SKRIPSI KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM …repository.unair.ac.id/46/1/FF.F.2-15 Pur k.pdfobat hidrofobik dan memiliki target spesifik dalam tubuh. Karakteristik liposom dapat dipengaruhi

SKRIPSI

KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING KURKUMIN YANG DIBUAT DARI

EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN HYDROGENATED EGG

PHOSPHATIDYLCHOLINE

NI LUH WAHYU PURNAMI

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA DEPARTEMEN FARMASETIKA

SURABAYA 2015

ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga

SKRIPSI KARAKTERISASI SISTEM... NI LUH WAHYU PURNAMI

SKRIPSI

KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING KURKUMIN YANG DIBUAT DARI

EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN HYDROGENATED EGG

PHOSPHATIDYLCHOLINE

NI LUH WAHYU PURNAMI

NIM : 051111006

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA DEPARTEMEN FARMASETIKA

SURABAYA 2015



LEMBAR PERSETUJUAN

PUBLIKASI KARYA ILMIAH

Demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya menyetujui skripsi/karya ilmiah

saya, dengan judul: KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING

KURKUMIN YANG DIBUAT DARI EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN

HYDROGENATED EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE untuk dipublikasikan atau

ditampilkan di internet, digital library Perpustakaan Universitas Airlangga atau

media lain untuk kepentingan akademik sebatas sesuai dengan Undang-Undang Hak

Cipta.

Demikian pernyataan persetujuan publikasi skripsi/karya ilmiah ini saya buat

dengan sebenarnya.

Surabaya, 17 September 2015

Ni Luh Wahyu Purnami

NIM : 051111006



SURAT PERNYATAAN

Saya yang bertandatangan di bawah ini,

Nama : Ni Luh Wahyu Purnami

NIM : 051111006

Fakultas : Farmasi

menyatakan bahwa sesungguhnya skripsi/karya ilmiah yang saya tulis dengan judul:

KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING KURKUMIN YANG

DIBUAT DARI EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN HYDROGENATED

EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE

adalah benar-benar merupakan hasil karya saya sendiri. Apabila di kemudian hari

diketahui bahwa skripsi/karya ilmiah ini menggunakan data fiktif atau merupakan

hasil plagiarisme, maka saya bersedia menerima sanksi berupa pembatalan kelulusan

dan atau pencabutan gelar yang saya peroleh.

Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dipergunakan sebagaimana

mestinya.

Surabaya, 17 September 2015

Ni Luh Wahyu Purnami NIM : 051111006



Lembar Pengesahan

KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING KURKUMIN YANG DIBUAT DARI EGG

PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN HYDROGENATED EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE

SKRIPSI

Dibuat untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi

pada Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

2015

Oleh :

NI LUH WAHYU PURNAMI NIM : 051111006

Skripsi ini telah disetujui oleh :

Pembimbing Utama Pembimbing Serta

Helmy Yusuf,SSi. M.Sc., Ph.D., Apt. Dr. Retno Sari, M.Sc.,Apt. NIP. 19790715 200312 1 002 NIP. 19630810 198903 2 001



vi

KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas

segala berkat dan karunia-Nya sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi

dengan judul “KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING

KURKUMIN YANG DIBUAT DARI EGG

PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN HYDROGENATED EGG

PHOSPHATIDYLCHOLINE” dengan sebaik-baiknya untuk memenuhi

syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas

Airlangga.

Skripsi ini dapat terselesaikan tidak lepas karena bantuan dan

dukungan dari semua pihak, untuk itu saya menyampaikan rasa terima kasih

yang dalam dan tulus kepada :

1. Bapak Helmy Yusuf, SSi. M.Sc., Ph.D., Apt. selaku dosen

pembimbing utama yang telah mendedikasikan waktu dan tenaga

dalam membimbing dan memberikan banyak ilmu, masukan,

motivasi dan nasehat sehingga skripsi/karya ilmiah ini dapat

terselesaikan dengan baik dan tepat waktu.

2. Ibu Dr. Retno Sari, M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbing serta

yang telah meluangkan waktu membimbing dan memberikan ilmu,

motivasi, serta dukungan sehingga skripsi/karya ilmiah ini selesai

tepat waktu.

3. Bapak Prof.Dr. Moh. Nasih, SE., MT., Ak selaku Rektor yang telah

memberikan kesempatan untuk menyelesaikan program pendidikan

sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.


SKRIPSI KARAKTERISASI SISTEM...NI LUH WAHYU PURNAMI

vii

4. Ibu Dr. Hj. Umi Athijah, M.S., Apt.,selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga yang telah memberikan kesempatan untuk

menyelesaikan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas

Airlangga.

5. Ibu Dra. Hj. Esti Hendradi, Apt., M.Si, Ph.D selaku Ketua

Departemen Farmasetika atas nasehat dan bantuan yang diberikan

sehingga penelitian ini terlaksana dengan baik.

6. Bapak Dr.H. Achmad Fuad, Drs., MS, Apt selaku Ketua

Laboratorium SATREPS ITD Unair, yang telah menyediakan sarana

dan fasilitas selama menyelesaikan penelitian ini.

7. Ibu Dra. Tutiek Purwanti, M.Si., Apt dan Ibu Dewi Melani Hariyadi,

S.Farm., M.Phil., Ph.D., Apt selaku dosen penguji yang telah

memberikan masukan dan saran demi kesempurnaan skripsi/karya

ilmiah ini.

8. Bapak Drs. Robby Sondakh M.S., Apt selaku dosen wali saya yang

telah membimbing selama melaksanakan program pendidikan

sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.

9. Kedua orang tua saya, Drs. I Made Purna M.Pd dan Ni Putu

Iswahyuni,S.Pd yang selalu mendoakan dan memberikan dukungan

selama menempuh perkuliahan dan menyelesaikan skripsi/karya

ilmiah ini. Adik saya, I Made Bayu Purnama dan I Komang Naditya

Purnama, beserta keluarga besar yang selalu memberikan motivasi.

10. Seluruh staf dosen pengajar Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

yang telah mengajarkan ilmu selama berkuliah di Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga.



viii

11. Seluruh staf TDC Bu Atiek, Bu Mirna, Bu Lidya, Bu Ida, Mbak

Indah dan Pak Yadi yang telah membantu selama bekerja di

Laboratorium SATREP.

12. Seluruh staf non kependidikan Fakultas Farmasi Universitas

Airlangga, khususnya Bapak Harmono, Bapak Suprijono, Mbak

Nawang, dan Ibu Ari untuk bantuan yang diberikan selama

menyelesaikan skripsi/karya ilmiah ini.

13. Teman-teman skripsi “Liposom” : Erlyn dan Adhe, terima kasih atas

kerja sama dan bantuan selama penelitian.

14. Teman-teman CTM, Tirza, Alfi, Uul, Nadiyah, serta teman-teman

Fanatik 2011: Anistya, Rossy, Ria Puspita, Aning, Devil, Tita, Devi,

Ratih, Mitchelini, Hadi dan Fadhil yang telah menemani dalam suka

maupun duka selama penelitian.

15. Semua pihak yang telah mendukung yang tidak dapat saya sebutkan

satu persatu. Terima kasih atas bantuan yang diberikan hingga

skripsi ini dapat terselesaikan.

Saya menyadari sepenuhnya bahwa penelitian ini jauh dari

sempurna. Oleh karena itu, semua masukan untuk penyempurnaan

penelitian ini akan saya terima dengan senang hati. Harapan saya, semoga

di masa mendatang penelitian ini dapat bermanfaat bagi pengembangan

ilmu pengetahuan dan teknologi.

Surabaya, 10 Agustus 2015

Penulis




ix

RINGKASAN

KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM KERING KURKUMIN YANG DIBUAT DARI EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE DAN

HYDROGENATED EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE Ni Luh Wahyu Purnami

Kurkumin merupakan senyawa polifenol yang memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi, antibakteri, antifungal, antikanker, antispasmodik, antioksidan, antidiabetes, dan hepatoprotektor. Kurkumin termasuk dalam Biopharmaceutical Classification System (BCS) kelas IV karena kurkumin memiliki kelarutan dalam air dan permeabilitas rendah. Penggunaan kurkumin masih sangat terbatas karena kurkumin dalam tubuh mengalami absorpsi rendah, metabolisme cepat yang mengakibatkan aktivitas biologis kurang optimal dan bioavalabilitas dalam tubuh rendah. Salah satu metode yang digunakan untuk meningkatkan bioavailabilitas kurkumin adalah sistem penghantaran liposom yang mampu untuk mengenkapsulasi bahan obat hidrofobik dan memiliki target spesifik dalam tubuh. Karakteristik liposom dapat dipengaruhi oleh komposisi bahan penyusun dan metode pembuatan yang digunakan. Berdasarkan komposisi, fosfolipid merupakan komponen utama yang dapat menentukan sifat fisika liposom berupa rigiditas, fluiditas dan muatan lapisan membran yang dapat mempengaruhi ukuran serta jumlah bahan yang dapat dienkapsulasi. Sedangkan perbedaan metode pembuatan liposom akan menentukan jenis liposom yang akan terbentuk. Dalam penelitian ini, digunakan fosfolipid yang termasuk kelompok fosfatidilkolin yaitu Egg Phosphatidycholine (EPC) yang berasal dari alam dan Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC) yang dibuat secara sintetik. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui fosfolipid yang dapat digunakan dalam formulasi liposom kering kurkumin. Selain fosfolipid, bahan tambahan yang digunakan dalam pembuatan liposom ini yaitu kolesterol dan TPGS untuk meningkatkan stabilitas liposom. Liposom dibuat dengan metode thin-film hydration dengan melarutkan semua bahan dengan pelarut kloroform:metanol (9:1) yang selanjutnya diuapkan dengan rotavapor selama 1 jam pada suhu 45°C dengan tekanan 320 mbar. Lapisan tipis lipid yang terbentuk dihidrasi dengan larutan sukrosa 10% dalam PBS pH 7,4 pada suhu 60°C. Liposom cair yang terbentuk selanjutnya disonikasi dengan waterbath sonicator selama 5 menit dan didispersikan ke dalam gel HPMC. Selanjutnya dikeringkan menggunakan oven pada suhu 40ºC selama 2 hari. Liposom



x

yang terbentuk kemudian dikarakterisasi dengan menggunakan Particle Size Analyzer, Differential Thermal Analysis (DTA), Difraksi Sinar-X (XRD) dan Scanning Electron Microscope (SEM).

Pengujian ukuran partikel terhadap liposom cair menggunakan Particle Size Analyzer menunjukkan ukuran rata-rata Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L secara berturut-turut 2396,5 ± 979,4nm dan 2464,2 ± 1813,0nm dengan nilai Polydispersity Index (PI) secara berturut-turut 0,517 ± 0,114 dan 0,370 ± 0,203. Hasil tersebut menunjukkan ukuran liposom yang besar dan sesuai dengan metode thin-film hydration yang menghasilkan liposom MLV dengan ukuran 0,1-15µm. Sedangkan nilai PI>0,3 menunjukkan bahwa distribusi ukuran liposom yang dihasilkan masih heterogen.

Karakterisasi liposom kering kurkumin dilakukan dengan uji sifat termal, pola difraksi dan pengamatan SEM. Termogram DTA Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L memperlihatkan bahwa tidak terdapat pemisahan fase antara kurkumin dengan bahan penyusunnya dan hanya terdapat puncak endotermik sukrosa yang digunakan sebagai matriks. Hal tersebut didukung dengan hasil pengamatan pola difraksi sinar-X. Difraktogram Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L menunjukkan tidak terdapat puncak yang menandakan struktur kristal pada sistem liposom. Hal ini mengindikasikan bahwa liposom tersebut telah berbentuk amorf. Karakterisasi morfologi Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L menggunakan SEM memperlihatkan bahwa liposom yang dihasilkan kedua formula tersebut memiliki bentuk sferis.

Hasil karakterisasi Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L menunjukkan telah terbentuk sistem liposom sehingga dapat disimpulkan bahwa kedua fosfolipid baik EPC dan HEPC dapat digunakan dalam formulasi liposom kering kurkumin karena dapat menghasilkan sistem berbentuk amorf dengan ketercampuran yang baik.



xi

ABSTRACT

CHARACTERIZATION OF DRIED CURCUMIN LIPOSOME MADE FROM EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE AND HYDROGENATED EGG PHOSPHATIDYLCHOLINE


Curcumin has poor solubility in aqueous media and permeability through membrane, so it has been classified as BCS Class IV. Liposome encapsulation of curcumin would increase its solubility and bioavailability. This study aimed to investigate the physical characterization of curcumin liposome such as particle size, thermal properties, X-ray diffraction pattern, and morphology. Egg Phosphatidylcholine (EPC) and Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC) were selected as phospholipids to form different types of curcumin-loaded liposomes: Cur-EPC-L (curcumin-loaded EPC liposome) and Cur-HEPC-L (curcumin-loaded HEPC liposome). Thin-film hydration method was selected to prepare liposome. Curcumin liposome was dried prior to characterization. The physical properties of different liposome were investigated in follow: the average particle sizes of the two types of curcumin liposome were 2396.5 ± 979.4nm (Cur-EPC-L) and 2464.2 ± 1813.0nm (Cur-HEPC-L), respectively. The result of thermal analysis showed that there was not separation of curcumin among all materials in both formulas. The pattern of X-ray diffraction showed that there was not crystallization of materials in both the formula, indicated that curcumin was in amorphous state. Based on morphology results, both liposome formulas have a spherical shape. These results suggest that EPC and HEPC could be used in curcumin liposome formulation as they have good physical characteristics and potentially developed to increase the bioavailability of curcumin. Keywords: liposome, curcumin, phosphatidylcholine, EPC, HEPC.



xii

DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................ vi

RINGKASAN .......................................................................................... ix

ABSTRACT ............................................................................................ xi

DAFTAR ISI .......................................................................................... xii

DAFTAR TABEL .................................................................................. xv

DAFTAR GAMBAR ............................................................................ xvi

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................ xvii

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ........................................................................ 5

1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................... 6

1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................... 6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 7

2.1 Tinjauan Kurkumin ...................................................................... 7

2.2 Tinjauan Liposom ........................................................................ 9

2.2.1 Definisi Liposom ................................................................. 9

2.2.2 Klasifikasi Liposom .......................................................... 10

2.2.3 Komponen Penyusun Liposom ......................................... 11

2.2.3.1 Fosfolipid .................................................................. 12

2.2.3.2 TPGS ........................................................................ 15

2.2.3.3 Kolesterol .................................................................. 17

2.2.4 Tujuan Liposom ................................................................ 18

2.2.5 Metode Pembuatan Liposom ............................................. 19

2.2.5.1 Thin Film Hydration ................................................. 20



xiii

2.2.5.2 Reverse-Phase Evaporation ...................................... 20

2.2.5.3 Ethanol Injection ...................................................... 21

2.3 Tinjauan Pengeringan..................................................................... 22

2.3.1 Tinjauan Lioprotektan ....................................................... 22

2.3.2 Tinjauan HPMC ................................................................ 23

2.4 Karakterisasi Liposom ................................................................... 25

2.4.1 Particle Size Analyzer (PSA) ............................................ 25

2.4.2 Differential Thermal Analysis (DTA) ............................... 26

2.4.3 X-Ray Diffraction (XRD) .................................................. 27

2.4.4 Scanning Electron Microscope (SEM) .............................. 28

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................... 29

3.1 Uraian Kerangka Konseptual ..................................................... 29

3.2 Skema Kerangka Konseptual ..................................................... 31

BAB IV METODE PENELITIAN ....................................................... 32

4.1 Bahan dan Alat Penelitian ......................................................... 32

4.1.1 Bahan Penelitian ............................................................... 32

4.1.2 Alat-alat Penelitian ........................................................... 32

4.2 Rancangan Penelitian................................................................. 33

4.3 Metode Penelitian ...................................................................... 33

4.3.1 Rancangan Formula Liposom Kering Kurkumin .............. 33

4.3.2 Pembuatan Liposom Kering Kurkumin............................. 34

4.4 Karakterisasi Sifat Fisika Sistem Liposom Kering Kurkumin ... 35

4.4.1 Particle Size Analyzer (PSA) ............................................ 35

4.4.2 Differential Thermal Analysis (DTA) ............................... 35

4.4.3 X-Ray Diffraction (XRD) .................................................. 37

4.4.4 Scanning Electron Microscope (SEM) .............................. 37



xiv

BAB V HASIL PENELITIAN .............................................................. 38

5.1 Hasil Pemeriksaan Particle Size Analyzer (PSA) ...................... 38

5.2 Hasil Pemeriksaan Differential Thermal Analysis (DTA) ......... 40

5.3 Hasil Pemeriksaan X-Ray Diffraction (XRD) ............................ 43

5.4 Hasil Pemeriksaan Scanning Electron Microscope (SEM) ....... 46

BAB VI PEMBAHASAN ...................................................................... 47

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .............................................. 53

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 54

LAMPIRAN ........................................................................................... 61



xv

DAFTAR TABEL

Tabel IV.1 Formula liposom kering kurkumin....................................... 34

Tabel V.1 Hasil pemeriksaan ukuran partikel liposom cair Cur-EPC-L

dan Cur-HEPC-L ................................................................. 38

Tabel V.2 Puncak endotermik pada termogram DTA terhadap komponen

penyusun, campuran fisik (CF) dan sistem Cur-EPC-L ....... 41

Tabel V.3 Puncak endotermik pada termogram DTA terhadap komponen

penyusun, campuran fisik (CF) dan sistem Cur-HEPC-L .... 42



xvi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Struktur Kimia Kurkumin ................................................ 7

Gambar 2.2 Struktur Liposom ........................................................... 10

Gambar 2.3 Klasifikasi liposom ......................................................... 11

Gambar 2.4 Struktur liposom dengan kolesterol dan TPGS .............. 12

Gambar 2.5 Struktur fosfolipid .......................................................... 13

Gambar 2.6 Struktur EPC .................................................................. 14

Gambar 2.7 Struktur HEPC ............................................................... 15

Gambar 2.8 Struktur TPGS ................................................................ 16

Gambar 2.9 Struktur Kolesterol ......................................................... 18

Gambar 2.10 Mekanisme water replacement lioprotektan .................. 23

Gambar 2.11 Struktur HPMC .............................................................. 24

Gambar 3.1 Skema Kerangka Konseptual ......................................... 31

Gambar 4.1 Skema Pembuatan Liposom Kering Kurkumin .............. 36

Gambar 5.1 Sistem liposom cair sebelum dan sesudah pengecilan ukuran

partikel ........................................................................... 39

Gambar 5.2 Termogram DTA komponen penyusun, campuran fisik

dan Cur-EPC-L. .............................................................. 40

Gambar 5.3 Termogram DTA komponen penyusun, campuran fisik

dan Cur-HEPC-L. ........................................................... 42

Gambar 5.4 Difraktogram sinar-X komponen penyusun, campuran

fisik dan Cur-EPC-L....................................................... 44

Gambar 5.5 Difraktogram sinar-X komponen penyusun, campuran

fisik dan Cur-HEPC-L. ................................................... 45

Gambar 5.6 Hasil pemeriksaan morfologi Cur-EPC-L dengan SEM 46

Gambar 5.7 Hasil pemeriksaan morfologi Cur-HEPC-L dengan SEM46



xvii

DAFTAR LAMPIRAN

1. Certificate of Analysis Bahan Penelitian EPC .............................. 61

2. Certificate of Analysis Bahan Penelitian HEPC............................ 63

3. Termogram DTA Kurkumin dan EPC .......................................... 65

4. Termogram DTA HEPC dan Kolesterol ....................................... 66

5. Termogram DTA TPGS dan Sukrosa ........................................... 67

6. Termogram DTA HPMC dan Campuran Fisik Cur-EPC-L ......... 68

7. Termogram DTA Campuran Fisik Cur-HEPC-L dan Cur-EPC-L 69

8. Termogram DTA Cur-EPC-L ....................................................... 70

9. Difraktogram Sinar-X Kurkumin ................................................. 71

10. Difraktogram Sinar-X EPC .......................................................... 73

11. Difraktogram Sinar-X HEPC........................................................ 74

12. Difraktogram Sinar-X TPGS ........................................................ 75

13. Difraktogram Sinar-X Kolesterol ................................................. 76

14. Difraktogram Sinar-X Sukrosa ..................................................... 78

15. Difraktogram Sinar-X HPMC ...................................................... 80

16. Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-EPC-L ..................... 81

17. Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-HEPC-L .................. 83

18. Difraktogram Sinar-X Cur-EPC-L ............................................... 85

19. Difraktogram Sinar-X Cur-HEPC-L ............................................ 86

20. Hasil Pemeriksaan SEM Cur-EPC-L ........................................... 87

21. Hasil Pemeriksaan SEM Cur-HEPC-L ......................................... 88



1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kurkumin merupakan senyawa polifenol yang memiliki berbagai

aktivitas biologis dan farmakologis, diantaranya sebagai antiinflamasi,

antibakteri, antifungal, antikanker, antispasmodik, antioksidan, antiHIV,

antidiabetes, dan hepatoprotektor (Banerjee et al., 2004; Aggarwal et al.,

2007; Sun et al., 2010; Mathews et al., 2012). Penggunaan kurkumin masih

sangat terbatas karena kurkumin dalam tubuh mengalami absorpsi yang

rendah, metabolisme yang cepat yang mengakibatkan aktivitas biologisnya

kurang optimal dan bioavalabilitas dalam tubuh rendah (Pandelidou et al.,

2011; Chen et al., 2012). Selain itu kurkumin memiliki kelarutan dan

permeabilitasnya yang rendah, sehingga kurkumin diklasifikasikan ke

dalam golongan Biopharmaceutical Classification System (BCS) kelas IV

(Bansal et al., 2010; Wahlang et al., 2011). Beberapa metode telah

digunakan untuk meningkatkan bioavailabilitas kurkumin antara lain sistem

penghantaran liposom, nanopartikel, dispersi padat, dan nanoemulsi

(Aggarwal et al., 2007; Zhongfa et al., 2007).

Dari berbagai jenis sistem penghantaran tersebut, liposom dapat

digunakan sebagai penghantaran kurkumin yang berpotensi dalam

meningkatkan bioavailabilitasnya. Liposom adalah vesikel buatan yang

berukuran kecil dengan diameter 20nm hingga lebih dari 1µm, terdiri dari

membran fosfolipid bilayer, memiliki bentuk spheris yang terbentuk secara



2

spontan ketika lipid tertentu dihidrasi ke dalam media air (Doherty et al.,

2004; Mansoori dan Agrawal, 2012; Yang et al., 2011). Sistem

penghantaran liposom banyak digunakan karena kelebihan utama liposom

yang mampu untuk mengenkapsulasi bahan obat yang hidrofilik dan

hidrofobik, memiliki target yang spesifik dalam tubuh, dapat mengubah

sifat farmakokinetik dan biodistribusi bahan aktif dengan cara delayed

clearance, memiliki waktu sirkulasi intravaskular yang panjang, dan tahan

terhadap enzim yang terdapat di dalam mulut dan lambung, larutan alkali,

cairan getah lambung, garam empedu, dan flora usus, serta radikal bebas

(Akbarzadeh et al., 2013; Mozafari, 2005; Pandelidou et al., 2011; Yang et

al., 2011). Oleh karena itu, kurkumin diharapkan dapat terlindungi dari

oksidasi dan degradasi sehingga sifat protektif tersebut akan tetap utuh

hingga bahan aktif dapat dihantarkan pada target organ.

Karakteristik fisika liposom dapat dipengaruhi oleh komposisi

bahan penyusun membran liposom dan metode pembuatan yang digunakan.

Berdasarkan komposisi, fosfolipid merupakan komponen paling utama yang

dapat berasal dari alam maupun sintetik dan menentukan sifat fisika

liposom berupa rigiditas, fluiditas dan muatan lapisan membran yang

terbentuk, serta dapat melakukan self-assembly dalam mengenkapsulasi

suatu bahan aktif sehingga akan mempengaruhi ukuran serta jumlah bahan

yang dapat dienkapsulasi (Akbarzadeh et al., 2013; Chen et al., 2012; Khan

et al., 2013). Sedangkan perbedaan metode pembuatan liposom akan

menentukan jenis liposom yang akan terbentuk.

Dalam penelitian ini, digunakan fosfolipid yang termasuk

kelompok fosfatidilkolin yaitu Egg Phosphatidycholine (EPC) yang berasal

dari alam dan Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC) yang dibuat



3

secara sintetik. Secara umum, fosfatidilkolin tidak jenuh seperti EPC

banyak digunakan dalam pembuatan sistem liposom dikarenakan memiliki

keuntungan yaitu mudah didispersikan dalam air, larut dalam etanol dan

bersifat permeabel yang memudahkan dalam menembus membran sel

(Barel, 2003; Crommelin et al., 2001). Adapun kekurangan yang dimiliki

oleh EPC antara lain memiliki suhu transisi fase di bawah 0oC, mudah

mengalami oksidasi, dan memiliki laju pelepasan yang cepat (Barel, 2003;

Chen et al., 2012). Kekurangan EPC diatasi dengan menghidrogenasi ikatan

rangkap pada bagian rantai asam lemak sehingga menyebabkan rantai asam

lemak menjadi jenuh. Perubahan ikatan tersebut menghasilkan

fosfatidilkolin yang disebut HEPC. HEPC akan membuat sistem liposom

yang terbentuk menjadi lebih stabil terhadap oksidasi, memiliki struktur

yang rigid, suhu transisi fase berada pada rentang 50-60oC, dan memiliki

laju pelepasan yang lebih lama sehingga dapat meningkatkan kestabilan

liposom dalam darah (Barel, 2003; Crommelin et al., 2001; Huang, et al.,

2003; Sailaja dan Sahikala, 2014).

Metode yang dapat digunakan untuk membuat liposom sebagai

pembawa obat dapat dilakukan melalui dua cara, yaitu melalui passive

loading technique dan active loading technique (Mansoori dan Agrawal,

2012). Dalam pembuatan liposom kurkumin ini dipilih metode yang

termasuk passive loading technique yaitu metode thin-film hydration karena

merupakan metode yang sesuai dengan bahan obat dengan sifat lipofilik dan

prosesnya sederhana (Monteiro et al., 2014). Metode tersebut akan

menghasilkan lapisan tipis yang selanjutnya dihidrasi dengan larutan

penghidrasi maka akan terbentuk liposom cair (Samad et al., 2007).



4

Setelah terbentuk liposom cair, sistem tersebut sangat rentan

mengalami degradasi, fusi, agregasi pada vesikel, sehingga terjadi

perubahan distribusi ukuran partikel serta kebocoran bahan yang

terenkapsulasi dalam liposom pada saat penyimpanan sehingga

menyebabkan kestabilan liposom cair menjadi rendah dan memiliki waktu

paruh yang pendek (Akbarzadeh, et al., 2013; Aso dan Yoshioka, 2005;

Samad et al., 2007). Perubahan bentuk liposom cair menjadi liposom padat

(kering) dapat menghindarkan berbagai masalah terkait dengan

ketidakstabilan tersebut (Wang, et al., 2006). Proses yang dapat digunakan

untuk mendapatkan bentuk liposom kering yaitu dikeringkan menggunakan

oven.

Pada saat proses pengeringan liposom biasanya mengalami

tekanan yang bervariasi selama proses. Oleh karena itu, dibutuhkan bahan

tambahan yang dapat digunakan untuk melindungi liposom terhadap

tekanan selama proses tersebut yang berupa lioprotektan. Lioprotektan

dapat berupa gula atau gula alkohol yang dapat menggantikan posisi air dan

berfungsi menjaga kestabilan fisik liposom. Dalam penelitian ini digunakan

sukrosa yang efektif mencegah agregasi dengan menjaga jarak antar fosfat

dan mengurangi ikatan van der Waals rantai lipid sehingga sukrosa akan

mengurangi interaksi air dengan fosfolipid dan pada akhirnya akan

menggantikan air (Abdelwahed, 2006; Chen et al., 2010). Selain itu, proses

pengeringan liposom yang membutuhkan waktu lama yaitu 48jam

kemungkinan menyebabkan liposom yang telah terbentuk mengalami

agregasi sehingga dibutuhkan bahan berupa matriks yang dapat

mempertahankan sistem liposom. Salah satu bahan yang dapat dijadikan



5

sebagai matriks dalam formulasi sediaan yang extended release yaitu

HPMC (Rowe et al, 2009).

Secara umum, penelitian yang akan dilakukan bertujuan untuk

mengetahui pengaruh jenis fosfolipid terhadap karakteristik fisika dari

sistem liposom kering kurkumin yang dibuat dari fosfolipid alam EPC dan

fosfolipid sintetik HEPC. Karakteristik liposom kering kurkumin yang akan

diteliti meliputi pengukuran ukuran partikel, sifat termal, difraksi sinar-X

dan morfologi. Sampai saat ini belum ada penelitian yang dilakukan terkait

pembuatan liposom kering kurkumin dari EPC dan HEPC. Oleh karena itu,

dari penelitian ini diharapkan akan diperoleh informasi tentang jenis

fosfolipid yang optimal sehingga didapat liposom kering kurkumin dengan

mutu fisik yang baik.

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana karakteristik fisika sistem liposom kering kurkumin

yang dibuat dari fosfolipid EPC yang meliputi ukuran partikel, sifat

termal, difraksi sinar-X dan morfologi?

2. Bagaimana karakteristik fisika sistem liposom kering kurkumin

yang dibuat dari fosfolipid HEPC yang meliputi ukuran partikel,

sifat termal, difraksi sinar-X dan morfologi?

3. Apakah EPC dan HEPC yang digunakan dalam formulasi liposom

kering kurkumin dapat menghasilkan sistem dengan mutu fisik

yang baik, meliputi ukuran partikel, sifat termal, difraksi sinar-X

dan morfologi?



6

1.3 Tujuan Penelitian

1. Mengetahui karakteristik fisika sistem liposom kering kurkumin

yang dibuat dari fosfolipid EPC yang meliputi pengukuran ukuran

partikel, sifat termal, difraksi sinar-X dan morfologi.

2. Mengetahui karakteristik fisika sistem liposom kering kurkumin

yang dibuat dari fosfolipid HEPC yang meliputi pengukuran

ukuran partikel, sifat termal, difraksi sinar-X dan morfologi.

3. Mengetahui EPC dan HEPC yang digunakan dalam formulasi

liposom kering kurkumin dapat menghasilkan sistem dengan mutu

fisik yang baik, meliputi ukuran partikel, sifat termal, difraksi

sinar-X dan morfologi.

1.4 Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai acuan

pengembangan formulasi kurkumin terkait pemilihan jenis fosfolipid

terhadap pembuatan sistem liposom kering kurkumin yang dapat

menghasilkan sistem dengan mutu fisik yang baik sehingga dapat

meningkatkan bioavailabilitas kurkumin dalam tubuh serta diperoleh sistem

yang stabil dalam penyimpanan.



7

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan Kurkumin

Kurkumin [1,7-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,6-heptadiene-

3,5-dione] atau diferuloylmethane adalah senyawa aktif yang didapat dari

ekstraksi bagian rimpang tanaman Curcuma longa yang memiliki aktivitas

farmakologi yang luas antara lain sebagai antioksidan, antiinflamasi,

antimikroba, antitumor, antiproliferatif, antimetastatik, antiangiogenik,

antidiabetes, hepatoprotektif, antiaterosklerosis, antitrombotik, dan

antiartritis (Aggarwal et al., 2006; Bansal, 2011; Xu et al., 2006). Kurkumin

dapat berperan sebagai hepatoprotektor karena memiliki potensi dalam

melindungi hepar dari efek toksik salah satunya akibat dari induksi arsen

(Mathews et al., 2012).

Gambar 2.1 Struktur Kimia Kurkumin (Xu et al., 2006)

Kurkumin berbentuk serbuk dengan warna jingga kekuningan

yang sukar larut dalam air dan eter tetapi larut dalam etanol,

dimetilsulfoksida, aseton, alkali, keton, asam asetat dan kloroform.

Kurkumin memiliki titik lebur pada suhu 183°C. Rumus molekul dari

kurkumin yaitu C21H20O6 dengan berat molekul kurkumin yaitu of 368.37

g/mol (Aggarwal et al., 2006; Chattopadhyay et al., 2004; Sharma et al.,



8

2005). Dengan spektrofotometri, kurkumin memiliki daya serap maksimum

(λmax) dalam metanol pada 420 nm, dengan Hukum Beer dengan kadar

0,5-5,0μg/mL (Aggarwal et al., 2006; Sharma, et al, 2005). Kurkumin

terdegradasi pada pH basa dan membentuk trans-6-(40-hydroxy-30-

methoxyphenyl)-2,4-dioxo-5-hexanal, ferulic acid, feruloylmethane, dan

vanilin dalam 30 menit (Chattopadhyay et al., 2004; Lin et al., 2000;

Sharma, et al, 2005; Xu et al., 2006). Oleh karena itu dibutuhkan

antioksidan yang berupa asam askorbat, N-aceylcysteine atau glutation yang

secara sempurna menghambat degradasi pada media atau buffer fosfat pada

pH diatas 7 (Wang et al., 1997). Sedangkan pada kondisi asam, degradasi

kurkumin lebih lambat dan terjadi perubahan warna menjadi coklat

kemerahan (Wang et al., 1997).

Kurkumin memiliki bioavailabilitas yang buruk yang disebabkan

oleh metabolisme kurkumin yang cepat di hati dan dinding usus dan laju

disolusi yang lambat (Aggarwal et al., 2006; Bansal et al., 2010; Shoba et

al., 1998). Laju disolusi dari kurkumin yang lambat dipengaruhi oleh

kelarutan kurkumin dalam air yang rendah dan juga permeabilitasnya yang

buruk, sehingga kurkumin diklasifikasikan ke dalam BCS kelas IV (Bansal

et al., 2010).

Penelitian oleh Ravindranath menunjukkan bahwa setelah

pemberian 400mg kurkumin secara oral kepada mencit, sangat sedikit

kurkumin yang ditemukan pada liver dan ginjal. Hal tersebut menunjukkan

distribusi kurkumin sangat buruk (Aggarwal et al., 2009). Eliminasi

sistemik dan klirens kurkumin juga merupakan salah satu faktor penting

yang menentukan aktivitas biologis dari kurkumin. Selain itu penelitian lain

menunjukkan bahwa 75% dari kurkumin diekskresi melalui feses dan



9

sangat sedikit yang ditemukan dalam urin mencit yang sebelumnya telah

diberikan kurkumin 1g/kgBB. Metabolit dari kurkumin,

tetrahidrokurkumin, dan bentuk konjugasinya, yaitu kurkumin

glukoronidase mempunyai aktivitas yang kurang aktif dari bentuk kurkumin

awal (Aggarwal et al., 2009).

Berbagai penelitian telah dilakukan untuk memperbaiki

bioavailabilitas dari kurkumin, antara lain penggabungan dengan liposom,

nanopartikel, dispersi padat, kompleks inklusi, nanoemulsi dan metode lain

yang dapat meningkatkan permeabilitas dan meningkatkan resistensinya

terhadap proses metabolisme tubuh (Aggarwal et al., 2010; Zhongfa et al.,

2012).

2.2 Tinjauan Liposom

2.2.1 Definisi Liposom

Liposom berasal dari bahasa Yunani, yaitu lipos yang berarti

lemak dan soma yang berarti tubuh (Khosravi-Darani et al., 2007). Liposom

adalah vesikel buatan yang berukuran kecil, memiliki bentuk spheric, dan

terdiri dari membran fosfolipid bilayer (Yang et al., 2011). Liposom dapat

dibuat dari fosfolipid nontoksik dan kolesterol untuk membentuk satu atau

multi membran bilayer yang memungkinkan dalam mengenkapsulasi

senyawa aktif yang hidrofilik maupun hidrofobik. Ukuran diameter dari

liposom yaitu 20nm hingga lebih dari 1µm yang sangat dipengaruhi oleh

komposisi dan metode pembuatan (O’Doherty et al., 2004; Yang et al.,

2011).



10

Gambar 2.2 Struktur liposom (Nelson et al., 2014)

Pada dekade terakhir, liposom dianggap sebagai model yang ideal

dalam meniru membran biologis sehingga dapat digunakan untuk

menghantarkan obat, vaksin, diagnostik dan senyawa aktif lainnya.

Penjebakan senyawa aktif dalam liposom dapat memperpanjang waktu

sirkulasi dalam tubuh, melindungi dari degradasi metabolik, meningkatkan

deposisi pada jaringan yang terinfeksi dan menurunkan uptake di ginjal,

myocardia, dan otak (Moghimipour & Handali, 2013).

2.2.2 Klasifikasi Liposom

Liposom dapat diklasifikasikan berdasarkan jumlah bilayer yang

terdapat dalam vesikel, ukuran diameter liposom, dan metode pembuatan.

Klasifikasi liposom berdasarkan jumlah bilayer dan ukuran diameternya

adalah yang paling sering digunakan dibandingkan klasifikasi berdasarkan

metode pembuatannya. Berdasarkan jumlah bilayer dan vesikel, liposom

diklasifikasikan sebagai :



11

1. Uni Lamellar Vesicles (ULV) : terdiri dari satu lipid bilayer dan

memiliki ukuran 20nm - 1µm,

dapat dibedakan menjadi :

a. Small Unilamellar Vesicles : memiliki ukuran 20 nm - 100 nm

b. Large Unilamellar Vesicles : memiliki ukuran >100nm - 1µm

2. Multi Lamellar Vesicles (MLV) : memiliki ukuran 0,1 - 15 µm

3. Multi Vesicular Vesicles (MVV) : memiliki ukuran 1,6 – 10 µm

(Doherty et al., 2004; Go´mez-Hens et al., 2005).

Gambar 2.3 Klasifikasi liposom (Go´mez-Hens et al., 2005)

2.2.3 Komponen Liposom

Liposom terutama terdiri dari fosfolipid yang dapat berasal dari

alam atau sintesis. Fosfolipid melakukan peran yang penting dengan sifat

yang amfifilik dan self-assembly untuk mengenkapsulasi suatu agen

terapeutik (Khan, 2013). Komponen penyusun liposom yang lain yaitu

membrane stabilizer, dalam penelitian ini menggunakan kolesterol dan

TPGS sehingga diharapkan dapat mengubah sifat permukaan membran



12

liposom menjadi lebih permeabel. Komponen liposom dengan kolesterol

dan TPGS dapat dilihat pada gambar 2.4.

Gambar 2.4 Struktur liposom dengan kolesterol dan TPGS (d-α-tocopheryl

PEG 1000 succinate) (Nelson et al., 2014)

2.2.3.1 Fosfolipid

Secara umum, liposom dibentuk dari fosfolipid yang secara

biologis bersifat inert dan memiliki toksisitas yang rendah (Immordino et

al., 2006). Fosfolipid berperan penting dalam susunan membran sel

sehingga sangat sesuai sebagai penyusun liposom. Fosfolipid umumnya

terdiri dari digliserida, gugus fosfat (molekul asam fosfat) dan molekul

organik (kolin). Digliserida adalah gliserida yang terdiri dari dua rantai

asam lemak yang kovalen terikat pada molekul gliserol tunggal. Gliserol

(C3H8O3) mengandung tiga gugus hidroksil (-OH), berperan atas kelarutan

molekul fosfolipid dalam air. Molekul asam lemak baik jenuh atau tidak

jenuh, memiliki sifat hidrofobik. Dengan demikian, molekul fosfolipid

terdiri dari bagian hidrofobik yang terdiri dari dua rantai asam lemak, dan

kepala hidrofilik terbuat dari gliserol dan fosfat. Struktur bilayer terbentuk



13

ketika bagian asam lemak dari satu lapisan bertemu dengan bagian asam

lemak lapisan lain dan bagian kepala yang menghadap ke air (Khan, 2013).

Tingkat kejenuhan fosfatidil kolin yang menyusun membran

liposom mempengaruhi kestabilan dan kerentanannya terhadap oksidasi

selama penyimpanan. Fosfatidil kolin alam banyak mengandung rantai yang

tidak jenuh (unsaturated) sehingga memiliki sifat lebih permeabel tetapi

memiliki stabilitas membran yang kurang. Sedangkan fosfolipid sintetik

lebih banyak mengandung rantai yang jenuh sehingga akan mempunyai

rigiditas membran yang tinggi tetapi mempunyai permeabilitas yang kurang

(Akbarzadeh et al., 2013). Fosfolipid yang memiliki rantai jenuh akan

membuat sistem liposom yang terbentuk menjadi lebih stabil terhadap

oksidasi (Huang et al., 1998) dan fosfolipid dengan rantai asam lemak

pendek dapat melawan efek dari enzim lipase yang dapat mendegradasi

liposom dalam saluran cerna (Sailaja dan Sashikala, 2014).

Gambar 2.5 Struktur fosfolipid (Tripathi)

Fosfolipid dapat berasal dari alam atau hasil sintesis. Fosfolipid

alam termasuk soybean phosphatidylcholine (SPC) dan egg

phosphatidylcholine (EPC), sedangkan fosfolipid sintetis termasuk



14

hydrogenated egg phosphatidylcholine (HEPC), dipalmitoil

phosphatidylcholine (DPPC) dan dimyristoyl phosphatidylcholine (DMPC)

(Monteiro et al., 2014). Berikut beberapa sifat fisika kimia dari berbagai

jenis fosfolipid :

1. Egg Phosphatidylcholine (EPC)

Egg phosphatidylcholine (EPC) adalah campuran dari L-α-

fosfatidilkolin dengan berbagai rantai asam lemak dan komponen utamanya

adalah 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glisero-3-fosfokolin (Jin, L et al., 2006) .

Gambar 2.6 Struktur EPC (www.lipoid.com)

Berikut ini merupakan data sifat sifat dari EPC :

Pemerian : Serbuk putih kekuningan

Berat molekul : 775 g/mol

Kelarutan : Terdispersi dalam air,larut etanol, kloroform,sikloheksana.

(5% larutan, suhu 20oC)

Komposisi : Fosfolipid: Fosfatidil kolin 96 %

Asam lemak(100%): Asam palmitat 30–33%

Asam stearat 11 – 15 %

Asam oleat 27 – 32 %

Asam Linoleat 14–18%



15

2. Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC)

Fosfolipid yang dihidrogenasi bertujuan untuk merubah ikatan

rangkap atau tidak jenuh (unsaturated) pada rantai asam lemak menjadi

ikatan tunggal. Hal ini dilakukan untuk meningkatkan stabilitas terhadap

oksidasi, warna, dan bau dari fosfolipid (Daicheng Liu dan Fucui Ma,

2011). Berikut ini merupakan data sifat sifat dari HEPC yang digunakan :

Gambar 2.7 Struktur HEPC (www.avantilipids.com)

Berikut ini merupakan data sifat sifat dari EPC :

Pemerian : Putih

Berat molekul : 790 g/mol

Kelarutan : Terdispersi dalam air pada suhu 50oC, larut kloroform

pada suhu 20oC, larut toluena pada suhu 50oC, larut

sikloheksana pada suhu 50oC

Komposisi : Fosfolipid : Fosfatidil kolin 98%

Asam lemak(100%) : Asam palmitat 29-33%

Asam stearat 56-61%

Asam oleat dan polimer 1%

2.2.3.2 TPGS

TPGS (d- α- tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate)

merupakan polimer larut air yang digunakan sebagai antioksidan dan

memiliki efek pada aktivitas permukaan sebagai surfaktan. TPGS telah

digunakan dalam pembuatan nanopartikel sebagai emulsifier, absorption



16

enhancer, dan solubilizer. Formulasi liposom yang menggunakan TPGS

sebagai salah satu komponen pembentuk liposom dapat menghasilkan

liposom dengan enkapsulasi yang lebih stabil (Zhai et al., 2008).

TPGS terbentuk dari vitamin E yang dikonjugasi dengan

polietilen glikol 1000 (PEG 1000). TPGS memiliki stabilitas tinggi dan

kelarutan dalam air yang baik. TPGS mungkin berinteraksi dengan muatan

negatif fosfolipid tidak jenuh dan meningkatkan adsorpsinya. TPGS tidak

menyebabkan fase segregasi di bilayer lipid. TPGS memiliki berat molekul

1513 g/mol (Shah et al., 2011).

Gambar 2.8 Struktur TPGS (Shah et al., 2011)

TPGS adalah vitamin E amfifilik yang cukup stabil dalam

kondisi normal tanpa hidrolisis. Karena keseimbangan hidrofilik -

liphophilic ( HLB ) nilainya berada di antara 15 dan 19, TPGS memiliki

kelarutan air yang sangat baik dan sangat cocok untuk digunakan sebagai

surfaktan yang efektif dapat mengemulsi molekul hidrofobik.

Stabilitas liposom yang dilapisi TPGS ditemukan lebih tinggi

daripada liposom konvensional karena sifat surfaktan dari TPGS yang

melapisi liposom. Liposom yang dilapisi TPGS menunjukkan peningkatan

pada efisiensi enkapsulasi dari obat dibandingkan dengan liposom



17

konvensional (Muthu, 2011). TPGS akan membuat liposom menjadi lebih

lama dalam peredaran darah, meningkatkan absorpsi selular dan dapat

mengadakan ikatan konjugasi dengan asam folat (Duhem et al., 2014).

Liposom yang dilapisi dengan TPGS akan membentuk stealth

liposome yang akan meningkatkan kestabilan liposom dalam darah. TPGS

akan melapisi permukaan liposom dan menyamarkan liposom sehingga

liposom tidak akan dikenali oleh mononuclear phagocyte system (MPS)

yang berfungsi untuk klirens liposom (Feng, 2008; Muthu and Feng, 2009).

Selain itu, rantai panjang PEG di permukaan liposom akan mencegah

adsorpsi protein plasma ke permukaan liposom sehingga akan mengurangi

agregasi liposom dalam plasma darah (Muthu and Singh, 2009; Yoshioka,

1991; Yuan et al., 2010).

2.2.3.3 Kolesterol

Kolesterol telah banyak digunakan untuk memperbaiki

karakteristik membran bilayer liposom (Laouini et al., 2012). Struktur

kolesterol tersusun dari hidrokarbon dalam bentuk cincin steroid yang dapat

mengisi ruang yang ada di antara rantai alkil pada membran bilayer dan

memiliki fungsi penting karena kemampuannya yang dapat memodulasi

sifat fisika-kimia membran sel (Ohvo-Rekilä et al.¸ 2002). Selain itu,

kolesterol juga banyak digunakan sebagai penyusun liposom untuk

memperbaiki sifat rigiditas atau fluiditas dari membran liposom,

menstabilkan membran bilayer, dan mengontrol permeabilitas membran

(Yu Nie et al., 2012).



18

Gambar 2.9 Struktur kolesterol

Dari bentuk struktur molekul dan kelarutannya, kolesterol akan

bekerja dengan menempati celah-celah dari fosfolipid dan membuat

strukturnya lebih rigid (Sashi et al., 2012). Sehingga kolesterol akan

menurunkan fluiditas membran dan mengurangi permeabilitas bahan obat

yang larut air (Mansoori dan Agrawal, 2012). Liposom tanpa kolesterol

akan berinteraksi secara cepat dengan protein plasma seperti albumin,

transferin dan makroglobulin. Protein tersebut akan cenderung menarik

fosfolipid dari liposom dan akan menyebabkan ketidakstabilan fisik dari

liposom. Kolesterol akan mengurangi interaksi antara protein plasma

dengan protein tersebut (Sashi et al., 2012). Selain itu kolesterol juga dapat

menstabilkan membran terhadap perubahan suhu. Kolesterol akan

menurunkan permeabilitas seiring dengan kenaikan suhu (Samad et al.,

2007).

2.2.4 Tujuan Liposom

Sistem penghantaran liposom digunakan karena kelebihan utama

liposom antara lain :

1. Mampu untuk mengenkapsulasi bahan obat yang hidrofilik

dan hidrofobik (Akbarzadeh et al., 2013; Yang et al., 2011).



19

2. Dapat menghantarkan obat ke reseptor tertentu dalam tubuh

(Mozafari, 2005).

3. Dapat mengubah sifat farmakokinetik dan biodistribusi bahan

aktif dengan cara delayed clearance dan memiliki waktu

sirkulasi intravaskular yang panjang (Pandelidou et al., 2011).

4. Tahan terhadap enzim yang terdapat di dalam mulut dan

lambung, larutan alkali, cairan getah lambung, garam

empedu, dan flora usus, serta radikal bebas (Akbarzadeh et

al., 2013).

5. Dapat mempertahankan pelepasan senyawa aktif yang

dienkapsulasi, sehingga meningkatkan aktivitas terapi (Khan,

2013).

2.2.5 Metode Pembuatan Liposom

Secara umum metode pembuatan liposom antara lain thin film

hydration, reverse phase evaporation, ethanol injection, polyol dilution,

freeze-thaw, double emulsions, proliposome method, French press

extrusion, detergent removal, dan high-pressure homogenization

(Akbarzadeh et al., 2013; Monteiro et al., 2014; Mozafari, 2005). Dari

semua metode pembuatan tersebut, metode yang paling sering digunakan

yaitu : thin film hydration, reverse phase evaporation, ethanol injection

(Yang et al., 2012).



20

2.2.5.1 Thin Film Hydration

Metode thin film hydration merupakan metode yang paling

sederhana jika dibandingkan dengan semua metode yang telah disebutkan

diatas. Metode ini menggunakan pelarut organik mudah menguap, seperti

kloroform, eter dan metanol yang digunakan untuk melarutkan lipid.

Setelah lipid dilarutkan, pelarut diuapkan dengan teknik rotary evaporation

(rotavapor) dengan menggunakan tekanan yang rendah hingga terbentuklah

lapisan tipis (thin film) di bagian bawah dinding. Selanjutnya ditambahkan

buffer untuk menghidrasi lapisan lipid tersebut pada suhu diatas titik leleh

campuran atau pada titik leleh maksimal campuran tersebut sehingga

terbentuklah liposom dengan multi lamellar vesicles (MLV). Perbedaan

ukuran MLV yang terbentuk bergantung dari waktu hidrasi, metode

resuspensi, komposisi dan konsentrasi lipid, dan volume cairan penghidrasi

(Monteiro et al., 2014). Namun metode pembuatan ini memiliki

keterbatasan yaitu memiliki kemampuan enkapsulasi yang rendah dan sulit

untuk menghasilkan liposom dengan ukuran nano. Oleh karena itu

digunakan tambahan metode yaitu sonikasi atau ekstrusi sehingga didapat

vesikel dengan ukuran ULV (Monteiro et al., 2014).

2.2.5.2 Reverse-phase Evaporation

Metode ini dapat menghasilkan liposom dengan cara membentuk

emulsi water-in-oil dari fosfolipid dan buffer. Langkah pertama, fosfolipid

dilarutkan dalam pelarut organik untuk membentuk lapisan tipis (thin film),

kemudian pelarut dihilangkan dengan penguapan (evaporasi). Lapisan tipis

tersebut diresuspensi dengan dietil eter, dilanjutkan dengan penambahan air.



21

Selanjutnya, dilakukan sonikasi selama waktu tertentu sehingga membentuk

emulsi yang homogen. Pelarut organik tersebut dihilangkan dengan metode

rotary evaporation tekanan rendah sehingga menghasilkan fase intermediet

yang viskus seperti gel yang memiliki ukuran LUV. Metode ini dapat

digunakan untuk mengenkapsulasi makromolekul berukuran besar dengan

nilai efisiensi enkapsulasi sebesar (20 – 68%). Kelemahan metode ini

adalah bahan yang dienkapsulasi terkena paparan dari pelarut organik dan

disonikasi dengan kecepatan tinggi yang dapat menimbulkan panas,

sehingga dapat merusak molekul yang sensitif terhadap panas (Monteiro et

al., 2014).

2.2.5.3 Ethanol Injection

Pada metode ini, lipid yang telah dilarutkan ke dalam etanol

segera diinjeksikan dalam larutan buffer, dimana secara spontan akan

terbentuk SUV dengan diameter 30nm. Ukuran dari liposom dapat

ditingkatkan dengan meningkatkan konsentrasi lipid. Metode pembuatan ini

memiliki keuntungan dengan tidak menggunakan perlakuan fisik maupun

kimia yang memungkinkan terjadinya kerusakan lipid. Namun, konsentrasi

dari vesikel yang dihasilkan sangat sedikit dan dibutuhkan langkah

tambahan khusus untuk menghilangkan etanol dari produk akhir (Monteiro

et al., 2014).



22

2.3 Tinjauan Pengeringan

Berbagai jenis peralatan yang dapat digunakan untuk

pengeringan bahan, termasuk tray, screen-conveyor, screw-conveyor, rotary

drum, tunnel, bin, spray, fluidised bed dan flash driers. Beberapa pengering

tersebut memancarkan panas secara langsung, dimana saat udara masuk ke

dalam pengering melakukan kontak langsung dengan bahan padat yang

basah. Selain itu terdapat jenis peralatan lain yang memancarkan panas

secara tidak langsung yaitu dengan pengeringan melalui dinding logam

(metal wall) atau tray. Beberapa alat pengering juga menggunakan

kombinasi pemanasan langsung dan tidak langsung. Kebanyakan pengering

beroperasi pada atau dekat dengan tekanan atmosfer. Namun, tray dan

enclosed rotary driers dapat dioperasikan di bawah vakum yang umumnya

dengan pemanasan tidak langsung. Sebagai alternatif untuk vakum

pengeringan, flash atau spray drying mungkin sesuai untuk padatan yang

tidak stabil terhadap panas karena pengeringan pada sistem tersebut terjadi

sangat cepat, biasanya dalam waktu 0,5-6 detik, sehingga kerusakan termal

dari kontak yang terlalu lama dengan panas dapat dihindari (Doran, 2013).

2.3.1 Tinjauan Lioprotektan

Lioprotektan dapat diartikan sebagai penstabil dan pencegah

degradasi suatu makromolekul selama proses pengeringan hingga saat

penyimpanan. Mekanisme lioprotektan yaitu dengan cara water

replacement dan vitrification (Chen et al., 2010). Lioprotektan dapat

menggantikan air selama pengeringan dan hal tersebut efektif dalam

mencegah fusi dan dehidrasi yang menyebabkan kerusakan vesikel



23

fosfolipid (Monteiro et al., 2014). Gambar 2.10 menggambarkan

mekanisme lioprotektan dalam mencegah degradasi suatu liposom dengan

cara water replacement.

Gambar 2.10 Mekanisme water replacement lioprotektan (Chen et al.,2010).

Beberapa jenis lioprotektan yang dapat digunakan yaitu gula

termasuk trehalosa, sukrosa dan laktosa. Trehalosa dan sukrosa efektif

dalam menjaga integritas membran dan mencegah kebocoran senyawa

dalam liposom akibat dari Tg yang cukup tinggi sehingga menyebabkan

gula jenis ini paling sering digunakan untuk lioprotektan selama proses

liofilisasi (Chen et al., 2010). Sukrosa efektif mencegah agregasi dengan

menjaga jarak antar fosfat dan mengurangi ikatan van der Waals rantai lipid

sehingga sukrosa akan mengurangi interaksi air dengan fosfolipid dan pada

akhirnya akan menggantikan air (Abdelwahed, 2006; Chen et al., 2010).

2.3.2 Tinjauan HPMC

Hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) memiliki nama kimia

cellulose hydroxypropyl methyl ether. HPMC berbentuk serat atau butiran

bubuk tidak berbau dan berasa dengan warna putih atau krem-putih.



24

Kelarutan HPMC yaitu larut dalam air dingin, membentuk solusi koloid

kental; praktis tidak larut dalam air panas, kloroform, etanol (95%) dan eter,

tetapi larut dalam campuran etanol dan diklorometana, campuran metanol

dan diklorometana dan campuran air dan alkohol (Rowe et al., 2009).

Gambar 2.11 Struktur HPMC (Rowe et al., 2009) HPMC tersedia dalam beberapa jenis yang dibedakan

berdasarkan viskositas dan tingkat substitusi. Jenis HPMC dapat dibedakan

dengan menambahkan nomor yang menandakan viskositas, dalam mPas,

dari 2%b/b larutan pada 20oC (Rowe et al., 2009). Liposom yang

dimasukkan dalam matriks gel HPMC dengan konsentrasi sebesar 2% dapat

menurunkan laju pelepasan dan jumlah bahan obat yang dilepaskan ke

dalam tubuh (Nounou et al., 2006). HPMC yang memiliki viskositas

15.000mPas pada saat dilarutkan dalam air dengan konsentrasi 2% yaitu

HPMC 2208. HPMC mengandung gugus metoksi dan hidropropoksi sesuai

dengan batas-batas untuk berbagai jenis HPMC. HPMC 2208, dua digit

angka diawal dapat diartikan sebagai isi persentase perkiraan dari kelompok

metoksi (OCH3) sedangkan dua digit selanjutnya berarti isi persentase

perkiraan dari kelompok hidroksipropoksi (OCH2CH(OH)CH3) (Rowe et

al., 2009).



25

2.4 Karakterisasi Liposom

2.4.1 Particle Size Analyzer (PSA)

Ukuran partikel dan distribusi ukuran partikel menjadi salah satu

sifat yang penting dalam karakterisasi liposom terutama jika liposom akan

digunakan dalam bentuk sediaan inhalasi atau rute parenteral. Liposom

dengan ukuran kecil akan dapat melewati fenestrae dari sinusoid hati dan

dapat beredar dalam tubuh untuk jangka waktu yang lama. Sebaliknya,

liposom yang besar dengan cepat dibersihkan oleh makrofag. Oleh karena

itu, potensi terapetik liposom sangat dipengaruhi oleh ukuran vesikel

liposom.

Beberapa teknik yang dapat digunakan untuk mengukur ukuran

partikel antara lain dynamic light scattering (DLS), static light scattering,

gel exclusion, light microscopy, laser difraction, microscopy technique,

small-angle X-ray, flow cytometri dan field-flow fractionation.

DLS merupakan salah satu teknik yang dapat digunakan untuk

menentukan ukuran partikel dalam rentang sub-mikron. Kelebihan teknik

ini adalah dalam hal kecepatan pengukurannya. Pengukuran hanya

membutuhkan waktu 2-5 menit. Untuk melakukan pengukuran, partikel

harus disuspensikan dan diiluminasikan dengan cahaya agar partikel dapat

menghasilkan indeks refraksi (Monteiro et al., 2014).

Pada nilai PI, tidak ada batas umum yang menunjukkan

penerimaan suatu nilai PI. Hal tersebut bergantung pada tujuan terhadap

partikel yang akan dibuat. jika ingin membuat molekul yang monodispersi

yaitu molekul dengan berat molekul yang sama atau homogen, maka nilai



26

PI diusahakan serendah mungkin karena nilai PI merupakan suatu indikator

agregasi terhadap molekul, Nilai PI berkisar antara 0-1, semakin rendah

nilai PI atau semakin mendekati 0 menunjukkan adanya sistem yang

monodispersi. Nilai PI yang mendekati 1 menunjukkan sistem non-

monodispersi atau polidispersi yang memiliki kecenderungan untuk

mengalami agregasi dibandingkan monodispersi.

2.4.2 Differential Thermal Analysis (DTA)

Analisis termal merupakan analisis perubahan sifat dari sampel,

yang bergantung pada perubahan suhu yang diberikan (Brown, 2001).

Selain itu, teknik analisis termal merupakan dasar untuk penentuan data

termodinamika polimorf, solvat, maupun bentuk amorf yang dapat dijadikan

pertimbangan dalam pembuatan, penyimpanan, dan distribusi dari bahan

baku obat. Metode yang umum digunakan dalam analisis termal meliputi

Differential Thermal Analysis (DTA), Differential Scanning Calorimetry

(DSC), Thermogravimetry (TG) dan Dynamic Mechanical Analysis (DMA).

Salah satu analisis termal Differential Thermal Analysis (DTA)

merupakan teknik analisis termal yang paling sederhana dan paling banyak

digunakan. Perbedaan suhu antara sampel dan bahan referensi yang inert

diukur saat keduanya mengalami diberi perlakuan panas yang sama (Brown,

2001). DTA sering digunakan dalam karakterisasi bahan farmasi, biologi,

kimia organik maupun anorganik dan diterapkan untuk mengukur transisi

endotermik dan eksotermik sebagai fungsi suhu. Apabila terjadi termal

endotermik (ΔH positif, seperti peleburan) terjadi pada sampel, maka suhu

sampel, Ts, akan tertinggal di belakang suhu referensi, Tr, selama diberikan



27

pemanasan. Jika output dari termokopel, ΔT = Ts-Tr, direkam terhadap Tr

(atau suhu tungku, Tf-Tr). Jika proses eksotermik (ΔH negatif seperti

oksidasi) terjadi pada sampel, respon akan berada di arah yang berlawanan.

Karena definisi ΔT sebagai Ts-Tr sering berubah-ubah, maka setiap kurva

DTA harus ditandai dengan arah baik endo atau ekso. Puncak negatif,

disebut endoterm dan ditandai dengan suhu onset. Suhu di mana respon

pada jarak maksimum dari baseline, ΔTmax, sering dilaporkan tetapi sangat

tergantung pada tingkat pemanasan, β, digunakan dalam suhu dan faktor-

faktor seperti ukuran sampel dan posisi termokopel (Brown, 2001).

2.4.3 X-Ray Diffraction (XRD)

Setiap bentuk kristal dalam suatu senyawa memiliki pola difraksi

sinar-X yang khas. Pola difraksi ini dapat dihasilkan oleh kristal tunggal

atau dari serbuk yang mengandung beberapa bahan. Jarak antara dan

intensitas relatif puncak-puncak terdifraksi dapat digunakan untuk analisis

kualitatif dan kuantitatif secara rutin pada pemeriksaan dan penetapan

kemurnian relatif bahan berbentuk kristal. Susunan molekul yang relatif

acak pada senyawa berbentuk amorf menyebabkan penyebaran sinar-X

yang kurang koheren sehingga menghasilkan puncak yang lebar pada pola

difraksinya. Sedangkan senyawa yang berbentuk kristal memiliki susunan

molekul yang lebih teratur sehingga memberikan pola difraksi yang tajam

(Depkes RI, 1995).

Analisis difraksi sinar-X dapat digunakan untuk mempelajari

sistem bilayer multilamelar, salah satunya yaitu sistem liposom. Untuk

mengukur jangkauan dan besarnya tekanan repulsif antara permukaan



28

bilayer, sebuah teknik “stres osmotik” dapat digunakan. Dalam metode ini

diketahui tekanan osmotik dapat diterapkan untuk sistem multi-bilayer dan

jarak antarbilayer pada setiap tekanan yang diterapkan diukur dengan

analisis difraksi sinar-X. Pada kesetimbangan, total tekanan repulsif

antarbilayer seimbang dengan total tekanan total atraktifnya, yang

merupakan jumlah dari tekanan atraktif van der Waals dan tekanan osmotik

yang diberikan (McIntosh, 1995).

2.4.4 Scanning Electron Microscope (SEM)

Karakterisasi terhadap liposom kering kurkumin dilakukan

dengan Scanning electron microscopy (SEM). Hal ini bertujuan untuk

mengetahui struktur matriks penjebak liposom yang sudah terbentuk. Selain

itu, bentuk dan morfologi permukaan liposom yang terjebak juga dapat

diketahui. Sampel liposom kering kurkumin ditempatkan pada holder (stub)

dan ditutup dengan lapisan emas/paladium untuk membentuk sebuah

lapisan konduktif menggunakan Bal-tec cool sputter coater. Selanjutnya

holder tersebut dimasukkan dalam specimen chamber pada mesin SEM

untuk dilakukan pengamatan dan pemotretan. Dilakukan pengambilan

gambar dengan berbagai ukuran perbesaran.

Scanning electron microscopy (SEM) dan transmission electron

microscopy (TEM) dapat digunakan untuk menentukan mengetahui

informasi tentang bentuk vesikel dan morfologi permukaan vesikel liposom

(Samad et al., 2007).



29

BAB III

KERANGKA KONSEPTUAL

3.1 Uraian Kerangka Konseptual

Kurkumin merupakan senyawa aktif yang memiliki berbagai

aktivitas farmakologis, yaitu sebagai antiinflamasi, antibakteri, antifungal,

antikanker, antispasmodik, antioksidan, antidiabetes dan hepatoprotektor.

Kurkumin dalam penggunaannya masih sangat terbatas, disebabkan oleh

kelarutan yang rendah dalam air, termetabolisme secara cepat di usus dan

hati menyebabkan kurkumin memiliki bioavailabilitas dalam tubuh yang

rendah sehingga kurkumin diklasifikasikan ke dalam golongan

Biopharmaceutics Classification System (BCS) kelas IV. Untuk mengatasi

masalah kelarutan dan bioavailabilitas tersebut, maka dibuat suatu

modifikasi dalam sistem penghantaran obat berupa sistem enkapsulasi

liposom.

Liposom adalah vesikel buatan yang berukuran kecil dengan

diameter 20nm hingga lebih dari 1µm, terdiri dari membran fosfolipid

bilayer, memiliki bentuk spheris yang terbentuk secara spontan ketika lipid

tertentu dihidrasi ke dalam media air. Liposom memiliki kelebihan antara

lain kemampuan liposom untuk memerangkap komponen hidrofilik dan

hidrofobik, menghindari dekomposisi bahan obat yang diperangkap, serta

memiliki target yang spesifik dalam tubuh.

Karakteristik liposom yang terbentuk dipengaruhi oleh

komponen penyusun dan metode pembuatannya. Dalam hal ini, jenis



30

fosfolipid yang digunakan akan menentukan fluiditas dan rigiditas dari

membran liposom. Pada penelitian ini, fosfolipid yang digunakan adalah

EPC dan HEPC, dan liposom dibuat dengan menggunakan metode thin film

hydration sehingga dapat terbentuk liposom cair.

Liposom cair memiliki kestabilan yang rendah dalam

penyimpanan, distribusi ukuran dapat berubah pada penyimpanan karena

degradasi komponen, permeabilisasi membran dapat menyebabkan

kebocoran bahan yang terenkapsulasi. Sehingga untuk mengatasi hal

tersebut, liposom dibuat dalam bentuk sistem liposom kering. Bentuk kering

liposom ini dapat menghindarkan liposom dari agregasi/aglomerasi, fusi,

dan kebocoran isi dari liposom.

Berdasarkan uraian di atas, untuk mengetahui pengaruh jenis

fosfolipid terhadap karakteristik fisika dari sistem liposom kering kurkumin

yang dibuat dari fosfolipid alam EPC dan fosfolipid sintetik HEPC maka

dilakukan karakterisasi yang meliputi ukuran partikel, sifat termal, difraksi

sinar-X dan morfologi. Dari karakterisasi tersebut diharapkan dapat

diperoleh liposom kering kurkumin dengan fosfolipid yang optimal yang

dapat memberikan mutu fisik yang baik.



31

3.2 Skema Kerangka Konseptual

Gambar 3.1 Skema Kerangka Konseptual

dipengaruhi

Kurkumin : a. Kelarutan dalam air sangat rendah (BCS IV) b. Cepat dimetabolisme dan diekskresi c. Bioavailabilitasnya rendah

Liposom : a. Vesikel spheris b. Berukuran 0.05-5.0 μm c. Tersusun dari fosfolipid dan kolesterol d. Dapat meningkatkan bioavailabilitas obat

Liposom cair kurkumin yang terbuat dari EPC dan HEPC dengan metode Thin Lipid

Hydration

Drying

a. Metode pembuatan b. Jenis dan jumlah

komponen penyusun : -fosfolipid -kolesterol -TPGS

Sistem liposom kering kurkumin yang

stabil, tidak megalami fusi dan agregasi,

serta kebocoran sistem

Liposom Kurkumin

dapat mengalami

- tidak stabil dalam penyimpanan yang lama

- fusi dan agregasi - kebocoran sistem



32

BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1 Bahan dan Alat Penelitian

4.1.1 Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

kurkumin (derajat kemurnian 65%) (Sigma-Aldrich, Singapura), fosfolipid

Egg Phosphatidylcholine (EPC) (Lipoid GmBh, Jerman), dan

Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC) (Lipoid GmBh, Jerman),

kolesterol (Sigma-Aldrich, Singapura), D-alpha tocopheryl polyethylene

glycol 1000 succinate (TPGS) (Sigma-Aldrich, Singapura), sukrosa (Sigma-

Aldrich, Singapura), HPMC (Metolose 90SH 15000) (Shin Etsu, Japan),

PBS buffer pH 7,4 (Sigma-Aldrich, Singapura) dengan derajat kemurnian

pharmaceutical grade, pelarut kloroform (Merck, Jerman) dan metanol

(Merck, Jerman) dengan derajat kemurnian proanalisis.

4.1.2 Alat-alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah neraca

analitik, Rotary Evaporator (Buchi Rotavapor R-215, Switzerland),

Waterbath Ultrasonic (Elma, Switzerland), Particle Analyzer (DelsaTM

Nano C, USA), Scanning Electron Microscopy (SEM) (TM3000 TableTop

SEM) (Hitachi, USA), Differential Thermal Analysis (DTA) (Mettler

Toledo FP 85, Switzerland), X-Ray Diffractometer (XRD) (Phillips Xpert,

Netherland) dan alat-alat gelas.



33

4.2 Rancangan Penelitian

Pada penelitian ini menggunakan metode eksperimental untuk

melakukan karakterisasi sistem liposom kering kurkumin dengan fosfolipid

EPC dan HEPC. Pembentukan sistem liposom dilakukan dengan metode

Thin Film Hydration yang dapat menghasilkan liposom dengan partikel

multilamellar vesicles. Selanjutnya, dilakukan pencampuran terhadap

larutan HPMC 15000 kemudian dikeringkan dengan oven pada suhu 40oC

selama 48jam. Bentuk liposom kering yang diperoleh kemudian

dikarakterisasi yang meliputi pengukuran ukuran partikel menggunakan

Particle Analyzer (DelsaTM Nano C, USA), pengamatan morfologi liposom

menggunakan Scanning Electron Microscope (TM3000 TableTop SEM)

(Hitachi, USA), pengamatan sifat termal menggunakan Differential

Thermal Analysis (Mettler Toledo FP 85, Switzerland) dan pengamatan pola

difraksi menggunakan X-Ray Diffractometer (Phillips Xpert, Netherland).

4.3 Metode Penelitian

4.3.1 Rancangan Formula Liposom Kering Kurkumin

Rancangan formula liposom kering kurkumin dengan jenis

fosfolipid yang berbeda dapat dilihat pada Tabel IV.1.



34

Tabel IV.1 Formula liposom kering kurkumin dengan jenis fosfolipid yang berbeda

Bahan Fungsi Formula

I II

Kurkumin Bahan aktif 1mg 1mg

EPC Fosfolipid 20mg -

HEPC Fosfolipid - 20mg

Kolesterol Membrane stabilizer 2mg 2mg

TPGS Membrane stabilizer 0,5 mg 0,5 mg

HPMC Pembentuk matriks 20mg 20mg

Larutan PBS pH 7,4 (dengan penambahan sukrosa 10%)

Larutan penghidrasi dan lioprotektan

1 mL 1 mL

Keterangan :

Formula I : Liposom kering kurkumin dengan fosfolipid EPC (Cur-EPC-L)

Formula II: Liposom kering kurkumin dengan fosfolipid HEPC(Cur-HEPC-

L)

4.3.2 Pembuatan Liposom Kering Kurkumin

Liposom kurkumin dengan masing-masing fosfolipid EPC dan

HEPC dibuat dengan metode Thin Film Hydration. Skema pembuatan

liposom kering kurkumin dapat dilihat pada Gambar 4.1. Pertama, dibuat

larutan stok masing-masing bahan yaitu kurkumin, fosfolipid, kolesterol,

dan TPGS dalam pelarut campuran kloroform:metanol (9:1) dalam vial.

Kemudian, masing-masing bahan dipipet sesuai dengan jumlah formula

yang tertera pada tabel 4.1 menggunakan mikropipet. Keempat bahan

tersebut dicampur di dalam labu alas bulat 100 mL. Setelah itu, pelarut

diuapkan dengan rotary evaporator selama 1 jam pada suhu 450C dengan



35

tekanan 320mbar dan kecepatan rotasi 100rpm. Lapisan tipis lipid yang

terbentuk kemudian dihidrasi dengan 1 mL larutan penghidrasi (larutan

dapar PBS pH 7,4 dengan penambahan sukrosa 10%) yang dipanaskan

terlebih dahulu pada suhu 600C. Setelah itu dilakukan sonikasi dengan

menggunakan waterbath ultrasonic hingga seluruh lipid terdispersi

homogen, dimana pada tahap ini telah terbentuk Multi Lamellar Vesicles

ditandai dengan sampel yang keruh. Selanjutnya dilakukan pencampuran

terhadap gel HPMC 4% dengan perbandingan 1:1 sehingga kadar HPMC

dalam sediaan menjadi 2%, kemudian dikeringkan dengan oven pada suhu

40oC selama 48jam.

4.4 Karakterisasi Sifat Fisika Sistem Liposom Kering Kurkumin

4.4.1 Particle Size Analyzer (PSA)

Sampel liposom cair kurkumin dievaluasi dengan mengukur

ukuran partikel. Sejumlah 50µL liposom cair kurkumin didispersikan dalam

1mL aquades. Ukuran partikel diukur dengan menggunakan alat Particle

Analyzer (DelsaTM Nano C, USA) pada suhu ruangan (25oC). Pengujian

ukuran partikel dilakukan sebanyak tiga kali untuk masing-masing formula.

4.4.2 Differential Thermal Analysis (DTA)

Differential Thermal Analysis (DTA) digunakan untuk

mengevaluasi perubahan sifat termodinamika yang terjadi saat sampel

diberikan energi panas, yang ditunjukkan puncak endotermik atau

eksotermik pada termogram DTA. Komponen murni dan campuran fisik



36

Gambar 4.1 Skema Pembuatan Liposom Kering Kurkumin

Dihidrasi dengan 1 mL larutan penghidrasi

(larutan dapar PBS pH 7,4 dengan sukrosa10%)

suhu 60C dan disonikasi dengan menggunakan

waterbath sonicator selama 5 menit

Dicampur dalam labu alas bulat 100mL

Dirotavapor selama 1 jam pada suhu 45C;

tekanan 320 mbar; kecepatan rotasi 100rpm

Campuran homogen larutan kurkumin

dan komponen liposom

Lapisan lipid tipis kurkumin

Liposom cair kurkumin (Multi Lamellar Vesicles)

Dikeringkan dengan oven

pada suhu 40oC selama

48 jam

Liposom cair kurkumin

Liposom kering kurkumin

Bahan aktif : Kurkumin+(Kloroform:metanol)=9:1

)

Komponen Liposom : a. Fosfolipid+(Kloroform:metanol=9:1) b. Kolesterol+(Kloroform:metanol=9:1) c. TPGS + (Kloroform : metanol =9:1)

Dicampur dengan gel

HPMC 4% sebanyak 1:1

Disonikasi dengan

menggunakan probe

sonicator 5menit

Liposom cair kurkumin (Uni

Lamellar Vesicles)

Dikeringkan dengan

freeze-dryer 24 jam



37

bahan dari masing-masing formula digunakan sebagai kontrol pembanding.

Differential Thermal Analysis (DTA) digunakan untuk. Sejumlah 2 mg

sampel diambil dan diletakkan dalam pan yang kering. Laju pemanasan

dibuat 10oC per menit pada rentang suhu 30-250oC. Kontrol pembanding

digunakan bahan awal kurkumin, sukrosa dan campuran fisik bahan

penyusun liposom dan diuji dengan cara yang sama dengan liposom kering

kurkumin.

4.4.3 X-Ray Diffraction (XRD)

Uji difraksi sinar-X dilakukan pada komponen awal yaitu

kurkumin, campuran fisik bahan penyusun liposom, Cur-EPC-L dan Cur-

HEPC-L. Sampel dimasukkan dalam holder kemudian diletakkan dalam alat

difraktometer sinar-X dan diamati pada rentang dari 5-50oC. Kondisi

pengukuran diatur sebagai berikut: sumber Cu Kα, voltase 30mA dan 40kV,

kecepatan scanning 0,017o per detik.

4.4.4 Scanning Electron Microscope (SEM)

Bentuk dan morfologi permukaan liposom kering kurkumin

diketahui dengan menggunakan alat Scanning electron microscopy (SEM).

Sampel liposom kering kurkumin ditempatkan pada holder (stub) dan

ditutup dengan lapisan emas/paladium untuk membentuk sebuah lapisan

konduktif menggunakan Bal-tec cool sputter coater. Selanjutnya holder

tersebut dimasukkan dalam specimen chamber pada mesin SEM untuk

dilakukan pengamatan dan pemotretan. Liposom kering kurkumin diamati

dengan SEM dengan perbesaran 500, 1500, 2000, 3000, 4000, dan 5000.



38

BAB V

HASIL PENELITIAN

5.1 Hasil Pemeriksaan Particle Size Analyzer (PSA)

Hasil pemeriksaan ukuran partikel liposom cair Cur-EPC-

L dan Cur-HEPC-L dapat dilihat pada Tabel V.1 berikut :

Tabel V.1 Hasil pemeriksaan ukuran partikel liposom cair

Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L

Berdasarkan pemeriksaan ukuran partikel Cur-EPC-L dan

Cur-HEPC-L didapatkan rentang diameter liposom cair kurkumin

secara berturut-turut 2396,5 ± 979,4nm dan 2464,2 ± 1813,0nm

dengan polidispersity index (PI) secara berturut-turut 0,517 ± 0,114

dan 0,370 ± 0,203. Cur-HEPC-L memiliki rerata ukuran partikel

yang lebih besar dan memiliki nilai PI lebih kecil dibandingkan

dengan Cur-EPC-L. Nilai PI dari Cur-HEPC-L yang relatif lebih

rendah Cur-EPC-L dan memiliki nilai yang lebih mendekati 0

menunjukkan bahwa molekul yang terbentuk merupakan sistem

Ukuran Partikel (nm) Polidispersity Index (PI)

Replikasi Replikasi

1 2 3 1 2 3

Cur-EPC-L 1097,7 2879,0 3212,7 0,348 0,592 0,613

Rerata 2396,5 ± 979,4 0,517 ± 0,114

Cur-HEPC-L 4556,8 1473,4 1362,5 0,604 0,244 0,262

Rerata 2464,2 ± 1813,0 0,370 ± 0,203



39

monodispersi yang relatif lebih stabil dan tidak mudah mengalami

agregasi.

Hasil Pemeriksaan Organoleptis Liposom Cair Kurkumin

Pemeriksaan organoleptis terhadap liposom cair Cur-

EPC-L dan Cur-HEPC-L terlihat bahwa Cur-EPC-L berwarna

kuning, keruh dan tidak berbau sedangkan Cur-HEPC-L berwarna

jingga, keruh dan tidak berbau.

Gambar 5.1 Sistem liposom cair Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L sebelum dan sesudah dilakukan pengecilan ukuran partikel.

Pengecilan ukuran partikel dengan probe sonicator seperti

Gambar 5.1 menghasilkan liposom Cur-EPC-L yang berwarna

jingga, jernih dan tidak berbau sedangkan pada Cur-HEPC-L

berwarna jingga, lebih jernih dan tidak berbau. Pada proses

pengecilan ukuran ini teramati secara visual bahwa liposom yang

semula dalam keadaan keruh menjadi lebih jernih. Hal tersebut

menandakan bahwa adanya perubahan ukuran liposom yang

awalnya memiliki molekul besar menjadi molekul yang lebih kecil.

Selain itu, dengan adanya pengecilan ukuran partikel membuktikan

bahwa sebagian besar kurkumin telah berada dalam sistem



40

liposom. Secara visual hal tersebut dibuktikan dengan liposom cair

yang jernih dimana tidak terlihat adanya kurkumin dalam larutan

penghidrasi tersebut.

5.2 Hasil Pemeriksaan Differential Thermal Analysis (DTA)

Hasil uji termal menggunakan Differential Thermal

Analysis (DTA) yang dilakukan pada kurkumin, fosfolipid (EPC

dan HEPC), kolesterol, TPGS, sukrosa, HPMC, campuran fisik

liposom kurkumin, serta sistem liposom kering kurkumin (Cur-

EPC-L dan Cur-HEPC-L) ditampilkan dalam Gambar 5.2 dan

Gambar 5.3 berikut data puncak endotermik pada Tabel V.2 dan

Tabel V.3.

Gambar 5.2 Termogram DTA: A.Cur-EPC-L, B.CF Cur-EPC-L, C.HPMC, D.Sukrosa, E TPGS, F.Kolesterol, G.EPC, H.Kurkumin.

A

G

H

F

E

D

C

B

End

oter

mik

Suhu (°C)



41

Tabel V.2 Puncak endotermik termogram DTA komponen penyusun, campuran fisik(CF) dan sistem

Cur-EPC-L.

Pada Gambar 5.2 menunjukkan termogram DTA

komponen awal yaitu kurkumin, EPC, kolesterol dan TPGS

menghasilkan satu puncak endotermik sedangkan sukrosa dan

HPMC menghasilkan dua puncak endotermik. Campuran fisik Cur-

EPC-L menghasilkan dua puncak endotermik pada suhu 191,2°C

dan 216,6°C yang identik dengan kedua puncak endotermik

sukrosa sedangkan Cur-EPC-L memiliki satu puncak endotermik

pada suhu 216,1°C yang identik dengan salah satu puncak

endotermik sukrosa. Pada Cur-EPC-L tidak terdapat puncak

endotermik yang identik dengan kurkumin sehingga dalam sistem

liposom yang terbentuk sudah tidak terdapat kristal kurkumin

No. Sampel Puncak Endotermik (°C)

A Kurkumin 174,0

B EPC 58,4

C Kolesterol 150,7

D TPGS 43,9

E Sukrosa 194,1 dan 224,4

F HPMC 52,6 dan 126,3

G CF Cur-EPC-L 191,2 dan 216,6

H Cur-EPC-L 216,1



42

Gambar 5.3 Termogram DTA: A.Cur-HEPC-L, B.CF Cur-HEPC-L, C.HPMC, D.Sukrosa, E TPGS, F.Kolesterol, G.HEPC, H.Kurkumin.

Tabel V.3 Puncak endotermik termogram DTA komponen penyusun, campuran fisik (CF) dan sistem Cur-HEPC-L.

No. Sampel Puncak Endotermik (°C)

A Kurkumin 174,0

B HEPC 78,5 dan 173,6

C Kolesterol 150,7

D TPGS 43,9

E Sukrosa 194,1 dan 224,4

F HPMC 52,6 dan 126,3

G CF Cur-HEPC-L 71,8 ; 175,0 dan 213,6

H Cur-HEPC-L

212,8

En

do

term

ik

Suhu (°C)

A

G

H

F

E

D

C

B



43

Pada Gambar 5.3 menunjukkan termogram DTA

komponen awal yaitu kurkumin, kolesterol, TPGS menghasilkan

satu puncak endotermik sedangkan HEPC, sukrosa dan HPMC

menghasilkan lebih dari dua puncak endotermik. Campuran fisik

Cur-HEPC-L menghasilkan tiga puncak endotermik pada suhu

71,8; 175,0 dan 213,6 yang secara berurutan identik dengan puncak

endotermik HEPC, kurkumin dan sukrosa sedangkan Cur-HEPC-L

memiliki satu puncak endotermik pada suhu 212,8°C yang identik

dengan salah satu puncak endotermik sukrosa. Pada Cur-HEPC-L

tidak terdapat puncak endotermik yang identik dengan kurkumin

sehingga dalam sistem liposom yang terbentuk sudah tidak terdapat

kristal kurkumin.

5.3 Hasil Pemeriksaan X-Ray Diffraction (XRD)

Difraktogram sinar-X komponen awal kurkumin,

fosfolipid (EPC dan HEPC), kolesterol, TPGS, sukrosa, HPMC,

campuran fisik serta sistem liposom kering kurkumin (Cur-EPC-L

dan Cur-HEPC-L) dapat dilihat pada Gambar 5.4 dan Gambar 5.5.

Berdasarkan Gambar 5.4, pola difraktogram sinar-X

komponen awal yaitu : kurkumin, kolesterol, TPGS dan sukrosa

menghasilkan beberapa puncak yang tajam yang menunjukkan

bahwa komponen tersebut bersifat kristalin. Pola difraktogram

HPMC dan EPC menunjukkan bahwa sistem tersebut relatif amorf.

Pada pola difraktogram CF Cur-EPC-L menghasilkan beberapa

puncak tajam



44

Gambar 5.4 Difraktogram sinar-X : A.Cur-EPC-L, B.CF Cur-EPC-L, C.HPMC, D.Sukrosa, E TPGS, F.Kolesterol, G.EPC, H.Kurkumin.

yang menandakan bahwa bahan-bahan penyusun yang terkandung

pada campuran fisik tersebut masih berada dalam bentuk kristal.

Pola difraktogram sistem Cur-EPC-L tidak memiliki puncak yang

tajam dan intensif seperti pada campuran fisik. Hal tersebut

menandakan bahwa dalam sistem tersebut semua bahan penyusun

termasuk bahan aktif yang digunakan yaitu kurkumin telah berada

dalam keadaan amorf.

Inte

nsi

tas

(AU

)

A

G

H

F

E

D

C

B



45

Gambar 5.5 Difraktogram sinar-X: A.Cur-HEPC-L, B.CF Cur-HEPC-L, C.HPMC, D.Sukrosa, E TPGS, F.Kolesterol, G.HEPC, H.Kurkumin.

Berdasarkan Gambar 5.5, pola difraktogram komponen

awal yaitu: kurkumin, kolesterol, TPGS dan sukrosa menghasilkan

beberapa puncak tajam yang menunjukkan bahwa komponen

tersebut bersifat kristalin. Pola difraktogram HPMC dan HEPC

menunjukkan bahan tersebut relatif amorf. Pola difraktogram CF

Cur-HEPC-L menghasilkan beberapa puncak tajam yang

menandakan bahwa bahan-bahan penyusun yang terkandung pada

campuran fisik tersebut masih berada dalam bentuk kristal. Pola

difraktogram sistem Cur-EPC-L tidak memiliki puncak tajam dan

intensif menunjukkan sistem tersebut semua bahan penyusun

termasuk bahan aktif kurkumin berada dalam keadaan amorf.

Inte

nsit

as (

AU

)

A

G

H

F

E

D

C

B



46

5.4 Hasil Pemeriksaan Scanning Electron Microscope (SEM)

Hasil pemeriksaan morfologi Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-

L menggunakan Scanning Electron Microscope (SEM) pada

berbagai perbesaran dapat dilihat pada Gambar 5.5 dan Gambar

5.6.

Gambar 5.6 Hasil pemeriksaan morfologi Cur-EPC-L dengan SEM pada perbesaran: A.1500kali, B.3000kali dan C.5000kali

Gambar 5.7 Hasil pemeriksaan morfologi Cur-HEPC-L dengan SEM pada perbesaran: A.1500kali, B.3000kali dan C.5000kali

Berdasarkan Gambar 5.6 dan Gambar 5.7 dapat diperoleh

informasi mengenai morfologi Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L yang

memiliki bentuk sferis serta matriks dengan struktur yang relatif

padat.



47

BAB VI

PEMBAHASAN

Penelitian mengenai karakterisasi liposom kering kurkumin

dilakukan untuk mengetahui jenis fosfolipid yang dapat digunakan dalam

formulasi sistem liposom. Karakteristik liposom dapat dipengaruhi oleh

komposisi bahan penyusun dan metode pembuatan yang digunakan.

Berdasarkan komposisi, fosfolipid merupakan komponen utama yang dapat

menentukan sifat fisika liposom berupa rigiditas, fluiditas dan muatan

lapisan membran yang dapat mempengaruhi ukuran serta jumlah bahan

yang dapat dienkapsulasi. Dalam penelitian ini, digunakan fosfolipid yang

termasuk kelompok fosfatidilkolin yaitu Egg Phosphatidycholine (EPC)

yang berasal dari alam dan Hydrogenated Egg Phosphatidylcholine (HEPC)

yang dibuat secara sintetik.

Tahap pertama dalam penelitian yaitu pembuatan liposom dengan

metode thin-film hydration, masing-masing bahan kurkumin, fosfolipid

(EPC dan HEPC), serta bahan tambahan kolesterol dan TPGS dilarutkan

dalam pelarut campuran kloroform:metanol. Semua bahan dicampur sesuai

formula dalam labu alas bulat kemudian pelarut diuapkan dengan rotavapor

hingga terbentuk lapisan lipid tipis yang selanjutnya dihidrasi dengan

larutan sukrosa 10% dalam PBS sehingga terbentuk liposom cair kurkumin.

Setelah itu, liposom cair disonikasi dengan waterbath sonicator, lalu

didispersikan ke dalam gel HPMC. Selanjutnya liposom cair dikeringkan



48

menggunakan oven hingga terbentuk liposom kering kurkumin yang

masing-masing mengandung EPC (Cur-EPC-L) dan HEPC (Cur-HEPC-L).

Ukuran partikel liposom ditentukan menggunakan Particle Size

Analyzer dengan mengukur liposom cair dikarenakan liposom kering telah

mengandung matriks HPMC akan mengganggu proses pengukuran. Hasil

yang didapat menunjukkan ukuran rata-rata Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L

secara berturut-turut 2396,5±979,4nm dan 2464,2±1813,0nm dengan nilai

Polydispersity Index (PI) secara berturut-turut 0,517±0,114 dan

0,370±0,203. Hasil tersebut sesuai dengan ukuran liposom yang dibuat

dengan metode thin-film hydration yang menghasilkan liposom bentuk

Multi Lamellar Vesicles (MLV) dengan rentang ukuran 0,1-15µm

(O’Doherty et al., 2004; Go´mez-Hens et al., 2005). Ukuran partikel

menjadi salah satu sifat yang penting dalam karakterisasi liposom jika

liposom akan digunakan dalam bentuk sediaan inhalasi maupun rute

parenteral. Liposom dengan ukuran kecil akan dapat melewati fenestrae dari

sinusoid hati dan dapat beredar dalam tubuh untuk jangka waktu yang lama.

Sebaliknya, liposom yang berukuran besar dapat dengan cepat dibersihkan

oleh makrofag. Selain itu, apabila sediaan ini akan digunakan secara

topikal, maka semakin besar ukuran partikel yang dihasilkan menyebabkan

penurunan penetrasi bahan obat yang dienkapsulasi terhadap lapisan kulit

yang lebih dalam (Verma et al., 2003). Pada kedua formula menghasilkan

PI>0,3, Cur-EPC-L memiliki nilai PI yang lebih besar dibandingkan dengan

Cur-HEPC-L yang menunjukkan bahwa distribusi ukuran liposom

kurkumin yang terbentuk dari fosfolipid EPC relatif lebih heterogen

dibandingkan terbuat dari HEPC. Nilai PI yang besar (PI>0,3) menunjukkan



49

polidipersitas yang tinggi dan distribusi ukuran partikel liposom masih

heterogen (Verma et al., 2003).

Liposom cair yang dihasilkan setelah dihidrasi masih berbentuk

MLV sehingga terlihat keruh pada gambar 5.1. Setelah dilakukan

pengecilan ukuran partikel dengan probe sonicator liposom cair terlihat

lebih jernih yang menunjukkan bahwa kurkumin telah terjebak dalam

sistem liposom dan dapat memperbaiki kelarutan kurkumin dalam air yang

dibuktikan dengan tidak adanya kristal kurkumin.

Setelah terbentuk liposom cair, sistem tersebut sangat rentan

mengalami degradasi, fusi, agregasi pada vesikel, sehingga dapat

menyebabkan perubahan distribusi ukuran partikel serta kebocoran bahan

yang terenkapsulasi dalam liposom pada saat penyimpanan (Akbarzadeh, et

al., 2013; Aso dan Yoshioka, 2005; Samad et al., 2007). Perubahan bentuk

liposom cair menjadi liposom padat (kering) dapat menghindarkan masalah

terkait dengan ketidakstabilan tersebut (Wang, et al., 2006). Untuk

mendapatkan liposom cair maka dilakukan pengeringan menggunakan oven

yang membutuhkan waktu lama mengharuskan adanya penambahan matriks

yang dapat melindungi liposom. Penelitian ini menggunakan matriks

HPMC sehingga didapat liposom kering dengan struktur yang tipis seperti

film. Penggunaan HPMC dapat mencegah agregasi pada vesikel liposom

selama pemanasan dan dapat menurunkan laju pelepasan dalam tubuh

sehingga dapat melepaskan obat secara perlahan (Nounou et al., 2006).

Liposom kering yang terbentuk dikarakterisasi sifat termalnya

menggunakan Differential Thermal Analysis (DTA). Hal ini dilakukan

untuk mengetahui ada atau tidaknya pemisahan fase pada sistem liposom



50

dengan cara membandingkan puncak endotermik Cur-EPC-L dan Cur-

HEPC-L dengan puncak endotermik masing-masing bahan penyusunnya.

Berdasarkan hasil pengamatan termogram DTA yang terlihat pada Gambar

5.2, pada Cur-EPC-L tidak terdapat puncak endotermik yang identik dengan

kurkumin menunjukkan tidak terjadi pemisahan fase kurkumin pada sistem

liposom. Pemisahan fase terjadi pada bahan penyusun sukrosa yang terlihat

puncak endotermik pada suhu 216,1°C. Cur-HEPC-L memiliki termogram

yang serupa dengan Cur-EPC-L yaitu tidak adanya puncak endotermik yang

identik dengan kurkumin dan hanya terdapat puncak endotermik sukrosa

pada suhu 212,8°C. Adanya puncak endotermik yang tajam dari sukrosa

menunjukkan pemisahan fase sukrosa yang disebabkan oleh penggunaan

sukrosa yang cukup banyak dalam formulasi maka pada saat liposom cair

dikeringkan terbentuk kristal sukrosa. Termogram DTA Cur-EPC-L dan

Cur-HEPC-L diketahui telah terjadi interaksi antar bahan penyusun liposom

sehingga tidak terlihat adanya pemisahan fase antara bahan penyusunnya

dan kurkumin dalam sistem liposom tersebut tidak dalam bentuk kristal.

Selain karakterisasi DTA, untuk membuktikan bahwa kurkumin

telah berada dalam liposom dan bukan bentuk kristal di luar liposom maka

dilakukan pengamatan pola difraksi menggunakan X-Ray Diffractometer

(XRD). Setiap bentuk kristal dalam suatu senyawa memiliki pola difraksi

sinar-X yang khas. Pola difraksi dapat dihasilkan oleh kristal tunggal atau

dari serbuk yang mengandung beberapa bahan. Penelitian terhadap pola

difraksi liposom kering kurkumin dilakukan untuk mengetahui kristalinitas

Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L yang dapat menunjukkan keberhasilan dari

sistem. Hal tersebut dilakukan dengan pengamatan terhadap puncak

difraktogram yang dihasilkan sistem liposom dan dibandingkan dengan



51

puncak pada difraktogram masing-masing bahan penyusun liposom.

Difraktogram XRD komponen penyusun kurkumin, kolesterol, TPGS dan

sukrosa menunjukkan beberapa puncak yang tajam dengan pola difraksi

yang khas dan mengindikasikan bahwa bahan tersebut berada dalam bentuk

kristal. Pola difraksi yang tajam dikarenakan oleh komponen penyusun

memiliki susunan molekul yang lebih teratur dan berbentuk kristal.

Sedangkan difraktogram Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L menunjukkan pola

difraksi dengan puncak yang melebar dan tidak terdapat puncak tajam yang

dapat menunjukkan tidak adanya kristal terhadap penyusun liposom serta

tidak terbentuknya kristal baru akibat interaksi antar bahan dalam sistem

tersebut. Puncak yang lebar pada pola difraksi dihasilkan oleh penyebaran

sinar-X kurang koheren akibat susunan molekul relatif acak dan berbentuk

amorf (Depkes RI, 1995). Difraktogram XRD menunjukkan bahwa pada

Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L tidak terdapat kristal dan sistem telah

berbentuk amorf.

Karakterisasi selanjutnya yaitu pengamatan morfologi liposom

kering kurkumin dengan menggunakan Scanning Electron Microscop

(SEM) yang bertujuan untuk mengamati morfologi dan struktur matriks

yang terbentuk pada sistem. Hasil pengamatan SEM Cur-EPC-L dan Cur-

HEPC-L pada Gambar 5.6 dan 5.7 memperlihatkan bahwa liposom yang

dihasilkan dari formula tersebut berbentuk sferis. Struktur matriks liposom

relatif padat diakibatkan oleh adanya bahan penyusun matriks yang cukup

banyak yaitu HPMC dan sukrosa yang berbentuk padat setelah dikeringkan

serta waktu yang dibutuhkan untuk mengeringkan liposom cair cukup lama.



52

Hasil karakterisasi fisik Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L ukuran

partikel (PSA), analisis termal(DTA), difraksi sinar-X(XRD) dan

morfologi(SEM) menunjukkan bahwa kedua jenis fosfolipid EPC dan

HEPC dapat digunakan untuk membentuk liposom kering kurkumin.

Berdasarkan pengukuran, partikel Cur-EPC-L lebih kecil dan heterogen

dibandingkan Cur-HEPC-L. Sedangkan karakterisasi DTA dan XRD Cur-

EPC-L dan Cur-HEPC-L menunjukkan hasil yang relatif sama. Begitu pula

hasil pengamatan SEM Cur-EPC-L dan Cur-HEPC-L yang sama-sama

memperlihatkan liposom berbentuk sferis serta struktur matriks yang relatif

padat. Sistem liposom tersebut dapat memperbaiki kelarutan kurkumin

dalam air sehingga diharapkan dapat meningkatkan bioavailabilitas

kurkumin di dalam tubuh serta lebih stabil selama penyimpanan.



53

BAB VII

KESIMPULAN DAN SARAN

7.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian ini, maka dapat disimpulkan bahwa:

1. Liposom kering kurkumin yang terbuat dari fosfolipid EPC memiliki

ukuran partikel sebesar 2396,5 ± 979,4nm dengan PI 0,517 ± 0,114

dan berbentuk sferis. Analisis sifat termal DTA tidak terjadi

pemisahan fase kurkumin terhadap sistem liposom. Pada

difraktogram XRD sistem liposom berbentuk amorf dan tidak

terdapat kurkumin dalam keadaan kristal.

2. Liposom kering kurkumin yang terbuat dari fosfolipid HEPC

memiliki ukuran partikel sebesar 2464,2 ± 1813,0nm dengan PI

0,370 ± 0,203 dan berbentuk sferis. Analisis sifat termal DTA tidak

terjadi pemisahan fase kurkumin terhadap sistem liposom.

Difraktogram XRD sistem liposom berbentuk amorf dan tidak

terdapat kurkumin dalam keadaan kristal.

3. Kedua fosfolipid baik EPC dan HEPC dapat digunakan dalam

formulasi liposom kering kurkumin yang dapat menghasilkan sistem

liposom berbentuk amorf dengan ketercampuran yang baik.

7.2 Saran

Dari hasil penelitian yang telah dilakukan maka disarankan untuk

melakukan penelitian lebih lanjut mengenai liposom dengan diberikan

perlakuan pengecilan ukuran partikel serta dikeringkan dengan metode

freeze-drying yang selanjutnya dapat dikarakterisasi mengenai efisiensi

penjebakan, uji pelepasan, serta stabilitas saat penyimpanan.



54

DAFTAR PUSTAKA

Abdelwahed, W., Degobert, G., Stainmesse, S., & Fessi, H. 2006. Freeze-drying of nanoparticles: formulation, process and storage considerations. Advanced drug delivery reviews, 58(15), 1688-1713.

Aggarwal, B.B., Bhatt I.D., Ichikawa H., Ahn K.S., Sethi G., Sandur S.K., Natarajan C., Seeram N., Shishodia S., 2006. Curcumin Biological and Medicinal Properties, 297-347.

Aggarwal, B.B., Surh, Y.J., Shisodia S. Eds. 2007. Advances in Experimental Medicine and Biology Vol. 595 : The Molecular Targets and Therapeutic Uses of Curcumin in Health and Disease. New York : Springer.

Akbarzadeh, A., Sadabady, R.R., Davaran, S., Joo, S.W., Zarghami, N., Hanifehpour, Y., Samiei, M., Kouhi, M., Koshki, K.N., 2013. Liposome: classification, preparation, and applications. Nanoscale Research Letters, p.1-9.

Aso, Y, and S. Yoshioka, 2005. Links effect of Freezing Rate on Physical stability of Lyophilized Cationic Liposomes. Tokyo. Chem Pharm Bull 53; 301-304.

Bansal, A.K., Wahlang, B., Pawar, Y.G. 2010.Identification of Permeability-Related Hurdles in Oral Delivery of Curcumin Using The Caco-2-cell model, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, vol. 77 p275-282.

Barel, A. O., Maibach, H.I. 2003. Handbook of cosmetic science and technology third edition. Marcel Dekker, New York,203.

Chattopadhyay, I., Biswas, K., Bandyopadhyay, U., & Banerjee, R. K. 2004. Turmeric and curcumin: Biological actions and medicinal applications. Current science, 87(1), 44-53.

Chen, Y., Wu, Q., Zhang, Z., Yuan, L., Liu, X., & Zhou, L. 2012. Preparation of curcumin-loaded liposomes and evaluation of their



55

skin permeation and pharmacodynamics. Molecules, 17(5), 5972-5987.

Chen, C., Han, D., Cai, C., Tang, X., 2010. An overview of liposome lyophilization and its future potential. Journal of Controlled Release, Vol. 142, p.299–311.

Crommelin D, Bos G, Storm G. 2001.Liposomes - succesful carrier systems for targeted drug delivery.p.17-19.

Daicheng Liu dan Fucui Ma. 2011. Soybean Phospholipids, Recent Trends for Enhancing the Diversity and Quality of Soybean Products. China : InTech.

Duhem, N., Danhier, F., & Préat, V. (2014). Vitamin E-based nanomedicines for anti-cancer drug delivery. Journal of Controlled Release, 182, 33-44.

Feng, S.S., 2008. Nanoparticles of biodegradable polymer for cancer treatment. Biomaterials, Vol. 29, p. 4146–4147.

Franks, F. 1998. Freeze-drying of bioproducts: putting principles into practice.European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 45(3), 221-229.

Go´mez-Hens A, Manuel Ferna´ndez-Romero J. 2005 The role of liposomes in analytical processes. Trends Anal. Chem. 24, 9–19.

Huang, Yi-You., Chung, Tze-Wen., Wu, Cheng-I., 1998. Effect of saturated /unsaturated phosphatidylcholine ratio on the stability of liposome-encapsulated hemoglobin. International Journal of Pharmaceutics, Vol. 172, p. 161–167.

Immordino, M. L., Dosio, F., & Cattel, L. 2006. Stealth liposomes: review of the basic science, rationale, and clinical applications, existing and potential.International journal of nanomedicine, 1(3), 297.



56

Jin, L., Millard, A. C., Wuskell, J. P., Dong, X., Wu, D., Clark, H. A., & Loew, L. M. 2006. Characterization and application of a new optical probe for membrane lipid domains. Biophysical journal, 90(7), 2563-2575.

Khan, Iftikhar., Elhissi, Abdelbary., Shah, Mahmood., Alhnan, Mohamed Albed., Ahmed, Waqar., 2013. Liposome-based carrier systems and devices used for pulmonary drug delivery. UK. Woodhead Publishing Limited. 395-443.

Khosravi-Darani, K., Pardakhty, A., Honarpisheh, H., Rao, V. M., & Mozafari, M. R. (2007). The role of high-resolution imaging in the evaluation of nanosystems for bioactive encapsulation and targeted nanotherapy. Micron,38(8), 804-818.

Laouini, A., Maalej, J., Blouza, I.L., Sfar, S., Charcosset, C., Fessi, H., 2012. Preparation, Characterization and Applications of Liposomes: State of the Art. Journal of Colloid Science and Biotechnology, Vol. 1, p.147–68.

Lin, J. K., Pan, M. H., & Lin-Shiau, S. Y. 2000. Recent studies on the biofunctions and biotransformations of curcumin. Biofactors, 13(1), 153-158.

Liu, Y., Zhao, Y., & Feng, X. 2008. Exergy analysis for a freeze-drying process. Applied Thermal Engineering, 28(7), 675-690.

Mathews, VV., Binu, P., Paul, MV Sauganth., Abhilash, M., Manju, Alex., Nair, R.Harikumaran. 2012. Hepatoprotective efficacy of curcumin against arsenic trioxide toxicity. India. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine s706-s711.

Mansoori, M.A., Agrawal, S., Jawade, S., Khan, M.I., 2012. A review on liposome. IJARB, Vol. 2, p.453-64.

Moghimipour, E., & Handali, S. 2013. Liposomes as drug delivery systems: properties and applications. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences, 4(1), 169-185.



57

Monteiro, N., Martins, A., Reis, R.L., Neves, N.M., 2014. Liposomes in tissue engineering and regenerative medicine. Interface, Vol.11.

Mozafari, M. R. 2005. Liposomes: an overview of manufacturing techniques.Cellular and Molecular Biology Letters, 10(4), 711.

Monteiro, N., Martins, A., Reis, R. L., & Neves, N. M. 2014. Liposomes in tissue engineering and regenerative medicine. Journal of The Royal Society Interface, 11(101), 20140459.

Muthu, M.S., Feng, S.S., 2009. Pharmaceutical stability aspects of nanomedicines. Nanomedicine, Vol. 4, p.857–860.

Muthu, M.S., Kulkarni, S.A., Xiong, Jiaqing., Feng, S.S., 2011. Vitamin E TPGS coated liposomes enhanced cellular uptake and cytotoxicity of docetaxel in brain cancer cells. International Journal of Pharmaceutics, Vol. 421, p. 332– 340.

Muthu, M.S., Singh, S., 2009. Targeted nanomedicines: effective treatment modali-ties for cancer, AIDS and brain disorders. Nanomedicine, Vol 4, p. 105–118.

Nounou, M. M., El-Khordagui, L. K., Khalafallah, N. A., & Khalil, S. A. (2006). In vitro release of hydrophilic and hydrophobic drugs from liposomal dispersions and gels. ACTA PHARMACEUTICA-ZAGREB-, 56(3), 311.

O’Doherty, M. 2004. Liposome literature review. Nanobiotechnology and Bioanalysis Group.

Ohvo-Rekilä, H., Ramstedt, B., Leppimäki, P., & Slotte, J. P. (2002). Cholesterol interactions with phospholipids in membranes. Progress in lipid research, 41(1), 66-97.

Pandelidou, Maria., Dimas, Konstantinos., Georgopoulos, Aristidis, Hatziantoniou, Sophia., Demetzos, Costas., 2011. Preparation and characterization of lyophilised egg pc liposomes incorporating curcumin and evaluation of its activity against colorectal cancer cell



58

lines.Journal of Nanoscience and Nanotechnology, Vol. 11, p. 1259–1266.

Sailaja, A. K., Sashikala, P., 2014. An overall review on liposomal drug delivery system. Indian Journal of Novel Drug Delivery, Vol. 6, No. 2, p. 112-119.

Samad, A., Sultana, Y., Aqil, M., 2007. Liposomal drug delivery systems : An update review. Current Drug Delivery, Vol.4, p.297-305.

Shah, Apurva R., Banerjee, R., 2011. Effect of D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate (TPGS) on surfactant monolayers.Colloids Surf B Biointerfaces, Vol. 85 No. 2, p.116-124.

Sharma, R. A., Gescher, A. J., & Steward, W. P. 2005. Curcumin: the story so far. European journal of cancer, 41(13), 1955-1968.

Sashi, Kant., Satinder, Kumar., Bharat, Prashar., 2012. A Complete Review On : Liposomes. International Research Journal of Pharmacy. Vol. 3, No 7.

Shoba, G., Joy, D., Joseph, T., Majeed, M., Rajendran, R., & Srinivas, P. S. 1998. Influence of piperine on the pharmacokinetics of curcumin in animals and human volunteers. Planta medica, (64), 353-6.

Sun, D., Zhuang, X., Xiang, X., Liu, Y., Zhang, S., Liu, C., ... & Zhang, H. G. 2010. A novel nanoparticle drug delivery system: the anti-inflammatory activity of curcumin is enhanced when encapsulated in exosomes. Molecular therapy, 18(9), 1606-1614.

Verma, D. D., Verma, S., Blume, G., & Fahr, A. (2003). Particle size of liposomes influences dermal delivery of substances into skin. International Journal of Pharmaceutics, 258(1), 141-151.

Wahlang, B., Pawar, Y. B., & Bansal, A. K. 2011. Identification of permeability-related hurdles in oral delivery of curcumin using the Caco-2 cell model. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 77(2), 275-282.



59

Wang, Ting., Deng, Yingjie., Geng, Yehui., Gao, Zibin., Zou, Jianping., Wang, Zhixuan., 2006. Preparation of submicron unilamellar liposomes by freeze-drying double emulsions. Biochimica et Biophysica Acta1758, p. 222–231.

Wang, W. (2000). Lyophilization and development of solid protein pharmaceuticals. International journal of pharmaceutics, 203(1), 1-60.

Wang, Y. J., Pan, M. H., Cheng, A. L., Lin, L. I., Ho, Y. S., Hsieh, C. Y., & Lin, J. K. 1997. Stability of curcumin in buffer solutions and characterization of its degradation products. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis,15(12), 1867-1876.

Xu, D., Wang, S., Jin, J., Mei, X., Xu, B., 2006. Dissolution and Absorption Researches of Curcumin in Solid Dispersions with The Polymers PVP. China. Hongkong Medical Publisher.p. 343-349

Yang, F., Jin, C., Jiang, Y., Li, J., Di, Y., Ni, Q., & Fu, D. 2011. Liposome based delivery systems in pancreatic cancer treatment: from bench to bedside.Cancer treatment reviews, 37(8), 633-642.

Yang, S., Chen, J., Zhao, D., Han, D., & Chen, X. 2012. Comparative study on preparative methods of DC-Chol/DOPE liposomes and formulation optimization by determining encapsulation efficiency. International journal of pharmaceutics, 434(1), 155-160.

Yoshioka, H., 1991. Surface modification of haemoglobulin-containing liposomes with polyethylene glycol prevents liposomes aggregation in blood plasma.Biomaterials, Vol. 12, p. 861–864.

Yu Nie, L. J., Ding, H., Xie, L., Li, L., He, B., Wu, Y., & Gu, Z. (2012). Cholesterol derivatives based charged liposomes for doxorubicin delivery: preparation, in vitro and in vivo characterization. Theranostics, 2(11), 1092.



60

Zhai, G., Wu, J., Zhao, X., Yu, B., Li, H., Lu, Y., ... & Lee, R. J. (2008). A liposomal delivery vehicle for the anticancer agent gossypol. Anticancer research, 28(5A), 2801-2805.

Zhongfa, L., Chiu, M., Wang, J., Chen, W., Yen, W., Fan-Havard, P., ... & Chan, K. K. 2012. Enhancement of curcumin oral absorption and pharmacokinetics of curcuminoids and curcumin metabolites in mice. Cancer chemotherapy and pharmacology, 69(3), 679-689.



61

LAMPIRAN

Lampiran-1

Certificate of Analysis Bahan Penelitian EPC



62



63

Lampiran-2

Certificate of Analysis Bahan Penelitian HEPC



64



65

Lampiran-3

Termogram DTA Kurkumin

Termogram DTA EPC



66

Lampiran-4

Termogram DTA HEPC

Termogram DTA Kolesterol



67

Lampiran-5

Termogram DTA TPGS

Termogram DTA Sukrosa



68

Lampiran-6

Termogram DTA HPMC

Termogram DTA Campuran Fisik Cur-EPC-L



69

Lampiran-7

Termogram DTA Campuran Fisik Cur-HEPC-L

Termogram DTA Cur-EPC-L



70

Lampiran-8

Termogram DTA Cur-HEPC-L



71

Lampiran-9

Difraktogram Sinar-X Kurkumin

Position [°2Theta] (Copper (Cu))

10 20 30 40

0

500

1000

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Kurkumin

Pos. [°2Th.]

Height [cts] FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.1775 161.05 0.7872 17.06851 14.47 7.8882 172.07 0.1476 11.20823 15.46 8.8844 926.66 0.1968 9.95352 83.25

12.2031 219.20 0.1476 7.25308 19.69 13.9757 50.22 0.1476 6.33686 4.51 14.5451 361.71 0.1476 6.09005 32.50 15.1294 101.07 0.1476 5.85614 9.08 15.8465 105.06 0.1476 5.59271 9.44 16.3279 49.71 0.1476 5.42891 4.47 17.3216 1113.11 0.1968 5.11964 100.00 18.1716 452.40 0.1968 4.88204 40.64 18.8370 119.34 0.1476 4.71104 10.72 19.4686 219.79 0.1476 4.55962 19.75 21.2335 209.93 0.2460 4.18445 18.86 22.8519 52.71 0.2460 3.89164 4.74 23.3730 423.86 0.1968 3.80603 38.08 23.7888 331.51 0.1476 3.74045 29.78 24.5971 415.05 0.1476 3.61933 37.29



72

25.2208 90.88 0.1476 3.53123 8.16 25.6031 435.66 0.1968 3.47936 39.14 26.1268 223.18 0.1968 3.41078 20.05 26.7796 190.24 0.1476 3.32911 17.09 27.3879 312.05 0.1476 3.25653 28.03 28.2242 115.59 0.1476 3.16191 10.38 28.5770 54.33 0.0984 3.12367 4.88 28.9820 199.41 0.1476 3.08094 17.91 31.6844 45.03 0.1968 2.82406 4.05 33.5219 23.01 0.1476 2.67334 2.07 34.8669 34.87 0.1968 2.57324 3.13 36.4723 16.25 0.3936 2.46358 1.46 37.5942 18.51 0.2952 2.39260 1.66 38.2512 18.71 0.2952 2.35300 1.68 40.0531 13.33 0.2952 2.25120 1.20 42.8566 28.41 0.4920 2.11021 2.55 44.6077 38.82 0.1968 2.03135 3.49 45.4798 22.45 0.1476 1.99441 2.02 48.4899 13.67 0.4920 1.87741 1.23



73

Lampiran-10

Difraktogram Sinar-X EPC


10 20 30 40

0

200

400

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X EPC

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.1280 125.24 0.1338 17.23345 26.22 6.1345 111.48 0.1673 14.40789 23.34 6.8394 477.72 0.0502 12.92449 100.00 7.5978 62.14 0.1673 11.63600 13.01 8.6277 49.31 0.1004 10.24908 10.32

10.3735 31.97 0.2676 8.52787 6.69 13.7891 42.69 0.0502 6.42219 8.94 15.1951 9.00 0.0836 5.83099 1.88 20.6823 62.50 0.0335 4.29470 13.08 23.5050 21.67 0.1004 3.78496 4.54 27.7369 19.34 0.1004 3.21635 4.05 28.7600 28.91 0.1004 3.10422 6.05 34.1498 21.37 0.1338 2.62562 4.47 35.7838 7.11 0.6691 2.50938 1.49 38.2530 7.33 0.2342 2.35289 1.53 42.0039 13.85 0.1673 2.15106 2.90



74

Lampiran-11

Difraktogram Sinar-X HEPC


10 20 30 40

0

200

400

HEPC

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X HEPC

Pos. [°2Th.] Height [cts]

FWHM Left

[°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.8431 565.19 0.0502 15.12562 99.01 8.7407 63.67 0.3346 10.11682 11.15 9.5878 30.95 0.0502 9.22486 5.42

11.3659 17.92 0.0836 7.78536 3.14 11.6407 44.21 0.2007 7.60217 7.75 21.0106 435.18 0.1004 4.22834 76.23 21.3881 570.84 0.2676 4.15456 100.00 21.7060 506.41 0.2007 4.09442 88.71 24.9740 29.58 0.0502 3.56555 5.18 33.6680 12.33 0.1004 2.66208 2.16 35.1066 6.17 0.2007 2.55622 1.08 39.8547 3.01 0.3346 2.26195 0.53 40.5115 16.37 0.0669 2.22678 2.87



75

Lampiran-12

Difraktogram Sinar-X TPGS


10 20 30 40

0

200

400

600

TPGS

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X TPGS

Pos. [°2Th.] Height [cts] FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

6.7526 14.41 0.1004 13.09028 1.81 11.1520 16.47 0.3346 7.93420 2.07 13.3241 10.90 0.6691 6.64529 1.37 18.0217 57.60 0.1004 4.92228 7.24 19.1320 795.52 0.1673 4.63908 100.00 23.3067 521.38 0.1338 3.81670 65.54 23.4598 478.76 0.1004 3.79215 60.18 25.1408 16.65 0.1338 3.54228 2.09 26.7077 56.89 0.2007 3.33791 7.15 30.2363 14.57 0.0669 2.95593 1.83 35.4655 50.36 0.0502 2.53117 6.33 36.2463 35.08 0.2676 2.47842 4.41 39.6204 16.23 0.6691 2.27478 2.04 41.7139 12.81 0.1338 2.16534 1.61 43.2819 13.19 0.6691 2.09046 1.66 45.2868 8.27 0.9368 2.00246 1.04 46.9778 21.60 0.0612 1.93265 2.71



76

Lampiran-13

Difraktogram Sinar-X Kolesterol


10 20 30 40

0

2000

4000

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Kolesterol

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.1577 5136.17 0.0669 17.13429 100.00 5.2464 3632.24 0.0335 16.84479 70.72 5.3565 2095.31 0.0502 16.49860 40.80 6.3190 347.06 0.2342 13.98768 6.76 7.0860 209.67 0.1338 12.47524 4.08 7.7568 244.73 0.2342 11.39779 4.76 8.7634 168.49 0.1171 10.09070 3.28 9.5673 291.84 0.2342 9.24459 5.68

10.5549 482.04 0.0669 8.38170 9.39 11.3317 267.42 0.1338 7.80878 5.21 11.8046 288.97 0.1004 7.49699 5.63 12.7764 545.78 0.1338 6.92891 10.63 13.0003 559.14 0.0669 6.81005 10.89 13.2220 435.20 0.1004 6.69634 8.47 13.8523 458.55 0.1673 6.39306 8.93 14.1779 934.08 0.1004 6.24696 18.19 14.2941 828.35 0.0669 6.19642 16.13 14.8503 232.69 0.0836 5.96558 4.53



77

15.3666 1166.97 0.0836 5.76629 22.72 15.4833 1514.94 0.0502 5.72307 29.50 15.6062 1543.01 0.1004 5.67828 30.04 16.1939 430.86 0.2342 5.47351 8.39 16.9562 1235.19 0.0836 5.22913 24.05 17.0476 1437.63 0.1004 5.20129 27.99 17.3920 1354.14 0.0502 5.09907 26.36 17.4915 1404.54 0.0502 5.07027 27.35 17.6253 951.82 0.1171 5.03211 18.53 18.2069 1241.78 0.0669 4.87263 24.18 18.3206 1122.32 0.1506 4.84267 21.85 18.9613 439.41 0.3011 4.68044 8.56 19.6621 465.69 0.2007 4.51517 9.07 20.9092 367.15 0.1338 4.24861 7.15 21.2944 382.77 0.2676 4.17263 7.45 22.0573 289.74 0.0335 4.03000 5.64 22.4768 239.78 0.2007 3.95572 4.67 23.6774 268.38 0.1338 3.75779 5.23 25.1049 209.26 0.4015 3.54726 4.07 26.2783 265.78 0.2342 3.39146 5.17 27.1002 153.94 0.3346 3.29044 3.00 28.5200 145.50 0.1004 3.12979 2.83 30.5674 128.06 0.2342 2.92466 2.49 32.8494 94.38 0.1673 2.72652 1.84 33.8408 65.02 0.1338 2.64888 1.27 34.4068 85.79 0.2007 2.60659 1.67 36.1352 64.10 0.4015 2.48578 1.25 37.1840 132.91 0.1338 2.41804 2.59 38.8008 80.88 0.3346 2.32093 1.57 40.0143 123.43 0.3346 2.25330 2.40 40.7008 88.98 0.2007 2.21686 1.73 42.5033 177.99 0.3346 2.12693 3.47



78

Lampiran-14

Difraktogram Sinar-X Sukrosa


10 20 30 40

0

10000

20000

30000

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Sukrosa

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

7.5651 21.02 0.2007 11.68611 0.05 8.2564 3286.16 0.0669 10.70914 8.31 8.3838 7187.98 0.0669 10.54672 18.17

11.6608 3846.54 0.1004 7.58913 9.73 12.3751 75.55 0.1004 7.15263 0.19 12.7439 8992.62 0.1506 6.94647 22.74 13.1843 86.46 0.0335 6.71542 0.22 13.6980 45.29 0.1338 6.46470 0.11 15.1264 64.94 0.2007 5.85730 0.16 15.5899 6973.38 0.1004 5.68420 17.63 15.8797 309.74 0.0836 5.58110 0.78 16.7313 11677.12 0.1506 5.29891 29.53 18.2060 98.55 0.0669 4.87289 0.25 18.5718 58.94 0.0502 4.77773 0.15 18.9233 189.98 0.0502 4.68976 0.48



79

19.6883 92.70 0.0669 4.50923 0.23 19.9044 52.43 0.0669 4.46076 0.13 20.7747 70.77 0.0502 4.27582 0.18 22.4602 136.08 0.0669 3.95861 0.34 22.7151 85.24 0.0669 3.91475 0.22 23.1206 105.69 0.0836 3.84701 0.27 23.4813 479.73 0.1004 3.78872 1.21 24.3652 178.93 0.1673 3.65324 0.45 24.8248 535.99 0.0502 3.58665 1.36 25.2130 39549.72 0.1673 3.53230 100.00 25.7255 244.92 0.1004 3.46308 0.62 27.2454 392.51 0.1004 3.27324 0.99 27.6432 573.07 0.0836 3.22703 1.45 28.4836 47.55 0.0669 3.13371 0.12 30.2049 173.47 0.0669 2.95893 0.44 30.5030 81.39 0.0502 2.93069 0.21 31.3785 4312.62 0.1224 2.84853 10.90 31.4774 1673.56 0.0408 2.84687 4.23 31.9275 1008.78 0.0612 2.80079 2.55 32.0534 2190.70 0.1020 2.79008 5.54 32.1574 813.19 0.0408 2.78820 2.06 32.6419 192.71 0.0612 2.74110 0.49 32.7277 79.42 0.0408 2.74091 0.20 33.5126 1444.99 0.0612 2.67185 3.65 33.8258 587.04 0.1632 2.64782 1.48 34.6396 230.07 0.0612 2.58746 0.58 34.7348 120.79 0.0408 2.58700 0.31 35.5671 1314.31 0.1020 2.52208 3.32 35.8641 370.52 0.0612 2.50187 0.94 36.7003 202.19 0.1020 2.44677 0.51 36.8216 72.91 0.0612 2.44504 0.18 38.4304 4741.60 0.0408 2.34050 11.99 38.5688 10923.27 0.1428 2.33242 27.62 38.6927 4120.30 0.0612 2.33101 10.42 38.9605 1453.55 0.1632 2.30987 3.68



80

Lampiran-15

Difraktogram Sinar-X HPMC


10 20 30 40

0

200

400

HPMC

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X HPMC

Pos. [°2Th.] Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

8.5343 45.43 0.6691 10.36107 34.32 19.5270 132.35 0.5353 4.54611 100.00 21.0189 118.46 0.6691 4.22667 89.50 23.6416 31.38 0.2007 3.76340 23.71 45.8275 3.60 0.3346 1.98009 2.72



81

Lampiran-16

Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-EPC-L


10 20 30 40

0

1000

2000

3000

4000

EPC-CF

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-EPC-L

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.2771 152.97 0.1476 16.74682 4.30 6.9079 68.46 0.2952 12.79634 1.93 8.3643 1508.22 0.2460 10.57127 42.42

11.6530 576.90 0.1476 7.59418 16.23 12.8424 73.64 0.1476 6.89340 2.07 13.2151 317.19 0.1476 6.69986 8.92 15.4392 793.46 0.1476 5.73934 22.32 16.7813 1334.73 0.1968 5.28323 37.54 18.1849 805.16 0.1476 4.87849 22.65 18.8208 656.54 0.1476 4.71507 18.47 19.6699 148.83 0.2952 4.51341 4.19 20.9258 368.75 0.1476 4.24529 10.37 22.0621 206.78 0.1476 4.02913 5.82 22.6845 258.55 0.1476 3.91997 7.27 23.5758 79.44 0.2952 3.77375 2.23



82

24.8933 219.98 0.0984 3.57693 6.19 25.2466 3555.45 0.2460 3.52767 100.00 27.3271 86.97 0.1968 3.26364 2.45 28.7751 28.73 0.2952 3.10261 0.81 30.2759 216.55 0.0984 2.95215 6.09 31.0930 1258.80 0.1476 2.87641 35.40 33.8848 107.17 0.1476 2.64554 3.01 34.9667 57.44 0.1476 2.56612 1.62 35.5860 22.61 0.2952 2.52287 0.64 36.8242 205.81 0.1476 2.44084 5.79 38.4219 29.40 0.4920 2.34294 0.83 40.5035 59.27 0.1476 2.22720 1.67 41.7176 132.36 0.1476 2.16515 3.72 43.6416 92.48 0.1476 2.07406 2.60 46.1924 28.17 0.1968 1.96529 0.79 46.8143 39.16 0.1968 1.94062 1.10 47.4002 128.11 0.1968 1.91800 3.60 48.3895 757.99 0.1968 1.88107 21.32 48.7636 69.82 0.0984 1.86751 1.96



83

Lampiran-17

Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-HEPC-L


10 20 30 40

0

5000

10000

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Campuran Fisik Cur-HEPC-L

Pos. [°2Th.] Height [cts] FWHM Left [°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.8498 304.04 0.1968 15.10830 2.74 8.2710 2345.75 0.1476 10.69037 21.12

11.6415 64.99 0.2460 7.60169 0.59 12.7553 903.08 0.1476 6.94032 8.13 15.4251 46.73 0.3936 5.74456 0.42 16.4570 147.03 0.1476 5.38661 1.32 16.7877 697.35 0.1476 5.28123 6.28 18.1981 106.56 0.1476 4.87497 0.96 18.7449 113.37 0.1968 4.73399 1.02 19.6537 1224.11 0.1476 4.51709 11.02 20.9756 1418.10 0.1968 4.23530 12.77 22.0679 351.19 0.0984 4.02809 3.16 23.5537 668.38 0.1476 3.77725 6.02 24.7338 11108.63 0.1476 3.59963 100.00 25.2651 358.76 0.1476 3.52512 3.23 26.6237 40.09 0.2460 3.34824 0.36 28.8121 142.41 0.1476 3.09872 1.28 31.0580 85.38 0.1476 2.87957 0.77 32.0297 486.17 0.0984 2.79440 4.38



84

32.7789 288.64 0.1476 2.73222 2.60 35.4114 100.54 0.1476 2.53491 0.91 37.0695 327.57 0.1476 2.42525 2.95 38.3316 33.06 0.2952 2.34825 0.30 40.3706 35.41 0.1476 2.23423 0.32 43.2649 432.24 0.1968 2.09124 3.89 47.1120 503.68 0.1476 1.92905 4.53 48.5234 16.88 0.2952 1.87619 0.15



85

Lampiran-18 Difraktogram Sinar-X Cur-EPC-L


10 20 30 40

0

100

200

EPC

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Cur-EPC-L

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left

[°2Th.]

d-spacing [Å]

Rel. Int. [%]

5.4275 47.14 0.6691 16.28306 100.00 22.8918 14.10 0.1004 3.88494 29.91 24.8610 11.30 0.0502 3.58151 23.97 26.2443 3.41 0.8029 3.39579 7.24 30.9787 11.00 0.0502 2.88677 23.34 34.5467 13.30 0.1004 2.59635 28.21 47.1754 12.62 0.2007 1.92661 26.76 48.5338 20.46 0.0612 1.87426 43.41



86

Lampiran-19

Difraktogram Sinar-X Cur-HEPC-L


10 20 30 40

0

200

400

HEPC I

Tabel Puncak Interferensi Difraktogram Sinar-X Cur-HEPC-L

Pos. [°2Th.]

Height [cts]

FWHM Left [°2Th.]

d-spacing

[Å]

Rel. Int. [%]

10.2644 17.80 0.1004 8.61824 15.18 13.0409 40.07 0.1004 6.78894 34.16 21.0929 117.31 0.2676 4.21202 100.00 30.7340 23.03 0.1004 2.90918 19.63 37.8779 19.78 0.1004 2.37532 16.86 44.9986 8.63 0.1338 2.01461 7.35 45.7259 8.63 0.1673 1.98425 7.35



87

Lampiran-20

Hasil Pemeriksaan Morfologi Cur-EPC-L Menggunakan Scanning Electron

Microscope (SEM)

Keterangan : A. Perbesaran 500 kali B. Perbesaran 1500 kali C. Perbesaran 2000 kali D. Perbesaran 3000 kali E. Perbesaran 5000 kali



88

Lampiran-21

Hasil Pemeriksaan Morfologi Cur-HEPC-L Menggunakan Scanning

Electron Microscope (SEM)

Keterangan : A. Perbesaran 500 kali B. Perbesaran 1500 kali C. Perbesaran 2000 kali D. Perbesaran 3000 kali E. Perbesaran 5000 kali



Documents

SKRIPSI KARAKTERISASI SISTEM LIPOSOM …repository.unair.ac.id/46/1/FF.F.2-15 Pur k.pdfobat hidrofobik dan memiliki target spesifik dalam tubuh. Karakteristik liposom dapat dipengaruhi