1

Opgave 1 Lactoseintolerans

Mennesker er i stand til at nedbryde lactose (mælkesukker) som børn. I store dele af verden mister den voksne befolkning dog helt eller delvist denne evne og bliver lactoseintolerante. Lactoseintolerante får i større eller mindre grad maveproblemer og diarré, hvis de indtager mælk.

Figur 1. Nedbrydningen af lactose.

1. Angiv hvilken enzymklasse lactase tilhører.

Koncentrationen af lactose i mælk kan bestemmes ved en spektrofotometrisk metode. Først behandles mælken med lactase, så lactose nedbrydes til glucose og galactose som vist i figur 1.

Glucose og galactose kan ved reaktion med 3,5-dinitrosalicylsyre danne den rødbrune forbindelse 3-amino-5-nitrosalicylsyre, der absorberer lys ved 540 nm, vist i figur 2.

Figur 2. Princippet for reaktion mellem galactose og 3,5-dinitrosalicylsyre. Reaktionen er ikke afstemt. Glucose reagerer på tilsvarende vis.

2. Argumenter for at der er tale om en oxidation af galactose i reaktionen vist på figur 2.

O

OHOH

OH

CH2OH

H

H H

HO

HHO O OH

OH

OH

CH2OH

HH H

HHO OCH

2OH

HOH

OH

O

HH

O

OHOH

OH

CH2OH

H

H H

H

H

+ H2OLactase

+H HH

H

Lactose GlucoseGalactose

C

C

C

C

C

CO

HO

HO

OH

OHH

H

H

H

H

C

C

C

C

C

O

HO

HO

OH

OHH

H

H

H

OH

CHO

+ +

Galactose 3,5-dinitrosalicylsyre 2,3,4,5,6-pentahydroxy-hexansyre

3-amino-5-nitrosalicylsyre(rødbrun)

H

H OH H

H

C

OH

NO2

HO O

O2N

C

OH

NH2

HO O

O2N

121554.indd 2 27/03/13 10.11

2

I et forsøg lod man en række standardopløsninger af galactose og glucose reagere med 3,5-dinitro-salicylsyre. Absorbans af opløsningerne blev målt ved 540 nm, se figur 3.

Figur 3. Sammenhørende værdier for den samlede koncentration af galactose og glucose og absorbans ved 540 nm. Kuvettebredde 1,0 cm.

3. Eftervis at måleresultaterne fra ovenstående forsøg vist i figur 3 er i overensstemmelse med Lambert-Beers lov.

Efterfølgende blev mælk behandlet med lactase og fortyndet 100 gange med vand. Derefter reagerede den fortyndede mælk med 3,5-dinitrosalicylsyre, og absorbansen blev målt ved 540 nm i en kuvette med en bredde på 1,0 cm. Absorbansen blev målt til 0,513.

4. Bestem koncentrationen af lactose i mælken. Resultatet angives i mM.

Samlet koncentrationaf galactose og glucose

(mM)

Absorbans

02,04,06,08,0

10,0

00,1980,3970,5950,7940,992

Opgaven fortsætter næste side.

121554.indd 3 27/03/13 10.11

3

m

n

Fomecel

De

EngenGeLaned

orsketolle

en g

n annmeneactadbr

kerdenan

gen

ndemodet easeryd

re hn e

nve

nm

5.

en mdifier oeendes

6.

harer and

mod

Sfr

meiceroprzym

s. M

Dm

r freat indes

difi

krirem

etoretensme

Mæ

Diskmed

emndstil

cer

iv emst

de t sksetet eælke

kutd la

mstisæfre

red

en tille

tilkimt oger aen

ter avt

illetteem

de k

F

koes.

at mmg inaktika

folac

et e et

msti

ko

Fig

ort f

prelsndsivt

an p

rdecto

en kekllin

pro

gur

fig

rodsvasat se

på

eleose

ko,kstrng

odu

4. F

gurt

ducamp

i eelv den

ogind

, dera gaf

uce

Frem

tek

erep. Een sven m

g udho

er pgenen

ere

mst

kst

e mEt gskid l

måd

lemold

pron fo

n ge

er la

tilli

til f

mælgenimmlavde

mpd.

oduor lenm

act

ing

fig

lk mn fmee tean

er

ucelacmo

tas

af e

gur

mefor elsvem

nven

ved

ererctasdif

se i

en g

r 4,

ed llac

vammpe

nd

d d

r mse fice

i yv

gen

de

lavctamp,erates

de t

mæli eere

ver

nmo

er b

vt inase , deturaf

to m

lk mn c

et k

ret,

odif

bes

ndher er n

rer lac

me

mecellko,

og

fice

skr

holfunu ogcto

etod

ed ele fse f

g d

eret

ive

ld aund

kag ka

sei

der

et lfra fig

derm

ko

er h

af det an pan tinto

r næ

lavet

gur

me

.

hvo

laci enprotilsole

æv

vt inko

r 4.

d n

ord

ctosn bodusæteran

vnt

ndhofo.

ned

dan

se bakucettesnte

ov

holoste

dbr

n en

er kterere s ale pe

ven

ld aer.

ryd

n g

vedrie,laclmers

nfor

af lDe

des

enm

d h, dectaind

son

r ti

lacen t

lac

mo

hjæer l

ase delner.

il p

ctostran

cto

odi

ælp levi sig .

prod

se. nsf

ose

fic

af ver stormæ

duk

Prfor

i m

cere

f eni G

re mælk

ktio

rincrme

mæ

et k

n Grømæk, s

on

cipere

ælke

ko

ønlængså l

af

petde

en.

kan

langdelact

f m

t i

.

n

d. er. tos

mælk

se

k

DNA medlactasegen

Celler fra etkofoster

Kerne

Kerne

Ægcelleuden kerne

Tidligtembryon

Rugeko

Kerne

Udtages

Indsættes

1

2

3

4

5

121554.indd 4 27/03/13 10.11