Makale saati

Dr. Banu TaşkınDermatoloji Anabilim Dalı

Eylül 2013

➲ BP➲ BP AG1...BP230➲ BPAG2...BP180...KOLLAJEN XVII➲ Hemidesmozon...epitelial-stromal kohezyon➲ Bazal epitel hc-ekstrasellüler matriks protein➲ 6 tip protein

➲ BP180... 1500aa transmembranekstrasellüler... NC16A (immundominant)

➲ BP 230...intrasellüler

SONUÇLAR

➲ Anti-BP 180 %83,33➲ Kontrol grubunda pozitif sonuç yok➲ 3/18 yanlış negatif sonuç (%16) (ELISA ile de

düşük antikor titresi)➲ Anti-BP 230 %39➲ Kontrol grubunda pozitif sonuç yok

SONUÇLAR

Tartışma

➲ ELISA; minimal invaziv, kantitatif ölçüm➲ Ama rekombinant proteinler tüm epitopları

içermeyebilir... pahalı➲ Biochip BP tanısı için ELISA için alternatif➲

➲ Değişik doku kesitleri, hücre substratları veya allerjenik moleküller tek bir inkübasyon

➲ Kısa süre (100dk)➲ Spectrofotometrik ekipman gerekmiyor➲ Tüm işlemler oda ısısında➲ Tek kit ile birçok parametreye bakılabilmekte➲ Ucuz

➲ Çalışma küçük bir grupla yapılmasına karşın önceki çalışmalarla birlikte değerlendirildiğinde;

➲ Anti-BP180 için Biochip ve ELISA benzer sonuçlar

➲ BP230 için sensitivite düşük➲ Değişik subrstratlar giydirilmiş Biochipler ile

birçok otoantikor aynı anda araştırılabilir➲ Şüpheli otoimmun büllöz hastalıklar için

tarama testi

GİRİŞ

➲ Otoimmun büllöz hastalıklar

➲ PF...Dsg 1➲ PV, mukozal...Dsg3➲ PV, mukokutanöz...Dsg1,3

➲ ELISA➲ Yeni ELISA yöntemi... HEK 293 hücre

➲ BP....BP180, BP230 hemidesmozomal protein

➲ ELISA, %90

➲ Tanıda ELISA...

➲ Amaç: yeni bir IIF yöntem

Hastalar ve method

Hastalar➲ 36 PV, 40 BP➲ Kontrol grup: 38 Psoriazis, 16 DLE ve Liken

planus, 40 sağlıklı

Method➲ IIF multiplex biochip➲ Her iki ELISA

SONUÇLAR

Tartışma

➲ Otoimmun büllöz hastalıkların tanısında serum Ab saptayan sensitif ve spesfik methodlar önemli

➲ Uzun yıllardır kullanılan maymun özofausunda IIF.... tüm BP ve PV örneklerinde sonuç vermemekte ve otoAb ayrımı yapılamamakta

➲ Spesfik ELISA... HEK 293 hücreleri ile Dsg 1 ve 3 saptanabilmiş... pahalı ve 4 antikor için ayrı ayrı çalışılmalı

➲ Otoimmun büllöz hastalıkların tanısında hızlı sonuç veren, daha efektif ve pratik yöntem gerekli

➲ Çalışmanın amacı çeşitli spesfik otoAb'ı eş zamanlı, basit yöntemle saptamak ve ELISA ile karşılaştırmak

➲ Multiplex IIF yöntem Dsg1 ve anti-BP180 için yüksek oranda tanısal doğrulukAnti-BP230 için düşük

➲

➲ Dsg3 ve NC16 A-4X BP 180 için %100, %90 doğruluk

➲ İki ELISA yönteminde de yüksek başarı➲ Anti-BP230 için için düşük kappa düzeyleri..

her iki yöntemde

➲ Her iki ELISA yöntemi karşılaştırılmış; anti-Dsg3 ve BP180 açısından fark yok.

➲ Biochip.... hızlı ve kesin bir görüntüleme yöntemi

➲ Kantitatif ölçüm yapmamakta

➲ Yapılan çalışmalarda PV 'te otoAB seviyeleri klinik aktivite ile korele

➲ Korelasyon yok! Bir çalışma➲ Tedavi ve remisyonun sağlanması ile serum

otoAb seviyeleri düştüğü...ve relapsta seviyelerin yükseldiği

➲ BP'te BP180 otoAB seviyeleri tedavi sonrası relapların saptanmasında etkili (Bernard et al)

➲ Bp230 seviyeleri?

Sonuç

➲ Bu çalışma ile multiplex IIF yöntemi kolay, hızlı, ucuz ve tanısal doğruluğu yüksek

➲ Simultene multiparametrik analiz

➲ Otoimmun büllöz hastalıklar ve Pemfigus grubu hastalıklar için ayrı biochip geliştirilmesi...