M11549c-0611 BioSystems S.A. Costa Brava 30, Barcelona (Spain)
07/2006ISO 13485 - TV Rheinland - Reg.: SX 60010383 0001
ISO 9001 - TV CERT - Reg.: 01 100 6696
LIPASALIPASA-COLOR
LIPASECOD 11549 4 x 15 mL
CONSERVAR A 2-8C
Reactivos para medir la concentracin de lipasaSlo para uso in
vitro en el laboratorio clnico
FUNDAMENTO DEL MTODOLa lipasa cataliza la hidrlisis del
substrato cromtico
1,2-O-dilauril-rac-glicero-3-cidoglutrico-(6-metilresorufina)-ster
obtenindose 1,2-O-dilauril-rac-glicerol y el cido
glutrico-(6-metil-resorufina)-ster, un producto intermedio
inestable. En solucin alcalina, ste sedescompone espontneamente en
cido glutrico y metilresorufina. La concentracin catalticase
determina a partir de la velocidad de formacin del colorante rojo
medida a 570 nm1.
1,2-O-Dilauril-rac-glcero-3-ac.
glutrico-(6-metilresorufina)-ster1,2-O-dilauril-rac-glicerol + cido
glutrico-(6-metilresorufina)-ster
cido glutrico-(6-metilresorufina)-ster cido glutrico +
metilresorufina
CONTENIDO Y COMPOSICINA. Reactivo: 4 x 10 mL. Tampn, deoxicolato
36 mmol/L, detergente, acetato de calcio 0,05
mmol/L, pH 8,3.B. Reactivo: 2 x 10 mL. Tampn, colipasa 23,2
U/mL, 1,2-O-dilauril-rac-glicero-3-cido
glutrico-(6-metilresorufina)-ster 0,03 %, detergente,
estabilizante, pH 5,5.Irritante (Xi): R41: Riesgo de lesiones
oculares graves. S24/25: Evtese el contacto con losojos y la piel.
S26: En caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y
abundantementecon agua y acdase a un mdico. S36/37/39: Usen
indumentaria y guantes adecuados yproteccin para los ojos/la cara.
S23: No respirar el gas.
CONSERVACINConservar a 2-8C.Los reactivos son estables hasta la
fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que seconserven
bien cerrados y se evite la contaminacin durante su
uso.Indicaciones de deterioro: Reactivos: Absorbancia del blanco
superior a 0,500 a 570 nm.
PREPARACIN DE LOS REACTIVOSLos reactivos estn listos para su
uso.
EQUIPO ADICIONAL Bao de agua a 37C Analizador, espectrofotmetro
o fotmetro con cubeta termostatizable a 37C para lecturas a
570 20 nm.
CALIBRACIN Calibrador Bioqumica (Cod. 18011). Calibrador
Bioqumica (Humano) (Cod. 18044).
MUESTRASSuero o plasma con heparina de sodio y litio recogido
mediante procedimientos estndar.La lipasa en suero es estable 5 das
a 2-8C.
PROCEDIMIENTO1. Precalentar los reactivos a 37C durante unos
minutos.2. Pipetear en una cubeta (Nota 1):
Reactivo A 800 LMuestra/Calibrador 12 L
3. Mezclar e insertar la cubeta en el instrumento. Poner el
cronmetro en marcha. A los 5minutos, aadir:
Reactivo B 400 L
4. Mezclar.5. Pasados 3 minutos, anotar la absorbancia inicial y
efectuar nuevas lecturas cada minuto
durante 3 minutos.6. Calcular el incremento de absorbancia por
minuto promedio (A/min).
CLCULOSLa concentracin de lipasa en la muestra se calcula a
partir de la siguiente frmula general:
VALORES DE REFERENCIASuero2: 12 - 48 U/L = 200 - 800 nkat/LEstos
valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que
cada laboratorioestablezca sus propios intervalos de
referencia.
CONTROL DE CALIDADSe recomienda el uso de los Sueros Control
Bioqumica niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) yII (cod. 18007,
18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento
de medida.Cada laboratorio debe establecer su propio programa de
Control de Calidad interno, as comoprocedimientos de correccin en
el caso de que los controles no cumplan con las
toleranciasaceptables.
CARACTERSTICAS METROLGICAS Lmite de deteccin: 3 U/L lipasa = 50
nkat/L lipasa Lmite de linealidad: 400 U/L = 6666 nkat/L lipasa.
Cuando se obtengan valores superiores,
diluir la muestra 1/2 con agua destilada y repetir la medicin.
Repetibilidad (intraserie):
Concentracin media CV n
71 U/L = 1183 nkat/L 2,3 % 20155 U/L = 2583 nkat/L 2,6 % 20
Reproducibilidad (interserie):Concentracin media CV n
71 U/L = 1183 nkat/L 3,5 % 25155 U/L = 2583 nkat/L 3,9 % 25
Sensibilidad: 0,234 mAL/U = 0.014 mAL/nkat Veracidad: Los
resultados obtenidos con estos reactivos no muestran
diferencias
sistemticas significativas al ser comparados con reactivos de
referencia. Los detalles delestudio comparativo estn disponibles
bajo solicitud.
Interferencias: La bilirrubina (60 mg/dL), el glicerol (600
mg/dL) y la lipemia (triglicridos 60g/L) no interfieren. La
hemoglobina (>2 g/L) puede afectar a los resultados.
Otrosmedicamentos y sustancias pueden interferir3.
Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los
resultados pueden variar alcambiar de instrumento o realizar el
procedimiento manualmente.
CARACTERISTICAS DIAGNSTICASLas lipasas hidrolizan los steres de
glicerol con cidos grasos de cadenas largas. Aunqueexisten glndulas
y mucosas que secretan esta enzima, nicamente la lipasa pancretica
tieneinters diagnstico. As, la medicin de la concentracin de lipasa
tiene utilidad para investigartrastornos pancreticos.La
concentracin de la lipasa srica aumenta como consecuencia de una
pancreatitis aguda.En general, tanto la amilasa como la lipasa
siguen el mismo curso aunque la elevacin delipasa persiste durante
ms tiempo. Las elevaciones de la concentracin de lipasa
tambinpueden ser debidas a una obstruccin del conducto pancretico
por un clculo o bien por uncarcinoma, en enfermedades renales
agudas o crnicas y como consecuencia del tratamientocon
opiceos2,4.El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en
cuenta el resultado de un nico ensayo,sino que debe integrar los
datos clnicos y de laboratorio.
NOTAS1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayora de
analizadores automticos. Solicite
informacin a su distribuidor.
BIBLIOGRAFA1. Neumann U, Kaspar P, Ziegerhorn J, Bergmeyer HU.
Methods of enzymatic analysis, 3rd ed.
Vol. 4:26-34,1984.2. Junge W, Abicht K, Goldman J et al.
Evaluation of the colorimetric liquid assay for pancreatic
lipase on Hitachi analyzers in clinical centers in Europe,
Japan, and USA. Clin Chem LabMed 1999;37, special suppl:469.
3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 3th
ed. AACC Press, 1997.4. Friedman and Young. Effects of disease on
clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press,
1997.
lipasa
H2O
x C Calibrador = U/LA/min Muestra
A/min Calibrador
