang optimal, diperkirakan bahwa akan ada penurunan efek samping beracun bagi pasien. Contoh tersebut juga bisa mencakup strategi bunuh diri dan imunoterapi

Mekanisme terapi gen, dalam teori, sangat menarik karena seseorang dapat menargetkan semua sel-sel kanker dalam tubuh dan berusaha untuk menghancurkan mereka. Selain itu, memperkenalkan gen vektor akan dormantly perjalanan dalam peredaran darah setelah pemberian cairan intravena dan terus mencari sel-sel kanker untuk menghancurkan selama jangka waktu yang terbatas. Di masa depan, sangat mungkin bahwa orang akan diperlakukan dengan membawa vektor khusus Gen-gen tertentu yang akan dirancang melawan kanker tertentu mereka sendiri. Jadi hari kemajuan s dapat menyebabkan perkembangan spesifik jenis baru vaksin kanker dan terapi kanker dalam waktu dekat (77)