Praktična nastava Mikrobiologija

2017/2018

dr Stoimir Kolarević – naučni saradnik

dr Ivica Dimkić – naučni saradnik

Bojana Vasilijević – istraživač saradnik

Jovana Kostić-Vuković – istraživač saradnik

Ivan Nikolić – istraživač saradnik

Tamara Janakiev – istraživač saradnik

Olja Stanojević – istraživač saradnik

Stefana Cvetković – student doktorskih studija

Jovana Jovanović – student doktorskih studija

• Ukupno poena na vežbama→20:

• prisustvo → pravo na jedan izostanak (bez opravdanja) i 2 izostanka sa

opravdanjem!

• overa praktikuma → 15 (5 vežbi po 3 poena)

• mikroskop test → 5

• Kolokvijumi (dva po 15 poena) → 30

• I kolokvijum – posle VIII predavanja (pismeno, obuhvata predavanja I – IV,

VII i VIII, vežbe I-VII)

• II kolokvijum – na kraju kursa (pismeno, obuhvata predavanja V-VI i IX-XII,

vežbe do kraja kursa)

• Usmeni deo ispita → 50

Informacije o bodovanju

Šta nositi na vežbe?

• Praktikum (kupuje se u studentskoj službi)

• Mantil

• Upaljač

• Permanentni marker

• Papirne maramice

• Rukavice za vežbu bojenja !!!

Knežević-Vukčević Ј., Simić D. (2006) Metode

u mikrobiologiji I, Biološki fakultet, Beograd

(odabrane vežbe).

Bakterije

• Prokariotska ćelija

• 0,2-50 µm u dijametru (Escherichia coli 1 x 2µm)

• Tipična eukariotska ćelija je 2-200 µm u dijametru

Najveći do sada poznati prokariot:

Thiomargarita namibiensis (400 – 750 µm)

Podela bakterija po obliku

• Koke (monokoke, diplokoke, tetrakoke, streptokoke, stafilokoke)

• Štapići (pojedinačni ili u lancima)

• Spirile

• Spirohete

• Bakterije koje formiraju drške

• Filamentozne bakterije

Mikroskopiranje

• Svetlosni mikroskop – koristi fotone vidljive svetlosti za formiranje lika

• Objektivi suvog sistema

• Sistem uljane imerzije

Indeks prelamanja imerzionog ulja

1,51 ~ 1,52 indeks prelamanja stakla

Objekti bliži od 0,2 µm mogu se videti

razdvojeno upotrebom imerzionog

objektiva (100x)

• Razdvojna moć svetlosnog mikroskopa je 0,2 µm,

što znači da se objekti koji su na manjoj razdaljini

od 0,2 µm ne mogu videti kao odvojeni entiteti

• Razdvojna moć zavisi od:

• Sistema sočiva

• Refraktornog indeksa sredine

• Talasne dužine svetlosti (plava svetlost

povećava moć razdvajanja)

Pripremanje trajnih preparata

• Nanošenje materijala na mikroskopsku pločicu sterilnom ezom i

kružno razmazivanje

• Sušenje razmaza na vazduhu ili fiksiranje na plamenu

Podela bakterija po Gramu

• Na osnovu bojenja po Gramu bakterije se mogu

podeliti na:

• Gram pozitivne (G+) – boje se ljubičasto

• Gram negativne (G-) – boje se crveno

G+ koke

G- koke

G+ štapići

Bacillus subtilis

mogu da formiraju lance

G- štapići

Escherichia coli

ne formiraju lance

G+/G- štapići

Endospore

• Formiraju se u unutrašnjosti ćelije procesom sporulacije u NEPOVOLJNIM

uslovima

• Otporne su na niske i visoke temperature, UV i X-zračenja, hemijske agense

• Teško primaju boju i često ostaju neobojene

• Mogu se formirati centralno, subterminalno i terminalno u ćeliji

• Javljaju se kod rodova Bacillus i Clostridium

Vegetativna ćelija (crvena)

Endospore obojene po Šefer-Fultonu

Spora (zelenkasta)

Vegetativna ćelija

(crvena)

Kapsule (glikokaliks, sluzavi omotač) – ekstracelularni

polimeri

• Polisaharidna, ređe proteinska struktura koja formira omotač oko

ćelijskog zida

• Visok procenat vode, bez fiksiranja na plamenu

• Sprečava isušivanje, zaštita, služi za kačenje (Streptococcus mutans),

jonska i osmotska barijera

• Kod nekih faktor patogenosti

• Formiranje biofilmova

Kapsule bojene po Giemsa-i

Bacillus anthracis

• Ćelije plave, okolina crvena

• Kapsula – neobojena zona

oivičena crvenom linijom

Kapsule bojene po Oltu

Bacillus anthracis

Ćelije – crveneKapsula – neobojena zona

Bojenje po Ziehl - Neelsen

• Koristi se za bojenje acidorezistentnih bakterija

• Crveno obojene štapićaste ćelije (Mycobacterium bovis)

Mycobacterium bovis

Hvala na pažnji!