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5/24/2018 Ppt de Adn Recombinante

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BIOTECNOLOG A;

CONCEPTO E HISTORIA

Aplicaci n de los sistemas

de problemas relacionado

calidad de vida del hombre.

En ste contexto podemos

ha desarrollado Biotecno

a os.-


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La biotecnolog a pod

como"toda aplicaci n te

que utilice sistemas bio

organismos vivos opara la creaci n o modi

productos o proceso

espec ficos".


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En la actualidad la biote

revolucionada por la inIn

Gen tica o tambi n llamada tec

recombinante.

Para situar a la biotecno

nueva era, se ha incorpo

Biotecnolog a Molecular.

BIOTECNOLOG A MOLECUL

La nueva era.


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50s 60s 70s 80s 90s 20

Primer genomasecuenciado

Primera prote naterapeutica producida

por ingenier a gen tica

El codigo gen tico

Es controlado.

Era de la g

Chips de D

Diagn s

Farmaco

Biomedi

Clonaci n del pr

animal

Inicio de la

ingenier a gen tica

Sintesis enzim tica

del ADN por PCR

Taq

Creaci n de base

de datos

de ADN y p ptidos

Producci n de

SOMATOSTATINA

en bacterias


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BIOTECNOLOG A;

Ambitos de desarrol

Alimentos

Antibi ticos

Nuevos f rmacos

Vacunas

Hormonas

Terapias g nicas

Mejora de procesos

Obtenci n de nuevos alimentos

Desarrollo de nutrace ticosDesarrollo de aditivos

Tratamiento de residuos

Biorremediaci n

Energ as limpias

Farmacia

Medio ambien

Diagn stico

Salud humana

Agricultura y g

Calidad de alim

Calidad ambien


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Microorganismos

Bacterias levaduras

Veget

tran

Animales

Transg nicos

Prod

C lulas

animales

Prote nas terap uticas

Anticuerpos

Mol culas complejas

Prote nas terap uticas

Anticuerpos

Mol culas complejas

Cultivos celularesen bioreactores

No hay necesidadde reactores

Cultivos de

c lulas mamarias

Ratones de investigaci

Vacunos, ovinos

Antibi ticos

P ptidos simples

Vacunas

Mol culas simples

Cultivos en bioreactores

Bacterias levaduras hongos

Resista virus

No hay nde react

Gen tiGen tica complejaGen tica complejaGen tica simple

Insulina

Hormona hGH

Vacuna Hepatitis B

Activador tisular

de plasmin genotPA

Factor VIII

Hormona hGH Vitami

Beta Car

R R S R


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PRODUCCI N DE FRMACOS EN MICROO

Tecnolog a de bioreactor

Tiempos generacionales c

Velocidad de crecimiento

Metabolismo

Manejo gen tico y molecul

Como carencias:

Problemas de regulaci n g

Problemas en los

requerimientos metab lic

Tecnoopero

Ingenmetab

Actualmente enpleno desarroll

B squeda de nu

compuestos b

Antibi tico

Antitumoral


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Sustancia Empresa Enfermedad

factor antihemof licoMiles, Baxter, Genetics

InstituteHemofilia A

DNasa I Genentech Fibrosis qu s tica

Eritropoyetina (EPO) Amgen, Ortho Biotech Anemia, e

Glucocerebrosidasa Genzyme Enfermedad de Ga

Hormona del crecimiento Genentech Enanis mo

Insu lina Eli Lilly Diabetes

Interfer n alfa-2a Hoffmann-LaRocheciertas leucemias, sarco

Kaposi

Interfer n alfa-2b Schering-Ploughciertas leucemias, Sarco

Kaposi, hepatitis B y C

Interfer n alfa-n3 Interferon Sciences Herpe

Interfer n gamma -1b Genentech enf. granulo

Interleucina-2 Chiron Carcinoma c

Somatotropina Eli LillyDeficiencia hormona

crecimiento

Activador tisular del

plasmi n geno (tPA)Genentech

Infarto agudo de miocar

embolismo pulmonar mas

F rmacos recombinantes producido


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RECOMBINANTE

ES UN T RMINO QUE AGRUPA UNA GRAN VARIEDAD DE T CN

EMPLEADAS EN EL LABORATORIO PARA MANIPULAR LAS MOL

ADN CON EL FIN DE ESTUDIARLAS.

CONSISTE EN LA INTRODUCCI N DE GENES EXTRA OS EN E

GEN TICO DE OTRA C LULA.

REQUIERE DE CULTIVOS CELULARES, ENZIMAS DE REST

VECTORES DE CLONACI N, LABORATORIOS EQUIPADOS Y

ENTRENADO.

Esta tecnolog a es muy

importante para la

investigaci n en biolog a

celular y molecular.


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Los procedimientos b sicos de la tecnol

incluyen de manera general los siguiente

Los fragmentos de DNA se generan utilizan

endonucleasas de restricci n, que reconmol cu

DNA por secuencias espec ficas.

La piedra angular de la tecnolog a del DNA

enzimas denominadasendonucleasas de restriccLas enzi

restricci n reconocen una secuencia es

sitio de restricci n) de una mol cula de DN

DNA por esa secuencia.

Hasta la fecha, se han aislado y caracteriza

restricci n diferentes. Las enzimas de r

organismo en el que se descubrieron, util

enzima EcoRI proviene deEscherichia coli; HindIII se de

Hemophilus influenzae.


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Hay dos tipos de enzimas de restricc

Las enzimas de Tipo I cortan las dos caden

aleatoria a cierta distancia del sitio

normalmente en la investigaci n de DNA r

corte no es preciso.

Las enzimas de Tipo II reconocen una secu

cadenas de la mol cula de DNA con absolu

secuencia reconocida. Se usan ampliame

recombinante puesto que cortan en sit

reconocidas por las enzimas de Tipo II so( palindr

decir, la secuencia de una de las cadenas lea 3' e

misma que la secuencia de la cadena complem

direcci n 5' a 3'.

T


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CULTIVO CELULAR

Proceso mediante el cual, c lulas procari

cultivarse en condiciones controladas

Los "cultivos celulares" hacen referencia a la si

eucariotas pluricelulares, especialmente c lulas

Cultivo de

humanas en

enriqueci

amino ci

factores d

Medios de cultivo

s lidos para

siembra de las

c lulas

(Variedad de agares)

Procesamiento de cultivo de c lulas

madre

S T


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MEDIOS DE CULTIVO

MEDIO DESCRIPCION

Medio Basal de Eagle (BME) Medio elemental con s

necesita siempre la supl

con suero bovino fet

rat n y c lulas HeLa.

McCoy 5A Medio dise ado para el cr

l neas celulares diplo

humanas.

Medio L-15 de Leibovitz Utilizado para el cultiv

RPMI 1640 Medio dise ado para el cr

celulares leuc micas en

rango de aplicaciones

5 S SDE TE G DE


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5 PASOS DE LA TECNOLOG A DEL A

RECOMBINANTE

Vector declonaci n

Selecci

ADN con

gen de in

Corte c

de restr

Pl smido

recombinadoCromosoma

bacteriano

Pl smido dentro

de la bacteriacultivo de

recombin

Corte del ADN en posiciones

precisas (secuencias pal ndromes)con endonucleasas de restricci n,

Uni n de fragmentos por la

ADNligasa,

Selecci n de un fragmento de ADN

cap z de autoreplicarse,

Insertar los vectores de clonaci n ac lulas espec ficas que contienen

toda la maquinaria gen tica para la

expresi n de la informaci n contenida

en el vector

Selecci n o identificaci n de las

c lulas que contienen al ADN

recombinante.


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Las 2 mol culas de ADN

son digeridas con la misma

endonucleasa de restricci

La enzima corta extremos

complementarios que se

aparean,

La ligasa repara hebras

cortadas de ADN y rehace

las nuevas bicatenarias.

Manipulaci n del ADN

Z S R STR


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ENZIMAS DE RESTRICCI N

Catalizan la hidr lisis de los enlaces fos

capaces de cortar ambas hebras del DNA en sitio

Ciertas cepas de E. coli degradan (cortan) e

infectivos, a menos que los cidos nucle c

grupos metilo) en algunos residuos de aden

T R S


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VECTORES DE CLONACI N

Bacteri fagos:son virus

que sirven de portadores de

Material gen tico a bacterias

Pl smismol culaextra cro

de forma c

bacterias

Cosmivectores

combina

caracter

lambda que p

extremos

regionescos

Sonmol culasque transportan y replican

llevan insertados.

S T S


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VIRUS BACTERI FAGOS

Part culas infectantes de bacterias,

Algunos (Lambda y M13) han sido utilizados

han modificado oportunamente sus genom

Pueden tener efecto l tico o lisog nico

ti id dde os irus


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Actividad de los virus bac

MANI ULACI NDEC LULAS


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MANIPULACI N DE C LULAS

HUMANAS

UT T G


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UTILIDAD DE LA BIOTECNOLOG

bacteri fagos)

Utiliza

microor

modificadgeneticam

como plan

animales

transg n

elaborac

antibi ti

hormona

de sustanc

utilidad pa

hombre.


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El sistema tradicional d

vacunasa partir de microor

pat genos inactivos, p

riesgo potencial.Muchas vacunas, como lahepati

se obtienen actualment

gen tica.

Como la mayor a de losfactores ason proteinas lo que seclon

de la proteina correspo


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ENAGRICULTURA


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EN AGRICULTURA

-En el mbito de la agricultur

pretendido obtener plantas

rendimientos sean ptimos

Desde hace muchos a os se util

conocimientos de la Gen ti

de una forma inadvertida, y en

entenderse los procesos de

realizados provocando crpoliploid as, para luego seleccio

de buenos resultados ymultiplicarlas

formandoclonescon ellas.

Losprincipalescaracter,


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os rinci es c r cterplantas transg nicas, s

a)resistencia a herbicida

enfermedades microbian.

b)incremento del rendim.

c)mejora en la calidad de lo

agr colas.

Las primeras plantas obtenid

t cnicas fueron un tipo de t

sus frutos tardan en madurar

despu s de haber sido cosecha

ENANIMALES


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EN ANIMALES

-En animales, la aplicaci n de la

Gen tica persiguen los objetivo

a)favorecer la investigaci n bfisiolog a de los genes y la biol

b)mejorar la productividad o la

enfermedades de animales tiles pa

c)producci n de prote nas de va

La correcci n de errores inna

mediante terapia g nica.


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GRACIAS

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