Preguntas HPLC

8/17/2019 Preguntas HPLC

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Nombre: David Lagla

Curso: Qui!o "Qu#mi$a Farma$%u!i$a& Tema: 'regu!as ('LC

¿Cuál es la diferencia fundamental en lo que se reere a losdetectores que inuye en la fase móvil del HPLC y de CG(cromatografía de gases!

E el C) es mu* sim+le e$o!rar de!e$!ores ,ue di-ere$ie la mues!ra dela -ase m.vil *a ,ue es u gas ier!e/ E ('LC es e$esario e$o!rardis+osi!ivos ,ue di-ere$ie el solu!o e solu$i. de la -ase m.vil/ El m0ssesible es el de!e$!or de 1uores$e$ia 2+ag 3 I!rodu$$i. al ('LC4

¿Cómo se mide la ecacia de una columna cromatografía en elequi"o de HPLC!

R: Se mide +or el 5mero de +la!os !e.ri$os +or me!ro

La medida $ua!i!a!iva de la e6$ie$ia es el 5mero de +la!os !e.ri$os7obviame!e el 5mero de +la!os !e.ri$os e-e$!ivos aume!a $o la logi!udde la $oluma7 +or lo !a!o +ara $om+arar di-ere!es -ases es!a$ioarias esm0s $oveie!e $osiderar la al!ura del +la!o e,uivale!e/

¿#u$ función cum"le la "recolumna!

R: Se la u!ili8a $o el 6 de ,ue se ,uede a9# +ar!#$ulas o su$iedades ,ue+odr#a a-e$!ar a la $oluma/

¿Para el funcionamiento continuo y en %uenas condiciones de la%om%a que se recomienda!

R: Debe 6l!rarse +reviame!e los disolve!es $o u 6l!ro de 7; ado +ero o +uede as+irardisolve!e7 la bomba $ome8ar0 a as+irar aire/ Eso +rodu$ir0 +er!urba$ioes+eri.di$as e la l#ea base7 1u>o ies!able * 9as!a -allo $om+le!o e labomba

¿Cómo com"ro%ar si un ltro está %loqueado!

R: Des$oe$!0dolo del desgasi6$ador * ver si sale dv/7 2*a , u 6l!roblo,ueado o a-e$!a a la le$!ura de 'resi. e la bomba/4

¿#u$ característica tienen los disolventes en HPLC!

R: Debe ser $om+a!ible $o el de!e$!or/

Adem0s

• 'u!os de Ebulli$i. i!ermedios

• Al!a 'ure8a


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• Mis$ible $o o!ros solve!es +ara -ormar me8$las 5!iles

• No degradar o disolver la -ase es!a$ioaria

• Teer ba>a vis$osidad +ara redu$ir las $a#das de +resi.

¿Cuáles son los %enecios de utili&ar metanol en fase reversa!

Tiee u ma*or +oder de disolve!es de sales * rea$!ivos de a+areamie!o

i.i$o7 es u solve!e bara!o * +o$o !o?i$o +ara ('LC

¿Para o%tener %uenos resultados "or el m$todo de gradiente que sede%e tomar en cuenta!

• De!ermiar la $om+osi$i. ii$ial * 6al del solve!e/

• A>us!ar el !iem+o del gradie!e/

• De!ermiar la -orma del gradie!e 2lieal7 $.$ava o $ove?a4/

• A>us!ar la velo$idad del 1u>o +ara me>orar la resolu$i./

• Regresar a las $odi$ioes ii$iales la $oluma/

¿Por qu$ se ensanc'an los "icos a medida que la %andacromatografíca se des"la&a "or la columna!

Tiee lugar $uado se !ras+or!a el solu!o a !rav%s de !ubos $omo los ,uese u!ili8a e los sis!emas de i*e$$i.7 e los de!e$!ores * e los !ubos ,ue$oe$!a los dis!i!os $om+oe!es del sis!ema

El esa$9amie!o +roviee de la di-ere!e velo$idad de 1u>o ,ue 9a* e!relas $a+as de l#,uido ad*a$e!es a las +aredes del !ubo * las del $e!ro/Como $ose$ue$ia7 la +ar!e $e!ral de ua bada de solu!o se mueve $om0s ra+ide8 ,ue la +eri-eria/

¿ que se denomina una columna de guarda o "recolumna!

Ua $oluma rellea de -ase es!a$ioaria dis+ues!a a!es de la $olumaaal#!i$a +ara evi!ar la disolu$i. * de!erioro de %s!a * debe es!ar$om+ues!a del mismo ma!eria ,ue la $oluma

)na muestra de un ácido d$%il tiene un "*a de +,-. /i queremosaumentar su retención so%re una columna de octadecíl sílice ¿#u$de%eríamos 'acer!

Tam+oar a +( @ ;7= la -ase m.vil

U rago de +( e!re ; * 3 suele o-re$er las $odi$ioes de re!e$i. m0ses!ables -re!e a +e,ueos $ambios de +( * es el re$omedado $omo +u!o


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de +ar!ida del desarrollo de m%!odos +ara la ma*or#a de las mues!ras7i$luidos los $om+ues!os b0si$os * los 0$idos d%biles !#+i$os/

La selectividad o factor de se"aración en HPLC está relacionado!

Co la a!urale8a de la -ase m.vil * de la -ase es!a$ioaria

demás de sistema de inyección "or 0eringas como se lo "uederem"la&ar!

Se lo +uede 9a$er media!e v0lvulas de i*e$$i. o loo+ ,ue so de 1u>o$os!a!e * de+ede de la medida del loo+ ,ue se $oe$!e e el e,ui+o/

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