MSc. ITZELA DAVISIvestigadora Acuícola

Diagnóstico Diagnóstico molecular de la molecular de la Hepatopancreatitis Hepatopancreatitis Necrotizante (NHP-Necrotizante (NHP-B) en camarones B) en camarones LitopenaeusLitopenaeus vannameivannamei en en Panamá.Panamá.

INTRODUCCIÓN

Durante su rápida expansión, la camaronicultura en Panamá, ha estado muy afectada por las enfermedades, convirtiéndose éstas en el problema más grande de la industria, causando pérdidas millonarias .

La mayoría de las enfermedades se hicieron evidentes en la última década del siglo pasado, en donde una gran parte de estas fueron causadas por virus, más sin embargo las enfermedades de origen bacteriano también han representado un riesgo para esta industria.

• La responsabilidad que asumimos, como La responsabilidad que asumimos, como institución ligada a la industria camaronera.institución ligada a la industria camaronera. • La necesidad de conocer los problemas La necesidad de conocer los problemas patológicos como ente investigador que patológicos como ente investigador que somos.somos.

• La prevención y control que debe haber La prevención y control que debe haber para combatir las enfermedades.para combatir las enfermedades.

¿QUÉ ES NHP-B?¿QUÉ ES NHP-B?

NHP-B: Es una Alphaproteobacteria NHP-B: Es una Alphaproteobacteria gram negativa.gram negativa.

Morfología: Pleomórfica; similar a Morfología: Pleomórfica; similar a las ricketsiaslas ricketsias

Encontrada en tejido blando de Encontrada en tejido blando de camarones marinos.camarones marinos.

Tejido saludable Tejido afectado

LESIONES CAUSADAS POR LA LESIONES CAUSADAS POR LA HEPATOPANCREÁTITIS NECROTIZANTE HEPATOPANCREÁTITIS NECROTIZANTE

(NHP-B) EN EL ÓRGANO (NHP-B) EN EL ÓRGANO HEPATOPANCREÁTICO DEL CAMARÓNHEPATOPANCREÁTICO DEL CAMARÓN

ANTECEDENTES

En 1985, en Texas (USA) se observaron anomalías en En 1985, en Texas (USA) se observaron anomalías en poblaciones de camarones cultivados en estanques tales poblaciones de camarones cultivados en estanques tales como lento crecimiento, flacidez notoria, reducción del como lento crecimiento, flacidez notoria, reducción del consumo de alimento y reducción en las poblaciones consumo de alimento y reducción en las poblaciones (mortalidad), estudios realizados revelaron que estas (mortalidad), estudios realizados revelaron que estas anomalías son consecuencia de la enfermedad anomalías son consecuencia de la enfermedad Hepatopancreatitis Necrotizante o Necrosis Hepatopancreatitis Necrotizante o Necrosis Hepatopancreática (NHP), la cual ha causado serias Hepatopancreática (NHP), la cual ha causado serias epizootias en países como Venezuela, Brasil, Ecuador, epizootias en países como Venezuela, Brasil, Ecuador, Panamá, Costa Rica y otros, Boletín Nicovita 1996.Panamá, Costa Rica y otros, Boletín Nicovita 1996.

SEPTICEMIA BACTERIANA

WSSV1999

NHPB1993

BP1988

STV1995

IHHNV1990

PRINCIPALES ENFERMEDADES

EN LA CAMARONICULTURA

EN PANAMÁ

- 1993 NHP, FINCAS CAMARONERAS EN PANAMÁ.

- DESCONOCIMIENTO SOBRE LA ENFERMEDAD.

- EVENTOS PATOLÓGICOS ASOCIADOS CON VIBRIOSIS.

- MORTALIDADES NO CUANTIFICADAS.

Signos clínicos observados

OBJETIVOS GENERALES

.

Detectar la presencia de la Hepatopancreatitis Necrotizante (NHP-

B) en camarones Litopenaeus vannamei en Panamá.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS- Determinar la distribución de la Hepatopancreatitis Necrotizante en fincas camaroneras de las Provincias de Herrera, Coclé, Los Santos y Veraguas.

- Detectar la prevalencia de la Hepatopancreatitis Necrotizante en fincas del área de Coclé.

- Relacionar algunas de las variables presentes en los cultivos con la presencia de la enfermedad. - Implementar el diagnóstico de esta enfermedad en la Unidad de PCR de la Estación Ing. Enrique Enseñat.

MATERIALES Y

MÉTODOS

17 FINCAS

7 COCLÉ 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

ESTUDIO DE DISTRIBUCIÓN

7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

PARA UN TOTAL DE 153 MUESTRAS

ESTUDIO DE PREVALENCIA

6 FINCAS

PROVINCIA DECOCLÉ

PPF LRC CMS DPMPLG CMC

192 MUESTRAS

Corte de tejido y fijación en etanol al Corte de tejido y fijación en etanol al 95%.95%.

La detección de la NHP-B se realiza con La detección de la NHP-B se realiza con técnicas de biología molecular que técnicas de biología molecular que consisten en una reacción en cadena de consisten en una reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) , con el Kit IQ2000-la Polimerasa (PCR) , con el Kit IQ2000-NHP-B, elaborado específicamente para NHP-B, elaborado específicamente para este fin.este fin.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

17 FINCAS

7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

2 POSITIVAS1 POSITIVA 1 POSITIVA 2 POSITIVAS

ESTUDIO DE DISTRIBUCIÓN

7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

ESTUDIO DE PREVALENCIA

6 FINCAS

PROVINCIA DECOCLÉ

PARA UN 4 % DE PREVALENCIA EN EL ÁREA ESTUDIADA

PPF LRC CMS DPM4 POSITIVAS

PLG CMC3 POSITIVAS

192 muestras procesadas

Positivo

severoPositiv

oleve

negativo

- NINGUNA DE LAS VARIABLES RELACIONADAS (TEMPERATURA, OXÍGENO, PH, SALINIDAD Y DENSIDAD DE SIEMBRA) DEMOSTRÓ UNA RELACIÓN DE DEPENDENCIA SIGNIFICATIVA CON LA PRESENCIA DE LA ENFERMEDAD.

ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

POSITIVA

POSITIVA

VALORES DE LA SALINIDAD AL MOMENTO DE LA TOMA DE MUESTRA

0 10 20 30 40 50 60 70

PPF

PLG

LRC

DPM

CMC

CMS

FIN

CA

S

SALINIDAD (ppt)

Serie1

+

+

A pesar de que no se encontró dependencia significativa entre la presencia de la necrosis y la salinidad, siendo la probabilidad de error de 0.418, indica que los dos casos positivos se dieron en salinidades que estaban con valores mayores de 43ppt es decir una con salinidad de 43-54ppt y la otra con valores de 55-63ppt.

Dependencia entre la necrosis y la salinidad Frecuencia ‚Frecuencia ‚ Porcentaje ‚31-42 ‚43-54 ‚55-65 ‚ TotalPorcentaje ‚31-42 ‚43-54 ‚55-65 ‚ Total ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆ 0 ‚ 9 ‚ 9 ‚ 4 ‚ 220 ‚ 9 ‚ 9 ‚ 4 ‚ 22 ‚ ‚ 37.50 ‚ 37.50 ‚ 16.67 ‚ 91.6737.50 ‚ 37.50 ‚ 16.67 ‚ 91.67 ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆ 1 ‚ 0 ‚ 1 ‚ 1 ‚ 21 ‚ 0 ‚ 1 ‚ 1 ‚ 2 ‚ ‚ 0.00 ‚ 4.17 ‚ 4.17 ‚ 8.330.00 ‚ 4.17 ‚ 4.17 ‚ 8.33 ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆ Total 9 10 5 24Total 9 10 5 24 37.50 41.67 20.83 100.0037.50 41.67 20.83 100.00 Grados de libertad = 2 Chi-calculada = 1.745 Prob.= 0.418Grados de libertad = 2 Chi-calculada = 1.745 Prob.= 0.418

CONCLUSIONESCONCLUSIONES- Estos estudios han demostrado que la - Estos estudios han demostrado que la

enfermedad está distribuida por las 4 enfermedad está distribuida por las 4 provincias estudiadas.provincias estudiadas.

- Existe una prevalencia de la enfermedad en - Existe una prevalencia de la enfermedad en el área de Coclé.el área de Coclé.

- Por los resultados obtenidos y la literatura - Por los resultados obtenidos y la literatura consultada, podemos concluir que la consultada, podemos concluir que la enfermedad puede aparecer tanto en enfermedad puede aparecer tanto en salinidades bajas como en las altas, pero que salinidades bajas como en las altas, pero que posiblemente tiene preferencia por las altas. posiblemente tiene preferencia por las altas.