PLASMA UMANO COME SUPPORTO

PER LA GENERAZIONE DI PELLE AUTOLOGA

devono possedere le seguenti caratteristiche:

• tollerabilità: devono essere immunologicamente

inerti (biocompatibili)

• impalcatura provvisoria: dopo integrazione il biomateriale deve essere sostituito dal tessuto originario (biodegradabili)

• contenuto informativo: devono comunicare e scambiare segnali con le cellule ospite

BIOMATERIALI

LE MATRICI PIU’ IDONEE..Per la crescita e differenziazione di cheratinociti e

fibroblasti autologhi, le matrici più idonee, sono di tipo naturale e

si suddividono in:

- collagene- agarosio- acido ialuronico - colla di fibrina - PGA- PHBV - PEG

Grande interesse è rivolto verso l’utilizzo del plasma umano

come supporto di crescita per cheratinociti e fibroblasti

“Human plasma as a dermal scaffold for the generation of

a completely autologous bioengineered skin”

Llames SG, Del Rio M, Larcher F, García E, García M, Escamez MJ, Jorcano JL, Holguín P, Meana A.Centro Comunitario de Sangre y Tejidos del Principado de Asturias, Emilio Rodriguez Vigil

s/n, Oviedo,Spain.

Plasma umano come supporto tridimensionale per la crescita di fibroblasti e cheratinociti

MATERIALI E METODI Estrazione e amplificazione di cheratinociti e

fibroblasti umani autologhi, prelevati da un’unica biopsia

Preparazione del supporto di plasma- 7,2 ml plasma umano- 7,2 mg acido tranexamico - 8,8 ml NaCl 0,9%- 2 ml CaCl2

Aggiunta di fibroblasti e cheratinociti a diverse densità

Densità di semina fibroblasti

2X103/cm2 4X103/cm2 6X103/cm2

Densità di semina cheratinociti

8X104/cm2 15X104/cm2

 

t0 FIBROBLASTI CHERATINOCITI

t1 (dopo 4 giorni)

-  CHERATINOCITI

t2 (dopo 8 giorni)

-  CHERATINOCITI

MODALITA’ SEMINA

Dopo 13 giorni i frammenti vengono prelevati per l’esame istologico

microscopio a contrasto di fase dopo 3 giorni

microscopio a contrasto di fase dopo 8 giorni

ematossilina-eosina

immunoistochimica: vimentina

immunoistochimica: citocheratine

immunoistochimica: MIB1

SVANTAGGI VANTAGGI

Supporto fragile e poco

maneggevole

Permette di ottenereinnesti del tutto

autologhi

Crescita di cheratinociti

scarsa