-
PML/RARA transzlokáció gyors kimutatása akut promyelocytás
leukémiában
PTE Pathologiai Intézet
2017.május 26.
Kajtár Béla, Hosnyánszki Diána
A tumorspecifikus diagnosztika irányvonalai
-
akut myeloid leukémia
PML/RARA transzlokáció kimutatása
kiegyensúlyozott transzlokációk
akut promyelocytás leukémia PML/RARA transzlokációval
PML/RARA kimutatása
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
-
Kiegyensúlyozott transzlokációk és malignitás
-
Kiegyensúlyozott transzlokációk és malignitás
IGH
BCL2
E E
BCL2
BCR
ABL1
abnormális expresszió
fúziós gén létrejötte
-
Kiegyensúlyozott transzlokációk és malignitás
Janet Davison Rowley (1925-2013)
Rowley JD, Blood 2008;112(6):2183
-
Kiegyensúlyozott transzlokációk és malignitás
Sarcoma Transzlokáció
Ewing sarcoma EWSR1-FLI1, EWSR1-ERG
Extrasceletalis myxoid chondrosarcoma EWSR1-CHN, RBP56-CHN
Világos-sejtes sarcoma EWSR1-ATF1
Alveolaris rhabdomyosarcoma PAX3-FKHR, PAX7-FKHR
Synovialis sarcoma SSX1-SYT, SSX2-SYT
Myxoid liposarcoma CHOP-FUS
Dermatofibrosarcoma protuberans COL1A1-PDGFB
Fibromyxoid sarcoma, alacsony gradus FUS-CREB3L2
Congenitalis fibrosarcoma ETV6-NTRK3
Inflammatoricus myofibroblastos tumor ALK-transzlokációk
Solid tumor Transzlokáció
Prostata rák TMPRSS2-ETV1/ETV4/ETV5
Colorectalis rák VTI1A-TCFL2, NAV2-TCF7L1
Papillaris pajzsmirigyrák RET-NTRK1
Papillaris vesesejtes rák PRCC-TFE3
Nem-kissejtes tüdőrák ROS1-transzlokációk,
ALK1-transzlokációk
Oligodendroglioma t(1;19)(q10;p10)
-
Akut myeloid leukémia
Túlélés(5 év)
27%
68 év
1,3%-a
3-4/100.000
25%-a
Leukémiák Rák
Epidemiológia
-
Akut myeloid leukémia
Definíció
erythroblast
Auer-pálca myeloblast monoblast promonocyta
megakaryoblast
promyelocyta
>20% blast vérben/csontvelőben
jellemző citogenetikai eltérés jelenléte + blastszaporulat
-
Akut myeloid leukémia
Osztályozás
AML myelodysplasiával kapcsolatos eltérésekkel
AML visszatérő genetikai eltéréssel
AML, terápiával összefüggő
AML, máshogy nem osztályozott
Egyéb akut leukémiák
t(8;21)(q22;q22) – RUNX1-RUNX1T1
inv(16)(p13q22) – CBFB-MYH11
t(15;17)(q24;q21) – PML-RARA
t(9;11)(p22;q23) – MLLT3-MLL
t(6;9)(p23;q34) – DEK-NUP214
inv(3)(q21q26) – RPN1-EVI1
t(1;22)(p13;q13) – RBM15-MKL1
NPM1 mutáció
biallélikus CEBPA mutáció
RUNX1 mutáció
t(9;22)(q34;q11) – BCR-ABL1
-
Akut myeloid leukémia
Osztályozás
Grossmann et al. Blood 2012;120:2983-2972
-
Akut promyelocytás leukémia PML/RARA transzlokációval
Jellemzők
10-15%-a AML
40-45 év
Túlélés(5 év)
80%
Auer-pálca
10-20%
hypergranulált hypogranulált
-
Akut promyelocytás leukémia PML/RARA transzlokációval
Patogenezis
Atlas of Genetics and Cytogenetics in Oncology and
Haematology
-
Akut promyelocytás leukémia PML/RARA transzlokációval
Patogenezis
Hatakeyama S. Nat Rev Canc 2011;11:792-804.
-
Akut promyelocytás leukémia PML/RARA transzlokációval
Kezelés
Zhi-Xiang Shen et al. PNAS 2004;101(15):5328
-
PML/RARA transzlokáció kimutatása
van Dongen JJ et al. Leukemia 1999;13:1901
-
PML/RARA kétfúziós FISH szonda
PML
PML-DF (544 kb)
Chr 15
telomer
RARA
RARA-DF (1060 kb)
Chr 17
telomer
PML/RARA+ PML/RARA-
5’ 3’
5’ 3’
-
RARA disszociációs (break apart) FISH szonda
RARA+ RARA-
RARA Chr 17
telomer
RARA-SpO 150 kb RARA-SpG 417 kb
5’ 3’
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
4 negatív minta 6 pozitív minta
2 db 2F1R1G 4 db 1F1R1G
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
4 negatív minta
0
5
10
15
20
25
30
1F1R1G 2F1R1G
12%
1% 1%
8%
Po
zití
v se
jt /
20
0 é
rté
kelt
se
jt
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
6 pozitív minta
65%
70%
75%
80%
85%
90%
95%
100%
65% 70% 75% 80% 85% 90% 95% 100%
Po
zití
v se
jte
k ar
áyn
a (D
AK
O)
Pozitív sejtek aránya (hagyományos)
-
0 120 240 360 480 600 720 840 960 1080 1200
Előkezelés Denaturáció Hibdridizáció Mosás
0 120 240 360 480 600 720 840 960 1080 1200
2,5 óra
20 óra
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
-
PML/RARA FISH szondák összehasonlítása
-
Konklúzió
megbízható
SureFISH PML-RARA szonda
gyors (akár 2,5 óra)
PCR-alapú kimutatás helyett lehetséges alternatíva
