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LÍQUIDOS CORPORALES ESTÉRILES Y TEJIDOS Página 1 de 20 Características del líquido cefalorraquídeo Rodea al encéfalo y médula espinal sirviendo de transporte a muchos metabolitos. Las membranas que rodean al cerebro se llaman meninges. El LCR se forma en los plexos coroideos de los ventrículos cerebrales mediante ultrafiltración de plasma y transporte activo. El volumen total es de 150 ml y se producen y reabsorben al día entre 800-900 ml por lo que se renueva totalmente cada 3-4 horas. Circula a través del epéndimo y en sentido descendente por encima de médula espinal y raíces nerviosas de los nervios espinales o raquídeos, y asciende por encima del encéfalo. La absorción tiene lugar en las vellosidades aracnoideas. - Sodio y cloro más alto en LCR que en sangre - Glucosa, bicarbonato, fosfato, potasio y calcio está más bajo que en sangre - La cantidad de proteínas es muy pequeña en una proporción 200/1 Obtención de la muestra Se obtiene mediante punción lumbar entre los espacios intervertebrales o interespinosos de la 4ª y 5ª vértebras lumbares. Indicaciones - Diagnósticos de meningitis, encefalitis, hemorragias subaracnoideas y sífilis del sistema nervioso central. - Introducción de anestésicos y de medios de contraste radiológicos para exploración del SNC, antes es necesario extraer LCR para no aumentar la presión. - Disminuir la presión intercraneal cuando ésta es muy alta con hipertensión benigna. Posición del paciente Decúbito lateral con pierna y muslos muy flexionados lo mismo que la cabeza. Instrumental necesario Aguja especial con su fijador y trócar debe llevar un manómetro y una válvula de 3 pasos. Se recogen 3 tubos estériles: el 2º para estudio microbiológico y 3º para examen microscópico y recuento. Se necesita al menos 1 ml de LCR, se debe trasladar rápidamente al laboratorio y nunca refrigerarse exceptos las que van a estudios virales que se congelan a -70º C. - Centrifugar a 1.500 g 15 minutos - Retirar el sobrenadante a un tubo estéril para pruebas serológicas y bioquímicas - El sedimento se resuspende y se toma una muestra con un capilar estéril para inocularlo a un medio de cultivo y para su observación microscópica. - Si es para detección de una micosis se filtra a través de una membrana mirando hacia abajo encima de un medio de cultivo.

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Características del líquido cefalorraquídeo

Rodea al encéfalo y médula espinal sirviendo de transporte a muchos

metabolitos. Las membranas que rodean al cerebro se llaman

meninges. El LCR se forma en los plexos coroideos de los ventrículos cerebrales

mediante ultrafiltración de plasma y transporte activo.

El volumen total es de 150 ml y se producen y reabsorben al día

entre 800-900 ml por lo que se renueva totalmente cada 3-4 horas. Circula a través del epéndimo y en sentido descendente por encima

de médula espinal y raíces nerviosas de los nervios espinales o

raquídeos, y asciende por encima del encéfalo. La absorción tiene

lugar en las vellosidades aracnoideas. - Sodio y cloro más alto en LCR que en sangre

- Glucosa, bicarbonato, fosfato, potasio y calcio está más bajo

que en sangre

- La cantidad de proteínas es muy pequeña en una proporción 200/1

Obtención de la muestra

Se obtiene mediante punción lumbar entre los espacios

intervertebrales o interespinosos de la 4ª y 5ª vértebras lumbares.

Indicaciones - Diagnósticos de meningitis, encefalitis, hemorragias

subaracnoideas y sífilis del sistema nervioso central.

- Introducción de anestésicos y de medios de contraste

radiológicos para exploración del SNC, antes es necesario extraer LCR para no aumentar la presión.

- Disminuir la presión intercraneal cuando ésta es muy alta con

hipertensión benigna.

Posición del paciente Decúbito lateral con pierna y muslos muy flexionados lo mismo que la

cabeza.

Instrumental necesario

Aguja especial con su fijador y trócar debe llevar un manómetro y

una válvula de 3 pasos. Se recogen 3 tubos estériles: el 2º para estudio microbiológico y 3º

para examen microscópico y recuento.

Se necesita al menos 1 ml de LCR, se debe trasladar rápidamente al

laboratorio y nunca refrigerarse exceptos las que van a estudios virales que se congelan a -70º C.

- Centrifugar a 1.500 g 15 minutos

- Retirar el sobrenadante a un tubo estéril para pruebas

serológicas y bioquímicas - El sedimento se resuspende y se toma una muestra con un

capilar estéril para inocularlo a un medio de cultivo y para su

observación microscópica.

- Si es para detección de una micosis se filtra a través de una membrana mirando hacia abajo encima de un medio de cultivo.

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- Si se buscan micobacterias se necesitan al menos 10 ml ya que

estos microorganismos no están en gran número, se centrifuga más

tiempo y a más velocidad.

Prevención de errores más comunes en la manipulación de LCR Es indispensable el rápido análisis de la muestras de LCR sobre todo

si hay sospecha de meningococos ya que realizan autolisis. Si es

necesario el retraso de más de una hora hay que refrigerar la

muestra ya que los leucocitos están lisados después de 2 horas. La punción debe hacerse por la mañana por:

- Examen en condiciones normales más que el de urgencias

proporciones resultados más precisos

- Si el paciente está en ayunas el nivel de glucosa en LCR y sangre se pueden comparar.

- Si aparecen problemas no esperados es más fácil acudir a otros

especialistas.

Sustancias analizables y técnicas Análisis macroscópico

a) Aspecto: limpio, cristalino y transparente.

Turbio: aumento de leucocitos o hematíes, si es por una mala

extracción el color debe ir disminuyendo del primer tubo al último.

Muy turbio: en meningitis Coágulos de fibrina: aparecen en meningitis aguadas meningocócicas

Coágulos de fibrina: aparecen en meningitis producidas por

bacilo de Koch (Mycobacterium tuberculosis)

b) Color: incoloro, hemático debido a punción traumática o hemorragia del SNC para diferenciarlas:

Se extraen 3 tubos si color va disminuyendo del primero al

último es una punción traumática

Si es hemorragia el sobrenadante queda algo coloreado después de centrifugar (xantocromía) debido a la degradación de la

hemoglobina.

c) Presión: normalmente 100-200 mmm de H2O (60-120 mm

Hg), si aumenta por encima de 200 mm se habla de hipertensión lo

que ocurre en meningitis, tumores hemorragias obstrucción. d) pH: el normal es de 7,4-7,6. Existe acidosis en todas las

lesiones cerebrales.

Análisis microscópico

a) Citológico: incluye: Recuento de leucocitos: aumento de polimorfonucleares

corresponde a infección bacteriana y aumento de linfocitos a vírica

Células leucémicas: infiltración leucémica de las meninges

Células tumorales Si la muestra tiene aspecto claro se recuenta usando la cámara de

recuento sin líquido diluyente, si es turbia se usa un poco de líquido

diluyente.

Para células leucémicas y tumorales se centrifuga la muestra y del sedimento se coge una pequeña cantidad, se realiza una extensión y

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se tiñe con papanicolau. Si es purulento se recoge directamente del

envase se extiende y se tiñe.

b) Microbiológico: se usa microscopía directa, el cultivo y análisis

inmunológico. El LCR es estéril por lo que cualquier microorganismo es significativo.

Microscopía directa: centrifugar la muestra, desechar el

sobrenadante y del sedimento hacer extensiones, teñir unas con

GRAM y otras con ZIEHL Cultivo: se puede sembrar directamente o del sedimento

obtenido por centrifugación. Los medios más usados son: Lowenstein

para bacilo de Koch, Saboraud para hongos y agar chocolate o sangre

para bacterias. Para meningitis víricas se usa el análisis microbiológico indirecto

o inmunológico. Está basado en una reacción de precipitación, al

poner en contacto LCR con un anticuerpo específico, si es positiva la

reacción se ve un anillo blanco en el tubo. c) Químico:

Proteínas: los valores normales varía con la edad de 400mg /

100 ml en niños hasta 60 mg / 100 ml en adultos.

Cualquier lesión que dañe el tejido cerebral aumenta de las proteínas.

Una de la más usada en la reacción de PANDY, se pone 1 cm de reactivo de Pandy en un tubo y 1 gota de LCR, si es positivo habrá

enturbiamiento. Se detectan globulinas.

Glucosa: normalmente es de 50-80 mg / 100 ml. Los niveles

disminuyen con la meningitis y demás enfermedades del SNC. Enzimas: Pueden aparecer la lactato-deshidrogenasa y

creatinfosfoquinasa.

Otras determinaciones: urea (en coma urémico) y ácido

diacético (en coma diabético). Características del jugo gástrico.

El análisis del jugo gástrico no tiene valor por sí solo, se tiene que

interpretar junto con la historia del paciente y el resultado de otras

pruebas.

No existen valores normales. No se suele realizar.

Se lleva a cabo por:

- Para determinar si el paciente puede segregar HCl. El que

aparezca aclohidria es de gran importancia para el diagnóstico de anemia pernisiosa y cáncer gástrico.

- Para determinar la cantidad de HCl producida por un paciente

con ulcus péptido o ulcus duodenal.

- Para apoyar un estado hipersecretorio en el síndrome de Zollinger-Ellison

- Para diferenciar entre ulcus gástrico y ulcus duodenal

- Los pacientes con úlcera duodenal segregan más HCl que los

pacientes sin esta patología - Sospecha de retención gástrica.

La solución gástrica suele tener:

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- HCl: secretado por las células parietales de las glándulas

gástricas de fondo y cuerpo del estómago, sus funciones son:

Actuar sobre el pepsinógeno para que se transforme en pepsina

Acidificar el bolo alimenticio Antiséptico

Hidroliza polipéptidos y polisacáridos

- Electrolítos: la variación de H es la única que tiene valor clínico

, el resto de electrolitos no tiene valor clínico - Enzimas digestivas:

Pepsina: es la principal, se segrega como pepsinógeno y el HCl

la activa a pepsina. Actúa sobre las proteínas y es secretada pro las

células principales de las glándulas gástricas de cuerpo y fondo. Lipasa gástrica: es secretada en pequeña cantidad, se encarga

de digerir las grasas

- Enzimas no digestivas: fosfatasa alcalina y lactato-

deshidrogenasa. - Moco: es una mezcla compleja de muco-proteínas y muco-

polisacáridos. Se encargan de la protección de la mucosa gástrica. Es

segregado por las glándulas mucosas o células calciformes.

- Otras sustancias:

Albúminas y У-globulinas séricas Factor intrínseco: es segregado por las células parietales de las

glándulas del cuerpo y del fondo, es una proteína que estimula la

absorción de vitamina B12

Hormona gástrica: es segregada por las células pilóricas y es responsable de estimular la secreción del jugo gástrico. Ligera

actividad proteolítica.

Obtención de la muestra

- Paciente en ayunas 12 horas antes de la extracción - Previa consulta médica suspender todo tipo de medicación

- Informar al paciente de la técnica a seguir

- Paciente se coloca sentado o semi sentado

- Se puede estimular la secreción de HCl mediante inyección de

gastrina o histamina - La 1ª extracción de jugo gástrico residual se identifica como A

- Inyectar el estimulante de la secreción

- Hacer extracciones cada 15 minutos en diferentes probetas

identificándolas como B, C, D,y E. Prevención de errores a la hora de la manipulación

El primer error es que el paciente no haya seguido las indicaciones de

ayuno y de la no toma de medicamentos.

Otro error es que las extensiones y tinciones no estén bien realizadas.

Sustancias analizables y técnicas

- Análisis macroscópico:

Normal: es de color gris-pálida, transparente o ligeramente viscosa. El olor débilmente agrio y el volumen entre 25-50 ml.

Hallazgos anormales:

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o Partículas de alimentos

o Bilis

o Moco

o Sangre - Análisis microscópico:

Citológico:

o Leucocitos

o Hematíes: abundantes en ulcus gástrico, cáncer y algunas gastritis

o Células neoplásicas: aparecen en tumores

o Células epiteliales: aparece aumentadas en gastritis

Microbiológico: o Estreptococos

o Enterococos

o Bacilo de Koch

Químico: o pH normal entre 1,6-1,8

o Ácido láctico y butírico para diagnóstico de cáncer

o Factor intrínseco para diagnóstico de anemia perniciosa

Inmunológico:

La determinación de Ag carcino-embrionario tiene importancia para el diagnóstico del cáncer.

Características del líquido ascítico.

Líquido peritoneal o ascítico es un ultrafiltrado de plasma cuya

formación depende del equilibrio entre permeabilidad de los capilares sanguíneos y la reabsorción a través de los capilares linfáticos.

Cuando se rompe este equilibrio da lugar a una ascitis.

El volumen de líquido peritoneal no sobrepasa los 50 ml en

condiciones normales. Las causas son:

- Peritonitis bacterianas espontáneas o primarias (a través de la

sangre)

- Peritonitis bacterianas secundarias

- Cirrosis hepática - Hepatomas

- Insuficiencias cardiacas congénitas

- Insuficiencias renales

La obtención de líquido ascítico se llama paracentesis y la realiza el médico o cirujano.

Se recogerán 2 tubos con tapón de rosca:

- El primero se tener anticoagulante y se usará para el análisis

citológico y microbiológico - El segundo tubo sin anticoagulante para el análisis químico

Cada tubo debe contener al menos 1 ml de líquido ascítico.

Si no se realiza el análisis inmediatamente refrigerar 4-8º C.

Prevención de errores - Valoración de los pacientes con pancreatitis aguda. La

determinación de amilasa y lipasa es importante

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- Valoración de los pacientes con peritonitis aguda

- Valoración de los pacientes con traumatismos contusos o

penetrantes

- Se utiliza también para aliviar los síntomas en pacientes con cirrosis hepática, hepatoma e insuficiencia cardiaca congestiva y

renales

Sustancias analizables

- Análisis macroscópico Normales: color amarillo claro, transparente y de escasa

cantidad

Patológico:

Puede aparecer: o Rosado: debido a traumatismos abdominales o pequeños

traumatismos a la hora de la extracción, en este caso se ira aclarando

con cada extracción.

o Opaco: debido a peritonitis bacteriana espontánea o perforaciones intestinales.

o Verde: presencia de bilis en el caso de úlcera duodenal

perforada

o Lechoso: por derrame quiloso debido a bloqueo capilares

linfáticos o por lesión. - Análisis microscópico: incluye análisis citológico, microbiológico

y químico

Para el análisis citológico y microscopía directa se realizan varias

extensiones, si el líquido es purulento recoger directamente del envase, si es seroso centrifugar 10 minutos decantar el sobrenadante

y coger el sedimento.

Para el análisis microbiológico centrifugar el líquido, decantar el

sobrenadante y sembrar el sedimento en agar sangre, agar chocolate, Lowenstein.

Citológico:

o Leucocitos: son las más examinadas para distinguir las ascitis

infecciosas de las que no lo son.

o Se tiñe con panóptico, Giemsa o May Grünwald Microbiológico:

o Se tiñe con gram y con Ziehl para bacilo de Koch

Químico:

o Proteínas: para clasificar los derrames peritoneales como trasudados o exudados. Están aumentados en exudados

o Glucosa: valor muy limitado

o Enzimas: amilasa y lipasa están aumentadas en pacientes con

pancreatitis aguda o traumatismo pancreático. Fosfatasa alcalina está aumentada en pacientes con perforación del intestino delgado

o Creatinina y urea: aumento en caso de rotura de vejiga

o pH: poco interés clínico

Introducir el líquido directamente en la máquina en el tubo de recogida o pasar a otro tubo más indicado.

Características del líquido articular

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El líquido sinovial es un dializado del plasma con ácido hialurónico

que se localiza en la cavidad articular donde actúa como lubricante y

como portador de nutrientes para el cartílago. El análisis del líquido

sinovial es de gran utilidad en la valoración de diversas patologías de las articulaciones.

Prevención de errores

Los mismos que en otros líquidos

Sustancias analizables y técnicas - características físicas:

Color, turbidez: incoloro y amarillo en condiciones normales

o Aparece turbio cuando hay leucocitos

o purulento en la artritis séptica o Turbidez lechosa nos haría sospechar la existencia de cristales

de urato

o Un color rojo por traumatismo articular

o Amarillo-turbio se observa en artritis debida a procesos inflamatorios

o Amarillo transparente en la artrosis

Viscosidad: muy viscoso en condiciones normales.

o Viscosidad disminuida en derrames de tipo inflamatorio.

o Muy viscoso en artrosis - Características bioquímicas:

Fibrinógeno: en condiciones normales no aparece. Si existe

inflamación sí que hay fibrinógeno por lo que puede coagular, se tiene

que usar anticoagulante. Proteínas totales: son útiles únicamente para interpretar los

niveles de complemento

Enzimas: proceden del suero, membrana sinovial y leucocitos.

En artritis reumatóide y fiebre reumática se observan una elevación de GOT y otras enzimas

Glucosa: esta disminuida en líquidos inflamatorios infecciosos,

su interpretación debe realizarse en consideración con la glucemia

Cristales: son importantes en el diagnóstico de artritis gotosa

(cristales de urato monosódico), de la seudogota o condrocalcinosis (microgotas de pirofosfato cálcico dihidratado) y en la enfermedad

por depósito de hidroxiapatita cálcica

- Determinaciones inmunológicas

Complemento: es normal con los brotes inflamatorios de artrosis y en derrames traumáticos.

o Estará alterado en condiciones inflamatorias sistemáticas.

o En el caso del lupus el complemento se consume por lo que

está disminuido. En las fases agudas aumenta, durante la enfermedad se aprecia un descenso.

o Su actividad se determina mediante métodos que miden la

actividad total del sistema o de sus componentes individuales. CH50

es la capacidad del suero de lisar una suspensión de hematíes de carnero sensibilizados por la concentración óptima de anticuerpos

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antihematíes de carnero. Determina la actividad total del

complemento.

Factor reumatoide: positivo en artritis reumatoide

- Citología Leucocitos: se utiliza el recuento de leucocitos para determinar

entre líquidos inflamatorios y no inflamatorios.

- Examen microbiológico

Se realiza para identificar la etiología de las artritis infecciosas. Se tiñe con los métodos clásicos una extensión de sedimento y se

observa al microscopio. También se realizan cultivos.

Los líquidos sinoviales se clasifican en:

No inflamatorios: recuento leucocitos inferior a 3.000 / mm3 con predominio de mononuclear. Líquidos claros, viscosos y color

ámbar. Se encuentran en osteoartritis y traumatismos

Inflamatorios: turbios, amarillos recuento de leucocitos entre

300-5.000 / mm3 con predominio de polimorfonuclear. Proteínas aumentadas, glucosa y viscosidad disminuida. Se encuentran en

artritis reumatoide, gota y otras enfermedades inflamatorias.

Ocasionalmente en artritis sépticas.

Infecciosos: turbios y opaco. Más de 500.000 leucocitos / mm3

con predominio de PMN. Proteínas elevadas y glucosa y viscosidad disminuida. Es típico de artritis sépticas.

Hemorragias: baja viscosidad de color rojo pardusco. Se

observa en hemartrosis y traumatismos.

Características generales del líquido pericárdico Se encuentra entre pericardio visceral y pericardio parietal con un

volumen de 30-50 ml o menos.

Formado por filtración del plasma a través del endotelio capilar. En

condiciones normales hay un equilibrio entre filtración y reabsorsión. Obtención y conservación

Se realiza solamente cuando es muy necesario, conlleva un riesgo

importante paciente sedado con anestesia local, hay que pedir el

consentimiento al paciente o familiares.

Se obtiene por aspiración con jeringa y aguja estéril recogiéndose 3 tubos con tapón estéril. Cada uno debe contener entre 2-4 ml y cada

tubo con condiciones específicas.

I. Con anticoagulante, heparina sódica, para análisis citológico

II. Con portacultivo para análisis microbiológico III. Sin ningún aditivo para el análisis bioquímico, inmunológico y

macroscópico.

Prevención de errores Debe realizarse el análisis lo antes posible sobre todo para el cultivo

(2º tubo), si no se puede refrigerar 4-8º C o congelar.

Sustancias analizables y técnicas

- Físico o macroscópico Color: claro, de color amarillo pálido y más bien transparente.

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En condiciones patológicas puede aparecer rosa o rojo debido a un

derrame hemorrágico en pericarditis hemorrágicas, enfermedades

reumáticas, extravasación o salida de sangre de una aneurisma

(enfermedad, rotura o dilatación de una arteria). Si el derrame hemorrágico es por la extracción el color rosado irá disminuyendo del

primer tubo al último.

Volumen: puede estar aumentado en el infarto de miocardio,

pericarditis bacteriana y tumores. - Microscópico

Citológico: las células que se van a investigar son:

o Células cancerosas

o Hematíes para comprobar los derrames hemorrágicos o Leucocitos: éstos están aumentados en todas las pericarditis

bacteriana

El tubo que contenga el anticoagulante se centrifuga y del sedimento

se realizan extensiones que se tiñen unas con azul de metileno o Giemsa o panóptico rápido para hematíes y leucocitos y otras con

papanicolau.

Bioquímico

o Glucosa: disminuida en los derrames debido a infecciones y

neoplasias. o Colesterol y triglicéridos: aumentados

o pH: ácido en derrames purulentos

o Proteínas: solo los anticuerpos tienen interés

Se usa el tubo que no tiene anticoagulante n i medio de transporte. Inmunológico

El estudio más importante es la determinación de Ac. Antinucleares,

proceden del propio organismo y actúan destruyendo el núcleo de las

células. Tiene importancia para la detección de lupus eritromatoso

(enfermedad sistémica y autoinmune)

Microbiológico:

o Cultivo: en agar común o agar chocolate, se siembre en 3

cuadrantes o se deja caer una gota a 1 cm del borde. o Microscopia directa: se realiza una extensión y se tiñe con Gram

o azul de metileno, se puede coger directamente de la muestra o de

la colonia de cultivo

Características generales del líquido pleural. Está situado entre las 2 pleuras del pulmón, sirve de amortiguador de

este órgano. No se sobrepasa los 15 ml de volumen y se forma por

filtración del plasma a través de los capilares de la pleura parietal, y

la reabsorción a través de los capilares sanguíneos y linfáticos de la pleura visceral.

Derrames pleurales

Aumento del líquido en el espacio pleural. Hay 2 clases:

- Trasudados: acumulaciones de líquidos debida a un aumento de la presión hidrostática de los capilares pleurales producidas sobre

todo por insuficiencias cardiacas.

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- Exudados: es una lesión en el tejido. Se altera la permeabilidad

de los capilares aumentando su tamaño. Sus causas son: infecciones

pleurales, neoplasias, procesos inflamatorios no sépticos.

Para diferenciarlos se usan 3 datos de laboratorio:

- Proteínas:

Normal: 2 g / dl Trasudado: menor 3 g / dl

Exudado: mayor 3 g / dl

- Densidad:

Trasudado: menos de 0,014 Exudado: más de 0,016

- Colesterol: aumentado en todos los exudados

Prevención de errores

La obtención de la muestra pleural se denomina toracentesis o toracocentesis.

Es necesario el permiso del paciente o familiares.

Técnica invasiva con anestesia local, se usa jeringa con un trocar para

evitar la entrada de aire.

Sustancias analizables y técnicas

- Macroscópico

Normal: color amarillo pálido y transparente. Alrededor

de 10-25 % presentan sangre macroscópica. Si es por

punción traumática la sangre se va diluyendo al ir

aspirando el líquido.

Patológico:

o Hemotórax (derrame hemorrágico): la sangre se ve

a simple vista y está distribuida de forma uniforme.

Aparece en cáncer de pulmón y tuberculosis

avanzada.

o Piotórax o Empiema: líquido claro y turbio puede

ser debido a grandes cantidades de leucocitos.

Asociado a inflamación séptica y no séptica.

o Quilotórax: aspecto lechoso debido a la presencia

de grasa. Aparece en hiperlipemia en insuficiencia

hepática o renal.

- Microscópico

Citológico:

o En fresco: 1 gota de líquido si el derrame es

purulento o del sedimento obtenido por

centrifugación si el líquido es seroso o transparente.

Se coloca en el centro del portaobjeto y se mezcla

con una gota de azul de metileno y se coloca el

cubreobjeto.

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o Tinción: se extiende sobre un portaobjetos

directamente de la muestra si el líquido es

purulento o del sedimente obtenido por

centrifugación si es seroso o transparente. Se

extiende por el portaobjetos, se seca, fija y se tiñe.

Las células que pueden aparecer son:

Células neoplásicas: teñir con papanicolau. En

tumores.

Células hemáticas. En hemotórax.

Leucocitos: teñir con giemsa, panóptico, May

Grünwald. En piotórax o empiemas.

Células epiteliales: en infecciones de pleura.

Teñir con papanicolau

Microbiológico

o Microscopía directa: se realiza como para el estudio

citológico pero se tiñe con Gram o Ziehl

(estreptococos, neumococos, estafilococos, bacilo

de Koch).

o Cultivo: centrifugar la muestra y sembrar

directamente del sedimento en diferentes medios

de cultivo.

Lowenstein para el bacilo de koch y agar sangre o

agar chocolate para el reto de patógenos.

Químico

No necesita ninguna preparación especial. Los análisis

más frecuentes son:

o Proteínas: para diferenciar exudados y trasudados,

más de 3 g / dl se considera exudado.

o Glucosa: para el diagnóstico de pleuritis reumática.

La glucosa normal oscila entre 50-60 ml / dl

o pH: 6,7-7,4 poca importancia clínica

o colesterol (lípidos): para diferenciar exudados. Está

aumentada en los exudados.

Inmunológico

o Factor reumatoide: positivo en los derrames

pleurales asociados con enfermedades reumáticas.

o Ac. Antinucleares: positivos en lupus eritromatoso.

o Ag. Carcino-embrionario: positivo en el 60-70 % de

neoplasias pulmonares.

Características generales de tejidos.

- Tejidos quirúrgicos: la muestra se obtiene en el momento de la

cirugía y se envía al laboratorio en un envase estéril de boca

ancha o tubo para anaerobio.

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- Tejido post-mortem: si no está infectado sus órganos se

mantienen estériles unas 20 horas, se toman las muestras y se

pasa a su estudio.

Muestras de heridas, abscesos y tejidos blandos.

Se recogen con agujas y jeringa estériles. Se transportan en vial para

anaerobios.

Normas generales para prevención de errores.

- Muestra representativa del proceso patológico y recogerse en

cantidad suficiente.

- Si la muestra no se ha tomado en condiciones adecuadas debe

rechazarse indicando el motivo.

- El material debe tomarse en el lugar donde sea posible

encontrar el microorganismo causante de la infección con la

menor contaminación posible.

- La muestra se debe obtener antes de empezar cualquier

tratamiento con agentes antimicrobianos.

- El transporte debe ser lo más rápido posible, incluso realizar la

siembra en el momento en el que se está tomando la muestra.

Exudados conjuntivales.

Las infecciones del ojo pueden estar producidas por:

- Virus: adenovirus, enterovirus

- Bacterias piógenas: S. Pneumoniae, H. influenzae

- Bacterias no piógenas: Moxarella lacunata, M. tuberculosis.

- Hongos

- Parásitos

Patologías más frecuentes:

- Conjuntivitis: inflamación de la conjuntiva (membrana que

tapiza los párpados y que cubre la porción anterior del globo

ocular. La más común es de origen bacteriano.

Adultos: H. influenzae, S. pneumoniae, S. aureus, S.

epidermidis

Niños: H. influenzae, S. pneumoniae, S. aureus

Neonatos: N. gonorreae, se denomina oftalmia

neonatorum.

También pueden provocarla Moraxella lacunata, C.

diphteriae, Chlamydia trachomatis (produce tracoma)

- Queratitis: inflamación de la córnea que puede ser causada por

numerosos agentes infecciosos. La producen en el 60.90 % de

los casos bacterias, destacando P. aeruginosa, Moraxella sp,

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Staphylococcus. También pueden provocarla virus y hongos.

El gonococo también puede producir queratitis en conjuntivitis

mal tratadas.

- Endoftalamitis: inflamación de tejidos internos del ojo de forma

espontánea, postquirúrgica o diseminación hematógena desde

focos infecciosos. Destacan como agentes etiológicos: S.

aureus, S. epidermidis, enterobacterias, pseudomonas,

anaerobios, hongos, virus y parasitos.

- Infecciones perioculares: parpados, aparato lacrimal y orbita.

Provocados por hongos, levaduras, Saureus, S. epidermidis.

Recolección y transporte de muestras

Cuando se trata de infección supurativa, la muestra se toma con un

hisopo estéril pasándolo por la superficie del saco conjuntival inferior

y el ángulo interno del ojo.

En caso de sospechar chlamydias usar un hisopo estéril de alginato

cálcico sembrando en medio adecuado.

En caso de queratitis se realiza un raspado de córnea con espátula

estéril de platino sembrando en medio adecuado.

Si es una endoftalmitis, la muestra la toma el oftalmólogo, se

realizan extensiones y tinción de Gram. Los raspados conjuntivales y

de úlceras corneales se tiñen con Giemsa.

Cultivos

Se recomienda el uso de agar sangre o agar chocolate para la

mayoría de los microorganismos, el caldo de tioglicolato para

anaerobios y lowestein para M. tuberculosis.

Exudados óticos

Otitis externa

El canal auditivo es estrecho y tortuoso.

Tipos:

- Infección aguda: localizada, ocasionada por S. aureus que se

presenta como póstula o forúnculo.

- Erisipela: afecta al oído. SBHA (Streptococcus pyogenes).

- Otitis externa difusa (oído del nadador): originada por bacilos

gram negativos (psudomonas aeruginosa, enterobacterias y

hongos)

- Otitis externa hemorrágica: ocasionada por P. aeruginosa.

- Otitis externa crónica

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- Otitis externa maligna: frecuente en diabéticos, es infección

necrosante originada por P. aeruginosa y anaerobios.

Para la toma y transporte de muestras se debe cumplir:

- Limpiar y desinfectar al zona para no contaminarla con la flora

cutánea (S. aureus, P. aeruginosa, S. pyogenes)

- Si hay supuración usar un hisopo

- Si es un forúnculo se realiza un drenaje con aguja y jeringa

Otitis media

Se llama media a la inflamación del revestimiento mucoso del oído

medio.

En niños: neumococo, H. influenzae SBHA, B. catarrhalis, S. aureus,

bacilos gram negativos y anaerobios.

Para la recolección y transporte de las muestras:

- Si hay rotura de membrana se toma muestra mediante hisopo

- Si no hay rotura mediante aguja y jeringa

- Observación microscópica para investigarla presencia de

leucocitos y flora existente

- Sembrar en medio adecuado

Agar sangre: para S. aureus, S, pneumoniae, SBHA,

Psudomonas, enterobacterias

Agar chocolate: para Hemophilus

Saboraud: hongos y levaduras

Vías genitourinarias

Las ETS pueden ser causa de infertilidad, embarazos ectópicos,

abortos, infecciones congénitas y perinatales, cáncer de cérvix, ano y

pene, úlceras genitales.

En el tracto genital hay una flora bacteriana cuya función es impedir

la adherencia de microorganismos patógenos:

– Uretra: estafilococos coagulasa negativo, corinobacterias y

anaerobios.

– Vagina: lactobacilos.

Los microorganismos que se consideran patógenos en el tracto

urogenital son:

- Bacterias: N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Gardnerella

vaginalis, Haemophilus duchrey, N. meningitidis, Ureaplasma

urealyticum.

- Hongos: Candida sp

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- Virus: citomegalovirus, herpes simple

- Parásitos: trichomonas vaginalis

El mujeres gestantes es importante el Streptococcus agalactiae que

puede pasar por el canal del parto al neonato.

Las ETS pueden cursar con exudado uretral o úlceras o tumoraciones.

Recolección y transporte de muestras

Conviene realizar más de una forma para disponer de suficiente

cantidad de muestra.

Para uretra usar un hisopo de algodón, se deben retirar células

epiteliales para el aislamiento de C. trachomatis.

Examen microscópico

Lo primero es realizar un examen en fresco para investigar la

presencia de leucocitos, células clave, trichomonas y levaduras.

Se puede realizar tinción de Gram o más específicas, según lo que se

observe se continúa la investigación realizando cultivos y pruebas de

identificación.

Heces

El tracto gastrointestinal es una continuación del medio externo, está

formado por esófago, estómago, intestinos delgado y grueso y ano.

Presenta una flora mixta abundante y diversa que constituye 1/3 del

peso en seco de las heces fundamentalmente anaerobios aunque

también hay aerobios como E. coli y va a depender de la edad, dieta

y porción del tracto. Ejerce un efecto protector.

Podemos encontrar:

- Infecciones intestinales: agentes etiológicos que desplazan a la

flora intestinal y pueden producir infección por:

Desarrollo del microorganismo dentro de las células de la

mucosa

Por invasión del epitelio

Adhesión al epitelio alterando los mecanismos de

secreción y absorción de líquidos

- Afecciones intestinales asociadas a microorganismos

productores de toxinas: en muchos casos no es el

microorganismo el que produce la patología si no las toxinas

que excreta al medio.

Virus

Protozoos

Bacterias

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El estudio de las heces se llama coprología. Tiene importancia en la

investigación de las enteritis crónicas, síndrome de mala absorción y

diagnóstico precoz de cáncer de colon y recto.

Contenido

2/3 del contenido es agua y el resto por restos alimenticios no

digeridos: celulosa, productos de la digestión, bacterias, células de

descamación.

Normalmente se defeca una vez al día aunque entre dentro de la

normalidad 2 o tres al día, incluso entra en la normalidad 2 a la

semana. Lo que tiene importancia es la consistencia y aspecto de las

heces.

Recogida, muestra y transporte

Se deposita la muestra del tamaño de una nuez en un recipiente

estéril. Debe sembrarse inmediatamente, si no se va a procesar antes

de 2 horas usar medios de transporte que mantengan el pH próximo

a la neutralidad. Medios:

- Buffer fosfato con y sin indicador

- Medio de Hajna (para Salmonella y Shigella)

- Medio de Cary-Blair (para patógenos intestinales)

- Alcohol de polivinilo (huevos y parásitos)

- Refrigerar para virus

La muestra al llegar al laboratorio debe observarse

macroscópicamente (color, consistencia, olor)

Consistencia y aspecto

Normal: semisólida y cilíndrica consistente.

Diarreas: fluidas o líquidas.

Estreñimiento: duras, pequeñas en forma de bolas o caprinas.

Estenosis del recto (estrechez debido a tumores): acintadas.

Color

Es debido a la esterocolina.

- Normal: color pardo o marrón. El color puede variar

dependiendo de la dieta:

Amarillo con dieta láctea

Marrón oscuro con dieta cárnica

Verdoso con dieta vegetal

Exceso de café oscurece heces

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Rojizas por ingestión de remolachas

Negras por la ingestión de sangre, morcillas, moras o

medicamentos con hierro o bismuto.

- Anormal

Acólicas o blanco grisáceas: ictericias obstructivas y fase

agudas de alteraciones hepáticas. La ingestión de papilla

de bario puede producir el mismo efecto.

Rojizas: contienen sangre no transformada o de origen

bajo: tumores de colon o del recto y hemorroide.

Negras: pastosas y pegadizas, son las heces del meconio

y melenas (heces con sangre de hemorragias del aparato

digestivo superior o vías respiratorias).

Olor

Es debido al indol y escatol producido por las bacterias intestinales.

El olor se hace fétido en los procesos que cursan con putrefacción de

las proteínas, muy desagradable en las melenas y cáncer de colon. A

veces inodoras tras el tratamiento con antibióticos.

Moco

Su presencia es normal. La presencia de moco sanguinolento indica

cáncer rectal o un tumor.

Se puede realizar un análisis buscando resto de alimentos o

parásitos, para lo cual se ponen las heces en un tamiz y se llevan

bajo un chorro de agua para luego recoger lo que queda en el tamiz.

Análisis químico

- pH: neutras o ligeramente alcalinas. La prueba se realizar con

papel de tornasol o indicador de pH. Tiene poco valor clínico.

- Na y K: importante cuando hay una alteración en la absorción

en el intestino delgado o grueso.

Para poder medirlos diluimos una pequeña cantidad de heces en

agua destilada o suero fisiológico y centrifugamos, recogemos

sobrenadante que es lo que medimos.

Sangre oculta

Sus causas son:

- Úlcera o ulcus gástrico o duodenal

- Tumores aparato digestivo

- Varices esofágicas

- Colitis

- Algunos parásitos intestinale

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Para el análisis el paciente debe seguir unas pautas:

- 3 días seguir una dieta sin carne roja, sangre o moras,

alimentos con hierro o bismuto

- Cuidado al aseo dental para no producir hemorragias

- Al 4º día se recogen las heces

La técnica más habitual es mezclar una pequeña porción de heces con

tintura de Guayasco o fenolytaleina, la aparición de un color azul o

verde dará positivo.

Repetir la prueba varias veces en días distintos.

También se puede extender y teñir. Ahora se realiza el estudio por

aglutinación en la cual no es imprescindible la dieta.

Pigmentos biliares

Normalmente las heces contienen estercobilina y estercobilógeno que

le dan su color. En un sujeto sano no debe haber bilirrubina ni

biliverdina.

La prueba consiste en mezclar heces con sublimado acético, según el

color:

- Rosa: normal

- Verde: bilirrubina escasamente transformada o biliverdina

- Blando: falta de pigmentos

Restos de alimentos

Un déficit de digestión o absorción en algunos tramos del tubo

gastro-intestinal puede provocar el aumento de la aparición de restos

alimenticios. Pueden aparecer:

- Esteatorrea: aumento de las grasas. Puede deberse a:

Transito acelerado de las heces a través del intestino

Déficit enzimático en su digestión

Déficit en la absorción

Hipersecreción endógena

Unas veces predomina la grasa neutra sin desdoblar y en otros los

ácidos grasos y glicerina.

o Análisis cualitativo: verifica la presencia de grasas en heces.

Recogida de la muestra: dieta habitual + 100 g diarios de

mantequilla durante 5 días. Los días 3, 4 y 5 deben

recogerse una muestra de heces y etiquetarla con el día

de recogida y nombre del paciente.

Conservación: conservar entre 5-8º C

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Preparación:

Hacer una emulsión fecal mezclando heces con

agua destilada o suero fisiológico en proporción ¼

heces + ¾ agua o suero fisiológico

Mezclar en portaobjetos gota de emulsión fecal con

gota de sudan III o Sudán IV + 1 gota de alcohol

70º.

Mirar al microscopio con objetivo de bajo aumento.

La grasa neutra aparece como gotas de color rojo o

anaranjado, los cristales de ácidos grasos como

agujas largas y finas

o Análisis cuantitativo o van de kemer:

Recogida de muestra: heces de 3 días consecutivos cada

uno en su envase correspondiente rotulando el día de

recogida

Preparación de la muestra: emulsión de la muestra

mezclando heces con agua destilada o suero fisiológico.

Automatizada.

- Creatorrea: malabsorción de proteínas. En individuaos normales

hay una pequeña cantidad de fibras musculares apenes

reconocibles pues presentan estriación transversa y forma

redondeada. Aparecen fibras musculares sin atacar en casos

como: insuficiencia gástrica, insuficiencia pancreática.

o Preparación de la muestra: gota de emulsión con gota de ácido

acético, para que las fibras se hinchen y se hagan visibles al

microscopio óptico.

- Amilorrea: presencia de restos de almidón sin digerir. Aparece

en insuficiencia pancreática exocrina.

o Preparación de la muestra: mezclar emulsión con lugol y

examinar al microscopio. Almidón no digerido de azul y

parcialmente digeridos de rojo.

Bacteriología

Para comprobar la existencia o no de disbacteriosis (desequilibrio

entre la flora normal del intestino). La flora normal constituye un

peso importante de las heces, en adulto predominan enterococo,

colibacilo y proteus, en niño lactobacilus y biffidus.

La otra finalidad es la identificación de microorganismos patógenos,

los más usuales son salmonella y escherichia coli.

- Análisis bacteriológico:

Microscopia directa y coprocultivo

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Obtención de la muestra: para microscopía se recoge una

Porción con cuchilla para cultivo con hisopo. Paciente sin

tomar antibióticos.

Preparación de la muestra para microscopía:

Hacer emulsión de heces

Preparar varias extensiones

Dejar secar

Fijar a la llama

Teñir con azul de metileno, Gram y Ziehl

Preparación de la muestra para coprocultivo

Si muestra está en tuvo con hisopo añadir 2 ml de

suero fisiológico o agua para realizar la emulsión

Homogenizar con el mixer

Sembrar el hisopo en distintos medios: agar

MacConkey, agar salmonella shigella y agar sangre.